专利名称：复凝聚法制备枸橼酸他莫昔芬微胶囊的制作方法
技术领域：
本发明属防治乳腺癌药物制剂制备领域，特别是涉及枸橼酸他莫昔芬微胶囊的制备方法。
背景技术：
近年来，乳腺癌的发病率急剧增长。在西方国家，乳腺癌已成为女性头号死亡原因。 而我国最近几年来，乳腺癌发病率也在不断上升中。据卫生部门的最新报道，我国的上海、 天津、北京、哈尔滨、武汉等特大型城市里，乳腺癌发病率亦已成为女性的第一或第二号 肿瘤疾病，而在广大农村地区，乳腺癌仍排在肿瘤疾病的第9位。近几年我国每年新增肿 瘤病人约160万-180万人，肿瘤病人总数约为450万-600万人。目前乳腺癌的治疗主要手段包括手术治疗，放射治疗，化学治疗和内分泌治疗。其 中内分泌治疗是乳腺癌的重要治疗手段，其疗效己得到广泛的认可。乳腺癌内分泌治疗已有一百多年的历史，早在1896年英国学者Beastson首先报道卵巢切除成功地控制绝经前 乳腺癌的进展，成为乳腺癌内分泌治疗的第一个里程碑。尽管从20世纪30年代即开始使 用内分泌药物治疗乳腺癌，但效果不那么理想。直到1971年，第一个抗雌激素药物枸橡 酸他莫昔芬研制成功，成为乳腺癌内分泌治疗的第二个里程碑。但到目前为止，枸橼酸他 莫昔芬的剂型主要是片剂，它有药物释放时间短，对胃肠刺激大等缺点。 发明内容本发明的目的是提供一种复凝聚法制备枸橼酸他莫昔芬微胶囊的方法，该方法反应条 件简单，方便，便于工业化。本发明的复凝聚法制备枸橼酸他莫昔芬微胶囊的方法，包括下列步骤(1) 精确称量一定量的枸橼酸他莫昔芬，溶于95%乙醇中，超声溶解，然后加入阿拉伯胶溶液 于水浴超声，再加入等量的明胶ZK溶液，7K浴搅拌，控制好囊心囊材质量比；(2) 在搅拌过程中，用10。/。的乙酸将pH值调到4.(M.3，加入一定量的蒸馏7jC进fi^释，高速 搅拌半小时，置冰浴中急速降温至(MO'C，再加入交联剂固化0.5~1小时；(3) 用20%NaOH溶液将pH值调到8~9，在(K10'C高速搅拌，固化3~4小时，离心，洗 涤，冷冻减压干燥，得到枸橼酸他莫昔芬微胶囊。所述的明胶是B型，等电点是4.7-5.0;所述步骤(1)中的明胶和阿拉伯胶溶液的质量百分比浓度是3%~5%。 所述步骤(1)中的7K浴,是4(K55'C。
所述步骤(1)中的搅拌速度是300~500转/分。所述步骤(1)中的囊心(枸橼酸他莫昔芬)、囊材(明胶、阿拉伯胶)的质量比是1:2 1:5。 所述步骤(2)中的蒸馏水用量为原溶液的1 2倍。 所述步骤(2)中的搅拌速度是1500-3000转/分。 所述步骤(2)中的交联剂是戊二醛、甲醛。 本发明的有益效果(1) 本发明的制备方法简单，原料来源方便，便于工业化；(2) 制备的微胶囊在光学显微镜观察具有很好的圆形形态，微胶囊的平均包封率为 67.35%、平均药物含量为11.61%、平均粒径尺寸为22.6nm;(3) 制备的微胶囊在体外释放符合一级动力学释放规律，药物完全释放时间可达12h以 上，比普通片剂释放时间延长了一倍以上，可以作为防治乳腺癌的药物缓释剂型。
图1是制备的枸橡酸他莫昔芬微胶囊的显微镜照片； 图2是制备的枸橼酸他莫昔芬微胶囊的扫描电镜照片； 图3是枸橼酸他莫昔芬的红外图谱；图4是明胶的红外图谱；图5是阿拉伯胶的红外图谱；图6是枸橼酸他莫昔芬微胶囊的红外图谱；图7是枸橼酸他莫昔芬微胶囊的体外释放曲线；图8是市售他莫昔芬片剂的体外释放曲线。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明 而不用f限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术 人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限 定的范围。实施例1(1)枸橼酸他莫昔芬微胶囊的制备称取枸橼酸他莫昔芬500mg，用20mL95。/。乙醇超声溶解，加入3%的阿拉伯胶水溶液 40mL，控温在4(TC 45'C搅拌，搅拌速度是400转/分，再加入40mL3n/。的明胶水溶液。搅 拌过程中缓慢滴加10n/。的冰醋酸将pH调至4.22，再加入35'C左右的蒸馏水100mL，高速
搅拌，搅拌速度3000转/分，待溶液自然降温至3(TC以下时，置冰浴急速降至l(TC后，加 入37。/。甲醛2mL，固化0.5h，用20%NaOH调至pH8~9，在冰浴中继续搅拌，固化3h，离 心，用水洗净至无甲醛，冷冻减压干燥，得到成品微胶囊。(2) 微胶囊的形态和粒径尺寸 通过光学显微镜和扫描电镜拍摄的微胶囊照片(图l，图2)，可以看到，研究所得的微囊具有很好的圆形形态。用校正过的带目镜测微尺的显微镜测微囊的粒径大小，发现所 得微胶囊的直径在15 25jtm， 500个微胶囊的平均粒径为22.6pm。(3) 红外光谱鉴定用NEXUS-670型红外一拉曼仪对纯枸橼酸他莫昔芬、纯明胶、纯阿拉伯胶以及所得 的微胶囊进行的红外扫描。从图中可以看出，枸橼酸他莫昔芬的苯环在1610 cnT1、 1513 cm'1、 1170cm"和704cm"的吸收峰(图3)，明胶和阿拉伯胶的羟基、羰基吸收峰(图4， 图5)，都出现在了微胶囊的红外图谱中(图6)，这说明微胶囊中含有枸橼酸他莫昔芬， 明胶和阿拉伯胶。并且可以看到，微胶囊中的枸橼酸他莫昔芬的苯环在上述位置的吸收强 度(1553 cm"、 1443 cm"、 1074 cm"和701 cm")都比纯枸橼酸他莫昔芬的低，这说明微 胶囊中的枸橼酸他莫昔芬是被明胶和阿拉伯胶包裹着的。(4) 枸橼酸他莫昔芬含量及包封率测定① 枸橼酸他莫昔芬最大吸收波长的测定 为确定用紫外分光光度法测定枸橼酸他莫昔芬含量的测定波长，研究中用UV-2102PC型紫外可见分光光度计对枸橼酸他莫昔芬的最大吸收波长进行了测定，测定步骤为精密 称取20mg枸橼酸他莫昔芬，用95%的乙醇溶液溶解，以95%的乙醇溶液为空白，在200 400nm间作紫外扫描，便可得到最大吸收波长为276nm。② 标准曲线制备精密称取50mg枸橼酸他莫昔芬，用95%的乙醇溶液溶解，转移至50mL容量瓶中定 容，得1.000mg/mL的枸橼酸他莫昔芬对照液。精密吸取对照液0.05、 0.1、 0.15、 0.2、 0.25、 0.3mL,在试管中分别用95Q/。的乙醇定容至5mL。按照分光光度法在枸橼酸他莫昔芬的最 大吸收波长处测定吸光度。并以枸橼酸他莫昔芬浓度为纵坐标、吸光度为横坐标作图得到 枸橼酸他莫昔芬乙醇溶液的标准曲线。通过线性回归得到枸櫞酸他莫昔芬浓度C对吸光度 A的回归方程为C=0.0446A-0.0065 (R2=0.9994, RSD=0.0518%， n=6, PO.OOOl)。 ③含量及包封率的计算精密称取50mg枸橼酸他莫昔芬，并加5mL蒸馏水于试管中，置IOO'C水浴加热破坏
lh后，转移至25mL容量瓶中，用95%乙醇定容。用微孔滤膜抽滤，精密吸取滤液lmL， 用95%乙醇定容至20mL。以95%乙醇为空白，在276nm处测得吸光度A，代入回归方程 并计算，便可得到枸橼酸他莫昔芬含量为11.61%。然后根据公式便可以计算得到微胶囊制 备过程中枸橼酸他莫昔芬的包封率是67.35%。(5) 回收率实验制备空白的微胶囊，向其中加入枸橼酸他莫昔芬溶液并使枸橼酸他莫昔芬的质量浓度 分别为O.l、 0.15、 0.2、 0.25、 0.3mg/mL，按上述药物含量的测定方法，测定所得溶液的枸 橼酸他莫昔芬含量，并根据公式计算得到回收率为99.6%，这表明枸橼酸他莫昔芬微胶囊 的囊材明胶和阿拉伯胶不干扰枸橼酸他莫昔芬的测定。(6) 体外释放实验利用RCZ-8A型药物溶出度测定仪进行微胶囊的体外释放实验，并计算其药物累计释 放量。该药物体外溶出实验参照中华人民共和国药典2000年版二部附录的溶出度测定方 法一浆法进行溶出介质为经脱气处理的磷酸盐缓冲液(pH6.8)，转速为100rpm，温度为 36.5~37.5°C。将适量枸橼酸他莫昔芬微胶囊放进250mL圆底烧瓶中，加入缓冲液，定时取 样5mL，用微孔滤膜过滤，并补入等量介质，取滤液在276nm处测定其吸光度A，由标准 曲线査出浓度为C (g/mL)，然后公式计算出累计释放量百分率并绘制释放曲线。以时间为横坐标，累计释放百分率为纵坐标，绘制枸橼酸他莫昔芬微胶囊及市售普通 片剂的体外释放曲线，见图7，图8。可见普通片剂在lh之内即释放了全部药量的68.9W， 微胶囊需要6小时才能释放72.3%;普通片剂3h几乎释放全部药量，微胶囊中枸橼酸他莫 昔芬接近完全释放的时间超过12h。
权利要求
1.复凝聚法制备枸橼酸他莫昔芬微胶囊的方法，包括下列步骤(1)精确称量囊心枸橼酸他莫昔芬，溶于95％乙醇中，超声溶解，加入阿拉伯胶溶液，于水浴中超声，再加入等量的明胶水溶液，水浴搅拌，控制好囊心囊材质量比；(2)在搅拌过程中，用10％的冰醋酸调pH值至4.0～4.3，加蒸馏水进行稀释，高速搅拌，置冰浴中急速降温至0～10℃，再加入交联剂固化0.5～1小时；(3)用20％NaOH溶液调pH值至8～9，在0～10℃高速搅拌，固化3～4小时，离心，洗涤，冷冻减压干燥，得到枸橼酸他莫昔芬微胶囊。
2. 根据权利要求1所述的复凝聚法制备枸橼酸他莫昔芬微胶囊的方法，其特征在于所 述的明胶是B型，等电点是4.7~5.0。
3. 根据权利要求1所述的复凝聚法制备枸橼酸他莫昔芬微胶囊的方法，其特征在于所 述步骤(1)中的明胶和阿拉伯胶溶液浓度是3°/<^5%。
4. 根据权利要求1所述的复凝聚法制备枸橼酸他莫昔芬微胶囊的方法，其特征在于所 述步骤(1)中的7jC浴温度是4(K55'C。
5. 根据权利要求1所述的复凝聚法制备枸橼酸他莫昔芬微胶囊的方法，其特征在于所述 步骤(1)中的搅拌速度是300~500转/分。
6. 根据权利要求1所述的复凝聚法制备枸橼酸他莫昔芬微胶囊的方法，其特征在于所述 步骤'O中的，囊心(枸橼酸他莫昔芬)、囊材(明胶、阿拉伯胶)的质量比是1:2 1:5。
7. 根据权利要求1所述的复凝聚法制备枸橼酸他莫昔芬微胶囊的方法，其特征在于所 述步骤(2)中的蒸馏水用量为原溶液的1 2倍。
8. 根据权利要求1所述的复凝聚法制备枸橼酸他莫昔芬微胶囊的方法，其特征在于所 述步骤(2)中的搅拌速度是1500-3000转/分。
9. 根据权利要求1所述的复凝聚法制备枸橼酸他莫昔芬微胶囊的方法，其特征在于所述 步骤(2)中的交联剂是戊二醛、甲醛。
全文摘要
本发明涉及一种复凝聚法制备枸橼酸他莫昔芬微胶囊，步骤包括(1)称量囊心枸橼酸他莫昔芬，溶于95％乙醇中，超声溶解，加入阿拉伯胶溶液，于水浴中超声，再加入明胶水溶液，水浴搅拌，控制好囊心囊材质量比；(2)在搅拌过程中，用10％的冰醋酸调pH值至4.0～4.3，加蒸馏水进行稀释，高速搅拌，置冰浴中急速降温至0～10℃，再加入交联剂固化；(3)用20％NaOH溶液调pH值，在0～10℃高速搅拌，固化，离心，洗涤，冷冻减压干燥，得到枸橼酸他莫昔芬微胶囊。该方法简便、安全，重现性好，制备的微胶囊通过透皮和体外溶出试验表明，具有较好的缓释作用，可以作为防治乳腺癌的药物缓释剂型。
文档编号A61K9/50GK101209248SQ20071017274
公开日2008年7月2日 申请日期2007年12月21日 优先权日2007年12月21日
发明者张晓飞, 朱利民, 樊在霞, 马宗会 申请人:东华大学