专利名称：13-卤代-3,15-二氧代赤霉酸酯及其制备方法
技术领域：
本发明涉及医药卫生和化学领域的药用化合物，特别是一种13-卤代-3， 15-二氧代赤霉酸酯及其制备方法。 背景纟支术癌症是严重威胁人类健康的一类疾病。目前用于治疗癌症的主要手段是化学 疗法。临床应用的化疗药物绝大多数都有使患者恶心、呕吐、白细胞下降、骨 髓抑制等毒副作用，影响了病人情绪及身体健康，因而大大限制了化疗药物的 临床应用。因此，寻找高活性，无毒或低毒副作用的抗癌化合物成为新药研究 的一项重要课题。赤霉素是一类广泛存在于植物和微生物体内、具有植物生长促进或植物生 长抑制生物活性的四环二萜类化合物，以商业化发酵生产的赤霉素(如GA3、 GA4、 GA7)为原料进行结构改造和修饰，以期发现具有更好植物生长促进或植 物生长抑制活性以及其它诸如抗菌、抗癌等新活性的赤霉素及其衍生物有着重 要的学术价值和实用价值。在本发明前期的研究中，本申请的发明人以赤霉酸(GA3)为原料合成得到 的3位和15位同时被氧化成羰基的赤霉酸衍生物具有很强的抗癌活性，同时对 正常细胞毒性很低，该项成果已于2004年申请了专利并获得授权，专利号 ZL200410021939。在本发明中我们又对此类结构的13位进行了进一步衍生化研 究。发明内容本发明的目的是提出一种具有结构通式(I)的化合物13-卣代-3， 15-二氧 代赤霉酸酯及其制备方法，该类化合物具有抗癌作用。式中W为曱基、2个碳到5个碳的烷基、苄基;W为氟、氯、溴、碘。本发明合成了系列13位卣代的3， 15-二氧代赤霉酸酯类化合物，经抗癌活性实验证明，这些化合物具有较强的抗肿瘤活性和对正常细胞的低毒性。 本发明的目的是这样实现的以3， 13， 15-三羟基赤霉酸酯(1)或3, 13， 15-三羟基赤霉酸节酯(2)为起始原 料，(1)或(2)参照专利ZL200410021939中的方法制备。(1)或(2)在低极性溶剂 中低温下加入二曱亚砜与适当比例的草酰氯或二曱亚砜与适当比例的氯化亚砜 形成的氧化剂，氧化3位和15位羟基为3, 15-二羰基的同时，13位同时发生 氯代反应生成具有结构通式(I)的化合物(3)或(4)。所述的低极性溶剂为苯、曱苯、二氯甲烷、三氯曱烷、正已烷、环已烷、 石油醚，用量为10-100mL溶剂/g底物；以二曱亚砜与草酰氯或二曱亚石风与氯 化亚砜在-7(TC至-40。C下形成的化合物为氧化剂，加入侍氧化和氯代的底物 后反应5-30分钟，再加入三乙胺进行反应5-30分钟。所述的化合物用量按摩尔比为底物/二曱亚石风/草酰氯或氯化亚^风/三乙胺 =1/2 ~ 50/2 ~ 6/4 ~ 100。采用各化合物用量按摩尔比为底物/二曱亚砜/草酰 氯/三乙胺=1/10/5/14。以化合物(1)或(2)制备(3)或(4)的步骤如下:式中(l)= CH3; 2國5个石灰的烷基，(2) Rq = PhCH2 ,(3) R = CH3; 2-5个碳的烷基，(4) R！ = PhCH2, a) DMSO， C10CCOCl，NEt3/CH2Cl2或DMSO,SOCl2,NEt3/CH2Cl2。 13-氯-3， 15_二氧> 赤霉酸酯(3)或(4)在四氢呋喃、乙腈、丙酮、N, N-二甲基曱酰胺、二曱亚砜、六曱基磷酰三胺等极性非质子性溶剂中与氟化钠、 氟化钾、氟化铵、四丁基氟化铵等氟化试剂反应得到13-氟-3， 15-二氧代赤霉 酸酯(5)或(6),反应溶剂采用丙酮，反应温度采用丙酮回流温度；氟化试剂 采用氟化钾，反应中各化合物的用量按摩尔比为底物/氟化钾=1/2~50/，丙 酮用量为10-100 mL /mmol底物，化合物(5)或(6)的制备如下，式中(3)的R广CH3;2-5个碳的烷基，(4)的= PhCH2, (5)的R,CH3;2-5个碳的烷基，(6)R,-PhCH2，b) KF/CH3COCH3。 13-溴-3， 15-二氧代赤霉酸酯(7)和(8)是分别以13-氯-3， 15-二氧代 赤霉酸酯(3)或(4)为原料，在极性非质子性溶剂，如四氢呋喃、丙酮、乙 醚、乙腈、二曱亚砜、N， N-二曱基曱酰胺、六曱基磷酰三胺等中与溴化钠、溴 化钾、溴化锂，四丁基溴化铵等溴化试剂反应制备，反应溶剂采用乙腈，溴化 试剂采用溴化锂，反应温度采用乙腈回流温度，反应中化合物的用量按摩尔比 为底物/溴化锂=1/2~50,乙腈用量为10~100 mL /mmo1底物，(7)或(8) 的制备如下，式中(3)的R^CH3;2-5个碳的烷基，(4)的R4 = PhCH2 , (7)的R！ = CH3; 2-5个碳的烷基，(8)的R, = PhCH2c ) UBr/CH3CN13会3, 15-二氧代赤霉酸酯(7)或(8)，亦可由ZL200410021939中的 方法制备的13-羟基-3， 15-二氧代赤霉酸酯(11)或(12)与三溴化磷、吡啶 在二氯曱烷中反应制备，反应中各化合物的用量按摩尔比为底物/吡啶/三溴 化磷-1/1~ 20/0. 35 ~2， 二氯曱烷用量为10~100 mL /mmo1底物，反应温度采 用-10°C~0°C。制备反应式如下(11) R！ = CH3; 2-5个碳的烷基 (7) R！ = CH3; 2-5个碳的烷基(12) R！ = PhCH2 (8)= PhCH2d) PBr3/CH2Cl213-碘-3， 15-二氧代赤霉酸酯(9)和(10)是分别以13-氯-3， 15-二氧代 赤霉酸酯(3)或(4)为原料，在极性非质子性溶剂，如四氢呋喃、丙酮、乙 醚、乙腈、二甲亚砜、N, N-二曱基曱酰胺、六曱基磷酰三胺等中与碘化钠、碘 化钾、碘化锂，四丁基碘化铵等碘化试剂反应制备，反应溶剂采用乙腈，石典化 试剂采用碘化钠，反应温度采用乙腈回流温度，反应中化合物的用量按摩尔比 为底物/硪化钠=1/2~50,乙腈用量为10-100 mL /mmol底物，(9)或(10) 的制备如下，(3) R = CH3; 2-5个碳的烷基 (9) R！ =CH3; 2-5个碳的烷基(4) & = PhCH2 (10) R4 = PhCH2 e) NaI/CH3CN13-硪-3, 15-二氧代赤霉酸酯(9)或(10)亦可由ZL200410021939中的 方法制备的13-羟基-3， 15-二氧代赤霉酸酯(11)或(12 )与三苯基膦、碘和咪唑在二氯甲烷中反应制备目标物，反应中化合物的用量按摩尔比为底物/咪 唑/碘-1/2~30/1~5， 二氯曱烷用量为10 ~ 100 mL/mmo1底物，反应温度采用 -10°C~(TC。 (9)或(10)的制备如下，(11) R, = CH3; 2-5个石岌的烷基 (9) R！ = CH3; 2-5个石友的烷基(12) = PhCH2 (10)= PhCH2f) PPh3， imidazole, I2/ CH2C12 13-羟基-3， 15-二氧代赤霉酸酯(11)和(12)除按ZL200410021939中 的方法制备外，还可由13-氯-3, 15-二氧代赤霉酸酯(3)或(4)在丙酮、乙 腈、四氩呋喃、二氯曱烷等极性非质子性溶剂中与水和碳酸氲钠、碳酸钠、碳 酸银、三乙胺、二异丙基乙基胺等减反应制备。采用丙酮作为溶剂，用量为10 ~ 100 mL /mmo1底物；采用碳酸银作为碱；反应温度采用丙酮回流温度；反应中 化合物的用量按摩尔比为底物/碳酸银=1/1~2;采用水用量按体积为丙酮体 积的1/4，丙酮用量采用5 10mL/mmol底物。(11)或(12 )的制备步骤如下(3) R！ = CH3; 2-5个碳的烷基 (11) R！ = CH3; 2-5个碳的烷基(4) & = PhCH (12)= PhCHg) Ag2C03， H20/CH3COCH3 具有结构通式(I)的化合物与至少一种药物上可接受的赋形剂或载体制 得的药物组合可用于治疗癌症。
具体实施方式
以下结合实施方式列举本发明的典型化合物，但本发明并不仅限于这些实 施例或被这些实施例所限制。化合物3 13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸曱酯制备过程如下混合二曱亚砜(7.6 g， lOOmmol)和二氯曱烷(30mL),冷却至-70°C，搅拌 下滴加草酰氯(6. 35g， 50隱o1 )， 5分钟左右加完，控制反应温度为-7(TC至-40。C之间。草酰氯加入10分钟后滴加3,13,15-三羟基赤霉酸甲酯(3. 76g， lOmmol )与二氯曱垸(20mL)和二曱亚砜(4 mL)配成的溶液，5分钟左 右加完后，在-7(TC至-40。C之间搅拌反应20分钟。再加入三乙胺(14. 14g，140mmo1)，继续在-7(TC至-40。C之间搅拌反应15分钟，纟敬去冷浴， 自然升温至室温。反应液转入分液漏斗中，加入冰冷却的乙酸乙酯(60 mL)，依 次用水冷却的盐酸(2N, 70mL x 1 )洗和水(30mL x 2 )洗，分出有才几层，加无水 硫酸钠干燥，过滤除去干燥剂，减压蒸出溶剂至干，得黄色固体3. 79g,硅胶柱 层析(正己烷/乙酸乙酯=4 / l)纯化得白色结晶3.45 g,收率87. 9 %。 元素分析C2。HwC106计算值(°/。) C， 61.47; H, 4.90; Cl， 9.07 实测值(°/。) C， 61.45; H， 4.93; Cl， 9.06服R (CDCU 300MHz): 5 7. 19 (d， J=9. 4Hz， 1H), 6. 23(S， 1H) ， 6. 07 (d， J=9.4Hz， 1H), 5. 87(s, 1H)， 3. 63(s, 3H) ， 3. 62 (d， J=10. 2Hz， 1H)， 2. 82 (d, J=10.2Hz， 1H)， 2. 79(d， J=ll. 5Hz， 1H), 2.69-2.62 (m， 1H)， 2.50(d， J=ll. 5Hz, 1H)， 2. 40—2. 10(m， 4H), 1.88(m, 1H), 1. 33(s， 3H).13CNMR(CDCl3，500MHz): 5 200.35， 191.08， 172.71， 170.23， 150.73， 145. 81: 129.75， 121.41， 89.17， 65.95， 65.45, 61.28， 60.54， 52.49， 48.87, 47.25， 41.60， 39.86， 18.02， 11.93.化合物413-氯-3， 15-二氧代赤霉酸节酯以3， 13， 15-三幾基赤霉酸卡酯(4. 52g， lOmmol )为起始原料，制备方法(反 应步聚、投料摩尔比、加料顺序、反应温度等)与化合物3 (13-氯-3， 15-二氧 代赤霉酸甲酯)的制备类同，最终得到浅黄色固体产物粗品4. 43g，硅胶柱层析 (正己烷/乙酸乙酯=8/ l)纯化得白色结晶4.15 g，收率88.7%,。 元素分析CmH23C106计算值(％): C， 66.88; H， 4.97; Cl， 7.59 实测值(％): C， 66.85; H， 5.00; Cl， 7.58^丽R (CDCh， 300MHz): 5 7. 35-7. 20 (m, 5H) ， 7. 18(d， J=9. 4Hz， 1H)，6. 16(s， 1H)， 6. 07(d, J=9. 4Hz， 1H), 5. 84 (s， IH)， 5. 05 (s, 2H) ， 3. 65 (d， J=10.4Hz， IH)， 2. 86(d， J=10. 4Hz， IH)， 2. 77(d， J=ll. 5Hz， IH)， 2. 70-2.62 (m: IH)， 2. 46(d， J=11.5Hz， IH)， 2. 38—2. 09 (m， 4H) ， 1.93—1.79 (m， 1H)， 1. 33(s， 3H)."C NMR (CDC13， 75MHz): 5 200.42， 191.06， 172.69， 169.61, 150.82， 145.79， 134.92， 129.77, 129.70, 128.67, 128.63， 121.26， 89.17, 67.58， 65.90, 65.45， 61.24， 60.60， 49.04， 47.32， 41.60， 39.73， 18.04， 12.01.化合物5 13-氟-3， 15-二氧代赤霉酸甲酯混合13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸曱酯(3 ， 391mg，lmmo1)、氟化钾(1. 51g， 25. 6mmo1)和50 mL丙酮，回流反应50小时，减压蒸出溶剂至干，加入20mL 二氯曱烷和10mL水，充分搅拌后分出有机层，水层再用二氯曱烷(10mLx2) 萃取，合并有机层，饱和盐水(1GmL)洗后，加无水硫酸钠干燥，过滤除去干 燥剂，减压蒸出溶剂至干，得黄色油状物390mg,硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙 酉旨=3/ 1 )得到白色颗粒状晶体203mg,收率54. 2%。元素分析C2。H19F06计算值(。/0: C, 64.17; H， 5.12; F， 5.07 实测值(％): C, 64.17; H， 5.10; F， 5.104 NMR (CDCh， 300MHz): 5 7. 19(d， J=9. 3Hz，lH)， 6. 16(s， 1H)， 6. 08 (d， J=9. 3Hz， 1H)， 5. 72(s, 1H)， 3. 65 (s+d， 4H) ， 2. 85 (d， J=10. 2Hz， 1H) ， 2. 62 (d， J=10.8Hz， 1H)， 2. 60-2.20 (m, 4H) ， 2.10-1.85 (m， 2H) ， 1.26(s, 3H).13CNMR(CDC13， 75MHz): 5 200. 47 (d， J=5. 8Hz ) ， 191.08， 172.76， 170.27， 148. 72 (d, J=19. 6Hz), 145.84， 129.80， 119.66, 96. 30 (d， J=200.1Hz), 89.08， 65.56, 61,71， 61. 23(d， J=4. 3Hz ) ， 52. 48, 48.81,48.17， 37. 44 (d， J=16. 7Hz): 34.30 (d， J=27.1Hz)， 17.49(d， J=8. OHz ) ， 11.99.化合物6 13-氟-3， 15-二氧代赤霉酸苄酯以化合物4-—13-氯-3, 15-二氧代赤霉酸苄酯(467mg， l麵ol)为起始原料， 制备方法(反应步聚、投料摩尔比、加料顺序、反应温度等)与化合物5 (13-氟-3， 15-二氧代赤霉酸曱酯)的制备类同，最终得到浅黄色固体产物粗品430mg， 硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯-8/ l)纯化得白色结晶230mg，收率51.1%。元素分析C26H F06计算值(％): C， 69.32; H， 5.15; F, 4.22 实测值U): C， 69.33; H， 5.17; F， 4.25^ NMR (CDC13， 300MHz): 5 7. 45—7. 10(m， 5H) ， 7. 12(d， J=9. 6Hz， 1H), 6. Ol(d， J=9. 6Hz， 1H)， 6. OO(s， 1H) ， 5. 60 ( s， 1H)， 5. OO(s， 2H) ， 3. 61 (d, J-10. 4Hz, 1H)， 2. 82(d， J-10. 4Hz， 1H)， 2. 53(d， J=10. 8Hz， 1H), 2. 45-2. 10 (m 4H), 2. 00-1.70 (m， 2H) ， 1.27(s， 3H).13CNMR(CDCl3，75MHz): 5 200. 46 (d， J=5. 8Hz ), 191.06， 172.72, 169.64， 148.75 (d， J=19.7Hz)， 145.81， 134.92， 129.76， 128.75， 128.70， 128.69, 119.37， 96.28 (d， J-200.2Hz), 89.05， 67.59, 65.52， 61.64, 61. 23 (d, J=4. 3Hz)， 48.91,48.20, 37.41 (d, J=16. 7Hz)， 34. 13(d， J=27. 2Hz), 17. 45(d J=7. 8Hz )， 12. 02.化合物7 13-溴-3， 15-二氧代赤霉酸甲酯混合吡啶(168mg，2. lmmol)和二氯曱烷(10mL)， - 40。C外浴冷却下搅拌、 滴加三溴化磷(72. 6 mg， 0. 27画1)，加毕，换冰盐水冷却，滴加13-羟基-3, 15-二氧代赤霉酸曱酯(11， 106 mg， 0. 27隨o1)与二氯甲烷(2mL )配成的溶 液，搅拌反应0. 5小时后停止反应，加入乙酸乙酯(10mL)，混合液转入分液漏 斗中，依次用水、盐酸(2N)和饱和食盐水洗，分出有机层，水层再用乙酸 乙酉旨(5mLx 2 )萃取两次，饱和食盐水洗至中性后合并有才几相，加无水辟u酸 钠干燥，过滤除去干燥剂，减压蒸出溶剂至干，得无色油状物85mg,硅胶柱层 析(正己烷/乙酸乙酯=3/ 1 )得到白色固体65mg,收率55.5%。元素分析C2QH19Br06计算值(％): C, 55.19; H， 4.40; Br， 18.36 实测值(％): C， 55.22; H, 4.42; Br, 18.40丄H NMR (CDC13, 300MHz): 5 7. 18(d， J=9. 4Hz， 1H)， 6. 30(s， 1H)， 6. 08 (d， J=9. 4Hz， 1H)， 5.97 ( s， 1H)， 3.65 ( s， 3H) ， 3. 63(d， J-10. 4Hz， 1H)， 2. 91 (d， J=11.7Hz， 1H)， 2. 82(d， J=10.4Hz， 1H),2. 67(d, J-ll. 7Hz， 1H) ， 2. 50—2. 20 (m， 4H)， 1. 90-1. 75 (m, 1H)， 1. 35(s， 3H).13C雨R (CDC13,75MHz): 5 199.61， 191.07， 172.70， 170.22， 150.29， 145.76， 129.80， 122.93， 89.22， 65.46， 61.19, 60.86， 57.45， 52. 54, 48.95, 47. 00， 42. 74， 41. 34， 18. 43, 11. 95.化合物8 13-溴-3， 15-二氧代赤霉酸苄酯以化合物11—-13-羟基-3， 15-二氧代赤霉酸苄酯(448mg， lmmol)为起始原 料，制备方法(反应步聚、投料摩尔比、加料顺序、反应温度等)与化合物7 (13-溴-3, 15-二氧代赤霉酸甲酯)的制备类同，最终得到浅黄色固体产物粗 品430mg，硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯=8/ l)纯化得白色结晶305mg,收率 59. 7%。元素分析C26H23Br06计算值(％): C, 61.07; H， 4.53; Br， 15.63 实测值(％): C, 61.08; H, 4.55; Br, 15.66^ NMR ( CDCh, 300MHz ): 5 7. 50—7. 20 (m， 5H)，7. 17(d， J=9. 4Hz， 1H)， 6. 23(s, 1H)， 6. 08(d, J=9. 4Hz， 1H) ， 5. 94 ( s， 1H)， 5. 05(s, 2H)， 3. 66 (d， J-10.4Hz， 1H)， 2.92(d， J-ll. 7Hz, 1H), 2.86(d， J=10. 4Hz， 1H)，2. 65(d， J=L1. 7Hz， 1H)， 2. 50-2. 20 (m， 4H), 1.90-1. 75 (m， 1H), 1. 35 (s, 3H).13C NMR (CDCh，75MHz): 5 199.68, 191.05， 172.68， 169.60， 150.38, 145.74， 134.97, 129.82, 129.79, 128.72， 128.70, 122.78， 89.22， 67.56, 65.46, 61.15， 60.92， 57.47, 49.12， 47.07， 42.74， 41.21， 18.45， 12.03.化合物9 13-碱-3, 15-二氧代赤霉酸曱酯混合13-氯-3, 15-二氧代赤霉酸甲酯(3 , 391mg， lmmol)、碘化钠(3. OOg, 20mmo1)和30 mL无水乙腈，回流反应50小时，减压蒸出溶剂至干，加入20mL 二氯甲烷和10mL水，充分搅拌后分出有机层，水层再用二氯曱烷(10mLx2) 萃取，合并有机层，饱和盐水(10mL)洗后，加无水^琉酸钠干燥，过滤除去千 燥剂，减压蒸出溶剂至干，得黄色油状物415mg,硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙 酉旨=3/ 1 )得到白固体241mg，收率43. 1%。元素分析C2。H191 06计算值(％): C, 49.81; H， 3.97; I, 26.31 实测值(％): C， 49.79; H, 3.99; I， 26.35^ NMR (CDC13, 300MHz): 5 7. 17(d， J=9. 4Hz， 1H)， 6. 36(s, 1H), 6. 08 (d， J=9.4Hz， 1H), 6.03 ( s， 1H)， 3.66 ( s, 3H), 3. 62 (d， J=10. 4Hz, 1H)， 3. 02 (d， J-12，8Hz， 1H), 2. 82(d, J-ll. 6Hz， 1H)，2. 80(d， J=10. 4Hz， 1H)， 2. 40-2.10(m， 4H)， 1.90-1. 75 (m， 1H)， 1. 35 (s， 3H).13C腿(CDC13， 75MHz): 5 198.22， 191.07， 172.69, 170.22， 153.19， 145.70， 129.80， 124.77， 89.34, 65.41， 60.98， 60.95， 52. 55， 48.99， 46.56, 45. 11， 44. 82， 33. 67, 18. 67， 11. 94.化合物IO 13-碘-3, 15-二氧代赤霉酸节酯以化合物4-—13-氯-3, 15-二氧代赤霉酸节酯(467mg， lmmol)为起始原料， 制备方法(反应步聚、投料摩尔比、加料顺序、反应温度等)与化合物9 (13-碘-3, 15-二氧代赤霉酸曱酯)的制备类同，最终得到浅黄色固体产物粗品430mg, 硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯=8 / 1)纯化得白色结晶303mg,收率54. 3%。元素分析C26H231 06计算值(％): C， 55.93; H， 4.15; I， 22.73 实测值(％): C, 55.93; H， 4.17; I， 22.77丄H NMR ( CDC13， 300MHz ): 5 7. 40—7. 20 (m， 5H),7. 16(d， J=9. 4Hz， 1H), 6.29(s， 1H)， 6. 08(d， J=9. 4Hz， 1H), 6. 00 ( s， 1H) ， 5. 04(s， 2H) ， 3. 65 (d， J-10.4Hz， 1H)， 3. 06(d, J=12.8Hz, 1H), 2. 80(d， J=ll. 6Hz， 1H)，2.79(d， J=10.4Hz， 1H)， 2.40-2. 10 (m， 4H), 1.90-1. 75 (m， 1H)， 1. 35 (s, 3H).13C NMR (CDC13,75MHz): 5 198.29， 191.05, 172.69， 170.20， 153. 28， 145.68,134.93， 129.82， 129.80， 128.71, 128.65, 124.62， 89.34， 67.55, 65.41， 61.01， 60.94, 49.06， 46.63， 45.11， 44.77， 33.67， 18.69, 12.02.化合物ll 13-羟基-3， 15-二氧代赤霉酸曱酯 13-氯-3, 15-二氧代赤霉酸酯(3 ， 391mg，lmmol)溶于丙酮/水(8/2， 10mL) 中，再加入碳酸银(304mg， 1. lmmol)，混合物搅拌回流反应24小时，仃反应， 冷至室温后过滤，丙酮洗滤饼。滤液减压浓缩至干，加乙酸乙酯(20 mL)和水 (7 mL),充分搅拌后，分出有机层，水层再用乙酸乙酯(10 mLx2)萃两次， 合并有机层，饱和盐水洗后，加无7jc琉酸钠干燥，过滤除去干燥剂，减压蒸出 溶剂至干，得白色粉末状固体355mg，硅月交柱层析(正己烷/乙酸乙酯=3/2) 得到白色固体345mg,收率95. 4%,。元素分析(:2。112。07计算值(％): C, 64. 51; H, 5. 41实测值(％): C， 64. 50; H, 5. 43!H NMR (CDC13， 300MHz): 5 7. 20(d， J=9. 4Hz， 1H)， 6. 13(s, 1H)， 6. 08 (d，J=9. 4Hz， 1H)， 5.70 ( s, 1H), 3.64 ( s， 3H) ， 3. 65 (d， J=10. 2Hz， 1H), 2. 83(d， J=10. 2Hz， 1H)，2. 54(d， J=10. 8Hz， 1H), 2. 40-2. 20 (m， 3H) ， 2. 16(d， J=10. 8Hz, 1H)，1.90-1. 75 (m, 3H) ， 1.35(s, 3H)。13C纖(CDCl3，75MHz): 5 202.15， 191.28, 173.00， 170.60， 152.69， 146.07， 129.74， 118.53， 89.31, 76.00, 65.60， 61.63， 60.86， 52.44， 48.98， 48. 09， 40. 39， 36. 75， 17. 61， 12. 01。化合物12 13-羟基-3， 15-二氧代赤霉酸千酯以化合物4---13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸千酯(467mg， lmmol)为起始原料， 制备方法(反应步聚、投料摩尔比、加料顺序、反应温度等)与化合物11 (13-羟基-3,15-二氧代赤霉酸曱酯)的制备类同，最终得到白色固体产物粗品420mg， 硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯=3/ l)纯化得白色结晶295mg，收率65.8%。元素分析C2JU)7计算值(％): C， 69. 63; H， 5. 39 实测值(%): C， 69. 64; H， 5. 41丄H NMR (CDCl3，300MHz): 5 7. 40-7. 10(m, 6H) ， 6. 08 (d， J=9. 9Hz, 1H)， 6. 06(s, 1H)，5. 65(s， 1H)，5. 06(s， 2H) ， 3. 68 ( d， J=10. 2Hz， 1H)， 2. 86(d, J-10. 8Hz， 1H)，2. 51(d， J=ll. lHz, 1H)， 2.40—2.15 (m, 3H) ， 2. 07 (d, J=ll. lHz， 1H)，1.90-1. 70 (m， 3H)， 1.34(s， 3H).13C NMR (CDC13， 75MHz): 5 202.50, 191.27， 172.98, 170.00， 152.86， 146.05， 135.10， 129.74， 128.84， 128.71， 128.67, 118.18， 89.32， 75.99， 67.55， 65.59， 61.61， 60.87， 49.15, 48.18， 40.46, 36.53， 17.59, 12.06.化合物3 ~ 10的抗癌活性实验化合物3 10按照MTT方法对K562 (人白血病细胞林)等六种肿瘤细胞抹 的半数抑制浓度(IC5。)测定结果表明:化合物3 ~ 10的IC5。 = 3. 5 ~ 45. 3 ju g/mL， 均具有较强的对肿瘤细胞的抑制作用。
权利要求
1、一种具有下述结构通式(I)的化合物，名称为13-卤代-3，15-二氧代赤霉酸酯，id="icf0001" file="S2008100582971C00011.gif" wi="139" he="46" top= "54" left = "35" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="no"/>
2、如权利要求1所述的具有结构通式(I )的化合物的制备方法，其特 征是a.以3， 13， 15-三羟基赤霉酸酯(l)或3， 13， 15-三羟基赤霉酸节酯(2)为起 始原料，首先在低极性溶剂中，低温下加入二甲亚砜与适当比例的草酰氯或适 当比例的二甲亚砜与氯化亚砜形成的氧化剂，氧化3位和15位羟基为3， 15-二羰基的同时，13位发生氯代反应生成具有结构通式(I )的化合物(3): 13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸酯或(4): 13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸苄酯，(1) 或(2)的结构式如下，Ri-CI^;2个碳到5个碳 的垸基及PhCH2式中(l)的R产CH3、 2个碳到5个碳的烷基，(2)的R产P跳 (3)或(4)结构式如下，<formula>formula see original document page 2</formula>其中(3)的R产CH3、 2个碳到5个碳的垸基，(4)的R产PhCH:b. 以13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸酯(3)或13-氯-3, 15-二氧代赤霉酸苄酯 (4)为原料，制备具有结构通式(I)的化合物13-氟-3， 15-二氧代赤霉酸 酯(5、 6)， 13-溴-3， 15-二氧代赤霉酸酯(7、 8)， 13_碘-3, 15-二氧代赤霉酸 酯(9、 10)，c. 以13-羟基-3， 15-二氧代赤霉酸酯(ll)或13_羟基-3, 15-二氧代赤霉 酸苄酯(12)为原料，制备具有结构通式(I )的化合物13-溴-3, 15-二氧代 赤霉酸酯(7、 8)或制备13-碘-3， 15-二氧代赤霉酸酯(9、 10)。
3、 一种以13-氯-3, 15-二氧代赤霉酸酯(3)或(4)为原料制备13-羟 基-3， 15-二氧代赤霉酸酯(ll)、 (12)的方法。
4、 根据权利要求2所述的制备方法，其特征是所采用的低极性溶剂为苯、 甲苯、二氯甲烷、三氯甲烷、正已烷、环己烷或石油醚，用量为10 100mL 溶剂/g底物；以二甲亚砜与草酰氯或二甲亚砜与氯化亚砜在-7(TC至一40'C 下形成的化合物为氧化剂，加入侍氧化和氯代的底物后反应5-30分钟，再加 入三乙胺进行反应5-30分钟。
5、 根据权利要求2或4所述的制备方法，其特征是各化合物用量按摩尔 比为底物/二甲亚砜/草酰氯或氯化亚砜/三乙胺=1/2 50/2 6/4 100。
6、 根据权利要求2或4所述的制备方法，其特征是各化合物用量按摩尔 比为底物/二甲亚砜/草酰氯/三乙胺=1/10/5/14。
7、 根据权利要求2所述的制备方法，其特征是制备13-氟-3， 15-二氧代 赤霉酸酯(5)、 (6)时，将13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸酯(3)或(4)在四氢呋喃、 丙酮、乙醚、乙腈、二甲亚砜、N， N-二甲基甲酰胺、六甲基磷酰三胺等非质 子性溶剂中与氟化钠、氟化钾、氟化锂、氟化铵或四丁基氟化铵等氟化试剂反 应制备目标物；反应温度采用丙酮回流温度；氟化试剂采用氟化钾，反应中化 合物的用量按摩尔比为底物/氟化钾二1/2 50，丙酮用量为10 100mL/mmol 底物，化合物(5)或(6)结构式如下，<formula>formula see original document page 4</formula>其中(5)的Rp CH3、 2个碳到5个碳的烷基,(6)的R产PhCH2 。
8、根据权利要求2所述的制备方法，其特征是制备13-溴-3， 15-二氧代 赤霉酸酯(7)、 (8)时，将13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸酯(3)或(4)在四氢呋喃、 丙酮、乙醚、乙腈、二甲亚砜、N， N-二甲基甲酰胺或六甲基磷酰三胺溶剂中 与溴化钠、溴化钾、溴化锂、四丁基溴化铵等溴化试剂反应制备目标物，溴化 剂采用溴化锂，反应温度采用乙腈回流温度，反应中化合物的用量按摩尔比为 底物/溴化锂=1/2 50，乙腈用量为10 100 mL /mmo1底物，(7)或(8)结 构式如下，<formula>formula see original document page 4</formula>式中(7)的R1= CH3、 2个碳到5个碳的垸基，(8)的R产PhCH2 。
9、根据权利要求2所述的制备方法，其特征是制备13-碘-3， 15-二氧代 赤霉酸酯(9)、 (IO)时，将13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸酯(3)、 (4)在四氢呋喃、 丙酮、乙醚、乙聘、二甲亚砜、N， N-二甲基甲酰胺或六甲基磷酰三胺溶剂中 与碘化钠、碘化钾、碘化锂、四丁基碘化铵等碘化剂反应制备目标物，碘化剂 采用碘化钠，溶剂采用乙腈，反应温度采用乙腈回流温度，反应中化合物的用 量按摩尔比为底物/碘化钠=1/2 50，乙腈用量为10 100 mL /mmol底物， (9)和(10)结构式如下，其中(9)的Rf CH3、 2个碳到5个碳的烷基，(10)的R^ PhCH2。
10、根据权利要求3所述的制备方法，其特征是制备13-羟基-3， 15-二 氧代赤霉酸酯(ll)、 (12)时，将13-氯-3， 15-二氧代赤霉酸酯(3)或(4) 在丙酮、乙腈、乙醇、甲醇、四氢呋喃或二氯甲垸溶剂中与水和碳酸氢钠、碳 酸钠、碳酸银、三乙胺或二异丙基乙基胺反应制备13-羟基-3, 15-二氧代赤 霉酸酯(11、 12)， (11、 12)结构式如下，<formula>formula see original document page 5</formula>其中(ll)的R^CH3， 2个碳到5个碳的烷基，(12)的R1= PhCH2。
11、 根据权利要求10所述的制备方法，其特征是采用丙酮/水作为溶剂， 碳酸银作为碱；反应温度采用丙酮回流温度，采用化合物用量按摩尔比为底物 /碳酸银=1/1. 1;丙酮/水比例采用按体积比为8/2，用量为10 100 mL/mmo1 底物。
12、 根据权利要求2所述的制备方法，其特征是由13-羟基-3， 15-二氧 代赤霉酸酯(11)、 (12)为原料制备13-溴-3， 15-二氧代赤霉酸酯(7)、 (8)， 13-羟基-3, 15-二氧代赤霉酸酯(11)或(12)与三溴化磷和吡啶在二氯甲烷 中反应制备13-溴-3， 15-二氧代赤霉酸酯(7)或(8)，反应中化合物的用量按 摩尔比为底物/吡啶/三溴化磷二1/1 20/0.35 2， 二氯甲烷用量为10 100 mL /mmol底物，反应温度采用—10°C 0°C。
13、 权利要求1所述的具有结构通式(I )的化合物在制备治癌症药物的 应用。
全文摘要
本发明涉及医药卫生和化学领域的药用化合物，是一种具有结构通式(I)的化合物13-卤代-3，15-二氧代赤霉酸酯及其制备方法，经抗癌活性实验证明，该类化合物具有较强的抗肿瘤活性和对正常细胞的低毒性。
文档编号A61K31/365GK101260095SQ20081005829
公开日2008年9月10日 申请日期2008年4月18日 优先权日2008年4月18日
发明者刘建平, 晨 卿, 孙竹先, 张洪彬, 张雁丽, 曾祥慧, 陈静波 申请人:云南大学;昆明医学院