专利名称：一种硫酸阿米卡星注射液的新用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种硫酸阿米卡星注射液的新用途，特别是涉及一种硫酸阿米卡星注射液 用于防治鸡的大肠杆菌和沙门氏菌病的新用途。
背景技术：
硫酸阿米卡星注射液的主要成份为硫酸阿米卡星。其化学名称为0-3-氨基-3-脱氧
-a-D-葡吡喃糖基-(1—6)-0-[6-氨基-6-脱氧-a-D-葡吡喃糖基-(l一4)]-N-(4-氨基-2-羟基-l-氧 丁基)-2-脱氧-D-链霉胺硫酸盐。药品类别氨基糖甙类。
适应症硫酸阿米卡星注射液适用于铜绿假单胞菌及部分其他假单胞菌、大肠埃希菌、
变形杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、不动杆菌属等敏感革兰阴性杆菌与葡萄 球菌属(甲氧西林敏感株)所致严重感染，如菌血症或败血症、细菌性心内膜炎、下呼吸道 感染、骨关节感染、胆道感染、腹腔感染、复杂性尿路感染、皮肤软组织感染等。由于本 品对多数氨基糖苷类钝化酶稳定，故尤其适用于治疗革兰阴性杆菌对卡那霉素、庆大霉素 或妥布霉素耐药菌株所致的严重感染。
性状硫酸阿米卡星注射液为无色或微黄色的澄明液体。
药理毒理硫酸阿米卡星是一种氨基糖苷类抗生素。对多数肠杆菌科细菌，如大肠埃 希菌、克雷伯菌属、肠杆菌属、变形杆菌属、志贺菌属、沙门菌属、枸橼酸杆菌属、沙雷 菌属等均具良好作用，对铜绿假单胞菌及部分其他假单胞菌、不动杆菌属、产碱杆菌属等 亦有良好作用；对脑膜炎球菌、淋球菌、流感杆菌、耶尔森菌属、胎儿弯曲菌、结核杆菌
及某些分枝杆菌属亦具较好抗菌作用，其抗菌活性较庆大霉素略低。其最突出的优点是对 许多肠道革兰阴性杆菌所产生的氨基糖苷类钝化酶稳定，不会为此类酶钝化而失去抗菌活
性。在目前所分离到的12种钝化酶中，硫酸阿米卡星仅可为AAC(6')所钝化，此外AAD(4') 和APH(3') — III偶可导致细菌对本品中度耐药。临床分离的肠杆菌科细菌中对庆大霉素、 妥布霉素和奈替米星等氨基糖苷类耐药者约60 70%对硫酸阿米卡星仍敏感。近年来革兰 阴性杆菌中对阿米卡星耐药菌株亦有增多。革兰阳性球菌中本品除对葡萄球菌属中甲氧西 林敏感株有良好抗菌作用外，肺炎链球菌、各组链球菌及肠球菌属对之大多耐药。硫酸阿 米卡星对厌氧菌无效。硫酸阿米卡星作用机制为作用于细菌核糖体的30S亚单位，抑制细 菌合成蛋白质。阿米卡星与半合成青霉素类或头孢菌素类合用常可获协同抗菌作用。
3药代动力学硫酸阿米卡星口服很少吸收。肌内注射后迅速被吸收。主要分布于细胞 外液，部分药物可分布到各种组织，并可在肾脏皮质细胞和内耳液中积蓄；但在心脏心耳 组织、心包液、肌肉、脂肪和间质液内的浓度很低。支气管分泌物、胆汁及房水中浓度低。 蛋白结合率低。在体内不代谢。成人血消除半衰期(tl/2 )为2 2.5小时。可透过胎盘进入 胎儿组织。脑脊液中浓度低。主要经肾小球滤过排出，给药后24小时内排出90%以上。 血液透析与腹膜透析可自血中清除相当量的药物。
用法用量1.成人，肌内注射或静脉滴注。单纯性尿路感染对常用抗菌药耐药者每 12小时0.2g;用于其他全身感染每12小时7.5mg/kg，或每24小时15mg/kg。成人一日不 超过1.5g，疗程不超过10天。2.小儿，肌内注射或静脉滴注。首剂按体重10mg/kg，继 以每12小时7.5mg/kg，或每24小时15mg/kg。 3.肾功能减退患者肌酐清除率>50 90ml/min者每12小时给予正常剂量(7.5mg/kg)的60 90% ;肌酐清除率10 50ml/min者 每24 48小时用7.5mg/kg的20 30% 。肌酐清除率可直接测定或从血肌酐值按下式计算 成年男性肌酐清除率K140-年龄)x标准体重(kg)/72x患者血肌酐浓度(mg/dl)或(140-年龄)x 标准体重(kg)/50x患者血肌酐浓度(mg/dl);成年女性肌酐清除率K140-年龄)x标准体重 (kg)x0.85/72x患者血肌酐浓度(mg/dl)或(140-年龄)x标准体重(kg)x0.85/50x患者血肌酐浓度 (mg/dl)。
不良反应1.患者可发生听力减退、耳鸣或耳部饱满感；少数患者亦可发生眩晕、 步履不稳等症状。听力减退一般于停药后症状不再加重，但个别在停药后可能继续发展至 耳聋。2.本品有一定肾毒性，患者可出现血尿，排尿次数减少或尿量减少、血尿素氮、 血肌酐值增高等。大多系可逆性，停药后即见减轻，但亦有个别报道出现肾功能衰竭。3.软 弱无力、嗜睡、呼吸困难等神经肌肉阻滞作用少见。4.其他不良反应有头痛、麻木、针 刺感染、震颤、抽搐、关节痛、药物热、嗜酸粒细胞增多、肝功能异常、视力模糊等。
禁忌症对阿米卡星或其他氨基糖苷类过敏的患者禁用。
注意事项1.交叉过敏，对一种氨基糖苷类过敏的患者可能对其他氨基糖苷也过敏。 2.在用药过程中应注意进行下列检查(l)尿常规和肾功能测定，以防止出现严重肾毒性 反应。(2)听力检査或听电图检查，尤其注意高频听力损害，这对老年患者尤为重要。3.疗 程中有条件时应监测血药浓度，尤其新生儿、老年和肾功能减退患者。每12小时给药
7.5mg/kg者血约峰浓度应保持在15 30 g/ml，谷浓度5 10g/ml; —日1次给药15mg/kg 者血药峰浓度应维持在56 64g/ml，谷浓度应为〈lg/ml。 4.下列情况应慎用硫酸阿米卡 星(l)失水，可使血药浓度增高，易产生毒性反应。(2)第8对脑神经损害，因本品可导致前庭神经和听神经损害。(3)重症肌无力或帕金森病，因本病可引起神经肌肉阻滞作用，导 致骨骼肌软弱。(4)肾功能损害者，因本品具有肾毒性。5.对诊断的干扰本品可使丙氨酸 氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清胆红素浓度及乳酸脱氢酶浓度的测定
值增高；血转、镁、钾、钠浓度的测定值可能降低。6.氨基糖苷类与p内酰胺类(头孢菌
素类与青霉素类)混合时可导致相互失活。本品与上述抗生素联合应用时必须分瓶滴注。
阿米卡星亦不宜与其他药物同瓶滴注。7.应给予患者足够的水份，以减少肾小管损害。8.配 制静脉用药时，每500mg加入氯化钠注射液或5%葡萄糖注射液或其他灭菌稀释液100 200ml。成人应在30 60分钟内缓慢滴注，婴儿患者稀释的液量相应减少。
孕妇及哺乳期妇女用药硫酸阿米卡星属孕妇用药的D类，即对人类有一定危害，但 用药后可能利大于弊。本品可穿过胎盘到达胎儿组织，可能引起胎儿听力损害。妊娠妇女 使用本品前必须充分权衡利弊。哺乳期妇女用药时宜暂停哺乳。
儿童用药氨基糖苷类在儿科中应慎用，尤其早产儿及新生儿的肾脏组织尚未发育完 全，使本类药物的半衰期延长，药物易在体内蓄积产生毒性反应。
老年患者用药老年患者的肾功能有一定程度的生理性减退，即使肾功能的测定值在
正常范围内，仍应采用较小治疗量。老年患者应用本品后较易产生各种毒性反应，应尽可 能在疗程中监测血药浓度。
药物相互作用1.硫酸阿米卡星与其他氨基糖苷类合用或先后连续局部或全身应用， 可增加耳毒性、肾毒性及神经肌肉阻滞作用。2.硫酸阿米卡星与神经肌肉阻断药合用可 加重神经肌肉阻滞作用，导致肌肉软弱、呼吸抑制等症状。本品与巻曲霉素、顺铂、依他 尼酸、呋塞米或万古霉素(或去甲万古霉素)等合用，或先后连续局部或全身应用，可能增
加耳毒性与肾毒性。3.硫酸阿米卡星与头孢噻吩或头孢唑林局部或全身合用可能增加肾 毒性。本品不宜与两性霉素B、头孢噻吩、磺胺嘧啶和四环素等注射剂配伍，不在同一瓶 中滴注。4.硫酸阿米卡星与多粘菌素类注射剂合用或先后连续局部或全身应用，可增加 肾毒性和神经肌肉阻滞作用。5.其他肾毒性药物及耳毒性药物均不宜与硫酸阿米卡星合 用或先后应用，以免加重肾毒性或耳毒性。
药物过量由于缺少特异性拮抗剂，本品过量或引起毒性反应时，主要用对症疗法和 支持疗法，同时补充大量水分。血液透析或腹膜透析有助于从血中清除阿米卡星。贮藏 密闭，在凉暗处保存。
发明内容
5本发明的目的是提供一种硫酸阿米卡星注射液的新用途，特别是提供一种硫酸阿米卡 星注射液用于防治鸡的大肠杆菌和沙门氏菌病的新用途，硫酸阿米卡星注射液属复方广谱 抗生素类药物，对多种革兰氏阴性杆菌，如大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、变形杆菌等 有中度抑制作用，A群链球菌、肺炎球菌、表皮葡萄球菌和某些支原体(如鸡毒支原体、 火鸡支原体、滑液支原体、猪鼻支原体、猪滑膜支原体等)常敏感。草绿色链球菌和金黄 色葡萄球菌多不敏感。林可霉素主要抗革兰氏阳性菌，对支原体的作用与红霉素相似而比 其他大环内酯类稍弱。对葡萄球菌、溶血性链球菌和肺炎球菌作用较强，但不及青霉素类 和头孢菌素类，对厌氧菌如破伤风梭菌、产气荚膜芽孢杆菌有抑制作用；对猪痢疾密螺旋 体和弓形体也有一定作用。对需氧革兰氏阴性菌耐药。二者合用，具有协同作用，同时也 显著增加对支原体的抗菌活性。
本发明的一种硫酸阿米卡星注射液的新用途，通过硫酸阿米卡星注射液对人工诱发鸡 大肠杆菌和沙门氏菌的疗效试验，以人工诱发鸡大肠杆菌和雏鸡沙门氏菌病为病理模型， 进行了硫酸阿米卡星注射液肌内注射的药效学观察，为在临床上有效安全使用提供了科学 依据，揭示了硫酸阿米卡星可有效防治鸡大肠杆菌和沙门氏菌病。
本发明的结果显示硫酸阿米卡星注射液对鸡源大肠杆菌和沙门氏菌，均产生明显的 抑菌作用，鸡源大肠杆菌和沙门氏菌对硫酸阿米卡星注射液均高敏；硫酸阿米卡星注射液 能有效地控制鸡大肠杆菌感染，减轻临床症状，减少发病和死亡率，同时能遏制存活鸡的 体重下降；硫酸阿米卡星注射液对鸡大肠杆菌和沙门氏菌具有抑杀作用，临床上能有效地 防治大肠杆菌和沙门氏菌的感染，降低发病率和病鸡的死亡率。
具体实施例方式
下面结合具体实施方式
，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明 而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术 人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限 定的范围。
本发明的一种硫酸阿米卡星注射液的新用途，是一种硫酸阿米卡星注射液用于防治鸡 的大肠杆菌和沙门氏菌病的新用途，硫酸阿米卡星属于氨基糖苷类药物，具有抗菌谱广、 抗菌效果强等特点，可有效防治鸡大肠杆菌和沙门氏菌病。下列试验通过人工诱发鸡大肠 杆菌和雏鸡沙门氏菌病为病理模型，进行了硫酸阿米卡星注射液肌内注射的药效学观察， 为在临床上有效安全使用提供了科学依据。
61材料与方法 11试验材料
1. 1. 1试验药物硫酸阿米卡星注射液(3%)，批号20080901，山西恒丰强动物药业有
限公司生产。
1. 1. 2试验动物湟中县多巴种猪种鸡场1日龄的健康海兰雏鸡480羽(无大肠杆菌病和沙
门氏菌病母源抗体)。
1 1. 3菌种中国兽药监察所培植的鸡源大肠杆菌O， (E， ColiCh)和鸡源沙门氏菌C79—1， C79— l阳性血清由青海省牧科院制作。 12试验方法
1. 2. 1试验动物的选择试验动物选用体重相近、体质健壮、精神状况良好、健康无病 的1日龄海兰雏鸡480羽作为试验动物。
1. 2. 2试验动物分组与攻毒接种量将选择好的480羽1日龄海兰雏鸡，按随机分组设计， 分为两个试验。第一个试验鸡大肠杆菌攻毒治疗试验。将240羽试验鸡随机分为2个大组， 其中第一大组(4个小组)用0.05 ml(2.4亿个活菌)鸡大肠杆菌02攻毒后进行治疗试验；第二大 组(4个小组)用0.1 ml(2.5亿个活菌)鸡大肠杆菌02攻毒后进行治疗试验。第二个试验鸡沙 门氏菌C79—l攻毒治疗试验。将240羽试验鸡随机分为2个大组，其中第1个大组(4个小组) 用0.05ml(2. 4亿个活菌)沙门氏菌C79—1攻毒后进行治疗试验；第二大组(4个小组)用
0. 1ml(2.5亿个活菌)沙门氏菌C79—l攻毒后进行治疗试验。
1. 2. 3体外抑菌试验通过测量抑菌圈的大小初步了解试验菌株对受试药的敏感性(含药 量30吗/点)。
1. 2. 4治疗用药量及用药方法把细菌攻毒各大组平均分成4个小组，每小组30羽鸡， 其中3个组为不同剂量水平治疗组(分别为4mg/kgw、 5mg/kgw和7mg/kgw). l个组不治疗， 作为对照组。各治疗组在攻毒后5 7h，即感染后初显临床症状时，立即分别给予药物饮 水，2次/d，连用5d。
1. 2. 5疗效判定标准用药后病鸡腹泻症状减轻，眼结膜潮红消失。采取鸡心血在试验 室进行细菌培养、显微镜检查，大肠杆菌呈阴性，判定为有效或治愈，反之判定为无效。 1. 2. 6试验时间试验时间为15d，其中预试期5d，正式试验10d。 1. 3观察记录等项目.
1. 3. 1接种后仔细观察和记录各组鸡的发病情况、临床变化及死亡情况。 1. 3. 2对死亡鸡及时进行剖检，记录病理变化，连续观察10d。1. 3. 3对死亡鸡进行剖检，取心血、肝进行细菌分离培养，并作血清学鉴定或用阳性血 清与培养菌进行玻片凝集反应，确定鸡死亡是否由接种感染菌所致。
1. 3. 4各组鸡在感染前和试验结束时分别称重l次，观察 增重效果。
2结果与分析
2. 1体外抑茵试验结果
硫酸阿米卡星注射液对鸡源大肠杆菌02和沙门氏菌C79—1株，均产生明显的抑菌作用，其 抑菌圈的直径分别为23mm和29 mm，根据细菌对药物敏感度的判定标准(硫酸阿米卡星的 抑菌直径》17为高敏)，结果表明鸡源大肠杆菌02，和沙门氏菌C79—1对硫酸阿米卡星注 射液均高敏。
2. 2对鸡大肠杆菌株02，感染的治疗试验人工病模试验各治疗组和细菌感染组雏鸡在 攻毒后5 7h，部分雏鸡出现不同程度的大肠杆菌临床症状，主要表现为精神不振、轻度 腹泻、眼结膜潮红、食欲减退，严重者食欲废绝等。三个用药组治疗后的第2d临床病症明 显减轻，到5d临床病症基本消失，但仍有个别病重的鸡，也有死亡。而对照组从攻毒开始 至第8d，临床症状非常严重并陆续死亡，到第9d存活鸡临床病症基本消失。各组治疗效 果见表l。
表l治疗期间各试验组的死亡、相对增重率(单位头、％ 、 kg)
组别动物数量死亡数死亡率始重末重总增重
0.05M14mg/kgw3026.61.572.801.23
攻毒组5mg/kgw30001.592.971.38
7mg/kgw30036.71.583.001.42
不治疗对照组30111.571.760.19
0.1 Ml4mg/kgw3026.61.562.791.23
攻毒组5mg/kgw30001.582.961.38
7mg/kgw30001.572.991.42
不治疗对照组3015501.561.750.19
从表l可以看出，治疗组从治疗开始到第10d，无论是0.05ml攻毒组，还是0.1ml攻毒 组，其4mg/kgw治疗组的鸡死亡率平均为6.6X ; 50mg/kgw和7mg/kg治疗组的平均死 亡率为0，而对照组的死亡率平均为43. 3%。由此可见，鸡的死亡率试验组之间虽有差异，但差异不显著(PX). 05)，而与对照组相比较，则差异极显著(PO. Ol)。说明硫酸阿米卡 星注射液对鸡大肠杆菌02株感染有良好的治疗效果。
死亡鸡剖检变化及主要特征解剖病死鸡可见气管粘液增多，肝脏大多有散在的出 血点，较瘦的鸡表现为纤维索性肝周炎、心包炎、肠黏膜肥厚，肠腔内有多量黄色泡沫， 肾脏稍肿。把死亡鸡的心血和肝接种于鉴别培养基麦康凯琼脂平板上进行常规培养，95% 的死亡鸡分离出大肠杆菌，经实验室血清学鉴定，全部是大肠杆菌02株，说明雏鸡死亡的 原因是由该菌株引起的。
上述试验结果表明，硫酸阿米卡星注射液能有效地控制鸡大肠杆菌感染，减轻临床症 状，减少发病和死亡率，同时能遏制存活鸡的体重下降。在药物的用量上，5mg/kgw和 7mg / kgw优于4mg / kgw硫酸阿米卡星注射液。
2. 3对鸡沙门氏茵C79—1感染的治疗效果人工病模试验各治疗组和细菌感染组雏鸡在 接种了沙门氏菌C79—1后6 7 h，部分鸡出现不同程度的发病症状，主要表现为精神不 振、闭目縮颈、畏寒、食欲减退或废绝。治疗的当天发病率已达50%左右，治疗组经过 治疗，到第5 d临床病症基本消失，期间个别组病重者死亡；而对照组从感染的第2d到 第4d临床症状明显，并发生大批死亡，从第5d死亡开始下降，至7 10d临床病症才基 本消失。各组的治疗效果见表2。
表2治疗期间各试验组的死亡、相对增重率(单位头、％ 、 kg)
组别动物数量死亡数死亡率始重末重总增重
0.05M14mg/kgw3013.31.592.901.31
攻毒组5mg/kgw30001.622.931.31
7mg/kgw30001.583.001.42
不治疗对照组301653.31.622.220.6
O.画4mg/kgw3013.31.582.911.33
攻毒组5mg/kgw30001.612.921.31
7mg/kgw30001.592.971.38
不治疗对照组3021701.632.250.62
从表2中可以看出，治疗组从治疗开始到第10d，无论是O. 05ml攻毒组，还是O. lml 攻毒组，其4mg / kgw治疗组的鸡死亡率平均为3.3X; 5mg / kgw和7mg / kgw治疗组的平 均死亡率均为O。试验组之间虽有差异，但差异不显著(PX). 05)，而与对照组的66. 7%的死亡率相比，则差异极显著(PO. 01)。鸡的增重结果也呈现上述规律，说明硫酸阿米卡 星注射液对鸡沙门氏菌C79—1感染有良好的治疗效果。
死亡鸡剖检变化及主要特征通过对病死鸡的病理解剖，肉眼观察可见嗉嚷空虚，肝 脏肿大，呈土黄色并有砖红色条纹，脾脏肿大、充血。把死t鸡的心血和肝接种于鉴别培
养基S. S琼脂平板上进行常规培养，90%以上的死亡鸡分离出沙门氏菌，经实验室用抗血 清进行玻片凝集反应为阳性，说明雏鸡死亡的原因是由沙门氏菌C79—l株引起的。上述试 验结果表明，硫酸阿米卡星注射液能有效地控制鸡沙门氏菌感染、减轻临床症状、减少沙 门氏菌的感染率和死亡率，在治疗期间一定程度上能遏制存活鸡的体重下降。在药物的用 量上，5mg / kgw和7mg / kgw无论在控制死亡和遏制体重下降方面都优于4mg / kgw硫酸 阿米卡星注射液。 3小结
3. 1硫酸阿米卡星注射液对鸡大肠杆菌和沙门氏菌具有抑杀作用，临床上能有效地防治 大肠杆菌和沙门氏菌的感染，降低发病率和病鸡的死亡率。
3. 2本试验采用4mg / kgw、 5mg/kgw和7mg/kgw，即低、中、高三个治疗浓度，研究 了其药效及临床应用的治疗剂量，根据感染后雏鸡的发病率、死亡率、临床病症及相对增 重率进行评价，结果表明，三个临床应用剂量都能有效地减少鸡大肠杆菌病和沙门氏菌病 的发病率、死亡率，并能遏制体重的下降，但相比较之下，5mg/kgw和7mg/kgw的治疗 效果更好。
10
权利要求
1.一种硫酸阿米卡星注射液的新用途，是一种硫酸阿米卡星注射液用于防治鸡的大肠杆菌和沙门氏菌病的新用途。
全文摘要
本发明涉及一种硫酸阿米卡星注射液的新用途，特别是涉及一种硫酸阿米卡星注射液用于防治鸡的大肠杆菌和沙门氏菌病的新用途。本发明的一种硫酸阿米卡星注射液的新用途，通过硫酸阿米卡星注射液对人工诱发鸡大肠杆菌和沙门氏菌的疗效试验，以人工诱发鸡大肠杆菌和雏鸡沙门氏菌病为病理模型，进行了硫酸阿米卡星注射液肌内注射的药效学观察，为在临床上有效安全使用提供了科学依据，揭示了硫酸阿米卡星可有效防治鸡大肠杆菌和沙门氏菌病。
文档编号A61K31/7028GK101584656SQ20091005436
公开日2009年11月25日 申请日期2009年7月3日 优先权日2009年7月3日
发明者洪 廖, 敏 李, 郭春艳, 高建辉, 谭 龙 申请人:上海恒丰强动物药业有限公司