专利名称：：紫云英子提取物的用途及制备方法
技术领域：
：本发明涉及天然药物技术，特别是涉及一种紫云英子提取物的用途及制备方法。
背景技术：
：肾为五脏之要器，先天之本，其作用是排出人体内的代谢产物，将代谢产物中的有用成分重新吸收回体内，再把产生的废物——尿液由输尿管、膀胱负责排出。同时，肾脏还是体内很重要的内分泌器官，负责制造促进造血的促红素，活性维生素D3，还负责体内胰岛素的分解。一旦肾功能受到损害，废物在体内蓄积，则会对身体产生很大的危害。目前我国肾脏病人已达9000万人，其中，尿毒症患者每年正以5%-10%的速度增长。据资料显示，从2006年以来，慢性肾病已经成为继心脑血管疾病、肿瘤、糖尿病之后的第四大疾病杀手，从全世界的总体情况来看，慢性肾脏病的防治正面临严峻的挑战。而在慢性肾脏疾病中，肾病综合征占了很大的比重[1]。肾病综合征(n印hroticsyndrome,NS)是肾内科的常见症，多发症！很多肾脏疾病临床上均表现为肾病综合征[2]，它不是一独立性疾病，而是由多种原因，包括慢性肾炎引起的肾小球疾病中的一组临床症候群。典型表现为大量蛋白尿、低白蛋白血症、水肿、高脂血症。由于低蛋白血症、高脂血症和水肿都是大量蛋白尿的后果，因此，诊断的标准应以大量蛋白尿为主[3]。而大量蛋白尿是导致肾功能恶化的重要的独立的危险因素，无论是原发性还是继发性肾病综合征，如果大量蛋白尿得不到及时有效的控制，将导致肾组织、特别是肾间质的进行性纤维化，肾功能进行性减退，而逐渐发展到终末期肾功能衰竭[1]。因此，其治疗关键在于减少或消除蛋白尿[2]。在其治疗措施方面，肾上腺皮质激素是治疗肾病综合征的首选药物，如泼尼松、泼尼松龙、地塞米松等，但长期服用该类药物副作用很多，有时相当严重[3]。同时，部分患者存在激素依赖、激素抵抗、激素不耐受及反复发作等现象["。这一部分患者可试用细胞毒性药物，如环磷酰胺和苯丁酸氮介，但此类药物同样毒副作用很大且对用药后缓解又重新复发者多不主张进行第二次用药，以免中毒[3]。此外，还可选用细胞免疫抑制剂——环孢霉素A，但此药亦有严重的毒副作用，最严重的为肝、肾毒性，其肾毒性发生率在20%-40%，故不宜长期用此药治疗肾病综合征，更不宜轻易将此药作为首选药物〔因上述各类药物存在的局限性及严重的毒副作用，结合中医中药治疗肾病综合征已逐渐被人们所应用，但到目前，仍然没有一种特异性的广泛应用于肾病综合征及降低尿蛋白的低毒高效药物。紫云英(AstragalussinicusLinn.)为豆科黄耆属植物，分布于长江流域各省区，长于山坡林下，沟边及草地。药用部位为全草及种子，具有清热解毒、明目活血之功能w。紫云英子肾形或菱形，据文献报道含有抗氧化作用的黄酮及其苷类物质[5]，三萜苷类物质[6]，天门冬氨酸及多糖等物质。但迄今为止，未见其现代药理研究报告D鉴于目前肾病综合征临床用药的上述不利现状，本发明利用阿霉素肾病模型大鼠对多种天然植物提取物进行了药理实验研究，观察这些提取物对尿蛋白含量的影响，意外发现紫云英子提取物具有显著降低尿蛋白，改善肾病综合症的药理作用，效果与泼尼松相当，且无毒副作用。本
发明内容国内外未见相关报道。袁发焕。难治性肾病综合征[J]。重庆医学，2008，37(8):786-788。[2]金萍。肾病综合症治疗药物的研究进展[J]。国外医学泌尿系统分册，2001，21(4):145-147。[3]肾病综合征。肾病医学网，http:〃www.shenbing.org。[4]《中国植物志》，中国科学院中国植物志编辑委员会主编，科学出版社出版，42(1):199。Yeom，SH;Kim，MK;Kim，HJ;Shim，JG;Lee，JH;Lee,MW.PhenoliccompoundsfromseedsofAstragalussinicusandtheirantioxidativeactivities[J].SaengyakHakhoechi，2003，34(4):344-351.Cui,B;Inoue，J;Takeshita,T;Kinjo，J;Nohara，T;Takeshita，T;Kinjo，J;Nohara，T.TriterpeneglycosidesfromtheseedsofAstragalussinicusL[J].Chemical&Pharmaceuticalbulletin'1992，40(12):3330-3.
发明内容本发明的目的在于提供一种降低尿蛋白，治疗肾病综合征的天然药物提取物及其制备方法。本发明采用的技术方案如下一、一种紫云英子提取物的用途该提取物以三萜、黄酮及它们的苷类物质为有效成分，用于降低尿蛋白，治疗肾病综合征。二、一种紫云英子提取物的制备方法，该方法的步骤如下1)紫云英子炒焦，粉碎，过10目筛，加6倍量60。/。乙醇浸泡2h，回流提取2次，每次2h，过滤，合并滤液，减压回收乙醇得提取浓縮液；2)将该提取浓縮液以大孔吸附树脂柱吸附，依次以6倍量水及7倍量30%乙醇洗柱后，以9倍量70%乙醇洗脱，洗脱液减压回收溶剂，在6(TC下真空干燥，得干浸膏，将干浸膏粉碎成细粉，就制备成了本发明的提取物。所述步骤2)中所用大孔吸附树脂包括非极性、弱极性和中等极性大孔吸附树脂。三、另一种紫云英子提取物的制备方法，该方法的步骤如下1)紫云英子炒焦，粉碎，过10目筛，加6倍量60。/。乙醇浸泡2h，回流提取2次，每次2h，过滤，合并滤液，减压回收乙醇得提取浓縮液；2)将该提取浓縮液，依次以石油醚、乙酸乙酯等体积萃取，各萃取3次后，以等体积正丁醇萃取3次，合并正丁醇萃取液，减压回收溶剂，在6(TC下真空干燥，于干燥箱巾放置活性碳吸附残留正丁醇，得干浸膏，将干浸膏粉碎成细粉，就制备成了本发明的提取物。正丁醇萃取物及大孔吸附树脂70%乙醇洗脱物进行显色反应(1)盐酸-镁粉反应阳性，表明含有黄酮类化合物。(2)Molish反应阳性，表明含有苷类化合物。(3)L-B反应阳性，表明含有三萜类化合物。上述显色反应结合文献可知该紫云英子提取物以黄酮、三葙及它们的苷类物质为有效成分。本发明具有的有益效果是1.紫云英子提取物具有显著降低尿蛋白，治疗肾病综合征的作用；2.紫云英子提取物无明显毒副作用。目前临床上治疗肾病综合征、降低尿蛋多用激素类药物和免疫抑制药物，毒副作用大，而紫云英子提取物无明显毒副作用，可长期服用。3.工艺合理简便，能最大限度保留有效成分，减少给药剂量。具体实施例方式下面是本发明的实施例，但本发明并不局限于此。实施例l:紫云英子2.5kg，炒焦，粉碎，过10目筛，加6倍量60。/。乙醇浸泡2h，回5流提取2次，每次2h，用2层医用纱布过滤，合并滤液，减压(-0.08-0.10MPa)回收乙醇后依次以等体积石油醚、乙酸乙酯及正丁醇分别萃取3次，减压(-0.08-0.10MPa)回收溶剂，在6(TC下真空干燥，于干燥箱中放置活性碳吸附残留正丁醇，得干浸膏，将干浸膏粉碎成细粉保存。实施例2紫云英子28kg,炒焦，粉碎，过10目筛，加6倍量60%乙醇浸泡2h，回流提取2次，每次2h，用2层医用纱布过滤，合并滤液，减压(-0.08-0.10MPa)回收乙醇后以DIOI大孔吸附树脂吸附，以6倍量水及7倍量30%乙醇洗柱后，以9倍量70%乙醇洗脱，最后以95%乙醇洗柱，洗脱液减压(-0.08-0.10MPa)回收溶剂，在6(TC下真空干燥，得干浸膏，将干浸膏粉碎成细粉保存。本发明的相关研究结果如下一、实施例1中各萃取组分对阿霉素肾病模型大鼠的影响1、实验动物健康SD大鼠，雄性，体重350士20g，购自浙江省实验动物中心。合格证号SCXK(浙2003-0001)。2、实验受试样品及药品1)紫云英子各萃取组分实施例1中各萃取组分以水为介质超声混悬灌胃。2)泼尼松片浙江仙琚制药股份有限公司生产，批号0704148，规格5mg。3)盐酸阿霉素明治医药有限公司生产，批号070101，规格10mg。3、动物分组及给药剂量将大鼠随机分为7组，每组10只，分别为空白对照组、模型组、阳性对照组(泼尼松)和紫云英子各萃取组分组；泼尼松给药剂量为15mg/kg，紫云英子各组分组为相当于10g生药材/kg，模型组给予等体积的蒸馏水为10ml/kg。4、实验方法空白对照组大鼠尾静脉注射生理盐水，其他六组尾静脉注射阿霉素5mg/kg造模，于造模当天开始灌胃给药，每天一次，连续28天，空白对照组及模型组灌胃给予等量蒸馏水。给药第28d称各鼠重量，并将大鼠放置于代谢笼中收集24h尿液测定尿蛋白含量。5、尿蛋白含量测定方法考马斯亮蓝法1)牛血清白蛋白标准溶液的配制准确称取100mg牛血清白蛋白，溶于100mL蒸馏水中，即为l000wg/mL的原液。2)蛋白试剂考马斯亮蓝G-250的配制称取100mg考马斯亮蓝G-250，溶于50niL90X乙醇中，加入85%(W/V)的磷酸100mL，最后用蒸馏水定容到lOOOmL。3)样品测定待测尿液于4000r/min离心20分钟，取上清液lml置具塞试管中，加入5ml蛋白试剂，充分混合，放置10分钟，用lcm光径比色杯在595nm下比色记录，通过标准曲线査得待测样品中蛋白质的含量。6、统计学处理实验数据用均值(7)表示，全部实验数据采用SPSS12.0软件进行处理。7、实验结果对各组大鼠尿蛋白含量进行比较可以发现正丁醇萃取物具有与泼尼松相似的降低阿霉素肾病模型大鼠尿蛋白的作用，与模型组相比均具有统计学意义。而其余各组分对大鼠尿蛋白含量均未见任何影响。具体实验结果见表1。表1紫云英子各萃取组份对阿霉素肾病模型大鼠尿蛋白量的影响(『10)组别正常模型泼尼松石油醚乙酸乙酯止丁醇水层尿蛋白量均值10.98498.65338.50469.42448.56334.94456.79(mg)SD2.1973.6345.2662.8471.0150.1355.27P0.000.350.140.000.17注P是与模型组相比的概率二、实施例2中各组分对阿霉素肾病模型大鼠的影响1、实验动物健康SD大鼠，雄性，体重350士20g，购自浙江省实验动物中心。合格证号SCXK(浙2003-0001)。2、实验受试样品及药品1)紫云英子各组分:实施例2中大孔吸附树脂柱水洗柱部分记为ASA,30%洗柱部分记为ASB，70%洗脱部分记为ASC，95%洗柱部分记为ASD，各部分以水超声混悬灌胃。2)泼尼松片浙江仙琚制药股份有限公司生产，批号0704148，规格5mg。3)盐酸阿霉素明治医药有限公司生产，批号070101，规格10mg。3、动物分组及给药剂量将大鼠随机分为7组，每组10只，分别为空白对照组、模型组、阳性对照组(泼尼松)和紫云英子各组分组；泼尼松给药剂量为15mg/kg，紫云英子各组分组为相当于10g生药材/kg，模型组给予等体积的蒸馏水为10ml/kg。4、实验方法空白对照组大鼠尾静脉注射生理盐水，其他六组尾静脉注射阿霉素5mg/kg造模，于造模当天开始灌胃给药，每天一次，连续28天，空白对照组及模型组灌胃给予等量蒸馏水。给药第28d称各鼠重量，并将大鼠放置于代谢笼中收集24h尿液测定尿蛋白含量(考马斯亮蓝法)。5、统计学处理实验数据用均值(X)表示，全部实验数据采用SPSS12.0软件进行处理。6、实验结果对各组大鼠尿蛋白含量进行比较可以发现ASC即大孔吸附树脂70%洗脱物具有与泼尼松相似的降低阿霉素肾病模型大鼠尿蛋白的作用，与模型组相比均具有统计学意义。而其余各组分对大鼠尿蛋白含量均未见任何影响。具体实验结果见表2。表2紫云英子各组份对阿霉素肾病模型大鼠尿蛋白量的影响(『10)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注P是与模型组相比的概率三、ASC对阿霉素肾病模型大鼠的影响1、实验动物健康SD大鼠，雄性，体重350士20g，购自浙江省实验动物中心。合格证号SCXK(浙2003-0001)。2、实验药品1)紫云英子提取物ASC。2)泼尼松片浙江仙琚制药股份有限公司生产，批号0704148，规格5mg。3)盐酸阿霉素明治医药有限公司生产，批号070101，规格10mg。3、动物分组及给药剂量将大鼠随机分为4组，每组10只，分别为空白对照组、模型组、阳性对照组(泼尼松)和ASC组；泼尼松给药剂量为15mg/kg，ASC组为相当于10g生药材/kg，模型组给予等体积的蒸馏水为10ml/kg。4、实验方法空白对照组大鼠尾静脉注射生理盐水，其他三组尾静脉注射阿霉素5mg/kg造模，于造模当天开始灌胃给药，每天一次，连续28天，空白对照组及模型组灌胃给予等量蒸馏水。给药第28d称各鼠重量，并将大鼠放置于代谢笼中收集24h尿液测定尿蛋白含量(考马斯亮蓝法)。末次给药后24h眶后静脉丛取血，于自动生化分析仪测定血中总蛋白、肌酐、尿素氮、总胆固醇及甘油三酯，断颈处死后取肾脏做组织学检查。5、肾脏组织学检査方法对肾小管间质损伤程度进行半定量分析(参照JournalAmericanSocietyofNephrology.1997，8(2):199-207)的方法对各实验组的每份标本在低倍镜下单盲观察5个肾小球、肾小管间质视野，即每张标本低倍镜下观察左上、右上、左下、右下、中间5个视野内肾小管、肾间质，根据肾小管上皮细胞空泡变性、肾小管扩张、间质纤维化、间质炎细胞浸润等四项指标对肾小管、肾间质病变进行评分，每一项指标根据病变程度分成轻、中、重三度，分别记l、2、3分计算其均值。6、统计学处理实验数据用均值表示，全部实验数据采用SPSS12.0软件进行处理。7、实验结果具体实验结果见表3-5。表3ASC对阿霉素肾病模型大鼠尿蛋白量的影响(r^10)组别正常模型泼尼松ASC均值10.75504.77352.04340.18尿蛋白量(mg)SD2.1856.1355.5253.65P0.000.00注-p是与模型组相比的概率比较上表中的数据可以进一步确定紫云英子提取物具有与泼尼松相似的降低阿霉素肾病模型大鼠尿蛋白的作用，与模型组相比均具有统计学意义。表4血生化数据结果(n二10)组别总蛋白尿素mmoI/L肌酐Crl_imoI/L总胆固醇mmol/L甘油三酯mmol/L正常均值64.185.5155.971.771.11SD4.210.756.670.260.18均值59.3813.19105.378.925.29模型SD3.464.6521.701.592.199均值65.18承11.9387.87承8.034.75SD5.852.249.262.602.28均值64.16求11.6386.14*7.813.99SD4.893.578.941.321.99注*与模型组比较，P〈0.05比较上表中的数据可以发现紫云英子提取物可以使阿霉素肾病模型大鼠的血中总蛋白含量基本维持正常，使肌酐Cr及甘油三酯含量得到一定程度的降低。表5病理组织学检査(『10)组别细胞水肿肾小管扩张间质纤维化炎症细胞模型均值2.321.90.641.75SD0.570.520.250.72均值1.56氺1.720.34氺1.48泼尼松SD0,560.920.250.51均值1.53*1.360.36承1.61ASCSD0.460.970.240.85注*与模型组比较，p<0.05比较上表中的数据可以发现紫云英子提取物可以使阿霉素肾病模型大鼠的细胞水肿、肾小管扩张及间质纤维化等病理现象得到明显的改善。四、ASC对切除左肾后阿霉素肾病模型大鼠的影响1、实验动物健康SD大鼠，雄性，体重350士20g，购自浙江省实验动物中心。合格证号SCXK(浙2003-0001)。2、实验受试品及药品1)紫云英子提取物ASC。2)泼尼松片浙江仙琚制药股份有限公司生产，批号0704148，规格5mg。3)盐酸阿霉素明治医药有限公司生产，批号070101，规格10mg。3、动物分组及给药剂量将大鼠随机分为4组，每组10只，分别为空白对照组、模型组、阳性对照组(泼尼松)和ASC组；泼尼松给药剂量为15mg/kg，ASC组为相当于10g生药材/kg，模型组给予等体积的蒸馏水为10ml/kg。4、实验方法腹腔注射戊巴比妥钠麻醉后，在无菌条件下，先将30只大鼠行左肾切除术，术后随机等分成3组，l周后按5mg/kg从其尾静脉注射盐酸阿霉素；另对10只正常对照组大鼠先行假手术，l周后尾静脉注射生理盐水。于造模当天开始灌胃给药，每天一次，连续35天，空白对照组及模型组灌胃给予等量蒸馏水。给药第35d称各鼠重量，并将大鼠放置于代谢笼中收集24h尿液测定尿蛋白含量(考马斯亮蓝法)。末次给药后24h眶后静脉丛取血于自动生化分析仪测定血中总蛋白、肌酐、尿素氮、总胆固醇、甘油三酯，断颈处死后取肾脏做组织学检查(检査方法同上)。5、统计学处理实验数据用均值(I)表示，全部实验数据采用SPSS12.0软件进行处理。6、实验结果具体实验结果见表6-8。表6ASC对切除左肾后阿霉素肾病模型大鼠尿蛋白量的影响(『10)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注P是与模型组相比的概率比较上表数据可知紫云英子提取物对切除左肾后阿霉素肾病模型大鼠具有与泼尼松相当的降尿蛋白作用，且具有统计学意义。表7血生化数据结果(n二10)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>8.781.411.85注*与模型组比较，p〈0.05比较上表数据可见紫云英子提取物可以使切除左肾后阿霉素肾病模型大<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>鼠的血中总蛋白含量基本维持正常，使肌酐Cr及甘油三酯含量得到一定程度的降低。表7病理组织学检査(n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>注*与模型组比较，P<0.05比较上表中的数据可以发现紫云英子提取物可以使切除左肾后阿霉素肾病模型大鼠的细胞水肿、肾小管扩张及间质纤维化等病理现象得到明显的改善。五、提取物对小鼠急性毒性试验1、实验动物健康ICR小鼠，雌雄各半，体重20士2g，购自浙江省实验动物中心。合格证号SCXK(浙2003-0001)。2、实验受试品及药品紫云英子提取物正丁醇萃取物、ASC。3、实验方法l)预试验在进行正式实验之前，首先做预试验，以便为正式试验提供依据。将18只小鼠随机分为三组，正丁醇萃取物组、ASC组和空白对照组。灌胃前禁食不禁水l6h。正丁醇萃取物组以可供灌胃的最大浓度(0.15g/mL)、小鼠灌胃可承受的最大体积(每IOg体重0.4mL)l次灌给正丁醇萃取物；ASC组以可供灌胃的最大浓度(0.15g/mL)、小鼠灌胃可承受的最大体积(每IOg体重0.4mL)1次灌给ASC;给药后常规饲养,观察3d。空白组:灌胃等量蒸馏水,方法同给药组。结果小鼠全部存活，因此，无法测出该复方制剂的LDs。，提示该提取物毒性很低，是较安全的，故测定本药对小鼠的最大给药量。2)最大给药量的测定将60只小鼠随机分为空白对照组20只、正丁醇萃取物组20只、ASC组20只，每组雌雄各半。试验前禁食16h，正常饮水。正丁醇萃取物组每只小鼠按0.4mL/10g的剂量灌胃0.15gZmL浓度的正丁醇萃取物混悬液；ASC组每只小鼠按0.4mL/10g的剂量灌胃0.15g/mL浓度的ASC混悬液；空白对照组灌胃等体积的蒸馏水，每天给药2次，间隔6h。给药后，观察7d，每天称取其体重并观察动物反应。给药后常规饲养，自然光照12h，室温(2024)。C，湿度60%。试验第8天称取体重后，处死小鼠，解剖观察其心、肝、脾、肺、肾等主要器官的组织变化。4、实验结果1)一般情况灌胃给药后两组小鼠的外观体征未见异常，活动自如，进食、饮水、粪便均正常，皮毛光洁，口、鼻、眼及肛门清洁无分泌物。2)体重变化情况灌胃给药7天，体重增加，正丁醇萃取物组给药前体重为(20.37士0.51)g，ASC给药前体重为(20.39士0.54)g，空白对照组体重为(20.35±0.62)g，第7天体重，正丁醇萃取物组为(24.73±1.31)g，ASC组为(24.64±1.28)g，空白对照组为(24.36±1.19)g。正丁醇萃取物组和ASC组分别与空白对照组体重进行比较，P〉0.05，差异均无统计学意义。主要脏器解剖肉眼观察进行实验的40只小鼠全部存活，无明显中毒反应。解剖所见胸腔、腹腔未见异常液体，肠管未见胀气，心、肝、脾、肺、肾、脑等重要脏器未见颜色、形态异常，没有出血点或其他病理改变，胃黏膜颜色红润，无出血点或溃疡，尸检无异常。小鼠最大给药量为12g/kg体重。正丁醇萃取物和ASC给ICR品系小鼠灌胃未测出LD5。，其最大耐受量均为12g/kg体重，约为临床患者拟用剂量的240倍，说明该提取物无明显毒性反应，使用安全可靠。权利要求1、一种紫云英子提取物的用途，其特征在于该提取物以三萜、黄酮及它们的苷类物质为有效成分，用于降低尿蛋白，治疗肾病综合征。2、一种紫云英子提取物的制备方法，其特征在于该方法的步骤如下1)紫云英子炒焦，粉碎，过10目筛，加6倍量60%乙醇浸泡2h，回流提取2次，每次2h，过滤，合并滤液，减压回收乙醇得提取浓縮液；2)将该提取浓縮液以大孔吸附树脂柱吸附，依次以6倍量水及7倍量30%乙醇洗柱后，以9倍量70%乙醇洗脱，洗脱液减压回收溶剂，在6(TC下真空干燥，得干浸膏，将干浸膏粉碎成细粉，就制备成了本发明的提取物。3、根据权利要求2所述的一种紫云英子改善肾病综合征、降低尿蛋白提取物的制备方法，其特征在于所述步骤2)中所用大孔吸附树脂包括非极性、弱极性和中等极性大孔吸附树脂。4、一种紫云英子改善肾病综合征、降低尿蛋白提取物的制备方法，其特征在于该方法的步骤如下1)紫云英子炒焦，粉碎，过10目筛，加6倍量60。/。乙醇浸泡2h，回流提取2次，每次2h，过滤，合并滤液，减压回收乙醇得提取浓縮液；2)将该提取浓縮液，依次以石油醚、乙酸乙酯等体积萃取，各萃取3次后，以等体积正丁醇萃取3次，合并正丁醇萃取液，减压回收溶剂，在6(TC下真空干燥，于干燥箱中放置活性碳吸附残留正丁醇，得干浸膏，将干浸膏粉碎成细粉，就制备成了本发明的提取物。全文摘要本发明公开了一种紫云英子提取物的用途及制备方法。它是以紫云英子为原料提取出三萜类、黄酮类及它们的苷类物质作为有效成分，用于降低尿蛋白、治疗肾病综合征。将紫云英子经乙醇回流提取法提取，减压回收溶媒，再经大孔吸附树脂柱色谱或正丁醇萃取分离得到三萜类、黄酮类及其苷类物质的提取物。紫云英子提取物具有显著降低尿蛋白，治疗肾病综合征的作用；无明显毒副作用，可长期服用；工艺合理简便，能最大限度保留有效成分，减少给药剂量。文档编号A61P13/00GK101530458SQ20091009772公开日2009年9月16日申请日期2009年4月16日优先权日2009年4月16日发明者孙静芸,曾永篪,军李,金圣煊申请人:杭州创新中药标准化研究所有限公司