专利名称：：清热凉血、滋阴养肾的中药制剂及其制备方法和检测方法
技术领域：
：本发明涉及一种清热凉血、滋阴养肾的中药制剂，特别涉及清热凉血、滋阴养肾的中药制剂的制备方法和检测方法。
背景技术：
：慢性肾小球肾炎是肾科常见病、多发病。其中绝大多数患者具有不同程度的肾功能损害，且呈进行性加重，渐进性的转为肾功能衰竭。本发明清热凉血、滋阴养肾的中药制剂用于治疗慢性肾小球肾炎有较好的效果，临床应用十分广泛。本发明对清热凉血、滋阴养肾的中药片剂制备方法对干燥条件、原辅料，药粉粉碎目数等进行了筛选，所得制剂流动性及可压性好，制备方法可行性好，工艺稳定，具备生产可操作性，其所制得的药物质量稳定、服用及携带方便。本发明通过对含量检测方法的研究，建立了精密度高、稳定性好、重现性好、专属性强的检测方法，该方法能有效地控制产品质量，克服了现有技术的不足。
发明内容本发明目的在于提供一种清热凉血、滋阴养肾的中药制剂。本发明另一个目的在于提供清热凉血、滋阴养肾的中药片剂的制备方法。本发明另一个目的还在于提供清热凉血、滋阴养肾的中药片剂的的检测方法。本发明目的是通过如下技术方案实现的清热凉血、滋阴养肾的中药制剂是通过如下技术方案实现的当归、栀子、川芎粉碎，过筛；其余旱莲草、山药、赤芍、猪苓、大蓟、马齿苋、女贞子、小蓟、地榆、地黄、茯苓、茜草、狗脊、车前子14味，分别加8-12倍量、8-12倍量水煎煮二次，第一次2-4小时，第二次1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至50°C_701:相对密度为1.30-1.35的清膏，加入上述药粉，混匀，干燥，粉碎称细粉；加入常规辅料，按照常规工艺，制成颗粒剂、片剂、丸剂、散剂；所述清热凉血、滋阴养肾的中药制剂是由如下原料药制成旱莲草60-80重量份、山药65-85重量份、赤芍20-40重量份、猪苳35-55重量份、大蓟60-80重量份、马齿苋160-180重量份、女贞子35-55重量份、当归35-55重量份、小蓟60-80重量份、地榆130-150重量份、地黄35-55重量份、川芎5-25重量份、茯苓35-55重量份、茜草35-55重量份、栀子35-55重量份、狗脊130-150重量份、车前子75-95重量份。所述狗脊为烫狗脊；所述车前子为盐炙车前子。上述清热凉血、滋阴养肾的中药制剂，其中药片剂压片前颗粒的粉碎粒度为100-200目。上述清热凉血、滋阴养肾的中药制剂，其特征在于该中药片剂的制备方法为当归、栀子、川芎粉碎，过120目筛；其余旱莲草、山药、赤芍、猪苓、大蓟、马齿苋、5女贞子、小蓟、地榆、地黄、茯苓、茜草、狗脊(烫)、车前子(盐炙)14B未，分别加8-12倍量、8-12倍量水煎煮二次，第一次2-4小时，第二次1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至50-7(TC相对密度为1.30-1.35的清膏，加入上述药粉，混匀，干燥，粉碎称细粉，制成颗粒，加硬脂酸镁，压片，包衣，即得。上述清热凉血、滋阴养肾的中药制剂，其特征在于所述制备片剂所用黏合剂为80-90%的乙醇。上述清热凉血、滋阴养肾的中药制剂，其中药片剂优选如下制备方法当归、栀子、川芎粉碎，过120目筛；其余旱莲草、山药、赤芍、猪苓、大蓟、马齿苋、女贞子、小蓟、地榆、地黄、茯苓、茜草、狗脊(烫)、车前子(盐炙)14味，分别加10倍量、8倍量水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至6(TC相对密度为1.30-1.35的清膏，加入上述药粉，混匀，-O.085MPa、7(TC减压干燥，粉碎称细粉，以85%的乙醇作黏合剂，制粒，5(TC干燥，临界相对湿度控制在60%以上；加硬脂酸镁2.0重量份，包衣，即得。清热凉血、滋阴养肾的中药制剂检测方法包括如下川芎鉴别和/或栀子鉴别和/或芍药苷含量测定方法中的一种或几种鉴别A、称取含相当生药材量15-35g的肾炎灵制剂，加乙醇，超声处理10-30分钟，滤过，滤液加于中性氧化铝柱上，用乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材O.5-1.5g，加甲醇超声处理10-30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5-15:1比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B、称取含相当生药材量25-45g的肾炎灵制剂，加乙醇，超声处理20-40分钟，滤过，滤液加于中性氧化铝柱上，用乙醇洗脱，弃去洗脱液，再用60%-80%乙醇洗脱，收集60%-80%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每lml含3-5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以i-io:i-io:0.5-1.5:o.5-1.5比例的乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；含量测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充齐U;15-35:65-85:0.05-0.15比例的甲醇-水-庚烷磺酸钠为流动相；检测波长为230nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于1500;对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇溶解稀释制成每lml含0.05-0.15mg的溶液，即得；供试品溶液的制备称取含相当生药材量6-10g的肾炎灵制剂粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇，称定重量，超声30-50分钟，冷却，用甲醇补足减失的重量，过滤，续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，计算，即得；相当生药材量1-1.5g肾炎灵制剂，含赤芍以芍药苷C23H28On计，不得少于0.3mg。6本发明质量检测方法优选如下鉴别和/或含量测定的一种或几种鉴别A、称取含相当生药材量16g的制剂，加乙醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材lg，加甲醇15ml超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以14:1比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B、称取含相当生药材量26g的制剂，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇40ml洗脱，弃去洗脱液，再用70%乙醇40ml洗脱，收集70%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每lml含4mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10yi，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9:2:1.4:o.e比例的乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，在105t:加热至斑点显色清晰；供试品色潜中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；含量测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；32:68:0.14比例的甲醇-水-庚烷磺酸钠为流动相；检测波长为230nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于1500;对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇溶解稀释制成每lml含0.lmg的溶液，即得；供试品溶液的制备称取含相当生药材量7g的制剂粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声40分钟，冷却，用甲醇补足减失的重量，过滤，续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10yl，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。本发明质量检测方法优选如下鉴别和/或含量测定的一种或几种鉴别A、称取含相当生药材量33g的制剂，加乙醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材lg，加甲醇15ml超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以6:1比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B、称取含相当生药材量43g的制剂，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇40ml洗脱，弃去洗脱液，再用70X乙醇40ml洗脱，收集70%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每lml含4mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各ioyi，分别点于同一硅胶G薄层板上，以2:9:0.6:1.4比例的乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，在105t:加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；含量测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；18:82:0.06比例的甲醇-水-庚烷磺酸钠为流动相；检测波长为230nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于1500;对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇溶解稀释制成每lml含0.lmg的溶液，即得；供试品溶液的制备称取含相当生药材量9g的制剂粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声40分钟，冷却，用甲醇补足减失的重量，过滤，续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10yl，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。本发明质量检测方法优选如下鉴别和/或含量测定的一种或几种鉴别A、取本药物组合物片剂，除去薄膜衣，研细，称取含相当生药材量28.3g的片剂粉末，加乙醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材lg，加甲醇15ml超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ii1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9:1比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B、取药物组合物片剂，除去薄膜衣，研细，称取含相当生药材量37.7g的片剂粉末，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇40ml洗脱，弃去洗脱液，再用70%乙醇40ml洗脱，收集70%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每lml含4mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10y1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5:5:i:i比例的乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水溶液为展开齐U，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，在105t:加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；含量测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；25:75:0.1比例的甲醇-水-庚烷磺酸钠为流动相；检测波长为230nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于1500;对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇溶解稀释制成每lml含0.lmg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本药物组合物片剂，研细，混合均匀，称取含相当生药材量8.49g的片剂粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声40分钟，冷却，用甲醇补足减失的重量，过滤，续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测定，计算，即得；相当生药材量1.18g肾炎灵片剂，含赤芍以芍药苷C23H28Ou计，不得少于0.3mg。清热凉血、滋阴养肾的中药组合物不同制剂的日用剂量(每日服用剂量或每日使用剂量)因制剂不同而不同，但不同制剂的日用剂量中含相当生药材量相同。本发明质量检测方法以相当生药材量为计量单位。清热凉血、滋阴养肾的中药制剂原料药组成为旱莲草60-80重量份、山药65-858重量份、赤芍20-40重量份、猪苓35-55重量份、大蓟60-80重量份、马齿苋160-180重量份、女贞子35-55重量份、当归35-55重量份、小蓟60-80重量份、地榆130-150重量份、地黄35-55重量份、川芎5-25重量份、茯苳35-55重量份、茜草35-55重量份、栀子35-55重量份、狗脊(烫)130-150重量份、车前子(盐炙)75-95重量份。清热凉血、滋阴养肾的中药制剂组成优选为旱莲草71.6重量份、山药76.6重量份、赤芍28.8重量份、猪苳43重量份、大蓟71.6重量份、马齿苋172重量份、女贞子43重量份、当归43重量份、小蓟71.6重量份、地榆143重量份、地黄43重量份、川芎14.4重量份、茯苓43重量份、茜草43重量份、栀子43重量份、狗脊(烫)143重量份、车前子(盐炙)86重量份。本发明对清热凉血、滋阴养肾的中药片剂制备方法对干燥条件、原辅料，药粉粉碎目数等进行了筛选，所得制剂流动性好，制备方法可行性好，工艺稳定，具备生产可操作性。本发明质量检测方法除川芎、栀子的薄层鉴别外，还增加了芍药苷的含量测定方法，并对其中的各种测定条件进行了优选，同时进行了方法学考察，结果表明本发明质量检测方法具有良好的线性关系、良好的回收率、且精密度高、稳定性好、重现性良好、专属性强。本发明质量检测方法可行性高，能较好地控制本发明药物组合物制剂的质量。下述实验和实施例用于进一步说明但不限于本发明。(以下实验例中本发明药物、本品等均为根据实施例7制备的清热凉血、滋阴养肾的中药片剂，但实验结果并不限于本发明药物片剂。)实验例1芍药苷含量测定方法实验l测定条件的选择仪器与试药高效液相色谱仪色谱条件色谱柱C184.6X250mm，5iim流速1.0ml/min1.1测定波长的选择根据药典赤芍含量测定方法，选230nm为测定波长。1.2阴性对照溶液的配制按工艺制备不含赤芍药材的阴性样品，按供试品溶液的制备方法制备，作为阴性对照品溶液。1.3流动相的选择选用四种不同比例的流动相(i)甲醇:水:庚烷磺酸钠(36:64:o.i);(2)甲醇水庚烷磺酸钠(25:75:o.i);(3)甲醇水庚烷磺酸钠(20:80:o.i);(4)甲醇水庚烷磺酸钠(14:86:o.i)，考察流动相比例调整对主峰与杂质峰分离情况及出峰时间的影响。分别精密吸取供试品溶液各ioyi，注入液相色谱仪，分离度及出峰时间数据见表i表i分离度及出峰时间数据<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>由以上结果可知(2)、(3)、(4)均能使主峰与杂峰分离度达到要求，但出峰时间(2)要短于(3)和(4)，(1)的分离度未达到要求。综合考虑选择(2)的流动相比例，即甲醇水庚烷磺酸钠(25:75:o.i)。按上述色谱条件试验，暂定理论板数为按芍药苷计不低于1000。2对照品溶液的制备精密称定芍药苷对照品10mg，置10ml量瓶中，加甲醇溶解，定容至刻度，再量取lml置10ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，即得。3供试品溶液的制备取本品，研细，混合均匀，称取1.8g置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声40分钟，冷却，用甲醇补足损失的重量，过滤，续滤液作为供试品溶液。3.1提取溶剂选择芍药苷溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯等有机溶剂。取研细的供试品粉末三份，每份1.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密加入甲醇、乙醇、乙酸乙酯25ml，称定重量，超声40分钟，冷却，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，过滤，取续滤液作为供试品溶液。结果见表2:表2提取溶剂考察<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>由以上结果可知芍药苷含量甲醇提取样品>乙醇提取样品>乙酸乙酯提取样品，故选定甲醇为提取溶剂。3.2提取溶媒量的选择取研细的供试品粉末三份，每份1.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密加入甲醇10ml、25ml、40ml，分别称定重量，超声40分钟，冷却，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，过滤，取续滤液作为供试品溶液。结果见表3:表3提取溶剂量的考察<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>由以上结果可知在提取溶剂为25ml和40ml时芍药苷含量无显著差异，且大于提取溶剂为10ml时芍药苷含量，故选用提取溶剂量为25ml。3.3提取方法的选择取研细的供试品粉末二份，每份1.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密加入甲醇25ml，分别称定重量，一份回流提取40分钟，另一份超声处理40分钟，冷却，分别再称定重量，用甲醇补足减失的重量，过滤，取续滤液作为供试品溶液。结果见表4:表4提取方法的考察<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>由以上结果可知两种方法所测得含量无明显差异，但由于第一份超声提取时就已达到提取最佳效果，且超声提取方法操作方便，故选超声提取方法。3.4超声时间的选项取研细的供试品粉末三份，每份1.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密加入甲醇25ml，分别称定重量，分别超声20分钟，4Q分钟，6Q分钟，冷却，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，过滤，取续滤液作为供试品溶液。结果见表5:表5提取溶剂量的考察<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>由以上结果可知超声提取40分钟、60分钟的样品测得芍药苷含量无显著差异，且大于超声提取20分钟的样品。4线性关系和线性范围的考察精密称取芍药苷对照品10.llmg，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密移取0.6、0.8、1.0、1.2、1.4ml置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，各精密吸取10iil进样。数据如表6。表6标准曲线数据表,#卩Pg0.60660.80881.0111.21321.4154芍药卄__^__499662__702807__933870__11297521337995表明芍药苷在0.6066iig1.4154yg范围内，具有良好的线性关系。5精密度考察精密吸取同一标准品溶液10iil，连续进样5次，测定试验精密度。结果见表7。表7精密度试验<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>由表7可知，峰面积的RSDX〈2.0%，符合要求。6稳定性考察取本发明药物片剂，按供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，每隔一定时间进样10ul。结果见表8。表8稳定性试验<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>由表8可知，峰面积的RSD%<2.0%，供试品在8小时内稳定。7重现性考察取同一批本发明药物片剂样品5份，按样品的测定项下的方法测定并计算含量。结果如表9。表9重现性试验<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>由表9可知，5次测定结果的相对标准偏差RSD%<2.0%，本方法重现性良好。[owe]8回收率考察采用加样回收法测定。取已知含量的本发明药物片剂样品，分别添加芍药苷对照品，按上述色谱条件测定。依下列公式计算回收率，结果见表10。测得芍药苷量一样品中芍药苷量回收率％=-~x100%加入芍药苷对照品量表10芍药苷回收率试验编号称样量(g)原有量(mg)加入S(mg)测得值(mg)冋收率°/。10.93511.48681.0262.483097.120.95751.52241.0262.520797.330.96911.54091.0262.530996.540.94721.50601.0262.495196.450.95141.51271.0262.515297.7平均值97.0RSD%0.56结果表明本法具有良好的回收率。9赤芍药材含量测定取本发明药物片剂粗粉约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，浸泡4个小时，超声处理20分钟，取出放冷，再称定重量，用甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，进样10ul，测得三批赤芍药材含量如下，见表11:表11三批赤芍药材芍药苷测定编号芍药苷(%)11.9321.9631.94IO含量限度本品含赤芍以芍药苷(C23H280u)计，每片不得少于0.3mg。实验例2制备工艺考察实验l水提取工艺研究1.l吸液量考察按处方比例称取旱莲草、山药、赤芍、猪苓、大蓟、马齿苋、女贞子、小蓟、地榆、地黄、茯苓、茜草、狗脊(烫)、车前子(盐炙)300g，加12倍量水浸泡至药材全部透心，过滤，测得吸水率约为215.0%。1.2水提条件的考察因素水平的选择采用L9(34)正交表优化水提工艺条件，重点考察煎煮次数、加水量和煎煮时间三个因素，分别取三个水平，因素水平见表12。表12水提取工艺因素水平表<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>试验方法及结果按处方比例称取旱莲草、山药、赤芍、猪苓、大蓟、马齿苋、女贞子、小蓟、地榆、地黄、茯苓、茜草、狗脊(烫)、车前子(盐炙)300g，共九份编为19个实验号，按正交表安排提取试验，加水煎煮，合并提取液，滤过，浓縮，定容至100ml，精密吸取20ml，按2000年版药典一部附录XA浸出物测定法干浸膏收率。剩余滤液减压浓縮干燥成干膏，测定芍药苷的含量。结果见表13、14、15。赤芍药材中芍药苷的含量为20mg/g。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>表14出膏率方差分析表<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>结果C>B>A;最佳工艺A2B3C3表15芍药苷提取量方差分析表<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>结果C>B>A;最佳工艺A3B2C2。由浸膏收率方差分析可知，以干浸膏收率为指标时各因素影响大小的顺序为c>B〉A，方差分析结果表明A因素煎煮时间、B因素加水量和C因素煎煮次数有显著性差异；最佳工艺A2B3C3。由芍药苷提取量方差分析可知，各因素影响大小顺序C>B>A，方差分析结果表明，煎煮次数C对总提取率有显著性影响，最佳工艺组成为A3B2C2。结合直观分析结果，最佳提取工艺条件为A3B2C2。即煎煮3小时加8倍量水、煎煮2次。因药材的吸水率为215.0%，考滤到煎煮时间无显著性影响，考虑到节约成本及参照原标准，故优选工艺如下加水煎煮二次，第一次10倍量3小时，第二次8倍量2小时。1.3提取工艺验证正交试验结束后，根据所确定的工艺进行了三批样品验证，按处方比例称取药材旱莲草、山药、赤芍、猪苓、大蓟、马齿苋、女贞子、小蓟、地榆、地黄、茯苓、茜草、狗脊(烫)、车前子(盐炙)300g，共三份，分别加水煎煮二次，第一次10倍量3小时，第二次8倍量2小时，滤过，合并滤液，浓縮，真空干燥，检测芍药苷提取量。验证情况如下表16:表16水提工艺验证表<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>致。根据提取条件考查研究情况最3小时，第二次8倍量2小时。由上表可知，验证结果与正交试验结果基本终确定提取工艺为分别加水煎煮二次，第一次10倍2干燥条件的选择将相对密度为1.301.35(6(TC测)清膏在不同温度条件下减压干燥，干燥26/J时后测定芍药苷含量，选择干燥条件。表17干燥条件的比较(-0.08MPa)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>不同干燥温度条件，干燥物芍药苷含量有差异。以上数据表明，在7(TC干燥时芍药苷含量较高。故采用-0.085MPa、7(TC减压干燥。实验例3片剂制剂工艺研究片剂服用量及服用次数为一日3次，一次67片，计算片重预计加入辅料后制成0.25g/片。则辅料加入量为0.8%。制剂用浸膏及辅料149g99g2.0g用浸舊浸膏粉药材粉末硬脂酸镁制成1000片1粉末与颗粒压片方式的选择本发明药物片剂中栀子、川芎、当归以原药粉入药，其余为中药浸膏，粘性较好，采:不加辅料直接压片或制成颗粒后直接压片，下面对两种压片方式进行考察，以样品流动性为考察指标。取浸膏粉，按比例加入栀子、川芎、当归，过80目筛混合均匀，备用。取浸膏粉，按比例加入栀子、川芎、当归，过80目筛混合均匀，以90%乙醇作黏合剂，18目筛制粒，5(TC干燥，得颗粒，备用。2休止角的测定采用固定漏斗法，将3只漏斗串联并固定于水平放置的坐标纸上2cm的高度处，小心地将样品分别沿漏斗壁倒入最上的漏斗中直到最下面漏斗形成的药粉圆锥体尖端接触到漏斗口为止，由坐标纸测出圆锥底部的直径(反复测定3次)，计算出休止角(tgci=H/R)。表18休止角的测定<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>结论从休止角的测定结果来看，颗粒的流动性优于粉末，因此采用颗粒压片,3黏合剂种类的选择选用不同浓度的乙醇作黏合剂，以颗粒的成型性和制粒情况为指标。表19黏合剂种类的选择<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>剂。结论从以上结果可知，处方3所得颗粒均匀，制粒容易，故采85%的乙醇作黏合4干燥工艺的考察颗粒中含有水分，需干燥，使其含水量低于5%，现就干燥工艺进行考察。取三份软材各100g，置鼓风干燥箱中干燥4小时，结果如下表表20干燥温度考查结果表编号称样量(g)干燥温度('C)含水量(％)整粒情况120.5405.4容易219.6503.5容易320.3602.5成块，难整粒采用5(TC干燥，所得颗粒水分较小，容易整粒，因此在制粒过程中选用5(TC干燥。5药材粉碎程度的选择研究过程中发现药材粉碎的程度对可压性影响很大，现就粉碎目数进行考察。取浸膏粉，按比例加入栀子、川芎、当归，共4份，分别过80目筛、100目筛、120目筛、200目筛混合均匀，以90%乙醇作黏合剂，18目筛制粒，5(TC干燥，得颗粒，备用。表21粉碎粒度考察结果表力'1234粉碎目数80100120200可压性差较好好好颗粒的可压性较差，研究发现药材粉碎的越细，可压性越好，当粉碎至120目时，可压性最好。6休止角测定采用固定漏斗法，将3只漏斗串联并固定于水平放置的坐标纸上2cm的高度处，小心地将样品分别沿漏斗壁倒入最上的漏斗中直到最下面漏斗形成的药粉圆锥体尖端接触到漏斗口为止，由坐标纸测出圆锥底部的直径(反复测定3次)，计算出休止角(tgci=H/R)。结果见表22。表22休止角的测定测定次数H(cm)R(cm)休止角a("。122.0544.29222.1043.6044.30322.0045.00颗粒流动性较差，需加入润滑剂进行调节。7润滑剂种类及用量的选择由于颗粒流动性差，选用流动性较好的硬脂酸镁及滑石粉作助流剂。具体安排及试验如下表23。表23润滑剂种类及用量的选择(n=3)处方润滑剂种类润滑剂用量休止角a(°)10.5%38.562硬脂酸镁0.8%36.0731.0%36.7540.5%39.415滑石粉0.8%37.2461.0%36.85结论从以上结果来看，硬脂酸镁的助流效果优于滑石粉，且加入量0.8%与1%差别不大，为了调整处方用量，选用0.8%的硬脂酸镁作为润滑剂。8临界相对湿度的测定因为该片中有浸膏粉，具有吸湿性和聚集性。环境湿度对混合、干燥、灌装、储存影响较大，为此测定浸膏粉的临界相对湿度。恒湿溶液制备分别配制54%、48%、44%浓度的硫酸液及过饱和NaBr、NaCl、KC1、KN03溶液，将配制的饱和溶液分别置入硅胶干燥器内，于25t:放置72h，分别得到相对湿度为29.40%、40.50%、48.50%、58.00%、75.00%、84.10%、93.00%的恒湿溶液。临界相对湿度测定取本发明实施例7制备得的片剂去薄膜衣药粉，分取7份，每份2.Og，将药粉置干燥至衡重的称量瓶内，精密称定，将称量瓶分别放置于盛放恒湿溶液的干燥器中，25t:下放置72h后取出精密称量，测试情况见下表。表24临界相对湿度测试情况表<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>吸湿率=(粉末吸湿后重_干粉末重)/干粉末重通过上表可知，当相对湿度大于60%时，粉末吸湿量显著增大，故确定临界相对湿度为60%。在混合、储存时，湿度必须控制在60%以下，减少水分对药物性质及稳定性的影响。9.1中试工艺研究结束后，进行了十批产品中试，中试情况如下设备提取罐、外循环减压浓縮器、真空干燥箱、粉碎机、湿法混合制粒机、压片机、包衣机、包装机。十批中试产品，工艺稳定，具有生产可操作性。9.2稳定性考察实验对本发明实施例7制备得的片剂进行稳定性考察实验，具体步骤如下9.2.1实验仪器岛津SPD-10Avp检测器、岛津LC-10ATvp高效液相色谱仪、超声波振荡器、分析天平、层析缸等。9.2.2实验方法分别采用加速实验(温度为40°C士2"、湿度为75%±5%)和长期实验(温度为25t:±2°〇、湿度为60%±10%)考核。定期检验各项指标，按0、1、2、3月和0、3、6、12月取样，测定各项指标。9.2.3考核项目性状、鉴别、崩解时限、含量测定、微生物限度检查等。9.2.4考核结果见表25、26。9.2.5稳定性结论本发明实施例7制备得的片剂经过12个月的稳定性试验，各项检测结果符合质量标准规定，结果与0月比较，无明显变化，说明该产品质量稳定。表25加速试验报告<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>表26长期试验报告<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>下述实施例均能实现上述实验例的效果。具体实施方式实施例1:旱莲草71.6g、山药76.6g、赤芍28.8g、猪苓43g、大蓟71.6g、马齿苋172g、女贞子43g、当归43g、小蓟71.6g、地榆143g、地黄43g、川芎14.4g、茯苓43g、茜草43g、栀子43g、狗脊(烫)143g、车前子(盐炙)86g上述药物组合物原料药加入常规辅料，按照常规工艺，制成胶囊剂；鉴别A、称取含相当生药材量16g的胶囊剂，加乙醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材lg，加甲醇15ml超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以14:1比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B、称取含相当生药材量26g的胶囊剂，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇40ml洗脱，弃去洗脱液，再用70%乙醇40ml洗脱，收集70%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每lml含4mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9:2:1.4:0.6比例的乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，在105t:加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。实施例2:旱莲草71.6g、山药76.6g、赤芍28.8g、猪苓43g、大蓟71.6g、马齿苋172g、女贞子43g、当归43g、小蓟71.6g、地榆143g、地黄43g、川芎14.4g、茯苓43g、茜草43g、栀子43g、狗脊(烫)143g、车前子(盐炙)86g以上17味，当归、栀子、川芎粉碎，过120目筛；其余旱莲草等14味，分别加10倍量、8倍量水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至6(TC相对密度为1.30-1.35的清膏，加入常规辅料，按照常规工艺，制成丸剂；含量测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；32:68:0.14比例的甲醇-水-庚烷磺酸钠为流动相；检测波长为230nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于1500;对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇溶解稀释制成每lml含0.lmg的溶液，即得；供试品溶液的制备称取含相当生药材量7g的丸剂粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声40分钟，冷却，用甲醇补足减失的重量，过滤，续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10yl，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。实施例3:旱莲草71.6g、山药76.6g、赤芍28.8g、猪苓43g、大蓟71.6g、马齿苋172g、女贞子43g、当归43g、小蓟71.6g、地榆143g、地黄43g、川芎14.4g、茯苓43g、茜草43g、栀子43g、狗脊(烫)143g、车前子(盐炙)86g以上17B未，当归、栀子、川芎粉碎，过120目筛；其余旱莲草等14味，分别加10倍量、8倍量水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至6(TC相对密度为1.30-1.35的清膏，加入上述药粉，混匀，干燥，粉碎称细粉，制成颗粒，压片，制成IOOO片，包衣，包装，即得;鉴别A、称取含相当生药材量33g的片剂，加乙醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材lg，加甲醇15ml超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以6:1比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B、称取含相当生药材量43g的片剂，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇40ml洗脱，弃去洗脱液，再用70%乙醇40ml洗脱，收集70%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每lml含4mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各ioyi，分别点于同一硅胶G薄层板上，以2:9:0.6:1.4比例的乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，在105t:加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；含量测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；18:82:0.06比例的甲醇-水-庚烷磺酸钠为流动相；检测波长为230nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于1500;对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇溶解稀释制成每lml含0.lmg的溶液，即得；供试品溶液的制备称取含相当生药材量9g的片剂粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声40分钟，冷却，用甲醇补足减失的重量，过滤，续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10yl，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。实施例4:旱莲草71.6g、山药76.6g、赤芍28.8g、猪苓43g、大蓟71.6g、马齿苋172g、女贞子43g、当归43g、小蓟71.6g、地榆143g、地黄43g、川芎14.4g、茯苓43g、茜草43g、栀子43g、狗脊(烫)143g、车前子(盐炙)86g上述药物组合物原料药加入常规辅料，按照常规工艺，制成散剂；鉴别A、称取含相当生药材量27.23g的散剂，加乙醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材lg，加甲醇15ml超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9:1比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B、称取含相当生药材量38.31g的散剂，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇40ml洗脱，弃去洗脱液，再用70%乙醇40ml洗脱，收集70%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每lml含4mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各ioyi，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5:5:i:i比例的乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，在105t:加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。实施例5:旱莲草71.6g、山药76.6g、赤芍28.8g、猪苓43g、大蓟71.6g、马齿苋172g、女贞子43g、当归43g、小蓟71.6g、地榆143g、地黄43g、川芎14.4g、茯苓43g、茜草43g、栀子43g、狗脊(烫)143g、车前子(盐炙)86g以上17味，当归、栀子、川芎粉碎，过120目筛；其余旱莲草等14味，分别加10倍量、8倍量水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至6(TC相对密度为1.30-1.35的清膏，加入常规辅料，按照常规工艺，制成颗粒剂；含量测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；25:75:0.1比例的甲醇_水_庚烷磺酸钠为流动相；检测波长为230nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于1500;对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇溶解稀释制成每lml含0.lmg的溶液，即得；供试品溶液的制备称取含相当生药材量8.17g的颗粒剂粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声40分钟，冷却，用甲醇补足减失的重量，过滤，续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ii1，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。实施例6:旱莲草71.6g、山药76.6g、赤芍28.8g、猪苓43g、大蓟71.6g、马齿苋172g、女贞子43g、当归43g、小蓟71.6g、地榆143g、地黄43g、川芎14.4g、茯苓43g、茜草43g、栀子43g、狗脊(烫)143g、车前子(盐炙)86g以上17味，当归、栀子、川芎粉碎，过120目筛；其余旱莲草等14味，分别加10倍量、8倍量水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至6(TC相对密度为1.30-1.35的清膏，加入上述药粉，混匀，干燥，粉碎称细粉，制成颗粒，压片，制成IOOO片，包衣，包装，即得;鉴别A、取本药物组合物片剂，除去薄膜衣，研细，称取含相当生药材量27.23g的片剂粉末，加乙醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材lg，加甲醇15ml超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ii1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9:1比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B、取药物组合物片剂，除去薄膜衣，研细，称取含相当生药材量38.31g的片剂粉末，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇40ml洗脱，弃去洗脱液，再用70%乙醇40ml洗脱，收集70%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每lml含4mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10y1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5:5:i:i比例的乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水溶液为展开齐U，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，在105t:加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；含量测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；25:75:0.1比例的甲醇_水_庚烷磺酸钠为流动相；检测波长为230nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于150Q;对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇溶解稀释制成每lml含10倍|旱莲草71.6g大蓟71.6g小蓟71.6g茯苓43g猪苓43g当归43g川芎14.4g狗脊(烫)143g0.lmg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本药物组合物片剂，研细，混合均匀，称取含相当生药材量8.17g的片剂粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声40分钟，冷却，用甲醇补足减失的重量，过滤，续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测定，计算，即得；本药物组合物片剂每片含赤芍以芍药苷C23H280u计，不得少于0.3mg。实施例7:山药76.6g赤芍28.8g马齿苋172g女贞子43g地榆143g地黄43g茜草43g栀子43g车前子(盐炙)86g制法以上17味，当归、栀子、川芎粉碎，过120目筛；其余旱莲草等14味，分别加:、8倍量水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至60°C相对密度为1.30-1.35的清膏，加入上述药粉，混匀，干燥，粉碎称细粉，制成颗粒，压片，制成1000片，包衣，包装，即得;鉴别A、取本品，除去薄膜衣，研细，称取6.0g，加乙醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材lg，加甲醇15ml超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9:i的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B、取本品，除去薄膜衣，研细，称取8.Og，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加于10g，内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇40ml洗脱，弃去洗脱液，再用70%乙醇40ml洗脱，收集70%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每lml含4mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10yi，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5:5:i:i的乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，在105t:加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；含量测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；25:75:0.l的甲醇-水-庚烷磺酸钠为流动相；检测波长为230nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于1500;对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇溶解稀释制成每lml含0.lmg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品，研细，混合均匀，称取1.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声40分钟，冷却，用甲醇补足减失的重量，过滤，续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测定，计算，即得；本品每片含赤芍以芍药苷C23H28Ou计，不得少于0.3mg;功能与主治清热凉血，滋阴养肾；用于慢性肾小球肾炎；用法与用量口服，一日3次，一次67片；规格每片重O.26g。实施例8:山药76.6g马齿苋172g地榆143g茜草43g旱莲草71.6g大蓟71.6g小蓟71.6g茯苓43g猪苓43g当归43g川芎14.4g狗脊(烫)143g赤芍28.8g女贞子43g地黄43g栀子43g车前子(盐炙)86g制法当归、栀子、川芎粉碎，过120目筛；其余旱莲草、山药、赤芍、猪苓、大蓟、马齿苋、女贞子、小蓟、地榆、地黄、茯苓、茜草、狗脊(烫)、车前子(盐炙)14味，分别加10倍量、8倍量水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至6(TC相对密度为1.30-1.35的清膏，加入上述药粉，混匀，-0.085MPa、7(TC减压干燥，粉碎称细粉，以85X的乙醇作黏合剂，制粒，5(TC干燥，临界相对湿度控制在60%以上；加硬脂酸镁2.0重量份，制成IOOO片，包衣，即得。实施例9旱莲草80.6g山药76.6g赤芍35.8g猪苓36g大蓟62.6g马齿苋172g女贞子43g当归43g小蓟71.6g地榆149g地黄50g川芎20.4g茯苳50g茜草40g栀子50g狗脊145g车前子86g制法以上17味，当归、栀子、川芎粉碎，过120目筛；其余旱莲草等14味，分别加10倍量、8倍量水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至60°C相对密度为1.30-1.35的清膏，加入上述药粉，混匀，干燥，粉碎称细粉，制成颗粒，压片，制成1000片，包衣，包装，即得;鉴别取本品，除去薄膜衣，研细，称取6.Og，加乙醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材lg，加甲醇15ml超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9:i的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。实施例9旱莲草65.6g大蓟71.6g小蓟65.6g茯苳40g车前子90g山药80g马齿苋165g地榆133g茜草50g赤芍23.8g女贞子50g地黄50g栀子40g猪苓50g当归50g川芎20.4g狗脊133g制法以上17味，当归、栀子、川芎粉碎，过120目筛；其余旱莲草等14味，分别加10倍量、8倍量水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至60°C相对密度为1.30-1.35的清膏，加入上述药粉，混匀，干燥，粉碎称细粉，制成颗粒，压片，制成1000片，包衣，包装，即得;鉴别取本品，除去薄膜衣，研细，称取8.0g，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加于10g，内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇40ml洗脱，弃去洗脱液，再用70%乙醇40ml洗脱，收集70%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每lml含4mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各ioyi，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5:6:i:i的乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，在105t:加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。权利要求一种清热凉血、滋阴养肾的中药制剂，其特征在于该中药制剂是由如下方法制成原料药组成为旱莲草60-80重量份、山药65-85重量份、赤芍20-40重量份、猪苓35-55重量份、大蓟60-80重量份、马齿苋160-180重量份、女贞子35-55重量份、当归35-55重量份、小蓟60-80重量份、地榆130-150重量份、地黄35-55重量份、川芎5-25重量份、茯苓35-55重量份、茜草35-55重量份、栀子35-55重量份、狗脊130-150重量份、车前子75-95重量份；当归、栀子、川芎粉碎，过筛；其余旱莲草、山药、赤芍、猪苓、大蓟、马齿苋、女贞子、小蓟、地榆、地黄、茯苓、茜草、狗脊、车前子14味，分别加8-12倍量水煎煮二次，第一次2-4小时，第二次1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至50℃-70℃相对密度为1.30-1.35的清膏，加入上述药粉，混匀，干燥，粉碎成细粉；加入常规辅料，按照常规工艺，制成颗粒剂、片剂、丸剂或散剂。2.如权利要求1所述清热凉血、滋阴养肾的中药制剂，其特征在于片剂压片前颗粒的粉碎粒度为100-200目。3.如权利要求1所述的清热凉血、滋阴养肾的中药制剂，其特征在于该中药片剂的制备方法为当归、栀子、川芎粉碎，过120目筛；其余旱莲草、山药、赤芍、猪苓、大蓟、马齿苋、女贞子、小蓟、地榆、地黄、茯苓、茜草、狗脊、车前子14味，分别加8-12倍量水煎煮二次，第一次2-4小时，第二次1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至50°C_701:相对密度为1.30-1.35的清膏，加入上述药粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，制成颗粒，加硬脂酸镁，压片，包衣，即得。4.如权利要求1-3任一所述清热凉血、滋阴养肾的中药制剂，其特征在于所述制备片剂黏合剂为80-90%的乙醇。5.如权利要求4所述的清热凉血、滋阴养肾的中药制剂，其特征在于该中药片剂是由如下方法制成当归、栀子、川芎粉碎，过120目筛；其余旱莲草、山药、赤芍、猪苓、大蓟、马齿苋、女贞子、小蓟、地榆、地黄、茯苓、茜草、狗脊、车前子14味，分别加10倍量、8倍量水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至6(TC相对密度为1.30-1.35的清膏，加入上述药粉，混匀，-0.085MPa、7(TC减压干燥，粉碎成细粉，以85%的乙醇作黏合剂，制粒，5(TC干燥，临界相对湿度控制在60%以上；加硬脂酸镁2.0重量份，包衣，即得。6.如权利要求l-5任一所述清热凉血、滋阴养肾的中药制剂，其特征在于该制剂的含量测定方法为色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；15-35:65-85:0.05-0.15比例的甲醇-水-庚烷磺酸钠为流动相；检测波长为230nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于1500;对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇溶解稀释制成每lml含0.05-0.15mg的溶液，即得；供试品溶液的制备称取含相当生药材量6-10g的制剂粉末，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇，称定重量，超声30-50分钟，冷却，用甲醇补足减失的重量，过滤，续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，计算，即得；相当生药材量l-1.5g清热凉血、滋阴养肾的中药制剂，含赤芍以芍药苷C23H28Ou计，不得少于0.3mg。7.如权利要求6所述的检测方法，其特征在于该方法中的含量测定方法优选为色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；25:75:0.1比例的甲醇-水-庚烷磺酸钠为流动相；检测波长为230nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于1500;对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇溶解稀释制成每1ml含0.lmg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本药物组合物片剂，研细，混合均匀，称取含相当生药材量8.49g的片剂粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声40分钟，冷却，用甲醇补足减失的重量，过滤，续滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测定，计算，即得；相当生药材量1.18g清热凉血、滋阴养肾的中药片剂，含赤芍以芍药苷C23H280u计，不得少于0.3mg;所述清热凉血、滋阴养肾的中药制剂是由如下原料药制成旱莲草71.6重量份、山药76.6重量份、赤芍28.8重量份、猪苳43重量份、大蓟71.6重量份、马齿苋172重量份、女贞子43重量份、当归43重量份、小蓟71.6重量份、地榆143重量份、地黄43重量份、川芎14.4重量份、茯苳43重量份、茜草43重量份、栀子43重量份、狗脊143重量份、车前子86重量份。8.如权利要求6或7所述的检测方法，其特征在于该方法包括如下川芎鉴别和/或栀子鉴别中的一种或几种A、川芎鉴别称取含相当生药材量15-35g的制剂，加乙醇，超声处理10-30分钟，滤过，滤液加于中性氧化铝柱上，用乙醇洗脱，收集流出液和洗脱液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材0.5-1.5g，加甲醇超声处理10-30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5-15:1比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B、栀子鉴别称取含相当生药材量25-45g的制剂，加乙醇，超声处理20-40分钟，滤过，滤液加于中性氧化铝柱上，用乙醇洗脱，弃去洗脱液，再用60%-80%乙醇洗脱，收集60%-80%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每lml含3-5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以i-io:i-io:0.5-1.5:o.5-1.5比例的乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。9.如权利要求8所述的检测方法，其特征在于该方法包括如下川芎鉴别和/或栀子鉴别中的一种或几种A、取本药物组合物片剂，除去薄膜衣，研细，称取含相当生药材量28.3g的片剂粉末，加乙醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇50ml洗脱，收集流出液和洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材lg，加甲醇15ml超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9:1比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B、取药物组合物片剂，除去薄膜衣，研细，称取含相当生药材量37.7g的片剂粉末，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇40ml洗脱，弃去洗脱液，再用70%乙醇40ml洗脱，收集70%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含4mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5:5:i:i比例的乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水溶液为展开齐U，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。10.如权利要求8所述的检测方法，其特征在于该方法包括如下川芎鉴别和/或栀子鉴别中的一种或几种A、川芎鉴别称取含相当生药材量33g的制剂，加乙醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇50ml洗脱，收集流出液和洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材lg，加甲醇15ml超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以6:l比例的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；B、栀子鉴别称取含相当生药材量43g的制剂，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加于10g、内径1.5cm的中性氧化铝柱上，用乙醇40ml洗脱，弃去洗脱液，再用70%乙醇40ml洗脱，收集70%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每lml含4mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各i0iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以2:9:0.6:1.4比例的乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水溶液为展开齐U，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，在105t:加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。全文摘要本发明公开了一种清热凉血、滋阴养肾的药物组合物的质量检测方法。本发明芍药苷的含量测定方法以15-35∶55-95∶0.05-0.15比例的甲醇-水-庚烷磺酸钠为流动相；供试品溶液的制备称取含相当生药材量6-10g的制剂粉末，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇，称定重量，超声30-50分钟，冷却，用甲醇补足减失的重量，过滤，续滤液作为供试品溶液。本发明质量检测方法精密度高、稳定性好、重现性好、专属性强。文档编号A61P13/12GK101711827SQ20091026589公开日2010年5月26日申请日期2009年12月29日优先权日2009年5月31日发明者张建立,曹相林,熊胜辉,褚清宗,靳晓秋申请人:北京四环科宝制药有限公司