治疗真菌、酵母和霉菌感染的纳米乳剂的制作方法

专利名称：治疗真菌、酵母和霉菌感染的纳米乳剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及治疗、杀死和/或抑制人类受试者中真菌、酵母菌和霉菌病原体生长 的方法，所述方法包括将具有抗真菌、抗酵母菌和/或抗霉菌性质的纳米乳剂组合物局部 施用于有需要的人类受试者。本发明还涉及治疗、预防和/或完全治愈人类受试者中真菌、 酵母菌和霉菌感染的方法，所述方法包括将具有抗真菌、抗酵母菌和/或抗霉菌性质的纳 米乳剂组合物局部施用于有需要的人类受试者。
背景技术：
A.真菌/酵母菌/霉菌感染真菌导致人类中各种各样的疾病。虽然一些真菌导致限于皮肤和毛发的最外层的 感染(浅表性真菌病)，但是其他真菌通过渗透至皮肤、毛发和指甲的角质化层并触发宿主 中的病理改变来导致皮肤的真菌病。皮下的真菌病导致真皮、皮下组织、肌肉和筋膜中的感 染，并且常常是慢性的。全身性真菌病首先在肺部产生并可导致身体其他器官系统中的继 发感染。具有免疫系统缺陷的患者常常易于患上伺机性真菌病。皮肤真菌包括红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)和须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophytes)，它们是造成皮肤的真菌感染或皮肤癣菌病(dermatophytose)的原因。 足癣(Tinea pedis)是脚趾之间最常显现的皮肤感染，导致受感染的皮肤的鳞屑、剥落和 发痒。也可产生水泡和皮肤开裂，从而导致掉皮组织暴露、红斑、疼痛、肿胀和炎症。第二 种足癣被称为软鞋足癣，其特征在于慢性足底红斑伴有扩散过度皮肤角化的轻微鳞屑，所 述过度皮肤角化可以是无症状的或瘙痒的。其他类型足癣包括炎性/水疱和溃疡性足癣。 感染可能波及身体的其他区域，感染本身显现为躯干、手臂和腿上带有抬升边缘的环形鳞 状蚀斑、脓疱和水泡(圆癣，Tinea corporis)、手掌和手指指间的鳞状皮疹(手癣，Tinea manuum)、腹股沟和耻区的红斑病变(股癣，Tinea cruris)、胡须部和颈部区域的红斑、鳞屑 和脓疱(须癣，Tinea barbae或面癣，Tinea faciale)，或头皮中圆形秃露的鳞状斑块(头 癣，Tinea capitis)。花斑癣(Tinea versicolor)也称为变色性皮癣，是影响皮肤的正常 色素沉着的皮肤常见真菌感染，产生小的、脱色的斑块。甲癣(Tinea unguium)是指甲的皮 肤真菌感染的另一个术语。继发性细菌感染可从真菌感染发展而来。癣是非常常见的，特别是在儿童之中，可通过皮肤与皮肤的接触，以及通过与诸如 发刷之类的污染物品的接触，或通过与感染的个体使用同一个马桶座圈来传播。当被感染 的癣是传染性癣时，甚至在它们显示疾病症状之前，癣容易传播。诸如摔跤之类的接触性运动的参与者具有通过皮肤与皮肤的接触获得真菌感染的风险。癣是中度传染性的。在家畜，特别是农畜，犬和猫以及甚至诸如仓鼠或豚鼠之类的 小的宠物中，癣也是常见的感染。当人类紧密接触这些动物时，人类可从这些动物感染癣 (通常也称为“环癣”)。癣也可通过直接接触和通过与脱落的皮肤薄片的长时间接触(例 如，共用衣服或室内尘埃)从其他人类获得。在人群中癣的最公知的病征是出现一个或一个以上具有明确边缘的红色抬升的 痒的斑块，这与玫瑰糠疹(Pityriasis rosea)的预示性皮疹没有不同。这些斑块常常中心 更浅，外观呈现由黑色素增多引起的围绕圆周的着色过度的环形。如果感染区域涉及头皮 或胡须区域，那么秃露的斑块可变得明显。感染的区域可能发痒一段时间。有时癣感染可导致远离实际感染的一部分身体中的皮肤病变。这样的病变被称为 “皮肤真菌疹”。病变本身是无真菌的，并且通常在实际感染治疗之后消失。最常见的实例 是由脚的真菌感染引起的手上出疹。皮肤真菌疹实质上是真菌的一般性过敏反应。因而，诸如小孢子菌(Microsporum)属物种、毛癣菌属(Trichophyton)物种、表皮 癣菌属(Epidermophyton)物种和念珠菌属物种之类的真菌和酵母菌可导致持续的和难以 治疗的感染。小孢子菌属物种的实例包括犬小孢子菌(M. canis)和石膏样小孢子菌 (Mgypseum)。小孢子菌属是引起皮肤癣菌病的几种真菌之一。皮肤癣菌病是用于定义毛 发、皮肤或指甲中由任何皮肤真菌物种引起的感染的一般术语。类似于其他皮肤真菌，小孢 子菌具有降解角蛋白的能力，因而可以驻留在皮肤和皮肤的附件中，并保持为非侵害性的。 注意的是，小孢子菌属物种主要感染毛发和皮肤。犬小孢子菌是犬和猫中环癣的主要原因， 是引起人类中偶发的皮肤癣菌病的动物源真菌物种，特别是引起拥有猫和狗的儿童的发癣 的动物源真菌物种。毛癣菌属物种的皮肤感染主要发生在颈背部、头皮或胡须。毛癣菌属物种感染的 症状包括发炎的头皮病变、发炎的颈部病变、发炎的胡须部病变、瘢痕和永久的毛发丧失。 毛癣菌属物种的实例包括红色毛癣菌(T.rubrum)、断发毛癣菌(T. tonsurans)和须癣毛癣 菌(T. mentagrophytes)。断发毛癣菌是真菌的人源毛内癣菌物种，在欧洲、南美洲和美国其引起流行性皮 肤癣菌病。它感染一些动物，并且其生长需要硫胺。在美国它是发癣最常见的原因，发癣 形成黑色斑点，在该黑色斑点处毛发在皮肤表面折断。红色毛癣菌是真菌，是足癣(“香港 脚”)、股癣和癣(环癣)最常见的起因。红色毛癣菌是引起手指甲真菌感染的最常见的皮 肤真菌。然而大多数真菌皮肤感染会发炎并难以治疗，存在着真菌感染导致死亡的报告。 具体而言，须癣毛癣菌皮肤感染迁移到淋巴结、睾丸、脊椎和中枢神经系统(CNS)。用灰黄 霉素、两性霉素B、克霉唑和转移因子治疗不起效，最终导致受试者死亡(Hironaga et al., J. Clin. Microbiol.，2003 ；5四8_5301.)。须癣毛癣菌是皮肤真菌群中真菌指甲感染的第二 普遍来源。表皮癣菌属(Epidermophyton)含有两个物种絮状表皮癣菌(Epidermophyton floccosum)和斯托克表皮癣菌(Epidermophyton stockdaleae)。已知斯托克表皮癣菌是不 致病的，这使得絮状表皮癣菌成为弓I起人类感染的唯一物种。絮状表皮癣菌是不同的健康 个体中皮肤癣菌病的常见起因之一。它感染皮肤(圆癣、股癣、足癣)和指甲(甲癣)。感染限于表皮的无生命的角化层，因为该真菌缺乏穿透免疫活性宿主的活体组织的能力。由任 何皮肤真菌散布的感染不太可能局限于对角质化组织的感染。然而，在患有白塞氏综合征 的免疫损害的患者中已报道了侵入性絮状表皮癣菌感染。与皮肤癣菌病的所有形式一样， 絮状表皮癣菌感染是可传播的，并且通常通过接触、特别是共用淋浴和体育设备来传播。念珠菌属(Candida)物种的实例包括白色念珠菌(C. albicans)、近平滑 (C. parapsiliosis)和克鲁斯氏念珠菌(C. krusei)。患有慢性皮肤粘膜念珠菌病的患者可 发展为指甲的念珠菌感染。念珠菌属物种可侵入早先通过感染或外伤而损伤的指甲，并导 致甲周区域和甲床下方的感染。甲褶出现红斑、膨胀和触痛，伴有偶见的排出物。疾病引起 表皮的损失、指甲营养不良、甲松离，伴有侧面甲褶周围的变色。在甲癣的所有形式中，指甲 出现各种损害和变形。由以上讨论的真菌和酵母菌引起的真菌感染的具体实例是甲癣(指甲感染)。由 于真菌感染在毛囊根中或指甲本身下方，影响指甲或头皮的真菌感染特别难以治疗。甲癣是甲床的慢性、持续性真菌、酵母菌和/或霉菌感染，其引起指甲的增厚和变 色，有时伴有疼痛和失能。这种真菌感染影响25%的成年人，发生率随着年龄而提高，以致 于在超过50岁的成年人中发病率是40%。根据在Podiatry Today中所报道的研究，在美 国超过3千5百万人患有甲癣，高达50%受该疾病影响的人没有接受治疗。甲癣对患者的社会性、职业性和情绪功能有显著的影响。困窘的感受可使患者排 斥在社会或工作环境中的互动，在这些环境中他们不愿意显出他们的手或脚。而且，受甲癣 感染的免疫损害的宿主尤其具有发生继发性细菌感染的风险。甲癣(指甲感染)可由皮肤真菌、酵母菌或非皮肤癣菌霉菌引起。甲癣主要由 包括毛癣菌属物种、表皮癣菌属物种和小孢子菌属物种在内的皮肤真菌引起。具体而 言，甲癣可由皮肤真菌红色毛癣菌(90% )、须癣毛癣菌、絮状表皮癣菌、奥杜盎氏小孢子 菌(Microsporum audouinii)、犬小抱子菌、石膏样小抱子菌(Microsporum gypseum)、抚 状毛癣菌(Trichophyton verrucosum)、堇色毛癣菌(Trichophyton violaceum)、许兰 氏毛癣菌(Trichophyton schoenleinii)、断发毛癣菌和诸如支顶孢属(Acremonium)物 种、曲霉属(Aspergillus)物种、镰刀菌属(Fusarium)物种、短柄帚霉Gcopulariopsis brevicaulis)、交链孢霉(Alternia)物种、淡紫色拟青霉(Paecilomyces lilacinus)、 Epiccocum nigrum、茎点霉属(Phoma)物种、毛壳属(Chaetomium)物种、弯孢属 (Curvularia) 禾中、；) )! (Scedosporium) ^fK Onychocola canadensis 禾口0音fe 柱顶孢(Scytalidiumdimidiatum)之类的霉菌引起。念珠菌属物种引起51 %至70%的手 指甲感染。远端的指甲下的甲癣(DSO)是甲癣的最常见形式，可在脚趾甲、手指甲或两者中 发生。感染从侵入甲床开始，由此指甲与甲床分离并引起指甲板与甲床分离(甲松离)和 指甲下区域增厚。当细菌和/或霉菌的超感染发生时，指甲板变为黄棕色。近端指甲下的甲癣(PSO)在AIDS患者中非常常见。真菌侵入甲床沟，穿透进入处 在下方的新形成的指甲板。远端的指甲保持正常，直到疾病的晚期。感染引起皮肤增厚(指 甲下的皮肤角化过度症)、指甲变白(白甲病)、近端甲松离和指甲单元的破坏。白色浅表性甲癣(WSO)是甲癣的较少见的形式，其在指甲板的表面层开始，逐渐 地侵入更深层。全营养不良性甲癣是所有类型的甲癣中的末期阶段。
此外，念珠菌属物种，特别是白色念珠菌，在慢性甲沟炎的发展中起到病因学作 用，慢性甲沟炎是手指甲或脚趾甲周围的软组织的常见感染，其中细菌可作为共同病原体。 无波动的肿胀、红斑和甲褶触痛是慢性甲沟炎的特征。最终，指甲板变厚并脱色伴有显著的 横脊，表皮和甲褶可从指甲板分离，形成各种微生物侵入的空隙。长期以来甲癣是最难治疗的真菌感染之一。指甲生长花费的时间长度、指甲板的 不可透性、甲床和甲板之间感染的位置是干扰根除影响这些组织的真菌病原体的主要因 素。因而，症状的根除是非常缓慢的，可花费整年或更长时间。局部抗真菌剂由于它们的抗 真菌谱可能限于皮肤真菌和由于抗真菌剂有限的穿透指甲而具有低效力。抗真菌剂的全身 性治疗显示了 40%或更高的复发率并且具有显著的风险，包括肝脏和/或心脏毒性，以及 有害的药物相互作用。因而，非常需要可选择的、更有效的治疗真菌、酵母菌和/或霉菌感 染(例如甲癣)的方法。B.真菌、酵母菌和霉菌感染的常规治疗选择真菌、酵母菌和霉菌感染的常规治疗包括局部和口服药物。口服施用的药物一般 比局部施用的药物更有效，但是由于口服施用的药物全身地而不是局部地起作用，口服施 用的药物的副作用可能更严重得多。口服施用的抗真菌剂药物的实例包括，但不限于灰黄霉素、咪唑(联苯苄唑、氯 苄甲咪唑、克霉唑、益康唑、芬替康唑、酮康唑、异康唑、咪康唑、奥昔康唑、舍他康唑、硫康 唑、噻康唑)、三唑(氟康唑、伊曲康唑、泊沙康唑、伏立康唑)、特比萘芬和苯并咪唑(噻苯 咪唑)。提供了这些药物的几种详细说明。灰黄霉素(Fulvicin-U/F 、Grifulvin V⑧和Gris-PEG )是用于治疗动物癣 和人癣的口服施用的药物，所述动物癣和人癣包括诸如股癣、足癣和癣之类的皮肤感染以 及头皮、手指甲和脚趾甲的真菌感染(甲癣)。灰黄霉素作为口服的片剂、胶囊和液体出现。通常一天服用一次，或可以一天服用 两到四次。虽然症状可以在数天内改善，但对于皮肤感染而言，必须服用药物2到4周，对 于毛发和头皮感染而言，必须服用药物4到6周，对于脚感染而言，必须服用药物4到8周， 对于手指甲感染而言，必须服用药物3到4个月，对于脚趾甲感染而言，必须服用药物至少 6个月。灰黄霉素副作用的实例包括麻疹、皮疹、意识模糊、眩晕和/或晕厥、腹泻、口渴、疲 劳、头痛、常规活动的性能损伤、无法入睡或保持睡眠、恶心和/或胃痛、鹅口疮(口腔的酵 母菌感染)、上腹痛、呕吐、肿胀、痒、手或足震颤、味觉丧失和对醇类敏感。此外，灰黄霉素可 能是诱导突变的致畸物，可降低口服避孕药的有效性。盐酸特比萘芬(Lamisil 、TerbiSil . 、Zabel )是合成的烯丙胺抗真菌剂。它 在性质上是高度亲脂性的，倾向于在皮肤、指甲和脂肪组织中积累。特比萘芬主要对真菌的 皮肤真菌群体有效。作为1 %乳膏剂或粉剂，它用于浅表性皮肤感染，例如股癣、足癣和其他 类型的癣(环癣)。口服的250mg片剂常常处方用于治疗由于皮肤真菌甲癣而引起的脚趾 甲或手指甲的甲癣。真菌指甲感染可位于指甲下基质中的深部，局部施用的治疗不能以足 够的量穿透。对于手指甲真菌而言，口服特比萘芬片剂通常每天服用一次持续6周，对于脚 趾甲真菌而言，一天服用一次持续12周。该片剂可导致肝脏毒性，因此就这点而警告患者， 并且可用肝功能测试来监测。此外，盐酸特比萘芬可诱导或加重亚急性的皮肤红斑狼疮。伊 曲康唑胶囊可用于治疗手指甲和/或脚趾甲的真菌感染。伊曲康唑口服溶液用于治疗口腔和咽喉的酵母菌感染，以及患有发烧和一些其他感染病征的患者中的怀疑的真菌感染。伊 曲康唑属于称为氮杂茂的一类抗真菌剂。它通过抑制麦角固醇生物合成起效，麦角固醇是 真菌膜的主要成分。伊曲康唑作为口服的胶囊剂和溶液(液体)出现。伊曲康唑胶囊通常与全餐一起 每天服用一到三次持续至少3个月。当伊曲康唑胶囊用于治疗手指甲的真菌感染时，它们 通常每天服用两次持续一周，完全不服用持续三周，然后每天服用两次再持续一周。伊曲康 唑溶液通常每天空腹服用一次或两次持续1到4周或更久。如果正在服用伊曲康唑来治疗 指甲感染，指甲可能不会看起来变健康，直到新的指甲长出。这可能需要6至9个月来生长 新的手指甲，需要12至18个月来生长新的脚趾甲。伊曲康唑具有许多严重的副作用。例如，伊曲康唑可导致充血性心力衰竭(心脏 不能泵送充足的血液通过身体的病症)。其他副作用包括腹泻或便溏、便秘、胀气、胃疼、烧 心、溃疡或牙龈出血、口腔内或周围的溃疡、头痛、眩晕、出汗、肌肉疼痛、性欲或能力降低、 神经质、抑郁、鼻涕和其他感冒症状、不平常的梦、过度疲劳、食欲不振、胃不适、呕吐、皮肤 或眼睛发黄、小便黄赤、浅色大便、手或足的震颤、发烧、寒战、或其他感染症状、排尿频繁或 痛苦、不受控的摇手、皮疹、麻疹、痒、呼吸或吞咽困难。此外，伊曲康唑口服溶液中的成分之 一导致一些类型的实验动物中的癌症。不知道的是服用伊曲康唑溶液的人是否具有提高的 发生癌症的风险。酮康唑(Nizoral )作为口服片剂出现。它通常一天服用一次。酮康唑用于治 疗真菌感染。酮康唑最常用于治疗通过血流可波及身体的不同部分的真菌感染，例如口腔、 皮肤、泌尿道和血液的酵母菌感染，以及在皮肤上或在肺中并且可散布整个身体的一些真 菌感染。酮康唑也被用于治疗不能用其他药物治疗的皮肤或指甲的真菌感染。酮康唑属于 一类氮杂茂抗真菌剂。它通过减缓引起感染的真菌的生长来起效。酮康唑可导致肝脏损伤。此外，与酮康唑相关的其他副作用包括胃疼、抑郁、皮疹、 麻疹、痒、呼吸或吞咽困难以及自杀倾向。此外，服用高剂量酮康唑的前列腺癌的少数患者 在他们开始进行药物治疗之后不久死亡。不知道他们是死于他们的疾病，还是使用酮康唑 治疗，还是其他原因。泊沙康唑(Noxafil )作为口服悬浮液(液体)出现。每个剂量应当与全餐 或液体营养增补剂一起服用(这可能是有问题的，因为根据这种说明的患者顺应性趋近 60%或更低)。也可获得泊沙康唑的片剂形式。800毫克/天的口服剂量(分为两次或四 次剂量)已经被用于治疗各种真菌感染。口服和局部泊沙康唑已经用于治疗腐皮镰刀菌 (Fusarium solani)角膜炎和内眼炎，起始口服剂量为200毫克每天四次，与泊沙康唑悬浮 液(10mg/0. 1毫升)的每小时眼部局部施用结合(Sponsel等人，2002)。当泊沙康唑用于治 疗口腔和咽喉的酵母菌感染时，通常每天服用一次或两次。泊沙康唑用于预防抗感染能力 减弱的人的严重的真菌感染。泊沙康唑也用于治疗口腔和咽喉的酵母菌感染，包括不能用 其他药物成功地治疗的酵母菌感染。泊沙康唑属于一类称为氮杂茂的抗真菌剂，通过抑制 麦角固醇生物合成减慢真菌生长。泊沙康唑可产生副作用，例如，发烧、头痛、寒战或发抖、 眩晕、虚弱、手、脚、踝或小腿肿胀、腹泻、呕吐、胃疼、便秘、烧心、体重损失、皮疹、痒、背部或 肌肉疼痛、唇、口腔或咽喉的溃疡、难以入睡或保持睡眠、焦虑、出汗增多、鼻出血、咳嗽、不 平常的擦伤或出血、极端的疲劳、缺少能量、食欲不振、恶心、胃的右上部疼痛、皮肤或眼睛发黄、流感样症状、小便黄赤、浅色的大便、禁食、心跳不规则、突然意识丧失、呼吸急促和排 尿减少。伏立康唑(Vfend )作为口服片剂和悬浮液(液体)出现。它通常每12小时空 腹、餐前至少1小时或餐后1小时服用。伏立康唑用于治疗严重的真菌感染，例如侵入性的 曲霉病(在肺部开始并通过血流散布到其他器官的真菌感染)和食道念珠菌病(酵母菌样 真菌感染，其可引起口腔和咽喉中的白色斑块)。伏立康唑属于一类称为氮杂茂的药物，通 过抑制麦角固醇生物合成减慢真菌生长。伏立康唑可导致副作用，例如，模糊或视力异常、 辨色困难、对强光敏感、腹泻、呕吐、头痛、眩晕、口干、面部潮红、发烧、寒战或发抖、快速心 跳、快速呼吸、意识模糊、胃不适、极端疲劳、不平常的擦伤或出血、缺少能量、食欲不振、胃 的右上部分疼痛、皮肤或眼睛发黄、流感样症状、幻觉、胸痛、皮疹、麻疹、痒、呼吸或吞咽困 难以及手、足、踝或小腿肿胀。氟康唑作为口服片剂和悬浮液(液体)出现。它通常一天服用一次。氟康唑用于 治疗真菌感染，包括阴道、口腔、咽喉、食道、腹部(胸和腰之间的区域)、肺部、血液和其他 器官的酵母菌感染。氟康唑属于一类称为氮杂茂的抗真菌剂，通过抑制麦角固醇生物合成 减慢真菌生长。氟康唑可导致副作用，例如，头痛、眩晕、腹泻、胃疼、烧心、品尝食物的能力 改变、胃不适、极端的疲劳、不平常的擦伤或出血、缺少能量、食欲不振、胃的右上部分疼痛、 皮肤或眼睛发黄、流感样症状、小便黄赤、淡色的大便、癫痫发作、皮疹、麻疹、痒、面部、咽 喉、舌、唇、眼睛、手、脚、踝或小腿肿胀、呼吸或吞咽困难。局部抗真菌药物包括环吡酮胺、含有咪康唑的药物(Daktarin，Micatin & Monistat)、克霄P坐(Canesten,Hydrozole)、布替蔡芬(Lotrimin Ultra,Mentax)、特比蔡芬 (Lamisil)、阿莫罗芬(Curanai 1，Loceryl，Locetar 和 Odenil)、萘替芬(Naftin)和托萘酯 (Tinactin)。也可用于消除真菌感染的其他抗真菌药物为对羟基苯甲酸乙酯、氟胞嘧啶、水 杨酸、二硫化硒和十一烯酸。以下描述了几种示范性的局部抗真菌剂。环吡酮胺(也称为 Batrafen Loprox 、Pen lac 禾口 Sti 印 rox. )是局部皮 肤使用的合成的抗真菌剂，其对三价金属阳离子具有高亲和力。在进一步阐明环吡酮胺的 作用机制而进行的研究中，筛选和测试了几种酿酒酵母突变体。药物治疗和突变两者的 作用的解释结果表明，环吡酮胺可通过几种机制发挥其作用，靶向参与细胞代谢的各种成 分的多个蛋白质，所述细胞代谢包括DNA复制、DNA修复和细胞转运(Leem et al. ,"The Possible Mechanism of Action of Ciclopirox Olamine in the Yeast Saccharomyces cerevisiae, "Mol. Cells.，15(1) :55-61 (2003))。环吡酮胺作为溶液出现，施用于指甲和紧密环绕指甲的皮肤以及指甲下的皮肤。 它通常一天施用一次。环吡酮胺用于改善指甲的状况，但是它不能完全地治愈指甲真菌。 此外，在受感染的指甲的任何症状得以改善之前，可持续使用环吡酮胺6个月或更久。环 吡酮胺不应与在用环吡酮胺局部溶液治疗的指甲上的指甲油或其他指甲化妆产品一起使 用(这可能是患者希望的)。此外，环吡酮胺局部溶液可能着火，因而这种药物不应接近热 源或明火(例如香烟)使用。与环吡酮胺相关的副作用包括，但不限于，应用位置发红、刺 激、痒、灼烧、水泡、肿胀、或应用位置渗液、受感染的指甲或邻近区域疼痛、指甲变色或形状 改变和指甲向内生长。酮康唑乳膏剂(Nizoral )用于治疗圆癣(环癣；引起身体的不同部分上红色鳞状皮疹的真菌皮肤感染)、股癣、足癣、花斑癣(引起胸部、背部、手臂、腿或颈部的褐色或淡 色斑点的真菌感染)和皮肤的酵母菌感染。处方的酮康唑香波用于治疗花斑癣。酮康唑属 于一类氮杂茂抗真菌药物。酮康唑可引起副作用，例如，毛发质地的改变、头皮上的水泡、皮肤干燥、痒、油性 或干燥的毛发或头皮、应用位置刺激、痒或刺痛，皮疹、麻疹、呼吸或吞咽困难，以及应用位 置发红、触痛、肿胀、疼痛或发热。C.纳米乳剂与纳米乳剂相关的在先教导在美国专利第6，015，832号中描述，其涉及灭活革兰 氏阳性细菌、细菌孢子或革兰氏阴性细菌的方法。所述方法包括使细菌灭活的(或使细 菌孢子灭活的)乳剂与革兰氏阳性细菌、细菌孢子或革兰氏阴性细菌接触。美国专利第 6，506，803号涉及使用乳剂杀死或中和人体之上或之中的微生物病原(例如，细菌、病毒、 孢子、真菌)的方法。美国专利第6，559，189号涉及净化样品(人体、动物、食物、医疗设备， 等等)的方法，包括使纳米乳剂与样品接触。所述纳米乳剂，当与细菌、病毒、真菌、原生动 物或孢子接触时，杀死病原体或使病原体失去能力。在水性介质中，抗微生物纳米乳剂一般 包括季铵化合物、乙醇/甘油/PEG之一、油和表面活性剂。美国专利第6，635，676号涉及 两种不同的组合物和通过用任一所述组合物处理样品来净化样品的方法。组合物1包含抗 细菌、病毒、真菌、原生动物和/或孢子的抗微生物的乳剂。所述乳剂包含油和季铵化合物。 美国专利第7，314，624号涉及诱导免疫原的免疫反应的方法，包括用免疫原和纳米乳剂的 组合经由粘膜表面来治疗受试者。所述纳米乳剂包含油、乙醇、表面活性剂、季铵化合物和 蒸馏水。US-2005-0208083-A1和US-2006-0251684-A1涉及具有优选尺寸的液滴的纳米乳 剂。US-2007-0054834-A1涉及包含季铵卤化物的组合物和使用所述组合物治疗感染病症的 方法。所述季铵化合物可作为乳剂的部分来提供。最后，US-2007-0036831-A1涉及包含抗 炎症剂的纳米乳剂。本领域中需要改善受真菌感染影响的患者的治疗选择，所述真菌感染包括脚趾 甲、手指甲和皮肤的真菌感染。具体地，本领域中需要完全地消灭脚趾甲、手指甲和皮肤的 真菌感染的高效杀菌剂。本发明满足了这些需求。

发明内容
本发明提供了用于治疗和/或预防人类受试者中真菌、酵母菌和/或霉菌病 原体感染的方法和组合物，所述方法包括将纳米乳剂局部或皮内施用于所述人类受 试者，其中所述真菌或酵母菌病原体是毛癣菌属(Trichophyton)物种、表皮癣菌属 (Epidermophyton)物种、念珠菌属(Candida)物种、小孢子菌属(Microsporum)物种、曲 霉属(Aspergillus)物种、拟青霉属(Paecilomyces)物种、镰刀菌属(Fusarium)物种、支 顶孢属(Acremonium)物种、毛壳属(Chaetomium)物种、茎点霉属(Phoma)物种、帚霉属 (Scopulariopsis)物种、柱霉属(Scytalidium)物种、链格孢属(Alternaria)物种、附球菌 属(Epicoccum)物种、弯孢霉属(Curvularia)物种，或其任何组合。用于治疗这些属的任 何物种的感染的方法和组合物被本发明涵盖。所述纳米乳剂包含具有平均直径小于约IOOOnm的液滴，所述纳米乳剂液滴包含 水相、至少一种油、至少一种表面活性剂和至少一种有机溶剂。
所述毛癣菌属物种可以是，例如，阿耶罗毛癣菌(T.ajelloi)、同心性毛癣菌 (T. concentricum)、马毛癣菌(T. equinum)、意瑞奈斯毛癣菌(T. erinacei)、淡黄毛癣菌 (T. flavescens)、光辉毛癣菌(Τ. gloriae)、趾间毛癣菌(T. interdigitale)、麦格毛癣 胃(T. megnini) > ^ (T. mentagrophytes) ,SlW^^MM (T. phaseoliforme) > tEfe 毛癣菌(T.rubrum)、许兰毛癣菌(T. schoenleini)、猴毛癣菌(T. simii)、苏丹奈斯毛癣 菌(T. soudanense)、土毛癣菌(T. terrestre)、断发毛癣菌(T. tonsurans)、范布鲁西米氏 毛癣菌(T. vanbreuseghemii)、疣状毛癣菌(T. verrucosum)、紫色毛癣菌(T. violaceum)、 或杨德氏毛癣菌(T. yaoimdei)。所述表皮癣菌属物种可以是，例如，絮状表皮癣菌 (E. floccosum)或斯托克表皮癣菌(E. stockdaleae)念珠菌属物种可以是，例如，白色念珠 菌(C. albicans)、近平滑念珠菌(C. parapsiliosis)、克柔念珠菌(C. krusei)、热带念珠菌 (C. tropicalis)、光滑念珠菌(C. glabrata)、近平滑念珠菌(C. parapsilosis)、葡萄牙念 珠菌(C. Iusitaniae)、乳酒念珠菌(C. kefyr)、高里念珠菌(C. guilliermondii)或杜氏念 珠菌(C. dubliniensis)。所述小孢子菌属物种可以是，例如，犬小孢子菌(M. canis)、石膏 样小孢子菌(M. gypseum)、奥杜安小孢子菌(M. audouini)、鸡禽小孢子菌(M. gallinae)、铁 锈色小孢子菌(M. ferrugineum)、扭曲小孢子菌(M. distortum)、矮小小孢子菌(M. nanum)、 库克小孢子菌(M. cookie)或范布瑞西米小孢子菌(M. vanbreuseghemii)。附球菌属物种 可以是，例如，黑附球菌(E.nigrum)。曲霉属物种可以是，例如，聚多曲霉(A. sydowii)、 ± (A. terreus)、■曲 β (A. niger)、± 曲 β (A. terreus) > ft # (A. fumigatus)、 黄曲霉(Α. flavus)、棒曲霉(A. clavatus)、灰绿曲霉群(A. glaucus group)、构巢曲霉 (A. nidulans)、米曲霉(A. oryzae)、土曲霉(A. terreus)、焦曲霉(A. ustus)或花斑曲霉 (A. versicolor)。拟青霉属物种可以是，例如，淡紫拟青霉(P. lilacinus)或宛氏拟青 霉(P.variotii)。镰刀菌属物种可以是，例如，尖孢镰刀菌(F.oxysporum)、腐皮镰刀菌 (F. solani)或半裸镰刀菌(F. semitectum)。毛壳菌属物种可以是，例如，C. atrobrunneum, 粪生毛壳菌(C. funicola)、球毛壳菌(C. globosum)或C. strumarium。帚霉属物种可以是， 例如，短帚霉(S. brevicaulis)、S. Candida、S. koningii、顶抱帚霉(S. acremonium)、黄帚 M (S. f lava)、S. cinerea> S. trigonospora> ^1 ' ' (S. brumptii)、S. chartarum、0音 色帚霉(S. fusca)或S. asperula。柱霉属物种可以是，例如，暗色柱霉(S. dimidiatum)、 透明柱霉(S. hyalinum) > S. infestans、日本柱霉(S. japonicum)或木生柱霉 (S. Iignicola)。链格孢属物种可以是，例如，交链格孢(A. alternate)、A. chartarum、 石竹链格孢(A. dianthicola)、A. geophilia、感染链格孢(A. infectoria)、匍柄链格孢 (A. stemphyloides)或极细链格孢(A. teunissima)。弯孢霉属物种可以是，例如，短孢弯 孢霉(C. brachyspora)、暗色弯孢霉(C. clavata)、膝弯孢霉(C. geniculata)、新月弯孢霉 (C. Iunata)、苍白弯孢霉(C. pallescens)、塞内加尔弯孢霉(C. senegalensis)或疣状弯孢 霄(C. verruculosa)。令人惊讶地发现在治疗由毛癣菌属物种、表皮癣菌属物种、念珠菌属物种、小孢子 菌属物种、曲霉属物种、拟青霉属物种、镰刀菌属物种、支顶孢属物种、毛壳菌属物种、茎点 霉属物种、帚霉属物种、柱霉属物种、链格孢属物种、附球菌属物种和/或弯孢霉属物种引 起的感染方面局部施用的纳米乳剂与口服施用的常规抗真菌剂治疗一样有效或比口服施 用的常规抗真菌剂治疗更有效。这是重要的，因为相对于口服施用从而产生的全身性活性，由局部施用而产生的局部的位点特异性活性是极为优选的。如在背景技术部分中提到的， 全身性的抗真菌药物具有许多副作用，一些副作用是非常严重的。待治疗的患者可遭受真菌、酵母菌和/或霉菌感染，例如，癣感染、皮肤癣菌病和/ 或皮肤癣菌瘤(dermatophytoma)。此外，真菌或酵母菌感染可以是足癣、甲癣、圆癣、股癣、 发癣、手癣、须癣、面癣、花斑癣或真菌角膜炎。在本发明的一个方面，患者可患有甲癣。所述纳米乳剂包含具有平均粒径小于约IOOOnm的液滴，所述纳米乳剂包含水、至 少一种油、至少一种表面活性剂和至少一种有机溶剂。在本发明的一种实施方式中，所述纳 米乳剂中存在的表面活性剂是阳离子表面活性剂。在本发明的另一实施方式中，所述纳米 乳剂进一步包含螯合剂。在本发明的一种实施方式中，本发明的纳米乳剂或从本发明的纳 米乳剂衍生的那些样品被稀释。然后，可测试稀释的样品以确定它们是否维持了期望的功 能，例如，表面活性剂浓度、稳定性、粒径和/或抗感染活性(例如，抗真菌活性)。在一些实施方式中，其他的活性剂，例如，抗真菌剂、抗酵母菌剂或抗霉菌剂，被掺 入所述纳米乳剂来改善活性剂的吸收。优选地，所述第二活性剂是抗真菌剂，例如，盐酸特 比萘芬(TBHC)或咪康唑。然而，在治疗甲癣中有用的任何适合的或期望的活性剂可掺入所 述纳米乳剂来实现皮肤和软组织中的抗真菌活性。优选地，用于局部或皮内施用的纳米乳剂是任何药学上可接受的剂型形式，包括 但不限于，软膏齐 、乳膏剂、乳剂、乳液、凝胶、液体、生物粘附性凝胶、喷雾、香波、气雾齐 、 膏剂、泡沫、防晒剂、胶囊、微囊，或是物体或载体的形式，例如，绷带、插入物、注射器样敷涂 器、阴道栓剂、粉剂、滑石粉或其他固体、香波、清洁剂(驻留和洗去的产品)以及有助于渗 透表皮、真皮和角蛋白层的药剂。所述纳米乳剂能够有效地治疗、预防和/或治愈毛癣菌属 物种、表皮癣菌属物种、念珠菌属物种、小孢子菌属物种、曲霉属物种、拟青霉属物种、镰刀 菌属物种、支顶孢属物种、毛壳菌属物种、茎点霉属物种、帚霉属物种、柱霉属物种、链格孢 属物种、附球菌属物种、弯孢霉属物种或其任何组合的感染，而不被全身吸收并且没有上皮 刺激。本发明的纳米乳剂可以是杀真菌的或抑真菌的(例如，对于皮肤真菌的每种分离 物)，并且对真菌分生孢子、菌丝、菌丝体和孢子有效。在本发明的一种实施方式中，本发明的纳米乳剂提供了待治疗病症的真菌学的痊愈。上述一般说明和以下的附图简要说明以及详细说明是示范性的和说明性的，意在 提供进一步解释本发明要求保护的内容。根据以下本发明的详细说明，对于本领域技术人 员而言其他目的、优点和新颖特征将是显而易见的。


图1显示了将纳米乳剂递送进入皮肤，包括纳米乳剂在毛囊和皮脂腺内部的定 位，图IA显示了皮肤横截面，箭头指出皮脂腺和毛囊；图IB显示了荧光下的有荧光素而没 有纳米乳剂的皮肤横截面，以及图IC显示了荧光下的有荧光素和纳米乳剂的皮肤横截面， 箭头指出毛囊和皮脂腺。图2显示了将纳米乳剂递送进入皮肤，包括纳米乳剂从毛囊和皮脂腺向真皮和表 皮的横向扩散，图2Α显示了皮肤横截面，箭头指出毛囊；附图2Β显示了荧光下的有荧光素而没有纳米乳剂的皮肤横截面，以及附图2C显示了荧光下的有荧光素和纳米乳剂的皮肤 横截面，箭头指出毛囊和皮脂腺。图3图示比较了对于红色毛癣菌的真菌分离物，本发明的纳米乳剂的杀真菌效果 和目前用于治疗真菌感染的其他抑真菌药物的效果，表示为最小抑制浓度(MIC)和最小杀 真菌浓度(MFC)值。(A)纳米乳剂(“NB-002”，在水性介质中包含大豆油、作为非离子表面 活性剂的吐温20 、乙醇、作为阳离子表面活性剂的氯化十六烷基吡啶(CPC)、EDTA和水)； (B)特比萘芬；(T)环吡酮胺(C) ； (D)伊曲康唑。图4说明了本发明的纳米乳剂对甲癣的作用机制。图5图示说明了，在用㈧载体；⑶包含0. 25%氯化十六烷基吡啶的纳米乳剂， 每天给于两次；(C)包含0.5%氯化十六烷基吡啶的纳米乳剂，每天给于一次；和⑶包含 0. 5%氯化十六烷基吡啶的纳米乳剂，每天给于两次治疗之后，由受训的研究人员评估的新 的未受影响的指甲的线性生长的进展。纳米乳剂治疗组显示出新的、未受影响的指甲的生 长的明显进展。图6图示说明了，在用㈧载体；⑶包含0. 25%氯化十六烷基吡啶的纳米乳剂， 每天给于两次；(C)包含0.5%氯化十六烷基吡啶的纳米乳剂，每天给于一次；和⑶包含 0.5%氯化十六烷基吡啶的纳米乳剂，每天给于两次治疗之后，通过面积法评估的新的未受 影响的指甲的线性生长的进展。纳米乳剂治疗导致新的、未受影响的指甲的生长的明显进展。图7图示说明了，在用㈧载体；⑶包含0. 25%氯化十六烷基吡啶的纳米乳剂， 每天给于两次；(C)包含0.5%氯化十六烷基吡啶的纳米乳剂，每天给于一次；和⑶包含 0. 5%氯化十六烷基吡啶的纳米乳剂，每天给于两次治疗之后，通过平面几何分析，受影响 的指甲的面积的逐渐减小。纳米乳剂治疗使得受影响指甲的面积的逐渐减小。图8比较了与用Penlac ⑥治疗相比，用根据本发明的纳米乳剂治疗停止后8周或 更久获得的真菌学治愈率。图9显示了本发明的示范性的纳米乳剂(NB-002)针对稀有的甲癣真菌病原体的 抗真菌性的图表。图10显示了随时间根据本发明的纳米乳剂对红色毛癣菌的生存力的影响(菌丝 和微小分生孢子)。在左侧(IOA)显示了纳米乳剂(4XMIC)和对比物(16xMIC)对红色毛 癣菌NBD031菌丝体的生存力的影响，在右侧显示了对微小分生孢子的影响(IOB)。测试的 对比物是伊曲康唑(菱形)；特比萘芬(正方形)；环吡酮胺(三角形)；和纳米乳剂(X)。 检测的下限是IOOcfu。图11显示了本发明的示范性的纳米乳剂(NB-002)对红色毛癣菌、须毛癣菌和絮 状表皮癣菌的杀真菌活性，图IlA显示了红色毛癣菌NBD030菌丝体(无处理)的扫描电 镜照片；图IlB显示了在室温下用100μ g/ml本发明的示范性的纳米乳剂(NB-002)处理 1小时之后的菌丝体(50 XMIC) (2, 000 X放大率)；图IlC显示了没有处理的红色毛癣菌 微小分生孢子(箭头)的扫描电镜照片；和图IlD显示了在用本发明的示范性的纳米乳剂 (NB-002)在室温下处理1小时之后(12. 5 μ g/ml 6XMIC)红色毛癣菌微小分生孢子(箭 头)的扫描电镜照片(5，000X放大率)。图12显示了在室温下用本发明的示范性的纳米乳剂(NB-002)( 50XMIC)处理1小时之后红色毛癣菌菌丝的扫描电镜照片(11，000X放大率)。图13显示了在M小时将纳米乳剂递送进入人类尸体皮肤。图13A显示了在对人 类尸体皮肤的单次施用之后，包含0.3% w/v氯化十六烷基吡啶(CPC)的纳米乳剂和包含 0.3% w/v水性氯化十六烷基吡啶(CPC)的对照组合物吸收进入表皮的比较。图1 显示 了在对人类尸体皮肤的单次施用之后，包含0.3%W/v氯化十六烷基吡啶(CPC)的纳米乳剂 和包含0.3% w/v水性氯化十六烷基吡啶(CPC)的对照组合物吸收进入真皮的比较。与胶 束CPC相比，纳米乳剂液滴的独特结构产生了显著的皮肤渗透。图14显示了根据本发明的纳米乳剂中存在的不同浓度的阳离子表面活性剂对吸 收进入猪皮肤的表皮和真皮的影响。图144显示了在包含0.1%、0.2(%、0.3(%、0.4(%或 0.5% w/v氯化十六烷基吡啶(CPC)的纳米乳剂的单次施用和三次施用之后吸收进入表皮 的比较。图14B显示了在包含0. 1%、0. 2%、0. 3%、0. 4%或0. 5% w/v氯化十六烷基吡啶 (CPC)的纳米乳剂的单次施用和三次施用之后吸收进入真皮的比较。图15显示了在施用TBHC制剂两次之后，与Lamisil 乳膏剂(Lamisil 是包含 TBHC的非纳米乳剂组合物)相比，当将化合物掺入纳米乳剂时包含盐酸特比萘芬(TBHC)的 纳米乳剂吸收进入猪皮肤的表皮表现出TBHC的吸收显著改善。图16显示了在施用TB制剂两次之后，与Lamisil乳膏剂(Lamisil 是包含TB 的非纳米乳剂组合物)相比，当化合物掺入纳米乳剂时包含盐酸特比萘芬(TBHC)的纳米乳 剂吸收进入猪皮肤的真皮表现出TBHC的吸收显著改善。图17显示了与在非纳米乳剂制剂 (Lotrimin(R)AF喷雾溶液)中局部施用的MCZ相比，局部施用掺入纳米乳剂中的MCZ (BID 给药)之后，在M小时家猪皮肤表皮中咪康唑(MCZ)的含量表现出当MCZ掺入纳米乳剂时 显著改善了 MCZ递送进入表皮。图18显示了与在非纳米乳剂制剂(Lotrimin AF喷雾溶液)中局部施用的MCZ 相比，局部施用掺入纳米乳剂中的MCZ (BID给药)之后，在M小时家猪皮肤真皮中咪康唑 (MCZ)的含量表现出当MCZ并入纳米乳剂中时显著改善了 MCZ递送进入真皮。图19说明了实施例13中描述的利用人类尸体皮肤的横向扩散研究的尺寸，两个 同心的玻璃环限定了 5. 27cm2的外部给药区域、3. 3cm2的中间区域和0. 5cm2的内部区域。图20说明了实施例13中描述的横向扩散研究的设计。根据横向扩散研究的设计， 腔室内部存在的CPC的唯一给药途径是渗透进入皮肤样品并横向地移动通过组织。图21图示了与包含0. 5% w/v氯化十六烷基吡啶(CPC)水溶液的对照组合物(图 21A)相比，包含0. 5% w/v氯化十六烷基吡啶(CPC)的根据本发明的纳米乳剂(图21B)， 利用人类尸体皮肤的横向扩散研究的结果。描绘了 M小时期间横向扩散的结果，对于水性 CPC溶液成分而言，进入中间区域具有最小的横向扩散，内部区域中没有显示横向扩散。相 比之下，当施加0. 5%纳米乳剂时，中间和内部区域明显地测量到横向扩散。图22图示了实施例13中描述的横向扩散研究结果，其中在所有三个区域(外部 给药区域、中间区域和内部区域)中表现出表皮组织内的0. 5%纳米乳剂和0. 25%纳米乳 剂的转运(CPC的测量用作纳米乳剂的递送标志)。在外部给药区域中纳米乳剂的施用之后 24小时，在0小时和8小时，在表皮的外部、中间和内部区域中检测到可测量数量的纳米乳 剂，其超过4 μ g/g纳米乳剂的最小杀真菌浓度(MFC9tl)。图23图示了实施例13中描述的横向扩散研究结果，其中在所有三个区域(外部给药区域、中间区域和内部区域)中表现出真皮组织内的0.5%纳米乳剂和0.25%纳米乳 剂的转运(CPC的测量用作纳米乳剂的递送的标志)。在外部给药区域中纳米乳剂的施用之 后M小时，在0小时和8小时，在真皮的外部、中间和内部区域中检测到可测量数量的纳米 乳剂，其超过4 μ g/g纳米乳剂的最小杀真菌浓度(MFC9tl)。图M图示了在外部给药区域中的单次施用之后M小时，在表皮内测试的0. 5 %纳 米乳剂的横向扩散，在外部、中间和内部区域中检测到可测量数量的纳米乳剂(CPC的测量 作为纳米乳剂的递送的标志)。图25图示了在外部给药区域中的单次施用之后对小时，在真皮内测试的0.5%纳 米乳剂的横向扩散，在外部、中间和内部区域中检测到可测量数量的纳米乳剂(CPC的测量 作为纳米乳剂的递送的标志)。
具体实施例方式本发明提供了用于治疗、预防和/或治愈人类受试者中真菌、酵母菌和/或霉菌感 染的方法和组合物，所述方法包括将纳米乳剂局部或皮内施用于所述人类受试者。真菌、酵 母菌和/或霉菌病原体可以是任何已知的真菌、酵母菌和/或霉菌病原体，包括本文描述的 任何这样的病原体。在示范性的方法和组合物中，所述病原体是毛癣菌属物种、表皮癣菌属 物种、念珠菌属物种、小孢子菌属物种、曲霉属物种、拟青霉属物种、镰刀菌属物种、支顶孢 属物种、毛壳菌属物种、茎点霉属物种、帚霉属物种、柱霉属物种、链格孢属物种、附球菌属 物种、弯孢霉属物种或其任何组合。本发明涵盖治疗由这些属的任何物种引起的感染的方 法和组合物。毛癣菌属物种的实例包括阿耶罗毛癣菌、同心性毛癣菌、马毛癣菌、意瑞奈斯毛癣 菌、淡黄毛癣菌、光辉毛癣菌、趾间毛癣菌、麦格毛癣菌、须毛癣菌、豆形毛癣菌、红色毛癣 菌、许兰毛癣菌、猴毛癣菌、苏丹奈斯毛癣菌、土毛癣菌、断发毛癣菌、范布鲁西米氏毛癣菌、 疣状毛癣菌、紫色毛癣菌和杨德氏毛癣菌。表皮癣菌属物种的实例包括絮状表皮癣菌(旧物种的废弃异名包括 E. clypeiforme、Ε. clypeiforme、Ε. inguinale、Ε. plicarum、Acrothecium floccosum、 Trichophyton cruris、Trichophyton floccosum>Trichophyton inguinale>Trichophyton intertriginis 禾口 Trichothecium floccosum)禾口斯托克表皮痛菌。念珠菌属物种的实例包括白色念珠菌、近平滑念珠菌(C.parapsiliosis)和克鲁 斯氏念珠菌。念珠菌属是一种酵母菌，它是全球伺机性真菌病最常见的起因。它也是人类 皮肤和粘膜的常见定殖者。念珠菌属包括约1 个物种。在这些物种之中，有六种在人类 感染中最常被分离。而白色念珠菌是最丰富的和重要的物种，热带念珠菌、光滑念珠菌、近 平滑念珠菌、克柔念珠菌和葡萄牙念珠菌也作为念珠菌属感染的致病病原体被分离。其他 念珠菌属物种包括乳酒念珠菌、高里念珠菌和杜氏念珠菌。重要地是非白色念珠菌属物种 (例如，光滑念珠菌和克柔念珠菌)的感染近来增加(Abi-Mid等人“The epidemiology of hematogenous candidiasis caused by different Candida species, "Clin. Infect. Dis. ,24 :1122-1128(1977) ；Aisner等人"Torulopsis glabrata infections in patients with cancer Increasing incidence and relationship to colonization, "Am. J. Med., 61 :23-28 (1976) ；Arif ^Α "Techniques for investigation of an apparent outbreak
26of infections with Candida glabrata,"J Clin Microbiol.，34 :2205-9(1996))。接 受氟康唑预防的患者特别有风险发生氟康唑抗性克柔念珠菌和光滑念珠菌菌株的感染。 (Barchiesi ^A "Emergence of oropharyngeal candidiasis caused by non-albicans species of Candida in HIV-infected patients (letter)，，，Eur. J. Epidemiol.，9 455-456(1993)。尽管如此，在感染中遇到的念珠菌属物种的多样性正在扩大，在过去很少 起作用的其他物种的出现现在是可能的。由念珠菌属物种引起的感染一般被称为念珠菌 病。念珠菌病的临床谱极其多样。身体的几乎任何器官或全身可受到影响。念珠菌病可以 是浅表性的和局部的，或是深层和散布的。散布的感染起因于来自主要感染位置的血行播 散。白色念珠菌是所有物种中最为病原性的并且是最常遇到的物种。它附着于宿主组织， 产生分泌性天冬氨酰蛋白酶和磷脂酶以及从酵母菌转化成菌丝形态的能力是它的致病性 的主要决定因素。小孢子菌属包括17种常规物种。在这些物种之中，最重要的是奥杜安小孢子 菌、鸡禽小孢子菌(M. gallinae)、铁锈色小孢子菌、扭曲小孢子菌(M. distortum)、矮小小 孢子菌、犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、库克小孢子菌(M. cookie)和范布瑞西米小孢子菌 (M. vanbreuseghemii).小孢子菌属是引起皮肤癣菌病的三个属之一。皮肤癣菌病是用于 定义毛发、皮肤、指甲中由任何皮肤真菌物种而引起的感染的一般术语。类似于其他皮肤 真菌，小孢子菌属具有降解角蛋白的能力，因而可以驻留在皮肤和皮肤的附件中，并保持为 非侵害性。和角蛋白酶一样，真菌的蛋白酶和弹性蛋白酶可以作为毒力因子。值得注意的 是，除了不感染毛发的桃色小孢子菌(Microsporum persicolor)以外，小孢子菌属物种主 要感染毛发和皮肤。指甲感染不那么常见。感染的病理取决于物种的天然储备。土源性物 种(Geophilic spp.)是经由与土壤接触获得的。动物源性物种从感染的动物传播。直接 或间接的(经由污染物)人类与人类间的传播涉及人源物种。可以观察到无症状的携带。 和其他健康的宿主一样，免疫受损的患者也可受到感染。曲霉属包括超过185种物种。约20个物种迄今为止被报道作为人类中伺机性感 染的致病病原体。在这些物种之中，烟曲霉是最常分离的物种，之后是黄曲霉和黑曲霉。棒 曲霉、灰绿曲霉群、构巢曲霉、米曲霉、土曲霉、焦曲霉和花斑曲霉是较不常见地作为伺机性 致病病原体被分离的其他物种。在所有丝状真菌之中，曲霉属通常是从侵入性感染中最常 分离的一种。它是继念珠菌属之后伺机性真菌病中第二常见的真菌。可以涉及人体中几 乎任何器官或全身。可能发生甲癣、鼻旁窦炎、脑曲霉病、脑膜炎、心内膜炎、心肌炎、肺曲 霉病、骨髓炎、耳霉菌病、内眼炎、皮肤曲霉病、肝脾曲霉病以及曲霉真菌血症和播散性曲 霉病。(Arikan 等人，“Primary cutaneous aspergillosis in human immunodeficiency virus-infected patients :Two cases and review, "Clin. Infect. Dis. ,27 641-643 (1998) ；Denning，D. W.，“Invasive aspergillosis，，，Clin. Infect. Dis.，26 781-803 (1998) ；Gefter, W. B. , "The spectrum of pulmonary aspergillosis，，，Journal of Thoracic Imaging，7 :56-74 (1992) ；Gumbo 等人，“Aspergillus valve endocarditis in patients without prior cardiac surgery,，，Medicine，79 :261-268 (2000)； Gupta 等 人，“Combined distal and lateral subungual and white superficial onychomycosis in the toenails，，，J. Am. Acad. Dermatol.，41 :938-44 (1999) ；Katz 等人， "Ocular aspergillosis isolated in the anterior chamber，，，Ophthalmology，100 1815-1818(1993))由于导管和其他设备而引起的曲霉病的医院内发生也是可能的。医院环 境中的结构构成了在尤其是嗜中性白细胞减少的患者中发生曲霉病的主要风险。曲霉属物 种还可以是在由于肺结核、结节病、支气管扩张、肺尘埃沉着病、关节强硬性脊椎炎或赘生 物而产生的早先发展的肺部空腔中的局部定殖者，表现为不同的临床实体，称为曲霉瘤。曲 霉瘤还可存在于肾脏中。 拟青霉属含有几个物种。最常见的是淡紫拟青霉和宛氏拟青霉。拟青霉属物 种可导致人类中的各种感染。这些感染有时称为拟青霉病。由于拟青霉而导致的角膜 溃疡、角膜炎和内眼炎可能在延长佩戴隐形眼镜或眼部手术之后发生。(Pettit等人， “Fungal endophthalmitis following intraocular lens implantation. A surgical epidemic，” Arch. Ophthalmol.，98 1025-1039 (1980).)拟青霉属是免疫受损的宿主 中出现的伺机性真菌病的致病病原体之一。(Groll等人，“Uncommon opportunistic fungi :new nosocomial threats," Clin. Microbiol. Infect. ,7 :8-24(2001)) i _ 白勺 &月夫ft 禾中胃(Orth ·入，“Outbreak of invasive mycoses caused by Paecilomyces lilacinus from a contaminated skin lotion，，，Ann. Intern. Med.， 125 :799-806(1996))这些感染可涉及人体几乎任何器官或全身。软组织(Williamson 等 人，“Successful treatment of Paecilomycesvarioti infection in a patient with chronic granulomatous disease and a review of Paecilomyces species infections，”Clin. Infect. Dis.，14 :1023-1(^6(1992))、肺部(Byrd 等人，“Paecilomyces variotii penumonia in a patient with diabetes mellitus，，，J. Diabetes Compile., 6 :150-153(1992))和皮肤感染(Orth 等人；Safdar，Α·，“Progressive cutaneous hyalohyphomycosis due to Paecilomyces lilacinus :Rapid response to treatment with caspofungin and Itraconazole，” Clin. Infect. Dis.，34 :1415—1417 0002))、蜂窝 组织炎(Jade 等人，“Paecilomyces lilacinus cellulitis in an immunocompromised patient, "Arch. Dermatol. ，122 1169-70 (1986)) Λ ￥^ (Fletcher ^A, "Onychomycosis caused by infection with Paecilomyces Iilanicus，” Br.J.Dermatol.，139 : 1133-1135(1998))、鼻旁窦炎(Gucalp 等人，“Paecilomyces sinusitis in an immunocompromised adult patient :Case report and review，，，Clin· Infect· Dis·，23 : 391-393 (1996) ；Rockhi 11 等人，“Paecilomyces lilacinus as the cause of chronic maxillary sinusitis，”J. Clin. Microbiol.，11 :737-739 (1980))、中耳炎(Dhindsa 等人， “Chronic supparative otitis media caused by Paecilomyces variotii,“ J. Med. Vet. Myco 1.，33 :59-61 (1995))、心内膜炎(Haldane 等人，“Prosthetic valvular endocarditis due to the fungus Paecilomyces, “ Can. Med. Assoc. J.，111 :963_5，968 (1974))、骨髓 炎(Cohen-Abbo 等人，“Multifocal osteomyelitis caused by Paecilomyces varioti in a patient with chronic granulomatous disease，，，Infection，23 :55-7 (1995))、 腹膜炎(Rinaldi 等人，"Paecilomyces variotii peritonitis in an infant on automated peritoneal dialysis, “ Pediat. Nephrol. , 14 :365-366 (2000))和导管相关 的真菌血症(Tan 等人，"Paecilomyces lilacinus catheter-related fungemia in an immunocompromised pediatric patient，，，J· Clin· Microbiol·，30 :2479-2483 (1992))都 已经被报道。
与作为常见的植物病原体一样，镰刀菌属是人类中浅表性感染和全身感染的致病 病原体。由于镰刀菌属物种而产生的感染被统称为镰刀菌病。最有毒力的镰刀菌属物种是 腐皮键刀菌(Mayayo 等人，"Experimental pathogenicity of four opportunist Fusarium species in a murine model，” J. Med. Microbiol.，48 :363-366 (1999))。外伤是由于镰 刀菌属菌株而发生皮肤感染的主要诱因。另一方面，在免疫抑制的宿主，尤其是在嗜中性 白细胞减少患者中和移植患者中，发生传播性伺机性感染(Vartivarian等人，"Emerging fungal pathogens in immunocompromised patients !classification, diagnosis， and management，” Clin.Infect. Dis. 17 :S487_91(1993) ；Venditti 等 人，"Invasive Fusarium solani infections in patients with acute leukemia，，，Rev. Infect. Dis.， 10 :653-660 (1988))。在实体器官移植之后镰刀菌感染易于保持在局部并且比在患有血液 恶性肿瘤的患者和骨髓移植患者中发生的镰刀菌感染具有更好的结果(Sampathkumar等 人,"Fusarium infection after solid-organ transplantation,"Clin. Infect. Dis. ,32 1237-124(K2001))。已经报道了由于镰刀菌物种引起的角膜炎(Tanure等人，‘‘Spectrum of fungal keratitis at Wills Eye Hospital, Philadelphia, Pennsylvania, "Cornea,19 307-12 (2000))、内目艮炎(Louie 等人，"Endogenous endophthalmitis due to Fusarium case report and review,，，Clin. Infect. Dis.，18 :585-8 (1994))、中耳炎(Wadhwani 等 人，‘‘Fungi from otitis media of agricultural field workers, "Mycopathologia, 88 :155-9(1984))，甲癣(Romano 等人，‘‘Skin and nail infections due to Fusarium oxysporum in Tuscany, Italy, "Mycoses, 41 :433-437 (1998))、皮肤感染(Romano 等 人)，特别是烧伤创口的感染，足分枝菌病、鼻旁窦炎、肺部感染(Rolston，K. V. I.， “The spectrum of pulmonary infections in cancer patients，“Curr.Opin. Oncol, 13:218-2230001))、心内膜炎、腹膜炎、中央静脉导管感染、脓毒性关节炎、传播性感 染禾口真菌血症(Yildiran 等人，"Fusarium fungaemia in severely neutropenic patients,，，Mycoses, 41 :467-469 (1998))。支顶孢属是真菌性白色颗粒足分枝菌病的致病病原体之一。还报道了由于支顶孢 属而引起的甲癣、角膜炎、内眼炎、心内膜炎、脑膜炎、腹膜炎和骨髓炎的罕有病例。已知这 种真菌在免疫受损的患者，例如骨髓移植接受者中引起伺机性感染。有时观察到由于支顶 孢属物种而引起的人工植入物感染。毛壳菌属含有几个物种。最常见的有C.atrobrurmeum、粪生毛壳菌、球毛壳菌和 C. strumarium。毛壳菌属物种属于引起全称为暗色丝孢霉病的感染的真菌。已经在免疫受 损的宿主中报道了由于Chaetomium atrobrurmeum而引起的致命的深度真菌病。也可由毛 壳菌属物种引起脑脓肿、腹膜炎、皮肤病变和甲癣。茎点霉属含有几个物种。从人类感染分离的大部分菌株没有被鉴定为物种水平。 茎点霉属物种是暗色丝孢霉病的罕见病因之一。感染通常在外伤之后发生，免疫抑制是发 生感染的主要风险因素。这些感染可能是皮肤的、皮下的、角膜或(罕有地)全身性的。最常见的帚霉属物种是短帚霉。其他非色素的物种包括S. candidEuS.koningii、 顶孢帚霉和黄帚霉。暗色或棕色成员包括S. cinerea、S. trigonospora、布朗氏帚霉、 S. chartarum、S. fusca和S. asperula。帚霉属物种可导致人类中的各种感染。它是引起甲 癣，特别是脚指甲的甲癣的真菌之一。已经报道了由于帚霉属物种而引起的皮肤病变、足分枝菌病、侵入性的鼻旁窦炎、角膜炎、内眼炎、肺部感染、心内膜炎、脑脓肿和传播性感染。侵 入性帚霉感染主要在免疫受损的宿主，例如骨髓移植接受者中见到。这些感染是高度致命 的。柱霉属物种包括暗色柱霉、S. hyalinum、S. infestans、日本柱霉和木生柱霉。柱霉 属物种是指甲或皮肤感染的偶见的病原体。也注意到皮下或传播性感染的一些病例。链格孢属目前含有约50个物种。在这些之中，A. alternate是从人类感染中最 常分离的一种。而A. chartarum、石竹链格孢、A. geophilia、感染链格孢、匍柄链格孢和 A. teunissima是从感染分离的其他链格孢属物种，某些被报道为致病病原体的链格孢属菌 株仍未具体说明。链格孢属物种特别是在具有免疫抑制的患者中，例如，骨髓移植患者中作 为伺机性病原体出现。它们是暗色丝孢霉病的致病病原体之一。已经报道了由于链格孢而 引起的甲癣、鼻旁窦炎、溃烂的皮肤感染和角膜炎，以及内脏感染和骨髓炎的病例。在免疫 活性的患者中，链格孢定殖于鼻旁窦，导致慢性肥大性鼻旁窦炎。在免疫受损的患者中，定 殖可最终发展为侵入性疾病。它是农田工作者中中耳炎的致病病原体之一。弯孢霉属含有几个物种，包括短孢弯孢霉(C. brachyspora)、暗色弯孢霉、膝弯孢 霉、新月弯孢霉、苍白弯孢霉、塞内加尔弯孢霉和疣状弯孢霉。新月弯孢霉是人类和动物中 最普遍的疾病起因。弯孢霉属物种属于暗色丝孢霉病的致病病原体。伤口感染、足分枝菌 病、甲癣、角膜炎、过敏性鼻旁窦炎、大脑脓肿、大脑炎、肺炎、过敏性支气管肺疾病、心内膜 炎、透析相关的腹膜炎和传播感染可由弯孢霉属物种引起。新月弯孢霉是最常遇到的物种。 重要地，感染可在具有完整免疫系统的患者中发生。然而，类似于几种其他的真菌属，弯孢 霉属近来也作为感染免疫受损的宿主的伺机性病原体出现。由这些病原体引起的真菌感染是广泛的，目前可用的治疗具有显著的局限性和/ 或有限的成功。例如，红色毛癣菌是引起足癣(香港脚)、股癣(股癣)和皮肤癣菌病(环 癣)最常见的真菌。由红色毛癣菌引起的其他常见的皮肤疾病包括，但不限于发癣(头皮 的真菌毛囊炎)、须癣(胡须的真菌毛囊炎)、马约基肉芽肿(腿的真菌毛囊炎)和甲癣。虽 然红色毛癣菌是引起手指甲真菌感染的最常见的皮肤真菌，但是还存在其他的皮肤真菌。 须毛癣菌是皮肤真菌组群中第二常见的真菌指甲感染病源。圆癣是通常热的、潮湿气候中更为常见的感染。红色毛癣菌是全球最常见的传染 原，是47%的圆癣病例的病源。断发毛癣菌是全球分布的人源性真菌，其引起皮肤、指甲和 头皮的炎性或慢性非炎性细小鳞状病变。断发毛癣菌是导致发癣的最常见的皮肤真菌，具 有人源性发癣感染的人更可能发生相关的圆癣。因此，由断发毛癣菌引起的圆癣的发病率 正在提高。犬小孢子菌是第三常见的致病微生物，与14%的圆癣感染相关。参见http:// emedicine. medscape. com/article/1091473-overview.近来有报道在非免疫受损患者和免疫受损患者中由非皮肤癣菌霉菌引起的 真菌感染增力口(Malani 等人，"Changing epidemiology of rare mould infections implications for therapy, "Drugs,67 :1803-1812(2007) ；Tosti 等 K, J. Am. Acad. Dermatol. ,42 :217-224(2000))。这样的生物体包括但不限于曲霉属物种、镰刀菌属物 种、足放线病菌属物种、拟青霉属物种、帚霉属物种、柱霉属物种、毛壳菌属物种、链格孢属 物种、支顶孢属物种和弯孢霉属物种。纳米乳剂包含具有平均直径小于约IOOOnm的液滴，所述纳米乳剂液滴包含水相、至少一种油、至少一种表面活性剂和至少一种有机溶剂。“局部”应用可以是施用于任何浅 表皮肤结构、毛发、毛干、毛囊、眼睛或其任何组合。在一些实施方式中，在指甲周围、指甲下方、穿过指甲或通过指甲中的缺损来扩散 的纳米乳剂包含另外的活性剂。优选的，第二活性剂是抗真菌剂。待治疗的患者可遭受真菌、酵母菌和/或霉菌感染，例如，癣感染、皮肤癣菌病和 皮肤癣菌瘤。此外，所述真菌、酵母菌和/或霉菌感染可以是足癣、甲癣、圆癣、股癣、发癣、 手癣、须癣、面癣、花斑癣或真菌角膜炎。在本发明的一个方面，患者可患有甲癣。在本发明的一种实施方式中，待治疗、预防或治愈的真菌感染是甲癣。在本发明 的这个方面中，局部施用是施用于感染的指甲、感染的指甲周围的皮肤或其组合，在施用 之后，所述纳米乳剂在指甲周围、在指甲之下、穿过指甲、通过指甲中的缺损、或其组合来扩 散。用于治疗皮肤和/或指甲的真菌/酵母菌/霉菌感染的常规药物中存在的难题之 一是真菌指甲感染一般位于指甲板下方的深部，甚至进入指甲基质，局部施用的常规治疗 极难或不能以足够的量穿透指甲以产生治疗有效的处理。口服施用的药物可解决局部施用 治疗中存在的这个难题，但是口服施用的药物全身起作用，因而，可导致不期望的毒性，例 如，肝脏毒性。向患者警告了这一点并可用肝功能测试来监测患者。全身性药物可在谱系 上有限制，不能覆盖引起甲癣的所有真菌、酵母菌和霉菌。惊讶地发现局部施用的纳米乳剂与口服施用的常规抗真菌剂治疗相比，在治疗由 毛癣菌属物种、表皮癣菌属物种、念珠菌属物种、小孢子菌属物种、曲霉属物种、拟青霉属物 种、镰刀菌属物种、支顶孢属物种、毛壳菌属物种、茎点霉属物种、帚霉属物种、柱霉属物种、 链格孢属物种、附球菌属物种、弯孢霉属物种或其任何组合引起的感染方面一样有效或更 有效。这是重要的，因为相对于口服施用药物而产生的全身性活性，当局部施用时产生局部 的位点特异性活性是极为优选的。如在背景技术部分提到的，全身性的抗真菌药物具有许 多副作用，一些是非常严重的。此外，纳米乳剂可施用于诸如指甲之类的覆盖感染的阻挡物并可在诸如指甲之类 的覆盖感染的阻挡物周围施用，在施用之后，所述纳米乳剂迁移(或横向在下方扩散)到阻 挡物之下来有效地到达感染处并消灭感染。获得这种结果而没有全身性的吸收，因为在治 疗的受试者的血浆中没有发现可测量数量的纳米乳剂(通过测量在纳米乳剂中存在的任 何诸如阳离子表面活性剂之类的表面活性剂或洗涤剂是否被吸收到血流中来测定)。本发明的纳米乳剂包含FDA批准用于人类消费的表面活性剂和“公认安全 的”(GRAS)常见的食品物质。纳米乳剂的制剂中使用的成分全部列于批准的药物产品中的 无活性成分的FDA的目录中。本发明的纳米乳剂的图解作用机制在图4中描绘。具有平均直径小于约IOOOnm 的纳米乳剂液滴可施用于受感染的指甲周围的皮肤和组织。在图4中描绘了脚趾甲。纳米 乳剂液滴通过皮肤毛孔/浅表皮肤结构、近中心和外侧的甲褶和指甲下方，迁移到达真菌、 酵母菌或霉菌感染的位置。发明人不希望受到理论的限制，认为纳米乳剂液滴裂解真菌菌 丝、细胞和孢子，从而“杀死”真菌、霉菌或酵母菌。具体地，图3图示比较了对于红色毛癣菌的真菌分离物，本发明的纳米乳剂的 杀真菌的效果和目前用于治疗真菌感染的其他抑真菌药物的效果，表示为最低抑菌浓度(MIC)和最小杀真菌浓度(MFC)值。(A)纳米乳剂(“NB-002，，) ； (B)特比萘芬；(C)环吡酮 胺；和(D)伊曲康唑。当用于治疗真菌感染时，环吡酮胺是局部施用，而特比萘芬和伊曲康 唑是口服施用的药物。令人惊讶地，通过比较显示了本发明的纳米乳剂针对红色毛癣菌是 杀真菌的，而环吡酮胺、特比萘芬和伊曲康唑针对红色毛癣菌仅仅是抑真菌的。与特比萘芬 和伊曲康唑的口服和全身作用相比，即使纳米乳剂是局部施用，上述比较结果也是确切的。 纳米乳剂的MIC和MFC (有时也称为“MLC”)值基本上是相等的，这意味着作用机制是杀真 菌(MFC MIC比值小于或等于四)。然而，例如特比萘芬的药物的MIC和MLC值相差大于 四倍，这意味着药物不总是杀真菌。与抑真菌剂的治疗相比，杀真菌剂的治疗是更加理想 的，因为杀真菌剂可更加有效的完全“治愈”感染以及防止感染复发。例如，图11显示了示范性的纳米乳剂(NB-002，包含水性介质、大豆油、作为非离 子表面活性剂的吐温20 、乙醇、作为阳离子表面活性剂的氯化十六烷基吡啶(CPC)、EDTA 和水)对生长的菌丝和孢子的作用。图IlA显示了在纳米乳剂施用之前的菌丝，图IlB和 图12显示了在纳米乳剂施用之后的菌丝。在纳米乳剂施用之后，纳米乳剂液滴与菌丝细胞 表面相互作用，导致形成气泡(凸出)。类似地，图IlC显示了在纳米乳剂施用之前的孢子， 图IlD显示了纳米乳剂施用之后的孢子。图IlD清楚地显示了施用根据本发明的纳米乳剂 导致孢子的裂解和破坏。时间-杀死实验验证了用纳米乳剂处理的菌丝或孢子是非存活的 (图 10)。纳米乳剂包含具有平均直径小于约IOOOnm的液滴，所述纳米乳剂包含水相、至少 一种油、至少一种表面活性剂或洗涤剂和至少一种有机溶剂。在本发明的一种实施方式中， 所述纳米乳剂中存在的表面活性剂是阳离子表面活性剂。本发明的纳米乳剂中可存在一种 以上表面活性剂或洗涤剂。例如，所述纳米乳剂可以包含阳离子表面活性剂与非离子表面 活性剂的组合。在本发明的另一实施方式中，所述纳米乳剂进一步包含螯合剂。“局部”施 用可以是施用于任何浅表皮肤结构、毛发、毛干、毛囊、眼睛或其任何组合。本发明的有机溶 剂和水相可以是非磷酸盐式溶剂。在本发明的一些实施方式中，诸如阳离子表面活性剂之 类的表面活性剂被用作“标记物”来测量吸收进入表皮和真皮的纳米乳剂(参见例如图13 和图14)。在一些实施方式中，也将除了纳米乳剂之外的活性剂，例如，抗真菌剂、抗酵母剂 或抗霉菌剂掺入所述纳米乳剂来实现促进活性剂的吸收，从而提高所述活性剂在组织中的 杀死效果(图15至图18)。所述纳米乳剂包含高能量纳米尺寸的液滴，其渗透皮肤毛孔和毛囊进入表皮和真 皮，在表皮和真皮中接触时杀死真菌(或病毒、细菌、霉菌，等等)。参见图1至图2和图13。 具有适合尺寸的液滴可渗透皮肤毛孔和毛囊，但是可被上皮细胞之间的紧密连接隔绝，因 而不破坏组织基质或进入血管。这减小了皮肤刺激和全身吸收，但是也提供了在表皮和真 皮组织中具有高生物利用度而不导致破坏正常上皮基质的组合物。例如，本文描述的数据 确认了本文所述的纳米乳剂经由毛囊途径扩散通过角质层，积累在表皮和真皮组织中而不 破坏正常的上皮基质。在表皮和真皮中达到的纳米乳剂的浓度大大高于抗感染活性所需的 浓度。理论上，纳米乳剂液滴通过膜去稳定作用杀死真菌、病毒、霉菌、酵母菌等等，其 中，所述纳米乳剂液滴与细胞外表面相互作用，引起裂解。例如，纳米乳剂液滴已经显示了
32附着于诸如红色毛癣菌之类的真菌的菌丝体，看起来与细胞表面融合，形成气泡，从而导致 死亡(图10至图12)。发现本文所述的纳米乳剂对菌丝的形态和生存力具有显著效果，甚 至在最小的暴露时间之后具有显著效果。此外，由于本发明的纳米乳剂在非生长条件下进 行测试(菌丝和小分生孢子悬浮于水中)，它们不需要重复起效。由于理论上纳米乳剂具有 经由真菌细胞表面的去稳定作用的“接触时杀死”的作用机制，它们不可能产生抗性；列举 了显示不会发生自发抗性、或自发抗性不稳定的实验(实施例7)。此外，已经显示了本发明的纳米乳剂在组织平面内横向扩散(图21至图25)到没 有表皮损伤的感染位置。具体地，以下实施例描述了根据本发明的纳米乳剂沿着组织平面 横向扩散到距离皮肤施用位置约Icm的感染位置。这使得能够治疗存在于阻挡物之下的感 染，例如，人类手指甲或脚趾甲。这对于甲癣的治疗特别具有吸引力，在甲癣中皮肤真菌感 染处在指甲板之下。因而，纳米乳剂不依赖于渗透而有效的穿过指甲板。此外，实施例显示了包含另外的活性剂的纳米乳剂横向扩散到不直接位于施用 位置之下的区域(实施例12至14)。适合的活性剂包括但不限于，任何抗真菌剂，包括但 不限于任何适合的抗真菌剂种类，包括但不限于(1)聚烯抗真菌剂，例如，那他霉素、龟菌 素、非律平、制霉菌素、两性霉素B和坎底辛；(2)咪唑抗真菌剂，例如，咪康唑、酮康唑、克霉 唑、益康唑、联苯苄唑、布康唑、芬替康唑、异康唑、奥昔康唑、舍他康唑、硫康唑、噻康唑；(3) 三唑抗真菌剂，例如，氟康唑、伊曲康唑、艾沙康唑、瑞扶康唑、泊沙康唑、伏立康唑、特康唑; (4)烯丙胺抗真菌剂，例如，特比萘芬、阿莫罗芬、萘替芬和布替萘芬；( 棘白菌素抗真菌 剂，例如，阿尼芬净、卡泊芬净和米卡芬净；(6)其他抗真菌剂，例如，苯甲酸(具有抗真菌 性质，但是必须与角质层分离剂，例如维特飞尔德药膏(Whitfield’ s Ointment)、环吡酮 胺、托萘酯、十一烯酸、氟胞嘧啶(或5-氟胞嘧啶)、灰黄霉素和卤普罗近联合)；以及(7) 可选药剂，例如，大蒜素(从压碎的大蒜产生的)、茶树油(SI0 4730，“白千层属的油，萜品 烯-4-醇型”)、香茅油、碘(卢戈尔氏溶液)、柠檬草、橄榄叶子、橙油、玫瑰草油、广藿香、香 柠桃木、蒜楝木种子油、椰子油、锌(锌膳食增补剂或天然食物来源，包括南瓜籽和小鸡豌 豆)以及硒((硒膳食增补剂或天然食品来源，包括巴西坚果)。这使得能够治疗存在于阻 挡物(例如，人类手指甲或脚趾甲)之下的感染。这对于甲癣的治疗特别具有吸引力，在甲 癣中皮肤真菌感染处在指甲板之下。因而，纳米乳剂不必依赖于渗透而有效的穿过指甲板。在本发明的另一实施方式中，真菌、酵母菌和/或霉菌病原体不表现出对根据本 发明的纳米乳剂产生抗性(实施例7)。具体而言，如在以下的实施例中描述的，当观察到对 根据本发明的纳米乳剂的表型抗性时，所测试的分离物都不是稳定对抗纳米乳剂。这与本 文所述的和实施例中描述的本发明的纳米乳剂均一的杀真菌活性是一致的。本发明的又一益处是本文所述的纳米乳剂提供了广泛覆盖来对抗引起甲癣的所 有主要病原体，所述主要病原体包括但不限于红色毛癣菌、须毛癣菌和絮状表皮癣菌。参 见实施例1。具体而言，本发明的示范性的纳米乳剂与常规的抗真菌药物(伊曲康唑、特比 萘芬和环吡酮胺)在杀死红色毛癣菌、须毛癣菌和絮状表皮癣菌方面的比较说明，所述纳 米乳剂在杀死引起甲癣的主要病原体方面与常规的抗真菌药物一样有效或比常规的抗真 菌药物更有效。参见实施例1。此外，如在实施例6中描述的，根据本发明的纳米乳剂还表现出针对所有非皮肤 癣菌霉菌的广泛有效性，所述非皮肤癣菌霉菌例如曲霉属物种、拟青霉属物种、镰刀菌属物种、支顶孢属物种、帚霉属物种、足放线病菌属物种、柱霉属物种、链格孢属物种、黑附球菌、 弯孢霉属物种、茎点霉属物种和毛壳菌属物种。此外，所述纳米乳剂显示了针对较不常见的 诸如疣状毛癣菌和Trichophyton soundanense之类的皮肤真菌物种的活性。在本发明的一种实施方式中，所述纳米乳剂中存在的表面活性剂是阳离子表面活 性剂。本发明的纳米乳剂中可存在一种以上表面活性剂或洗涤剂。例如，纳米乳剂可以包 含阳离子表面活性剂与非离子表面活性剂的组合，或与阴离子的和/或两性离子的和/或 阳离子表面活性剂的组合和/或它们的任何组合。在本发明的另一实施方式中，所述纳米 乳剂进一步包含螯合剂。“局部”应用可以是施用于任何浅表皮肤结构、毛发、毛干、毛囊或 其任何组合。本发明的有机溶剂和水相可以是非磷酸盐式溶剂。在本发明的另一方法中，描述了杀死或预防有需要的人类受试者中的真菌、霉菌 或酵母菌病原体的方法，所述方法包括将纳米乳剂局部施用于所述人类受试者。所述局部 施用是施用于阻挡物周围的皮肤，真菌、酵母菌和/或霉菌感染存在于阻挡物下方，阻挡物 下方的皮肤具有真菌、酵母菌和/或霉菌感染或感染恶化的风险，并且所述纳米乳剂在所 述阻挡物周围、在所述阻挡物之下、通过所述阻挡物中的缺损或其组合扩散。所述阻挡物 可以是指甲、增稠的角质层、毛干、毛囊或其任何组合。纳米乳剂包含具有平均直径小于约 IOOOnm的液滴，所述纳米乳剂包含水相、至少一种油、至少一种表面活性剂或洗涤剂和至少 一种有机溶剂。纳米乳剂本身具有抗真菌活性，并且不需要与其他活性剂联合来获得治疗有效 性。然而，在本发明的一种实施方式中，所述纳米乳剂可以进一步包含在治疗、治愈或缓解 甲真菌病感染方面有用的一种或一种以上其他活性剂，包括但不限于添加另一种抗真菌 剂。用于治疗皮肤和/或指甲的甲癣或真菌/酵母菌/霉菌感染的常规药物中所存在 的难题之一是真菌指甲感染一般位于指甲板下方的深部，甚至进入指甲基质，局部施用的 常规治疗极难以足够的量渗透或不能渗透甲床和基质来产生治疗有效的处理。口服施用的 药物可以解决局部施用治疗中存在的这个难题，但是口服施用的药物全身起作用，因而，可 以导致肝脏毒性。向患者警告这一点，并可用肝功能测试来监测。全身性药物还在谱系方 面有限制，不能覆盖引起甲癣或其他癣感染的所有真菌、酵母菌和霉菌。令人惊讶地，本发明涉及以下发现，本发明的纳米乳剂可以在诸如指甲之类的覆 盖感染的阻挡物周围施用，在施用之后，所述纳米乳剂迁移到阻挡物的下方(或在下方横 向地扩散)，有效到达感染处并消灭感染。此外，获得这种结果而没有全身性吸收，因为在治 疗的受试者的血浆中没有发现可测量数量的纳米乳剂(通过测量在纳米乳剂中存在的诸 如阳离子表面活性剂之类的任何表面活性剂或洗涤剂是否被吸收到血流中来测定)。在本发明的一种实施方式中，本发明的纳米乳剂向待治疗的病症提供了真菌学治 愈(即，用于治疗真菌感染和/或甲癣)。例如，在本发明的方法中，本文所述的纳米乳剂可 以提供真菌学治愈，这定义为在停止治疗后1周、停止治疗后2周、停止治疗后3周、停止治 疗后4周、停止治疗后5周、停止治疗后6周、停止治疗后7周、停止治疗后8周、停止治疗后 9周、停止治疗后10周、停止治疗后11周、停止治疗后12周、停止治疗后1个月、停止治疗 后2个月、停止治疗后3个月、停止治疗后4个月、停止治疗后5个月或停止治疗后6个月 显微镜检查为阴性结果并且培养物检查为阴性结果。这与抗真菌感染的常规局部治疗(例如Penlac )形成对比，所述抗真菌感染的常规局部治疗提供了在停止治疗后最小的真菌 学治愈。在本发明的另一实施方式中，在用本发明的纳米乳剂治疗后，至少约7%、至少约 8%、至少约9%、至少约10%、至少约11%、至少约12%、至少约13%、至少约14%、至少约 15%、至少约16%、至少约17%、至少约18%、至少约19%、至少约20%、至少约21%、至少 约22 %、至少约23 %、至少约M%、至少约25 %、至少约沈%、至少约27 %、至少约观％、至 少约或至少约30%的受治疗的患者群体根据任何上述治疗时间间隔(即，停止治疗后 1周、停止治疗后2周，等等)，表现出治疗的真菌感染和/或甲癣的真菌学治愈。在本发明 的又一实施方式中，与使用常规的非纳米乳剂局部抗真菌治疗(例如Penlac )所获得的 真菌学治愈率相比，本发明的纳米乳剂提供了改善的真菌学治愈率。在本发明的一些实施 方式中，与常规的非纳米乳剂治疗(例如Penlac )相比，根据本发明的纳米乳剂获得的 真菌学治愈与常规的非纳米乳剂治疗的真菌治愈之间的差异是25%或更高、50%或更高、 75%或更高、100%或更高、125%或更高、150%或更高、175%或更高、200%或更高、225% 或更高、250%或更高、275%或更高、300%或更高、325%或更高、350%或更高、375%或更 高、400%或更高、425%或更高、450%或更高、475%或更高或500%或更高。在本发明的一种实施方式中，所述纳米乳剂包含(a)水相；(b)约的油到约 80%的油；(c)约0. 的有机溶剂到约50%的有机溶剂；(d)约0. 001%的表面活性剂或 洗涤剂到约10%的表面活性剂或洗涤剂；(e)约0.0005%到约1.0%的螯合剂；或(f)其 任何组合。在本发明的另一实施方式中，所述纳米乳剂包含(a)约10%的油到约80%的 油；(b)约的有机溶剂到约50%的有机溶剂；(c)以约0. 到约10%的量存在的至少 一种非离子表面活性剂；⑷以约0. 01%到约2%的量存在的至少一种阳离子试剂；(e)约 0.0005%到约1.0%的螯合剂；或(f)其任何组合。所述纳米乳剂可以进一步包含另外的 活性剂，例如，抗真菌剂。在本发明的又一实施方式中，所述纳米乳剂另外包括至少一种适合的或理想的在 治疗甲癣中有用的活性剂。所述活性剂可以以治疗有效量存在，例如，约0. 至约99%、 约3 %至约80 %、约5 %至约60 %、约10 %至约50 %或其任何组合(例如，约3 %至约 10% )。纳米乳剂中存在的每种成分的量是指治疗性的纳米乳剂，而不是体外待测试的纳 米乳剂。这是重要的，因为体外测试的纳米乳剂，例如，在实施例中描述的纳米乳剂，一般比 要用于治疗用途(例如局部使用)的纳米乳剂具有更低浓度的油、有机溶剂、表面活性剂或 洗涤剂，以及螯合剂(如果存在的话)。这是因为体外试验不需要纳米乳剂液滴横贯皮肤或 其他阻挡物。对于局部(或皮内的)应用而言，成分的浓度必需更高以产生治疗性的纳米 乳剂。然而，体外测试的纳米乳剂中使用的每种成分的相对量适合于治疗使用的纳米乳剂， 因而，可成比扩大体外量以制备治疗组合物，并且体外数据可很好的预示局部施用成功。A.定义在此使用如在下文和整个申请中阐述的几个定义来描述本发明。本文使用的“约”会被本领域普通技术人员理解，并且其在一定程度上依赖于使用 该词的语境而变化。如果对于本领域普通技术人员而言在使用该词的语境中不清楚该术语 的使用时，“约”是指具体术语的正负10%。术语“缓冲液”或“缓冲剂”是指当将其添加至溶液中时使得该溶液抵抗PH值的改变的物质。术语“螯合物”或“螯合剂”是指具有可用于键合至金属离子的孤对电子的一个以 上原子的任何物质。术语“稀释”是指利用由PBS或水(例如diH20)或其他水溶性成分构成的水性系 统，将本发明的纳米乳剂或由本发明的纳米乳剂衍生的那些纳米乳剂稀释到期望的浓度。术语“亲水亲油平衡指数”和“HLB指数”是指表面活性剂分子化学结构与它们 的表面活性相关的指数。HLB指数可以通过Meyers (Meyers，Surfactant Science and Technology, VCH Publishers Inc. , New York，pp. 231-245 [1992]，通过引用并入本文)所 描述的多种经验公式来计算。如本文使用的，表面活性剂的HLB指数是在McCutcheon' s Volume 1 :Emulsifiers and Detergents North American Edition, 1996 (通过弓|用并入 本文)中分配给表面活性剂的HLB指数。商售的表面活性剂的HLB指数为0到约70或更 高。在水中具有高溶解度和增溶性质的亲水性表面活性剂处在上述数值范围的高值一端， 而在水中具有低溶解度、在油中是水的良好增溶剂的表面活性剂处在上述数值范围的低值 一端。本文使用的术语“纳米乳剂”包括分散体或液滴，以及其他脂质结构，当与水不混 溶的油相与水相混合时，所述其他脂质结构可由驱动非极性残基(即，长烃链)远离水和驱 动极性头部基团朝向水的疏水力来形成。这些其他脂质结构包括，但不限于单层、稀少层 (paucilamelIar)和多层脂质囊泡、胶束和薄层相。所述液滴具有小于约IOOOnm的平均直径。本文使用的术语“药学上可接受的”或“药理学上可接受的”是指当施用于宿主 (例如，动物或人)时基本上不产生不利的过敏反应或免疫反应的组合物。这样的制剂包括 任何药学上可接受的剂型。本文使用的“药学上可接受的载体”包括任何和所有溶剂、分散 介质、包被、润湿剂(例如，十二烷基硫酸钠)、等渗剂和吸收延迟剂、崩解剂(例如，马铃薯 淀粉或淀粉羟基乙酸钠)，等等。当涉及“稳定的纳米乳剂”时，术语“稳定的”是指所述纳米乳剂保持其作为乳剂 的结构。期望的纳米乳剂结构，例如，可由期望的尺寸范围、乳剂科学的宏观观察结果(是 否可见一个或一个以上层、是否可见沉淀)、PH值以及一种或一种以上成分的稳定浓度来 表征。本文使用的术语“受试者”是指通过本发明的组合物待治疗的生物体。这样的生 物体包括动物(驯养的动物物种，野生动物)和人类。术语“表面活性剂”是指具有极性头部基团和疏水性的尾部的任何分子，所述极性 头部基团积极地倾向于被水溶剂化，所述疏水性的尾部不易被水溶剂化。术语“阳离子表面 活性剂”是指具有阳离子头部基团的表面活性剂。术语“阴离子表面活性剂”是指具有阴离 子头部基团的表面活性剂。本文使用的术语“全身活性药物”被广泛地使用来表明其施用不必靠近感染源并 且其含量可在远离施用位置的位置测出的物质或组合物(例如，口服施用药物，其中药物 的含量在血流中或在组织或器官中发现)。本文使用的术语“局部地”是指本发明的组合物施用于皮肤或感染的组织和粘膜 细胞和组织的表面(例如，肺泡、口腔、舌、舌下、咀嚼粘膜或鼻粘膜，以及中空器官或身体
36空腔中的其他组织和细胞)。本文使用的术语“局部活性剂”是指被施用于皮肤或粘膜表面的本发明的组合物。 会在受试者的施用(接触)位置之处或附近产生期望的药理学结果。B.本发明的纳米乳剂的性质本发明提供了在有需要的人类受试者中杀死引起真菌、酵母菌和/或霉菌感染的 真菌、酵母菌和/或霉菌病原体的方法，其中所述真菌、酵母菌和/或霉菌病原体是毛癣菌 属物种、表皮癣菌属物种、念珠菌属物种、小孢子菌属物种、曲霉属物种、拟青霉属物种、镰 刀菌属物种、支顶孢属物种、毛壳菌属物种、茎点霉属物种、帚霉属物种、柱霉属物种、链格 孢属物种、附球菌属物种和/或弯孢霉属物种，或其组合。所述方法包括将治疗有效量的纳 米乳剂局部或皮内施用于人类或动物受试者。此外，本发明的纳米乳剂在局部施用之后，能够穿透天然阻挡物，所述天然阻挡物 通常对抗人体中其他局部施用的药剂的渗透。本发明的纳米乳剂有效地治疗和/或控制真 菌、酵母菌、病毒和/或霉菌感染，而不被全身地吸收和/或引起对施用位置的明显刺激。所 述纳米乳剂液滴横贯皮肤毛孔和毛囊。此外，因为已经突破了天然的皮肤阻挡物，所述纳米 乳剂可以被损伤的或患病的皮肤、外侧或近中心甲褶和/或甲床部分吸收。根据本发明的 纳米乳剂不完全依靠渗透指甲到达真菌感染的位置、甲床和/或基质。所述纳米乳剂通过 杀死或抑制真菌、酵母菌和/或霉菌病原体的生长，引起真菌、酵母菌和/或霉菌病原体失 去致病性或其任何组合来有效地治疗真菌、酵母菌和/或霉菌感染。本发明的纳米乳剂有效地治疗和/或控制真菌、酵母菌和/或霉菌感染，而不被全 身吸收和/或引起对施用位置的明显刺激。纳米乳剂可以是针对真菌、酵母菌和/或霉菌病原体的杀真菌剂、抑真菌剂或其 组合。在本发明的一种实施方式中，所述纳米乳剂具有窄分布的MIC(最小抑制浓度)和 MFC(最小杀真菌浓度)值。当纳米乳剂是杀真菌剂时，纳米乳剂的MIC和MFC相差小于或等 于四倍。当纳米乳剂是抑真菌剂时，纳米乳剂的MIC和MFC相差大于四倍。参见图3。MFC 有时称为MLC (最小致死浓度)。例如，图3图示比较了对于红色毛癣菌的真菌分离物，本发明的纳米乳剂的杀真 菌效果和目前用于治疗真菌感染的其他抗真菌药物的效果，表示为最小抑制浓度(MIC)和 最小杀真菌浓度(MFC)值。(A)纳米乳剂(“NB-002，，) ； (B)特比萘芬；(C)环吡酮胺；和 (D)伊曲康唑。对于红色毛癣菌的不同的临床分离物，纳米乳剂是持续杀真菌的(MFC MIC 比例< 4)，而其他抗真菌药物产生抑真菌的(MFC MIC >4)或杀真菌的效果。与抑真菌 治疗相比，杀真菌治疗是更加理想的，因为杀真菌剂在完全“治愈”感染以及防止感染复发 方面更有效得多，并且不依赖于功能性免疫系统。此外，纳米乳剂对于真菌、酵母菌和/或霉菌病原体可以是治疗有效的。优选的， 所述纳米乳剂是杀真菌的或抑真菌的，并且对于真菌分生孢子、菌丝和菌丝体、酵母菌单倍 和二倍细胞、和霉菌以及其任何组合是有效的。针对毛癣菌属物种、针对表皮癣菌属物种、 小孢子菌属物种的约0. 25 μ g阳离子试剂/mL到约100 μ g阳离子试剂/mL的MIC值，或针 对念珠菌属物种的约0. 25 μ g阳离子试剂/mL到约32 μ g阳离子试剂/mL的MIC值表明纳 米乳剂抑制真菌或酵母菌或霉菌的生长。在本发明的示范性的实施方式中(1)生物体是毛癣菌属物种，MIC从约0. 25 μ g阳离子试剂/ml到约25 μ g阳离子试剂/ml，和/或MFC从约0.25 yg阳离子试剂/ml到约100 μ g阳离子试剂/ml ；(2)生物体是表皮癣菌属物种，MIC从约0. 25 μ g阳离子试剂/ml到约25 μ g阳离 子试剂/ml，和/或MFC从约0.25 yg阳离子试剂/ml到约100 μ g阳离子试剂/ml ；(3)生物体是念珠菌属物种，MIC从约0. 25 μ g阳离子试剂/ml到约25 μ g阳离子 试剂/ml，和/或MFC从约0.25 yg阳离子试剂/ml到约100 μ g阳离子试剂/ml ；(4)生物体是小孢子菌属物种，MIC从约0. 25 μ g阳离子试剂/ml到约25 μ g阳离 子试剂/ml，和/或MFC从约0.25 yg阳离子试剂/ml到约100 μ g阳离子试剂/ml ；(5)生物体是曲霉属物种，MIC从约0. 25 μ g阳离子试剂/ml到约25 μ g阳离子试 剂/ml，和/或MFC从约0.25 yg阳离子试剂/ml到约100 μ g阳离子试剂/ml ；(6)生物体是拟青霉属物种，MIC从约0. 25 μ g阳离子试剂/ml到约25 μ g阳离子 试剂/ml，和/或MFC从约0.25 yg阳离子试剂/ml到约100 μ g阳离子试剂/ml ；(7)生物体是镰刀菌属物种，MIC从约0. 25 μ g阳离子试剂/ml到约25 μ g阳离子 试剂/ml，和/或MFC从约0.25 yg阳离子试剂/ml到约100 μ g阳离子试剂/ml ；(8)生物体是支顶孢属物种，MIC从约0. 25 μ g阳离子试剂/ml到约25 μ g阳离子 试剂/ml，和/或MFC从约0.25 yg阳离子试剂/ml到约100 μ g阳离子试剂/ml ；(9)生物体是毛壳菌属物种，MIC从约0. 25 μ g阳离子试剂/ml到约25 μ g阳离子 试剂/ml，和/或MFC从约0.25 yg阳离子试剂/ml到约100 μ g阳离子试剂/ml ；(10)生物体是茎点霉属物种，MIC从约0.25 Ug阳离子试剂/ml到约25 μ g阳离 子试剂/ml，和/或MFC从约0.25 yg阳离子试剂/ml到约100 μ g阳离子试剂/ml ；(11)生物体是帚霉属物种，MIC从约0.25 Ug阳离子试剂/ml到约25 μ g阳离子 试剂/ml，和/或MFC从约0.25 yg阳离子试剂/ml到约100 μ g阳离子试剂/ml ；(12)生物体是柱霉属物种，MIC从约0.25 Ug阳离子试剂/ml到约25 μ g阳离子 试剂/ml，和/或MFC从约0.25 yg阳离子试剂/ml到约100 μ g阳离子试剂/ml ；(13)生物体是链格孢属物种，MIC从约0.25 Ug阳离子试剂/ml到约25 μ g阳离 子试剂/ml，和/或MFC从约0.25 yg阳离子试剂/ml到约100 μ g阳离子试剂/ml ；(14)生物体是附球菌属物种，MIC从约0.25 Ug阳离子试剂/ml到约25 μ g阳离 子试剂/ml，和/或MFC从约0.25 yg阳离子试剂/ml到约100 μ g阳离子试剂/ml ；或(15)生物体是弯孢霉属物种，MIC从约0.25 Ug阳离子试剂/ml到约25 μ g阳离 子试剂/ml，和/或MFC从约0.25 yg阳离子试剂/ml到约100 μ g阳离子试剂/ml。本发明的纳米乳剂是安全的并可以成功地治疗和/或完全治愈真菌、酵母菌和/ 或霉菌感染，而不引起明显的皮肤刺激或被全身吸收。所述纳米乳剂结合至真菌细胞表面， 杀死或抑制细胞的生长并防止感染的生长/传播。进一步，本发明的纳米乳剂杀死真菌的 休眠孢子或菌丝，因而限制了疾病复发的可能性。C.本发明的纳米乳剂的稳定性本发明的纳米乳剂在约40°C和约75%的相对湿度下可以是稳定的，持续至少约1 个月的时间、至少约3个月的时间、至少约6个月的时间、至少约12个月的时间、至少约18 个月的时间、至少约2年的时间、至少约2. 5年的时间或至少约3年的时间。在本发明的另一实施方式中，本发明的纳米乳剂在大约25°C和约60%的相对湿 度下可以是稳定的，持续至少约1个月的时间、至少约3个月的时间、至少约6个月的时间、至少约12个月的时间、至少约18个月的时间、至少约2年的时间、至少约2. 5年的时间、或 至少约3年的时间、至少约3. 5年的时间、至少约4年的时间、至少约4. 5年的时间或至少 约5年的时间。在本发明的另一实施方式中，本发明的纳米乳剂在大约4°C下可以是稳定的，持续 至少约1个月的时间、至少约3个月的时间、至少约6个月的时间、至少约12个月的时间、 至少约18个月的时间、至少约2年的时间、至少约2. 5年的时间、至少约3年的时间、至少 约3. 5年的时间、至少约4年的时间、至少约4. 5年的时间、至少约5年的时间、至少约5. 5 年的时间、至少约6年的时间、至少约6. 5年的时间、或至少约7年的时间。D.真菌感染待治疗、预防和/或治愈的真菌、酵母菌和/或霉菌感染可以是癣感染、皮肤癣菌 病或皮肤癣菌瘤。本文所述的真菌感染包括但不限于人类指甲、甲床、指甲基质、指甲板的 感染、甲沟炎、慢性甲沟炎，等等。待治疗、预防和/或治愈的这些病症的具体实例包括但不 限于足癣、甲癣、圆癣、股癣、发癣、手癣、须癣、面癣、花斑癣、甲癣、真菌角膜炎或其任何组
口 o本文定义的甲癣是引起指甲的增厚和变色、有时伴有疼痛和失能的甲床的慢性持 续性真菌感染。甲癣可以由，例如，皮肤真菌或丝状真菌弓I起，所述皮肤真菌或丝状真菌例 如，毛癣菌属物种、表皮癣菌属物种、镰刀菌属物种、曲霉属物种、拟青霉属物种、支顶孢属 物种、柱霉属物种、帚霉属物种、足放线病菌属物种、链格孢属物种、附球菌属物种、弯孢霉 属物种、茎点霉属物种、毛壳菌属物种和小孢子菌属物种。E.病原体在本发明中涉及的真菌感染由毛癣菌属物种、表皮癣菌属物种、念珠菌属物种、小 孢子菌属物种、曲霉属物种、拟青霉属物种、镰刀菌属物种、支顶孢属物种、毛壳菌属物种、 茎点霉属物种、帚霉属物种、柱霉属物种、链格孢属物种、附球菌属物种、弯孢霉属物种或其 组合引起。本发明涵盖治疗这些属的任何物种引起的感染的方法和组合物。在本发明的一种实施方式中，用本发明的纳米乳剂待治疗、预防和/或治愈的真 菌、酵母菌和/或霉菌感染由下列菌引起红色毛癣菌、断发毛癣菌、须毛癣菌、苏丹奈斯 毛癣菌、疣状毛癣菌、阿耶罗毛癣菌、同心性毛癣菌、马毛癣菌、意瑞奈斯毛癣菌、淡黄毛癣 菌、光辉毛癣菌、趾间毛癣菌、麦格毛癣菌、豆形毛癣菌、许兰毛癣菌、猴毛癣菌、土毛癣菌、 断发毛癣菌、范布鲁西米氏毛癣菌、紫色毛癣菌、杨德氏毛癣菌、絮状表皮癣菌、斯托克表 皮癣菌、白色念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠 菌、葡萄牙念珠菌、乳酒念珠菌、高里念珠菌、杜氏念珠菌、犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、 奥杜安小孢子菌、鸡禽小孢子菌、铁锈色小孢子菌、扭曲小孢子菌、矮小小孢子菌、库克小 孢子菌、范布瑞西米小孢子菌、黑附球菌、聚多曲霉、土曲霉、黑曲霉、土曲霉、烟曲霉、黄曲 霉、棒曲霉、灰绿曲霉群、构巢曲霉、米曲霉、土曲霉、焦曲霉、花斑曲霉、淡紫拟青霉、宛氏 拟青霉、尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌、半裸镰刀菌、Chaetomium atrobrunneum、粪生毛壳菌、 求€冑胃、Chaetomium strumarium>Scopulariopsis Candida、Scopulariopsis koningii、TjS 3 # ^ > It灰质Scopulariopsis trigonospora> 布 Il月氏 _、Scopulariopsis chartarum、0音Scopulariopsis asperula> Bh
柱霉、Scytalidium infestans、日本柱霉、木生柱霉、交链格孢、纸链格孢、石竹链格孢、Alternaria geophilia、感染链格孢、匍柄链格孢、极细链格孢、短孢弯孢、暗色弯孢霉、膝 弯孢霉膝弯孢霉、新月弯孢霉、苍白弯孢霉、塞内加尔弯孢霉、疣状弯孢霉或其任何组合。本文定义的霉病包括但不限于由下列物质引起的感染真菌支顶孢属物种、曲霉 属物种(例如，聚多曲霉、土曲霉、黑曲霉)、镰刀菌属物种(例如，尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌、 半裸镰刀菌)、帚霉属物种(例如，短帚霉)、足放线病菌属物种、链格孢属物种、淡紫拟青 霉、Epiccocum nigrum、茎点霉属物种、毛壳菌属物种、弯孢霉属物种和柱霉属物种(例如， 暗色柱霉)。本文定义的酵母菌包括但不限于引起酵母菌感染的念珠菌属物种，所述感染包括 甲周区域和甲床下方的区域的感染、甲癣、指甲营养不良、甲松离和慢性甲沟炎。此外，皮肤 的念珠菌感染可以在手指、脚趾、肛门周围、阴茎、下垂的乳房下方、或在生殖器皮肤皱襞之 间发生。念珠菌属物种的实例包括但不限于白色念珠菌、近平滑念珠菌和克柔念珠菌。F.纳米乳剂本文定义的术语“纳米乳剂”是指分散体或液滴或任何其他脂质结构。本发明中所 涉及的典型的脂质结构包括，但不限于，单层、稀少层(paucilamellar)和多层脂质囊泡、 胶束和薄层相。本发明的纳米乳剂包含液滴，所述液滴的平均直径小于约l，000nm、小于约 950nm、小于约900nm、小于约850nm、小于约800nm、小于约750nm、小于约700nm、小于约 650nm、小于约600nm、小于约550nm、小于约500nm、小于约450nm、小于约400nm、小于约 350nm、小于约300nm、小于约250nm、小于约200nm、小于约150nm或其任何组合。在一种实 施方式中，所述液滴具有大于约125nm以及小于或等于约300nm的平均直径。在不同的实 施方式中，所述液滴具有大于约50nm或大于约70nm，以及小于或等于约125nm的平均直径。1.水相所述水相可以包含任何类型的水相，包括但不限于，水(例如，H20、蒸馏水、自来 水)和溶液(例如，磷酸盐缓冲盐水(PBS)溶液)。在一些实施方式中，所述水相包含pH值 为约4到10、优选地为约6到8的水。所述水可以是去离子的(在下文中“DiH20”)。在一 些实施方式中，所述水相包含磷酸盐缓冲盐水溶液(PBS)。所述水相可以进一步是无菌的和 无热原的。2.有机溶剂本发明的纳米乳剂中的有机溶剂包括但不限于=C1-C12醇类、二醇、三醇、二烷基磷 酸酯、诸如三-η-丁基磷酸酯之类的三烷基磷酸酯、其半合成衍生物及其组合。在本发明的 一个方面，所述有机溶剂是选自非极性溶剂、极性溶剂、质子溶剂或非质子溶剂的醇类。用于纳米乳剂的适合的有机溶剂包括但不限于乙醇、甲醇、异丙醇、甘油、中链甘 油三酯、乙醚、乙酸乙酯、丙酮、二甲亚砜(DMSO)、乙酸、正丁醇、丁二醇、香料醇类、异丙醇、 正丙醇、甲酸、丙二醇、甘油、山梨醇、工业用甲醇变性酒精、三乙酰甘油酯、己烷、苯、甲苯、 乙醚、氯仿、1，4_ 二氧杂环、四氢呋喃、二氯甲烷、丙酮、乙腈、二甲基甲酰胺、二甲亚砜、甲 酸、其半合成衍生物，以及其任何组合。3.油相本发明的纳米乳剂中的油可以是任何化妆品或药学上可接受的油。所述油可以是 挥发性的或非挥发性的，可以选自动物油、植物油、天然油、合成油、烃类油、硅氧烷油、其半合成的衍生物及其组合。适合的油包括但不限于矿物油、角鲨烯油、香味油、硅油、精油、水不溶的维生素、 异丙基硬脂酸酯、硬脂酸丁酯、辛基棕榈酸酯、鲸蜡醇十六酸酯、十三烷醇山嵛酯、二异丙基 己二酸酯、癸二酸二辛酯、薄荷基氨基苯甲酸酯、十六烷基碘苯腈辛酸酯、辛基水杨酸酯、 十四烷酸异丙酯、新戊二醇二癸酸酯鲸蜡醇、Ceraphyls 、癸基油酸酯、二异丙基己二酸 酯、C12_15烷基乳酸酯、十六烷基乳酸酯、月桂基乳酸酯、异硬脂醇新戊酸酯、十四烷基乳酸 酯、异鲸蜡醇硬脂酰硬脂酸酯、辛基十二醇硬脂酰硬脂酸酯、烃类油、异链烷烃、流体石蜡、 异构十二烷、矿脂、摩洛哥坚果油、加拿大芥花油、辣椒油、椰子油、玉米油、棉花子油、亚麻 籽油、葡萄籽油、芥子油、橄榄油、棕榈油、棕榈坚果油、花生油、松籽油、罂粟籽油、南瓜子 油、米糠油、红花油、茶油、块菌油、植物油、杏(仁)油、希蒙德木油(加州希蒙得木种子 油)、葡萄籽油、夏威夷果油、麦芽油、杏仁油、菜籽油、葫芦油、大豆油、芝麻油、榛子油、玉米 油、向日葵油、大麻籽油、白檀香油(bois oil)、kuki坚果仁油、鳄梨油、核桃油、鱼油、刺柏 子油、多香果油、桧油、籽油、杏仁籽油、茴香子油、芹菜子油、枯茗籽油、肉豆蔻籽油、叶油、 罗勒叶油、月桂叶油、肉桂叶油、荔枝草叶油、桉树叶油、柠檬草叶油、白千层叶油、奥杜那干 酪叶油、广藿香叶油、薄荷叶油、松叶油、迷迭香叶油、绿薄荷叶油、茶树叶油、百里香叶油、 鹿蹄草叶油、花油、春黄菊油、鼠尾草油、丁香油、天竺葵花油、牛膝草花油、茉莉花油、熏衣 草花油、松红梅花油、Marhoram花油、橙花油、玫瑰花油、依兰树花油、栲皮油、肉桂皮油、桂 皮油、黄樟树皮油、桐油、樟木油、柏木油、玫瑰木油、檀香油、地下茎(姜)桐油、松香油、兰 丹油、没药油、果皮油、香柠檬果皮油、葡萄柚果皮油、柠檬果皮油、石灰果皮油、橙皮油、柑 桔皮油、根油、缬草油、油酸、亚油酸、油醇、异硬脂醇、其半合成衍生物和其任何组合。所述油可以进一步包含硅氧烷成分，例如，挥发性的硅氧烷成分，所述挥发性的硅 氧烷成分可以是硅氧烷成分中的溶胶油，或可以与其他硅氧烷和非硅氧烷、挥发性的和非 挥发性油结合。适合的硅氧烷成分包括但不限于甲基苯基聚硅氧烷、西甲硅氧烷、二甲基 硅氧烷、苯基三甲基硅氧烷(或其有机改性的形式)、聚硅氧烷的烷基衍生物、十六烷基二 甲硅氧烷、月桂基三甲硅氧烷、聚硅氧烷的羟基化的衍生物，例如，聚二甲基硅氧烷醇、挥发 性硅氧烷油、环状和线性的硅氧烷、环甲硅氧烷、环甲硅氧烷的衍生物、六甲基环三硅氧烷、 八甲基环四硅氧烷、十甲基环五硅氧烷、挥发性的线性二甲聚硅氧烷、异十六烷、异二十烷、 异二十四烷、聚异丁烯、异辛烷、异十二烷、其半合成衍生物和其组合。挥发性油可以是有机溶剂，或者挥发性油可以是除有机溶剂之外还存在的挥发性 油。适合的挥发性的油包括但不限于萜烯、单萜、倍半萜、排气剂、甘菊环烃、薄荷醇、樟脑、 侧柏酮、百里香酚、橙花醇、芳樟醇、苎烯、香叶醇、紫苏子醇、橙花叔醇、法呢醇、依兰烯、没 药醇、法呢烯、驱蛔萜、土荆芥油、香茅醛、柠檬醛、香茅醇、母菊奥、蓍草、愈创烯、甘菊、其半 合成衍生物或其组合。在本发明的一个方面，硅氧烷成分中的挥发性油不同于油相中的油。4.表面活性剂/洗涤剂本发明的纳米乳剂中的表面活性剂或洗涤剂可以是药学上可接受的离子型表面 活性剂、药学上可接受的非离子表面活性剂、药学上可接受的阳离子表面活性剂、药学上可 接受的阴离子表面活性剂、或药学上可接受的两性离子表面活性剂。示范性的有用的表面活性剂在Applied Surfactants -Principles andApplications. Tharwat F.Tadros, Copyright 8 2005 WILEY-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA, Weinheim ISBN :3-527-30629-3中描述，通过引用将其特别地并入本文。进一步，所述表面活性剂可以是药学上可接受的离子聚合物表面活性剂、药学上 可接受的非离子聚合物表面活性剂、药学上可接受的阳离子聚合物表面活性剂、药学上可 接受的阴离子聚合物表面活性剂或药学上可接受的两性离子聚合物表面活性剂。聚合物表 面活性剂的实例包括但不限于，具有多个(至少一个)聚环氧乙烷(PEO)侧链的聚(甲基 丙烯酸甲酯)主干的接枝共聚物，聚羟基硬脂酸、烷氧基化的烷基酚甲醛缩合物、具有脂肪 酸疏水物的聚亚烷基二醇修饰的聚酯、聚酯、其半合成衍生物、或其组合。表面活性剂(surface active agent或surfactant)是两亲性分子，其由连接至 极性或离子型亲水性部分的非极性疏水性部分组成，所述非极性疏水性部分通常是含有8 至18个碳原子的直链或支链烃或氟碳化合物链。所述亲水性部分可以是非离子型、离子型 或两性离子型。在水相环境中烃链与水分子微弱地相互作用，而极性或离子头部基团通过 偶极或离子偶极相互作用与水分子强烈地相互作用。根据亲水基团的性质，表面活性剂被 分成阴离子型、阳离子型、两性离子型、非离子型和聚合物表面活性剂。适合的表面活性剂包括，但不限于包含9到10个乙二醇单元的乙氧基化的壬基 酚、包含8个乙二醇单元的乙氧基化的十一醇、聚氧乙烯00)失水山梨糖醇单月桂酸酯、聚 氧乙烯00)失水山梨糖醇单棕榈酸酯、聚氧乙烯00)失水山梨糖醇单硬脂酸酯、聚氧乙烯 (20)山梨糖醇酐单油酸酯、失水山梨糖醇单月桂酸酯、失水山梨糖醇单棕榈酸酯、失水山梨 糖醇单硬脂酸酯、失水山梨糖醇单油酸酯、乙氧基化氢化蓖麻油、月桂基硫酸钠、环氧乙烷 和环氧丙烷的两嵌段共聚物、环氧乙烷-环氧丙烷嵌段共聚物、基于环氧乙烷和环氧丙烷 的四功能嵌段共聚物、甘油基单酯、甘油基癸酸酯、甘油基辛酸酯、甘油基椰油酸酯、甘油基 芥酸酯、甘油基羟基硬脂酸酯、甘油基异硬脂酸酯、甘油基羊毛脂酸酯、甘油基月桂酸酯、甘 油基亚油酸酯、甘油基肉豆蔻酸酯、甘油基油酸酯、甘油基PABA、甘油基棕榈酸酯、甘油基蓖 麻醇酸酯、甘油基硬脂酸酯、甘油基巯基乙酸酯、甘油基二月桂酸酯、甘油基二油酸脂、甘油 基二肉豆蔻酸酯、甘油基二硬脂酸酯、甘油基倍半油酸酯、甘油基硬脂酸酯乳酸酯、聚氧乙 烯十六烷基/硬脂酰基醚、聚氧乙烯胆固醇醚、聚氧乙烯月桂酸酯或二月桂酸酯、聚氧乙烯 硬脂酸酯或二硬脂酸酯、聚氧乙烯脂肪醚、聚氧乙烯月桂基醚、聚氧乙烯硬脂酰基醚、聚氧 乙烯十四烷基醚、类固醇、胆固醇、β谷固醇、没药醇、醇的脂肪酸酯、十四烷酸异丙酯、脂 肪-异丙基η- 丁酸酯、异丙基η-己酸酯、异丙基η-癸酸酯、异丙基棕榈酸酯、辛基十二基 肉豆蔻酸酯、烷氧基化的醇类、烷氧基化的酸、烷氧基化的酰胺、烷氧基化的糖类衍生物、天 然油和蜡的烷氧基化的衍生物、聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物、壬苯醇醚-14、PEG-8月桂 酸酯、PEG-6可可酰胺、PEG-20甲基葡萄糖倍半硬脂酸酯、PEG40羊毛脂、PEG-40蓖麻油、 PEG-40氢化蓖麻油、聚氧乙烯脂肪醚、甘油基二酯、聚氧乙烯硬脂酰基醚、聚氧乙烯十四烷 基醚和聚氧乙烯月桂基醚、甘油基二月桂酸酯、甘油基二肉豆蔻酸酯、甘油基二硬脂酸酯、 其半合成衍生物或其混合物。其他适合的表面活性剂包括但不限于非离子的脂质，例如，甘油基月桂酸酯、甘 油基肉豆蔻酸酯、甘油基二月桂酸酯、甘油基二肉豆蔻酸酯、其半合成衍生物和其混合物。在其他实施方式中，所述表面活性剂是具有约2个到约100个基团的聚氧乙烯头 部基团的聚氧乙烯脂肪醚、或具有I--(OCH2CH2)y-OH结构的烷氧基化的醇类，其中R5是具有约6个到约22个碳原子的分支或不分支的烷基基团，y为约4至约100，优选地，为约10 至约100。优选地，所述烷氧基化的醇类是&是月桂基基团且y的平均值为23的物质。在不同的实施方式中，所述表面活性剂是烷氧基化的醇类，其是羊毛脂醇的乙氧 基化的衍生物。优选地，羊毛脂醇的乙氧基衍生物是羊毛脂醇醚-10 (Ianeth-IO)，其是平均 乙氧基化值为10的羊毛脂醇的聚乙二醇醚。非离子型表面活性剂包括但不限于乙氧基化的表面活性剂、乙氧基化的醇类、乙 氧基化的烷基酚、乙氧基化的脂肪酸、乙氧基化的单烷醇酰胺(monoalkaolamide)、乙氧基 山梨糖醇酐酯、乙氧基化脂肪氨基、环氧乙烷-环氧丙烷共聚物、二(聚乙二醇二 [咪唑羰 基])、壬苯醇醚-9、二(聚乙二醇二 [咪唑羰基])』1~01；35』1^」《56』1^」《72』1^」《76、 Brij 92V、Brij 97、Brij 58P、Cremophor EL、十乙二醇单十二烷基醚、N-癸酰基-N-甲基 葡糖胺、η-癸基α -D-批喃葡萄糖苷、癸基β -D-麦芽糖苷、η-十二烷酰-N-甲基葡糖酰胺、 η-十二烷基α-D-麦芽糖苷、η-十二烷基β-D-麦芽糖苷、η-十二烷基β-D-麦芽糖苷、七 乙二醇单癸基醚、七乙二醇单十二烷基醚、七乙二醇单十四烷基醚、正十六烷基β-D-麦芽 糖苷、六乙二醇单十二烷基醚、六乙二醇单十六烷基醚、六乙二醇单十八烷基醚、六乙二醇 单十四烷基醚、Ig印al CA-630,Igepal CA-630、甲基-6-0-(N-庚基氨基甲酰基)-α-D-吡 喃葡萄糖苷、九乙二醇单十二烷基醚、N-N-壬酰基-N-甲基葡糖胺、八乙二醇单癸基醚、八 乙二醇单十二烷基醚、八乙二醇单十六烷基醚、八乙二醇单十八烷基醚、八乙二醇单十四烷 基醚、辛基-β -D-吡喃葡萄糖苷、五乙二醇单癸基醚、五乙二醇单十二烷基醚、五乙二醇单 十六烷基醚、五乙二醇单己基醚、五乙二醇单十八烷基醚、五乙二醇单辛基醚、聚乙二醇二 缩水甘油醚、聚乙二醇醚W-1、聚氧乙烯10十三烷基醚、聚氧乙烯100硬脂酸酯、聚氧乙烯 20异十六烷基醚、聚氧乙烯20油烯基醚、聚氧乙烯40硬脂酸酯、聚氧乙烯50硬脂酸酯、聚 氧乙烯8硬脂酸酯、聚氧乙烯二(咪唑基羰基)、聚氧乙烯25丙二醇硬脂酸酯、来自皂树皮 的皂角苷、3卩&11，20、5 &11 40、5 &11 60、5 &11 65、5 &11 80、5 &11 85、16印^01 15-S-12、
Tergitol 15-S-30、Tergitol 15_S_5、Tergitol 15_S_7、Tergitol 15_S_9、Tergitol ΝΡ—10、 Tergitol NP_4、 Tergitol ΝΡ—40、 Tergitol NP_7、 Tergitol NP_9、 TergitoU Tergitol TMN-10、Tergitol ΤΜΝ-6、十四烷基-β-D-麦芽糖苷、四乙二醇单癸基醚、四乙 二醇单十二烷基醚、四乙二醇单十二烷基醚、四乙二醇单十四烷基醚、三乙二醇单癸基醚、 三乙二醇单十二烷基醚、三乙二醇单十六烷基醚、三乙二醇单辛基醚、三乙二醇单十四烷基 醚、Triton CF-21、Triton CF-32、Triton DF-12、Triton DF-16、Triton GR-5M、Triton QS-15、Triton QS-44、Triton X-100、Triton X-102、Triton X-15、Triton X-151、Triton X-200、Triton X-207、Triton X_114、Triton X-165、Triton X-305、Triton X-405、 Triton X-45、Triton X-705_70、TffEEN 20, TWEEN 2U TffEEN 40, TffEEN 60, TffEEN 61、TffEEN 65, TffEEN 80, TWEEN 8U TTOEN 85、泰洛沙泊、n_ ^烷基 β -D-吡喃葡萄 糖苷、其半合成衍生物或其组合。此外，所述非离子表面活性剂可以是泊洛沙姆。泊洛沙姆是由聚氧乙烯嵌段其后 连接聚氧丙烯嵌段其后连接聚氧乙烯嵌段构成的聚合物。聚氧乙烯和聚氧化丙烯的平均 单元数根据与聚合物相关的数字而改变。例如，最小的聚合物，泊洛沙姆101，由平均2个 单元的聚氧乙烯嵌段、平均16个单元的聚氧化丙烯嵌段、以及平均2个单元的聚氧乙烯嵌 段组成。泊洛沙姆从无色液体和膏剂到白色的固体。在化妆品和个人护理产品中，泊洛沙姆用于皮肤清洁剂、沐浴产品、香波、护发素、嗽口水、眼睛卸状物和其它皮肤和头发产品的 制剂中。泊洛沙姆的实施包括但不限于泊洛沙姆101、泊洛沙姆105、泊洛沙姆108、泊洛 沙姆122、泊洛沙姆123、泊洛沙姆124、泊洛沙姆181、泊洛沙姆182、泊洛沙姆183、泊洛沙 姆184、泊洛沙姆185、泊洛沙姆188、泊洛沙姆212、泊洛沙姆215、泊洛沙姆217、泊洛沙 姆231、泊洛沙姆234、泊洛沙姆235、泊洛沙姆237、泊洛沙姆238、泊洛沙姆观2、泊洛沙 姆观4、泊洛沙姆观8、泊洛沙姆331、泊洛沙姆333、泊洛沙姆334、泊洛沙姆335、泊洛沙姆 338、泊洛沙姆401、泊洛沙姆402、泊洛沙姆403、泊洛沙姆407、泊洛沙姆105苯甲酸酯和泊 洛沙姆182 二苯甲酸酯。 适合的阳离子表面活性剂包括但不限于季铵化合物、烷基三甲基氯化铵化合物、 二烷基二甲基氯化铵化合物、阳离子的含卤素化合物，例如，氯化十六烷基吡啶、苯扎氯铵、 苄基二甲基十六烷基氯化铵、苄基二甲基十四烷基氯化铵、苄基十二烷基二甲基溴化铵、苄 基三甲基四氯碘酸铵、二甲基二十八烷基溴化铵、十二烷基乙基二甲基溴化铵、十二烷基三 甲基溴化铵、十二烷基三甲基溴化铵、乙基十六烷基二甲基溴化铵、Girard试剂T、十六烷 基三甲基溴化铵、十六烷基三甲基溴化铵、N，N'，N-聚氧乙烯(10)-N-牛羊脂-1，3-二氨 基丙烷、溴苄嘧棕胺、三甲基(十四烷基)溴化铵、1，3，5_三嗪-1，3，5QH，4H，6H)-三乙醇、 1-癸基铵、N-癸基-N，N-二甲基-氯化物、二癸基二甲基氯化铵、2-(2-(ρ-(二异丁基)甲 酚)乙氧基)乙基二甲基苯甲基氯化铵、2-(2-(ρ-(二异丁基)苯氧基)乙氧基)乙基二 甲基苯甲基氯化铵、烷基1或3苯甲基-1-(2-羟乙基)-2-咪唑啉氯化物、烷基二(2-羟 乙基)苯甲基氯化铵、烷基二甲基苯甲基氯化铵、烷基二甲基3，4-二氯苄基氯化铵(100% C12)、烷基二甲基3，4_二氯苄基氯化铵(50% C14,40% C12U0% C16)、烷基二甲基3，4_二 氯苯甲基氯化铵(55% C14,23% C12,20% C16)、烷基二甲基苯甲基氯化铵、烷基二甲基苯 甲基氯化铵(100% C14)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(100% C16)、烷基二甲基苯甲基氯化铵 (41%C14,28% C12)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(47% C12，18%C14)、烷基二甲基苯甲基氯 化铵(55% C16，20% C14)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(58% C14，28% C16)、烷基二甲基苯 甲基氯化铵(60% C14，25% C12)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(61 % C11，23% C14)、烷基二 甲基苯甲基氯化铵(61% C12、23% C14)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(65% C12，25% C14)、 烷基二甲基苯甲基氯化铵(67% C12,24% C14)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(67% C12,25% C14)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(90% C14,5% C12)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(93% C14、 4% C12)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(95% C16,5% C18)、烷基二癸基二甲基氯化铵、烷基二 甲基苯甲基氯化铵(C12-16)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(C12-18)、二烷基的二甲基苯甲基 氯化铵、烷基二甲基二甲基苯甲基氯化铵、烷基二甲基乙基溴化铵(90% C14,5% C16,5% C12)、烷基二甲基乙基溴化铵(混合的烷基和烯基基团，如在大豆油的脂肪酸中一样)、烷 基二甲基乙基苯甲基氯化铵、烷基二甲基乙基苯甲基氯化铵(60% C14)、烷基二甲基异丙 基苯甲基氯化铵(50% C12,30% C14U7% C16,3% C18)、烷基三甲基氯化铵(58% C18、 40% C16U% C14U% C12)、烷基三甲基氯化铵(90% C18U0% C16)、烷基二甲基(乙基 苯甲基)氯化铵(C12-18)、二-(C8-10)-烷基二甲基氯化铵、二烷基二甲基氯化铵、二烷基 甲基苯甲基氯化铵、二癸基二甲基氯化铵、二异癸基二甲基氯化铵、二辛基二甲基氯化铵、 十二烷基二(2-羟乙基)辛基氯化氢铵、十二烷基二甲基苯甲基氯化铵、十二烷基氨基甲 酰基甲基二甲基苯甲基氯化铵、十七基羟基乙基咪唑啉氯化物、六氢-1，3，5-三(2-羟乙基)-S-三嗪、Myristalkonium氯化物(和)Quat RNIUM 14、N，N-二甲基-2-羟基丙基氯化
铵聚合物、η-十四烷基二甲基苯甲基氯化铵一水合物、辛基癸基二甲基氯化铵、辛基十二烷 基二甲基氯化铵、辛基苯氧基乙氧基乙基二甲基苯甲基氯化铵、氧基二乙烯基二(烷基二 甲基氯化铵)、三甲氧基甲硅烷基丙基二甲基十八烷基氯化铵、三甲氧基甲硅烷基季铵盐、 三甲基十二烷基苯甲基氯化铵、其半合成衍生物和其组合。示范性的含卤素的阳离子化合物包括，但不限于十六烷基吡啶卤化物、十六烷 基三甲基卤化铵、十六烷基二甲基乙基卤化铵、十六烷基二甲基苄基卤化铵、十六烷基三 丁基卤化膦、十二烷基三甲基卤化铵，或十四烷基三甲基卤化铵。在一些特定的实施方式 中，适合的阳离子的含卤素化合物包括，但不限于，氯化十六烷基吡啶(CPC)、十六烷基三 甲基氯化铵、十六烷基苄基二甲基氯化铵、溴化十六烷吡啶(CPB)、十六烷基三甲基溴化铵 (CTAB)、十六烷基二甲基乙基溴化铵、十六烷基三丁基溴化膦、十二烷基三甲基溴化铵和 十四烷基三甲基溴化铵。在特别优选的实施方式中，所述含卤素的阳离子化合物是CPC，然 而本发明的组合物不限于具有特定的含阳离子化合物的制剂。适合的阴离子表面活性剂包括但不限于羧酸酯、硫酸酯、磺酸酯、磷酸酯、鹅去 氧胆酸、鹅去氧胆酸钠盐、胆酸、牛或绵羊胆汁、去氢胆酸、去氧胆酸、去氧胆酸、去氧胆酸甲 酯、毛地黄皂苷、毛地黄毒苷配基、N, N-二甲基十二烷基胺N-氧化物、多库酯钠盐、甘氨去 氧胆酸钠盐、甘氨胆酸水合物、合成的甘氨胆酸钠盐水合物，合成的甘氨去氧胆酸一水合 物、甘氨去氧胆酸钠盐、甘氨石胆酸3-硫酸二钠盐、甘氨石胆酸乙酯、N-十二烷基肌氨酸钠 盐、N-十二烷基肌氨酸溶液、N-十二烷基肌氨酸溶液、十二烷基硫酸锂、十二烷基硫酸锂、 十二烷基硫酸锂、Lugol溶液、4型Niaproof 4、1-辛烷磺酸钠盐、1-丁烷磺酸钠、1-癸烷磺 酸钠、1-癸烷磺酸钠、1-十二烷基磺酸钠、无水1-庚烷磺酸钠、无水ι-庚烷磺酸钠、ι-壬烷 磺酸钠、1-丙烷磺酸钠一水合物、2-溴乙烷磺酸钠、胆酸钠水合物、络胆酸钠、去氧胆酸钠、 去氧胆酸钠一水合物、十二烷基硫酸钠、无水己烷磺酸钠、辛基硫酸钠、无水戊烷磺酸钠、牛 磺胆酸钠、牛磺鹅去氧胆酸钠盐、牛磺去氧胆酸钠盐一水合物、牛磺猪去氧胆酸钠盐水合 物、牛磺石胆酸3-硫酸二钠盐、牛磺熊去氧胆酸钠盐、Trizma_ 十二烷基硫酸酯、TWEEN 80、 熊去氧胆酸、其半合成衍生物和其组合。适合的两性离子表面活性剂包括但不限于N-烷基甜菜碱、月桂基氨基丙基二甲 基甜菜碱、烷基二甲基甘氨酸盐、N-烷基氨基丙酸酯、最小值98% (TLC)的CHAPS、最小 值98% (TLC)的CHAPS、最小值98% (TLC)的用于电泳的CHAPS、CHAPS0、最小值98%的 CHAPS0、用于电泳的CHAPS0、3-(癸基二甲基铵)丙烷磺酸内盐、3-(十二烷基二甲基铵)丙 烷磺酸内盐、3_(十二烷基二甲基铵)丙烷磺酸内盐、3-(N，N-二甲基肉豆蔻基铵)丙烷磺 酸盐、3-(N，N-二甲基十八烷基铵)丙烷磺酸盐、3-(N，N-二甲基辛基铵)丙烷磺酸内盐、 3-(N, N- 二甲基棕榈基铵)丙烷磺酸盐，其半合成衍生物和其组合。在一些实施方式中，所述纳米乳剂包含阳离子表面活性剂，其可以是氯化十六烷 基吡啶。在本发明的其他实施方式中，所述纳米乳剂包含阳离子表面活性剂，所述阳离子 表面活性剂的浓度是小于约5.0%和大于约0.001%。在本发明的又一实施方式中，所述 纳米乳剂包含阳离子表面活性剂，所述阳离子表面活性剂的浓度选自小于约5%、小于 约4. 5%、小于约4. 0%、小于约3. 5%、小于约3. 0%、小于约2. 5%、小于约2. 0%、小于 约1. 5%、小于约1. 0%、小于约0. 90%、小于约0. 80%、小于约0. 70%、小于约0. 60%、小
45于约0. 50%、小于约0. 40%、小于约0. 30%、小于约0. 20%或小于约0. 10%。进一步，所 述纳米乳剂中阳离子试剂的浓度是大于约0. 002%、大于约0. 003%、大于约0. 004%、大 于约0. 005%、大于约0. 006%、大于约0. 007%、大于约0. 008%、大于约0. 009%、大于约 0. 010%或大于约0. 001%。在一种实施方式中，所述纳米乳剂中阳离子试剂的浓度是小于 约5. 0%和大于约0. 001%。在本发明的另一实施方式中，所述纳米乳剂包含至少一种阳离子表面活性剂和至 少一种非阳离子表面活性剂。所述非阳离子表面活性剂是非离子表面活性剂，例如，聚山梨 酸酯(Tween)，例如，聚山梨酸酯80或聚山梨酸酯20。在一种实施方式中，所述非离子表 面活性剂的浓度为约0. 05%到约7. 0%，或所述非离子表面活性剂的浓度为约0. 5%到约 4%。在本发明的又一实施方式中，所述纳米乳剂包含与非离子表面活性剂结合的、浓度为 约0. 01%到约2%的阳离子表面活性剂。5.活性剂任选地，除了纳米乳剂之外，将提供缓解或治疗效果的、诸如抗真菌剂、抗酵母剂 或抗霉菌剂之类的第二活性剂掺入所述纳米乳剂中，来实现改善活性剂的吸收或提供累加 /协同作用、或缩短治疗持续时间。在治疗、治愈或缓解甲真菌病感染、真菌感染或甲癣方面 有用的任何活性剂可掺入纳米乳剂中，包括但不限于添加另一抗真菌剂。示范性的活性剂包括，但不限于(1)氮杂茂(咪唑)，(2)抗代谢物，(3)烯丙胺， (4)吗啉，(5)葡聚糖合成抑制物(化学物家族棘白菌素)，(6)聚烯，(7)benoxaborales, (8)其他抗真菌/甲癣剂，和(9)新类型的抗真菌甲癣剂。氮杂茂的实例包括，但不限于联苯苄唑、克霉唑、益康唑、咪康唑、噻康唑、氟康 唑、伊曲康唑、酮康唑、普拉康唑、瑞扶康唑、泊沙康唑和伏立康唑。抗代谢物的实例包括但 不限于，氟胞嘧啶。烯丙胺的实例包括但不限于特比萘芬、萘替芬和阿莫罗芬。葡聚糖合 成抑制物的实例包括但不限于卡泊芬净、米卡芬净和阿尼芬净。聚烯的实例包括但不限 于两性霉素B、制霉菌素和匹马菌素。benoxaborale的实例是A拟690。抗真菌/甲癣剂 的其他实例包括但不限于灰黄霉素和环吡酮胺。最后，新类型的抗真菌/甲癣剂的实例包 括但不限于粪壳菌素衍生物和尼柯霉素。6.其他成分适于在本发明的纳米乳剂中使用的其他化合物包括但不限于一种或一种以上溶 剂，例如，有机磷酸盐式溶剂、填充剂、着色剂、药学上可接受的赋形剂、防腐剂、PH调节齐U、 缓冲剂、螯合剂，等等。所述其他化合物可以混合到预先乳化的纳米乳剂中，或所述其他化 合物可以添加到待乳化的原始混合物中。在这些实施方式的一些中，一种或一种以上其他 化合物在纳米乳剂组合物即将使用之前混合到已有的纳米乳剂组合物中。本发明的纳米乳剂中适合的防腐剂包括但不限于氯化十六烷基吡啶、苯扎氯铵、 苯甲醇、氯己定、咪唑基脲、苯酚、山梨酸钾、苯甲酸、溴硝丙二醇、氯甲酚、对羟苯甲酸酯、苯 氧乙醇、山梨酸、α -生育酚、抗坏血酸、抗坏血酸棕榈酸酯、丁基化羟茴醚、丁基化羟基甲 苯、抗坏血酸钠、二(P-氯苯基二胍)己烷、3-(-4-氯苯氧基)_丙烷-1，2-二醇、甲基和甲 基氯异噻唑啉酮、焦亚硫酸钠、柠檬酸、依地酸，其半合成衍生物和其组合。其他适合的防 腐剂包括，但不限于，苯甲醇、氯己定(二(P-氯苯基二胍)己烷)、氯苯甘醚(3-(-4-氯苯 氧基)_丙烷-1，2-二醇)、Kath0n CG(甲基和甲基氯异噻唑啉酮)、对羟苯甲酸酯(甲基、乙基、丙基、丁基羟基苯甲酸酯)、苯氧乙醇(2-苯氧乙醇)、山梨酸(山梨酸钾、山梨酸)、 Phenonip (苯氧乙醇、甲基、乙基、丁基、丙基对羟苯甲酸酯)、Phenoroc (苯氧乙醇0. 73%， 对羟基苯甲酸甲酯0.2%，对羟苯甲酸丙酯0.07% )、Liquipar Oil (异丙基、异丁基、丁基 对羟基苯甲酸酯)、Liquipar PE (70%苯氧乙醇，30% liquipar oil)、Nipaguard MPA(苯 甲醇(70% )、甲基和丙基对羟苯甲酸酯)、Nipaguard MPS(丙二醇、甲基和丙基对羟苯甲 酸酯)、Nipasept (甲基、乙基和丙基对羟苯甲酸酯)、Nipastat (甲基、丁基、乙基和丙基 对羟苯甲酸酯)、Elestab 388 (丙二醇中的苯氧乙醇加氯苯甘醚和对羟基苯甲酸甲酯)和 Killitol (7. 5%氯苯甘醚和7. 5%对羟基苯甲酸甲酯)。纳米乳剂可以进一步包含至少一种pH值调节剂。本发明的纳米乳剂中适合的pH 值调节剂包括但不限于二乙醇胺、乳酸、单乙醇胺、三乙醇胺、氢氧化钠、磷酸钠，其半合成 衍生物和其组合。此外，所述纳米乳剂可以包含螯合剂。在本发明的一种实施方式中，所述螯合剂的 量为约0. 0005%到约1. 0%。螯合剂的实例包括但不限于肌醇六磷酸、多聚磷酸、柠檬酸、 葡糖酸、乙酸、乳酸、乙撑二胺、乙二胺四乙酸(EDTA)和二巯丙醇和其组合。优选的螯合剂 是乙二胺四乙酸。所述纳米乳剂可以包含缓冲剂，例如，药学上可接受的缓冲剂。缓冲剂的实例包 括但不限于2-氨基-2-甲基-1，3-丙二醇(彡99. 5% (NT) )，2-氨基-2-甲基丙醇 (彡 99. 0% (GC))，L-(+)-酒石酸(彡 99. 5% (T)), ACES (彡 99. 5% (T)), ADA (彡 99. 0% (T))，乙酸(彡99.5% (GC/T))，用于萤光的乙酸(彡99.5% (GC/T))，用于分子生物学 的乙酸铵溶液(H2O中约5M)，用于萤光的乙酸铵(彡99.0% (根据干物质计算的，T))， 碳酸氢铵(彡99. 5 % (T))，柠檬酸二铵(彡99. 0 % (T))，甲酸铵溶液(H2O中10M)，甲酸 铵(>99.0% (根据干物质计算的，NT))，草酸铵一水合物(>99.5% (室温))，磷酸 氢二铵溶液Ol2O中2. 5M)，磷酸氢二铵(彡99. 0% (T))，磷酸二氢铵溶液Ol2O中2. 5M)， 磷酸二氢铵(彡99. 5% (T))，磷酸氢钠铵四水合物(彡99. 5% (NT))，用于分子生物学 的硫酸铵溶液(H2O中3. 2M)，酒石酸二铵溶液(H2O中2M(20°C无色溶液))，酒石酸二铵 (^ 99.5% (T))，用于分子生物学的BES缓冲盐水QX浓缩的)，BES(彡99.5% (T)), 用于分子生物学的BES( ^ 99.5%⑴)，用于分子生物学的BICINE缓冲溶液(H2O中 1M)，BICINE( ^ 99. 5% (T)), BIS-TRIS( ^99.0% (NT))，碳酸氢盐缓冲溶液(> 0. IM Na2CO3, > 0. 2M NaHCO3)，硼酸(彡99. 5% (T))，用于分子生物学的硼酸(彡99. 5% (T))， CAPS( ^ 99.0% (TLC)),CHES( ^ 99. 5% (T))，乙酸钙水合物(^ 99.0% (根据干物质计 算，KT))，碳酸钙沉淀(>99.0% (KT))，柠檬酸三钙四水合物(>98.0% (根据干物质计 算的，KT))，用于分子生物学的柠檬酸盐浓缩溶液(H2O中1M)，无水柠檬酸(> 99. 5% (T))， 用于萤光的无水柠檬酸(彡99.5% (T))，二乙醇胺(彡99.5% (GC)), EPPS( ^99.0% (T))，用于分子生物学的乙二胺四乙酸二钠盐二水合物(彡99.0% (T))，甲酸溶液(H2O 中 1. 0M)，Gly-Gly-Gly ( ^ 99. 0% (NT))，Gly-Gly ( ^ 99. 5% (NT))，甘氨酸(彡 99. 0 % (NT))，用于萤光的甘氨酸(彡99.0% (NT))，用于分子生物学的甘氨酸(彡99.0% (NT)), 用于分子生物学的HEPES缓冲盐水O倍浓缩)，HEPES( ^99.5% (T))，用于分子生物学 的HEPES ( ^ 99.5% (T))，咪唑缓冲溶液(H2O中1M)，咪唑(彡99. 5% (GC))，用于萤光的 咪唑(>99.5% (GC))，用于分子生物学的咪唑(>99.5% (GC))，脂蛋白重折叠缓冲液，醋酸锂二水合物(彡99.0% (NT))，柠檬酸三锂四水合物(彡99. 5% (NT) )，MES水合物 (^ 99.5% (T))，用于萤光的MES —水合物(彡99.5% (T))，用于分子生物学的MES溶 液(H2O中0.5M)，MOPS (彡99. 5% (T))，用于萤光的MOPS (彡99. 5% (T))，用于分子生物 学的M0PS(彡99. 5% (T))，用于分子生物学的乙酸镁溶液(H2O中约1M)，乙酸镁四水合物 (^99.0% (KT))，柠檬酸三镁九水合物(>98.0% (根据干物质计算的，KT))、甲酸镁 溶液(H2O中的0. 5M)，磷酸氢二镁三水合物(彡98. 0% (KT))，用于原位杂交的中和溶液， 用于分子生物学的草酸二水合物(彡99. 5% (RT)), PIPES ( ^ 99.5% (T))，用于分子生 物学的PIPESO 99. 5% (T))，磷酸盐缓冲盐水(溶液(高压灭菌的))，磷酸盐缓冲盐水 (Western印迹中过氧化物酶共轭物的洗涤缓冲液，10倍浓缩)，无水哌嗪(> 99. 0% (T))， D-酒石酸氢钾(>99.0% (T))，用于分子生物学的乙酸钾溶液，用于分子生物学的乙酸钾 溶液(H2O中5M)，用于分子生物学的乙酸钾溶液(H2O中约1M)，乙酸钾(彡99. 0% (NT)), 用于萤光的乙酸钾(彡99.0% (NT))，用于分子生物学的乙酸钾(彡99.0% (NT))，碳酸 氢钾(彡99. 5% (T))，无水碳酸钾(彡99.0% (T))，氯化钾(彡99. 5% (AT))，柠檬酸氢 钾(彡99. 0% (干物质，NT))，柠檬酸三钾溶液(H2O中1M)，甲酸钾溶液(H2O中14M)，甲 酸钾(彡99. 5 % (NT))，草酸钾一水合物(彡99. 0 % (RT))，无水磷酸氢二钾(彡99. 0 % (T))，用于萤光的无水磷酸氢二钾(>99.0% (T))，用于分子生物学的无水磷酸氢二钾 (^99.0% (T))，无水磷酸二氢钾(彡99.5% (T))，用于分子生物学的无水磷酸二氢钾 (^ 99.5% (T))，磷酸三钾一水合物(彡95% (T))，邻苯二甲酸氢钾(彡99.5% (T)), 酒石酸钠钾溶液(H2O中1.5M)，酒石酸钠钾四水合物(彡99. 5% (NT))，四硼酸钾四水 合物(彡99.0% (T))，四草酸钾二水合物(彡99. 5% (RT))，丙酸溶液(H2O中1·0Μ)，用 于分子生物学的STE缓冲溶液(pH 7. 8)，用于分子生物学的STET缓冲溶液(pH 8. 0),5, 5-二乙基巴比土酸钠(彡99. 5% (NT))，用于分子生物学的乙酸钠溶液(H2O中约3M)，乙 酸钠三水合物(彡99. 5% (NT))，无水乙酸钠(彡99.0% (NT))，用于萤光的无水乙酸钠 (^99.0% (NT))，用于分子生物学的无水乙酸钠(^99.0% (NT))，碳酸氢钠(^99.5% (T))，酒石酸氢钠一水合物(>99.0% (T))，碳酸钠十水合物(>99.5% (T))，无水碳 酸钠(>99.5% (根据干物质计算的，T))，无水柠檬酸二氢钠(>99·5% (T))，柠檬酸 三钠二水合物(彡99.0% (NT))，用于萤光的柠檬酸三钠二水合物(彡99.0% (NT))，用 于分子生物学的柠檬酸三钠二水合物(彡99. 5% (NT)),甲酸钠溶液Ol2O中8M)，草酸钠 (^99.5% (RT))，磷酸氢二钠二水合物(>99.0% (T))，用于萤光的磷酸氢二钠二水合物 (^99.0% (T))，用于分子生物学的磷酸氢二钠二水合物(>99·0% (T))，磷酸氢二钠十 水合物(^99.0% (T)),磷酸氢二钠溶液(H2O中0. 5M)，无水磷酸氢二钠(^99.5% (T)), 用于分子生物学的磷酸氢二钠(彡99. 5% (T))，磷酸二氢钠二水合物(彡99.0% (T))，用 于分子生物学的磷酸二氢钠二水合物(》99. 0% (T))，用于分子生物学的磷酸二氢钠一水 合物(彡99. 5 % (T))，磷酸二氢钠溶液(H2O中5M)，焦磷酸二氢二钠(彡99. 0 % (T))，焦 磷酸四钠十水合物O 99. 5% (T))，酒石酸二钠二水合物(> 99. 0% (NT)),酒石酸二钠 溶液(H2O中1. 5M(20°C无色溶液))，四硼酸钠十水合物(^99.5% (T))，TAPS( ^99.5% (T)),TES(^99.5% (根据干物质计算的，T))，用于分子生物学的TM缓冲溶液(pH 7.4)， 用于分子生物学的TNT缓冲溶液(pH 8.0)，TRIS甘氨酸缓冲溶液(10倍浓缩)，用于分子生 物学的TRIS乙酸-EDTA缓冲溶液，，TRIS缓冲盐水(10倍浓缩)，用于电泳的TRIS甘氨酸SDS缓冲溶液(10倍浓缩)，用于分子生物学的浓缩的TRIS磷酸-EDTA缓冲溶液(10倍浓 缩)，Tricine (彡 99. 5% (NT))，三乙醇胺(彡 99. 5% (GC))，三乙胺(彡 99. 5% (GC))，三 乙基乙酸铵缓冲液(挥发性的缓冲液，H2O中约1. 0M)，三乙基磷酸铵溶液(挥发性的缓冲 液，H2O中约1. 0M)，三甲基醋酸铵溶液(挥发性的缓冲液，H2O中约1. 0M)，三甲基磷酸铵溶 液(挥发性的缓冲液，H2O中约1M)，用于分子生物学的浓缩的Tris-EDTA缓冲溶液(100倍 浓缩)，用于分子生物学的Tris-EDTA缓冲溶液(pH 7. 4)，用于分子生物学的Tris-EDTA缓 冲溶液(pH 8. 0) Jrizma 乙酸盐(彡 99. 0% (NT))，iTrizma 碱(彡 99. 8% (T)) ,Trizma 碱(彡"·8%⑴)，用于萤光的Trizma‘ 碱(彡99·8% (T))，用于分子生物学的Trizma 碱(彡99. 8% (T))，Trizma 碳酸盐(彡98. 5% (T))，用于分子生物学的Trizma 盐酸盐 缓冲溶液(pH 7. 2)，用于分子生物学的Trizma 盐酸盐缓冲溶液(pH 7. 4)，用于分子生物 学的Trizma 盐酸盐缓冲溶液(pH 7. 6)，用于分子生物学的Trizma 盐酸盐缓冲溶液(pH 8.0) ,Trizma 盐酸盐(彡 99.0% (AT))，用于萤光的 Trizma 盐酸盐(彡 99. 0% (AT))，用 于分子生物学的！"rizma 盐酸盐(彡"·0% (AT))和1Trizma^马来酸盐(彡"· 5 % (NT))。所述纳米乳剂可以包含一种或一种以上乳化剂来帮助形成乳剂。乳化剂包括在油 /水界面处聚集以形成防止两个邻近液滴的直接接触的连续膜的化合物。本发明的一些实 施方式特征在于可以容易地用水将纳米乳剂稀释到期望的浓度而不损害它们的抗真菌或 抗酵母性质。G.药物组合物本发明的纳米乳剂可以配制成药物组合物，其包含治疗有效量的纳米乳剂和药学 上可接受的赋形剂，用于局部或皮内施用于有需要的人类受试者。这样的赋形剂是本领域 公知的。用语“治疗有效量”，是指任何数量的纳米乳剂，其通过杀死或抑制真菌、酵母菌和 /或霉菌病原体的生长使得所述真菌、酵母菌和/或霉菌病原体失去致病性，或其任何组合 来有效治疗真菌、酵母菌和/或霉菌感染。局部和皮内的施用包括施用于脚趾甲、手指甲、皮肤或粘膜，包括毛发、毛囊、毛 干、阴囊、口腔、耳、鼻和眼睛的表面。局部或皮内施用的药学上可接受的剂型包括但不限于软膏剂、乳膏剂、液体、洗 液、乳剂、凝胶、生物粘附性凝胶、气雾剂、香波、膏剂、泡沫、防晒剂、胶囊、微囊，或是物体或 载体的形式，例如，绷带、插入物、注射器样敷涂器、阴道栓剂、粉剂、滑石粉或其他固体、香 波、清洁剂(驻留和洗去产品)以及有助于渗透表皮、真皮和角蛋白层的试剂。皮内施用是指将根据本发明的纳米乳剂注射到皮肤的层之间。皮内施用意在产生 皮肤效果，同时保持纳米乳剂的药理学作用定位于渗透和沉积的皮内区域。皮内吸收很少 或不发生全身性吸收或积累。药物组合物可以被配制为立即释放、持续释放、控制释放、延迟释放或其任何组 合，进入表皮或真皮，没有全身性吸收。在一些实施方式中，所述剂型可以含有渗透促进剂， 用于促进纳米乳剂通过角质层渗透进入表皮或真皮。适合的渗透促进剂包括但不限于，诸 如乙醇之类的醇类、甘油三酯和芦荟组合物。渗透促进剂的量可以为按剂型重量计约0.5% 到约40%。在一些实施方式中，用于皮内施用的剂型包含治疗有效量的纳米乳剂并将其施用到靠近真菌或酵母菌或霉菌感染的区域中。在一些实施方式中，预想了经由包含治疗有效量的纳米乳剂的“贴片”来递送制 剂。本文使用的“贴片”包含至少局部剂型和覆盖层，从而所述贴片可以置于待治疗的区域 之上。优选地，所述贴片被设计为使通过角质层递送进入表皮或真皮最大化，同时使吸收进 入循环系统最小化，并且对皮肤的刺激很小至几乎没有刺激，使滞后时间减小，促进均勻吸 收，以及降低机械擦除和脱水。在粘帖型贴片的药物中使用的粘附剂是本领域公知的。适合的粘附剂包括，但不 限于聚异丁烯、硅氧烷和丙烯酸。这些粘附剂可以在各种条件下起作用，例如，高湿度和 低湿度、沐浴、出汗，等等。优选地，所述粘附剂是基于天然或合成的橡胶的组合物；例如， 聚丙烯酸酯、聚丁基丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、聚-2-乙基己基丙烯酸酯、聚乙烯乙烯酯、 聚二甲硅氧烷或/和水凝胶(例如，高分子量聚乙烯吡咯烷酮和寡聚聚环氧乙烷)。最优 选的粘附剂是压力敏感的丙烯酸粘附剂，例如，Durotak 粘附剂(例如，Durotak⑧2052， National Starch and Chemicals)。粘附剂可以含有增稠剂，例如，硅土增稠剂(例如， Aerosil, Degussa, Ridgefield Park, N. J.)或交联剂，例如，乙酰丙酮铝。适合的释放衬里包括但不限于具有压力敏感释放衬里的薄覆层的、封闭的、不透 明的或透明的聚酯薄膜(例如，硅酮-氟硅酮，和全氟化碳聚合物)。背膜可以是封闭的或可渗透的并且来自合成聚合物，如聚烯烃油聚酯、聚乙烯、聚 氯乙烯和聚氨基甲酸酯，或来自天然材料，如棉花、羊毛，等等。诸如合成的聚酯之类的封闭 的背膜引起角质层的外层的水化，而非封闭的背膜使该区域呼吸(即，促进水蒸汽从皮肤 表面透过)。更优选地，所述背膜是封闭的聚烯烃箔(Alevo，Dreieich, Germany)。聚烯烃 箔厚度优选地为约0. 6mm到约1mm。贴片的形状可以是扁平的或三维的、圆形、椭圆形、正方形，并具有凹形或凸形的 外部形状，或贴片或绷带可以由使用者利用或不利用其他工具分割成相应的形状。本发明的纳米乳剂可以利用电泳递送/电泳来施用和/或递送。包括施加电流在 内的这样的穿表皮方法是本领域公知的。例如，通过测量经过治疗的人类受试者的血浆中表面活性剂(例如阳离子表面活 性剂)的量可以监测没有全身性吸收。血浆中等于或小于约lOng/ml的表面活性剂的量 确认了没有全身性吸收。在本发明的另一实施方式中，纳米乳剂的最小全身性吸收在局部 施用之后发生。这样的最小全身性吸收可以通过检测到的受试者的血浆中纳米乳剂中一种 或一种以上表面活性剂的浓度小于10ng/mL、小于8ng/mL、小于5ng/mL、小于^g/mL、小于 3ng/mL或小于^g/mL来确定。用于局部或皮内施用的药物组合物可以在单次施用中或在多次施用中施加。药物 组合物局部或皮内施用每周至少一次、每周至少两次、每天至少一次、每天至少两次、每天 多次、每周多次、两周一次、每月至少一次，或其任何组合。所述药物组合物局部或皮内施 用持续约一个月的时间、约两个月的时间、约三个月的时间、约四个月的时间、约五个月的 时间、约六个月的时间、约七个月的时间、约八个月的时间、约九个月的时间、约十个月的时 间、约i^一个月的时间、约一年的时间、约1. 5年的时间、约2年的时间、约2. 5年的时间、约 3年的时间、约3. 5年的时间、约4年的时间、约4. 5年的时间和约5年的时间。在施用之 间，可以冲洗施用区域来除去任何残余的纳米乳剂。
50
优选的，所述药物组合物以约0. 001mL/cm2到约5. OmL/cm2的量施用于皮肤区域。 示范性的施用量和面积是约0. 2mL/cm2。在局部或皮内施用之后，纳米乳剂可以被封闭或半 封闭。所述封闭或半封闭可以通过将绷带、聚烯烃薄膜、不可渗透隔挡物或半不可渗透隔挡 物覆盖到局部制剂上来进行。优选地，在施用之后，治疗区域用服装覆盖。H.示范性的纳米乳剂以下描述了几种示范性的纳米乳剂，然而本发明的方法不局限于这些纳米乳剂的 使用。每一种的成分和量可以如本文其他纳米乳剂的制剂中所述的成分和量而变化。除非 另作说明，表格中所有浓度按照％ w/w来表示。
表1:示范性的治疗有效的纳米乳剂制剂 (CPC%w/v)大豆油％Tween20%乙醇％CPC% (mg/mL)EDTA% (mM)H20%制剂#1 (0.50%)31.42.963.370.53 (5)0.037 ( 1 )61.70制剂#2 (0.25%)15.71.481.680.27 ( 2.5 )0.0185 (0.5)80.85制剂#3 (1.0%)62.795.926.731.068 ( 10)0.075 (2)23.42制剂#4 (0.3%)18.841.782.020.320 ( 3 )0.022 2 ( 0.6 )77.03制剂#5 (0.1%)6.280.590.670.107 ( 1 )0.0075 (0.2)92.34以下描述了几种其他的示范性的纳米乳剂。所有这些纳米乳剂显示了具有体外抗 真菌活性。如上所述，对于受试者的治疗性局部使用而言，每种成分的浓度将被提高。
权利要求
1.一种杀死有需要的人类受试者中的真菌、酵母菌或霉菌病原体或其组合的方法，所 述方法包括将纳米乳剂局部或皮内施用于所述人类受试者，其中(a)所述纳米乳剂包含具有平均直径小于约IOOOnm的液滴；(b)所述纳米乳剂液滴包含水相、至少一种油、至少一种表面活性剂和至少一种有机溶 剂；和(c)所述真菌、酵母菌或霉菌病原体选自毛癣菌物种、表皮癣菌属物种、念珠菌属物 种、小孢子菌属物种、曲霉属物种、拟青霉属物种、镰刀菌属物种、支顶孢属物种、毛壳菌属 物种、茎点霉属物种、帚霉属物种、柱霉属物种、链格孢属物种、附球菌属物种、弯孢霉属物 种或其任何组合。
2.如权利要求1所述的方法，其中(a)所述毛癣菌属物种是红色毛癣菌、断发毛癣菌、须毛癣菌、苏丹奈斯毛癣菌、疣状毛 癣菌、阿耶罗毛癣菌、同心性毛癣菌、马毛癣菌、意瑞奈斯毛癣菌、淡黄毛癣菌、光辉毛癣菌、 趾间毛癣菌、麦格毛癣菌、豆形毛癣菌、许兰毛癣菌、猴毛癣菌、土毛癣菌、断发毛癣菌、范布 鲁西米氏毛癣菌、紫色毛癣菌、杨德氏毛癣菌或其任何组合；(b)所述表皮癣菌属物种是絮状表皮癣菌、斯托克表皮癣菌或其任何组合；(c)所述念珠菌属物种是白色念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌、光滑念 珠菌、近平滑念珠菌、葡萄牙念珠菌、乳酒念珠菌、高里念珠菌、杜氏念珠菌或其任何组合；(d)所述小孢子菌属物种是犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、奥杜安小孢子菌、鸡禽小孢 子菌、铁锈色小孢子菌、扭曲小孢子菌、矮小小孢子菌、库克小孢子菌、范布瑞西米小孢子菌 或其任何组合；(e)所述附球菌属物种是黑附球菌；(f)所述曲霉属物种是聚多曲霉、土曲霉、黑曲霉、土曲霉、烟曲霉、黄曲霉、棒曲霉、灰 绿曲霉群、构巢曲霉、米曲霉、土曲霉、焦曲霉、花斑曲霉或其任何组合；(g)所述拟青霉属物种是淡紫拟青霉、宛氏拟青霉或其任何组合；(h)所述镰刀菌属物种是尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌、半裸镰刀菌或其任何组合；(i)所述毛壳菌属物种是C.atrobrunneum、粪生毛壳菌、球毛壳菌、C. strumarium、或 其任何组合；(j)所述帚霉属物种是短帚霉、S. candidal, koningii、顶孢帚霉、黄帚霉、S. cinerea、 S.trigonospora、 布朗氏帚霉、S. chartarum、暗色帚霉、S. asperula或其任何组合；(k)所述柱霉属物种是暗色柱霉、透明柱霉、S. infestans,日本柱霉、木生柱霉或其任 何组合；(1)所述链格孢属物种是交链格孢、A. chartarum、石竹链格孢、A. geophilia、感染链格 孢、匍柄链格孢、极细链格孢或其任何组合；(m)所述弯孢霉属物种是短孢弯孢霉、暗色弯孢霉、膝弯孢霉、新月弯孢霉、苍白弯孢 霉、塞内加尔弯孢霉、疣状弯孢霉或其任何组合；或(η)其任何组合。
3.如权利要求1或2所述的方法，其中(a)所述真菌、酵母菌或霉菌感染选自癣感染、皮肤癣菌病和皮肤癣菌瘤；(b)所述真菌、酵母菌或霉菌感染选自足癣、甲癣、圆癣、股癣、发癣、手癣、真菌角膜炎、面癣、花斑癣和须癣；或 (C)其任何组合。
4.如权利要求1到3任一项所述的方法，其中所述纳米乳剂液滴(a)具有的平均直径选自小于约950nm、小于约900nm、小于约850nm、小于约800nm、 小于约750nm、小于约700nm、小于约650nm、小于约600nm、小于约550nm、小于约500nm、小 于约450nm、小于约400nm、小于约350nm、小于约300nm、小于约250nm、小于约200nm、小于 约150nm、小于约lOOnm、大于约50nm、大于约70nm、大于约125nm和其任何组合；(b)具有大于约125nm和小于约300nm的平均直径；(c)经由滤泡途径利用毛孔和毛囊渗透进入表皮和真皮；(d)扩散通过皮肤、毛孔、指甲、头皮、毛囊、损伤的皮肤、患病的皮肤、侧面或近端的皱 褶、指甲、甲床或其任何组合；(e)进入表皮、真皮或其组合；(f)结合至真菌细胞表面，引起死亡、生长抑制、丧失致病性或其任何组合；(g)杀死分生孢子、菌丝、单倍体酵母菌、二倍体酵母菌或其任何组合或抑制分生孢子、 菌丝、单倍体酵母菌、二倍体酵母菌或其任何组合的生长；或(h)其任何组合。
5.如权利要求1到4任一项所述的方法，其中，所述“局部”施用是施用于任何浅表皮 肤结构、毛发、毛干、毛囊、眼睛或其任何组合。
6.如权利要求1到5任一项所述方法，其中，所述纳米乳剂包含(a)水相；(b)约的油到约80%的油；(c)约0.的有机溶剂到约50%的有机溶剂；(d)以约0.001%表面活性剂到约10%表面活性剂的量存在的至少一种表面活性剂；(e)约0.0005%到约1. 0%的螯合剂；或(f)其任何组合。
7.如权利要求1到6任一项所述的方法，其中，所述纳米乳剂包含(a)水相；(b)约5%的油到约80%的油；(c)约0.的有机溶剂到约10%的有机溶剂；(d)以约0.到约10%的量存在的至少一种非离子表面活性剂；(e)以约0.01%到约2%的量存在的至少一种阳离子试剂；(f)约0.0005%到约1. 0%的螯合剂；或(g)其任何组合。
8.如权利要求1到7任一项所述的方法，其中，所述纳米乳剂(a)对真菌、酵母菌或霉菌病原体是抑真菌性的；(b)对真菌、酵母菌或霉菌病原体是杀真菌性的；(c)对真菌、酵母菌或霉菌病原体是治疗有效的；(d)是杀真菌性的或抑真菌性的，并且对真菌分生孢子和菌丝或菌丝体或酵母菌单倍 体或二倍细胞有效；(e)向待治疗的病症提供真菌学的治愈；(f)与常规的非纳米乳剂表面抗真菌治疗Penlac 所提供真菌学治愈率相比，提供改 善的真菌学治愈率；(g)对所述人类受试者不是全身毒性的；或(h)其任何组合。
9.如权利要求1到8任一项所述的方法，其中(a)所述纳米乳剂具有窄MIC(最小抑制浓度)值分布和窄MFC (最小杀真菌浓度)值 分布；(b)所述纳米乳剂的MIC和MFC相差小于或等于四倍，意味着所述纳米乳剂是杀真菌性的；(c)所述纳米乳剂的MIC和MFC相差大于四倍，意味着所述纳米乳剂是抑真菌性的；或(d)其任何组合。
10.如权利要求1到9任一项所述的方法，其中(a)所述生物体是毛癣菌属物种，所述MIC为约0.25 μ g阳离子试剂/ml至约25 μ g阳 离子试剂/ml ；(b)所述生物体是毛癣菌属物种，所述MFC为约0.25 μ g阳离子试剂/ml至约100 μ g 阳离子试剂/ml ；(c)所述生物体是表皮癣菌属物种，所述MIC为约0.25 μ g阳离子试剂/ml至约25 μ g 阳离子试剂/ml ；(d)所述生物体是表皮癣菌属物种，所述MFC为约0.25 μ g阳离子试剂/ml至约100 μ g 阳离子试剂/ml ；(e)所述生物体是犬小孢子菌，所述MIC为约0.25 μ g阳离子试剂/ml至32 μ g阳离子 试齐[J /ml ；(f)所述生物体是犬小孢子菌，所述MFC为约0.25 μ g阳离子试剂/ml至128 μ g阳离 子试剂/ml ；(g)所述生物体是念珠菌属物种，所述MIC为约0.25 μ g阳离子试剂/ml至约32 μ g阳 离子试剂/ml ；(h)所述生物体是念珠菌属物种，所述MFC为0.25 μ g阳离子试剂/ml至约128 μ g阳 离子试剂/ml ；(i)所述生物体是曲霉属物种，所述MIC为约0.25 μ g阳离子试剂/ml至约25 μ g阳离 子试剂/ml ；(j)所述生物体是曲霉属物种，所述MFC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml至约100 μ g阳 离子试剂/ml ；(k)所述生物体是拟青霉属物种，所述MIC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml至约25 μ g阳 离子试剂/ml ；(1)所述生物体是拟青霉属物种，所述MFC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml至约100 μ g 阳离子试剂/ml ；(m)所述生物体是支顶孢属物种，所述MIC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml至约25 μ g阳 离子试剂/ml ；(η)所述生物体是支顶孢属物种，所述MFC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml至约100 μ g 阳离子试剂/ml ；(ο)所述生物体是毛壳菌属物种，所述MIC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml至约25 μ g阳 离子试剂/ml ；(P)所述生物体是毛壳菌属物种，所述MFC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml至约100 μ g 阳离子试剂/ml ；(q)所述生物体是茎点霉属物种，所述MIC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml至约25 μ g阳 离子试剂/ml ；(r)所述生物体是茎点霉属物种，所述MFC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml至约100 μ g 阳离子试剂/ml ；(s)所述生物体是帚霉属物种，所述MIC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml至约25 μ g阳离 子试剂/ml ；(t)所述生物体是帚霉属物种，所述MFC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml至约100 μ g阳 离子试剂/ml ；(u)所述生物体是镰刀菌属物种，所述MIC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml至约25 μ g阳 离子试剂/ml ；(ν)所述生物体是镰刀菌属物种，所述MFC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml至约100 μ g 阳离子试剂/ml ；(w)所述生物体是柱霉属物种，所述MIC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml至约25 μ g阳离 子试剂/ml ；(χ)所述生物体是柱霉属物种，所述MFC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml至约100 μ g阳 离子试剂/ml ；(y)所述生物体是链格孢属物种，所述MIC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml到约25 μ g阳 离子试剂/ml ；(ζ)所述生物体是链格孢属物种，所述MFC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml到约100 μ g 阳离子试剂/ml ；(aa)所述生物体是附球菌属物种，所述MIC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml至约25 μ g 阳离子试剂/ml ；(bb)所述生物体是附球菌属物种，所述MFC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml至约100 μ g 阳离子试剂/ml ；(cc)所述生物体是弯孢霉属物种，所述MIC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml至约25 μ g 阳离子试剂/ml ；(dd)所述生物体是弯孢霉属物种，所述MFC为约0. 25 μ g阳离子试剂/ml至约100 μ g 阳离子试剂/ml ；或(ee)其任何组合。
11.如权利要求1到10任一项所述的方法，其中(a)所述纳米乳剂在约40°C和约75%相对湿度下稳定一段时间，所述一段时间选自 约1个月、约3个月、约6个月、约12个月、约18个月、约2年、约2. 5年和约3年；(b)所述纳米乳剂在约25°C和约60%相对湿度下稳定一段时间，所述一段时间选自约1个月、约3个月、约6个月、约12个月、约18个月、约2年、约2. 5年、约3年、约3. 5年、 约4年、约4. 5年和约5年；(c)所述纳米乳剂在约4°C下稳定一段时间，所述一段时间选自约1个月、约3个月、 约6个月、约12个月、约18个月、约2年、约2. 5年、约3年、约3. 5年、约4年、约4. 5年、 约5年、约5. 5年、约6年、约6. 5年和约7年；或(d)其任何组合。
12.如权利要求1到11任一项所述的方法，其中，所述有机溶剂(a)选自=C1-C12醇类、二醇、三醇、二烷基磷酸酯、三烷基磷酸酯和其组合；(b)选自非极性溶剂、极性溶剂、质子溶剂、非质子溶剂、其半合成衍生物和其组合；(c)是醇类，所述醇类选自三-正丁基磷酸酯、乙醇、甲醇、异丙醇、甘油、中链甘油三 酯、乙醚、乙酸乙酯、丙酮、二甲亚砜(DMSO)、乙酸、正丁醇、丁二醇、香料醇类、异丙醇、正丙 醇、甲酸、丙二醇、甘油、山梨醇、工业用甲醇变性酒精、三乙酰甘油酯、己烷、苯、甲苯、乙醚、 氯仿、1，4_ 二氧杂环、四氢呋喃、二氯甲烷、丙酮、乙腈、二甲基甲酰胺、二甲亚砜、甲酸、其半 合成衍生物和其任何组合；和(d)其任何组合。
13.如权利要求1到12任一项所述的方法，其中所述油是(a)任何化妆品或药学上可接受的油；(b)非挥发性的；(c)选自动物油、植物油、天然油、合成油、烃类油、硅油和其半合成衍生物；(d)选自矿物油、角鲨烯油、香味油、硅油、精油、水不溶的维生素、异丙基硬脂酸酯、 硬脂酸丁酯、辛基棕榈酸酯、鲸蜡醇十六酸酯、十三烷酸山嵛酯、二异丙基己二酸酯、癸二酸 二辛酯、薄荷基氨基苯甲酸酯、十六烷基辛酸酯、辛基水杨酸酯、十四烷酸异丙酯、新戊二醇 二癸酸酯鲸蜡醇、Ceraphyls 、癸基油酸酯、二异丙基己二酸酯、C12_15烷基乳酸酯、十六烷 基乳酸酯、月桂基乳酸酯、异硬脂醇新戊酸酯、十四烷基乳酸酯、异鲸蜡醇硬脂酰硬脂酸酯、 辛基十二醇硬脂酰硬脂酸酯、烃类油、异链烷烃、流体石蜡、异十二烷、矿脂、摩洛哥坚果油、 油菜油、辣椒油、椰子油、玉米油、棉花子油、亚麻籽油、葡萄籽油、芥子油、橄榄油、棕榈油、 棕榈坚果油、花生油、松籽油、罂粟籽油、南瓜子油、米糠油、红花油、茶油、块菌油、植物油、 杏(仁)油、希蒙德木油(加州希蒙得木种子油)、葡萄籽油、夏威夷果油、麦芽油、杏仁油、 菜籽油、葫芦油、大豆油、芝麻油、榛子油、玉米油、向日葵油、大麻籽油、白檀香油、kuki坚果 仁油、鳄梨油、核桃油、鱼油、刺柏子油、多香果油、桧油、籽油、杏仁籽油、茴香子油、芹菜子 油、枯茗籽油、肉豆蔻籽油、叶油、罗勒叶油、月桂叶油、肉桂叶油、荔枝草叶油、桉树叶油、柠 檬草叶油、白千层叶油、奥杜那干酪叶油、广藿香叶油、薄荷叶油、松叶油、迷迭香叶油、绿薄 荷叶油、茶树叶油、百里香叶油、鹿蹄草叶油、花油、春黄菊油、鼠尾草油、丁香油、天竺葵花 油、牛膝草花油、茉莉花油、熏衣草花油、松红梅花油、Marhoram花油、橙花油、玫瑰油、依兰 树花油、栲皮油、肉桂皮油、桂皮油、黄樟树皮油、桐油、樟木油、柏木油、玫瑰木油、檀香油、 地下茎(姜)桐油、松香油、兰丹油、没药油、果皮油、香柠檬果皮油、葡萄柚果皮油、柠檬皮 油、石灰果皮油、橙皮油、柑桔皮油、根油、缬草油、油酸、亚油酸、油醇、异硬脂醇、其半合成 衍生物和其任何组合；或(d)其任何组合。
14.如权利要求1到13任一项所述的方法，其中，所述纳米乳剂包含挥发性油，其中(a)所述挥发性油是有机溶剂；(b)除了有机溶剂之外还存在所述挥发性油；(c)在硅氧烷成分中使用的所述挥发性油不同于油相中的油；或(d)所述挥发性油是萜烯、单萜、倍半萜、排气剂、甘菊环烃、其半合成衍生物或其组合；(e)所述挥发性油选自萜烯、单萜、倍半萜、排气剂、甘菊环烃、薄荷醇、樟脑、侧柏酮、 麝香草酚、橙花醇、芳樟醇、苎烯、香叶醇、紫苏子醇、橙花叔醇、法呢醇、依兰烯、没药醇、法 呢烯、驱蛔萜、土荆芥油、香茅醛、柠檬醛、香茅醇、母菊奥、蓍草、愈创烯、甘菊、其半合成衍 生物和其组合；或(f)所述纳米乳剂包含硅氧烷成分，所述硅氧烷成分包含至少一种挥发性的硅氧烷油， 其中所述挥发性的硅氧烷油可以是硅氧烷成分中的溶胶油，或所述挥发性的硅氧烷油可与 其他硅氧烷和非硅氧烷油结合，其中所述其他油可以是挥发性的或非挥发性的；(g)所述纳米乳剂包含硅氧烷成分，所述硅氧烷成分选自甲基苯基聚硅氧烷、西甲硅 氧烷、二甲基硅氧烷、苯基三甲基硅氧烷(或其有机改性的形式)、聚合硅氧烷的烷基衍生 物、十六烷基二甲硅氧烷、月桂基三甲硅氧烷、聚硅氧烷的羟基化的衍生物，例如，二甲硅 醇、挥发性硅氧烷油、环状和线性的硅氧烷、环甲硅氧烷、环甲硅氧烷的衍生物、六甲基环三 硅氧烷、八甲基环四硅氧烷、十甲基环五硅氧烷、挥发性的线性二甲聚硅氧烷、异十六烷、异 二十烷、异二十四烷、聚异丁烯、异辛烷、异十二烷、其半合成衍生物和其组合；或(h)其任何组合。
15.如权利要求1到14任一项所述的方法，进一步包括(a)螯合剂；(b)至少一种防腐剂；(c)至少一种PH值调节剂；(d)至少一种缓冲液；(e)至少一种抗真菌剂；或(f)其任何组合。
16.如权利要求15所示的方法，其中(a)所述螯合剂(i)以约0.0005%至约1.0%的量存在；(ii)选自乙撑二胺、乙二胺 四乙酸和二巯丙醇；(iii)是乙二胺四乙酸；(iv)或其任何组合；(b)所述防腐剂选自氯化十六烷基吡啶、苯扎氯铵、苯甲醇、氯己定、咪唑基脲、苯酚、 山梨酸钾、苯甲酸、溴硝丙二醇、氯甲酚、对羟苯甲酸酯、苯氧乙醇、山梨酸、α-生育酚、抗 坏血酸、抗坏血酸棕榈酸酯、丁基化羟茴醚、丁基化羟基甲苯、抗坏血酸钠、二(P-氯苯基二 胍)己烷、3-(-4-氯苯氧基)_丙烷-1，2- 二醇、甲基和甲基氯异噻唑啉酮、焦亚硫酸钠、 柠檬酸、依地酸，其半合成衍生物和其组合；氯苯甘醚(3- (-4-氯苯氧基)-丙烷-1，2- 二 醇)、Kath0n CG(甲基和甲基氯异噻唑啉酮)、对羟基苯甲酸酯(甲基、乙基、丙基、丁基对羟 基苯甲酸酯)、苯氧乙醇O-苯氧乙醇)、Wienonip (苯氧乙醇、甲基、乙基、丁基、丙基对羟 基苯甲酸酯)、Phenoroc (0. 73%苯氧乙醇，0. 2%对羟基苯甲酸甲酯，0. 07%对羟基苯甲酸 丙酯)、Liquipar Oil (异丙基、异丁基、丁基对羟基苯甲酸酯)、Liquipar PE(70%苯氧乙醇，30% liquipar oil)、Nipaguard MPA(苯甲醇(70% )、甲基&丙基对羟基苯甲酸酯)、 Nipaguard MPS (丙二醇、甲基&丙基对羟基苯甲酸酯)、Nipas印t (甲基、乙基和丙基对羟 苯甲酸酯)、Nipastat (甲基、丁基、乙基和丙基对羟基苯甲酸酯)、Elestab 388(丙二醇中 的苯氧乙醇加氯苯甘醚和对羟基苯甲酸甲酯)和Killitol (7. 5%氯苯甘醚和7. 5%对羟基 苯酸甲酯)；(c)所述pH值调节剂选自二乙醇胺、乳酸、单乙醇胺、三乙醇胺、氢氧化钠、磷酸钠，其 半合成衍生物和其组合；(d)所述缓冲液选自2-氨基-2-甲基-1，3-丙二醇、2-氨基-2-甲基-1-丙醇、 L-(+)_酒石酸、ACES、ADA、乙酸、乙酸铵溶液、碳酸氢铵、柠檬酸二铵、甲酸铵、草酸铵一水 合物、磷酸氢二铵、磷酸二氢铵、磷酸氢钠铵四水合物、硫酸铵溶液、酒石酸二铵、BES缓冲盐 水、BES、BICINE、BIS-TRIS、碳酸氢盐缓冲溶液、硼酸、CAPS、CHES、乙酸钙水合物、碳酸钙、 柠檬酸三钙四水合物、柠檬酸盐浓缩溶液、含水的柠檬酸、二乙醇胺、EPPS、乙二胺四乙酸二 钠盐二水合物、甲酸溶液、Gly-Gly-Gly, Gly-Gly、甘氨酸、HEPES、咪唑、脂蛋白重折叠缓冲 液、醋酸锂二水合物、柠檬酸三锂四水合物、MES水合物、MES 一水合物、MES溶液、MOPS、乙 酸镁溶液、乙酸镁四水合物、非水合柠檬酸三镁、甲酸镁溶液、磷酸氢二镁三水合物、草酸二 水合物、PIPES、磷酸盐缓冲盐水、哌嗪、D-酒石酸氢钾、乙酸钾、碳酸氢钾、碳酸钾、氯化钾、 柠檬酸二氢钾、柠檬酸三钾溶液、甲酸钾、草酸钾一水合物、磷酸氢二钾、用于分子生物学的 无水的磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸二氢钾、磷酸三钾一水合物、邻苯二甲酸氢钾、酒石酸 钠钾、酒石酸钠钾四水合物、四硼酸钾四水合物、四草酸钾二水合物、丙酸、STE缓冲液、STET 缓冲液、5，5-二乙基巴比土酸钠、乙酸钠、乙酸钠三水合物、碳酸氢钠、酒石酸氢钠一水合 物、碳酸钠十水合物、碳酸钠、柠檬酸二氢钠、柠檬酸三钠二水合物、甲酸钠溶液、草酸钠、磷 酸氢二钠二水合物、磷酸氢二钠十水合物、磷酸氢二钠溶液、磷酸二氢钠二水合物、磷酸二 氢钠一水合物、磷酸二氢钠溶液、焦磷酸二氢二钠、焦磷酸四钠十水合物、酒石酸二钠二水 合物、酒石酸二钠溶液、四硼酸钠十水合物、TAPS、TES、TM缓冲溶液、TNT缓冲溶液、TRIS 甘氨酸缓冲液、TRIS乙酸盐-EDTA缓冲溶液、TRIS缓冲盐水、TRIS甘氨酸SDS缓冲溶液、 TRIS磷酸盐-EDTA缓冲溶液、Tricine、三乙醇胺、三乙胺、三乙基乙酸铵缓冲液、三乙基磷 酸铵溶液、三甲基醋酸铵溶液、三甲基磷酸铵溶液、Tris-EDTA缓冲溶液、Trizma 乙酸盐、(K)Trizma 碱、Trizma 碳酸盐、Trizma盐酸盐、Trizma 马来酸盐或其任何组合；(e)除了所述纳米乳剂之外，所述抗真菌剂选自(1)氮杂茂(咪唑)，(2)抗代谢物， (3)烯丙胺，(4)吗啉，( 葡聚糖合成抑制物(化学物质家族棘白菌素)，(6)聚烯，(7) benoxaaborale ； (8)其他抗真菌/甲真菌病剂，和(9)新类型的抗真菌/甲真菌病剂；(f)除了所述纳米乳剂之外，所述抗真菌剂选自联苯苄唑、克霉唑、益康唑、咪康唑、 噻康唑、氟康唑、伊曲康唑、酮康唑、普拉康唑、瑞扶康唑、泊沙康唑、伏立康唑、氟胞嘧啶、特 比萘芬、Naftidine、吗啉、卡泊芬净、米卡芬净、阿尼芬净、两性霉素B、制霉菌素、匹马菌素、 灰黄霉素、环吡酮胺、AN2690、sodarin衍生物和尼柯霉素；或(g)其任何组合。
17.如权利要求1到16任一项所述的方法，其中(a)所述表面活性剂选自包含9到10个乙二醇单元的乙氧基化的壬基酚、包含8个乙 二醇单元的乙氧基化的十一醇、聚氧乙烯00)失水山梨糖醇单月桂酸酯、聚氧乙烯00)失水山梨糖醇单棕榈酸酯、聚氧乙烯00)失水山梨糖醇单硬脂酸酯、聚氧乙烯00)失水山梨 糖醇单油酸酯、失水山梨糖醇单月桂酸酯、失水山梨糖醇单棕榈酸酯、失水山梨糖醇单硬脂 酸酯、失水山梨糖醇单油酸酯、乙氧基化的氢化蓖麻油、月桂基硫酸钠、环氧乙烷和环氧丙 烷的二嵌段共聚物、环氧乙烷烯-环氧丙烷嵌段共聚物、基于环氧乙烷和环氧丙烷的四功 能嵌段共聚物、甘油基单酯、甘油基癸酸酯、甘油基辛酸酯、甘油基椰油酸酯、甘油芥酸酯、 甘油基羟基硬脂酸酯、甘油基异硬脂酸酯、甘油基羊毛脂酸酯、甘油基月桂酸酯、甘油基亚 油酸酯、甘油基肉豆蔻酸酯、甘油基油酸酯、甘油基PABA、甘油基棕榈酸酯、甘油基蓖麻醇酸 酯、甘油基硬脂酸酯、甘油基巯基乙酸酯、甘油基二月桂酸酯、甘油基二油酸脂、甘油基二肉 豆蔻酸酯、甘油基二硬脂酸酯、甘油基倍半油酸酯、甘油基硬脂酸酯乳酸酯、聚氧乙烯十六 烷基/硬脂酰基醚、聚氧乙烯胆固醇醚、聚氧乙烯月桂酸酯或二月桂酸酯、聚氧乙烯硬脂 酸酯或二硬脂酸酯、聚氧乙烯脂肪醚、聚氧乙烯月桂基醚、聚氧乙烯硬脂酰基醚、聚氧乙烯 十四烷基醚、类固醇、胆固醇、β谷固醇、没药醇、醇的脂肪酸酯、十四烷酸异丙酯、脂肪-异 丙基η- 丁酸酯、异丙基η-己酸酯、异丙基η-癸酸酯、异丙基棕榈酸酯、辛基十二基肉豆蔻 酸酯、烷氧基化的醇类、烷氧基化的酸、烷氧基化的酰胺、烷氧基化的糖类衍生物、天然油和 蜡的烷氧基化的衍生物、聚氧乙烯聚氧化丙烯嵌段共聚物、壬苯醇醚-14、PEG-8月桂酸酯、 PEG-6可可酰胺、PEG-20甲基葡萄糖倍半硬脂酸酯、PEG40羊毛脂、PEG-40蓖麻油、PEG-40 氢化蓖麻油、聚氧乙烯脂肪醚、甘油基二酯、聚氧乙烯硬脂酰基醚、聚氧乙烯十四烷基醚和 聚氧乙烯月桂基醚、甘油基二月桂酸酯、甘油基二肉豆蔻酸酯、甘油基二硬脂酸酯、其半合 成衍生物和其混合物；(b)所述表面活性剂是非离子脂质，选自甘油基月桂酸酯、甘油基肉豆蔻酸酯、甘油 基二月桂酸酯、甘油基二肉豆蔻酸酯、其半合成衍生物和其混合物；(c)所述表面活性剂是聚氧乙烯脂肪醚，所述聚氧乙烯脂肪醚具有约2个到约100个基 团的聚氧乙烯头部基团；(d)所述表面活性剂是具有如下式I所示的结构的烷氧基化的醇R5- (OCH2CH2) y—OH 式 I其中&是具有约6到约22个碳原子的分支或不分支的烷基基团，y为约4至约100， 优选地为约10至约100 ；(e)所述表面活性剂是烷氧基化的醇，所述烷氧基化的醇是羊毛脂醇的乙氧基化的衍 生物；(f)所述表面活性剂是非离子型，并且选自壬苯醇醚_9、乙氧基化的表面活性剂、乙 氧基化的醇类、乙氧基化的烷基酚、乙氧基化的脂肪酸、乙氧基化的单烷醇酰胺、乙氧基山 梨糖醇酐酯、乙氧基化脂肪氨基、环氧乙烷-环氧丙烷共聚物、二(聚乙二醇二 [咪唑羰 基])、Brij 35、Brij 56、Brij 72、Brij 76、Brij 92V、Brij 97、Brij 58P、Cremophor EL、十乙二醇单十二烷基醚、N-癸酰基-N-甲基葡糖胺、η-癸基α-D-吡喃葡萄糖苷、癸基 β-D-吡喃麦芽糖苷、η-十二烷酰-N-甲基葡糖酰胺、η-十二烷基α-D-麦芽糖苷、η-十二 烷基β-D-麦芽糖苷、七乙二醇单癸基醚、七乙二醇单十四烷基醚、七乙二醇单十二烷基 醚、正十六烷基β-D-麦芽糖苷、六乙二醇单十二烷基醚、六乙二醇单十六烷基醚、六乙二 醇单十八烷基醚、六乙二醇单十四烷基醚、Igepal CA-630、甲基-6-0-(Ν-庚基氨基甲酰 基)-α -D-吡喃葡萄糖苷、九乙二醇单十二烷基醚、N-壬酰基-N-甲基葡糖胺、八乙二醇单癸基醚、八乙二醇单十二烷基醚、八乙二醇单十六烷基醚、八乙二醇单十八烷基醚、八乙二 醇单十四烷基醚、辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷、五乙二醇单癸基醚、五乙二醇单十二烷基醚、 五乙二醇单十六烷基醚、五乙二醇单己基醚、五乙二醇单十八烷基醚、五乙二醇单辛基醚、 聚乙二醇二缩水甘油醚、聚乙二醇醚W-1、聚氧乙烯10十三烷基醚、聚氧乙烯100硬脂酸酯、 聚氧乙烯20异十六烷基醚、聚氧乙烯20油烯基醚、聚氧乙烯40硬脂酸酯、聚氧乙烯50硬脂 酸酯、聚氧乙烯8硬脂酸酯、聚氧乙烯二(咪唑基羰基)、聚氧乙烯25丙二醇硬脂酸酯、来自 皂树皮的皂角苷、Span 20、Span 40、Span 60、Span 65、Span 80、Span 85、Tergito 1、 Tergitoll5-S-12 型、Tergitol 15-S-30 型、Tergitol 15-S-5 型、Tergitol 15-S-7 型、 Tergitoll5-S-9 型、Tergitol NP-10 型、Tergitol NP-4 型、Tergitol NP-40 型、Tergitol NP-7 型、Tergitol NP-9 型、Tergitol TMN-10 型、Tergitol TMN-6 型、十四烷基-β-D-麦 芽糖苷、四乙二醇单癸基醚、四乙二醇单十二烷基醚、四乙二醇单十四烷基醚、三乙二醇单 癸基醚、三乙二醇单十二烷基醚、三乙二醇单十六烷基醚、三乙二醇单辛基醚、三乙二醇单 十四烧基醚、Triton CF-21、Triton CF-32、Triton DF-12、Triton DF-16、Triton GR-5M、 Triton QS-15、Triton QS-44、TritonX-100、Triton X-102、Triton X-15、Triton X-151、 Triton X-200,Triton X-207,Triton X-114,Triton X-165,Triton X-305,Triton X-405、 Triton X-45,Triton X-705-70、TWEEN 20、TffEEN 21、TffEEN 40、TffEEN 60、TffEEN 61、 TffEEN 65, TffEEN 80, TffEEN 81, TTOEN 85、泰洛沙泊、N- ^^ — 烷基 β -D-吡喃葡萄糖 苷、泊洛沙姆101、泊洛沙姆105、泊洛沙姆108、泊洛沙姆122、泊洛沙姆123、泊洛沙姆124、 泊洛沙姆181、泊洛沙姆182、泊洛沙姆183、泊洛沙姆184、泊洛沙姆185、泊洛沙姆188、泊 洛沙姆212、泊洛沙姆215、泊洛沙姆217、泊洛沙姆231、泊洛沙姆234、泊洛沙姆235、泊洛 沙姆237、泊洛沙姆238、泊洛沙姆观2、泊洛沙姆观4、泊洛沙姆观8、泊洛沙姆331、泊洛沙 姆333、泊洛沙姆334、泊洛沙姆335、泊洛沙姆338、泊洛沙姆401、泊洛沙姆402、泊洛沙姆 403、泊洛沙姆407、泊洛沙姆105苯甲酸盐、泊洛沙姆182、二苯甲酸酯、其半合成衍生物和 其组合；(g)所述表面活性剂是阳离子型，选自季铵化合物、烷基三甲基氯化铵化合物、二烷 基二甲基氯化铵化合物、苯扎氯铵、苄基二甲基十六烷基氯化铵、苄基二甲基十四烷基氯 化铵、苄基十二烷基二甲基溴化铵、苄基三甲基四氯碘酸铵、氯化十六烷基吡啶、二甲基 二十八烷基溴化铵、十二烷基乙基二甲基溴化铵、十二烷基三甲基溴化铵、乙基十六烷基二 甲基溴化铵、Girard' s试剂T、十六烷基三甲基溴化铵、N，N'，N-聚氧乙烯(10)-N-牛羊 脂-1，3-二氨基丙烷、溴苄嘧棕胺、三甲基(十四烷基)溴化铵、1，3，5_三嗪-1，3，5QH，4H， 6Η)_三乙醇、1-癸基铵、N-癸基-队^二甲基-氯化物、二癸基二甲基氯化铵、2-(2-( -(二 异丁基)甲酚)乙氧基)乙基二甲基苯甲基氯化铵、2-(2-(ρ-(二异丁基)苯氧基)乙氧基) 乙基二甲基苯甲基氯化铵、烷基1或3苯甲基-1-(2-羟乙基)-2-咪唑啉氯化物、烷基二 O-羟乙基)苯甲基氯化铵、烷基二甲基苯甲基氯化铵、烷基二甲基3，4_ 二氯苄基氯化铵 (100% C12)、烷基二甲基3，4-二氯苄基氯化铵(50% C14,40% C12U0% C16)、烷基二甲基 3，4-二氯苄基氯化铵(55% C14,23% C12,20% C16)、烷基二甲基苯甲基氯化铵、烷基二甲 基苯甲基氯化铵(100% C14)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(100% C16)、烷基二甲基苯甲基氯 化铵(41%C12)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(47% C12，18% C14)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(55% C16，20% C14)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(58% C14，沘％ C16)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(60% C14，25% C12)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(61 % C11，23% C14)、 烷基二甲基苯甲基氯化铵(61% C12、23% C14)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(65%C12，25% C14)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(67% C12,24% C14)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(67% C12、 25% C14)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(90% C14,5% C12)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(93% CUA0A C12)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(95% C16,5% C18)、烷基二癸基二甲基氯化铵、 烷基二甲基苯甲基氯化铵(C12-16)、烷基二甲基苯甲基氯化铵(C12-18)、二烷基二甲基苯 甲基氯化铵、烷基二甲基二甲基苯甲基氯化铵、烷基二甲基乙基溴化铵(90% C14,5% C16、 5% C12)、烷基二甲基乙基溴化铵(混合的烷基和烯基基团，如在大豆油的脂肪酸中一样)、 烷基二甲基乙基苄基氯化铵、烷基二甲基乙基苄基氯化铵(60% C14)、烷基二甲基异丙基 苄基氯化铵(50% C12,30% C14U7% C16,3% C18)、烷基三甲基氯化铵(58% C18,40% C16U% C14U% C12)、烷基三甲基氯化铵(90% C18U0% C16)、烷基二甲基(乙基苄基) 氯化铵(C12-18)、二 -(C8-10)-烷基二甲基氯化铵、二烷基二甲基氯化铵、二烷基甲基苯甲 基氯化铵、二癸基二甲基氯化铵、二异癸基二甲基氯化铵、二辛基二甲基氯化铵、十二烷基 二(2-羟乙基)辛基氯化氢铵、十二烷基二甲基苯甲基氯化铵、十二烷基氨基甲酰基甲基 二甲基苯甲基氯化铵、十七基羟基乙基咪唑啉氯化物、六氢-1，3，5-三(2-羟乙基)-s-三 嗪、Myristalkonium氯化物(和)Quat RNIUM 14、N，N-二甲基-2-羟基丙基铵氯化物聚合 物、η-十四烷基二甲基苯甲基氯化铵一水合物、辛基癸基二甲基氯化铵、辛基十二烷基二甲 基氯化铵、辛基苯氧基乙氧基乙基二甲基苯甲基氯化铵、氧基二乙烯基二(烷基二甲基氯 化铵)、三甲氧基甲硅烷基丙基二甲基十八烷基氯化铵、三甲氧基甲硅烷基季铵盐、三甲基 十二烷基苄基氯化铵、其半合成衍生物和其组合；(h)所述表面活性剂是阴离子型，选自羧酸酯、硫酸酯、磺酸酯、磷酸酯、鹅去氧胆酸、 鹅去氧胆酸钠盐、胆酸、牛或绵羊胆汁、去氢胆酸、去氧胆酸、去氧胆酸甲酯、毛地黄皂苷、毛 地黄毒苷配基、N，N- 二甲基十二烷基胺N-氧化物、多库酯钠盐、甘氨鹅去氧胆酸钠盐、甘氨 胆酸水合物，合成的甘氨胆酸钠盐水合物、合成的甘氨去氧胆酸一水合物、甘氨去氧胆酸钠 盐、甘氨石胆酸酸3-硫酸二钠盐、甘氨石胆酸酸乙酯、N-十二烷基肌氨酸钠盐、N-十二烷基 肌氨酸溶液、十二烷基硫酸锂、Lugol溶液、4型Niaproof 4、1_辛烷磺酸钠盐、1_ 丁烷磺酸 钠、1-癸烷磺酸钠、1-十二烷基磺酸钠、无水ι-庚烷磺酸钠、ι-壬烷磺酸钠、1-丙烷磺酸钠 一水合物、2-溴乙烷磺酸钠、胆酸钠水合物、络胆酸钠、去氧胆酸钠、去氧胆酸钠一水合物、 十二烷基硫酸钠、无水己烷磺酸钠、辛基硫酸钠、无水戊烷磺酸钠、牛磺胆酸钠、牛磺鹅去氧 胆酸钠盐、牛磺去氧胆酸钠盐一水合物、牛磺猪去氧胆酸钠盐水合物、牛磺石胆酸3-硫酸 二钠盐、牛磺熊去氧胆酸钠盐、Trizma 十二烷基硫酸盐、熊去氧胆酸、其半合成衍生物和其 组合；(i)所述表面活性剂是两性离子型，选自N-烷基甜菜碱、月桂基氨基丙基二甲基甜菜 碱、烷基二甲基氨基乙酸、N-烷基氨基丙酸酯、CHAPS (最小值98% )、CHAPS (最小98% )、 3_(癸基二甲基铵)丙烷磺酸内盐、3-(十二烷基二甲基铵)丙烷磺酸内盐、3-(N，N-二甲 基肉豆蔻基铵)丙烷磺酸盐、3_(N，N-二甲基十八烷基铵)丙烷磺酸盐、3-(N，N-二甲基辛 基铵)丙烷磺酸内盐、3_(N，N-二甲基棕榈基铵)丙烷磺酸盐、其半合成衍生物和其组合；(j)所述表面活性剂是聚合的，所述聚合表面活性剂选自具有至少一个聚环氧乙烷 (PEO)侧链的聚(甲基丙烯酸甲酯)主干的接枝共聚物、聚羟基硬脂酸、烷氧基化的烷基酚甲醛缩合物、具有脂肪酸疏水物的聚亚烷基二醇修饰的聚酯、聚酯、其半合成衍生物和其组 合；或(k)其任何组合。
18.如权利要求17所述的方法，其中(a)所述烷氧基化的醇类是R5是月桂基基团、y平均值为23的物质；或(b)羊毛脂醇的乙氧基化的衍生物是laneth-10，其是乙氧基化平均值为10的羊毛脂 醇的聚乙二醇醚。
19.如权利要求1到18任一项所述的方法，其中，所述纳米乳剂(a)包含至少一种阳离子表面活性剂；(b)包含氯化十六烷基吡啶阳离子表面活性剂；(c)包含阳离子表面活性剂，其中所述阳离子表面活性剂的浓度小于约5.0%和大于 约 0. 001% ；(d)包含阳离子表面活性剂，其中所述阳离子表面活性剂的浓度选自小于约5%、小 于约4. 5%、小于约4. 0%、小于约3. 5%、小于约3. 0%、小于约2. 5%、小于约2. 0%、小 于约1. 5%、小于约1. 0%、小于约0. 90%、小于约0. 80%、小于约0. 70%、小于约0. 60%, 小于约0. 50 %、小于约0. 40 %、小于约0. 30 %、小于约0. 20 %、小于约0. 10 %、大于 约0. 001%、大于约0. 002%、大于约0. 003%、大于约0. 004%、大于约0. 005%、大于约 0. 006%、大于约0. 007%、大于约0. 008%、大于约0. 009%和大于约0. 010% ；或(e)其任何组合。
20.如权利要求1到19任一项所述的方法，其中(a)所述纳米乳剂包含至少一种阳离子表面活性剂和至少一种非阳离子表面活性剂；(b)所述纳米乳剂包含至少一种阳离子表面活性剂和至少一种非阳离子表面活性剂， 其中所述非阳离子表面活性剂是非离子表面活性剂；(c)所述纳米乳剂包含至少一种阳离子表面活性剂和至少一种非阳离子表面活性剂， 其中所述非阳离子表面活性剂是聚山梨酸酯非离子表面活性剂；(d)所述纳米乳剂包含至少一种阳离子表面活性剂和至少一种非离子表面活性剂，所 述非离子表面活性剂是聚山梨酸酯20或聚山梨酸酯80 ；(e)所述纳米乳剂包含至少一种阳离子表面活性剂和至少一种非阳离子表面活性剂， 其中所述非阳离子表面活性剂是非离子表面活性剂，所述非离子表面活性剂的浓度为约 0. 05%到约10%、约0. 05%到约7. 0%、约0. 到约7%或约0. 5%到约4% ；(f)所述纳米乳剂包含至少一种阳离子表面活性剂和至少一种非离子表面活性剂，其 中所述阳离子表面活性剂的浓度为约0. 05%到约2%或约0. 01%到约2% ；或(g)其任何组合。
21.如权利要求1到20任一项所述的方法，其中，所述水存在于磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。
22.如权利要求1到21任一项所述的方法，其中(a)将所述纳米乳剂在单次施用中局部或皮内施用；(b)将所述纳米乳剂局部或皮内施用每周至少一次、每周至少两次、每天至少一次、每 天至少两次、每天多次、每周多次、双周地、每月至少一次或其任何组合；(C)将所述纳米乳剂局部或皮内施用一段时间，所述一段时间选自约一周、约两周、 约三周、约一个月、约两个月、约三个月、约四个月、约五个月、约六个月、约七个月、约八个 月、约九个月、约十个月、约i^一个月、约一年、约1. 5年、约2年、约2. 5年、约3年、约3. 5 年、约4年、约4. 5年和约5年；(d)将所述纳米乳剂局部施用，随后洗涤施用区域来除去任何残余的纳米乳剂；或(e)其任何组合。
23.如权利要求1到22任一项所述的方法，其中所述纳米乳剂在人类受试者中不被全 身吸收，或在人类受试者中非常少的所述纳米乳剂被全身吸收，其中，通过检测出所述受试 者的血浆中所述纳米乳剂中存在的一种或一种以上表面活性剂小于lOng/mL，确定没有这 样的吸收，或存在最小的吸收。
24.如权利要求23所述的方法，其中(a)检测出所述受试者的血浆中所述纳米乳剂中存在的一种或一种以上表面活性剂小 于 5ng/mL ；(b)检测出所述受试者的血浆中所述纳米乳剂中存在的一种或一种以上表面活性剂小 于 3ng/mL ；(c)检测出所述受试者的血浆中所述纳米乳剂中存在的一种或一种以上表面活性剂小 于 2ng/mL ；(d)所述受试者的血浆中所述纳米乳剂中存在的一种或一种以上表面活性剂的可测量 量低于分析检测限。
25.如权利要求1到M任一项所述的方法，其中在治疗之后，(a)获得阴性的真菌、酵母菌和/或霉菌培养物；(b)获得阴性的氢氧化钾(KOH)测试；或(c)其组合。
26.如权利要求1到25任一项所述的方法，其中(a)在所述纳米乳剂局部施用之后，所述纳米乳剂被封闭或半封闭；(b)在所述纳米乳剂局部施用之后，所述纳米乳剂被封闭或半封闭，所述封闭或半封闭 通过将绷带、聚烯烃薄膜、衣物、不可渗透隔挡层或半不可渗透隔挡层覆盖到局部制剂上进 行；(c)所述纳米乳剂以物体或载体的形式局部施用，所述物体或载体例如，绷带、插入物、 注射器样敷涂器、阴道栓剂、粉剂、滑石粉或其他固体、溶液、液体、喷雾剂、气雾剂、软膏剂、 泡沫、乳膏剂、凝胶、膏剂、洗液、微胶囊、生物粘附凝胶、香波、清洁剂(驻留和洗去产品)、 喷雾器或其组合；(d)所述纳米乳剂是控制释放剂型、持续释放剂型、立即释放剂型或其任何组合；或(e)其任何组合。
27.如权利要求1到沈任一项所述的方法，其中(a)所述感染是人类指甲、甲床、指甲基质、指甲板或其组合的感染；(b)指甲周围的组织感染是甲沟炎；(c)指甲周围的组织感染是慢性甲沟炎；或(d)其任何组合。
28.如权利要求27所述的方法，其中在治疗之后，观察到部分或全部指甲感染被清除。
29.如权利要求观所述的方法，其中(a)在治疗六周之后，受试者显示了与基线相比未受影响的指甲线性生长增加；(b)在治疗12周之后，受试者显示了与基线相比未受影响的指甲线性生长增加；(c)在治疗18周之后，受试者显示了与基线相比未受影响的指甲线性生长增加；(d)在治疗M周之后，受试者显示了与基线相比未受影响的指甲线性生长增加；(e)在治疗六周之后，受试者显示了与基线相比受影响面积减小；(f)在治疗12周之后，受试者显示了与基线相比受影响面积减小；(g)在治疗18周之后，受试者显示了与基线相比受影响面积减小；(h)在治疗M周之后，受试者显示了与基线相比受影响面积减小；或(i)其任何组合。
全文摘要
本发明涉及治疗和完全治愈人类受试者中真菌、酵母菌和/或霉菌感染的方法，所述方法包括将抗真菌纳米乳剂组合物局部施用于有需要的人类受试者。
文档编号A61P31/10GK102065851SQ200980122907
公开日2011年5月18日 申请日期2009年4月27日 优先权日2008年4月25日
发明者乔伊丝·A·萨克利夫, 玛丽·R·弗拉克, 玛丽·乔蒂, 詹姆斯·R·贝克 申请人:纳米生物公司