专利名称：一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种制备总黄酮、绿原酸提取工艺，一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、 绿原酸提取工艺。
背景技术：
国内已见报道的杜仲中总黄酮、绿原酸的提取方法有浸提法、微波辅助提取、超声波辅助提取、酶法提取等方法。详细介绍了杜仲中总黄酮、绿原酸的提取工艺，通过正交实验方法，探讨杜仲总黄酮最佳提取工艺条件。用微波法对杜仲不同部位提取总黄酮，以芦丁作为对照品，用硝酸铝-亚硝酸钠显色、用紫外-可见分光光度计测得杜仲老叶、嫩叶、细枝、粗枝、一年生枝、主杆、主杆皮、主根、主根皮、须根的总黄酮含量分别为6. 05%,4. 65%, 0. 52%,0. 33%,0. 285%,0. 23%,0. 15%,0. 15%,0. 155%,0. 165%。连续动态逆流提取法对植物有效成分的提取具有提取率高，溶剂用量少等一系列优点，研究了杜仲有效成分的超声辅助连续逆流浸取技术。本发明创新性的以杜仲叶为原料，以乙醇为溶剂，采用超微粉碎、微波助提、大孔吸附树脂、活性炭脱色、反渗透浓缩纯化得到杜仲叶黄酮产品；采用碱性蛋白酶-复合风味酶双酶酶解、膜分离和喷雾干燥技术得到绿原酸产品，实现杜仲叶中的黄酮、绿原酸等高附加值产品的同步提取，达到高值化综合利用。该产品纯度及得率高，工艺合理可行。
发明内容
本发明的目的是提供一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺。本发明的技术方案如下一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，包括(1)预处理；( 浸提； (3)离心分离；(4)树脂纯化；(5)酶解；(6)灭酶；(7)膜分离；⑶高温蒸煮醇沉多糖；(9) 喷雾干燥；得到含有总黄酮、绿原酸的提取物。本发明的制备方法如下(1)预处理新鲜杜仲叶清洗，挑选，80°C烘干至恒重，超微粉碎后过80目筛备用；(2)浸提以乙醇为溶剂，微波辅助提取，各提取条件初步确定为提取次数为2-3 次，提取温度60-70°C，提取时间lOmin，乙醇浓度60%-75%，固液比1 20_1 30，并根据工业化生产需求对工艺及其参数进行适当调整，以满足工业化生产需要；(3)离心分离离心速度为4800r/min，离心20min，并根据工业化生产需求对其进行适当调整，以满足工业化生产需要；(4)树脂纯化初步采用大孔吸附树脂 FL-I，FL-3，HPD-600，HPD-800，AB-8，X-5， NKA-9分别对杜仲叶黄酮进行纯化，结果表明AB-8较适用于杜仲叶黄酮的纯化；(5)酶解初步选用碱性蛋白酶-复合风味蛋白酶双酶酶解乙醇提取残渣，酶解条件为pH8-9，酶解温度45-55°C，底物浓度3% -5%，酶解时间60-90min ；
(6)灭酶105°C，IOmin高温高压下使酶灭活；(7)膜分离根据绿原酸的分子量选择滤膜的孔径，以截取适合的生物活性绿原酸；(8)高温蒸煮醇沉多糖高温蒸煮提取残渣，使多糖溶出，蒸煮温度100°C，蒸煮时间40min，离心得上清液，经浓缩后加入95%乙醇沉淀，使用体积视沉淀效果而定；(9)喷雾干燥旋转浓缩液经喷雾干燥成固体粉末产品，操作条件为进料温度 25°C、进风温度为190°C、出风温度87°C、喷雾压力15MPa、流速视出风温度而定。并根据工业化生产需要对各喷雾条件进行适当调整。
具体实施例方式实施例1、一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，包括(1)预处理； ⑵浸提；⑶离心分离；⑷树脂纯化；(5)酶解；(6)灭酶；(7)膜分离；⑶高温蒸煮醇沉多糖；(9)喷雾干燥；得到含有总黄酮、绿原酸的提取物。实施例2、一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，其中预处理为新鲜杜仲叶清洗，挑选，80°C烘干至恒重，超微粉碎后过80目筛备用。其余同实施例1。实施例3、一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，其中浸提为以乙醇为溶剂，微波辅助提取，各提取条件初步确定为提取次数为2-3次、提取温度60-70°C、 提取时间lOmin、乙醇浓度60%-75%、固液比1 20_1 30，并根据工业化生产需求对工艺及其参数进行适当调整，以满足工业化生产需要。其余同实施例1。实施例4、一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，其中离心分离为 离心速度为4800r/min，离心20min，并根据工业化生产需求对其进行适当调整，以满足工业化生产需要。其余同实施例1。实施例5、一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，其中树脂纯化为 初步采用大孔吸附树脂FL-1，FL-3，HPD-600, HPD-800，AB-8，X_5，NKA-9分别对杜仲叶黄酮进行纯化，结果表明AB-8较适用于杜仲叶黄酮的纯化。其余同实施例1。实施例6、一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，其中酶解为初步选用碱性蛋白酶-复合风味蛋白酶双酶酶解乙醇提取残渣，酶解条件为ΦΗ8-9，酶解温度 45-55°C，底物浓度3% -5%，酶解时间60-90min。其余同实施例1。实施例7、一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，其中灭酶为 105°C, IOmin高温高压下使酶灭活。其余同实施例1。实施例8、一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，其中膜分离为根据绿原酸的分子量选择滤膜的孔径，以截取适合的生物活性绿原酸。其余同实施例1。实施例9、一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，其中高温蒸煮醇沉多糖为高温蒸煮提取残渣，使多糖溶出，蒸煮温度100°c，蒸煮时间40min，离心得上清液，经浓缩后加入95%乙醇沉淀，使用体积视沉淀效果而定。其余同实施例1。实施例10、一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，其中喷雾干燥为旋转浓缩液经喷雾干燥成固体粉末产品，操作条件为进料温度25°C、进风温度为 190°C、出风温度87°C、喷雾压力15MPa、流速视出风温度而定。并根据工业化生产需要对各喷雾条件进行适当调整。其余同实施例1。
权利要求
1.一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，其特征在于包括下列步骤 (1)预处理；⑵浸提；(3)离心分离；⑷树脂纯化；(5)酶解；(6)灭酶；(7)膜分离；⑶高温蒸煮醇沉多糖；(9)喷雾干燥；得到含有总黄酮、绿原酸的提取物。
2.如权利要求1所述的一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，其特征在于其中预处理为新鲜杜仲叶清洗，挑选，80°C烘干至恒重，超微粉碎后过80目筛备用。
3.如权利要求1所述的一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，其特征在于其中浸提为以乙醇为溶剂，微波辅助提取，各提取条件初步确定为提取次数为2-3 次、提取温度60-70°C、提取时间IOmiru乙醇浓度60%-75%、固液比1 20-1 30。
4.如权利要求1所述的一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，其特征在于其中离心分离为离心速度为4800r/min，离心20min。
5.如权利要求1所述的一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，其特征在于其中树脂纯化为采用大孔吸附树脂FL-1，FL-3，HPD-600, HPD-800，AB-8，X_5，NKA-9 分别对杜仲叶黄酮进行纯化。
6.如权利要求1所述的一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，其特征在于其中酶解为选用碱性蛋白酶-复合风味蛋白酶双酶酶解乙醇提取残渣，酶解条件为 PH8-9，酶解温度45-55°C，底物浓度3% -5%，酶解时间60_90min。
7.如权利要求1所述的一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，其特征在于其中灭酶为105°C，IOmin高温高压下使酶灭活。
8.如权利要求1所述的一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，其特征在于其中膜分离根据绿原酸的分子量选择滤膜的孔径，以截取适合的生物活性绿原酸。
9.如权利要求1所述的一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，其特征在于其中高温蒸煮醇沉多糖高温蒸煮提取残渣，使多糖溶出，蒸煮温度100°c，蒸煮时间 40min,离心得上清液，经浓缩后加入95%乙醇进行沉淀。
10.如权利要求1所述的一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺，其特征在于其中喷雾干燥为旋转浓缩液经喷雾干燥成固体粉末产品，操作条件为进料温度 25°C、进风温度为190°C、出风温度87°C、喷雾压力15MPa。
全文摘要
本发明涉及一种从中药杜仲叶中制备总黄酮、绿原酸提取工艺。本发明以杜仲叶为原料，以乙醇为溶剂，采用超微粉碎、微波助提、大孔吸附树脂、活性炭脱色、反渗透浓缩纯化得到杜仲叶黄酮产品；采用碱性蛋白酶-复合风味酶双酶酶解、膜分离和喷雾干燥技术得到绿原酸产品，实现杜仲叶中的黄酮、绿原酸等高附加值产品的同步提取，达到高值化综合利用。
文档编号A61P19/00GK102240317SQ201010167488
公开日2011年11月16日 申请日期2010年5月10日 优先权日2010年5月10日
发明者李太盛 申请人:李太盛