专利名称：一种微波辅助提取杜仲叶中杜仲醇的方法
技术领域：
本发明属于中药提取技术，具体来说，即是一种微波辅助从杜仲叶中提取杜仲醇的方法。
背景技术：
杜仲(Eucommia ulmoides Oliv.)是中国特有的名贵经济树种，也是世界上适应范围
广的重要胶源植物，在我国26个省(区、市)均有栽培。杜仲自古以取皮入药而称，具有强筋骨、补肝肾、久服轻身耐老等功效，为中药之上品。国内外学者杜仲的丰产栽培、生理形态、化学成分及其含量、药理药效作用、系列产品开发以及仲胶进行了大量的研究，取得了丰硕的成果。特别是对化学成分的研究，已经分离出个木脂素类化合物，15个环烯醚萜类化合物，12个酚类化合物(包括8个苯丙素类合物)，并分别对其进行了药理药效学研究。[唐建军等，植物学通报.15 (6) ,21-25(1998);尉芹等，西北林学院学报.10(4) :88-93(1995);张康健等，西北林学院学报，11 (2) : 75-79 (1996)，李家实等，中药通报，11(8) :41-42(1986);翰龙等，中草药，17 (5) : 40-44 (1996);赵玉英等，天然产物研究与开发，7 (3) =46-52(1995);管淑玉等，中药材26 (2) : 124-129 (2003);王文明等，西北药学杂志，13(2) :60-62 (1998)]。早在1974年日本学者Bianco等就从杜仲中分离出一种无色油状物，结构鉴定为一化合物，命名为杜仲醇。经文献查证，仲醇只存在于植物杜仲(Eucommia ulmoides Olive)中,其他来源未见报道,是杜仲特异性成分,专属性强。经研究表明杜仲醇对大鼠体内胶原蛋白的形成具有明显的促进作用。现有制备杜仲醇的方法是采用乙酸乙酯萃取，再用活性碳-硅藻土分离，最后用甲醇洗脱。该方法所用原材料价格较高，具有一定毒性，工艺也较为复杂，很难实现工业化生产(M.Hattor，Q.M.CHE, et al, Shoyakygakuzasshi, 42 (I) :76_80，1998)。也有报道直接使用水提法[彭金年等，西北农林科技大学学报，34 (01) : 35-38 (2006)]，其收率较低，仅能达到8. 95mg/g，经济效益低下。本发明方法中，通过引入微波辅助，极大的缩短了提取时间，提高了提取收率，整体工艺的经济效益得到明显改善。
发明内容
本发明的目的是提供一种简单易行的，借助微波辅助从杜仲叶中提取杜仲醇的方法。本发明所述制备杜仲醇的工艺步骤如下
Cl)将杜仲叶粉碎，过80目筛；加入杜仲叶重量的10-30倍乙醇，乙醇浓度V/V为30-80%,在300-800W功率下微波加热l_10min，浸提液低速离心，上清液再经减压蒸馏浓缩，以95%乙醇沉淀，醇液再次浓缩后得到浸膏；(2)将步骤(I)得到的浸膏，上D-IOl大孔吸附树脂柱进行分离，水洗脱，TLC检测，CHCl3-MeOH-H2O展开，展开剂中CHCl3' MeOH, H2O三者的比例为7:3:0. 5，收集10%硫酸乙醇溶液显粉紫色的部分；收集液再上硅胶柱分离，5%、10%CHCl3-Me0H溶液依次洗脱，收集10%CHCl3-Me0H洗脱部分，浓缩后得无色油状物，即杜仲醇。本发明的有益效果是本发明的方法简单，容易工业化生产，通过微波辅助，能显著减少提取时间，提高杜仲醇的提取率。经检测，按本发明方法制得的杜仲醇粗提物含量在95%以上，提取率达到13. 5mg/g，提取时间为5min。
具体实施例方式下面通过具体实施例进一步说明本发明的特点。实例I 本实例是在微波辅助条件下，从杜仲叶中提取制备杜仲醇。具体提取过程为
取干燥的杜仲叶I公斤，用植物粉碎机粉碎，过80目筛。加入杜仲叶重量的10倍的乙醇，乙醇浓度(V/V)为30%，在800W功率下微波加热5min，浸提液低速离心，上清液再经减压蒸馏浓缩，以95%乙醇沉淀，醇液再次浓缩后得到浸膏。浸膏上D-101大孔吸附树脂柱进行分离，5L水洗脱，每500mL收集为一份，用TLC检测，CHCl3-MeOH-H2O (7:3:0. 5)展开，10%硫酸乙醇溶液显粉紫色的部分收集合并。收集液再上硅胶柱分离，5%、10%CHCl3-Me0H溶液依次洗脱，收集10%CHCl3-Me0H洗脱部分，浓缩后得无色油状物，即杜仲醇。实例2
本实例是在微波辅助条件下，从杜仲叶中提取制备杜仲醇。具体提取过程为
取干燥的杜仲叶I公斤，用植物粉碎机粉碎，过80目筛。加入杜仲叶重量的20倍的乙醇，乙醇浓度(V/V)为50%，在800W功率下微波加热8min，浸提液低速离心，上清液再经减压蒸馏浓缩，以95%乙醇沉淀，醇液再次浓缩后得到浸膏。浸膏上D-101大孔吸附树脂柱进行分离，5L水洗脱，每500mL收集为一份，用TLC检测，CHCl3-MeOH-H2O (7:3:0. 5)展开，10%硫酸乙醇溶液显粉紫色的部分收集合并。收集液再上硅胶柱分离，5%、10%CHCl3-Me0H溶液依次洗脱，收集10%CHCl3-Me0H洗脱部分，浓缩后得无色油状物，即杜仲醇。实例3
本实例是在微波辅助条件下，从杜仲叶中提取制备杜仲醇。具体提取过程为
取干燥的杜仲叶I公斤，用植物粉碎机粉碎，过80目筛。加入杜仲叶重量的30倍的乙醇，乙醇浓度(V/V)为30%，在600W功率下微波加热lOmin，浸提液低速离心，上清液再经减压蒸馏浓缩，以95%乙醇沉淀，醇液再次浓缩后得到浸膏。浸膏上D-IOl大孔吸附树脂柱进行分离，5L水洗脱，每500mL收集为一份，用TLC检测，CHCl3-MeOH-H2O (7:3:0. 5)展开，10%硫酸乙醇溶液显粉紫色的部分收集合并。收集液再上硅胶柱分离，5%、10%CHCl3-Me0H溶液依次洗脱，收集10%CHCl3-Me0H洗脱部分，浓缩后得无色油状物，即杜仲醇。实例4
本实例是对实例I获得的杜仲醇进行结构分析
通过质谱、红外、核磁共振氢谱确定该油状物的结构，数据如下EI-MS，m/z 189 (M+1)；1H NMR(CDCl3) 3. 99 (d, 1H), 2. 48 (m, 1H), 2. 07 (IH), 2. 62 (m, 1H), I. 26 (m, 1H), I. 58 (m,1H), 3. 87 (s, 1H), 4. 09 (s, 1H), 4. 05 (d, 1H), 3. 97 (m, 1H) ;IR(KBr 压片)1423cm_1 (c=c),3340cm-1 (OH)0通过与杜仲醇标准药品比照，以高效液相色谱法测定，本方法提取得到的杜 仲醇提取物中杜仲醇的含量达到95%以上。
权利要求
1. 一种微波辅助提取杜仲叶中杜仲醇的制备方法，其特征是 (1)将杜仲叶粉碎，过80目筛；加入杜仲叶重量的10-30倍乙醇，乙醇浓度F/F为30-80%,在300-800W功率下微波加热l_10min，浸提液低速离心，上清液再经减压蒸馏浓缩，以95%乙醇沉淀，醇液再次浓缩后得到浸膏； (2)将步骤(I)得到的浸膏，上D-101大孔吸附树脂柱进行分离，水洗脱，TLC检测，CHCl3-MeOH-H2O展开，展开剂中CHCl3' MeOH, H2O三者的比例为7:3:0. 5，收集10%硫酸乙醇溶液显粉紫色的部分；收集液再上硅胶柱分离，5%、10%CHCl3-Me0H溶液依次洗脱，收集10%CHCl3-Me0H洗脱部分，浓缩后得无色油状物，即杜仲醇。
全文摘要
一种从杜仲叶中提取制备杜仲醇的提取的方法，是将杜仲叶粉碎、过筛，加入乙醇，微波加热，浸提液低速离心，上清液再经减压蒸馏浓缩，乙醇沉淀，醇液再次浓缩后得到浸膏；将浸膏上大孔吸附树脂柱进行分离，水洗脱，TLC检测，CHCl3-MeOH-H2O展开，收集10%硫酸乙醇溶液显粉紫色的部分；收集液再上硅胶柱分离，5%、10%CHCl3-MeOH溶液依次洗脱，收集10%CHCl3-MeOH洗脱部分，浓缩后得无色油状物，即杜仲醇。本发明的方法简单，容易工业化生产，通过微波辅助，能显著减少提取时间，提高杜仲醇的提取率。
文档编号C07C35/06GK102816052SQ20121025616
公开日2012年12月12日 申请日期2012年7月24日 优先权日2012年7月24日
发明者刘停, 李旭 申请人:南昌大学