专利名称：青霉素类药物皮试试剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种青霉素类药物皮试试剂及其制备方法，属于化学制药领域。
背景技术：
青霉素是一组具有相同的核结构(乙内酰胺和噻唑烷环)和不同侧链的重要抗生素。青霉素G (PG)是从青霉素培养液中提取；青霉素V (PV)是在青霉素菌培养时加入侧链；青霉素类的其他药物为半合成制造(人为修饰侧链)。由于侧链结构不同，青霉素类药物皮试试剂的命名、抗菌谱和特异性呈现多样化。随着科学技术的迅猛发展，新型抗生素层出不穷。而青霉素也在这个激烈的竞争中不断进步和发展。其作为预报人体对青霉素过敏反应的试剂，主要经历了以下几个发展过程。第一代试剂，1941年，PG被用于临床治疗，良好的疗效和几乎可以忽略的毒性，使它一直被列为一线抗生素。但PG存在的问题是I型过敏反应(即刻型过敏反应)发生率高(约 4%)，其中每10万例中可有1 2例为过敏性休克。上世纪50年代，临床采用PG50U作皮试，以预报个体敏感状态，阳性率为50%。由于假阳性反应过高(在非选择性人群中约30%)， 特异性低，于是产生了“滚雪球效应”，即越来越多对PG并不敏感的患者，由于皮试曾经呈假阳性，使得医师无法处方，因而其使用率也越来越低，而我国自1950年至今，也一直是采用第一代试剂，目前同样也存在使用率低的现状。世界卫生组织(WHO)在上世纪60年代初提出深入研究预报青霉素I型过敏反应试剂的问题。10年后第二代试剂问世，有两个重要组份青霉噻唑酰-多赖氨酸 (Benzylpenicilloyl-polylysine, BPO-PLL或PLL)，亦称主抗原决定簇；青霉噻唑羧酸盐 (Benzylpenicilloate)或青霉烯酸(Benzylpenicillenic acid)和极少量青霉素的混合物，亦称次要抗原决定簇。该组试剂预报青霉素I型过敏反应正确率高达97. 6%，解决了青霉素使用的安全和假阳性问题，被许多发达国家广泛使用。由于目前国际上采用的第二代皮试试剂原料-多赖氨酸是在研究所实验室中人工合成的，有固定的赖氨酸数目和分子量。如瑞士的青霉素皮试试剂产品PENKET是由10 个赖氨酸合成，分子量为5000，因此制备BPO-PLL的成本高；也有合成20个赖氨酸作原料， 其分子量为10000。其成本过高，不能广泛地在发展中国家推广应用，并且该青霉素皮试试剂的具体制备方法未公开。因此发明设计一种制备成本低，以便能供全世界范围内使用的青霉素皮试试剂成为必要。
发明内容
本发明针对现有技术的不足，提供一种青霉素类药物皮试试剂及其制备方法，以使其制备成本降低，能够供全世界范围内的人们使用。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下一种青霉素类药物皮试试剂，包括青霉噻唑酰-多赖氨酸(PPL)和青霉噻唑羧酸盐(BPNC0)，所述青霉噻唑酰-多赖氨酸(PPL)由下述通式(I)表示:
权利要求
1. 一种青霉素类药物皮试试剂，其特征在于，包括青霉噻唑酰-多赖氨酸和青霉噻唑羧酸盐，所述青霉噻唑酰-多赖氨酸由下述通式(I )表示
2.根据权利要求1所述的青霉素类药物皮试试剂，其特征在于，所述青霉噻唑酰-多赖氨酸中的多赖氨酸的分子量为1000 10000。
3.根据权利要求1所述的青霉素类药物皮试试剂，其特征在于，所述青霉噻唑酰-多赖氨酸和青霉噻唑羧酸盐溶于生理盐水或生理缓冲液，所述青霉噻唑酰-多赖氨酸的浓度为 0. 035mg/mL，所述青霉噻唑羧酸盐的浓度为0. 5mg/mL。
4.一种青霉素类药物皮试试剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤1)分别制备青霉噻唑酰-多赖氨酸和青霉噻唑羧酸盐；2)按照青霉烷法测定制备的青霉噻唑酰-多赖氨酸和青霉噻唑羧酸盐的纯度，所述青霉噻唑酰-多赖氨酸的纯度> 90%，所述青霉噻唑羧酸盐的纯度> 60% ；3)分装纯度测定后的青霉噻唑酰-多赖氨酸和青霉噻唑羧酸盐，再冷冻干燥，即可。
5.根据权利要求4所述的青霉素类药物皮试试剂的制备方法，其特征在于，所述1)中青霉噻唑酰-多赖氨酸的制备包括以下步骤Al.将多赖氨酸与青霉素类抗生素加入盛有氯化钠溶液的反应器皿中，调节PH值，使其溶解形成反应体系；Bi.于20 25°C，搅拌反应体系，并在反应体系中加入NaOH调节PH至7. 5 14，使多赖氨酸与青霉素类抗生素结合，通过薄层层析板喷水合茚三酮观察反应体系中是否存在多赖氨酸的游离氨基；Cl.将反应结合的青霉噻唑酰-多赖氨酸反应体系中含有的青霉素降价物，过柱纯化分离；Dl.将过柱纯化后的青霉噻唑酰-多赖氨酸加入旋转蒸发器中，于真空浓缩蒸发；El.将真空浓缩后的青霉噻唑酰-多赖氨酸加蒸馏水过柱洗脱，收集洗脱液，将其分段用电导仪测定，去除含盐部分；Fl.将去盐的青霉噻唑酰-多赖氨酸再蒸发浓缩后，冷冻干燥，保存于-40°C，待用。
6.根据权利要求5所述的青霉素类药物皮试试剂的制备方法，其特征在于，所述步骤 Al中多赖氨酸与青霉素的摩尔比为1 :3，氯化钠溶液的浓度为1M/L，PH值为7. 4。
7.根据权利要求5所述的青霉素类药物皮试试剂的制备方法，其特征在于，所述步骤 Bl中，搅拌6 10小时，所述NaOH的浓度为1M/L，将PH值调至8 10。
8.根据权利要求5所述的青霉素类药物皮试试剂的制备方法，其特征在于，所述步骤 Bl中，在层析板喷水合茚三酮后，反应体系呈无色，多赖氨酸的游离氨基不存在，加入1M/L 的HCL，调节PH至7，或在层析板喷水合茚三酮后，反应体系呈淡红色色，多赖氨酸的游离氨基存在，再加入青霉素类抗生素，继续搅拌，直至多赖氨酸的游离氨基不存在。
9.根据权利要求5所述的青霉素类药物皮试试剂的制备方法，其特征在于，所述步骤 Dl中，于真空条件下，水温30 50°C浓缩蒸发。
10.根据权利要求4所述的青霉素类药物皮试试剂的制备方法，其特征在于，步骤1)中青霉噻唑羧酸盐的制备包括以下步骤A2.将青霉素类抗生素加入盛有蒸馏水的器皿中，于20 25°C搅拌，使其溶解为青霉素类抗生素溶液，所述青霉素溶液的浓度为0. lg/mL ；B2.在青霉素类抗生素溶液中加入NaOH调节PH至8 13，于20 25°C保持，搅拌 0. 5 1. 5小时；C2.然后将反应器皿置入冰水混合物中，在反应器皿内滴入1M/L的HCL，调节PH至7，停止反应；D2.将反应后的体系转入旋转蒸发器，于真空条件下，水温30 50°C浓缩蒸发，冷冻干燥，保存于_40°C，待用。
全文摘要
本发明涉及一种青霉素类药物皮试试剂及其制备方法，所述青霉素类药物皮试试剂，包括先后单独使用的青霉噻唑酰-多赖氨酸和青霉噻唑羧酸盐，所述青霉噻唑酰-多赖氨酸由下述通式(Ⅰ)表示 (Ⅰ)其中，所述青霉噻唑酰-多赖氨酸中多赖氨酸的分子量为1000～10000；所述青霉素类药物皮试试剂的制备方法，包括以下步骤1)分别制备青霉噻唑酰-多赖氨酸和青霉噻唑羧酸盐；2)按照青霉烷法测定制备的青霉噻唑酰-多赖氨酸和青霉噻唑羧酸盐的纯度；3)分装纯度测定后的青霉噻唑酰-多赖氨酸和青霉噻唑羧酸盐，再冷冻干燥，即可。
文档编号A61K49/00GK102370994SQ20101024848
公开日2012年3月14日 申请日期2010年8月9日 优先权日2010年8月9日
发明者朱大勋 申请人:朱大勋