专利名称：：贯叶金丝桃素衍生物在制药中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及生物医药领域，具体涉及两种贯叶金丝桃素衍生物，即贯叶金丝桃素乙酯和贯叶金丝桃素-N，N二环己胺盐在制药中的应用。
背景技术：
：恶性肿瘤是常见的且严重威胁人类生命和生活质量的主要疾病之一，2000年全球新发癌症病例约为1000万，死亡620万，现患病例2240万。20世纪后期近30年以来癌症病发率一直呈上升趋势，按目前趋势世界卫生组织(WHO)预测，至2020年随着全球人口达80亿，将有2000万新发癌症病例，其中死亡人数将达到1200万，癌症将成为新世纪人类的第一杀手。统计表明，我国常见人类生命健康的恶性肿瘤有肺癌、胃癌、食管癌、肠癌、肝癌、宫颈癌、乳腺癌、白血病、恶性淋巴瘤、鼻咽癌等十大肿瘤。化疗、放疗、手术治疗是当今治疗肿瘤的主要手段，但毒副作用较大。能否找到既能杀伤肿瘤细胞，毒副作用又比较小的药物及治疗方法，在肿瘤治疗中显得尤其重要。目前恶性肿瘤的药物治疗以化学药品为主，但化学药品的开发费用昂贵，毒副作用大，多有不同程度的致突变性。因此，人们把目光转向天然抗肿瘤药物的研发上，试图从天然成分中寻找毒副作用小，作用独特的抗肿瘤药物。贯叶连翘(HypericumperforatumL.)是藤黄科金丝桃属植物，又名贯叶金丝桃、赶山鞭、千层楼、圣·约翰草(St.John'swort)0由其提取物生产的制剂已在欧美诸国临床上广泛用于治疗中、轻度抑郁症。贯叶金丝桃素(hyperf0rin，HF)属于间苯三酚类物质，存在于贯叶连翘的花、果实、芽和叶中，其中花和嫩枝梢端提取物亲脂性成分中含量最高。在植物中含量为(0.87.2%)(郑清明等，不同产地贯叶连翘中贯叶金丝桃素含量分析比较·药学实践杂志·2002，0129-31)。最近的研究发现，贯叶金丝桃素除具有抗抑郁作用外，还具有抗肿瘤等药理活性。贯叶金丝桃素能够诱导，包括实体瘤和血液瘤例如慢性B淋巴细胞白血病，在内的多种肿瘤细胞凋亡。并且呈剂量依赖性的抑制多种人原和鼠原的肿瘤细胞增殖，扣50在3-2(^皿之间。并且贯叶金丝桃素抑制多种肿瘤细胞转移和侵袭以及抑制肿瘤血管生长(CQuiney,etal.Hyperforin,anewleadcompoundagainsttheprogressionofcancerandleukemia？Leukemia.2006,20:1519_1525.)。贯叶金丝桃素已经成为了目前国际上研究的热点天然药物之一。研究表明，贯叶金丝桃素抑制了Wistar大鼠自身的MT-450乳腺癌细胞的生长，这种作用和紫杉醇(paclitaxel)等效，但大鼠无任何急性中毒征象(HostanskaK,etal.HyperforinaconstituentofStJohn'swort(HypericumperforatumL.)extractinducesapoptosisbytriggeringactivationofcaspasesandwithhypericinsynergisticallyexertscytotoxicitytowardshumanmalignantcelllines.EurJPharmBiopharm.2003,56(1):121_32.)。有报道表明，贯叶金丝桃素能够通过体外抑制血管内皮细胞的生长来抑制血管生成。它能够抑制MMP-2和尿激的分泌，加入贯叶金丝桃素后能显著抑制慢性B淋巴细胞中MMP-9的分泌，抑制细胞外基质的降解，而细胞外基质的降解是肿瘤血管生成的一直重要表现(GiriecaLorusso,etal.Mechanisms3ofHyperforinasananti—angiogenicangiopreventionagent.EUROPEANJOURNALOFCANCER.2009,45:1474-1484)。由于贯叶金丝桃素具有显著的抗肿瘤活性、体内低毒性、副作用小、天然资源含量丰富的性质，其具有作为新的抗肿瘤药物的潜在开发价值。近年来关于贯叶金丝桃素提取制备工艺出现了很多深入的研究。Bombardelli等(BombardelliE,etal.Hyperforinderivatives,theusethereofandformulationscontainingthem.WO=9964388,1999-12-16.)将贯叶连翘花枝机械干燥并压成立方体，240巴40°C用二氧化碳超临界萃取，再用甲醇和正己烷反复萃取，得到的提取物中含有70%的HF，但此工艺成本较高。Bombardelli等(BombardelliE，etal.Hyperforinderivatives,theusethereofandformulationscontainingthem.WO03091193(Al),2003-11-06.)用甲醇提取贯叶连翘花枝，正己烷萃取，正己烷层用碱醇溶液萃取至没有HF，碱醇层中和后用弱碱性离子交换树脂过滤，其可选择性保留HF，再用含磷酸的甲醇洗脱，甲醇洗脱液加水稀释后用正己烷萃取，浓缩干燥后得到HF的含量为90%。此法工序复杂，不适宜大规模生产。杨得坡等(杨得坡等，植物中贯叶金丝桃素类成分的提取纯化方法。C07C50/36，2004-11-24.)用加入复合稳定剂的醇或酮搅拌浸提药材，提取液浓缩并加水稀释，用石油醚萃取，石油醚层用碱醇溶液碱化后静置分层，碱醇层酸化后用石油醚萃取，所得提取物HF含量不低于65%。此法更适宜工业化生产。但贯叶金丝桃素遇光、氧、热极易发生化学氧化降解(PoutaraudA，etal.ImprovedprocedureforthequalitycontrolofHypericumperforatumL.PhytochemAnal2001,12(6)=355-62.)0从而使其药理活性大大降低。因此，还需要对其进行结构修饰与改造，使其能在常态下保持稳定的化学特性，并保留或增强原有的活性。近年来，关于贯叶金丝桃素衍生物的研究逐渐成为热点。ZanoliP.等人报M(ZanoliP.，etal.Pharmacologicalactivityofhyperforinacetateinrats.BehavPharmacol.2002，13(8):645_651.)贯叶金丝桃素乙酯，化学性质十分稳定，且具有良好的抗抑郁效果。ChatterjeeSS等人(ChatterjeeSS，etal.Stablehyperfonnsalts，methodforproducingsameandtheiruseintreatmentofalzheimer’sdisease.PCTWO99/41220，1999-8-19.)合成了贯叶金丝桃素-N，N二环己胺盐用于治疗阿尔茨海默症。MelanieRothley等人报道了(MelanieRothley,etal.Hyperforinandaristoforininhibitlymphaticendothelialcellproliferationinvitroandsuppresstumor-inducedlymphangiogenesisinvivo.Int.J.Cancer.2009,125:34-42.)贯叶金丝桃素稳定衍生物aristoforin在体外能够抑制淋巴内皮细胞增殖，并且体内抑制由于肿瘤引起的血管生成。目前在抗肿瘤方面，还未见有关于贯叶金丝桃素乙酯和贯叶金丝桃素-N，N二环己胺盐的报道。
发明内容本发明的目的在于提供了两种贯叶金丝桃素衍生物，即贯叶金丝桃素乙酯和贯叶金丝桃素-N，N二环己胺盐在制药中的新用途。实现上述的目的技术方案如下具有结构I1的贯叶金丝桃素乙酯和/或具有结构I2的贯叶金丝桃素-N，N二环己权利要求具有结构I1的贯叶金丝桃素乙酯和/或具有结构I2的贯叶金丝桃素N，N二环己胺盐在制备治疗肿瘤的药物中的应用。FSA00000245415500011.tif2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为白血病。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为对多种抗肿瘤药物耐药的白血病。4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为肝癌、宫颈癌、肺癌、乳腺癌或恶性黑色素瘤。5.一治疗肿瘤的药物，其特征在于，其活性成份为权利要求1所述的贯叶金丝桃素乙酯和/或贯叶金丝桃素-N，N二环己胺盐。全文摘要本发明公开了具有结构I1的贯叶金丝桃素乙酯和/或具有结构I2的贯叶金丝桃素-N，N二环己胺盐在制备治疗肿瘤药物中的应用。本发明通过药理药效学实验证明，贯叶金丝桃素乙酯和贯叶金丝桃素-N，N二环己胺盐对体外培养的人肿瘤细胞具有特异性的抑制增值、诱导凋亡、影响细胞周期等作用，为临床肿瘤治疗提供了新的药物选择。文档编号A61K31/13GK101933917SQ20101026421公开日2011年1月5日申请日期2010年8月25日优先权日2010年8月25日发明者刘劲芸,刘忠,孙凤,杨得坡,王一飞,王冬梅申请人:中山大学