专利名称：一种用于抗衰老的口服液及其制备方法和质量控制方法
技术领域：
本发明涉及医药领域，具体而言，本发明涉及一种用于抗衰老的口服液及其制备方法和质量控制方法。
背景技术：
由于目前的人们的生活节奏加快，工作压力增大等原因造成诸如更年期综合征、 神经衰弱、慢性疲劳综合症(Chronic FatigueSyndrome, CFS)等疾病的发病率明显增加。 CFS是因为长期的体力和脑力方面的高度紧张或精神负担过重，使人产生记忆力减退、注意力不集中、睡眠障碍、精神困倦、四肢无力等全身性症候群。美国疾病控制中心预测，CFS将成为21世纪影响人类健康的一个主要问题，至今尚无特效治疗药物。中成药制剂能通过整体调节机体过氧化平衡，延缓衰老，调节改善机体免疫功能， 保护脑、肝、内分泌等重要组织器官功能和抗疲劳作用，并且副作用低，安全有效。发明人经过对国内外文献和专利的查询，未见能治疗更年期综合征、神经衰弱、慢性疲劳综合症等疾病的中成药制剂。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于抗衰老，治疗更年期综合征、神经衰弱、慢性疲劳综合症的口服液。本发明的目的还在于提供该口服液的制备方法。本发明的目的还在于提供该口服液的质量控制方法。为了实现本发明的目的，本发明提供一种用于抗衰老，治疗更年期综合征、神经衰弱、慢性疲劳综合症的口服液，它是由下列重量份配比的中药药材并依照下述1)到4)的步骤制成制何首乌50 150 淫羊藿15 45 黄精(制)22 66枸杞子15 45黄芪22 66 丹参11 331)取上述重量份的制何首乌、丹参、枸杞子加水煎煮三次，合并煎液，滤过，将滤液浓缩至相对密度为1. 10 1.40(60°C )，加乙醇使含醇量达70%，滤过；再向滤液中加入乙醇使含醇量达80%，滤过，调节滤液pH值至7. 8-8. 2，滤过；再调节滤液pH值至6. 8-7. 2， 回收乙醇，药液备用； 2)取上述重量份的淫羊藿、黄精加水煎煮二次，合并煎液，滤过，将滤液浓缩至相对密度为1. 10 1. 30 (500C )，加乙醇至含醇量达65%，滤过；再向滤液中加入乙醇使含醇量达80%，滤过，调节滤液pH值至7. 8-8. 2，滤过；再调节滤液pH值至6. 8-7. 2，回收乙醇， 药液备用；3)取上述重量份的黄芪加水煎煮三次，合并煎液，滤过，将滤液浓缩至相对密度为 1. 10 1.40(25°C )，药液备用；4)合并上述三种备用药液，搅勻，滤过，将滤液加水定容并调节pH值至7. 0-7. 5，使得每IOOml水溶液相当于含IOOg制何首乌药材。制备本发明用于抗衰老的口服液的中药药材的优选重量份配比为制何首乌 75 125、淫羊藿22. 5 37. 5、黄精(制)33 55、枸杞子22. 5 37. 5、黄芪33 55、丹参16. 5 27. 5 ；更优选的中药药材重量份配比为制何首乌100、淫羊藿30、黄精(制)44、 枸杞子30、黄芪44、丹参22。本发明还提供该口服液的制备方法，该方法包括1)称取中药药材制何首乌、淫羊藿、黄精(制)、枸杞子、黄芪、丹参；2)取制何首乌、丹参、枸杞子加水煎煮三次，合并煎液，滤过，将滤液浓缩至相对密度为1. 10 1. 40 (600C )，加乙醇使含醇量达70%，滤过；再向滤液中加入乙醇使含醇量达 80%,滤过，调节滤液pH值至7. 8-8. 2，滤过；再调节滤液pH值至6. 8-7. 2，回收乙醇，药液 3)取淫羊藿、黄精加水煎煮二次，合并煎液，滤过，将滤液浓缩至相对密度为 1. 10 1. 30 (50°C )，加乙醇至含醇量达65%，滤过；再向滤液中加入乙醇使含醇量达 80%,滤过，调节滤液pH值至7. 8-8. 2，滤过；再调节滤液pH值至6. 8-7. 2，回收乙醇，药液4)取黄芪加水煎煮三次，合并煎液，滤过，将滤液浓缩至相对密度为1. 10 1.40(25°C )，药液备用；5)合并上述三种备用药液，搅勻，滤过，将滤液加水定容并调节pH值至7. 0-7. 5， 使得每IOOml水溶液相当于含IOOg制何首乌药材。本发明还提供该口服液的质量控制方法，该方法包括1)性状所述口服液为棕色的液体；味甜、微涩。2)鉴别(a)取所述口服液20ml，用氯仿振摇提取3次，每次15ml，合并氯仿液，回收氯仿， 残渣加乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取大黄素对照品，加乙醇制成每Iml含0. 05mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(2005版《中国药典》附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-甲醇(15 2 0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点；置氨气中熏后，日光下检视，斑点变为红色。(b)取所述口服液10ml，用醋酸乙酯振摇提取3次，每次10ml，合并醋酸乙酯液，回收醋酸乙酯，残渣加乙醇使溶解，作为供试品溶液。另取淫羊藿甙对照品，加乙醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(2005版《中国药典》附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各4μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水 (10 1 1 1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铝乙醇溶液，于105°C烘5 10分钟，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄绿色荧光斑点。3)检查(a)相对密度应不低于1. 05(2005版《中国药典》附录VIIA比重瓶法)。(b) pH值应为5. 0 7. 0 (2005版《中国药典》附录VIIG)。(c)其他应符合合剂项下有关的各项规定(2005版《中国药典》附录IJ)。
5
4)含量测定照高效液相色谱法(2005版《中国药典》附录VID)测定。(a)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.2%磷酸溶液(57 43)为流动相；检测波长为271nm;柱温为40°C;理论板数按淫羊藿甙峰计算应不低于2500。(b)对照品溶液的制备精密称取淫羊藿甙对照品约10mg，置IOOml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇勻，即得(每Iml中含淫羊藿甙100 μ g)。(c)供试品溶液的制备精密量取所述口服液1.0ml，加于聚酰胺柱[取聚酰 5g(75 ISOnm)，湿法装柱(柱径20mm)，洗净备用]中，用水IOOml洗脱，弃去洗脱液，再用乙醇150ml洗脱，洗脱液于50°C以下减压蒸干，残渣用甲醇溶解，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，即得。(d)测定法分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪， 测定，即得。所述口服液每Iml含淫羊藿甙(C33H4tlO15)不得少于0. 5mg。在本发明所述口服液可口服给药，一次10毫升，一日1次。在本发明所述口服液的中药药材配方中，以何首乌为君药，补益精血，滋补肝肾。 臣以黄精、枸杞子滋肾填精。佐以淫羊藿补肾壮阳；黄芪补气生血；丹参活血通络，且使诸药补而不滞。诸药配合，共奏益气补血，滋养肝肾之功，具有调节机体过氧化平衡，延缓衰老，调节改善机体免疫功能，保护脑、肝、内分泌等重要组织器官功能和抗疲劳作用，在治疗更年期综合征，神经衰弱，慢性疲劳综合症，以及年老体弱，精神萎靡，失眠健忘，眼花耳聋， 脱发或头发早白等综合疗效上具有明显的优点。并且临床观察中也未发现所述口服液有明显的不良反应，说明该制剂是一种安全、有效的中成药，值得在临床中推广运用。
具体实施例方式以下通过具体实施方式
的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。实施例1本发明口服液制备例将制何首乌lOOOg、丹参220g、枸杞子300g加水煎煮三次，合并煎液，滤过，将滤液浓缩至糖浆状(60°C时相对密度为1.2)，放冷，加乙醇使含醇量达70%，放置，滤过，滤液再加乙醇使含醇量达80%，放置，滤过，将滤液用10%氢氧化钠溶液调节pH值至8. 0，放置，滤过，将滤液用10%盐酸液调节pH值至7.0，回收乙醇，药液备用；将淫羊藿300g、黄精(制)440g加水煎煮二次，合并煎液，滤过，静置，将滤液浓缩至相对密度为1.2(50°C )，放冷，加乙醇至含醇量达65%，静置，滤过，滤液加乙醇使含醇量达80 %，静置，滤过，将滤液用10 %氢氧化钠溶液调节pH值至8. 0，静置，滤过，将滤液用 10%盐酸溶液调节PH值至7. 0，回收乙醇，药液备用；将黄芪440g黄芪加水煎煮三次，合并煎液，滤过，将滤液浓缩至相对密度为 1. 15(25°C )，药液备用。合并以上三种备用药液，搅勻，静置，滤过，将滤液加水至1000ml，并用10%氢氧化钠溶液调节PH值至7. 0，分装成每支10ml，生药含量为27g/支。
实施例2本发明口服液小鼠口服耐受测定1.试验材料(1)试验动物健康SD小白鼠10只，体重17g 22g，雌雄各半，由四川抗菌素工业研究所实验动物中心提供，动物合格证号川实动管第32号。(2)试验药物根据实施例1所制备的口服液，棕色液体，每支10ml，生药含量为27g/支。2.试验方法(1)给药途径、剂量将上述10只小鼠于禁食12小时后，一次灌胃给予本发明口服液MO. 975g生药/ kg体重(由于小鼠灌胃受胃容量限制，故本实验所用药液为实施例1所制备口服液的3. 57 倍浓缩液)。(2)检测指标观察给药期间小鼠的行为活动3.试验结果小鼠在服药后活动、吃食均正常，未见任何明显的中毒症状。给药3天后，无一死亡。本发明口服液的人用量为27g/日，成人平均体重以50kg计，则小鼠耐受量相当于人用量的446倍。4 结论上述小鼠口服耐受测定的结果提示，本发明用于抗衰老的口服液毒性较低，用于人体口服是安全的。实施例3本发明口服液治疗更年期综合征的临床试验1.临床试验样本88例40岁以上或手术切除双侧卵巢后，月经紊乱或已绝经，有明显的更年期症状的患者。将患者随机分为两组治疗组46例，年龄46 52岁，平均59岁；对照组42例， 年龄45 50岁，平均47. 5岁。两组患者一般情况无显著差异性。所有患者治疗前化验血象、肝肾功能。2.治疗方法治疗组服用根据实施例1制备的本发明口服液，每次10mL，1次/天；对照组服用谷维素片，每次20mg，3次/天。两组均以90天为1个疗程，1个疗程后统计疗效。统计学方法采用卡方检验和方差分析。3.观察项目与方法观察患者烘热汗出、失眠多梦、烦躁易怒、头晕头痛、五心烦热等临床症状的改善情况，复查血象、肝肾功能。治疗组治疗前后查血清雌二醇(E》及T淋巴细胞亚群⑶4+、 CD8+。E2采用放射免疫测定(试剂盒由深圳拉尔文生物工程有限公司提供)，T细胞亚群检测采用APAAP法(试剂盒由军事医学科学院生物制剂中心提供)，均按试剂使用说明操作。 并与30例健康人对照(年龄46 50岁，平均48岁)。4.疗效评定标准显效症状消失；好转症状有所减轻；无效症状无改善。
5.试验结果(1)两组疗效比较(见表1)表1两组疗效比较[例(％ )]
组别η显效有效无效总有效率(％)治疗组4610(21. 7)28(57. 1)8(21. 2)78. 8对照组423(7. 1)20(47. 7)19(45. 2)54. 8注两组比较，P < 0.05(2)治疗前后T淋巴细胞亚群和E2的变化情况(见表2)表2治疗前后T淋巴细胞亚群和E2的变化(平均值士标准差)
组别η时间CD4+(%)CD8+(%)CD4+/ CD8+E2治疗组46治疗前33.2 士 6.5**36.1 士 7.4**0.92 士 0.33**140.4 士 12.8**治疗后45.6 士 6.728.3 士 6.21.61±0.42176.4±16.7健康组30-46.7 士 7.027.4 士 4.81.70 士 0.46175.8±16.4注与健康组比较，*P < 0. 05，**P < 0. 01 ；治疗后与健康组比较，P > 0. 05(3)临床症状改善情况与不良反应治疗组有效者症状改善时间通常在用药1个月以后，对照组有效者症状改善通常在2个月后出现。两组均无不良反应及过敏反应，均未出现血象改变及肝肾功能损害。6.结论更年期综合征是一种常见病，多与内分泌失调有关。本发明口服液可保护内分泌器官及调节内分泌功能，调节E2的含量，从而改善症状。随着年龄增长，胸腺发生萎缩与机能减退，可导致细胞免疫功能下降，尤其引起淋巴细胞比例失调和功能降低。T淋巴细胞是体内主要的免疫调节细胞和效应细胞，CD4+T细胞促进免疫细胞增殖、分化，协调细胞相互作用，激发免疫应答，CD8+T细胞抑制免疫应答。更年期综合征患者CD4+明显低于正常对照，⑶4+/⑶8+高于正常对照，⑶4+/⑶8+明显降低，提示更年期综合征发病可能与内分泌失调和细胞免疫功能紊乱有关。而本发明口服液可能是通过调节下丘脑一垂体一性腺轴的功能和调节细胞免疫功能而发挥作用的，使患者的细胞免疫功能恢复正常。 试验例4本发明口服液治疗神经衰弱的临床试验1.临床试验样本神经衰弱患者176例，男75名，女101名，18 70岁，平均32. 3士1.6岁。随机平分成治疗组(A组)和对照组(B组)。A组男40例，女48例，平均31. 5 土 1. 6岁；B组男 35例，女53例，平均32. 6士 1. 7岁。所有病例均符合神经症的中西医结合辩证分型标准之肝肾精血亏虚型，且符合西医神经症神经衰弱的诊断标准；两组资料无统计学差异。2.治疗方法A组口服根据实施例1制备的本发明口服液，一天两次，每次IOml ；B组口服养血安神糖浆，一天三次，每次15ml。分别在服药后第1、2、3、4周后观察临床症状，并进行症状评分和疗效判定。3.疗效评价方法及标准采用SCL-90和中医症状分级量化标准进行治疗前后两组间的比较。其中SCL-90 的评价内容包括总分、总均分、阳性项目数、阴性项目数、阳性症状均分及因子分，包括躯体化、强迫症状、人际关系敏感症、抑郁、焦虑、敌对、恐怖、偏执、精神病性、其他、睡眠分。疗效评定标准的临床痊愈为SCL-90总分减少> 95%，肝肾精血亏虚的临床症状、 体症消失或基本消失，证候积分减少> 95% ；显效为SCL-90总分减少> 70%，肝肾精血亏虚的临床症状、体症明显改善，证候积分减少> 70% ；有效为SCL-90总分减少> 30%, 肝肾精血亏虚的临床症状、体症均有好转，证候积分减少> 30% ；无效为SCL-90总分减少 < 30%，肝肾精血亏虚的临床症状、体症均无明显改善甚或加重，证候积分减少< 30%。排除肝肾精血亏虚型神经症的其他分型；精神分裂症、抑郁症者；神经症的其他亚型(恐惧症，焦虑症，强迫症，躯体形式障碍)者；慢性疲劳综合征；合并肝、肾、造血系统、内分泌系统等严重疾病及/或重度营养不良者；妊娠期或哺乳期妇女对本药物成分过敏及过敏体质者；已使用其他治疗药物；病情危重难以对该药的有效性和安全性做出确切评价者。4.数据统计所有符合研究方案，服满观察疗程，依从性好，并完成病例报告表规定填写内容的病例，统计分析疗效，采用SPSS11. 5统计软件进行计算。5.试验结果(1)两组疗效比较A组在SCL-90及中医临床上的显效率、有效率、总有效率分别为25%、46. 5%和 71. 59% ；B组则分别为6. 82%,40. 91%,47. 73%，治疗组的显效率总有效率明显优于对照组，经χ 2检验显示有统计学意义(P < 0. 05)。(2)治疗组治疗前后的评分比较A组在SCL-90的总分、阳性项目数、阴性项目数、阳性症状分治疗后较治疗前有明显减少(P < 0. 01)；总均分治疗后较治疗前减少(P < 0. 05)。对照组在SCL-90的总分、总均分、阴性项目数、阳性症状分治疗后较治疗前有明显减少(P <0.01)；阳性项目数治疗后较治疗前减少(P < 0. 05)(表3)。表3SCL-90相关项目评分(n = 88)
权利要求
1. 一种用于抗衰老的口服液，其特征在于，它是由下列重量份配比的中药药材并依照下述1)到4)的步骤制成制何首乌50 150 淫羊藿15 45 黄精(制)22 66 枸杞子15 45黄芪22 66 丹参11 331)取上述重量份的制何首乌、丹参、枸杞子加水煎煮三次，合并煎液，滤过，将滤液浓缩至相对密度为1. 10 1.40(60°C )，加乙醇使含醇量达70%，滤过；再向滤液中加入乙醇使含醇量达80 %，滤过，调节滤液pH值至7. 8-8. 2，滤过；再调节滤液pH值至6. 8-7. 2，回收乙醇，药液备用；2)取上述重量份的淫羊藿、黄精加水煎煮二次，合并煎液，滤过，将滤液浓缩至相对密度为1. 10 1. 30(50°C )，加乙醇至含醇量达65%，滤过；再向滤液中加入乙醇使含醇量达 80%,滤过，调节滤液pH值至7. 8-8. 2，滤过；再调节滤液pH值至6. 8-7. 2，回收乙醇，药液3)取上述重量份的黄芪加水煎煮三次，合并煎液，滤过，将滤液浓缩至相对密度为 1. 10 1.40(25°C )，药液备用；4)合并上述三种备用药液，搅勻，滤过，将滤液加水定容并调节pH值至7.0-7. 5，使得每IOOml水溶液相当于含IOOg制何首乌药材。
2.根据权利要求1所述的用于抗衰老的口服液，其中所述中药药材重量份的配比为 制何首乌75 125 淫羊藿22. 5 37. 5 黄精(制)33 55枸杞子22. 5 37. 5 黄芪33 55丹参16. 5 27. 5
3.根据权利要求2所述的用于抗衰老的口服液，其中所述中药药材重量份的配比为 制何首乌100 淫羊藿30 黄精(制)44枸杞子30 黄芪44 丹参22
4.一种权利要求1至3任一项所述的用于抗衰老的口服液的制备方法，该方法包括1)称取中药药材制何首乌、淫羊藿、黄精(制)、枸杞子、黄芪、丹参；2)取制何首乌、丹参、枸杞子加水煎煮三次，合并煎液，滤过，将滤液浓缩至相对密度为1. 10 1.40(60°C )，加乙醇使含醇量达70%，滤过；再向滤液中加入乙醇使含醇量达 80%，滤过，调节滤液pH值至7. 8-8. 2，滤过；再调节滤液pH值至6. 8-7. 2，回收乙醇，药液3)取淫羊藿、黄精加水煎煮二次，合并煎液，滤过，将滤液浓缩至相对密度为1.10 1.30(50°C )，加乙醇至含醇量达65%，滤过；再向滤液中加入乙醇使含醇量达80%，滤过， 调节滤液PH值至7. 8-8. 2，滤过；再调节滤液pH值至6. 8-7. 2，回收乙醇，药液备用；4)取黄芪加水煎煮三次，合并煎液，滤过，将滤液浓缩至相对密度为1.10 1.40(25°C)，药液备用；5)合并上述三种备用药液，搅勻，滤过，将滤液加水定容并调节pH值至7.0-7. 5，使得每IOOml水溶液相当于含IOOg制何首乌药材。
5. 一种权利要求1至3中任一项所述的用于抗衰老的口服液的质量控制方法，该方法包括1)性状所述口服液为棕色的液体；味甜、微涩。2)鉴别(a)取所述口服液20ml，用氯仿振摇提取3次，每次15ml，合并氯仿液，回收氯仿，残渣加乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取大黄素对照品，加乙醇制成每Iml含0. 05mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(2005版《中国药典》附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-甲醇(15 2 0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点；置氨气中熏后，日光下检视，斑点变为红色。(b)取所述口服液10ml，用醋酸乙酯振摇提取3次，每次10ml，合并醋酸乙酯液，回收醋酸乙酯，残渣加乙醇使溶解，作为供试品溶液。另取淫羊藿甙对照品，加乙醇制成每 Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(2005版《中国药典》附录VIB)试验， 吸取上述两种溶液各4 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水 (10 1 1 1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铝乙醇溶液，于105°C烘5 10分钟，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄绿色荧光斑点。3)检查(a)相对密度应不低于1.05(2005版《中国药典》附录VIIA比重瓶法)。(b)pH值应为5. 0 7. 0 (2005版《中国药典》附录VIIG)。(c)其他应符合合剂项下有关的各项规定(2005版《中国药典》附录IJ)。4)含量测定照高效液相色谱法(2005版《中国药典》附录VID)测定。(a)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.2% 磷酸溶液(57 43)为流动相；检测波长为271nm;柱温为40°C;理论板数按淫羊藿甙峰计算应不低于2500。(b)对照品溶液的制备精密称取淫羊藿甙对照品约10mg，置IOOml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇勻，即得(每Iml中含淫羊藿甙lOOyg)。(c)供试品溶液的制备精密量取所述口服液1.0ml，加于聚酰胺柱[取聚酰5g(75 180nm)，湿法装柱(柱径20mm)，洗净备用]中，用水IOOml洗脱，弃去洗脱液，再用乙醇 150ml洗脱，洗脱液于50°C以下减压蒸干，残渣用甲醇溶解，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度， 摇勻，即得。(d)测定法分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定， 即得。所述口服液每Iml含淫羊藿甙(C33H4tlO15)不得少于0. 5mg。
全文摘要
本发明涉及一种用于抗衰老的口服液，它是由下列不同重量份的中药药材制成制何首乌、淫羊藿、黄精(制)、枸杞子、黄芪、丹参。本发明还涉及该口服液的制备方法和质量控制方法。本发明所述的口服液具有益气补血、滋养肝肾的功效，能治疗更年期综合征，神经衰弱，慢性疲劳综合症，以及年老体弱，精神萎靡，失眠健忘，眼花耳聋，脱发或头发早白属气血不足、肝肾亏虚者，并且急性毒性试验中也未发现所述口服液有明显的不良反应，说明该制剂是一种安全、有效的中成药，值得在临床中推广运用。
文档编号A61K9/00GK102397462SQ20101028037
公开日2012年4月4日 申请日期2010年9月10日 优先权日2010年9月10日
发明者万方, 张劲松, 杨华蓉, 林大胜, 王浪波, 高星 申请人:成都华神集团股份有限公司制药厂