专利名称：一种香椿叶黄酮类物质的分离方法
技术领域：
本发明涉及有机物提取工艺，尤其是涉及一种香椿叶黄酮类物质的分离方法。
技术背景
香椿又名春芽树、椿、椿树，在《植物名实图考》中称为红椿，属楝科(Meliaceae) 香椿属落叶乔木，是我国特有珍贵速生材、菜、药多用途树种，落叶乔木，树冠庞大，叶繁茂， 树干通直，生长迅速。香椿具有很高的药用价值，《本草纲目》中指出，香椿的叶、芽、根、皮和果实均可入药。现代医学实验研究表明香椿叶提取物体内有调节脂质代谢、缓解高血糖症、 增进精子活力、延缓肝纤维化、诱导癌细胞凋亡和抑制肉瘤生长等作用。此外香椿叶提取物还有体外抗氧化、抗菌和对害虫的毒杀、拒食或驱避活性等作用。香椿叶主要有效成分之一为黄酮类化合物，主要以苷的形式存在，已发现的黄酮类化合物主要有槲皮素-3-0-葡萄糖苷、槲皮素-3-0-鼠李糖苷、槲皮素-3-0-葡萄糖苷(6-1)鼠李糖、山萘酚-3-0-葡萄糖苷、山萘酚-3-0-阿拉伯糖、6，7，8，2'-四甲氧基-5，6' - 二羟基黄酮、5，7-二羟基-8-甲氧基黄酮等，所含黄酮醇苷的苷元主要是槲皮素、山萘酚，与银杏叶所含黄酮苷元大致相同，而且同季节香椿叶中总黄酮苷元含量比银杏叶中的含量高出2-3倍。
黄酮类化合物具有广泛的生物活性，如保肝、抗炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化作用以及对心血管的作用和雌激素样作用。植物中黄酮类化合物现有的提取富集分离方法主要有有机溶剂萃取、大孔树脂吸附等方法，也有用双水相和超滤方法的报道。发明内容
为了加速开发香椿叶资源，本发明旨在提供一种质量稳定可靠，提取方法简便的香椿叶黄酮类物质的工艺。
实现上述目的的技术方案如下
从香椿叶提取香椿叶黄酮类物质的工艺，工艺步骤如下
(1)将香椿叶晒干，粉碎；
(2)干粉用50-95%的乙醇回流进行初提，料液比为6_10倍，在50_85°C回流1_2 小时，再进行减压蒸馏，压力为0. 08Mpa，温度为40-50°C，回收溶剂，得到乙醇浸膏；
(3)乙醇浸膏用1 % -5%的NaOH溶液水解纯化，1 % _5 %的NaOH溶液用量为乙醇浸膏体的4-6倍，充分溶解后过滤，除去沉淀；
(4)在室温下用石油醚萃取脱色，除去石油醚层；
(5)用乙酸乙酯进行萃取，乙酸乙酯用量为1 1.5-1 2，萃取5-6次，收集乙酸乙酯层；
(6)加入HCl 3-10%溶液，热回流进行酸解，热回流温度为60-80°C，回流1-2小时；
(7)水层中加入乙酸乙酯提取酸解后水相中的异黄酮类物质，乙酸乙酯用量为 1 1.5-1 2，提取5-6次，收集乙酸乙酯提取层；
(8)合并乙酸乙酯提取层，进行减压蒸馏，0. 08Mpa，40-50°C，得到香椿叶黄酮类物质粗品。
在上述提取工艺中各参数的优选值为热回流初提用的乙醇浓度为75%。用于水解纯化的氢氧化钠水溶液浓度为2%。酸解时盐酸溶液浓度为3%。初提时乙醇用量料液比为10倍，回流温度为70°C，回流时间1小时。HCl酸解时反应温度为60°C，反应时间为1 小时。
对香椿叶黄酮类物质粗品进行HPLC检测，以十八烷基硅烷键合硅胶柱作为色谱柱，分别取适当浓度的磷酸水溶液及乙腈溶液作为流动相，经检测，已划归香椿叶黄酮同宗的含量可达20%以上。
本发明具有以下有益效果工艺简单，提取效率高；采用通用设备，设资少，工程启动快；成本低、易于推广。
具体实施方式
现通过以下实施例对本发明的技术方案作进一步说明。
实施例1
(1)将香椿叶晒干，粉碎；
(2)干粉用75%的乙醇回流进行初提，料液比为10倍，在70°C回流1小时，再进行减压蒸馏，压力为0. 08Mpa，温度为45°C，回收溶剂，得到乙醇浸膏；
(3)乙醇浸膏用NaOH 3%溶液水解纯化，NaOH溶液用量为乙醇浸膏体积的5倍， 充分溶解后过滤，除去沉淀；
(4)在室温下用石油醚萃取脱色，除去石油醚层；
(5)用乙酸乙酯进行萃取，乙酸乙酯用量为1 1.5，萃取5次，收集乙酸乙酯层；
(6)加入3%盐酸溶液，热回流进行酸解，热回流温度为70°C，回流1小时；
(7)水层中加入乙酸乙酯提取酸解后水相中的异黄酮类物质，乙酸乙酯用量为 1 1.5，提取5次，收集乙酸乙酯提取层；
(8)合并乙酸乙酯提取层，进行减压蒸馏，0.08Mpa，45°C，得到香椿叶黄酮类物质粗品。
实施例2
(1)将香椿叶晒干，粉碎；
(2)干粉用95%的乙醇回流进行初提，料液比为8倍，在85°C回流2小时，再进行减压蒸馏，压力为0. 08Mpa，温度为50°C，回收溶剂，得到乙醇浸膏；
(3)乙醇浸膏用NaOH 溶液水解纯化，NaOH溶液用量为乙醇浸膏体积的6倍， 充分溶解后过滤，除去沉淀；
(4)在室温下用石油醚萃取脱色，除去石油醚层；
(5)用乙酸乙酯进行萃取，乙酸乙酯用量为1 2，萃取6次，收集乙酸乙酯层；
(6)加入10%盐酸溶液，热回流进行酸解，热回流温度为80°C，回流2小时；
(7)水层中加入乙酸乙酯提取酸解后水相中的异黄酮类物质，乙酸乙酯用量为 1 2，提取6次，收集乙酸乙酯提取层；
(8)合并乙酸乙酯提取层，进行减压蒸馏，0.08Mpa，5(TC，得到香椿叶黄酮类物质粗品。
实施例3
(1)将香椿叶晒干，粉碎；
(2)干粉用50%的乙醇回流进行初提，料液比为6倍，在50°C回流1. 5小时，再进行减压蒸馏，压力为0. 08Mpa，温度为40°C，回收溶剂，得到乙醇浸膏；
(3)乙醇浸膏用NaOH 5%溶液水解纯化，NaOH溶液用量为乙醇浸膏体积的4倍， 充分溶解后过滤，除去沉淀；
(4)在室温下用石油醚萃取脱色，除去石油醚层；
(5)用乙酸乙酯进行萃取，乙酸乙酯用量为1 2，萃取6次，收集乙酸乙酯层；
(6)加入5%盐酸溶液，热回流进行酸解，热回流温度为60°C，回流1小时；
(7)水层中加入乙酸乙酯提取酸解后水相中的异黄酮类物质，乙酸乙酯用量为 1 2，提取6次，收集乙酸乙酯提取层；
(8)合并乙酸乙酯提取层，进行减压蒸馏，0.08Mpa，4(TC，得到香椿叶黄酮类物质粗品。权利要求
1.一种香椿叶黄酮类物质的分离方法，其特征为包括以下步骤(1)将香椿叶晒干，粉碎；(2)干粉用50%-95%的乙醇回流进行初提，料液比为6-10倍，在50-85°C回流1_2小时，再进行减压蒸馏，压力为0. 08Mpa，温度为40-50°C，回收溶剂，得到乙醇浸膏；(3)乙醇浸膏用1% -5%的NaOH溶液水解纯化，1 % _5%的NaOH溶液用量为乙醇浸膏体的4-6倍，充分溶解后过滤，除去沉淀；(4)在室温下用石油醚萃取脱色，除去石油醚层；(5)用乙酸乙酯进行萃取，乙酸乙酯用量为1 1.5-1 2，萃取5-6次，收集乙酸乙酯层；(6)加入3%-10%的盐酸溶液，热回流进行酸解，热回流温度为60-80°C，回流1-2小时；(7)水层中加入乙酸乙酯提取酸解后水相中的黄酮类物质，乙酸乙酯用量为 1 1.5-1 2，提取5-6次，收集乙酸乙酯提取层；(8)合并乙酸乙酯提取层，进行减压蒸馏，0.08Mpa，40-50°C，得到香椿叶黄酮类物质粗PΡΠ O
2.根据权利要求1所述的香椿叶黄酮类物质的分离方法，其特征为热回流初提用的乙醇浓度为75%。
3.根据权利要求1所述的香椿叶黄酮类物质的分离方法，其特征为用于水解纯化的氢氧化钠水溶液浓度为2%。
4.根据权利要求1所述的香椿叶黄酮类物质的分离方法，其特征为酸解时盐酸溶液浓度为3%。
5.根据权利要求1或2所述的香椿叶黄酮类物质的分离方法，其特征为初提时乙醇用量料液比为10倍，回流温度为70°C，回流时间1小时。
6.根据权利要求1或4所述的香椿叶黄酮类物质的分离方法，其特征为盐酸酸解时反应温度为60°C，反应时间为1小时。
全文摘要
本发明涉及有机物提取工艺，尤其是涉及一种香椿叶黄酮类物质的分离方法，包括用乙醇溶液热回流进行初提，得乙醇浸膏，再用氢氧化钠溶液进行水解进行纯化，再用盐酸溶液进行水层处理，经乙酸乙酯萃取，减压蒸馏得到香椿叶黄酮类物质的粗产品，本发明具有提取效率高、设备投资少、工程启动快、成本低、易于推广的有益效果。
文档编号A61P9/00GK102512503SQ20111037172
公开日2012年6月27日 申请日期2011年11月15日 优先权日2011年11月15日
发明者毕云英 申请人:威海天泓农业科技有限公司