过氧化物酶体增殖物激活受体(ppar)的配体剂的制作方法

专利名称：过氧化物酶体增殖物激活受体(ppar)的配体剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及对预防及/或治疗与过氧化物酶体增殖物激活受体相关的疾病有效的过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)的配体剂。本发明还进一步涉及用于预防及/或治疗上述疾病的医药组合物及/或饮食品。
背景技术：
曾歹(Peroxisome proliferator-activatedreceptor PPAR)属于维持脂质及糖代谢的担负基因组表达调控的核受体家族的控制配体依赖性转录的因子，已知存在PPAR α、PPAR γ、PPAR δ (PPAR β)的3种亚型。已确认PPARa主要在肝脏、心肌等中表达并调节脂质代谢，特别是在肝脏中高表达。作为PPARa的配体，已知有棕榈酸、油酸、亚油酸、花生四烯酸等的脂肪酸类，苯扎贝特、氯贝特等的贝特类抗高脂血症药等的合成化合物，还已知通过激活肝脏的PPARa、促进脂质代谢来体现出血液中的脂质降低作用(非专利文献1，2)。PPAR γ主要在脂肪组织中表达，参与小型脂肪细胞的分化，且具有诱导引起胰岛素抵抗的TNF α及游离脂肪酸的产生、分泌亢进的肥大脂肪细胞的细胞凋亡，从而改善胰岛素抵抗、降低血糖值的作用等。作为PPAR γ的配体，已知有α-亚麻酸、二十碳五烯酸、 二十二碳六烯酸等的不饱和脂肪酸，曲格列酮、匹格列酮、罗格列酮等的噻唑烷二酮类糖尿病治疗药等的合成化合物，通过抑制肥大脂肪细胞的过量形成，使胰岛素敏感性的小型脂肪细胞增加，从而改善胰岛素抵抗、降低血糖值(非专利文献1，2)。PPAR δ因在组织内普遍表达，所以难于进行功能预测，其生理作用不明了，但在最近，证实了其在骨格肌细胞中高表达，进而在骨格肌细胞、脂肪组织内参与脂肪酸代谢相关的基因表达，具有促进脂肪酸代谢的功能。另外，可知PPAR δ配体除了抑制肥胖小鼠模型的高脂餐负荷所引起的体重增加以外，还显示出改善胰岛素抵抗的效果。而且，还证实了使骨格肌中PPARS过表达的重组小鼠不易产生高脂餐负荷所引起的肥胖和胰岛素抵抗， 还可使脂肪细胞小型化(非专利文献1)。作为PPAR δ的配体，已报道有二高-γ -亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸等的多不饱和脂肪酸类，前列腺素Al、前列腺素D2等的类花生酸类，半合成前列腺素的前列腺环素等(非专利文献2)。其他，作为PPAR配体，已报道有没食子酸酯、没食子单宁类、槲皮酮类、黄酮、异黄酮、儿茶素、表儿茶素等的多酚类(专利文献1)。专利文献1日本特开2002-80362号公报专利文献2日本特开2003-95968号公报
专利文献3日本特开2006_似816号公报专利文献4日本特开2003-26694号公报专利文献5日本特开2005-8572号公报专利文献6日本特开2006-16330号公报专利文献7日本特开2005-U6405号公报专利文献8日本特开2006-20606号公报专利文献9日本特开2006-230225号公报专利文献10日本特开2006-22095号公报专利文献11日本特开2006-520804号公报专利文献12W097/28149非专利文献1日本临床，2005年，63卷557 583项非专利文献2Journal of Medicinal Chemistry, 2000 年，43 卷，527 550 页非专利文献3Journal of Periodontology, 2006 年，77 卷，271 279 页非专利文献4Phytother. Res.，2007 年，21 卷，391 394 页非专利文献 5Journal of Agr icultural and Food Chemistry, 54, 335-341(2006)非专利文献6Annals of Medicine, 2005 年，37 卷，270 275 页非专利文献7Exp. Biol. Med.，2005 年，230 卷，225 234 页

发明内容
如上所述，PPAR配体(本说明书中，也记为“PPAR的配体剂”)通过使脂质代谢、糖代谢亢进，可期待预防及/或改善肥胖及肥胖引起的胰岛素抵抗、更有高脂血症、高血压、 糖尿病改善等。但是，对于已有的PPAR配体，除了因担心医药品的长期投给所引起的副作用等以外，来自食品的多酚类等又不能得到充分的PPAR配体作用(本说明书中，也记为“配体活性”)，作为PPAR配体剂的功效也不一定令人满意。本发明的目的在于提供安全、具有优异的PPAR配体作用的PPAR配体剂。本发明者为得到即使长期摄取也安全而副作用少的PPAR配体，不断探索各种植物提取物中的PPAR配体的结果，成功地得到了具有优异的PPAR配体作用的特定的食用植物的提取物。而且还发现，其配体作用的特性因溶剂种类等的不同而不同，从而完成了本发明。 本发明中，作为优选方式包含以下的方式。[方式1]一种过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)的配体剂，其特征在于，含有作为有效成分的选自以下的植物锯叶棕、刺五加、巴西莓、豆蔻、欧白芷、番石榴、黑刺李、木半夏、川芎、大麻、西洋接骨木、亮叶杨桐、西番莲、滨海前胡、茴芹、穗花牡荆、印度人参、帚石楠、单子山楂、亚麻、阿魏蘑、刺槐、无梗五加中的1种或2种以上的植物提取物。[方式2]根据方式1所述的配体剂，其中，PPAR为PPAR δ。[方式3]
根据方式1或2所述的配体剂，其中，植物选自西洋接骨木、亮叶杨桐、西番莲、滨海前胡、茴芹、穗花牡荆、印度人参、帚石楠、单子山楂、亚麻、阿魏蘑、刺槐、无梗五加中的1 种或2种以上。[方式4]根据方式1 3中任一项所述的配体剂，其中，提取物为醇或醇水溶液提取物。[方式δ]根据方式4所述的配体剂，其中，醇为乙醇。[方式6]根据方式1或2所述的配体剂，其中，植物选自亚麻、阿魏蘑、无梗五加、大麻中的 1种或2种以上。[方式7]根据方式1、2或6所述的配体剂，其中，提取物为热水提取物。[方式8]一种医药组合物，其特征在于，其用于预防及/或治疗与过氧化物酶体增殖物激活受体相关的疾病，含有选自以下植物锯叶棕、刺五加、巴西莓、豆蔻、欧白芷、番石榴、黑刺李、木半夏、川芎、大麻、西洋接骨木、亮叶杨桐、西番莲、滨海前胡、茴芹、穗花牡荆、印度人参、帚石楠、单子山楂、亚麻、阿魏蘑、刺槐、无梗五加中的1种或2种以上的植物提取物和药学上允许的添加剂。[方式9]根据方式8所述的医药组合物，其中，与过氧化物酶体增殖物激活受体相关的疾病选自肥胖、高脂血症、高血压、糖尿病中的1种或2种以上的疾病。[方式10]一种饮食品，其特征在于，含有选自以下的植物锯叶棕、刺五加、巴西莓、豆蔻、欧白芷、番石榴、黑刺李、木半夏、川芎、大麻、西洋接骨木、亮叶杨桐、西番莲、滨海前胡、茴芹、 穗花牡荆、印度人参、帚石楠、单子山楂、亚麻、阿魏蘑、刺槐、无梗五加中的1种或2种以上的植物提取物和作为饮食物允许的添加剂。[方式11]根据方式10所述的饮食品，其用于预防及/或改善与过氧化物酶体增殖物激活受体相关的疾病。[方式12]一种抗肥胖剂，其特征在于，含有作为有效成分的选自西洋接骨木、茴芹、单子山楂及亮叶杨桐中的1种或2种以上的植物提取物。[方式13]—种用于预防及/或治疗与过氧化物酶体增殖物激活受体相关的疾病的方法，其特征在于，所述方法包括向需要该预防及/或治疗的个体投给含有选自以下植物锯叶棕、 刺五加、巴西莓、豆蔻、欧白芷、番石榴、黑刺李、木半夏、川芎、大麻、西洋接骨木、亮叶杨桐、 西番莲、滨海前胡、茴芹、穗花牡荆、印度人参、帚石楠、单子山楂、亚麻、阿魏蘑、刺槐、无梗五加中的1种或2种以上的植物提取物的医药组合物。[方式14]
一种用于制造医药组合物的应用，其为用于制造用于预防及/或治疗与过氧化物酶体增殖物激活受体相关的疾病的医药组合物的应用，其特征在于，所述医药组合物包含选自以下植物锯叶棕、刺五加、巴西莓、豆蔻、欧白芷、番石榴、黑刺李、木半夏、川芎、大麻、 西洋接骨木、亮叶杨桐、西番莲、滨海前胡、茴芹、穗花牡荆、印度人参、帚石楠、单子山楂、亚麻、阿魏蘑、刺槐、无梗五加中的1种或2种以上的植物提取物。[方式15]一种用于预防及/或治疗肥胖的方法，其特征在于，所述方法包括向需要该预防及/或治疗的个体投给含有选自西洋接骨木、茴芹、单子山楂及亮叶杨桐中的1种或2种以上的植物提取物的抗肥胖剂。[方式16]一种用于制造抗肥胖剂的应用，其为用于制造用于预防及/或治疗肥胖的抗肥胖剂的应用，其特征在于，所述抗肥胖剂含有选自西洋接骨木、茴芹、单子山楂及亮叶杨桐中的1种或2种以上的植物提取物。根据本发明，提供优异的PPAR配体剂、及以其为有效成分含有的组合物(医药组合物、饮食品)。本发明的作为配体剂的有效成分的植物提取物因可作为来自天然的食物进行摄取，安全性高，所以可长期摄取。因此，可作为经口用组合物日常摄取，也可作为与过氧化物酶体增殖物激活受体相关的疾病、例如肥胖、高脂血症、高血压、糖尿病等的预防用组合物来利用。此外，也可作为在长期进行治疗及改善上必需的上述疾病的治疗用及改善用组合物来利用。


图1表示投给西洋接骨木提取物时的体重变化。白色菱形为不投给提取物的对照，方形为投给lOOmg/kg/day、三角形为投给300mg/kg/day的结果。图2表示投给西洋接骨木时的体脂肪量。白色柱为不投给提取物的对照，横纹柱为投给lOOmg/kg/day、深黑色柱为投给300mg/kg/day投给的结果。图3表示投给西洋接骨木时的血液中游离脂肪酸浓度。白色柱为不投给提取物的对照，横纹柱为投给lOOmg/kg/day、深黑色柱为投给300mg/kg/day的结果。**P < 0. 01对
眧图4表示投给西洋接骨木时的血液中中性脂肪浓度。白色柱为不投给提取物的对照，横纹柱为投给lOOmg/kg/day、深黑色柱为投给300mg/kg/day的结果。图5表示投给茴芹提取物时的体重变化。白色菱形为不投给提取物的对照，黑色方形为投给lOOOmg/kg/day的结果。图6表示投给茴芹时的体脂肪量。白色柱为不投给提取物的对照，黑色柱为投给 1000mg/kg/day 的结果。图7表示投给茴芹时的血液中游离脂肪酸浓度。白色柱为不投给提取物的对照， 黑色柱为投给1000mg/kg/day的结果。< 0. 01图8表示投给茴芹时的血液中中性脂肪浓度。白色柱为不投给提取物的对照，黑色柱为投给lOOOmg/kg/day的结果。
图9表示投给单子山楂提取物时的体重变化。圆形为不投给提取物的对照，方形为投给lOOmg/kg/day、菱形为投给300mg/kg/day、三角形为投给lOOOmg/kg/day的结果。图10表示投给单子山楂时的体脂肪量。白色柱为不投给提取物的对照，浅黑色柱为投给lOOmg/kg/day、横纹柱为投给300mg/kg/day投给、黑色柱为投给lOOOmg/kg/day的结果。图11表示投给单子山楂时的血液中游离脂肪酸浓度。白色柱为不投给提取物的对照，浅黑色柱为投给lOOmg/kg/day、横纹柱为投给300mg/kg/day投给、黑色柱为投给 1000mg/kg/day 的结果。< 0. 01 对照图12表示投给亮叶杨桐提取物时的体重变化。白色菱形为不投给提取物的对照， 黑色方形为投给lOOmg/kg/day的结果。图13表示投给亮叶杨桐时的体脂肪量。白色柱为不投给提取物的对照，黑色柱为投给lOOmg/kg/day的结果。图14表示投给亮叶杨桐时的血液中游离脂肪酸浓度。白色柱为不投给提取物的对照，黑色柱为投给lOOmg/kg/day的结果。< 0. 01图15表示投给亮叶杨桐时的血液中中性脂肪浓度。白色柱为不投给提取物的对照，黑色柱为投给lOOmg/kg/day的结果。
具体实施例方式I. PPAR 配体剂本发明涉及含有作为有效成分的特定的植物提取物的过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAI )的配体剂及/或抗肥胖剂。(植物提取物)作为本发明的配体剂的原料的植物为选自以下23种植物中的1种或2种以上的
食用植物。(1)西洋接骨木(Sambucus nigra)；(2)亮叶杨桐(Adinandra nitida)；(3)(Passiflora incarnata)；(4) 宾海前胡(Peucedanum japonicum)；(5)茴芹(Pimpinella anisum)；(6)穗花牡荆(Vitex agnus-castus)；(7)印度人参(ffithania somnifera)；(8)帚石楠(Calluna vulgaris)；(9)(Crataegus monogyna)；(10)亚麻(Linum usitatissimum)；(11)阿魏蘑(Pleurotus ferulae)；(12) ^lJtt (Robinia pseudoacacia)；(13)无梗五力口 (Acanthopanax sessiliflorus)；(14)大麻(Cannabis sativa)；(15)豆蔻(Elettaria cardamomum)；
(16) @白 ￡ (Angelica archangelica)；(17)番石榴(Psidium guajava)；(18)黑刺李(Prumus spinosa)；(19)锯叶棕(Serenoa repens)；(20)木半夏(Eleagnus multiflora)；(21)川弯(Ligusticum chuaxiong)；(22)刺五力口(Acanthopanax senticosus)及(23)巴西莓(Euterpe oleracea、或 Ε· edulis)。以下，对各植物进行说明。(1)西洋接骨木忍冬科植物，在本发明中优选使用花。已知西洋接骨木的花的别名也称为接骨木花，是在欧洲自古以来一直使用的芳香药草，对感冒、咽喉炎、关节炎等的改善有效。且有报道指出其对牙周炎的初期炎症具有抑制效果(非专利文献幻。但是，对西洋接骨木的溶剂提取物为PPAR配体剂还全然不知。(2)亮叶杨桐(石崖茶)山茶科植物，在本发明中优选使用叶。亮叶杨桐是中国南部、广西壮族自治区特产的茶，公认其有消炎、解毒作用，对咽喉炎、口腔炎有疗效，并具有降压效果、防癌效果。但是，对亮叶杨桐的溶剂提取物为PPAR配体剂还全然不知。(3)西番莲西番莲科棺物,在本发明中优诜使用地上部。西番莲的地上部被称为时钟花，在欧洲是被用于烦躁不安、失眠的芳香药草。已知有包含1种以上包含西番莲(时钟花)在内的多种多酚材料和大蒜材料的循环器官疾病预防组合物(专利文献幻。且公开了以减轻因减肥而造成的精神压力的作用为目的的含有食物纤维的减肥食品，其中记载了配合有时钟花的减肥食品(专利文献；3)。但是所有的文献中均未提及西番莲的独立的生理作用，也未证实和公开西番莲的溶剂提取物为PPAR配体剂。(4)滨海前胡日本名称为牡丹防风，余形科棺物，在本发明中优诜使用地上部。 专利文献4中记载了滨海前胡的干燥粉末或提取物具有二糖类分解酶抑制活性，对抗糖尿病、抗肥胖有效，但对滨海前胡的溶剂提取物为PPAR配体剂还全然不知。(5)茴芹伞形科植物，在本发明中优选使用种子。茴芹的种子作为芳香性的芳香药草被用于饮料、烤制点心、芳香药草茶等，作为民间疗法药被用于利尿、消化不良、支气管炎等。但是，对茴芹的溶剂提取物为PPAR配体剂还全然不知。(6)穗花牡荆马鞭草科植物，在本发明中优选使用果实。在欧洲，穗花牡荆的果实作为香辛料、且作为民间疗法药被用于月经不调、经前紧张症。此外，还有关于乙醇提取物中含有的类黄酮类的抗氧化活性的报道(非专利文献4)。但是，对穗花牡荆的溶剂提取物为PPAR配体剂还全然不知。(7)印度人参茄科植物，在本发明中优选使用根。印度人参的叶和根在印度的传统医疗阿育吠陀中自古以来即被用作长寿药萨拉扬(Sarayan)。已知有滋养强壮、强精、抗焦虑、抗抑郁、缓和风湿病等的关节炎等的功效。但是，对印度人参的溶剂提取物为PPAR配体剂还全然不知。(8)帚石楠杜鹃花科植物，在本发明中优选使用花。在欧洲，帚石楠的花被作为对预防尿道感染、利尿、关节炎、失眠、呼吸器官疾病等有效的芳香药草使用，叶·茎也被作为具有同样效果的保健茶使用。专利文献5中公开了因脂肪酶抑制作用而作为脂肪吸收抑制剂的抗肥胖、改善粉刺的效果，但这是与作为PPAR配体剂的改善脂质代谢的效果不同的作用，且对帚石楠的溶剂提取物为PPAR配体剂还全然不知。(9)单子山楂蔷薇科棺物，在本发明中优诜使用果实。在欧洲，单子山楂的花、 叶、果实被作为治疗心脏病的芳香药草使用，特别是果实被作为对动脉硬化、肾脏病有效的芳香药草使用。但是，对单子山楂的溶剂提取物为PPAR配体剂还全然不知。(10)Λ:亚麻科植物，优选使用种子。已知亚麻种子富含ω3脂肪酸，具有降低血液中胆固醇的作用，此外，从免疫学上已知在摄取亚麻种子的芬兰，前列腺癌、乳癌等的激素敏感性癌的患病率低。如上所述，虽已知脂肪酸为PPAR配体剂，但亚麻的溶剂提取物为PPAR配体剂并未被具体公开，也未被证实。侧耳科植物，在本发明中优选使用子实体。已知有提高免疫的抗肿瘤效果及增强胰脏功能而对糖尿病有效。但是，对阿魏蘑的溶剂提取物为PPAR配体剂还全然不知。(12)IM 也称为洋槐，豆科植物，在本发明中优选使用花。花作为中药被用于下血、喀血。虽然专利文献6中公开了作为与以原花色素为有效成分的脂质燃烧促进剂有关的材料的洋槐的果实，但优选使用的部位不同，且也未证实和公开其作为PPAR配体剂。(13)无梗五加五加科棺物,在本发明中优诜使用叶。无梗五加的根皮作为中药的五加皮被用于抗炎症、镇痛、强壮，叶被作为食用、保健茶使用。非专利文献5中报道了无梗五加的叶的皂苷通过抑制胰脂肪酶而具有抗肥胖效果，但这是与作为PPAR配体剂的改善脂质代谢的效果不同的作用，且对无梗五加的溶剂提取物为PPAR配体剂还全然不知。(14)大麻科植物，优选使用种子。有报道指出大麻的叶和花冠中含有的向神经性物质大麻素作用于神经系统，与食欲、能量代谢有关(非专利文献6及7)，但却不知道大麻的果实(种子)使脂质代谢亢进，且对大麻的溶剂提取物为PPAR配体剂全然不知。(15)豆蔻姜科棺物,在本发明中优诜使用种子。豆蔻的种子被用作香辛料。专利文献7中公开了以配合水溶性半乳甘露聚糖及食品乳化剂、酵母粉末、维生素B类为特征的肥胖防止剂，且有在其中配合豆蔻精油的记载，该专利中记载了其主要作用为通过由水溶性半乳甘露聚糖引起胃的膨满感从而控制饮食和降低、延迟葡萄糖、脂肪的吸收以防止肥胖，通过精油的配合来促进体内代谢，但未得到证明，也没有对豆蔻的溶剂提取物为PPAR 配体剂的作用的证实和公开。(16)欧白芷伞形科植物，在本发明中优选使用根。欧白芷的根在欧洲是被用于食欲不振、消化不良、膨满感等症状的芳香药草。已知欧白芷对高血压、贫血、糖尿、神经痛、 利尿、疲劳恢复、预防血栓形成等有功效，但对其为PPAR配体剂还全然不知。(17)番石榴桃金娘科植物，优选使用未成熟果实。专利文献8及9中公开了番石榴茶的防止及改善肥胖的作用。但是，其作用在专利文献8中为通过碳水化合物、脂肪的消化酶抑制来控制脂肪、淀粉、糖分的吸收，在专利文献9中为通过糖质消化酶的抑制效果来抑制糖的吸收，但对番石榴的未成熟果实使脂质代谢亢进还不得而知，且对番石榴的溶剂提取物为PPAR配体剂还全然不知。(18)黑刺李(黑刺李)在本发明中优选使用果实。黑刺李的果实在欧洲被作为芳香药草茶且被作为口腔、咽粘膜炎症的民间疗法药使用。但是，对黑刺李的溶剂提取物为 PPAR配体剂还全然不知。
(19)锯叶棕棕榈科植物，在本发明中优选使用果实。已知锯叶棕的果实有抗雄激素作用，对前列腺障碍有效。但是，对锯叶棕的溶剂提取物为PPAR配体剂还全然不知。00)胡颓子科植物，在本发明中优选使用果实。木半夏的果实在中药中称为木半夏，被用于跌打损伤、风湿病所引起的关节痛的治疗。但是，对木半夏的溶剂提取物为PPAR配体剂还全然不知。(21)川芎余形科棺物，在本发明中优诜使用地上部。该植物的根茎在中药中为川芎，被用作强壮、镇静、镇痛药。但是，对川芎的溶剂提取物为PPAR配体剂还全然不知。(22)刺五加五加科植物，在本发明中优选使用根皮。根皮作为五加皮被用于抗炎症、镇痛、强壮，叶具有抗精神压力的作用，被用作保健茶。专利文献10中公开了因刺五加叶的皂苷的脂肪酶抑制活性而具有抑制脂质吸收、抗肥胖、改善高脂血症的效果等，但对刺五加的根皮使脂质代谢亢进还不得而知，对刺五加的溶剂提取物为PPAR配体剂也还全然不知。(23)^MM:日本名为阿萨伊莓，棕榈科植物，在本发明中优选使用果实。果实中富含具有抗氧化作用的多酚、氨基酸、必须脂肪酸，虽有关于以具有抗氧化作用的阿沙依椰子(Jucara)及巴西莓果实为基础的健康补助食品的见解(专利文献11)，但却没有关于预防、改善脂质代谢和肥胖的记载。此外，对巴西莓的溶剂提取物为PPAR配体剂还全然不知。本发明中使用的植物的植物提取物中的各种植物体的使用部位优选上述部位，但不限于此，花蕾、花、果实、果皮、种子、叶、枝、干、树皮、根、根皮、地上部、全草等的所有的部位均可使用。此外，不仅为上述的优选部位，也可并用选自上述的所有部位中的1种或2种以上。作为原料的植物体可使用新鲜或干燥后的产物，可根据需要进行粉碎、细切、粉末化等的加工后使用。此外，也可直接使用可获得的生药。植物提取物除了通过使用溶剂直接从上述各种提取部位中提取而得到以外，进行水蒸气蒸馏、使用超临界萃取技术的二氧化碳提取、进而进行压榨处理后得到的压榨液 (榨汁)及/或在残渣中加入溶剂进行提取而得到的产物、所述的压榨液本身均包含于本发明的植物提取物的定义范围内。此外，本发明者由上述23种植物的醇水溶液得到提取物，在其中加入乙酸乙酯、 正丁醇或水进行液相分配而得到乙酸乙酯萃取物、丁醇萃取物及水萃取物中，证实了一个或一个以上的萃取物中具有优异的PPAR配体活性。本发明的植物提取物中也包含此种溶剂提取物的萃取物。本发明的植物提取物也可根据需要用柱色谱法等分离精制其活性成分。(提取方法)本发明中，可使用上述的植物提取物或其精制物。这些可单独使用，也可将二种以上混合使用。作为用于得到植物提取物而使用的提取溶剂无特别限定，可列举水、碳原子数为 1 4的低级醇(例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇等)、液状多元醇(例如1，3- 丁二醇、丙二醇、 丙三醇等)、酮类(例如丙酮、丁酮)、酯类(例如乙酸乙酯、乙酸丁酯等)等。也可将上述单独或2种以上混合使用。作为原料植物使用⑴西洋接骨木(特别是花)、⑵亮叶杨桐(特别是叶)、⑶西番莲(特别是地上部)、(4)滨海前胡(特别是地上部)、(5)茴芹(特别是种子)、(6) 穗花牡荆(特别是果实)、(7)印度人参(特别是根)、⑶帚石楠(特别是花)、(9)单子山楂(特别是果实)、(10)亚麻(特别是种子)、(11)阿魏蘑(特别是子实体)、(12)刺槐 (特别是花)、(13)无梗五加(特别是叶)时，作为溶剂，优选使用醇、特别是低级醇或其水溶液。作为溶剂，使用醇或其水溶液时，醇的浓度可根据所希望的配体作用适当选择。通常，提取溶剂中醇的浓度为约10 100容量％，优选为约10 70容量％。本发明的配体剂因适合作为医药组合物或饮食品等的经口用组合物使用，所以，从安全性的观点来看，作为醇优选使用乙醇。而且，作为原料植物使用(10)亚麻(特别是种子)、(11)阿魏蘑(特别是子实体)、 (13)无梗五加(特别是叶)时，除了上述醇或醇水溶液以外，作为溶剂也优选使用热水的方式。此外，作为原料植物使用(14)大麻(特别是种子)时，作为溶剂也优选使用热水。本说明书中所述的热水具体为50 100°C，更优选为50 85°C的水。上述的溶剂、即热水、醇或醇水溶液中，只要在不过大地损害作为本发明的特征的 PPAR配体作用、提取效率的范围内，也可含有任意其他的成分。作为提取方法，无特别限定，通过使溶剂与上述植物原料接触来进行。具体地说， 可在溶剂中浸漬原料静置保存，搅拌、加热回流等提取方式可根据公知方法，根据所需适当设定。提取温度无特别限制，可根据溶剂的温度适当设定，但从操作上的观点来看，优选为溶剂的沸点以下。此外，也可根据需要设定加压、减压等的条件。提取时间可根据所使用的植物原料的种类、提取溶剂的种类及使用量等适当设定。具体地说，作为溶剂使用醇或醇水溶液时，其使用量通常相对于1重量份原料为1 1000倍，优选为1 100倍，进一步优选为1 10倍，提取时间通常为约10分钟 1个月左右，优选为10分钟 7天左右。此外，作为溶剂使用热水时，其使用量通常相对于1重量份原料为1 1000倍，优选为1 100倍，进一步优选为1 10倍，提取时间通常为约10 分钟 7天左右，优选为10分钟 1天左右，进一步优选为10分钟 1小时左右。本发明的植物提取物在上述的提取操作后，分离提取残渣而制成提取液的形态。 作为此种分离手段可使用公知的方法，例如可例举过滤、离心分离等。在本发明中，可直接使用上述提取液，也可根据需要，作为提取液的浓缩物或干燥物(浓缩干固物)使用，从输送的方便性等观点来看，优选作为浓缩物或干燥物。浓缩可在常压或减压下进行，通过浓缩可使浓缩液的容积减少至约10 50容量％，优选为约10 30容量％。干固物优选在减压下使含有PPAR配体活性成分的提取液中的溶剂干燥而获得。如上所述，本发明的植物提取物中，也包含使溶剂与上述植物原料接触而得到的提取物的萃取物(例如乙酸乙酯萃取物、丁醇萃取物、水萃取物)。该萃取物通常是通过将植物原料的醇或醇水溶液的提取物进行液相分配而得到。作为液相分配的方法无特别限制，可使用公知的方法。(PPAR配体剂及抗肥胖剂)本发明的PPAR配体剂及抗肥胖剂如上所述，含有作为有效成分的选自锯叶棕、刺五加、巴西莓、豆蔻、欧白芷、番石榴、黑刺李、木半夏、川芎、大麻、西洋接骨木、亮叶杨桐、西番莲、滨海前胡、茴芹、穗花牡荆、印度人参、帚石楠、单子山楂、亚麻、阿魏蘑、刺槐、无梗五
11加中的1种或2种以上的植物的溶剂提取物。在此，本说明书中的PPAR配体剂是指具有与PPAR配体结合区域结合的能力、即具有PPAR配体作用的物质的总称。配体剂可以是激动剂也可以是拮抗剂，优选为激动剂。本发明的PPAR配体剂可对与胰岛素抵抗、高脂血症、糖尿病、高血压及肥胖等的生活习惯病有关的各种基因的表达进行正控制或负控制。所述各种基因例如可例举酰基辅酶A氧化酶、中链酰基辅酶A脱氢酶、肉碱棕榈酰转移酶、长链酰基辅酶A合成酶、脂肪酸结合蛋白、脂蛋白脂肪酶、载脂蛋白、解耦联蛋白等，但不限于这些。PPAR配体活性例如可通过将PPAR配体结合区与GAL4的融合蛋白的结合用荧光素酶的表达来体现的报告基因检测(Cell，1995年，83卷，803 812页)、使用包含PPAR配体结合区的蛋白的竞争结合实验(competitive bindingassay) (Cell，1995年，83卷，813 819页)等测定。这些检测中，样品的活性通常与溶剂对照相比，将显示比溶剂对照活性高的样品评价为“具有PPAR配体活性”。在本发明中，将与溶剂对照相比显示1. 3倍以上活性的样品评价为“具有PPAR配体活性”。本发明的PPAR配体剂只要对于PPAR α、γ、δ之中的至少1种以上的PPAR具有配体作用即可。如后述实施例所示，本发明的PPAR配体剂特别是作为PPAR δ的配体剂而有用。因本发明中可使用的来自23种植物的提取物均至少对于PPAR δ亚型具有配体活性，所以，作为上述PPARS的配体剂有用。如本说明书的[背景技术]的项目中所记载， PPAR δ的生理作用得到证实是最近的事。关于PPAR δ，可期待可激活PPAR δ的激动剂作为提高HDL胆固醇作用、由其引起的抑制动脉硬化发展及其治疗、脂质降低剂、血糖降下剂的应用。但是，其具有充分的活性，可被临床应用还不为人所知。因此，本发明的PPAR的配体剂作为PPAR δ激动剂被认为特别是作为血液中脂质降低剂、抗肥胖剂而有希望。而且，如后述的实施例所明确的，对于α亚型及Υ亚型的PPAR，因所来源的植物种类不同，有具有配体活性的情况，也有不具有的情况。具体地说，豆蔻的水萃取物、亚麻的乙酸乙酯萃取物及正丁醇萃取物显示PPARα活性(实施例幻。此外，刺五加、木半夏、大麻、西洋接骨木、亮叶杨桐、茴芹及帚石楠的乙酸乙酯萃取物、以及亮叶杨桐的正丁醇萃取物显示PPARy活性(实施例4)。根据本发明所公开的内容，本领域技术人员可根据需要， 通过选择所使用的植物材料制备所需的配体剂。优选对PPAR δ和PPAR Y两者显示配体活性。此外，如后述实施例6所述，将本发明的抗肥胖剂投给小鼠16天后，可证实其具有抑制体重增加、抑制体脂肪积累、降低血液中中性脂肪浓度的作用。因此，本发明的抗肥胖剂可作为体重增加抑制剂、体脂肪积累抑制剂、血液中中性脂肪降低剂等使用。本发明的抗肥胖剂优选含有选自西洋接骨木、茴芹、单子山楂及亮叶杨桐中的1种或2种以上的植物提取物。具体地说，以未投药的对照组在试验结束时的体重为100%时，西洋接骨木提取物投给组(300mg/kg/day)的体重增加被抑制到约92 %左右，投给茴芹提取物组(IOOOmg/ kg/day)被抑制到约93%左右，投给单子山楂提取物组(lOOOmg/kg/day)被抑制到约94% 左右，投给亮叶杨桐提取物组(lOOmg/kg/day)被抑制到约69%左右。且以未投药的对照组在试验结束时的体脂肪量为100%时，西洋接骨木提取物投给组(300mg/kg/day)的体脂肪积累被抑制到约81%左右，投给茴芹提取物组(lOOOmg/kg/day)被抑制到约88%左右， 投给单子山楂提取物组(lOOOmg/kg/day)被抑制到约80%左右，投给亮叶杨桐提取物组 (100mg/kg/day)被抑制到约88%左右。而且，以未投药的对照组在试验结束时的血液中中性脂肪浓度为100%时，西洋接骨木提取物投给组(300mg/kg/day)的中性脂肪浓度被降低到约80%左右，投给茴芹提取物组(lOOOmg/kg/day)被降低到约87%，投给亮叶杨桐提取物组(lOOmg/kg/day)被降低到约63%左右。而且，本发明的抗肥胖剂还可使投给本发明的植物提取物的机体的血液中的游离脂肪酸浓度发生变化。血液中的游离脂肪酸浓度增加是指脂肪细胞中积累的中性脂肪或血液中的中性脂肪被分解而游离于血液中，从而成为能量源。并非限定，但含有西洋接骨木、 茴芹及单子山楂中的提取物的抗肥胖剂可得到血液中的游离脂肪酸浓度增加的效果。血液中的游离脂肪酸浓度减少是指因游离的脂肪酸进入肝脏等进一步燃烧而产生亢进的状况， 从而使血液中的游离脂肪酸浓度减少的状态。并非限定，但含有亮叶杨桐中的提取物的抗肥胖剂可得到血液中的游离脂肪酸浓度减少的效果。II.医药用组合物及饮食品在本发明中，可由来自各种植物的提取物制备PPAR配体剂。本发明也提供含有该PPAR配体剂和药学上允许的添加剂及可食用的添加剂的医药组合物、饮食品(也可总称记为“本发明的组合物”)。本发明的组合物根据PPAR在机体内的分布和生理活性，可用于预防及/或治疗与过氧化物酶体增殖物激活受体相关的疾病。具体地说，本发明的组合物对肥胖、高脂血症、高血压、高血糖、胰岛素抵抗、糖尿病的预防或改善有效。在本发明中，肥胖的预防是指防止或延迟包括内脏肥胖在内、日本肥胖学会在肥胖·肥胖症的指导手册第2版(2001年7月发行)中定义的肥胖或肥胖症的状态的形成。 且肥胖的改善是指从上述学会定义的肥胖症或肥胖的状态向上述学会定义的正常范围的状态靠近。在本发明中，高脂血症的预防是指防止或延迟日本动脉硬化学会在动脉硬化性疾病诊疗指南(2002年9月发行)中定义的高脂血症的状态或临界状态的形成。此外，高脂血的改善是指从上述所示的高脂血症的状态或临界状态向上述指南中定义的正常范围的状态靠近。在本发明中，胰岛素抵抗是指在肝脏·脂肪细胞·骨格肌中，作为胰岛素的主要作用的糖的吸收促进作用减弱的状态。胰岛素抵抗的预防是指防止或延迟 SSPG(steady-state plasma glucose)法等规定的作为胰岛素抵抗的指标的值更加恶化。 胰岛素抵抗的改善是指进一步改善作为上述的胰岛素抵抗的指标的值。在本发明中，糖尿病的预防是指防止或延迟日本糖尿病学会在糖尿病治疗指南 2002-2003(2002年5月发行)中定义的糖尿病的状态或临界状态的形成。此外，糖尿病的改善是指从上述的糖尿病的状态或临界状态向上述指南中定义的正常范围的状态靠近。本发明的组合物其形态不受限定，例如可作为健康食品、营养补助食品、营养功能食品、特定保健用食品等的饮食品及医药品使用。本发明的饮食品含有上述23种植物提取物的1种或2种以上、和作为饮食物允许的添加剂。在此，添加剂是指饮食品中通常使用的添加剂，例如可例举维生素E、维生素C 等的维生素类、糖类、赋形剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、乳化剂、绷紧剂(tensing agent)(等张剂)、缓冲剂、助溶剂、防腐剂、稳定剂、抗氧化剂、着色剂、矫味剂、香料、凝固剂、PH调节剂、增粘剂、提取物粉末、生药、无机盐等，只要不损坏所希望的本发明配体剂的效果，不限定于这些。特别是本发明的饮食物为营养强化剂时，例如可适当配合制备维生素E、维生素C等的维生素类、制备营养强化剂时通常配合的乳化剂、绷紧剂(tensing agent)(等张剂)、缓冲剂、助溶剂、防腐剂、稳定剂、抗氧化剂等。作为饮食品，可在口香糖、巧克力、奶糖、果冻、饼干、克力架等的点心类，冰淇淋、 冰点心等的冰点心类，茶、清凉饮料、保健营养液、美容饮料等的饮料，面条、中华面条、意大利面、速食面等的面类，鱼糕、圆筒状鱼糕、鱼肉山芋饼等的加工产品，调味汁、沙拉酱、酱汁等的调味料，人造奶油、黄油、沙拉油等的油脂类，面包、火腿、汤、软罐头食品、冷冻食品等所有的饮食品中使用。该提取物的摄取量无特别限定，但期望PPAR配体活性、特别是预防及/或改善肥胖及因肥胖而发病的胰岛素抵抗、高血脂、高血压、糖尿病而摄取时，其摄取量按该提取物计成人每人每天为0. 01 1000mg/kg体重，优选1 300mg/kg体重，进一步优选2 20mg/kg体重。本发明的医药组合物含有上述23种植物提取物中的1种或2种以上、和药学上允许的添加剂。作为在此所述的添加剂，例如可例示赋形剂、崩解剂、润滑剂、粘合剂、抗氧化剂、着色剂、抗凝剂、吸收促进剂、助溶剂、稳定剂等。医药组合物的形态无特别限定，例如可例举胶囊剂、片剂、颗粒剂、注射剂、栓剂、贴剂等，特别优选为经口用组合物的形态。为经口用组合物时，该提取物的摄取量无特别限定，但在期待PPAR配体活性、特别是预防及/或改善肥胖及因肥胖而发病的胰岛素抵抗、高脂血、高血压、糖尿病而摄取时，其投给量按该提取物计成人每人每天为0. 01 1000mg/kg体重，优选为0. 1 300mg/kg体重，进一步优选为2 20mg/kg体重，分一次或数次投给。本领域技术人员可考虑患者的状态(年龄、性别、 症状等)、及投给方式等确定适当的投给量。“予页防及/或治疗方法”、njk “m^mmmm^mm.^"本发明还提供用于预防及/或治疗与过氧化物酶体增殖物激活受体相关的疾病的方法，所述方法包括对于需要该预防及/或治疗的个体投给含有本发明的植物提取物的医药组合物。本发明进一步提供用于制造如下医药组合物的本发明的植物提取物的应用，该医药组合物为预防及/或治疗与过氧化物酶体增殖物激活受体相关的疾病时所使用的医药组合物。本发明还提供用于预防及/或治疗肥胖的方法，所述方法包括对于需要该预防及 /或治疗的个体投给含有本发明的植物提取物的抗肥胖剂。本发明还进一步提供本发明的植物提取物用于制造如下抗肥胖剂的应用，该抗肥胖剂为预防及/或治疗肥胖时使用的抗肥胖剂。对于本发明的“预防及/或治疗方法”、以及“用于制造医药组合物的应用”，有关投给方式、投给量等如以上“医药组合物”中所述。实施例以下，列举实施例进一步具体说明本发明，但本发明不限于这些实施例。植物材料本说明书中的实施例中所使用的植物和其使用部位如表1所示。样品制备中使用各植物使用部位的干燥粉碎物。破碎时使用日本株式会社TOSHO制片剂粉碎机TS-10M型或日本株式会社吉田制作所制Wiley型粉碎机1(^9-JAS型。表权利要求
1.亮叶杨桐提取物在制备用于预防及/或改善肥胖的组合物中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其中，所述提取物为醇或醇水溶液提取物。
3.根据权利要求2所述的用途，其中，所述醇为乙醇。
4.根据权利要求1所述的用途，其中，所述提取物为热水提取物。
5.根据权利要求1 4中任一项所述的用途，其中，所述组合物为医药组合物。
6.根据权利要求1 4中任一项所述的用途，其中，所述组合物为饮食品。
全文摘要
本发明的目的为提供过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)的配体剂等。具体为，本发明的配体剂的特征在于，含有作为有效成分的选自以下植物锯叶棕、刺五加、巴西莓、豆蔻、欧白芷、番石榴、黑刺李、木半夏、川芎、大麻、西洋接骨木、亮叶杨桐、西番莲、滨海前胡、茴芹、穗花牡荆、印度人参、帚石楠、单子山楂、亚麻、阿魏蘑、刺槐、无梗五加中的1种或2种以上的植物提取物。
文档编号A61K36/29GK102406686SQ20111039284
公开日2012年4月11日 申请日期2008年10月24日 优先权日2007年10月24日
发明者前田满, 北川义德, 小仓享一, 橹木智裕, 江川香 申请人:三得利控股株式会社