专利名称：一种对酒精性肝损伤具有保护作用的小叶丁香树皮提取物的制作方法
技术领域：
本发明所属医药产品研究开发技术领域。本发明涉及一种对酒精性肝损伤具有保护作用的小叶丁香树皮提取物。
背景技术：
小叶丁香Syringa Pubescens Turcz.又名毛(叶)丁香，雀舌花，巧玲花，是木犀科(oleaceace) 丁香属植物,分布于辽宁、河北、河南、山西、陕西和甘肃。高约2. 5m,幼枝灰褐色，被柔毛。叶卵圆形或椭圆状卵形，全缘，有缘毛。圆锥花序疏松，侧生，淡紫红色；花期4月下旬至5月上旬；秋季7月下旬至8月上旬。长期以来，民间以其花泡茶饮用治疗慢性肝炎、肠炎、食管癌、肝硬化、肝癌等病，疗效显著.但至今未被药典收录。目前，对丁香的研究虽然较多，但对小叶丁香的研究甚少。小叶丁香花和果实含有裂环环烯醚萜苷类、芳醇类，黄酮类化合物和挥发油成分。小叶丁香主要药理作用治愈肝疾、抗肝纤维化、有降血压作用、抗菌作用、抗炎作用、抗病毒作用、抗氧化作用、抗肿瘤作用、降血糖作用。
发明内容
I、一种对酒精性肝损伤具有保护作用的小叶丁香树皮提取物，其特征在于该提取物的制备包括以下过程步骤(I):称取小叶丁香树皮干燥粗粉，加入以粗粉重量为8-10倍量的水浸泡 8h-10h，煎煮I. 5h-2h，煎煮后真空抽滤，收集滤液；步骤(2):将步骤(I)中的小叶丁香树皮干燥粗粉的滤渣再加水煎煮lh-1. 5h，然后超声lh-1. 5h，温度为30°C，功率为80W，真空抽滤，收集滤液；步骤⑶将步骤⑴和⑵中的滤液合并，将滤液浓缩至浸膏状，烘干浸膏，粉碎，得到小叶丁香树皮提取物。2、一种对酒精性肝损伤具有保护作用的小叶丁香树皮提取物的用途，其特征在于该提取物用于制备对酒精性肝损伤具有保护作用的药物制剂。
具体实施例方式本发明所述的一种对酒精性肝损伤具有保护作用的小叶丁香树皮提取物包括以下实施例，下面的实施例可进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发明。实施例I :I、一种对酒精性肝损伤具有保护作用的小叶丁香树皮提取物，其特征在于该提取物的制备包括以下过程步骤(I):称取小叶丁香树皮干燥粗粉100g，加入以粗粉重量为8倍量的水浸泡 8h,煎煮I. 5，煎煮后真空抽滤，收集滤液；步骤(2):将步骤(I)中的小叶丁香树皮干燥粗粉的滤渣再加水煎煮lh，然后超声lh，温度为30°C，功率为80W，真空抽滤，收集滤液；步骤(3):将步骤(I)和(2)中的滤液合并，将滤液浓缩至浸膏状，烘干浸膏，粉碎，得到小叶丁香树皮提取物19. 6g。2、该提取物用于制备对酒精性肝损伤具有保护作用的药物制剂。实施例2:I、一种对酒精性肝损伤具有保护作用的小叶丁香树皮提取物，其特征在于该提取物的制备包括以下过程步骤(I):称取小叶丁香树皮干燥粗粉200g，加入以粗粉重量为10倍量的水浸泡 IOh,煎煮2h，煎煮后真空抽滤，收集滤液；步骤(2):将步骤(I)中的小叶丁香树皮干燥粗粉的滤渣再加水煎煮I. 5h，然后超声I. 5h，温度为30°C，功率为80W，真空抽滤，收集滤液；步骤(3):将步骤(I)和(2)中的滤液合并，将滤液浓缩至浸膏状，烘干浸膏，粉碎，得到小叶丁香树皮提取物37. 3g。2、该提取物用于制备对酒精性肝损伤具有保护作用的药物制剂。小叶丁香树皮提取物对小鼠酒精性肝损伤保护作用的实验I实验材料、动物、仪器和试剂I. I实验材料药材采自吉林农业大学校园，由吉林农业大学园艺学院胡全德教授鉴定为木樨科 (Oleaceae) 丁香属(Syringa)植物小叶丁香(Syringa Pubescens Turcz.)的树皮。I. 2实验动物实验动物购自吉林大学基础医学院实验动物中心，动物系昆明种小鼠60只，雌雄各半，体重(20 ± I) g，合格证号SCXK(吉)2011-0001。实验动物在温度25 °C 27 °C，湿度 55°C 60°C的条件下饲养。I. 3仪器与试剂LPZ5-2型离心机(北京医用离心机厂)，76新世纪紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)，百灵LA114型电子天平(110g/0. OOOlg，常熟市百灵天平仪器有限公司)，电子计数天平(500g/0. OOlg，金羊天平仪器厂)，KQ-250DB型超声波清洗器 (昆山市超声仪器有限公司)，高速冷冻离心机(GI-20B上海安亭科学仪器厂)。丙氨酸转氨酶(ALT)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒(南京建成生物工程研究所)； 56% (V/V)北京二锅头白酒(北京红星酿酒有限公司)，冰醋酸、无水乙醇(北京化工厂)； 护肝片(吉林修正药业)。2实验方法2. I小叶丁香树皮提取物的制备步骤(I):称取小叶丁香树皮干燥粗粉100g，加入以粗粉重量为8倍量的水浸泡 8h,煎煮I. 5，煎煮后真空抽滤，收集滤液；步骤(2):将步骤(I)中的小叶丁香树皮干燥粗粉的滤渣再加水煎煮lh，然后超声 lh，温度为30°C，功率为80W，真空抽滤，收集滤液；步骤(3):将步骤(I)和(2)中的滤液合并，将滤液浓缩至浸膏状，烘干浸膏，粉碎，得到小叶丁香树皮提取物19. 5g，用水溶解，使其每克溶液相当于Ig原药材(小叶丁香树皮粗粉)。2. 2动物分组及给药2. 2. I动物分组小鼠60只适应性喂养3d后，随机分为正常组、阴性(模型)对照组、阳性对照组， 小叶丁香树皮水提物高、中、低剂量组，每组10只，雌雄各半，按鼠体重给药。2. 2. 2给药设计A组正常组正常喂食、喂水。B组阴性(模型)对照组只给酒精，不给药。C组阳性对照组将阳性药护肝片的成人剂量，按成人体重与小鼠体重的比例折合成小鼠的剂量。每天给小鼠灌胃。D组小叶丁香树皮低剂量组每天按5g小叶丁香树皮提取物/kg小鼠的给药量给
小鼠灌胃。E组小叶丁香树皮中剂量组每天按IOg小叶丁香树皮提取物/kg小鼠的给药量
给小鼠灌胃。F组小叶丁香树皮高剂量组每天按20g小叶丁香树皮提取物/kg小鼠的给药量给小鼠灌胃。2. 2. 3动物给药除正常组外，其余各组每日均于给药Ih后灌胃56% (V/V) 二锅头白酒16mL/ kg(阴性对照组只给酒精，不给药)，连续7d。自造模第I日起，每日给酒4h前灌胃相应的水煎液I次，共7d。末次给酒24h后(禁食不禁水12h)，摘除小鼠眼球取血，静置Ih后， 3500r/min离心IOmin分离血清，检测血清ALT活性。小鼠脱臼处死，迅速取出肝脏，剪碎后以4°C生理盐水制成10%肝匀浆，3500r/min离心lOmin，取肝脏上清液，测定MDA活性。2. 3指标检测2. 3. I动物一般情况观察并且记录各组小鼠每日的饮食、体重、活动、毛色、死亡等情况。2. 3. 2血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的活性检测小鼠眼球取血后，静置lh，3500r/min离心IOmin分离血清，测定管用移液枪加入待测血清O. Iml加入试管中，对照管不加待测血清。将试剂盒中的基质液先于37°C的水浴锅中预热5min后，取出O. 5ml加入测定管和对照管中，充分混匀后，于37°C水浴30min。然后测定管和对照管同时加入0.5ml的2，4-二硝基苯肼液，混匀。再取O. Iml待测血清只加入对照管中，混匀后于37°C水浴20min。最后在测定管和对照管中都加入5ml0. 4mol/l的氢氧化钠液混勻。室温放置IOmin,于505nm处,蒸懼水调零,测定对照管和测定管的OD值。 每组重复三次。绝对OD值=测定管OD值-对照管OD值查标准曲线，通过拟合公式求得相应的ALT活性2. 3. 3肝组织匀浆MDA的检测各组小鼠处死后，剖腹取肝脏，在4°C生理盐水清洗，洗去血液，滤纸拭干后，取肝右叶相同部位的一小块肝组织约O. 5g，剪碎后以4°C生理盐水制成10%肝匀浆，匀浆液以 3500r/min，离心lOmin，取其上清液，具体操作按试剂盒说明书测定MDA的含量。
组织中MDA含量的计算公式组织中MDA含量=(测定管吸光度-测定空白管吸光度/标准管吸光度-标准空白管吸光度)X标准品浓度+待测样本蛋白浓度2. 4数据处理数据应用SPSS 10. O软件包进行处理。各项数据以x±s表示，用方差分析及t检验比较组间差异的显著性，P < O. 05表示差异显著，有统计学意义。3实验结果3. I动物一般情况A组小鼠活动正常，被毛整齐、光泽，反应灵敏，食量及大便正常，体重逐渐增减。B 组小鼠在每日给酒后，活动明显减少，行走不稳，反应迟钝，倦卧少动，多在30min Ih内醉倒酣睡，随着给酒时间的延长，其醉酒时间逐渐缩短。造模3天左右，小鼠饮食减少，大便稀软，被毛蓬松无光泽，体重无明显增加甚至有下降。C组、D组、E组、F组小鼠每日给酒给药后，醉酒症状较轻，活动减少，反应尚灵敏，被毛整齐，体重递增，各组小鼠无死亡。3. 2血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的活性检测见表1。表I小叶丁香树皮提取物对酒精性肝损伤小鼠血清ALT活性的影响
权利要求
1.一种对酒精性肝损伤具有保护作用的小叶丁香树皮提取物，其特征在于该提取物的制备包括以下过程步骤(I):称取小叶丁香树皮干燥粗粉，加入以粗粉重量为8-10倍量的水浸泡8h-10h， 煎煮I. 5h-2h，煎煮后真空抽滤，收集滤液；步骤(2):将步骤(I)中的小叶丁香树皮干燥粗粉的滤渣再加水煎煮lh-1. 5h，然后超声lh-1. 5h，温度为30°C，功率为80W，真空抽滤，收集滤液；步骤(3):将步骤(I)和(2)中的滤液合并，将滤液浓缩至浸膏状，烘干浸膏，粉碎，得到小叶丁香树皮提取物。
2.如权利要求I中所述的一种对酒精性肝损伤具有保护作用的小叶丁香树皮提取物的用途，其特征在于该提取物用于制备对酒精性肝损伤具有保护作用的药物制剂。
全文摘要
本发明所属医药产品研究开发技术领域。本发明涉及一种对酒精性肝损伤具有保护作用的小叶丁香树皮提取物。称取小叶丁香树皮干燥粗粉，加入以粗粉重量为8-10倍量的水浸泡8h-10h，煎煮1.5h-2h，煎煮后真空抽滤，收集滤液；将其滤渣再加水煎煮1h-1.5h，然后超声1h-1.5h，温度为30℃，功率为80W，真空抽滤，收集滤液；将滤液合并，浓缩至浸膏状，烘干浸膏，粉碎，得到小叶丁香树皮提取物。该提取物用于制备对酒精性肝损伤具有保护作用的药物制剂。
文档编号A61K36/63GK102579592SQ201210046758
公开日2012年7月18日 申请日期2012年2月20日 优先权日2012年2月20日
发明者侯欣池, 张崇禧, 张成城, 徐蕊, 郑友兰 申请人:山东大学威海分校