专利名称：一种穿心莲提取物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及来源于植物原料的药物的制备方法，具体涉及ー种穿心莲提取物及其制备方法。
背景技术：
穿心莲药材为爵床科植物穿心(Burm. f. ) Nees的全草，具有清热解毒、凉血消肿之功效，在广东分布广，栽培历史悠久。它是穿心莲注射液、穿琥宁制剂、穿心莲片、消炎利胆片、复方穿心莲片等多种名优中成药的原料药材。其活性成分为穿心莲内酯等成分，除开此类活性成分之外，还有许多含量较低的色素等其它类型化学成分。穿心莲内酯等活性成分受热不稳定，易于分解，长时间加热会导致内酯环的结构破坏。在穿心莲的制剂エ艺中，穿心莲内酯在穿心莲提取液经过浓缩和干燥的エ艺过程中，穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的损失率大。另外，穿心莲中的其他成分等杂质常常引起穿 心莲的毒副作用[中国人民解放军军事医学科学院，2010年，博士学位论文，“莲必治注射液安全性再评价研究”]，优化工艺、除去具无效成分或有毒副作用的杂质成分、減少提取浓缩过程中穿心莲内酯类成分的受热损失一直是以穿心莲为原料的名优中成药生产厂家急需解决的重要课题。《中国药典》(2010年版)记载的穿心莲制剂如穿心莲片、消炎利胆片等，其穿心莲原料药材的提取エ艺均是取穿心莲的醇提液，浓缩、干燥后加其他原辅料而制成。其提取物的生产エ艺中，穿心莲内酯的损失较大，同时，没有对活性成分穿心莲内酯进行纯化，穿心莲色素等其它成分的含量较高。有文献报道对穿心莲的提取エ艺的研究。如“穿心莲浸膏的提取エ艺”，中草药2002,6(3) :7-9。公开了将穿心莲以碱提酸沉エ艺进行提取，成本低，穿心莲内酯的提取效率高，但其提取エ艺复杂，浓缩过程中容易水解，生产上难于控制，不适合于エ业化批量生产，再者，论文没有提到如何纯化穿心莲内酯，除去穿心莲色素等杂质成分，没有提及提取液的浓缩、干燥、以及制备其干燥提取物的技术和方法。另外，文献“穿心莲内酯提取エ艺改进探讨”中医药信息2002，19 (3) :50_52，提到了将穿心莲提取液以活性炭除杂，氯仿溶解，丙酮重结晶的エ艺提取穿心莲内酯成分，该エ艺的目的是提取穿心莲内酯这ー单体成分，其エ艺过程中用到大量有机溶剤，对生产安全的要求极高，同样不适合エ业化的大生产。穿心莲的提取エ艺研究中，中国药典所述的エ艺简単，以85%こ醇提取后，提取液回收こ醇，干燥即可。但目前的エ业化生产中，浓缩均采用单效或ニ效热浓缩エ艺及烘干的干燥エ艺，因而，按药典エ艺生产的穿心莲片中其有效成分一一穿心莲总内酯成分在生产过程中已损失殆尽(“穿心莲片生产过程中脱水穿心莲内酯的含量变化”，中国中药杂志，2002，12，36-38)，由此可见，这种简单的生产エ艺技术不但没有除去杂质成分，也难于保留穿心莲中的有效成分，严重的影响了穿心莲制剂的质量，为此，进一步研究如何有效提闻穿心莲内酯等活性成分的得率、最大限度地去除色素等杂质成分的大生产制备エ艺技术对于保证穿心莲制剂的质量和疗效有非常重要的意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种穿心莲提取物及其制备方法。为解决上述不足，本发明采取的技术方案是
一种穿心莲提取物，含有质量百分比32. 3 40. 5%的穿心莲内酯和质量百分比
2.23 5. 52%的脱水穿心莲内酯。优选的，所述穿心莲提取物为棕褐色粉末。
上述的一种穿心莲提取物的制备方法，包括以下步骤将穿心莲粉碎成超微粉颗粒，经乙醇冷浸提取或渗漉提取，得到的穿心莲提取液依次经微滤膜过滤、活性炭纤维柱净化、纳滤膜浓缩、大孔树脂洗脱纯化、喷雾干燥，即得穿心莲提取物。优选的，向超微粉颗粒中加入体积分数为85%乙醇冷浸提取或渗漉提取，得穿心莲提取液。优选的，向超微粉颗粒中加入10倍重量体积分数为85%乙醇冷浸提取或渗漉提取2次，每次提取24h，得穿心莲提取液。优选的，采用DlOl大孔树脂洗脱纯化。优选的，通过球磨技术将穿心莲粉碎成超微粉颗粒。优选的，该制备方法，包括以下步骤将穿心莲球磨粉碎成超微粉颗粒，加入10倍重量体积分数为85%乙醇冷浸提取或渗漉提取2次，每次提取24h，得到穿心莲提取液经微滤膜过滤，除去悬浮的微小颗粒等杂质，滤液再经过活性炭纤维柱净化，除去色素等杂质成分，除杂后的溶液经纳滤膜循环加压浓缩回收乙醇，浓缩液经DlOl大孔树脂洗脱纯化，洗脱液喷雾干燥，得穿心莲提取物。所述穿心莲为爵床科植物穿心莲(Burm. f.) Nees的全草。该穿心莲提取物以穿心莲内酯等成分为其主要组成，干品呈棕褐色粉末，味极苦；其紫外光谱在220 260nm之间有最大吸收；HPLC分析(以乙腈-水(18 :82，v:v)梯度洗脱，从Omin到60min,乙腈的浓度从18%线性增加至40%,流速1. Oml/min,洗脱液在226nm的波长下进行检测)结果表明，该活性部位至少具有7个明显的色谱峰，其中，穿心莲内酯为最主要色谱峰。本发明所提供的制备方法所得到的穿心莲提取物完整保持了穿心莲药材的活性成分，保持了穿心莲药材的抗菌消炎的活性，有效的去除了色素等杂质成分，可添加各种药用辅料，按常规的制药工艺制备成各种剂型如颗粒剂、片剂、胶囊剂等。本发明研制出穿心莲提取物，其中的穿心莲内酯等活性成分收率高、色素等杂质含量低，及其工业化生产的集成制备工艺技术。本发明的集成制备工艺技术从穿心莲药材的粉碎开始到最后的干燥过程等整个工艺过程中的每一个步骤，均考虑到了如何有效地提取纯化其活性成分。本发明的有益效果是
本发明的制备方法为集成制备工艺，该集成制备工艺极大限度地保留了穿心莲药材中的活性成分穿心莲内酯等成分，有效提高其抗菌活性成分穿心莲内酯在制备工艺中的得率，保持其强的抗菌消炎活性；同时，去除了穿心莲中的色素等杂质成分，避免了穿心莲制剂毒副作用的发生。
本发明的制备方法综合且充分考虑到提取纯化穿心莲中的有效成分和去除杂质之目的，工艺经组合优化而成。采用球磨技术将穿心莲粉碎成超微颗粒，大大提高了穿心莲内酯的溶出率；应用渗漉或冷浸提取技术、活性炭纤维柱净化技术、大孔树脂纯化技术最大限度地减少或除去了穿心莲提取物中的色素等杂质成分。
本发明的制备方法不需加热即可完成提取、纯化和制备，避免了穿心莲内酯类活性成分在加热过程中的分解损失，操作简单可行，生产能耗低，适于工业化批量生产。
本发明所得提取物是根据穿心莲活性成分的特点，采用了现代高新技术，经过优化而得，显著降低了其提取物中色素等杂质的含量，有效地保留了穿心莲药材中活性成分穿心莲内酯等成分，可用于制备抗菌消炎药物，如颗粒剂、片剂、胶囊剂等。
图1是穿心莲提取物APl的HPLC色谱图；图2是穿心莲提取物AP2的HPLC色谱图；图3是穿心莲提取物AP3的HPLC色谱图；图4是穿心莲提取物APs的HPLC色谱图。
具体实施方式
下面结合具体的实施例对本发明作进一步的说明，但并不局限如此。
以下实施例如无特别说明，均为质量百分比。
以下所采用的HPLC分析方法，步骤如下以乙腈-水(体积比18 :82)梯度洗脱，从 Omin到60min，乙腈的浓度(体积浓度度)从18%线性增加至40%，流速1. Oml/min,洗脱液在 226nm的波长下进行检测。
实施例1取IOkg的穿心莲，先粉碎成粗粒，然后球磨粉碎成超微粉颗粒，以10倍重量85%乙醇 (v/v)渗漉提取2次，每次提取时间为24h ;提取结束后，过滤，合并两次滤液，得到穿心莲提取液，经过微滤膜(采用PP棉)过滤，除去悬浮的微粒等杂质，同时，可见到PP棉吸附了大量的色素等成分；滤液通过活性炭纤维柱净化，进一步除去色素等杂质，净化后的溶液在高压泵的推动下(保持高压泵的工作压力在O. 6 O. 9MPa之间)，穿心莲提取液经过纳滤膜循环加压浓缩，浓缩到原体积1/10，得到的浓缩液经DlOl大孔树脂(5kg)洗脱纯化，收集过大孔树脂柱后的溶液进行喷雾干燥，即得穿心莲提取物干粉O. 9kg(编号AP1)。
采用HPLC分析方法测定穿心莲提取物干粉APl的活性成分，APl的HPLC色谱图见图1，测得穿心莲内酯含量为40. 5%，脱水穿心莲内酯含量为2. 23%。
实施例2取穿心莲药材50kg，先粉碎成粗粒，然后球磨粉碎成超微粉颗粒，以10倍重量85%乙醇 (v/v)冷浸提取2次，每次提取时间为24h ;提取结束后，过滤，合并两次滤液，得到穿心莲提取液，经过微滤膜(采用PP棉)过滤，除去悬浮的微粒等杂质，同时，可见到PP棉吸附了大量的色素等成分；滤液通过活性炭纤维柱净化，进一步除去色素等杂质，净化后的溶液在高压泵的推动下(保持高压泵的工作压力在O. 6 O. 9MPa之间)，穿心莲提取液经过纳滤膜循环加压浓缩，浓缩到原体积1/10，得到的浓缩液经DlOl大孔树脂(5kg)洗脱纯化，收集过大孔树脂柱后的溶液进行喷雾干燥，即得穿心莲提取物干粉5. 2 kg (编号AP2)。用HPLC分析方法測定其活性成分穿心莲内酯的含量为32. 3%，脱水穿心莲内酯的含量为4. 85%，其提取物的HPLC图谱见图2。实施例3
取穿心莲药材5kg，先粉碎成粗粒，然后球磨粉碎成超微粉颗粒，以10倍重量85%こ醇(v/v)渗漉提取2次，每次提取时间为24h ;提取结束后，过滤，合并两次滤液，得到穿心莲提取液，经过微滤膜(采用PP棉)过滤，除去悬浮的微粒等杂质，同时，可见到PP棉吸附了大量的色素等成分；滤液通过活性炭纤维柱浄化，进ー步除去色素等杂质，浄化后的溶液在高压泵的推动下(保持高压泵的工作压カ在0. 6 0. 9MPa之间)，穿心莲提取液经过纳滤膜循环加压浓缩，浓缩到原体积1/10，得到的浓缩液经DlOl大孔树脂(5kg)洗脱纯化，收集过大孔树脂柱后的溶液进行喷雾干燥，即得穿心莲提取物干粉0.48 kg (编号AP3)。用HPLC分析方法測定其活性成分穿心莲内酯的含量为39. 6%，脱水穿心莲内酯的含量为5. 52%，其提 取物的HPLC图谱见图3。对比例
取IOkg的穿心莲药材，按《中国药典》2010版一部P964穿心莲片项下记载的提取方法，用85% (v/v)こ醇热浸提二次，毎次2小时，合并提取液，过滤，以ニ效浓缩器浓缩至密度1.1 1. 2之间，回收こ醇，80°C烘房中干燥，得到的穿心莲提取物干粉(编号APs)，用HPLC分析方法測定穿心莲提取物干粉APs的活性成分，APs的HPLC色谱图见图4，测得穿心莲内酯含量为4. 35%，脱水穿心莲内酯含量为4. 12%。本发明实施例与对比例对比可知，本发明有效地提高了穿心莲活性成分的含量。
权利要求
1.一种穿心莲提取物，含有质量百分比32. 3 40. 5%的穿心莲内酯和质量百分比2.23 5. 52%的脱水穿心莲内酯。
2.根据权利要求1所述的一种穿心莲提取物，其特征在于该提取物为棕褐色粉末。
3.权利要求1所述的一种穿心莲提取物的制备方法，包括以下步骤将穿心莲粉碎成超微粉颗粒，经乙醇冷浸提取或渗漉提取，得到的穿心莲提取液依次经微滤膜过滤、活性炭纤维柱净化、纳滤膜浓缩、大孔树脂洗脱纯化、喷雾干燥，即得穿心莲提取物。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于向超微粉颗粒中加入体积分数为85%乙醇冷浸提取或渗漉提取，得穿心莲提取液。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于向超微粉颗粒中加入10倍重量体积分数为85%乙醇冷浸提取或渗漉提取2次，每次提取24h，得穿心莲提取液。
6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于采用DlOl大孔树脂洗脱纯化。
7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于通过球磨技术将穿心莲粉碎成超微粉颗粒。
8.根据权利要求3 7任一项所述的制备方法，其特征在于该制备方法，包括以下步骤将穿心莲球磨粉碎成超微粉颗粒，加入10倍重量体积分数为85%乙醇冷浸提取或渗漉提取2次，每次提取24h，得到穿心莲提取液经微滤膜过滤，滤液再经过活性炭纤维柱净化，除杂后的溶液经纳滤膜循环加压浓缩回收乙醇，浓缩液经DlOl大孔树脂洗脱纯化，洗脱液喷雾干燥，得穿心莲提取物。
全文摘要
本发明公开了一种穿心莲提取物及其制备方法，该提取物含有质量百分比32.3～40.5%的穿心莲内酯和质量百分比2.23～5.52%的脱水穿心莲内酯。其制备方法，包括以下步骤穿心莲通过球磨技术粉碎、乙醇提取，得到的提取液经微滤膜过滤、活性炭纤维净化、纳滤膜浓缩、大孔树脂洗脱、喷雾干燥即得。本发明制备的穿心莲提取物极大限度地保留了穿心莲药材的活性成分穿心莲内酯等成分，去除了穿心莲中的色素等杂质成分，保持其强的抗菌消炎活性。本发明的制备方法操作简单、不需加热，生产能耗低，适于工业化批量生产。
文档编号A61P31/04GK103006724SQ20121050148
公开日2013年4月3日 申请日期2012年11月28日 优先权日2012年11月28日
发明者曾令杰 申请人:广东药学院