疏水性经修饰肽及其在肝特异性靶向中的用途的制作方法与工艺

疏水性经修饰肽及其在肝特异性靶向中的用途本发明涉及衍生自乙肝病毒(HBV)的preS-结构域的疏水性经修饰肽，其为用于在体外和在体内将化合物特异性地递送至肝(优选地至肝细胞)的通用载体。任何种类的化合物(特别是药物)可特异性地靶向至肝，并且因此在肝中富集。此肝脏靶向可进一步用于靶向预防和/或治疗肝疾病或病症，例如肝炎、疟疾、肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)，以及用于预防HAV、HBV、HCV和/或HDV感染。本发明涉及包含所述疏水性经修饰肽和所述待特异性地递送至肝的化合物的药物组合物。本发明还涉及本发明的疏水性经修饰肽在预防和/或治疗肝疾病或病症中的用途；用于预防和/或治疗肝疾病或病症的方法；以及该疏水性经修饰肽在制备用于预防和/或治疗肝疾病或病症的药物中的用途。

背景技术：
肝是存在于脊椎动物和另一些动物中的器官，它在代谢中扮演着重要角色，并且在机体中具有许多功能，包括糖原贮积、红细胞分解、血浆蛋白合成和解毒。肝也是人体内最大的腺体。它位于腹胸部中的隔膜的下方。肝产生胆汁，一种通过脂质的乳化作用来辅助消化的碱性化合物。肝还进行和调节需要特定组织的多种多样的高容量生化反应。肝细胞占肝脏细胞质量的70％至80％。肝细胞参与蛋白质合成、蛋白质贮积和碳水化合物转化、胆固醇、胆盐和磷脂的合成、以及外源性物质和内源性物质的解毒、修饰和排泄。肝细胞还启动胆汁的形成和分泌。存在多种多样的已知肝疾病，例如：-肝炎：肝的炎症，主要由多种病毒引起，还由某些毒物、自身免疫性病症或遗传性病症引起；-肝硬化：肝中形成纤维化组织，代替死亡的肝细胞。肝细胞的死亡可例如由病毒性肝炎、酒精中毒或与其它肝毒性化学品接触引起；-血色素沉着病：引起铁在机体中累积的遗传性疾病，最终导致肝损伤；-肝的癌症：原发性肝细胞癌(HCC)或胆管癌和转移性癌，通常源自胃肠道的其它部分；-威尔逊氏病(Wilson′sdisease)：引起机体保留铜的遗传性疾病；-原发性硬化性胆管炎：胆管的炎性疾病，在本质上是自身免疫性的；-原发性buildup胆汁性肝硬化：小胆管的自身免疫性疾病；-巴德-基亚里综合征(Budd-Chiarisyndrome)：肝静脉的阻塞；-吉尔伯综合征(Gilbert′ssyndrome)：胆红素代谢的遗传性病症，见于约5％的人群中；-糖原贮积疾病II型：糖原的累积(bulid-up)引起机体周身的进行性肌无力(肌病)并且影响多种机体组织，特别是心脏、骨骼肌、肝和神经系统。还存在许多小儿科肝疾病，例如胆管闭锁、α-1-抗胰蛋白酶缺乏症、阿拉日耶综合征(alagillesyndrome)、和进行性家族性肝内胆汁淤积症；以及代谢疾病。此外，若干病原体和寄生虫(尤其是热带疾病)在它们的生活周期过程中具有肝阶段。例如，疟疾是最常见的感染性疾病之一并且是很大的公共卫生问题。疟疾是由疟原虫属(Plasmodium)的原生动物寄生虫引起的。该疾病最严重的形式是由恶性疟原虫(Plasmodiumfalciparum)和间日疟原虫(Plasmodiumvivax)引起的，但其它相关物种(卵形疟原虫(Plasmodiumovale)、三日疟原虫(Plasmodiummalariae)以及有时诺氏疟原虫(Plasmodiumknowlesi))也可感染人。该组的人-病原性疟原虫属物种通常被称为疟疾寄生虫。疟疾寄生虫由雌性按蚊(Anophelesmosquitoes)传播。人的疟疾通过两期产生：红细胞外期(肝期或“肝阶段”)和红细胞内期。当受感染蚊子刺穿人的皮肤取血为食时，蚊子唾液中的子孢子进入血流并迁移到肝。在被引入人宿主中约30分钟内，这些子孢子感染肝细胞，无性地并且无症状地扩增6至15天的时间。一旦这些有机体在肝中分化产生数千个裂殖子，裂殖子在其宿主细胞破裂之后逸入血液中并感染红细胞，则生活周期的红细胞内阶段开始。寄生虫通过将其自身包裹在受感染宿主肝细胞的细胞膜中离开肝而不被发现。寄生虫相对地受到保护免受机体免疫系统攻击是因为，就大部分其人生活周期而言，寄生虫驻留在肝和血液细胞内并且对免疫监督来说是相对不可见的(invisible)。越来越关注开发特别地解决疟疾寄生虫的肝特异性阶段的药物(例如，伯氨喹(primaquine)、旋转酶抑制剂例如左氧氟沙星(levofloxacin)、多柔比星(doxorubicin))以避免血液阶段的发生。另一实例是血吸虫病或裂体吸虫病(bilharziosis)，其为由若干物种的扁形虫引起的寄生性疾病。虽然血吸虫病具有低死亡率，但其可使人非常衰弱(debilitating)。血吸虫病通常是由寄生性扁形虫(血吸虫)感染血液引起的慢性疾病。其引起衰弱并且引起肝和肠损伤。血吸虫病最常见于亚洲、非洲和南美洲，尤其是水被淡水螺(其包含寄生虫)污染的地区。乙肝病毒(HBV)是乙肝的原因，它是哺乳动物和鸟类的小的包膜DNA病毒家族的原型(1)。HBV包膜包绕(enclose)3种蛋白质，称为L-(大)、M-(中)和S-(小)(参见图1)。它们共有具有四个跨膜区的C端S结构域。M-蛋白和L-蛋白携带额外的55个和(基因型依赖性的)107或118个氨基酸(aa)的N端延伸(preS2-和preS1)。在病毒体中，L、M和S的化学计量比为约1∶1∶4，但更大量地分泌的非感染性亚病毒颗粒(SVP)几乎只包含S-蛋白和仅痕量的L-蛋白(2)。在合成过程中，L的preS1结构域被十四酰化，并且在HBV生活周期的一些点转运通过ER-衍生的膜。该修饰对于感染性而言是必要的(3，4)。HBV的一个显著特征是其肝趋向性，即，肝是特异性地支持HBV生长的组织。理想地，药物靶向应满足以下标准：1)药物只向所需作用位点转移；2)对其余有机体的影响最小；3)使用药理学无活性载体。为了携带药物(即，治疗活性剂)至特定组织，研究了不同的策略。例如，使用前药，通过组织特异性酶在靶组织中从前药释放药理活性部分。另一个可能性是使有效的非组织特异性药物与组织特异性的但药理学惰性的载体系统(例如受体-亲和肽或胶体颗粒)相偶联。多种药物载体已被用于增强药物的肝靶向。一种直接的方法基于肝中网状内皮系统的活性吞噬作用来递送特定载体(例如，脂质体和微球体)中的药物。例如，已示出，i.v.(静脉内)注射之后，合并有药物的颗粒状载体主要被肝中的网状内皮系统捕获，导致药物靶向肝(5)。在另一方面，具有带正电的水溶性聚合物的药物的肝靶向基于多数水溶性物质从肝的血管系统自由溢出以及基于肝细胞表面的负电荷(6)。因此，基于肝的这样的解剖学特征和生物化学特征，已使用聚合物作为载体来使药物靶向肝。已通过使用肝细胞的脱唾液酸糖蛋白受体来尝试更特异性的肝脏药物靶向。脱唾液酸糖蛋白受体(半乳糖受体)以高密度存在于肝细胞上。另外，一旦配体与半乳糖受体结合，则配体-受体复合物内化，使得细胞摄取半乳糖基化配体(7)。还通过例如两性聚合物和病毒载体使用纳米颗粒进行了其它递送方法(8)。还通过使用生物纳米胶囊(bio-nanocapsule，BNC)进行了药物和遗传物质的递送。BNC被描述为“由通过生物技术所产生的蛋白质组成的纳米级胶囊”，并且BNC可被用作器官特异性药物递送的递送系统(9)。US7,001,760B2公开了衍生自乙肝病毒(HBV)的重组载体，其可用于基因治疗，例如将治疗基因递送至肝细胞和异源基因在肝细胞中表达。WO2009/092612描述了HBV的疏水性经修饰preS-衍生肽及其作为用于化合物特异性地递送至肝的载体的用途，其内容通过引用整体并入本文。在该文献中，HBV的疏水性经修饰preS-衍生肽可以通过任选的锚定基团(A)与诊断活性剂或治疗活性剂偶联，所述锚定基团优选为疏水性经修饰preS-衍生肽的“C端”。本发明提供了与一种或更多种化合物(优选为药物)缀合的疏水性经修饰肽，所述化合物与以X表示的肽N端氨基酸序列相偶联，使得可产生较短的肽同时仍保留肝特异性。出乎意料地，可使疏水性部分与所述肽相偶联而不消除肝趋向性。化合物(例如药物)与N端位点相偶联使得活性化合物穿过细胞膜更好地递送并且还使得指导药物(在细胞膜上其为活化的)直接到达作用位点。此外，药物与肽的N端区域相偶联有助于该活性物质的稳定性。在图3中，示意性地说明了疏水性经修饰肽与肝细胞表面结合的分子机制。发明概述根据本发明，通过提供疏水性经修饰肽解决了该目的。在图2中，示意性地说明了本发明的疏水性经修饰肽的构造。所述疏水性经修饰肽具有通式：[X-P-Y-R0]Ap，其中P是具有氨基酸序列NPLGFXaaP(单字母密码；其中Xaa是任意氨基酸，优选为F或L，更优选为F)的肽。X是长度为m个氨基酸的氨基酸序列，其中X的一个或更多个氨基酸携带一个或更多个用于选自以下的疏水性修饰的基团：酰化，优选地用羧酸、饱和的和不饱和的脂肪酸、C8至C22脂肪酸、具有亲脂性侧链的氨基酸；和添加选自以下的疏水性部分：胆固醇、胆固醇的衍生物、磷脂、糖脂、甘油酯、类固醇、神经酰胺、异戊二烯衍生物、金刚烷、法尼醇、脂肪族基团、聚芳族化合物，并且m至少为4(m≥4)。在一个优选的实施方案中，疏水性修饰通过用酰基部分酰化来实现，所述酰基部分优选地选自肉豆蔻酰基(C14)、棕榈酰基(C16)或硬脂酰基(C18)，更优选地，通过用肉豆蔻酰基(C14)酰化或者通过用硬脂酰基(C18)酰化来进行。Y是长度为n个氨基酸的氨基酸序列(n为0或至少为1)。在上述通式中，m+n至少为11，即，本发明的疏水性经修饰肽的长度为总计至少18个氨基酸(aa)。R是所述疏水性经修饰肽的C端修饰，其优选为保护使得免受降解的部分，其选自：酰胺、D-氨基酸、经修饰氨基酸、环氨基酸、白蛋白、天然聚合物和合成聚合物，例如PEG、聚糖(o为0或至少为1)。A是锚定基团，优选地选自酯、醚、二硫化物、酰胺、硫醇、硫酯，p为0或者至少为1。在一个优选的实施方案中，m为4至19和/或n为0至78。一种或更多种化合物(优选为一种或更多种药物)与X的一个或更多个氨基酸相偶联。所述化合物可由一种物质构成或者可包含两种或更多种物质，它们通过任何种类的化学键或物理键(例如，共价键、离子键等)连接在一起，或者其为复合物的形式。在本发明的一个优选的实施方案中，所述一种或更多种化合物通过接头或间隔子(spacer)与所述肽相连，其中优选地通过肝蛋白质从与疏水性经修饰肽的缀合物切离所述接头或间隔子，所述肝蛋白质优选为肝细胞蛋白水解酶，其可选自细胞色素(例如，细胞色素P450)、内吞途径的蛋白酶和裂合酶(例如，酯酶)、基质金属蛋白酶MMP1、MMP2、MMP7、MMP9和MMP12，优选为MMP7。在这种情况下，接头或间隔子优选地包含肽序列GCHAK或RPLALWRS。在另一个优选的实施方案中，所述一种或更多种药物与X的在侧链中具有氨基的一个或更多个氨基酸相偶联，所述氨基酸优选地选自：赖氨酸、α-氨基甘氨酸、α，γ-二氨基丁酸、鸟氨酸、α，β-二氨基丙酸，更优选为赖氨酸。在侧链中具有氨基的氨基酸优选地位于X的N端，其中优选1至11个、更优选1至3个在侧链中具有氨基的氨基酸位于X的N端。根据本发明，还通过提供包含以下的药物组合物解决了该目的：至少一种如本文所定义的疏水性经修饰肽和至少一种如本文所定义的待特异性地递送至肝、优选地至肝细胞的化合物(例如药物)以及任选的可药用载体和/或赋形剂。在一个优选的实施方案中，所述疏水性经修饰肽和所述药物组合物用于特异性地递送药物至肝，优选地用于治疗和预防肝疾病或病症。在一个优选的实施方案中，该化合物是细胞穿透肽(cell-penetratingpeptide，CPP)。在一个优选的实施方案中，两种或更多种不同化合物的组合与一种疏水性经修饰肽相偶联。更优选地，与X的一个或更多个氨基酸偶联或连接的一种或更多种化合物是一种或更多种药物或者两种或更多种药物的组合。根据本发明，还通过提供本发明的疏水性经修饰肽或所述药物组合物在制备用于预防和/或治疗肝疾病或病症的药物中的用途解决了该目的。根据本发明，还通过提供用于预防和/或治疗肝疾病或病症的方法解决了该目的，所述方法包括向对象施用治疗有效量的本发明的疏水性经修饰肽或药物组合物。从属权利要求中限定了本发明的另一些优选的实施方案。本发明优选的实施方案的描述在下文中对本发明进行更详细的描述之前，应理解，本发明不限于本文所述的特定方法、方案和试剂，因为它们可以改变。还应理解，本文所使用的术语仅出于描述特定实施方案的目的，并且不旨在限制将仅由所附权利要求书限制的本发明的范围。除非另有指明，否则本文所使用的所有技术和科学术语的含义与本领域普通技术人员所通常理解的含义相同。出于本发明的目的，本文所引用的全部参考文献均通过引用整体并入本文。疏水性经修饰肽如上所述，本发明提供了衍生自乙肝病毒(HBV)的preS结构域的疏水性经修饰肽(也称为“preS-肽”)。HBV的包膜包绕3种蛋白质，称为L(大)、M(中)和S(小)(参见图1)。它们共有具有四个跨膜区的C端S结构域。M蛋白和L蛋白携带55个和(基因型依赖性的)107或118个氨基酸的额外N端延伸(preS2-和preS1)。因此，本发明的肽指这样的肽：其氨基酸序列对应于或基于HBV的L-蛋白质的N端延伸，preS1，优选为基因型A至H以及绒毛猴(WMHBV)、猩猩、黑猩猩和大猩猩的乙肝病毒，但所述肽还指其变体，优选为C端截短变体、氨基酸替换变体。作为必不可少的序列，对于HBV的疏水性经修饰preS-衍生肽的肝趋向性而言重要的氨基酸残基(如SEQIDNO：1(NPLGFXP)中给出的)存在于本发明疏水性经修饰肽的氨基酸序列中。特别地，本发明的疏水性经修饰肽基于以下序列(单字母密码的氨基酸；必需的结构域下方加有下划线)。疏水性经修饰肽的必需结构域(SEQIDNO：1)：NPLGFXP(其中X是任意氨基酸，优选为F或L，更优选为F)preSHBV-A(ID：M57663；SEQIDNO：2)：MGGWSSKPRKGMGTNLSVPNPLGFFPDHQLDPAFGANSNNPDWDFNPIKDHWPQANQVGVGAFGPGFTPPHGGVLGWSPQAQGILATVPAMPPPASTNRQSGRQPTPISPPLRDSHPQApreSHBV-B(ID：D00329，SEQIDNO：3)MGGWSSKPRKGMGTNLSVPNPLGFFPDHQLDPAFKANSENPDWDLNPHKDNWPDAHKVGVGAFGPGFTPPHGGLLGWSPQAQGILTSVPAAPPPASTNRQSGRQPTPLSPPLRDTHPQApreSHBV-C(ID：AB048704，SEQIDNO：4)MGGWSSKPRKGMGTNLSVPNPLGFFPDHQLDPAFKANSENPDWDLNPHKDNWPDAHKVGVGAFGPGFTPPHGGLLGWSPQAQGILTSVPAAPPPASTNRQSGRQPTPLSPPLRDTHPQApreSHBV-Chimpanzee(ID：AB032432，SEQIDNO：5)MGQNLSTSNPLGFFPEHQLDPAFKANTNNPDWDFNPKKDYWPEANKVGAGAFGPGFTPPHGGLLGWSPQAQGILTTLPANPPPASTNRQSGRQPTPLSPPLRDTHPQApreSHBV-D(ID：AB048702，SEQIDNO：6)MGQNLSTSNPLGFFPDHQLDPAFRANTNNPDWDFNPNKDTWPDANKVGAGAFGLGFTPPHGGLLGWSPQAQGIMQTLPANPPPASTNRQSGRQPTPLSPPLRTTHPQApreSHBV-E(ID：X65657，SEQIDNO：7)MGLSWTVPLEWGKNISTTNPLGFFPDHQLDPAFRANTRNPDWDHNPNKDHWTEANKVGVGAFGPGFTPPHGGLLGWSPQAQGMLKTLPADPPPASTNRQSGRQPTPITPPLRDTHPQApreSHBV-F(ID：X69798@8，SEQIDNO：8)MGAPLSTTRRGMGQNLSVPNPLGFFPDHQLDPLFRANSSSPDWDFNTNKDSWPMANKVGVGGYGPGFTPPHGGLLGWSPQAQGVLTTLPADPPPASTNRRSGRKPTPVSPPLRDTHPQApreSHBV-G(ID：AF160501，SEQIDNO：9)MGLSWTVPLEWGKNLSASNPLGFLPDHQLDPAFRANTNNPDWDFNPKKDPWPEANKVGVGAYGPGFTPPHGGLLGWSPQSQGTLTTLPADPPPASTNRQSGRQPTPISPPLRDSHPQAHBVGibbon(ID：AJ131572，SEQIDNO：10)MGQNHSVTNPLGFFPDHQLDPLFRANSNNPDWDFNPNKDTWPEATKVGVGAFGPGFTPPHGGLLGWSPQAQGILTTLPAAPPPASTNRQSGRKATPISPPLRDTHPQAHBV-H(ID：Q8JMY6，SEQIDNO：11)MGAPLSTARRGMGQNLSVPNPLGFFPDHQLDPLFRANSSSPDWDFNTNKDNWPMANKVGVGGFGPGFTPPHGGLLGWSPQAQGILTTSPPDPPPASTNRRSGRKPTPVSPPLRDTHPQAHBVOrangutan(ID：AF193864，SEQIDNO：12)MGQNLSVSNPLGFFPEHQLDPLFRANTNNPDWDFNPNKDTWPEATKVGVGAFGPGFTPPHGGLLGWSPQAQGVTTILPAVPPPASTNRQSGRQPTPISPPLRDTHPQAHBVWoollyMonkey(ID：NC_001896，SEQIDNO：13)MGLNQSTFNPLGFFPSHQLDPLFKANAGSADWDKNPNKDPWPQAHDTAVGAFGPGLVPPHGGLLGWSSQAQGLSVTVPDTPPPPSTNRDKGRKPTPATPPLRDTHPQA“变体”优选为SEQIDNO：2至13的N端和/或C端截短的变体、氨基酸替换或缺失变体或延长变体，其携带疏水性修饰，并且其中一种或更多种药物与疏水性经修饰肽的必需结构域N端的一个或更多个氨基酸相偶联。变体还包括含有经修饰氨基酸、非天然氨基酸的氨基酸序列或肽模拟物或可模拟肽骨架/结构的另一些化合物。优选地，变体选自SEQIDNO.2至13的C端截短的变体；氨基酸替换或缺失变体；包含经修饰氨基酸、非天然氨基酸的变体或肽模拟物或可模拟肽骨架/结构的另一些化合物。根据本发明，疏水性经修饰肽的变体至少包含具有SEQIDNO：1的序列的氨基酸并且可由上述SEQIDNO：2至13或其变体的18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118或119个氨基酸组成。N端和/或C端截短的变体优选地包含SEQIDNO.2至13或其变体的至少18个连续氨基酸、更优选为至少19个连续氨基酸、更优选为至少20以及更优选至少21个连续氨基酸。所述疏水性经修饰肽的长度为m个氨基酸的N端序列(X)包含至少4个氨基酸(即，m＝4)。优选地，疏水性经修饰肽的N端序列(X)可由4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18或19个氨基酸组成。即，m可以为4至19。在一个优选的实施方案中，X的一个或更多个氨基酸的侧链具有氨基，所述氨基酸优选地选自赖氨酸、α-氨基甘氨酸、α，γ-二氨基丁酸、鸟氨酸、α，β-二氨基丙酸，更优选为赖氨酸。X的在侧链具有氨基的氨基酸优选地位于X的N端，其中1至11、优选1至3个在侧链具有氨基的氨基酸位于X的N端。在一个优选的实施方案中，疏水性经修饰肽的N端序列(X)优选地包含序列NX1SX2X3(SEQIDNO：16)，其中X1、X2和X3可以为任意氨基酸。优选地，SEQIDNO：16的X1是L、I或Q，更优选为L。优选地，SEQIDNO：16的X2是T、V或A，或者不存在，优选为T或V，更优选为T。优选地，SEQIDNO：16的X3是P、S、T或F，更优选为P或S，更优选为S。优选地，序列NX1SX2X3(SEQIDNO：16)直接与肽P(SEQ.IDNO：1；NPLGFXaaP)的N端相连，导致包含序列NX1SX2X3NPLGFXaaP的肽，其中X1、X2、X3和Xaa如上文所定义。所述疏水性经修饰肽的长度为n个氨基酸的C端序列(Y)包含0或至少1个氨基酸(即，n≥0)。优选地，疏水性经修饰肽的C端序列(Y)可由0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、1920、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92或93个氨基酸组成。即，n可以为0至93。在一个优选的实施方案中，所述疏水性经修饰肽的C端序列(Y)由至少4个氨基酸(n＝4)组成，其优选地具有序列X4HQLDP(SEQIDNO：17)，其中X4是任意氨基酸。优选地，SEQIDNO：17的X4是D、E或S，更优选为D或E，更优选为D。优选地，序列X4HQLDP(SEQIDNO：17)直接与肽P(SEQ.IDNO：1；NPLGFXaaP)的C端相连，导致包含序列NPLGFXaaPX4HQLDP的肽，其中X4和Xaa如上文所定义。在一个优选的实施方案中，本发明的疏水性经修饰肽包含由氨基酸序列NX1SX2X3NPLGFXaaPX4HQLDP(SEQIDNO：18)编码的肽，其中X1、X2、X3、X4和Xaa如上文所定义。术语“变体”还指见于嗜肝性病毒属(hepadnavirus)的不同病毒性种属、毒株或亚型的同源序列，例如HBV毒株α、HBV毒株LSH(黑猩猩分离物)、绒毛猴HBV(WMHBV)，或者选自HBV基因型A至H(参见SEQIDNO：2至13)的毒株。术语“变体”还指与包含SEQIDNO.2至13的不变的NPLGFXaaP-结构域和邻近序列或本文所公开的任意其它氨基酸序列的氨基酸序列示出至少50％、优选70％、更优选80％、更优选90％或95％的序列同一性的同源序列。因此，根据本发明的优选疏水性经修饰肽包含具有不同病毒种属、毒株或亚型(优选为HBV的基因型或绒毛猴HBV(WMHBV)或其变体的氨基酸序列)的氨基酸序列的SEQIDNO.2至13的变体。SEQIDNO.2至13的“变体”还包括这样的变体或“类似物”：其包含氨基酸缺失；氨基酸替换，例如被其它氨基酸或者等构物(isostere)(与蛋白质氨基酸具有相近的结构和空间相似性的经修饰氨基酸)保守替换或非保守替换；氨基酸插入或等构物插入，只要序列仍示出肝趋向性即可，优选地，在静脉内注射后1小时之后，大于10％的注射剂量在肝组织中累积。疏水性经修饰肽或其“变体”的肝趋向性优选为1小时之后10％或更大的注射剂量，更优选为1小时之后25％或更大的注射剂量，更优选为1小时之后50％或更大的注射剂量。保守氨基酸替换通常涉及相同类别的氨基酸之间的替换。这些类别包括，例如：-具有不带电极性侧链的氨基酸，例如天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸；-具有碱性侧链的氨基酸，例如赖氨酸、精氨酸和组氨酸；-具有酸性侧链的氨基酸，例如天冬氨酸和谷氨酸；以及-具有非极性侧链的氨基酸，例如甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸和半胱氨酸。“N端”指X的N端，即，各第一位氨基酸残基，但还包括紧挨着N端的疏水性修饰，例如各氨基酸残基(-4)、(-3)、(-2)、(-1)、1、2或3或4。因此，化合物(例如，药物)与疏水性修饰的偶联还可通过药物与接近于X的N端的位点处的疏水性部分的连接来实现。根据本发明所述的疏水性经修饰肽的疏水性修饰为肽添加了疏水性部分。X被至少一个疏水性部分或基团所修饰。在本发明的一些优选的实施方案中，X被1、2、3、4或更多个疏水性部分或基团所修饰。即，可以用多于一个疏水性部分或基团(例如，2个)来修饰X。所述疏水性部分或基团可彼此相同或不同。根据本发明所述的肽的疏水性修饰选自：-酰化；-疏水性部分的添加。酰化优选地选自用羧酸、脂肪酸、具有亲脂性侧链的氨基酸来酰化。优选的脂肪酸是饱和脂肪酸或不饱和脂肪酸、支链脂肪酸或非支链脂肪酸，优选地具有8至22个碳原子(C8至C22)。更优选地，通过酰化进行疏水性修饰选自用肉豆蔻酰基(C14)、棕榈酰基(C16)或硬脂酰基(C18)来酰化。在体内应用和医学应用中优选通过肉豆蔻酰基化来修饰，这是由于其较高的安全性，例如，未示出硬脂酰基的不利作用(先天性免疫应答等)。疏水性部分的添加优选地选自以下的添加：胆固醇、胆固醇的衍生物、磷脂、糖脂、甘油酯、类固醇、神经酰胺、异戊二烯衍生物、金刚烷、法尼醇、脂肪族基团、聚芳族化合物。疏水性部分的连接优选地通过共价结合进行，共价结合可通过氨基甲酸酯、酰胺、醚、二硫化物或本领域技术人员技术范围内的任何其它连接来实现。因此，本发明的疏水性经修饰的、优选地酰化的肽优选为脂肽，这是由于其N端亲脂性或疏水性基团/部分。Y的C端修饰(R)优选为用保护免受降解(例如，体内降解)的部分来修饰。“C端”指C端(即，各最后一个氨基酸残基)处的修饰，但还包括紧挨着C端例如倒数第二个氨基酸残基、倒数第三个氨基酸残基或更多个氨基酸残基的修饰(例如，引入一个D-氨基酸，其保护载体免受酶降解，例如，通过羧肽酶的作用)。本领域技术人员将能够根据各应用选择各合适的部分。保护免受降解的优选部分选自：酰胺、D-氨基酸、经修饰氨基酸、环氨基酸、白蛋白、天然聚合物和合成聚合物，例如PEG、聚糖。此外，o为0或者至少为1，即，C端修饰(R)是任选的。优选地，o为1。在本发明的另一些实施方案中，o为1、2、3、4或更大。即，可以用多于一个部分或基团(例如，2个)来修饰疏水性经修饰肽的C端或其邻近区(proximity)。所述部分或基团可彼此相同或不同。在本发明的一个实施方案中，疏水性修饰和/或R通过接头或间隔子与肽相连。接头或间隔子对于本领域技术人员而言是已知的，例如多聚丙氨酸、多聚甘氨酸、碳水化合物、(CHa)n基团。因此，本领域技术人员将能够根据各应用选择各合适的接头或间隔子。任选的锚定基团(A)作为化合物、标签、标记的额外的连接点，并且位于Y的氨基酸处。即，在存在至少一个锚定基团(A)(即，p≥1)的情况下，Y也包含至少一个氨基酸(即，n≥1)。在一个优选的实施方案中，锚定基团是Y的“C端”，其中“C端”指C端处的修饰，即，各最后一位氨基酸残基，但还包括C端的邻近区，例如倒数第二个氨基酸残基、倒数第三个氨基酸残基或更多个氨基酸残基。在这种情况下，o可以是0，因此，没有其它C端修饰R。锚定基团A可以在Y的氨基酸侧链处或者可以是Y的氨基酸侧链本身，即，A可以是侧链本身或经修饰侧链。锚定基团还可以是经修饰氨基酸残基，其被引入Y的氨基酸序列以作为锚定基团。在本发明的另一些实施方案中，锚定基团A与X的疏水性修饰和/或C端修饰R相连。优选的锚定基团选自：酯、醚、二硫化物、酰胺、硫醇、硫酯。本领域技术人员将能够根据待连接的各化合物、标签、标记等来选择各合适的锚定基团。锚定基团还可适用于连接形成复合物的组分，例如生物素/亲和素、多聚精氨酸/寡核苷酸(例如，siRNA)复合物。此外，o为0或至少为1，即，锚定基团(A)是任选的。优选地，o为1。在本发明的另一些实施方案中，o为1、2、3、4或更多。即，存在多于一种锚定基团，例如2种。锚定基团可以彼此相同或不同，使得若干化合物(例如药物和标记或不同药物)相连。疏水性经修饰肽的合成本发明的肽可通过本领域技术人员多种容易得知的方法来制备，一般通过合成化学方法和/或遗传工程方法。合成化学方法更特别地包括固相顺序和嵌段合成(Erickson和Merrifield，1976)。从WO2009/092612可获得更多细节。可使用已建成的自动化方法例如通过使用自动化肽合成仪来进行固相顺序方法。在该方法中，使[α]-氨基保护的氨基酸与树脂支持物相结合。所使用的树脂支持物可以是在本领域中常规地用于(多)肽的固相制备的任何合适的树脂，优选为聚苯乙烯，其与聚氧乙烯(polyoxyethylen)共聚提供与最初引入的o-氨基保护的氨基酸进行酯形成的位点。已清楚地描述了本发明人所应用的该优化方法(参见，例如，12)。氨基酸一个接一个(逐步)的引入。对应于一个氨基酸的引入的各合成循环包括去保护步骤、接连的洗涤步骤、氨基酸活化的偶联步骤以及后续洗涤步骤。这些步骤中的每一个之后接着过滤。用于偶联的反应剂是用于(多)肽合成的经典反应剂，例如二环己基碳二亚胺、羟基苯并三唑、苯并三唑-1-基-氧基三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸、以及二苯基磷酰叠氮化物。在树脂上合成多肽之后，通过在苯甲醚、乙二硫醇或2-甲基吲哚的存在下用强酸例如三氟乙酸处理来将多肽与树脂分离。然后，通过经典纯化技术，特别是通过HPLC方法来纯化该化合物。本发明的肽还可以通过偶联(多)肽片段(其选择性地被保护)来获得，该偶联例如在溶液中实现。该肽还可通过本领域技术人员已知的遗传工程技术来产生。特别合适的是真核表达系统，例如杆状病毒系统。根据该方法，在被重组杆状病毒感染的昆虫细胞中表达蛋白质，所述重组杆状病毒包含编码异源蛋白质的核酸序列和调节核酸序列例如启动子。若干细胞系可用于被重组杆状病毒感染，例如细胞系Sf-9，可得自美国典型培养物保藏中心(CRL1711)。在原核表达系统(例如大肠杆菌)中表达也特别合适。向该肽引入疏水性部分可通过本领域技术人员容易得知的多种方法来实现，包括合成方法和遗传工程方法。可替选地，可通过稳定地转染的真核细胞系(例如本领域中已知并且通常用于产生疫苗等的CHO和另一些细胞系)来产生肽和/或融合肽(即，疏水性经修饰肽)。由于N端47-preS1氨基酸促进十四酰化蛋白质/肽分泌的固有特性，可以从细胞培养物上清液中提取生物活性的疏水性经修饰肽。用于肝靶向的载体和运载体如上所述，本发明提供了疏水性经修饰肽作为载体或运载体(shuttle)用于特异性地递送化合物(例如，药物)至肝的用途，其中所述药物与本文所述的疏水性经修饰肽相偶联。根据本发明用于特异性地递送化合物至肝的“载体”或“运载体”表示如由本发明人所发现的和本文所述的疏水性经修饰肽的肝趋向性，即指它们选择性地在肝中累积的能力，优选为选择性地在肝细胞的质膜处累积以及选择性地进入肝细胞。本发明基于本发明人对HBV的preS1序列高特异性肝累积的发现和HBV的preS1序列中HBV肝趋向性决定因子的鉴定。因此，本发明使用关于肝趋向性的决定因子的知识来设计分别用于特异性肝靶向或递送的通用载体或运载体。本发明的疏水性经修饰肽是用于特异性地将化合物递送至肝的通用载体或运载体。优选地，化合物特异性地递送至肝是化合物特异性地递送至肝细胞。此外，化合物可在体外以及在体内特异性地递送至肝细胞。化合物优选地特异性地递送至动物的肝，所述动物优选为哺乳动物或人或鸟类。待递送的化合物根据本发明待特异性地递送至肝的化合物(例如，药物)可以是任何种类的化合物，优选地适于治疗目的。药物可以为前药或预前药(preprodrug)的形式。化合物还可以是病毒或其衍生物，例如，复制缺陷型重组病毒或可复制重组病毒(例如，腺病毒或腺相关病毒)，其已经化学修饰或遗传修饰从而暴露其表面上的靶序列并且因而再定向为感染肝细胞。这些病毒应可用于肝细胞特异性基因递送。药物(治疗剂)在本发明的一个优选的实施方案中，待特异性地递送至肝细胞的化合物是药物(或前药形式的药物)。该药物/前药优选地选自治疗活性化合物、药物、制剂，更优选地选自以下类别的物质：放射性分子或同位素(例如，18F、51Cr、67Ga、68Ga、11lIn、99mTc)、烷化剂(例如，顺铂、奥沙利铂(oxalplatin))、抗代谢物(例如，硫唑嘌呤)、抗肿瘤剂(例如，博来霉素、放线菌素)、蒽环类(例如，多柔比星(doxorubicin)、表柔比星)、抗叶酸剂(例如，氨甲蝶呤)、抗病毒剂(例如，利巴韦林(ribavarin)、替诺福韦)、细胞骨架干扰剂(例如，长春碱、紫杉醇)、细胞因子(例如，干扰素-α、干扰素-β)、趋化因子(例如，CCL1、CXC1)、siRNA(例如，CALAA-01、SIRNA-034)、miRNA(例如，miR-26a)、核受体激动剂和拮抗剂(例如，米非司酮)、寡核苷酸和核酸(例如，质粒、短dsDNA、短ssDNA)、埃博霉素(例如，帕土匹隆(patupilone)、伊沙匹隆(ixabepilone))、激素(例如，孕激素、氟甲睾酮)、激素拮抗剂(例如，托瑞米芬、氟维司群)、免疫抑制剂(例如，雷帕霉素、环孢素A)、免疫调节剂(例如，来那度胺)、免疫刺激剂(例如，SDC101、ITMN-191)、免疫刺激序列(例如，TLR激动剂)、激酶抑制剂(例如，索拉非尼(sorafenib)、伊马替尼、厄洛替尼(erotinib))、蛋白酶抑制剂(例如，波西普韦(boceprevir)、特拉普韦(telaprevir))、聚合酶抑制剂(例如，MK-0608、R7128)、拓扑异构酶抑制剂(例如，伊立替康、拓扑替康)、核苷类似物(例如，替比夫定、恩替卡韦)、前体类似物(例如，氟尿嘧啶)、肽和肽抗生素(例如，防御素1)、抗生素(例如，阿奇霉素、克林霉素、利福平)、氟喹诺酮(fluoroquinilone)类旋转酶抑制剂(例如，左氧氟沙星、克林沙星、加替沙星、吉米沙星、莫西沙星、西他沙星、曲伐沙星、普卢利沙星、加雷沙星、德拉沙星)、基于铂的制剂(例如，卡铂、顺铂)、类视黄醇(例如，他扎罗汀、贝沙罗汀)、长春花生物碱(例如，长春西汀、长春瑞滨)及其衍生物、细胞毒性剂和细胞生长抑制剂例如核糖体失活蛋白质(例如，α-八叠球菌毒素(α-sarcin)、局限曲菌素)、维生素(例如，维生素B6)、α-链毒素(例如，白喉毒素)、蛇毒毒素及其组分(例如，眼镜蛇毒素)、真菌衍生剂(例如，曲霉素)、细菌外毒素(例如，假单胞菌外毒素)、细菌性肠毒素(例如，霍乱毒素)和细菌内毒素(例如，脂多糖)及其类似物、抗体(例如，贝伐单抗、西妥昔单抗)和CAD(阳离子两性药物)例如丙氯拉嗪、氟奋乃静(fluphenazine)、三氟吩嗪。本发明的优选实施方案可包括上述类别的物质中的一个或更多个成员，特别是氨苯砜、博来霉素、放线菌素D、丝裂霉素、柔红霉素、多柔比星、环孢素A、替诺福韦、拉米夫定、阿德福韦、恩替卡韦、利巴韦林、特拉匹韦(telepravir)、表柔比星、伊达比星、米托蒽醌、胺苯吖啶(amsacrin)、去氧氟尿苷(doxifluridine)、顺铂、卡铂、奥沙利铂、赛特铂、喜树碱、拓扑替康、伊立替康、安吖啶(amsacrine)、依托泊苷、替尼泊苷、环磷酰胺、异环磷酰胺、氯乙环磷酰胺、美法仑、苯丁酸氮芥、雌二醇氮芥(estramustin)、白消安、氮芥、苏消安(treosulfan)、卡莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀、链脲霉素、丙卡巴肼、达卡巴嗪、替莫唑胺、噻替哌、长春瑞滨、长春新碱、长春碱、长春地辛、紫杉醇、多西紫杉醇、甲氨蝶呤、培美曲塞、雷替曲塞、氟尿嘧啶、卡培他滨、胞嘧啶-阿糖胞苷、吉西他滨、硫鸟嘌呤、喷司他丁、硫唑嘌呤、巯嘌呤、氟达拉滨、克拉屈滨、羟基脲、米托坦、阿扎胞苷、阿糖胞苷(cytarabine)、吉西他滨、奈拉滨、硼替佐米、阿那格雷，优选为伊马替尼、厄洛替尼、舒尼替尼、索拉非尼、达沙替尼、拉帕替尼或尼洛替尼、MK886、苯噻啶(pizotlyene)、托瑞米芬、SDC-101、ITMN-191、RG7227、硝唑尼特、VX-950、VX-222、BMS-790052、BMS-650032、GS9190、GS9256、BI201335、BI207127、IDX184、R7128、波西普韦、MK-7009、SIRNA-034、MK-0608、R7128、RG7347、RG7348、TMC435、PF-868554、PF-4878691、TT033、BI201335、BI207127、BMS-790052、BMS-791325、BMS-650032、BMS-824393、ANA598、VCH-759、Gl50005、ITX5061、ITX4520、IDX184、IDX320、IDX375、A-837093、GS9190、GS9256、ACH-1095、ACH-1625、PPI-461、PPI1301、TG4040、AZD7295、凯咪唑(chemizole)、SPC3649、GNI-104、ID-12、GSK625433、ABT-450、ABT-072、ABT-333、PSO-7977、INX09189、PSI-938、EDP-239、SDC-101、SP-30、AVL-181、VX-500及其组合。在一个优选的实施方案中，药物选自：伯氨喹、多柔比星和旋转酶抑制剂(优选左氧氟沙星)。多柔比星被用作用于治疗原发性HCC的第一线药物并且发现其作为抗疟疾药物(FriedmanR，(2009)；38；GamoFJ等.(2010)；39)。但是，多柔比星显示出严重的心脏毒性和肾毒性。多柔比星与本发明的疏水性经修饰肽结合消除了该药的靶毒性。已知氟喹诺酮类的旋转酶抑制剂例如左氧氟沙星抑制肝阶段疟疾(Friesen等，Scie.Transl.Med.，2010；40)。为了有效作为抗疟疾药物，需要进行每日长时间使用。此外，已知如果剂量高的话，旋转酶抑制剂产生不耐性，需要进行长期使用。旋转酶抑制剂例如左氧氟沙星的偶联可减少高剂量使用并且使用皮下注射允许贮存诱导(depotinduction)。上文所述药物可单独使用或者与彼此以任意合适的组合使用。用于治疗不可切除肝细胞癌的优选组合是以下的组合：硼替佐米(bortezumib)和多柔比星；索拉非尼和多柔比星；硼替佐米(botezomib)和索拉非尼；厄洛替尼和氟尿嘧啶；厄洛替尼、氟尿嘧啶和干扰素-α；顺铂和多柔比星；以及顺铂、多柔比星和厄洛替尼。用于治疗已转移的结直肠癌的优选组合是：伊立替康和氟尿嘧啶；伊立替康和厄洛替尼；奥沙利铂和氟尿嘧啶；FOLFOX(奥沙利铂、氟尿嘧啶、甲酰四氢叶酸(lencovorin))；顺铂和多柔比星。用于治疗肝阶段疟疾的优选组合是：伯氨喹和克林霉素；伯氨喹和阿奇霉素；环丙沙星、多柔比星(doxocycline)和阿托伐醌；伯氨喹、环丙沙星和利福平；伯氨喹、利福平和氨苯砜。用于治疗丙型慢性肝炎的优选组合是：干扰素-α和利巴韦林；特拉匹韦和利巴韦林；特拉匹韦、利巴韦林和干扰素-α；波西普韦和利巴韦林；波西普韦、利巴韦林和干扰素-α；环孢素A和干扰素-α。用于治疗乙肝的优选组合是：替诺福韦和恩替卡韦；替诺福韦和干扰素-α；恩替卡韦和干扰素-α；替诺福韦、恩替卡韦和干扰素-α。关于药物、其作用以及用于预防和/或治疗肝疾病或病症的药物的合适的组合的其它信息可获自Chen，K.F.，H.C.Yu，等.(2010)；Czauderna，P.，G.Mackinlay，等.(2002)；Javle，M.和C.T.Hsueh(2009)；Lee，J.，J.O.Park，等.(2004)；Mendelsohn，J.和J.Baselga(2000)；Patt，Y.Z.，M.M.Hassan，等.(2003)；Richly，H.，B.Schultheis，等.(2009).Falcone；A.，S.Ricci，等.(2007)；Javle，M.和C.T.Hsueh(2009)；Sagar，J.，K.Sales，等.(2010)；Seymour，M.T.，T.S.Maughan，等.(2007)；Tournigand，C，T.Andre，等.(2004)；Kappe，S.H.，A.M.Vaughan，等.(2010)；Goodman，C.D.，V.Su，等.(2007)；Zeuzem，S.(2004).McHutchison，J.G，G.T.Everson，等.(2009)；Nelson，DR，Ghalib，RH，Sulkowski，M，等.(2009).“EASLClinicalPracticeGuidelines：managementofchronichepatitisB.”JHepatol50(2)：227-242；Liaw，Y.F.，N.Leung，等.(2005)；Lok，A.S.和B.J.McMahon(2009)Kornhuber，J.，P.Tripal，等.(2008)；Gastaminza，P.，C.Whitten-Bauer，等.(2010)。细胞穿透肽可以将一种或更多种细胞穿透肽(CCP)与本发明的疏水性经修饰肽相偶联以有效地将前药和胞内活性剂递送入肝细胞中。优选地，CCP将与另一些化合物/药物组合使用。优选的实施方案是：N端偶联的CPP和伯氨喹和或抗生素用于治疗疟疾；N端偶联的CPP和核苷类似物用于治疗HBV和HCV；N端偶联的CPP和蛋白酶抑制剂用于治疗HCV及其组合。在一个优选的实施方案中，CPP选自多聚精氨酸、穿透素、HBVpreS2-TLM、触角足(Antennapedia)。N端偶联的CPP可用于递送寡核苷酸-肽缀合物和肽核酸缀合物进入肝细胞。一个优选的实施方案是使用N端偶联的HIV-TAT肽将璜基琥珀酰亚胺基-4-(对-马来酰亚胺基苯基丁酸酯)偶联的抗-HCVsiRNA递送入肝细胞中。关于CCP的进一步细节可获自Meng，S.，B.Wei，等.(2009)；deKoning，M.C，G.A.vanderMarel，等.(2003)和Zatsepin，T.S.，J.J.Turner，等.(2005)。与标记的组合在另一个优选的实施方案中，药物与标记组合，即，一种或更多种标记与本发明的疏水性经修饰肽相偶联，所述疏水性经修饰肽与一种或更多种药物相偶联。由于该组合，可通过检测标记来监测药物向肝的递送。标记可以是适于诊断目的并且可以通过本文所述的方法与本发明的疏水性经修饰肽相偶联的任何种类的化合物。优选地，该标记选自荧光染料、放射性同位素或造影剂。根据本发明，造影剂是帮助示出机体内异常区域的染料或其他物质。优选的放射性同位素/发出荧光的同位素选自：发出α射线的同位素、发出γ射线的同位素、发出俄歇电子的同位素、发出X-射线的同位素、发出荧光的同位素，例如18F、51Cr、67Ga、68Ga、111In、99mTc、140La、175Yb、153Sm、166Ho、88Y、90Y、149Pm、177Lu、47Sc、142Pr、159Gd、212Bi、72As、72Se、97Ru、109Pd、105Rh、101m15Rh、119Sb、128Ba、123I、124I、131I、197Hg、211At、169Eu、203Pb、212Pb、64Cu、67Cu、188Re、186Re、198Au和199Ag。优选的荧光染料选自以下类别的染料：呫吨染料(例如，荧光素)、吖啶类染料(例如，吖啶黄)、嗪(例如，嗪1)、Cynines(例如，Cy7/Cy3)、苯乙烯基染料(例如，染料-28)、香豆素(例如，AlexaFluor350)、卟吩类(例如，叶绿素B)、金属-配体复合物(例如，PtOEPK)、荧光蛋白(例如，APC、R-藻红蛋白)、纳米晶体(例如，量子点705)、二萘嵌苯(例如，LumogenRedF300)和酞菁类(例如，IRDYETM700DX)以及这些类别的染料的缀合物与组合。优选的对比剂选自：顺磁性剂，例如Gd、Eu、W和Mn，优选地与螯合剂复合。其它选择是超磁铁(supramagneticiron)(Fe)复合物和颗粒、包含高原子数的原子的化合物，即，用于计算机断层摄影(CT)的碘、微泡和载体例如包含这些对比剂的脂质体。螯合剂待特异性地递送至肝细胞的化合物可以以与螯合剂复合的形式结合至所述疏水性经修饰肽，其中所述螯合剂能够与各化合物形成复合物。在本发明的一个优选的实施方案中，螯合剂选自：1，4，7，10-四氮杂环十二烷-N，N′，N，N′-四乙酸(DOTA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、1，4，7-三氮杂环壬烷-1，4，7-三乙酸(NOTA)、三亚乙基四胺(TETA)、亚氨基二乙酸、二亚乙基三胺-N，N，N′，N′，N″-五乙酸(DTPA)和6-肼基吡啶-3-羧酸(HYNIC)，而特别优选1，4，7，10-四氮杂环十二烷-N，N′，N，N′-四乙酸(DOTA)。化合物与疏水性经修饰肽相偶联化合物与X各氨基酸的偶联可通过本领域技术人员已知的任何合适的方法进行。在本发明的一个优选的实施方案中，通过使用活化酯将化合物与X的各氨基酸相偶联。特别地，在偶联化合物至X的在侧链具有氨基的氨基酸的情况下，可以使用该方法。或者，可以使用下述偶联方法以使一种或更多种化合物与X的各氨基酸相偶联，其被简短的总结。化学工作者可容易地确定用于实现化合物与氨基酸(有或没有接头)的偶联的特定反应条件：-通过胺与活化羧酸反应形成酰胺，优选为NHS-酯或碳二亚胺；碳二亚胺是促进羧基直接缀合至伯胺的完全交联剂。NHS酯是由包含羧酸酯基团的分子的碳二亚胺-活化形成的反应性基团。-使用两个巯基或特异性地与吡啶基二硫化物反应的一个巯基的二硫连接；吡啶基二硫化物与巯基在广泛的pH范围(最佳为pH4至5)内反应从而形成二硫键。在该反应过程中，在分子的SH-基团和2-吡啶基二巯基基团之间发生二硫化物交换。结果是吡啶-2-硫酮被释放。-使用马来酰亚胺或卤乙酰基和巯基组分形成硫酯；卤乙酰基与巯基在生理pH下反应。通过用来自巯基的硫原子亲核取代碘而进行碘乙酰基的反应从而产生稳定的硫酯连接。当反应混合物的pH为6.5至7.5时，马来酰亚胺基团特异性地与巯基反应并形成不可逆的稳定硫酯连接。-使用酰亚胺酯和胺形成脒；酰亚胺酯交联剂与胺在碱性pH下快速地反应，但半衰期短。随着pH的碱性变得更强，半衰期和与胺的反应性升高；因此，与pH8相比，在pH10下进行的交联更有效。低于pH10的反应条件可导致副反应，但是pH8至10有助于脒形成。-使用羰基(例如，醛)和酰肼的酰肼连接；羰基(醛和酮)与酰肼和胺在pH5至7下反应。羰基不易于存在于蛋白质中；但是，使用偏高碘酸钠进行的糖醇的温和氧化将邻近羟基转化为醛或酮。与酰肼的后续反应导致形成腙键。-使用羰基和胺在还原性条件下进行胺连接；还原性胺化(也称为还原性烷化)是涉及羰基通过中间体亚胺转化为胺的胺化形式。羰基最通常为酮或醛。-使用腈和叠氮化物的铜-催化形成三唑。使用叠氮化物与末端或内在炔之间的Huisgen-类型1，3-两极性环加成作用来得到稳定的1，2，3-三唑。-使用异硫氰酸酯和胺形成异硫脲；异硫氰酸酯与胺(即，赖氨酸的ε-氨基)的反应导致稳定的异硫脲键。-通过醇与活化羧酸反应形成酯，优选为酰氯或碳二亚胺；高温反应使得醇与羧酸直接反应形成稳定的酯或羧酸并且在酸性催化条件或碱性催化条件下活化。-通过纯与烷基卤化物的反应形成酯。卤烷烃对亲核试剂具有反应性。它们是极性分子：与卤素相连的碳稍带正电，其中卤素稍带负电。这导致缺电子(亲电子)的碳不可避免地吸引亲核试剂。用于化合物(例如，药物)的接头/间隔子本发明的疏水性经修饰肽(特别是缀合物)优选地用于在肝中富集运送至肝的化合物。优选地，肝蛋白(优选为肝细胞蛋白水解酶，特别是在体内于肝中)将化合物从与疏水性经修饰肽的缀合物上切掉。该化合物(例如，药物)和疏水性经修饰肽形成缀合物。优选地，化合物与疏水性经修饰肽的缀合物通过共价连接或者通过复合物形成而形成。连接的形式取决于化合物的类型。化合物(例如，药物)与X的各氨基酸的偶联可通过使用间隔子或接头来进行。接头或间隔子对于本领域技术人员而言是已知的，例如多聚丙氨酸、多聚甘氨酸、碳水化合物、(CH2)n基团或氨基酸序列。因此，本领域技术人员将能够根据各应用选择各合适的接头或间隔子。间隔子或接头优选地包含肝细胞特异性活化的识别位点，其优选地被肝或肿瘤特异性蛋白质识别。识别位点优选为蛋白质水解切割位点。因此，肝蛋白质优选地为肝细胞蛋白质，更优选为肝细胞蛋白水解酶或在肿瘤中过表达的蛋白水解酶，例如，MMP7。因此，疏水性经修饰肽可被施用于对象并且将被在机体(例如在体液中)中输送而不被切割。但是，疏水性经修饰肽一旦到达其靶标(肝或肝细胞)，肝蛋白质(例如肝细胞蛋白水解酶)就将切割蛋白质水解切割位点并从其运载体(即，疏水性经修饰肽)释放该化合物。另一些优选的肝蛋白质是细胞色素，例如细胞色素P450或内吞途径的裂合酶。如用于阿德福韦(Adefovir)或Pradevofir的HepDirect(R)技术(MetabasisTechnologies，Inc.)也适于本发明。对于肿瘤疾病例如由癌(例如，结肠癌)的转移引起的瘤性改变而言特别重要的是恶性组织与周围组织之间的交换。需要健康的上皮细胞活化和/或作为原发性肿瘤的远距离转移的形成之必要条件的免疫细胞募集。组织分析示出，基质金属蛋白酶(MMP1、MMP2、MMP7、MMP9和MMP12)的肿瘤特异性mRNA表达水平与肿瘤患者的不良预后相关(GentnerB.等，AnticancerRes.2009Jan；29(1)：67-74)。在这些蛋白酶中，对MMP7特别感兴趣，因为它主要由肿瘤细胞表达。药物与所述肽序列通过包含对MMP7(例如，短肽序列GCHAK或RPLALWRS)以及所有其它MMP7底物(例如，纤连蛋白、弹性蛋白、酪蛋白等)具有特异性的蛋白质水解结合位点的接头序列偶联会使得无活性前药通过上述方式经原始肽的修饰递送至肝。随后，在肝中，经修饰的肽会优先在肿瘤组织的直接环境中被切割并且无活性前药将活化。在过表达上文所列举的MMP之一的肝中，靶向原发性肝细胞癌或转移(例如，结肠癌转移)的药物递送至肝的该方法代表了药物靶向肿瘤组织的新方法。在一个实施方案中，通过复合物形成来形成化合物与疏水性经修饰衍生肽的缀合物。可用于本发明的优选复合物是生物素/亲和素、多聚精氨酸/寡核苷酸(例如，siRNA)。本领域技术人员将能够确定合适的复合物组分并且由此设计化合物和疏水性经修饰肽。预防和/或治疗肝疾病在本发明的一个优选的实施方案中，提供了上述疏水性经修饰肽(特别是其与化合物的缀合物)来预防和/或治疗肝疾病或病症。根据应被预防和/或治疗的肝疾病或病症，选择各化合物并选择性地特异性地递送至肝。本发明的“肝疾病”或“肝病症”指对器官肝、肝组织或肝细胞有影响或涉及器官肝、肝组织或肝细胞的任何疾病或病症。肝疾病的实例是：-肝炎：肝的炎症，主要由多种病毒引起，还由某些毒物、自身免疫性病症或遗传性病症引起；-肝硬化：肝中形成纤维组织，代替死亡的肝细胞。肝细胞的死亡可例如由病毒性肝炎、酒精中毒或与其它肝毒性化学品接触引起；-血色素沉着病：引起铁在机体中累积的遗传性疾病，最终导致肝损伤；-肝的癌症：原发性肝细胞癌(HCC)或胆管癌和转移性癌，通常源自胃肠道的其它部分；-威尔逊氏病：引起机体保留铜的遗传性疾病；-原发性硬化性胆管炎：胆管的炎性疾病，在本质上是自身免疫性的；-原发性胆汁性肝硬化：小胆管的自身免疫性疾病；-巴德-基亚里综合征：肝静脉的阻塞；-吉尔伯综合征：胆红素代谢的遗传性病症，见于约5％的人群中；-糖原贮积疾病II型：糖原的累积引起机体周身的进行性肌无力(肌病)并且影响多种机体组织，特别是心脏、骨骼肌、肝和神经系统；-小儿科肝疾病，例如胆管闭锁、α-1-抗胰蛋白酶缺陷症、阿拉日耶综合征和进行性家族性肝内胆汁淤积症；-代谢疾病。此外，还包括动物(例如，宠物或家禽)的肝疾病，特别是可传播至人的疾病，例如弓形体病。待预防和/或治疗的肝疾病或病症优选地选自肝炎、肝硬化、血色素沉着病，优选为由甲、乙、丙、丁、戊、己、庚和辛型肝炎病毒引起的肝炎。待预防和/或治疗的肝疾病或病症还可以是由病毒引起的伴发肝炎，所述病毒例如疱疹病毒家族的病毒，例如，疱疹病毒、巨细胞病毒(CMV)、以及带状疱疹病毒(VZV)、EB病毒(EBV)、柯萨奇病毒(coxsackievirus)、黄热病毒、登革病毒(Denguevirus)。待预防和/或治疗的肝疾病或病症还可以是涉及病毒或非病毒性病原体(例如，在许多热带疾病中)的肝病期的疾病。由于一些病原体的肝病期是早期病期，所以可以在这样的早期病期选择性地特异性治疗各感染。这样的病毒是甲、乙、丙、丁、戊、己、庚和辛型病毒，疱疹病毒。这样的非病毒性病原体是细菌、寄生虫和/或蠕虫。寄生虫是例如引起疟疾的疟原虫属的原生动物寄生虫，例如恶性疟原虫、间日疟原虫和相关物种(例如，卵形疟原虫、三日疟原虫、诺氏疟原虫)。这样的蠕虫是：例如，血吸虫属的扁形虫，其引起血吸虫病或裂体吸虫病，例如曼氏血吸虫(Schistosomamansoni)、间插血吸虫(Schistosomaintercalatum)、埃及血吸虫(Schistosomahaematobium)、日本血吸虫(Schistosomajaponicum)和湄公血吸虫(Schistosomamekongi)。这样的寄生虫还是：例如，白蛉属(Phlebotomus)和罗蛉属(Lutzomyia)的利什曼虫锥体虫原生动物，其为疾病利什曼病的原因。因此，可以通过本发明的方法来预防和/或治疗疟疾、血吸虫病(裂体吸虫病)和/或利什曼病。因此，可以通过本发明的方法来预防和/或治疗某些热带疾病。待预防和/或治疗的肝疾病或病症优选为肝肿瘤，优选为肝细胞癌(HCC)或由实体肿瘤(例如，结肠癌)引起的瘤性改变。待预防和/或治疗的肝疾病或病症还可以是代谢疾病，例如糖尿病、高脂血症、代谢综合征和肥胖症、慢性高血糖症、代谢综合征、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)(同样参见(9))。在本发明的一个优选的实施方案中，提供了上述疏水性经修饰肽(特别是其与化合物的缀合物)来调节肝功能。优选其在肝细胞介导的抗原呈递和肝导向免疫应答的活化中的用途。在这种情况下，待递送至肝的化合物优选为免疫原性表位。在本发明的一个优选的实施方案中，上述疏水性经修饰肽(优选为酰化衍生肽，特别是其与化合物的缀合物)可用于制备用于预防和/或治疗肝疾病或病症的药物。药物组合物如上所述，本发明提供了药物组合物，其包含至少一种如本文所定义的疏水性经修饰肽和至少一种如本文所定义的待特异性地递送至肝的化合物以及任选的可药用载体和/或赋形剂。根据本发明的药物组合物包含：-至少一种如上文所定义的疏水性经修饰肽；和-任选的可药用载体和/或赋形剂。根据本发明的药物组合物非常适用于本文所述的全部用途和方法。“可药用载体和/或赋形剂”指任何载剂，可在其中或用其配制根据本发明的药物或疫苗组合物。其包括盐溶液，例如磷酸盐缓冲盐水、柠檬酸盐缓冲剂、NaCl、辛基葡萄糖苷和/或poloxamere。一般而言，基于施用方式和途径以及标准药物实践来选择稀释剂或载体。治疗方法另外，如上所述，本发明提供了通过使用本发明的上述疏水性经修饰肽或药物组合物来预防和/或治疗肝疾病或病症的方法。本发明还提供了通过向对象施用如本文所定义的缀合物来预防和/或治疗肝疾病或病症的方法，所述缀合物包含本文所定义的疏水性经修饰衍生肽和化合物(例如药物)或药物组合物。根据本发明的用于预防和/或治疗肝疾病或病症的方法，其包括向对象施用治疗有效量的：(a)如上文所定义并且包含至少一种上文所定义的化合物(例如药物)的疏水性经修饰肽，或(b)如上文所定义的药物组合物。施用途径优选地，本发明的缀合物或药物组合物的施用途径(特别是治疗方法)选自皮下、静脉内、经口、经鼻、肌内、经皮、吸入、通过栓剂。用于经鼻施用或应用的一个优选的实施方案是鼻喷雾。在另一个优选的实施方案中，将包含化合物(例如，药物)的本发明疏水性经修饰肽溶于来自患者的血清中并且通过注射施用。治疗有效量本发明的疏水性经修饰肽或药物组合物的“治疗有效量”指足以预防和/或治疗各肝疾病或病症的量。优选的治疗有效量取决于待递送的各化合物及其各自的治疗潜力。技术人员应能够确定合适的治疗有效量。在一个优选的实施方案中，治疗有效量在10pmol/kg体重至20μmol/kg体重的范围内。就用作治疗剂(即，药物与疏水性经修饰肽相偶联)而言，待施用于患者的优选量在100nmol/kg体重至2μmol/kg体重的范围内。本发明的优选的疏水性经修饰肽在下文中，给出了本发明的优选的疏水性经修饰肽。这些疏水性经修饰肽基于氨基酸序列KKKNLSTSNPLGFFPDHQLPD(SEQIDNO.14)或KKKNLSTSNPLGFFPDHQLDP(SEQIDNO.15)，其中一个或两个N端赖氨酸(K)可缺失或者被另一个氨基酸所替换。一个示例性疏水性经修饰肽具有以下化学结构：具有上述示例性化学结构的化合物的氨基酸序列为：硬脂酰基-K(伯氨喹)][K(伯氨喹)][K伯氨喹)]-NLSTSNPLGFFPDHQLDP，其中三个N端赖氨酸(KKK)各自与一个伯氨喹分子相偶联，并且第一个N端赖氨酸还被疏水性硬脂酰基修饰。在该连接中，应注意，本发明的疏水性经修饰肽的式在本文中简化，使得还可将上述示例性疏水性经修饰肽称为“硬脂酰基-[K(伯氨喹)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP”。另一示例性的优选的疏水性经修饰肽具有以下化学结构：硬脂酰基-[K-多柔比星]-NLSTSNPLGFFPDHQLDP(HBVpreS/myr-[K-多柔比星]3-20)。另一个优选的示例性疏水性经修饰肽具有以下化学结构：肉豆蔻酰基-[K-左氧氟沙星]-NLSTSNPLGFFPDHQLDP(HBVpreS/myr-[K-左氧氟沙星]3-20)。在下文中，给出了本发明的优选的疏水性经修饰肽以及其在治疗和/或预防肝疾病或病症中的优选的特定用途：-硬脂酰基-[K(伯氨喹)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP和硬脂酰基-[K(GCHAK-伯氨喹)]-NLSTSNPLGFFPDHQLDP优选地用于治疗疟疾(尤其是间日疟)的肝阶段；-肉豆蔻酰基-[K(多柔比星)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP和肉豆蔻酰基-[K(GCHAK-多柔比星)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP优选地用于治疗肝中MMP7过表达瘤性改变；-肉豆蔻酰基-[K(青霉素)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP和肉豆蔻酰基-[K(GCHAK-青霉素)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP优选地用于治疗肝中细菌感染；-肉豆蔻酰基-[K(环孢素)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP和肉豆蔻酰基-[K(GCHAK-环孢素)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP优选地用于治疗肝移植之前和肝移植之后的患者；-肉豆蔻酰基-[K(雷帕鸣TM)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP和肉豆蔻酰基-[K(GCHAK-雷帕鸣TM)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP优选地用于治疗肝移植之前和肝移植之后的患者；-硬脂酰基-[K(RPLALWRS-万珂TM)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP优选地用于抑制肝的瘤性改变中的血管形成；-硬脂酰基-[K(多吉美TM)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP和硬脂酰基-[K(RPLALWRS-多吉美TM)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP优选地用于抑制肝的瘤性改变中的血管形成；以及-硬脂酰基-[K(噻唑烷二酮)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP优选地用于治疗脂肪变性、2型糖尿病和抑制血管形成；-硬脂酰基-[K(伯氨喹)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLPD和硬脂酰基-[K(GCHAK-伯氨喹)]-NLSTSNPLGFFPDHQLPD优选地用于治疗疟疾(尤其是间日虐)的肝阶段；-肉豆蔻酰基-[K(多柔比星)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLPD和肉豆蔻酰基-[K(GCHAK-多柔比星)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLPD优选地用于治疗肝中MMP7过表达瘤性改变；-肉豆蔻酰基-[K(青霉素)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLPD和肉豆蔻酰基-[K(GCHAK-青霉素)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLPD优选地用于治疗肝中的细菌感染；-肉豆蔻酰基-[K(环孢素)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLPD和肉豆蔻酰基-[K(GCHAK-环孢素)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLPD优选地用于治疗肝移植之前和肝移植之后的患者；-肉豆蔻酰基-[K(雷帕鸣TM)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLPD和肉豆蔻酰基-[K(GCHAK-雷帕鸣TM)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLPD优选地用于治疗肝移植之前和肝移植之后的患者；-硬脂酰基-[K(RPLALWRS-万珂TM)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLPD优选地用于抑制肝的瘤性改变中的血管形成；-硬脂酰基-[K(多吉美TM)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLPD和硬脂酰基-[K(RPLALWRS-多吉美TM)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLPD优选地用于抑制肝的瘤性改变中的血管形成；-硬脂酰基-[K(噻唑烷二酮)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLPD优选地用于治疗脂肪变性、2型糖尿病和抑制血管形成；-肉豆蔻酰基-[K-多柔比星)]-NLSTSNPLGFFPDHQLDP优选地用于治疗癌症，优选为原发性HCC(肝细胞癌)或疟疾；以及-肉豆蔻酰基-[K(左氧氟沙星)]-NLSTSNPLGFFPDHQLDP(HBVpreS/myr-[K-左氧氟沙星]3-20y)用于治疗疟疾。表1优选的疏水经修饰肽Myr指N端的十四酰化；palm指N端的棕榈酰化；硬脂酰基指N端的硬脂酰化；以下实施例和附图举例说明了本发明，但不对本发明进行限制。附图简述图1：HBV颗粒和HBVL-、M-和S-蛋白的示意图。部分双链DNA与由末端蛋白(TP)、逆转录酶(RT)和RNA酶H(RNaseH)组成的病毒聚合酶复合物共价连接。基因组由120个核心蛋白二聚体构成的二十面体壳包封。3种HBV表面蛋白L-、M-和S-嵌入ER衍生的脂质双层。L-和M-蛋白包含充当膜锚的完整S结构域。HBV部分双链DNA基因组的示意图；C＝形成病毒衣壳的核心蛋白；X＝X蛋白，具有不明确功能的多效反式活化子；P＝病毒聚合酶；这些的preS1/preS2/S组合形成了大(preS1/preS2/S)HBV表面蛋白(L蛋白)、中(preS2/S)HBV表面蛋白和小(S)HBV表面蛋白。图2：本发明的疏水性经修饰肽的通式和本发明的疏水性经修饰肽的实例的示意图。图3：本发明的疏水性经修饰肽与肝细胞表面结合的示意图。图4：带有肿瘤的大鼠的PET图像。图4A静脉注射后5分钟WAG/Rji大鼠肝中400nmol/kg硬脂酰基-[K(DOTA[68Ga])]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP-酰胺的特异性富集。图4B初始测量后24小时使用18F-FDG的复染，18F-FDG在消耗大量葡萄糖的器官中富集，在图中心脏(顶部灰色部分)和肿瘤中富集葡萄糖(在脑中富集的18F-FDG出于技术原因而未示出)。图4C两幅图像的合并表明肽的特异性仅使肝组织染色，而不使肿瘤组织染色。图5：多柔比星经修饰肽的器官分布。图6：用原代小鼠肝细胞进行细胞活力测定。图6A.将原代小鼠肝细胞与N端经修饰preS肽偶联的多柔比星(缀合物)和对照一起孵育12小时的12小时测量。图6B.将原代小鼠肝细胞与N端经修饰preS肽偶联的多柔比星(缀合物)和对照一起孵育12小时的24小时测量。图7：用HepG2细胞进行的细胞活力测定。用将HepG2细胞与N端经修饰preS肽偶联的多柔比星(缀合物)和对照一起孵育12小时的12小时测量。图8：用肉豆蔻酰基-[K-左氧氟沙星]-NLSTSNPLGFFPDHQLDPy-131I(HBVpreS/myr-[K-左氧氟沙星]3-20y-131I)注射的大鼠的PET总结图像。图8A.用HBVpreS/myr-[K-左氧氟沙星]3-20y-131I注射的大鼠在注射后0至20分钟的PET总结图像。图8B.用肉豆蔻酰基-[K-左氧氟沙星]-NLSTSNPLGFFPDHQLDPy-131I(HBVpreS/myr-[K-左氧氟沙星]3-20y-131I)注射的大鼠在注射后20至40分钟的PET总结图像。图8C.用肉豆蔻酰基-[K-左氧氟沙星]-NLSTSNPLGFFPDHQLDPy-131I(HBVpreS/myr-[K-左氧氟沙星]3-20y-131I)注射的大鼠在注射后40至60分钟的PET总结图像。图8D.用肉豆蔻酰基-[K-左氧氟沙星]-NLSTSNPLGFFPDHQLDPy-131I(HBVpreS/myr-[K-左氧氟沙星]3-20y-131I)注射的大鼠在注射后6小时测量10分钟的PET总结图像。实施例在下文的实施例1和2中，使用携带Gd作为标记的与DOTA(硬脂酰-[K(DOTA[Gd])]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP-酰胺复合的疏水性肽来说明本发明的工作原理。实施例1疏水性经修饰肽的合成通过使用如(10)Gripon，P.等.JVirol79，1613-1622(2005)中所述的Fmoc方法实施肽合成。合成DOTA-DFP将二异丙基碳二亚胺(5mmol，631mg，774μl)溶于吡啶(15ml)中并经10分钟滴加至DOTA(5mmol，2.02g)和二氟酚(5mmol，650mg)的水溶液(60ml)中，同时进行搅拌。添加后30分钟，用二氯甲烷将反应混合物萃取3次，并且通过使用旋转蒸发器将水相蒸发至干。将粗产物溶于水(11ml)和乙腈(3ml)的混合物中，通过制备型RP-HPLC纯化。通过冷冻干燥浓缩包含产物的HPLC级分。产量：1.0633g(41％)。与肽偶联将肽硬脂酰基-KKKNLSTSNPLGFFPDHQLDP-酰胺(140mg，0.055mmol)溶于5mlDMF中。添加DOTA-DFP(129mg，0.25mmol)，再添加DIPEA(410μl，2.5mmol)。将混合物在50℃下搅拌过夜。添加乙醚直到沉淀；通过使用离心使沉淀分离并用乙醚洗涤两次。通过使用RP-HPLC纯化粗产物。通过使用水和乙腈(二者均包含0.1％三氟乙酸)的梯度进行纯化。通过冷冻干燥浓缩包含产物的HPLC级分。产量：112mg(55％)。Gd3+的复合将肽硬脂酰基-[K(DOTA)]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP-酰胺(112mg，0.030mmol)溶于0.4M乙酸钠缓冲液(pH5)中并添加GdCl3*6H2O(335mg，0.90mmol)。将混合物在水浴中加热1小时同时进行搅拌。通过使用RP-HPLC纯化所得的产物混合物。通过使用水和乙腈(二者均包含0.1％三氟乙酸)的梯度进行纯化。通过冷冻干燥浓缩包含产物(硬脂酰-[K(DOTA[Gd])]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP-酰胺)的HPLC级分。产量：94mg(77％)。实施例2PET成像将肽硬脂酰基-[K(DOTA[68Ga])]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP-酰胺溶于柠檬酸盐缓冲剂(pH8.0)+4％BSA中，并i.v.注射到带有肿瘤的WAG/Rij大鼠的尾静脉中。在测量前10天用1×106同系结肠癌细胞(CC531细胞)orthopically注射大鼠。在测量当天，大鼠接受浓度为400nmol/kg体重的肽。在实验过程中，用异氟烷麻醉大鼠并保持在37℃。使用来自Siemens的Inveon小动物PET进行PET成像，使用硬脂酰-[K(DOTA[68Ga])]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP-酰胺初始测量后24小时进行i.v.注射肽，之后立即开始成像，用浓度为5毫居里的18F-FDG(氟脱氧葡萄糖(18F)注射大鼠作为对照。图4A～C示出了带有肿瘤的大鼠的代表性PET图像。图4A在i.v.注射后5分钟，400nmol/kg硬脂酰基-[K(DOTA[68Ga])]3-NLSTSNPLGFFPDHQLDP-酰胺在WAG/Rji大鼠肝中的特异性富集。图4B：初始测量后24小时使用18F-FDG进行的复染，18F-FDG在消耗大量葡萄糖的器官中富集，在图中心脏(顶部灰色部分)和肿瘤中富集葡萄糖(在脑中富集的18F-FDG出于技术原因未示出)。图4C两幅图像的合并表明肽的特异性仅使肝组织染色，而非肿瘤组织。实施例3与多柔比星偶联的N端经修饰preS肽的肝特异性和细胞毒性的测试如本文所述合成与多柔比星偶联的肽。简言之，使用FMOC保护的固相肽合成来合成肽骨架(KNLSTSNPLGFFPDHQLDPy)，然后使用酰胺形成使多柔比星与肽骨架相偶联。肽骨架中的“y”代表131碘可以与之偶联从而作为用于检测大鼠中之经修饰肽的标记的D-酪氨酸。通过HPLC纯化所得肽并通过质谱分析纯度。所得肽的纯的为97％或更高。经修饰肽的图示如下所示：肉豆蔻酰基-[K-多柔比星]-NLSISNPLGFFPDHQLDPy-酰胺(HBVpreS/myr-[K-多柔比星]3-20y)为了显示所得合成肽仍然是肝特异性的，使用如(Eisenhut和Mier，2011；36)中所述的氯胺T法用放射性的131碘标记上文图示肽的C端。酪氨酸特异性碘标记：将10μl的1mM肽溶液(溶于水中)添加到20μl的磷酸盐缓冲液中。根据需要将不同量的放射性Na131I溶液添加到肽溶液中以实现完全标记，量基于放射性Na131I溶液的放置时间而不同。本领域技术人员可通过测量放射性活性(计数)来控制所需量。然后，添加5μl的氯胺-T溶液(2mg/ml在水中)，搅拌所得溶液(5次)并离心(8000g，30s，5次)。随后，添加10μl的饱和甲硫氨酸溶液，小心翻转小瓶以混合。然后，使用RP-HPLC纯化所得溶液。收集肽级分并在真空中干燥。然后，可以将冻干的经标记肽溶于期望的实验缓冲液中并用于下游实验。然后，将放射性标记肽溶于PBS+3％BSA中，加热至37℃并注入WAG/RJ大鼠的尾静脉中。然后，在指定时间点将动物安乐死(图5)，移植器官并使用γ计数器测量。每个时间测量四只动物。图5通过将每个器官所测量的平均放射表示为注射剂量的百分比来示出经多柔比星修饰肽的器官分布。如图5所示，用多柔比星进行HBVpreS肽的N端修饰未削弱肝趋向性。接着，分析经修饰多柔比星是否仍对细胞具有细胞毒性。在该实验中，将如Galle等，(1994)(37)所述的从C57BL/6小鼠分离的原代小鼠肝细胞孵育并再接种于96孔平底板中以形成汇合的细胞层。接种后24小时，用合成肽(缀合物)、多柔比星的无活性的合成中间体、单独的多柔比星孵育细胞，以及使用未添加多柔比星的未经修饰肽(Cold肽)作为额外的对照将细胞预孵育30分钟，接着使用指定浓度的合成肽(缀合物)进行孵育(图6A和6B)。然后，分别将细胞孵育12小时(图6A)或24小时(图6B)。孵育之后，按照制造商的说明书所示进行MTT测定(细胞增殖试剂盒，RocheMannheimGermany)以确定剩余细胞活力。结果示于图6A和6B(细胞活力测定)中。图6a(12小时测量)：将原代小鼠肝细胞与单独的多柔比星、与如上所示的N端经修饰preS肽偶联的多柔比星(缀合物)或多柔比星的无活性合成中间体一起孵育12小时。用未经修饰的preS肽(Cold肽)预孵育30分钟，接着用作为受体特异性相互作用对照的缀合物进行孵育。图6b(24小时测量)将原代小鼠肝细胞与单独的多柔比星、与如上所示的N端经修饰preS肽(缀合物)或多柔比星的无活性合成中间体一起孵育12小时。用未经修饰的preS肽(Cold肽)预孵育30分钟，接着用作为受体特异性相互作用对照的缀合物进行孵育。将原代小鼠肝细胞与单独的多柔比星或肉豆蔻酰基-[K-多柔比星]-NLSTSNPLGFFPDHQLDPy-酰胺(HBVpreS/myr-[K-多柔比星]3-20y)肽一起孵育12小时和24小时之后示出显著的细胞毒性作用。用偶联反应的无活性合成中间体孵育未示出任何毒性。此外，在用肉豆蔻酰基-[K-多柔比星]-NLSTSNPLGFFPDHQLDPy-酰胺(HBVpreS/myr-[K-多柔比星]3-20y)处理细胞之前，通过用未经修饰的preS肽预孵育30分钟阻断肽特异性受体完全消除了经修饰肽的细胞毒性作用。作为额外的对照，在与如上所述相同的条件下将HepG2细胞孵育12小时。HepG2细胞不表达特异性肽受体。出于该原因，如果所观察到的作用是肽和受体特异性的话，HepG2细胞不应受所观察到的肉豆蔻酰基-[K-多柔比星]-NLSTSNPLGFFPDHQLDPy-酰胺(HBVpreS/myr-[K-多柔比星]3-20y)肽的细胞毒性作用影响。该实验的结果示于图7中。图7(12小时测量)：将HepG2细胞与单独的多柔比星、与如上所示N端经修饰preS肽偶联的多柔比星(缀合物)、或多柔比星的无活性合成中间体一起孵育12小时。用未经修饰的preS肽(Cold肽；C.肽)预孵育30分钟，接着用作为受体特异性相互作用对照的缀合物进行孵育。如图7所示，肉豆蔻酰基-[K-多柔比星]-NLSTSNPLGFFPDHQLDPy-酰胺(HBVpreS/myr-[K-多柔比星]3-20y)肽对不表达肽特异性受体的细胞未示出细胞毒性活性，但单独的多柔比星在孵育12小时之后仍示出显著的细胞毒性。实施例4用于治疗肝阶段疟疾的与左氧氟沙星偶联的N端经修饰HBVpreS肽的肝特异性如本文所述合成与左氧氟沙星偶联的肽。简言之，使用FMOC保护的固相肽合成来合成肽骨架(KNLSTSNPLGFFPDHQLDP)，然后使用酰胺形成将左氧氟沙星与肽骨架相偶联。通过HPLC纯化所得肽并通过质谱分析纯度。所得肽的纯度为95％或更高。经修饰肽的图示如下所示：肉豆蔻酰基-[K-左氧氟沙星]-NLSTSNPLGFFPDHQLDPy-酰胺(HBVpreS/myr-[K-左氧氟沙星]3-20y)为了显示所得合成肽仍然是肝特异性的，使用如上文所述和(36)中所述的氯胺T法用放射性的131碘标记上文图示肽的C端。然后，将放射性标记肽溶于PBS+3％BSA中，加热至37℃并注射入WAG/RJ大鼠的尾静脉中。然后，使用异氟烷将动物安乐死并使用小动物PET扫描仪监测肽分布。在指定时间点获取图像以监测动物中的肽分布。图像8A至8D是覆盖指定时间点的总结图像：图8A.用肉豆蔻酰基-[K-左氧氟沙星]-NLSTSNPLGFFPDHQLDPy-131I(HBVpreS/myr-[K-左氧氟沙星]3-20y-131I)注射的大鼠在注射后0至20分钟的PET总结图像。全部放射的几乎100％见于肝中。图8B.用肉豆蔻酰基-[K-左氧氟沙星]-NLSTSNPLGFFPDHQLDPy-131I(HBVpreS/myr-[K-左氧氟沙星]3-20y-131I)注射的大鼠在注射后20至40分钟的PET总结图像。全部放射的几乎100％见于肝中。图8C.用肉豆蔻酰基-[K-左氧氟沙星]-NLSTSNPLGFFPDHQLDPy-131I(HBVpreS/myr-[K-左氧氟沙星]3-20y-131I)注射的大鼠在注射后40至60分钟的PET总结图像。大多数放射见于肝中，在肠和膀胱中观察到中度富集。图8D.用肉豆蔻酰基-[K-左氧氟沙星]-NLSTSNPLGFFPDHQLDPy-131I(HBVpreS/myr-[K-左氧氟沙星]3-20y-131I)注射的大鼠在注射后6小时测量10分钟的PET总结图像。大多数放射仍见于肝中，但可观察到肠和膀胱中放射的明显累积。这些实验表明肉豆蔻酰基-[K-左氧氟沙星]-NLSTSNPLGFFPDHQLDPy-131I(HBVpreS/myr-[K-左氧氟沙星]3-20y-131I)肽特异性地在WAG/RJ大鼠的肝中富集，其中他们被肝细胞摄取并且在注射后6小时动物的内脏和膀胱中可见痕量的放射性。前述描述、权利要求书和/或附图中所公开的特征可分开地和以其任意组合作为用于以其不同形式实现本发明的材料。参考文献1.Seeger，C.&Mason，W.S.HepatitisBvirusbiology.MicrobiolMoIBiolRev64，51-68(2000).2.Nassal，M.HepatitisBvirusmorphogenesis.CurrTopMicrobiolImmunol214，297-337(1996).3.Gripon，P.，LeSeyec，J.，Rumin，S.&Guguen-Guillouzo，C.MyristylationofthehepatitisBviruslargesurfaceproteinisessentialforviralinfectivity.Virology213，292-299(1995).4.LeSeyec，J.，Chouteau，P.，Cannie，L，Guguen-Guillouzo，C.&Gripon，P.InfectionprocessofthehepatitisBvirusdependsonthepresenceofadefinedsequenceinthepre-S1domain.JVirol73，2052-2057(1999).5.JulianoRL(1988)Factorsaffectingtheclearancekineticsandtissuedistributionofliposomes，microspheres，andemulsions.AdvDrugDelivRev2：31-54.6.HashidaMandTakakuraY(1994)Pharmacokineticsindesignofpolymericdrugdeliverysystems.JControlRelease31：163-171.7.Lu，X.M.，Fischman，A.J.，Jyawook，S.L.，Hendricks，K.，Tompkins，R.G.andYarmush，M.L.(1994)AntisenseDNAdeliveryinvivo：livertargetingbyreceptor-mediateduptake.J.Nucl.Med.35，269-275.8.KasuyaT，KurodaS.Nanoparticlesforhumanliver-specificdrugandgenedeliverysystems：invitroandinvivoadvances.ExpertOpinDrugDeliv.2009Jan；6(1)：39-52.Review.PubMedPMID：19236207.9.YamadaT，IwasakiY，TadaH，IwabukiH，ChuahMK，VandenDriesscheT，FukudaH，KondoA，UedaM，SenoM，TanizawaK，KufodaS.Nanoparticlesforthedeliveryofgenesanddrugstohumanhepatocytes.NatBiotechnol.2003Aug；21(8)：885-90.Epub2003Jun29.PubMedPMID：1283307110.Gripon，P.，Cannie，I.&Urban，S.EfficientinhibitionofhepatitisBvirusinfectionbyacylatedpeptidesderivedfromthelargeviralsurfaceprotein.JVirol79，1613-1622(2005).11.Chen，K.F.，H.C.Yu，etal.(2010).″SynergisticinteractionsbetweensorafenibandbortezomibinhepatocellularcarcinomainvolvePP2A-dependentAktinactivation.″JHepatol52(1)：88-95.12.Czauderna，P.，G.Mackinlay，etal.(2002).″Hepatocellularcarcinomainchildren：resultsofthefirstprospectivestudyoftheInternationalSocietyofPediatricOncologygroup.″JClinOncol20(12)：2798-2804.13.Javle，M.andC.T.Hsueh(2009).″UpdatesinGastrointestinalOncology-insightsfromthe200844thannualmeetingoftheAmericanSocietyofClinicalOncology.″JHematolOncol2：9.14.Lee，J.，J.O.Park，etal.(2004).″PhaseIIstudyofdoxorubicinandcisplatininpatientswithmetastatichepatocellularcarcinoma.″CancerChemotherPharmacol54(5)：385-390.15.Mendelsohn，J.andJ.Baselga(2000).″TheEGFreceptorfamilyastargetsforcancertherapy.″Oncogene19(56)：6550-6565.16.Patt，Y.Z.，M.M.Hassan，etal.(2003).″PhaseIItrialofsystemiccontinuousfluorouracilandsubcutaneousrecombinantinterferonAlfa-2bfortreatmentofhepatocellularcarcinoma.″JClinOncol21(3)：421-427.17.Richly，H.，B.Schultheis，etal.(2009).″Combinationofsorafenibanddoxorubicininpatientswithadvancedhepatocellularcarcinoma：resultsfromaphaseIextensiontrial.″EurJCancer45(4)：579-587.18.Falcone，A.，S.Ricci，etal.(2007).″PhaseIIItrialofinfusionalfluorouracil，leucovorin，oxaliplatin，andirinotecan(FOLFOXIRI)comparedwithinfusionalfluorouracil，leucovorin，andirinotecan(FOLFIRI)asfirst-linetreatmentformetastaticcolorectalcancer：theGruppoOncologicoNordOvest.″JClinOncol25(13)：1670-1676.19.Javle，M.andC.T.Hsueh(2009).″UpdatesinGastrointestinalOncology-insightsfromthe200844thannualmeetingoftheAmericanSocietyofClinicalOncology.″JHematolOncol2：9.20.Sagar，J.，K.Sales，etal.(2010).″Loweringtheapoptoticthresholdincolorectalcancercellsbytargetingmitochondria.″CancerCellInt10：31.21.Seymour，M.T.，T.S.Maughan，etal.(2007).″Differentstrategiesofsequentialandcombinationchemotherapyforpatientswithpoorprognosisadvancedcolorectalcancer(MRCFOCUS)：arandomisedcontrolledtrial.″Lancet370(9582)：143-152.22.Tournigand，C.，T.Andre，etal.(2004).″FOLFIRIfollowedbyFOLFOX6orthereversesequenceinadvancedcolorectalcancer：arandomizedGERCORstudy.″JClinOncol22(2)：229-237.23.Kappe，S.H.，A.M.Vaughan，etal.(2010).″Thatwasthenbutthisisnow：malariaresearchinthetimeofaneradicationagenda.″Science328(5980)：862-866.24.Goodman，C.D.，V.Su，etal.(2007).″Theeffectsofanti-bacterialsonthemalariaparasitePlasmodiumfalciparum.″MolBiochemParasitol152(2)：181-191.24.25.Zeuzem，S.(2004).″Heterogeneousvirologicresponseratestointerferon-basedtherapyinpatientswithchronichepatitisC：whorespondslesswell？″AnnInternMed140(5)：370-381.26.McHutchison，J.G.，G.T.Everson，etal.(2009).″TelaprevirwithpeginterferonandribavirinforchronicHCVgenotype1infection.″NEnglJMed360(18)：1827-1838.27.Nelson，DR，Ghalib，RH，Sulkowski，M，etal.EfficacyandsafetyofthecyclophilininhibitorDebio025incombinationwithpegylatedinterferonalpha-2aandribavirininpreviouslynull-respondergenotype1HCVpatients.Presentedatthe44thAnnualMeetingoftheEuropeanAssociationfortheStudyoftheLiver，Copenhagen，Denmark；April22-26，2009；abstract#9528.(2009).″EASLClinicalPracticeGuidelines：managementofchronichepatitisB.″JHepatol50(2)：227-242.29.Liaw，Y.F.，N.Leung，etal.(2005).″Asian-PacificconsensusstatementonthemanagementofchronichepatitisB：a2005update.″LiverInt25(3)：472-489.30.Lok，A.S.andB.J.McMahon(2009).″ChronichepatitisB：update2009.″Hepatology50(3)：661-662.31.Meng，S.，B.Wei，etal.(2009).″TATpeptidesmediatedsmallinterferingRNAdeliverytoHuh-7cellsandefficientlyinhibitedhepatitisCvirusRNAreplication.″Intervirology52(3)：135-140.32.deKoning，M.C.，G.A.vanderMarel，etal.(2003).″SyntheticdevelopmentstowardsPNA-peptideconjugates.″CurrOpinChemBiol7(6)：734-740.33.Zatsepin，T.S.，J.J.Turner，etal.(2005).″Conjugatesofoligonucleotidesandanalogueswithcellpenetratingpeptidesasgenesilencingagents.″CurrPharmDes11(28)：3639-3654.34.Kornhuber，J.，P.Tripal，etal.(2008).″Identificationofnewfunctionalinhibitorsofacidsphingomyelinaseusingastructure-property-activityrelationmodel.″JMedChem51(2)：219-237.35.Gastaminza，P.，C.Whitten-Bauer，etal.(2010).″UnbiasedprobingoftheentirehepatitisCviruslifecycleidentifiesclinicalcompoundsthattargetmultipleaspectsoftheinfection.″ProcNatlAcadSciUSA107(1)：291-296.36.Eisenhut，M.andW.Mier(2011).RadioiodinationChemistryandRadioiodinatedCompoundsHandbookofNuclearChemistry.A.Vértes，S.Nagy，Z.Klencsár，R.G.LovasandF.SpringerUS：2121-2141.37.Galle，P.R.，Hagelstein，J.，Kommerell，B.，Volkmann，M.，Schranz，P.，andZentgraf，H.，Gastroenterology106：664-673(1994).38.FriedmanR，CaflischA.Discoveryofplasmepsininhibitorsbyfragment-baseddockingandconsensusscoring.ChemMedChem.2009Aug；4(8)：1317-26.PubMedPMID：19472268.39.GamoFJ，SanzLM，VidalJ，deCozarC，AlvarezE，LavanderaJL，VanderwallDE，GreenDV，KumarV，HasanS，BrownJR，PeishoffCE，CardonLR，Garcia-BustosJF.Thousandsofchemicalstartingpointsforantimalarialleadidentification.Nature.2010May20；465(7296)：305-10.PubMedPMID：2048542740.FriesenJ，SilvieO，PutriantiED，HafallaJC，MatuschewskiK，BorrmannS.Naturalimmunizationagainstmalaria：causalprophylaxiswithantibiotics.SciTranslMed.2010Jul14；2(40)：40ra49.PubMedPMID：20630856.