硫酸化糖胺聚糖与透明质酸酶组合用于改善因子viii的生物利用度的制作方法
【专利摘要】本发明涉及包含因子VIII、硫酸化的糖胺聚糖和透明质酸酶的用于在出血障碍的治疗性和预防性治疗中非静脉内施用的药物制剂。本发明还涉及因子VIII、硫酸化糖胺聚糖和透明质酸酶组合用于治疗或预防出血障碍的用途，以及用于在通过共施用硫酸化糖胺聚糖和透明质酸酶进行因子VIII的非静脉内施用后增加生物利用度的方法。
【专利说明】硫酸化糖胺聚糖与透明质酸酶组合用于改善因子Vl I I的生物利用度
[0001]本发明涉及包含至少一种因子VII1、至少一种硫酸化糖胺聚糖和至少一种透明质酸酶药物制剂，其用于出血障碍的治疗性和预防性治疗中的非静脉内施用。本发明还涉及因子VII1、硫酸化糖胺聚糖和透明质酸酶组合用于治疗和预防出血障碍的用途，以及用于在通过共施用硫酸化糖胺聚糖和透明质酸酶进行因子VIII的非静脉内施用后增加生物利用度的方法。
[0002]发明背景
[0003]因子VIII (FVIII)
[0004]FVIII是哺乳动物肝脏中产生的分子量约280kDa的血浆糖蛋白。其为导致血液凝固的凝血反应级联的至关重要的组分。该级联中有一个其中因子IXa(FIXa)与活化的因子VlII(FVIIIa) 一起将因子X(FX)转化成活化形式FXa的步骤。FVIIIa在该步骤中充当辅因子，其与钙离子和磷脂一起是使FIXa的活性最大化所需要的。最常见的血友病障碍是由被称为血友病A的功能性FVIII缺乏而引起的。
[0005]血友病A的治疗中的一项重要进展是分离到编码人FVIII的完整2，351个氨基酸的序列的cDNA克隆(美国专利N0.4，757，006)以及提供了人FVIII基因DNA序列和其重
组生产方法。
[0006]从克隆的cDNA确定的人FVIII的推导一级氨基酸序列的分析表明，其为从更大的前体多肽加工而成的异二聚体。该异二聚体由约80kDa的C末端轻链以及以金属离子依赖性方式相缔合的约200kDa N末端重链组成。(参见Kaufman, Transfusion Med.Revs.6:235(1992)的综述)。该异二聚体的生理活化通过凝血酶对其蛋白质链的蛋白水解切割发生。凝血酶将重链切割成90kDa的蛋白质，随后将其切割成54kDa和44kDa的片段。凝血酶还将80kDa的轻链切割成72k`Da的蛋白质。正是后一种蛋白质和通过钙离子保持在一起的两个重链片段(上述54kDa和44kDa)构成了活性FVIII。当44kDa A2重链片段从该分子上解离下来时或当72kDa和54kDa结构域被凝血酶、活化的蛋白C或FXa进一步切割时，发生失活。在血浆中，FVIII通过与50倍摩尔浓度过量的Von Willebrand因子蛋白(〃VWF〃)缔合而得以稳定，所述因子蛋白似乎抑制上述FVIII的蛋白水解破坏。
[0007]FVIII的氨基酸序列被组织成3个结构性结构域:三重330个氨基酸的A结构域、单个980个氨基酸的B结构域和二重150个氨基酸的C结构域。B结构域与其它蛋白质不具有同源性，并且提供该蛋白质的25个潜在天冬酰胺(N)-连接糖基化位点中的18个。B结构域似乎在凝血中不具有功能，并且可被缺失，该B结构域被缺失的FVIII分子仍然具有促凝血活性。
[0008]Von Willebrand 因子(VWF)
[0009]VWF是存在于哺乳动物血浆中的多聚粘着糖蛋白，其具有多个生理功能。在主要的止血过程中，VWF充当血小板表面上的特异性受体与细胞外基质的组分例如胶原之间的介质。此外，VWF还充当促凝血因子FVIII的载体和稳定化蛋白。VWF在内皮细胞和巨核细胞中被合成为2813个氨基酸的前体分子。前体多肽(前VWF原)由22个残基的信号肽、741个残基的前肽和在成熟血浆VWF中发现的2050个残基的多肽组成(Fischer等人，FEBSLett.351:345-348, 1994)。在分泌进入血浆后，VWF以具有不同分子大小的不同种类的形式循环。这些VWF分子由具有2050个氨基酸残基的成熟亚基的寡聚体和多聚体组成。VWF通常可作为一个二聚体至由50 - 100个二聚体组成的多聚体形式发现于血浆中(Ruggeri等人，Thromb.Haemost.82:576-584，1999)。在人循环中人VWF的体内半衰期约为12小时。
[0010]人中最常见的遗传性出血障碍是维勒布兰德病(VWD)。取决于出血症状的严重度，VWD可通过利用含VWF (通常地来源于人血浆，但重组VWF也在开发中)的浓缩物的替代疗法来治疗。可从人血浆制备VWF，如例如EP0503991中描述的。在专利EP0784632中描述了分离重组VWF的方法。
[0011]已知VWF体内稳定FVIII，从而起着调节FVIII的血浆水平的关键作用，因此是控制原发性和继发性止血的中心因子。还已知在于VWD患者中静脉内施用含VWF的药物制剂后，可观察到在24小时内内源性FVIII = C达到I至3个单位/ml的增加，这表明VWF对FVIII的体内稳定作用。[0012]患者总的来说受益于活性成分的特定作用模式，但目前所有商购可得的因子VIII制剂是通过静脉内施用来给药的，这牵涉注射部位感染的风险并且通常是患者希望避免的过程，尤其是在治疗凝血系统中具有缺陷的儿童中。
[0013]直至今天，血友病A和VWD的标准治疗包括FVIII和VWF浓缩物的制剂的频繁静脉内输注。
[0014]这些替代疗法通常是有效的，然而，例如在经历预防性治疗的严重血友病A患者中，因因子VIII约12小时的短暂血浆半衰期的原因，必须每周约3次地静脉内(1.V.)施用因子VIII。通过使FVIII水平高于正常人血浆1% (对应于FVIII水平升高0.01U/ml)，已经将严重的血友病A转变成中度血友病A。在预防性治疗中，给药方案被设计成使FVIII活性的谷底水平不降至非血友病患者中FVIII活性的2-3%以下的水平。
[0015]通过静脉内施用进行的因子VIII给药是非常麻烦的，其伴随着疼痛并且具有造成感染的风险，特别是这主要是患者自己或由诊断为血友病A的儿童的父母在家治疗中进行这一操作。此外,频繁的静脉内注射不可避免地导致瘢痕形成,干扰将来的输注。由于严重血友病的预防性治疗始于生命的早期，儿童通常在2岁以前开始，因此甚至难以将FVIII每周3次地注射进入这样小的患者的静脉。在有限的时期内，端口系统的植入可提供另一选择。然而，在这些情况下，重复感染可能会发生，并且端口可在体育运动中引起不便。
[0016]因此，存在对避免静脉内输注因子VIII的巨大医学需要。
[0017]皮下施用在例如W095/01804A1和W095/026750中已被建议用于因子VIII。然而，必须施用极高剂量的因子VIII才能获得可接受的生物利用度。
[0018]提高非静脉内施用的生物利用度的另一个方法是使用白蛋白融合的因子VIII(W02011/020866A2)。
[0019]W02010/077297A1和W02010/077297A1教导了将透明质酸酶用作扩散或分散剂来
促进、增强或增加大量试剂、药物和蛋白质的分散和递送，从而改善共施用药剂、药物或蛋白质的药代动力学和药效特征。
[0020]高度期望改善非静脉内施用后因子VIII的生物利用度。本申请的发明人令人惊讶地发现，如果将因子VIII与硫酸化糖胺聚糖和透明质酸酶一起组合施用，则可显著增加因子VIII的生物利用度。
[0021]发明概述
[0022]在第一方面，本发明涉及包含至少一种因子VII1、至少一种硫酸化糖胺聚糖和至少一种透明质酸酶的药物制剂。
[0023]在本发明第一方面的一个优选实施方案中，所述药物制剂包含因子VII1、至少一种硫酸化糖胺聚糖(例如肝素)和至少一种透明质酸酶。更优选地，所述药物制剂包含人因子VII1、未分级分离的肝素和人透明质酸酶。可以将或可以不将因子VIII与VWF复合。
[0024]在第二方面，本发明涉及用于治疗或预防出血障碍的因子VIII，其中所述治疗或预防包括施用至少一种硫酸化糖胺聚糖和至少一种透明质酸酶。在第二方面的一种变型中，本发明涉及用于治疗或预防出血障碍的因子VII1、硫酸化糖胺聚糖和透明质酸酶。
[0025]本发明第二方面的一个优选实施方案是用于治疗或预防出血障碍的因子VIII，其中所述治疗或预防包括施用至少一种硫酸化糖胺聚糖和至少一种透明质酸酶。更优选地，治疗或预防包括施用因子VII1、肝素(例如未分级分离的肝素)和人透明质酸酶。可以将或可以不将因子VIII与VWF复合。
[0026]进一步优选所述出血障碍是血友病A，并且治疗或预防包括药剂的非静脉内施用，最优选通过皮下、肌内或皮内注射。
[0027]本发明的第三方面是至少一种硫酸化糖胺聚糖与至少一种透明质酸酶组合用于提高一种或多种因子VIII的生物利用度。第三方面的一些优选实施方案对应于在细节上做必要修正的第一和第二方面的优选实施方案。
[0028]本发明的第四方面是通过给有此需要的受试者施用治疗有效量的至少一种因子VII1、至少一种硫酸化糖胺聚糖和至少一种透明质酸酶来治疗出血障碍的方法。可以例如通过混合在单一组合物中来同时施用因子VII1、硫酸化糖胺聚糖和透明质酸酶。或者，可分开地施用一个组分，同时将另外两种组分同时施用。在另一个实施方案中，可以例如以时间上错开的方式分开地施用全部三种组分。
[0029]在另一个方面，本发明涉及包括至少一种因子VII1、至少一种硫酸化糖胺聚糖和至少一种透明质酸酶的药物试剂盒。
[0030]在本发明的所有方面，因子VIII优选是人因子VIII。优选硫酸化糖胺聚糖是肝素，最优选未分级分离的肝素。
[0031]附图概述
[0032]图1描述了实施例1的结果。如将硫酸化糖胺聚糖与透明质酸酶共施用，则可增加FVIII的生物利用度。组合施用对因子VIII的生物利用度的作用是协同性的。
[0033]详述
[0034]本发明涉及出血障碍的治疗和预防。
[0035]如本文中所用，术语“出血障碍”包括家族性和获得性血友病A。
[0036]根据本发明的第一方面，提供了包含至少一种因子VII1、至少一种硫酸化糖胺聚糖和至少一种透明质酸酶的药物制剂。
[0037]因子VIII可以是野生型因子VIII或可包含突变。取决于选择的宿主细胞和宿主细胞环境的性质，糖基化或其它翻译后修饰的程度和位置可变化。当提及特定氨基酸序列时，这样的序列的翻译后修饰包括在本申请中。[0038]术语〃血液凝固因子VIII"、〃因子VIir和〃FVIII〃在本文中可互换使用。“因子VIII”包括野生型因子VIII以及具有野生型因子VIII的促凝活性的野生型因子VIII衍生物。衍生物相较于野生型因子VIII的氨基酸序列而言可具有缺失、插入和/或添加。术语因子VIII包括因子VIII的蛋白水解加工的形式，例如包含重链和轻链的活化前形式。
[0039]术语〃因子VIII"包括具有野生型因子VIII的生物活性的至少10%，优选至少25%，更优选至少50%，最优选至少75%的任何因子VIII变体或突变体。测定因子VIII的生物活性的适当测试是一阶段或两阶段凝血测定(Rizza等人1982.Coagulation assay ofFVII1:C and FIXa in Bloom ed.The Hemophilias.NY Churchchill Livingston 1992)或生色底物 FVII1:活性测定(S.Rosen, 1984.Scand J Haemato133:139-145，suppl.)。将这些参考资料的内容通过引用并入本文。
[0040]作为非限定性实例，因子VIII分子包括防止或减少APC切割的因子VIII突变体(Amanol998.Thromb.Haemost.79:557-563)、白蛋白融合的 FVIII 分子(W02011/020866A2)、FVII1-Fc 融合分子(W004/101740A)、进一步稳定 A2 结构域的因子VIII突变体(W097/40145)、导致表达增加的FVIII突变体(Swaroop等人1997.JBC272:24121-24124)、免疫原性降低的因子 VIII 突变体(LolIar 1999.Thromb.Haemost.82:505-508)、从不同地表达的重链和轻链重建的FVIII (Oh等人1999.Exp.Mol.Med.31:95-100)、减少对受体的结合(从而导致FVIII样HSPG (硫酸乙酰肝素蛋白聚糖)和/或LRP(低密度脂蛋白受体相关蛋白)的分解代谢)的FVIII突变体(Ananyeva 等人 2001.TCM, 11:251-257)、二硫键稳定化的 FVIII 变体(Gale 等人，2006.J.Thromb.Hemost.4:1315-1322)、具有改善的分泌性质的FVIII突变体(Miao等人，2004.Bloodl03:3412-3419)、辅因子比活性增加的 FVIII 突变体(Wakabayashi 等人，2005.Biochemistry44:10298-304)、具有改善的生物合成和分泌、降低的ER伴侣蛋白相互作用、改善的ER-Golgi转运、活化增强或对失活的抗性增强和半衰期改善的FVIII突变体(由Pipe2004.Sem.Thromb.Hemost.30:227-237概述的)，以及具有B结构域全部或部分的缺失的 FVIII 突变体(参见例如 W02004/067566A1、W002/102850A2、W000/24759A1 和美国专利N0.4，868，112)。特别优选作为“单链”FVIII分子的FVIII分子。单链FVIII具有B结构域全部或部分的缺失以及酸性a3区域全部或部分的缺失，从而缺失了 Argl648处的切割位点(其通常在分泌过程中被切割)。单链FVIII分子公开于例如W02004/067566A1 ；US2002/132306A1 ；Krishnan` 等人(1991)European Journal of Biochemistry 第 195卷,n0.3,第 637-644 页;Herlitschka 等人(1998)Journal of Biotechnology,第 61卷,n0.3,第 165-173 页;Donath 等人(1995) Biochem.J.,第 312 卷，第 49-55 卷中。
[0041]将所有这些因子VIII突变体和变体通过引用整体并入本文。
[0042]人因子VIII的成熟野生型形式的氨基酸序列示于SEQ ID N0:2中。提及特定序列的氨基酸位置时意指所述氨基酸在FVIII野生型蛋白中的位置，并且不排除在所提及的序列中其它位置处突变例如缺失、插入和/或取代的存在。例如，提及SEQ ID N0:2的〃Glu2004〃处的突变时，不排除在被修饰的同源物中，SEQ ID N0:2的位置I至2332处的一个或多个氨基酸不存在。编码SEQ ID NO:2的DNA序列示于SEQ ID NO:1中。
[0043]术语“糖胺聚糖”，如本文中所用，是指特别地包含氨基己糖单位的低聚糖或多糖。硫酸化糖胺聚糖包括但不限于硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫酸角质素、肝素和硫酸乙酰肝素。优选地，硫酸化糖胺聚糖是肝素，最优选硫酸化糖胺聚糖选自未分级分离的肝素、低分子量肝素和硫酸软骨素。
[0044]术语“肝素”包括未分级分离的肝素和具有更低分子量的肝素。在一个实施方案中，按照本发明使用的肝素是“未分级分离的肝素”，其可具有约SkDa至约30kDa，优选约IOkDa至约20kDa，最优选约12kDa至约16kDa，例如约15kDa的平均分子量。在另一个实施方案中，按照本发明使用的肝素是低分子量肝素(LMWH)。LMWH是平均分子量小于SOOODa的肝素或肝素盐，其中至少60%的所有链具有小于SOOODa的平均分子量。优选地，按照本发明使用的LMWH的分子量为约2kDa至约8kDa，更优选约3kDa至约6kDa，更优选约4kDa至约5kDa，例如约4.5kDa。LMWH可通过多聚肝素的分级分离或解聚合的各种方法来获得。LMWH的实例包括但不限于阿地肝素钠(Normiflo)、舍托肝素(Sandoparin)、依诺肝素(Lovenox和克赛)、帕肝素(Fluxum)、亭扎肝素(Innohep和洛集帕林)、达肝素(法安明)、瑞肝素(诺易平)和纳屈肝素(Fraxiparin)。
[0045]术语“肝素”还包括通过裂解和分离而衍生自天然肝素或通过合成途径产生的肝素分子的小分子量片段。已有例如合成地制造的、并且其结构来源于肝素的商购可得的硫酸化戊糖。其可以磺达肝素钠获得。
[0046]硫酸软骨素包括例如硫酸软骨素A(软骨素-4-硫酸)、硫酸软骨素C(软骨素-6-硫酸)、硫酸软骨素D (软骨素-2，6-硫酸)和硫酸软骨素E (软骨素-4，6-硫酸)。
[0047]硫酸皮肤素(先前称为硫酸软骨素B)是商购可得的另一种硫酸化糖胺聚糖。
[0048]硫酸角质素是另一种硫酸化的糖胺聚糖。硫酸角质素的结构描述于例如Funderburgh (2000)Glycobiology 第 10 卷 n0.10 第 951-958 页。
[0049]硫酸乙 酰肝素是与肝素不同的N-硫酸化多糖(参见，例如，Gallagher, J.T., Lyon, Μ.(2000)."Molecular structure of Heparan Sulfate and interactions withgrowth factors and morphogens〃.1n 1zzo, Μ, V..Proteoglycans: structure, biologyand molecular interactions.Marcel Dekker Inc.New York, New York.第 27 - 59 页；和Gallagher, J.T.Walker, A.(1985)."Molecular distinctions between Heparan Sulphateand Heparin:Analysis of sulphation patterns indicates Heparan Sulphate and 月干素are separate families of N-sulphated polysaccharides^.Biochem.J.230(3):665 -74)。
[0050]术语“透明质酸酶”是指具有透明质酸葡糖醛酸酶活性、透明质酸葡糖胺酶活性或透明质酸裂解酶活性的任何多肽。优选地，透明质酸酶能够至少部分地降解乙酰透明质酸(透明质酸)。
[0051]存在三类透明质酸酶:
[0052](I)哺乳动物透明质酸酶(EC3.2.1.35)，其为是内切-β-N-乙酰己糖胺酶，以四糖和己糖作为主要终产物。它们具有水解和转糖苷酶活性，并且可降解乙酰透明质酸和软骨素硫酸盐类(CS)，特别地C4-S和C6-S。
[0053](2)细菌透明质酸酶(EC4.2.2.1)，其是通过β -消除反应起作用的内切-β -N-乙酰己糖胺酶，其主要产生二糖终产物。
[0054](3)来自水蛭、其它寄生虫和甲壳类动物的透明质酸酶(EC3.2.1.36)，其是通过β 1-3键的水解产生四糖和己糖终产物的内切-β -葡糖醛酸糖苷酶。[0055]哺乳动物透明质酸酶根据本发明是优选的，并且还可细分成2类:中性活性酶和酸性活性酶。中性活性透明质酸酶是优选的。本发明的透明质酸酶可来源于任何物种。然而，更优选透明质酸酶是人透明质酸酶。仍更优选分别由人基因HYALl (Uniprot/Swissprot登录号 Q12794)、HYAL2 (Uniprot/Swissprot 登录号 Q12891)、HYAL4 (Uniprot/Swissprot登录号Q2M3T9)和PH20/SPAM1 (Uniprot/Swissprot登录号P38567)编码的透明质酸酶用作本发明的透明质酸酶。最优选地，透明质酸酶是人PH20 (Uniprot/Swissprot登录号P38567)。特别优选的还有W02010/077294A1中描述的可溶性PH20多肽和扩展的可溶性PH20多肽(具体参见W02010/077294A1的图1中描述的人PH20的氨基酸序列)。将这些多肽通过引用并入本文。
[0056]还包括的是上述透明质酸酶的任何变体和突变体，只要它们仍然具有至少某种透明质酸酶活性即可。
[0057]如本文中所用，透明质酸酶活性是指酶促催化透明质酸的切割的能力。透明质酸酶的美国药典(USP)XXII测定通过测量在使酶与HA在37°C反应30分钟后剩余的更高分子量透明质酸或乙酰透明质酸(HA)底物的量来间接地测定透明质酸酶活性(USP XXI1-NFXVII(1990)644-645United States Pharmacopeia Convention, Inc, Rockville, MD)? 参照标准溶液可在测定中用于确定以单位表示的任何透明质酸酶的相对活性。测定透明质酸酶的透明质酸酶活性的体外测定在本领域中是已知的。示例性测定包括微浊度测定(microturbidity assay),其通过检测当未切割的透明质酸与血清白蛋白结合时形成的不溶性沉淀物来间接地测量透明质酸酶对透明质酸的切割(参见例如Hynes，ff.L.，J.J.Ferretti (1994).Assays for hyaluronidase activity.Meth Enzymol235:606-616).可使用参照标准以便例如产生标准曲线，从而确定以被测试的透明质酸酶单位表示的活性。在另一个实例中，透明质酸酶活性可使用其中在与透明质酸酶温育后测量残留生物素化透明质酸的微量滴定测定来测量(参见，例如，Frost和Stern(1997)Anal.Biochem.251:263-269，美国专利公布N0.2005/0260186)。测量透明质酸酶活性的其它测定在本领域也是已知的，并且也可以使用(参见Deipech等人，(1995)Anal.Biochem.229:35-41; Takahashi 等人,(2003) Anal.Biochem.322:257-263)。
[0058]在一个实施方案中，将因子VII1、硫酸化糖胺聚糖和透明质酸酶包含在相同制剂中。可通过单次注射等给患者施用包含所述3种组分的制剂。
[0059]在另一个实施方案中，因子VII1、硫酸化糖胺聚糖和透明质酸酶不存在于相同组合物中。例如，可以以分开的剂型将3种组分中的每一种在所述药物制剂中提供。或者，3种组分中的两种可存在于相同组合物中，然而第三组分以分开的剂型提供。在另一种变型中，将3种组分中的每一种以分开的剂型提供于所述药物制剂中。概括而言，本发明包括下列实施方案。
[0060]表1
[0061]
【权利要求】
1.一种药物制剂，其中包含因子VII1、硫酸化糖胺聚糖和透明质酸酶。
2.权利要求1的药物制剂，其中因子VII1、硫酸化糖胺聚糖和透明质酸酶被包含在相同组合物中。
3.权利要求1的药物制剂，其中以分开的剂型在所述药物制剂中提供因子VII1、硫酸化糖胺聚糖和透明质酸酶中的每一种。
4.前述权利要求中任一项的药物制剂，其中所述透明质酸酶是人透明质酸酶。
5.前述权利要求中任一项的药物制剂，其中所述硫酸化糖胺聚糖是肝素。
6.权利要求5的药物制剂，其中所述肝素是未分级分离的肝素。
7.用于治疗或预防出血障碍的因子VIII，其中所述治疗或预防包括施用硫酸化糖胺聚糖和透明质酸酶。
8.按照权利要求7使用的因子VIII，其中所述因子VIII是人因子VIII。
9.按照权利要求7至8中任一项使用的因子VIII，其中所述透明质酸酶是人透明质酸酶。
10.按照权利要求7至9中任一项使用的因子VIII，其中所述硫酸化糖胺聚糖是肝素。
11.按照权利要求7至10中任一项使用的因子VIII，其中所述出血障碍是血友病A。
12.按照权利要求7至11中任一项使用的因子VIII，其中同时施用所述因子VII1、硫酸化糖胺聚糖和透明质酸酶。`
13.按照权利要求7至12中任一项使用的因子VIII，其中分开地施用因子VII1、硫酸化糖胺聚糖和透明质酸酶。
14.按照权利要求7至13中任一项使用的因子VIII，其中治疗或预防包括所述因子VII1、硫酸化糖胺聚糖和透明质酸酶的非静脉内施用。
15.根据权利要求14使用的因子VIII，其中所述非静脉内施用是皮下注射、肌内注射或皮内注射。
16.用于改善因子VIII的生物利用度的硫酸化糖胺聚糖和透明质酸酶。
17.权利要求16的硫酸化糖胺聚糖和透明质酸酶，其用于治疗性或预防性治疗出血障碍。
18.权利要求16和17的硫酸化糖胺聚糖和透明质酸酶，其中所述出血障碍选自家族性和获得性血友病A、家族性或获得性维勒布兰德病。
19.一种用于治疗或预防出血障碍的药物试剂盒，其包含因子VII1、透明质酸酶和硫酸化糖胺聚糖。
【文档编号】A61K47/36GK103889446SQ201280051590
【公开日】2014年6月25日 申请日期:2012年10月18日 优先权日:2011年10月18日
【发明者】S·祖内尔, H·梅特斯内尔 申请人:德国杰特贝林生物制品有限公司