含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂及其制备方法，所述含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂，以重量百分比计，含有：黏膜吸收促进剂0.1～30%，生物粘附材料0.1～50%，重组人生长激素1～30%。本发明的优点在于：简便易行，适合工业化生产。制备过程不使用有机溶剂，对重组人生长激素的活性破坏较小，本发明的载药微粒可显著增加鼻腔滞留时间，增加人生长激素的经鼻吸收，提高生物利用度。
【专利说明】含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药领域，具体为一种用于治疗内源性生长激素缺乏症、慢性肾衰、特 纳氏综合症所致儿童生长缓慢及重度烧伤等疾病，含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂及 其制备方法。
【背景技术】
[0002] 重组人生长激素（rhGH)自1985年问世以来，彻底解决了尸源性人GH来源稀少和 潜在脘病毒感染而致Creutzfeldt - Jakob病的问题，为生长激素缺乏症（GHD)患者提供 了治疗途径。它具有与人体内源生长激素同等的作用，能使摘除垂体大鼠的体重增加，促进 胫骨和软骨生长。同时还有促进全身蛋白质合成，纠正手术等创伤后的负氨平衡状态，刺激 免疫球蛋白合成，刺激淋巴样组织，巨噬细胞和淋巴细胞的增殖，增强抗感染能力；刺激烧 伤创面及切口胶原细胞、巨噬细胞分裂增殖，加速伤口愈合的作用。
[0003] 迄今为止rhGH在人体的应用已经通过20多年的临床验证，其有效性和安全性 得到了医生及患者的普遍认可。同时rhGH的应用人群也在逐渐扩大，FDA已经批准了儿 童GHD、慢性肾功能不全、HIV感染相关衰竭综合症、成人GHD、Turner综合征、小于胎龄儿 (SGA)、特发性矮身材（ISS)、短肠综合征、Prader - Willi综合征等10余个rhGH适应症。
[0004] 长期、规则使用rhGH是rhGH治疗达到最佳疗效的基础。目前全球范围内正式上市 使用的rhGH需要每天注射给药，儿童GHD疗程长达3个月至3年，使患者不但要承受因注 射带来的痛苦，还得承担由此带来的诸多生活不便和额外的经济负担，降低了患者依从性， 影响了 rhGH治疗的长期疗效。某儿童医院内分泌门诊部资料显示，因咨询rhGH需要每日 注射后而放弃治疗的约5?10%。国外已经发表的研究显示，接受rhGH注射治疗的儿童患 者，23%每月会漏打至少3次，在2年的治疗期里，13%的患儿会因漏打而导致实际使用剂 量减少50 %以上。另一项统计显示，注射剂依从性仅36?49%，70%患者感到不快，30%考 虑停止治疗（Frost & Sullivan)。
[0005] 国内外一些制药企业和研发机构致力于rhGH长效制剂的开发，通过缓控释技术 或化学修饰方法改善rhGH的药代动力学特征，增加患者依从性。但是rhGH长效制剂的应 用面临一些潜在的问题，如注射后的血GH浓度变化与生理分泌模式不同是否会影响GH长 效制剂的疗效？持续高水平的GH浓度是否会导致安全性问题？缓释制剂注射部位局部反 应如何解决？第一个经FDA批准的PLGA缓释微球Nutropin Depot?因为疗效不佳和局部 副反应等原因停止销售。
[0006] 开发非注射的短效GH给药系统是符合治疗要求和相对更安全的给药方式，具有 长效注射给药系统无法比拟的优势。如经鼻、肺、眼、口腔、直肠等粘膜给药，其中鼻腔给药 研究较多。
[0007] 迄今为止，关于重组人生长激素的鼻腔给药研究表明，尽管鼻腔具有较大的吸收 面积和丰富的血液供应，但蛋白质类大分子药物仍难透过鼻腔黏膜。（1)蛋白穿透黏膜能 力差，蛋白由于分子量太大，因此穿透鼻腔黏膜的能力较低；（2)鼻粘膜纤毛具有快速清 除机制，缩短了药物在鼻腔吸收部位的滞留时间，影响药物的生物利用度；（3)鼻腔中可 能存在酶的降解作用。
[0008] 为解决重组人生长激素的经鼻吸收问题，有很多通过在制剂中加入各种吸收促进 剂来提高人生长激素生物利用度的研究，但是大多数不能超过皮下注射的30%，也就意味着 药效达不到注射给药的效果。如Pharm Res，1990, 7(7) :772报道生长激素经大鼠鼻腔给予， 采用溶血卵磷脂为促进剂时相对生物利用度为25. 8%，用盐酸氨肽酶抑制剂为促进剂时的 相对生物利用度为28. 9%。Eur. J. Pharm. Sci. 26(2005)9-15的研究表明，羊鼻腔给予生长 激素和壳聚糖的干粉混合物，与皮下注射比，生物利用度大约15%.
[0009] 综上所述，尽管已进行了多种尝试来提高人生长激素经鼻给药的吸收，但目前仍 未能达到与皮下注射相当的效果，仍然需要进一步提高人生长激素经鼻给药的生物利用 度。
【发明内容】
[0010] 本发明的目的在于提供一种含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂及其制备方法， 以克服现有技术存在的缺陷，满足临床应用的需要。
[0011] 所述的含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂，以重量百分比计，含有：
[0012] 黏膜吸收促进剂 0.1?30%
[0013] 生物粘附材料 0· 1?50%
[0014] 重组人生长激素 1?30%
[0015] 优选的，以重量百分比计，含有：
[0016] 黏膜吸收促进剂 2?23%
[0017] 生物粘附材料 1?7%
[0018] 重组人生长激素 6?12%
[0019] 所述黏膜吸收促进剂选自环糊精或其衍生物、烷基糖苷类表面活性剂、胆酸盐类、 氨肽酶抑制剂、磷脂或其衍生物中的一种以上；
[0020] 优选的黏膜吸收促进剂为烷基糖苷类表面活性剂，更优选的为八/十/十二/ 十四烷基麦芽糖苷、蔗糖苷或葡萄糖苷；
[0021] 生物粘附材料选自壳聚糖、结冷胶、氨基化明胶、纤维素或其衍生物、卡波姆或透 明质酸等中的一种以上；
[0022] 优选的生物粘附材料为壳聚糖，分子量50, 000?1，000, 000,脱乙酰度>85%。
[0023] 所述重组人生长激素的分子量为?22, OOODa，可以是有191个氨基酸残基的、与 天然人生长激素结构和氨基酸序列完全一致的蛋白，也可以是N-端增加一个甲硫氨酸的 192个氨基酸残基组成的蛋白。所述重组人生长激素也可以是分子量为20KD，176个氨基酸 残基，缺失天然人生长激素32?46位15个氨基酸残基的重组人生长激素。
[0024] 优选的，所述的含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂，还包括保护剂，所述保护剂 选自乳糖、蔗糖、海藻糖、甘露醇或葡聚糖等中的一种以上，用于干燥过程中生长激素的活 性保护；
[0025] 进一步优选的，所述的含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂，还包括稳定剂，所述 稳定剂选自甘氨酸、赖氨酸、醋酸锌或波洛沙姆等中的一种以上，用于提高生长激素的稳定 性；
[0026] 优选的，所述的含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂，还包括pH=5?8的缓冲盐， 所述pH=5?8的缓冲液选自醋酸-醋酸钠、柠檬酸-柠檬酸钠或磷酸二氢钠-磷酸氢二钠 等；
[0027] 特别优选的，所述的含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂，包括如下重量百分比 的组分：
【权利要求】
1?含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂，其特征在于，以重量百分比计，含有： 黏膜吸收促进剂 〇? 1?30% 生物粘附材料 〇. 1?50% 重组人生长激素 1?30%。 2?根据权利要求1所述的含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂，其特征在于，以重量 百分比计，含有： 黏膜吸收促进剂 2?23% 生物粘附材料 1?7% 重组人生长激素 6?12%。
3. 根据权利要求1所述的含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂，其特征在于，还包括 保护剂、稳定剂或PH=5?8的缓冲盐中的一种以上，所述保护剂选自乳糖、蔗糖、海藻糖、甘 露醇或葡聚糖中的一种以上； 所述稳定剂选自甘氨酸、赖氨酸、醋酸锌或波洛沙姆等中的一种以上； 所述pH=5?8的缓冲液选自醋酸-醋酸钠、柠檬酸-柠檬酸钠或磷酸二氢钠-磷酸氢 二钠。
4. 一种含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂,其特在于，包括如下重量百分比的组 分：
5. 根据权利要求4所述的含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂，其特征在于，包括如 下重量百分比的组分：
6. 根据权利要求1?5任一项所述的含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂，其特征在 于，所述黏膜吸收促进剂选自环糊精或其衍生物、烷基糖苷类表面活性剂、胆酸盐类'氨肽 酶抑制剂、磷脂或其衍生物中的一种以上； ' 生物粘附材料选自壳聚糖、结冷胶、氨基化明胶、纤维素或其衍生物、卡波姆或透明质 酸等中的一种以上； ' 所述重组人生长激素的分子量为?22, OOODa。
7. 根据权利要求6所述的含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂，其特征在于，所述黏 膜吸收促进剂为烷基糖苷类表面活性剂。
8. 根据权利要求6所述的含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂，其特征在于，所述生 物粘附材料为壳聚糖，分子量50, 000?1，000, 000,脱乙酰度>85%。 9?根据权利要求6所述的含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂，其特征在于，所述重 组人生长激素是有191个氨基酸残基的、与天然人生长激素结构和氨基酸序列完全一致的 蛋白；或天然人生长激素N-端增加一个甲硫氨酸的、192个氨基酸残基组成的蛋白；或分 子量为20KD，176个氨基酸残基，缺失天然人生长激素 32?46位15个氨基酸残基的重组 人生长激素。
10.根据权利要求1?9任一项所述的含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂的制备方 法，其特征在于，包括如下步骤： (1) 将生物粘附材料溶解于pH缓冲液，然后加入重组人生长激素； 、、 (2) 在上述的溶液中，加入黏膜吸收促进剂、保护剂和稳定剂，采用本领域常规的方法， 干燥，获得所述的含有重组人生长激素的鼻腔给药制剂； 、 (3) 将干燥后的固体过1〇〇目筛，得30 - 150 Um粉末，按剂量分装于鼻用粉雾剂装置 中。
【文档编号】A61K38/27GK104225579SQ201310240170
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2013年6月17日 优先权日:2013年6月17日
【发明者】吴闻哲, 侯惠民, 姚孝林 申请人:上海现代药物制剂工程研究中心有限公司