包含神经调节蛋白的药物制剂及装置制造方法
【专利摘要】本发明涉及包含神经调节蛋白(neuregulin，NRG)的装置或制剂，该装置或制剂可向哺乳动物血液中长期注入神经调节蛋白，从而使神经调节蛋白在血液中持续存在。实验证明血液中持续存在的NRG不仅能长时间持续激活其下游信号传导系统，还能显著改善心衰心脏的功能。本发明中向哺乳动物血液长期注入神经调节蛋白的装置具体包括装有NRG溶液的容器及配套注射系统，含NRG溶液的胶囊式渗透压泵，含NRG的制剂具体包括NRG和聚乙二醇(PEG)的耦联物或含NRG的脂质体、微球等。
【专利说明】包含神经调节蛋白的药物制剂及装置
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物化学、分子生物学和医学领域。具体而言，本发明涉及释放神经调节蛋白到动物血液中的药物制剂及装置。
[0002]发明背景
[0003]神经调节蛋白(neuregulin, NRG ；heregulin, HRG),又叫神经胶质生长因子(glial growth factor, GGF), neu 分化因子(new differentiation factor, NDF),为分子量在44KD左右的糖蛋白，它们在细胞间传递信号，是酪氨酸激酶受体ErbB家族的配体。神经调节蛋白家族含 4 个成员:NRG1，NRG2，NRG3，NRG4。(Falls et al.，Exp Cell Res.284:14-30,2003)对后三者的生物学功能相对来讲知之甚少。NRGl在神经系统、心脏和乳腺中起着重要作用，还有证据显示NRGl信号传递在其他一些器官系统的发育、功能以及人类疾病(包括精神分裂症和乳腺癌)的发病机理中起作用。NRGl有很多异构体。对基因突变小鼠(基因敲除小鼠)的研究说明在N末端区或表皮生长因子(EGF)类似区不同的异构体，其在体功能也不一样。本发明是以神经调节蛋白I β (NRG10)为基础的。
[0004]神经调节蛋白1β 为一跨膜蛋白(Holmes et al.，Science256，1205-1210，1992)。膜外部分是N末端，包括免疫球蛋白类似区(Ig-like domain)和EGF类似区(EGF-1ikedomain)，膜内部分是C末端。在细胞外基质的金属蛋白酶作用下，神经调节蛋白的膜外部分可被酶切下来而呈游离状态，从而有利于和周围细胞表面的ErbB受体结合，激活相应的细胞信号传递。
[0005]ErbB受体家族也分为四类，ErbBl、ErbB2、ErbB3和ErbB4，它们都是跨膜蛋白，分子量在180-185KD附近。除ErbB2外，它们在膜外的N末端都含配体结合区；除ErbB3夕卜，它们在膜内的C末端都含 蛋白酪氨酸激酶活性。其中ErbBl是表皮生长因子的受体，ErbB3和ErbB4都是神经调节蛋白的受体。在神经调节蛋白的受体中，只有ErbB2和ErbB4在心脏表达量较高。(Yarden et al.，Nat Rev Mol Cell Biol, 2:127-137, 2001)
[0006]当神经调节蛋白与ErbB3或ErbB4的膜外部分结合时，将引起ErbB3、ErbB4与其他ErbB受体(常常包括ErbB2)形成异源二聚体，或ErbB4自身形成同源二聚体，然后导致受体的膜内部分被磷酸化(Yarden et al.,Nat Rev Mol Cell Biol, 2:127-137, 2001)。磷酸化的膜内部分可进一步与细胞内的多种信号传递蛋白结合，从而激活下游ERK或AKT信号通路，引起一系列细胞反应:包括刺激或抑制细胞增殖、细胞凋亡、细胞迁移、细胞分化或细胞粘连。
[0007]神经调节蛋白对心脏的发育尤其重要(W00037095, CNl276381，W003099300,W09426298, US6444642, W09918976, W00064400, Zhao et al.，J.Biol.Chem.273，10261-10269,1998)。在胚胎发育早期，神经调节蛋白的表达主要局限于心内膜，随后通过旁分泌途径释放到周围心肌细胞并与细胞膜上的蛋白酪氨酸激酶受体ErbB4膜外部分结合，ErbB4进而与ErbB2形成异源二聚体。ErbB4/ErbB2复合物的形成及激活对早期海绵样心脏形成小梁是必须的。神经调节蛋白、ErbB4和ErbB2三个蛋白基因中的任何一个缺失都会使胚胎没有小梁并在发育早期死于子宫。W00037095显示一定浓度的神经调节蛋白可持续激活ERK信号通路，促进心肌细胞在的生长及分化，引导心肌细胞和细胞粘连处肌节和细胞骨架的重建，改善心肌细胞的结构，增强心肌细胞的收缩。W00037095及W003099300还指出神经调节蛋白可用于检测、诊断和治疗各种心血管疾病。
[0008]下面列举了与本发明有关的一些现有技术文献:
[0009]K cardiac muscle function and manipulation ；W00037095
[0010]2、生长因子神经调节蛋白及其类似物的新应用；CN1276381
[0011]3、neuregulin based methods and compositions for treating cardiovasculardiseases ；W003099300
[0012]4、You-yang Zhao，Douglas R.Sawyer, Ragavendra R.Baligaj Douglas J.0pel,Xinqiang Han, Mark A.Marchionni, and Ralph A.Neuregulins Promote Survival andGrowth of Cardiac Myocytes.Kelly J.Biol.Chem.273,10261-10269(1998)
[0013]5λMethods for treating muscle diseases and disorders ；W09426298
[0014]6、Methods of increasing myotube formation or survival or muscle cellmitogenesis，differentiation or survival using a neuregulin ；US6444642
[0015]7、Therapeutic methods comprising use of a neuregulin ;W09918976
[0016]8λMethods for treating congestive heart failure ；W00064400
[0017]9、William E.HolmesiMark X.Sliwkowski，Robert W.Akita，William J.Henzel，James Lee, John W.Park,. Daniel Yansuraj Nasrin Abadi, Helga Raab, GailD.Lewis,H.Michael Shepard，Wun-Jing Kuang, William 1.Wood, David V.Goeddel，RichardL.Wandlen.1dentification of heregulin，a specific activator ofpl85 (erbB2).Science256，1205-1210(1992)
[0018]10、 Douglas L.Falls.Neuregulins:functions, forms， and signalingstrategies.Experimental Cell Research284，14-30 (2003)
[0019]11、Yosef Yarden，Mark X.Sliwkowsk1.Untangling the ErbB signallingNetwork.Nature Reviews:Molecular Cell Biology2127-137(2001)。
[0020]发明概述
[0021]发明人发现给大鼠注射一定量(10μg/kg:蛋白量/体重)的神经调节蛋白能激活体内的ERK和AKT信号通路，进而有利于心力衰竭的恢复。
[0022]发明人近来还发现给哺乳动物持续给神经调节蛋白(NRG)，也能激活ERK和AKT信号通路，并能提高哺乳动物心脏的FS和/或EF值，及预防心脏肥大，进而能大大提高心衰心脏的收缩功能，达到比快速给药更好的效果。
[0023]因此，我们将神经调节蛋白注入胶囊式渗透压泵、微量注射器、与PEG耦联或包装于脂质体、微球中，然后再植入或注入动物体内，这样就能够持续地释放神经调节蛋白，从而延长蛋白的半衰期，降低蛋白用量，减少病人的用药次数，降低毒副作用，同时又起到比快速注射更好的治疗作用。
[0024]本发明的一方面提供一种预防、治疗或延缓哺乳动物疾病或紊乱的装置，该装置包括有效量的神经调节蛋白，其特征在于，该装置是长期释放神经调节蛋白的装置。
[0025]本发明的预防、治疗或延缓哺乳动物疾病或紊乱的装置通过向哺乳动物血液中长期释放神经调节蛋白，可激活哺乳动物心肌细胞的MAP激酶信号通路并引起心肌细胞的生长或分化，从而预防、治疗或延缓哺乳动物疾病或紊乱，尤其是哺乳动物心力衰竭。
[0026]在一较佳实施方式中，本发明的装置包括容器和/或配套注射系统，该容器例如是泵和/或注射器，如渗透压泵、微量注射泵。
[0027]在本发明进一步较佳实施例中，神经调节蛋白的长期释放可诱导心肌细胞中ERK和/或AKT信号通路的持续激活。
[0028]在本发明进一步较佳实施例中，神经调节蛋白的长期释放可提高哺乳动物心脏的EF和/或FS值。
[0029]在本发明进一步较佳实施例中，神经调节蛋白的长期释放可预防哺乳动物心脏肥大。
[0030]在本发明进一步较佳实施例中，神经调节蛋白的长期释放可减小哺乳动物左心室的内径。
[0031]在本发明进一步较佳实施例中,所述的疾病是心力衰竭。
[0032]在本发明中，所述的疾病或紊乱选自心血管疾病、癌症、神经系统疾病、肌肉疾病、肌肉萎缩症(如杜兴肌营养不良、肢带型肌营养不良)、多发性硬化、脊髓损伤、中风、眼或耳疾病、糖尿病、精神分裂症及老年性痴呆症。
[0033]在本发明中，所述的神经调节蛋白可为NRG1，NRG2, NRG3, NRG4的功能氨基酸片段，即含EGF类似区的任何氨基酸片段。
[0034]在本发明进一步较佳实施例中，神经调节蛋白的长期低剂量释放可以减小其对哺乳动物的副作用，其中副作.用包括胃肠道紊乱和/或心包液渗漏。
[0035]在本发明进一步较佳实施例中，所述的长期释放包括每天连续释放10分钟到24小时，更佳地每天连续释放至少4小时，最佳地每天连续释放至少6小时。
[0036]在本发明进一步较佳实施例中，所述的神经调节蛋白还可用其它影响哺乳动物基因表达的因子如FGF(纤维细胞生长因子)、VEGF(血管内皮生长因子)、IGF(胰岛素类似生长因子)、内皮素、LIF(白血病抑制因子)、EGF(表皮生长因子)、TOGF(血小板源生长因子)、TGF (转化生长因子)、IL-1K白细胞介素11)、TNF(肿瘤坏死因子)、干扰素、激素(如脑钠肽家族和胰岛素)、ΕΡ0(红细胞生成素)或CSF (集落刺激因子)等配体家族成员来替代。
[0037]本发明另一方面是提供一种预防、治疗或延缓哺乳动物疾病或紊乱的药物制剂，该药物制剂包括有效量的神经调节蛋白，其中，该药物制剂是长期释放神经调节蛋白的药物制剂。
[0038]本发明的预防、治疗或延缓哺乳动物疾病或紊乱的药物制剂通过向哺乳动物血液中长期释放神经调节蛋白，可激活哺乳动物心肌细胞的MAP激酶信号通路并引起心肌细胞的生长或分化，从而预防、治疗或延缓哺乳动物疾病或紊乱，尤其是哺乳动物心力衰竭。
[0039]在一较佳实施方式中，本发明的药物制剂是NRG和聚合物的耦联物、脂质体和/或微球或其它缓慢释放药物的制剂。该聚合物是聚乙二醇和/或聚乙二醇衍生物。
[0040]在本发明进一步较佳实施例中，神经调节蛋白的长期释放可诱导心肌细胞中ERK和/或AKT信号通路的持续激活。
[0041]在本发明进一步较佳实施例中，神经调节蛋白的长期释放可提高哺乳动物心脏的EF和/或FS值。[0042]在本发明进一步较佳实施例中，神经调节蛋白的长期释放可预防哺乳动物心脏肥大。
[0043]在本发明进一步较佳实施例中，神经调节蛋白的长期释放可减小哺乳动物左心室的内径。
[0044]在本发明进一步较佳实施例中,所述的疾病是心力衰竭。
[0045]在本发明，所述的疾病或紊乱选心血管疾病、癌症、神经系统疾病、肌肉疾病、肌肉萎缩症(如杜兴肌营养不良、肢带型肌营养不良)、多发性硬化、脊髓损伤、中风、眼或耳疾病、糖尿病、精神分裂症及老年性痴呆症。
[0046]在本发明中，所述的神经调节蛋白可为NRG1，NRG2, NRG3, NRG4的功能氨基酸片段，即含EGF类似区的任何氨基酸片段。
[0047]在本发明进一步较佳实施例中，神经调节蛋白的长期低剂量释放可以减小其对哺乳动物的副作用，其中副作用包括胃肠道紊乱和/或心包液渗漏。
[0048]在本发明进一步较佳实施例中，所述的长期释放包括每天连续释放10分钟到24小时，更佳地每天连续释放至少4小时，最佳地每天连续释放至少6小时。
[0049]在本发明进一步较佳实施例中，所述的神经调节蛋白还可用其它影响哺乳动物基因表达的因子如FGF(纤维细胞生长因子)、VEGF(血管内皮生长因子)、IGF(胰岛素类似生长因子)、内皮素、LIF(白血病抑制因子)、EGF(表皮生长因子)、TOGF(血小板源生长因子)、TGF(转化生长因子)、IL-11 (白细胞介素11)、TNF(肿瘤坏死因子)、干扰素、激素(如脑钠肽家族和胰岛素)、ΕΡ0 (红细胞生成素)或CSF (集落刺激因子)等配体家族成员来替代。
【专利附图】
【附图说明】
[0050]图1是神经调节蛋白在三种给药条件下诱导的正常大鼠左心室组织AKT、ERK的磷酸化随时间变化的图。其中“vehicle”即赋形剂，“P-AKT”、“P-ERK”和“NRG”分别代表磷酸化的AKT，磷酸化的ERK和神经调节蛋白。“ im”、“ iv”和“ ivgtt”指的是肌肉注射，静脉
注射和静脉滴注。
[0051]图2是用BaI2染色检测电泳后各泳道中PEG的结果图。将反应后的PEG和神经调节蛋白混合物通过凝胶过滤柱SlOO分离，收集各组分电泳后染色。图中“mixture”指PEG和神经调节蛋白反应后的混合物。“M”和“peakl”、“peak2”、“peak3”分别代表蛋白分子量标记和反应混合物经过SlOO柱分离后的洗脱峰1，2，3。“NRG-mono-PEG”、“NRG-d1-PEG”和“NRG-poLy-PEG”分别指的是与一个PEG结合的神经调节蛋白、与两个PEG结合的神经调节蛋白和与多个(至少3个)PEG结合的神经调节蛋白。
[0052]图3是用考马氏亮蓝染色检测电泳后各泳道中神经调节蛋白的结果图。其中的缩写标记含义同图2。在M泳道，各条蛋白带的分子量从下往上依次为14.4kD，20.1kD,31.0kD, 43.0kD, 66.2kD 和 97.4kD。
发明详述
[0053]神经调节蛋白是具有重要生物学功能的糖蛋白。本发明提供了神经调节蛋白在治疗和预防心血管疾病中的新方式。但是，本发明并不受限于所阐述之原理。[0054]在本发明中，所有术语均具有本领域的技术人员普遍已知的含义。
[0055]术语“神经调节蛋白”是指能够激活ErbB2/ErbB4或ErbB2/ErbB3异二联蛋白酪氨酸激酶的分子，包括神经调节蛋白异构体、神经调节蛋白中的EGF区域、神经调节蛋白突变体，和任何能激活上述受体的神经调节蛋白类的基因产物。作为例子，但非限制性地，本发明的神经调节蛋白是神经调节蛋白β 2异构体的一个片段，即177-237位氨基酸片段，其中包含了受体结合区EGF类似区。该片段的氨基酸序列为:SHLVKCAEKEKTFCVNGGECFMVKDLSNPSRYLCKCPNEFTCDRC QNYVMASFYKAEELYQ。应该理解的是，本发明的神经蛋白包括完整蛋白、其片段和各种突变体、等价物、模拟体等等，也包括上述物质与它种物质的融合体、偶联体或者结合物，包括上述物质的变性或者未变性形式，包括上述物质的各种各样修饰物。在不背离本发明的基础上，对神经调节蛋白进行截短、氨基酸替换或添加等等变化都是在本发明的范围之内。
[0056]实施例1神经调节蛋白在不同给药条件下诱导的正常大鼠左心室组织AKT、ERK磷酸化
[0057]试验方法:将体重为200±20g的雄性Wistar大鼠分成三个一组，分别后肢肌肉注射(im)、尾静脉注射(iv)或尾静脉滴注(iVgtt, 20 μ 1/min,持续2小时左右)赋形剂(IOmMNa2HP04-NaH2P04,150mM· NaCl，0.2% HSA(人血清白蛋白)，5%甘露醇，ρΗ6.0，剂量为 4ml/kg鼠体重)或10 μ g/kg神经调节蛋白(NRG1 β 2之177-237氨基酸片段，泽生科技开发有限公司，批号=200503002)，溶解于赋形剂中，浓度为2.Syg/ml，剂量为4ml/kg鼠体重)，然后分别给药后于20min、lr、2hr、4h;r、6hr断颈处死,摘下心脏,剪取左心室,用预冷的生理盐水洗净后将同组三个左心室在裂解液(50mMTris pH7.4,5mM EDTA, 150mM NaCl,l%Triton X-100,2mM Na2VO4, 50mM NaF, 2mM PMSF及Cocktail 蛋白酶抑制剂混和物(无EDTA，Roche))中剪碎、匀浆，将匀浆液于12，OOOrpm离心5min，取上清，同上再离心一次，_80°C冻存。用前化冻，再于12，OOOrpm离心5min，取上清。用BCA方法测定蛋白浓度，取适量样品与 2X 样品缓冲液(0.125M Tris ρΗ6.8，20%甘油，4% SDS，0.2M DTT，0.012%溴芬蓝)混合，煮3min，然后电泳，转膜，分别用ERK、磷酸化ERK或AKT、磷酸化AKT对应的抗体(Cellsignaling公司)来检测样品的ERK、AKT磷酸化状态。
[0058]实验结果如图1所示，为神经调节蛋白不同给药方法的正常大鼠左心室AKT、ERK的磷酸化水平随时间变化的情况图。从图中可以看出，与赋形剂相比，三种给药方法下神经调节蛋白都能持续诱导ERK的磷酸化，而神经调节蛋白诱导的AKT磷酸化水平则在给药后20min时较高，Ihr时降低，2hr时又开始回升,到4hr时回复到较高水平。特别值得注意的是，尾静脉滴注时神经调节蛋白对ERK、AKT磷酸化的影响跟其他两种注射方法没有明显区别，提示神经调节蛋白的持续低剂量给药方法也是同样有效的。
[0059]实施例2不同给药方法时神经调节蛋白恢复冠脉结扎大鼠心功能的情况
[0060]实验方法:
[0061 ] 1、大鼠冠脉结扎、心超检测及分组
[0062]200±20g Wistar雄性大鼠(中国科学院上海实验动物中心)腹腔注射氯胺酮(Ketamine) 100mg/kg麻醉后,仰卧固定于鼠板,颈部及胸部去毛后用新洁尔灭消毒。颈部正中切口，钝性分离气管，18G动静脉针留置第3-5气管软骨间，退出针芯，将塑料套管推入气管内l_2cm，固定，以备接小动物呼吸机(SAR-830/P ventilator，潮气量约lml/100g/次，频率60次/分钟)。胸部左前切口，钝性分离，暴露第4、5肋骨，用弯头纹式止血钳从肋间穿透胸壁并剪断第4肋，接通开启呼吸机，暴露心脏，观察肺充气及心跳情况。撕开心包，将上部脂肪垫上翻，充分暴露左心耳和肺动脉圆锥，于二者之间用6/0医用无损伤缝合线结扎冠状动脉前降支，可看到结扎后心肌局部呈现白色(约8_X8mm)，活动明显减弱。缝合胸壁，堵住呼吸机回气口使肺充盈，用力挤压胸部排气后，缝合胸部肌肉和皮肤。观察呼吸情况，待自主呼吸后去除呼吸机。
[0063]结扎后第14天心脏超声仪(Philips Sonos7500S4探头)检测，选用EF值在30-50%之间的大鼠随机分组，每组12只。
[0064]2、冠脉结扎大鼠给药、心超检测
[0065]结扎后第15天称重、给药。“对照组”尾静脉注射赋形剂，给药体积为0.4ml/100g,每天I次，连续给药5天,停药2天,再连续给药5天；“给药组”尾静脉注射神经调节蛋白，剂量为10 μ g/kg,给药体积也为0.4ml/100g,每日I次,连续给药5天,停药2天,再连续给药5天；“静脉滴注给药组”分组后第5天，做胶囊式渗透压泵(ALZET2ML1)植入手术，泵中充入神经调节蛋白溶液2ml (含神经调节蛋白250 μ g，如果大鼠体重按照250g计算，给药速度接近6 μ g/kgXh,达峰血药浓度与给大鼠尾静脉注射0.7 μ g/kg神经调节蛋白后相当)。给药7天后，心超检查。次日用生理记录仪(ABinstruments powerlab4_25)做血流动力学检查、心脏解剖学检查。
[0066]2.1、胶囊式渗透压泵(ALZET2ML1)装药并植入体内
[0067]在无菌操作台内给每支(250 μ g)神经调节蛋白先注入Iml无菌注射用水，再注入Iml无菌生理盐水，溶解后用无菌注射器抽取神经调节蛋白溶液，给注射器换上钝头注射针头，排净气泡。取下胶囊式渗透压泵的流量调节器并将泵直立，将注射针头从泵的顶端小孔处插入至最底部，缓慢推入神经调节蛋白溶液，直至有溶液溢出小孔，拔出注射针头，擦净泵外周溶液。把流量调节 器上方的半透明盖子去掉，露出一小段不锈钢管，将长5cm的PE60管与之连紧。注射器吸取神经调节蛋白溶液，排净气泡，针头与PE60管相连，充入药物溶液至流量调节器满为止。将流量调节器未与PE60管连接的一端插入泵中，至流量调节器的白色边缘与泵贴紧为止，拔掉注射器及针头。将连接好的泵浸入37°C的无菌生理盐水中过夜，用前取出。
[0068]用氯胺酮麻醉大鼠，取仰卧位，颈部备皮并消毒，用灭菌铺巾覆盖大鼠身体。在颈前偏右侧纵向切口，小心分离颈外静脉，在远心端结扎，穿双线，用眼科剪在颈外静脉上做一斜剪口，再用显微镊撑开切口，将连接了胶囊式渗透压泵的PE60管插入约2cm，近心端扎紧，远心端多处扎紧固定PE60管。然后自切口处向颈后外侧钝性分离一窦道至背部肩胛处，再钝性分离一空间，将胶囊式渗透压泵自窦道塞入背部肩胛处的空间内。缝合切口，并开始计时。待大鼠苏醒后送其回鼠房，让其自由进食水。[0069]
【权利要求】
1.一种预防、治疗或延缓哺乳动物疾病的缓释装置，其中含有有效量的神经调节蛋白，并且将所述神经调节蛋白持续释放到该哺乳动物体内，以达到比快速注射相同剂量神经调节蛋白更优的预防、治疗或延缓该哺乳动物疾病的效果，其中所述持续释放是指每天持续释放至少4小时。
2.如权利要求1所述的装置，其包含一个渗透压泵。
3.如权利要求1所述的装置，其包含一个微量注射泵。
4.如权利要求1所述的装置，其中所述持续释放是指每天连续释放至少6小时。
5.如权利要求1所述的装置，其中所述持续释放是指每天连续释放至少8小时。
6.如权利要求1所述的装置，其中所述疾病选自心血管疾病、癌症、神经系统疾病、肌肉疾病、肌肉萎缩症(如杜兴肌营养不良、肢带型肌营养不良)、多发性硬化、脊髓损伤、中风、眼或耳疾病、糖尿病、精神分裂症及老年性痴呆症。
7.如权利要求1所述的装置，其中所述疾病是心力衰竭。
8.如权利要求1所述的装置，其中所述神经调节蛋白可为NRGl，NRG2，NRG3或NRG4的功能氨基酸片段，即含神经调节蛋白家族EGF类似区的任何氨基酸片段。
9.一种预防、治疗或延缓哺乳动物疾病的缓释组合物，其中含有有效量的神经调节蛋白，并且将所述神经调节蛋白持续释放到该哺乳动物体内，以达到比快速注射相同剂量神经调节蛋白更优的预防 、治疗或延缓该哺乳动物疾病的效果，其中所述持续释放是指每天持续释放至少4小时。
10.如权利要求9所述的组合物，其特征在于所述神经调节蛋白是与聚合物耦联的或被脂质体或微球所包含的。
11.如权利要求10所述的组合物，其中所述聚合物是聚乙二醇和/或聚乙二醇衍生物。
12.如权利要求9所述的组合物，其中所述持续释放是指每天连续释放至少6小时。
13.如权利要求9所述的组合物，其中所述持续释放是指每天连续释放至少8小时。
14.如权利要求9所述的组合物，其所述疾病选自心血管疾病、癌症、神经系统疾病、肌肉疾病、肌肉萎缩症(如杜兴肌营养不良、肢带型肌营养不良)、多发性硬化、脊髓损伤、中风、眼或耳疾病、糖尿病、精神分裂症及老年性痴呆症。
15.如权利要求9所述的组合物，其所述疾病是心力衰竭。
16.如权利要求9所述的组合物，其中所述神经调节蛋白可为NRG1，NRG2，NRG3或NRG4的功能氨基酸片段，即含神经调节蛋白家族EGF类似区的任何氨基酸片段。
【文档编号】A61P27/02GK103432681SQ201310348834
【公开日】2013年12月11日 申请日期:2007年5月25日 优先权日:2007年5月25日
【发明者】周明东 申请人:上海泽生科技开发有限公司