枳实或枳壳提取物及其制备方法和应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种枳实或枳壳提取物及其制备方法和应用，所述枳实或枳壳提取物由如下方法制备而成：将枳实或枳壳全果粉碎，水提或醇提1-3次，同时收集挥发油，过滤合并滤液，加入或不加入有机溶剂萃取，然后浓缩成浸膏与挥发油合并，即得枳实或枳壳提取物。该提取物可应用于制备治疗止咳化痰的药物组合物，具备良好的止咳化痰效果，其生产方法简单，有效成分提取率高。
【专利说明】枳实或枳壳提取物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及中药【技术领域】，特别是涉及一种枳实或枳壳提取物及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002]积实(Fructusaurantii immaturus)为芸香科植物酸澄 Citrus aurantium L.,枸橘(Poncirus trifoliata (L.) Raf.)或香圆(Citrus wilsonii Tanaka)的幼果，主要用于积滞内停、痞满胀痛、泻痢后重等。
[0003]积壳(Fructus aurantii)为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培变种的干燥未成熟果实，具有理气宽中、行滞消胀之功效。
[0004]枳实、枳壳均为常用中药，在临床上应用于治病的历史已经有二千多年，被广泛应用于中医治病复方制剂。曾有药理实验表明，枳实药剂可使实验动物胃肠平滑肌收缩节律增加，但尚未见对枳实、枳壳止咳、化痰和平喘方面有效成分或有效成分及其制剂的报道。
[0005]在过去的研究利用上，大部分都是根据古代的复方制剂，对其中的君药枳实或枳壳本身的研究不够，使用效果往往不大理想；要对疾病起疗效，需要较大的剂量，而且起效时间较长。从其开发利用的方法上，均为复方制剂，与其他中药配置使用，未见单方使用，尤其是在止咳化痰方面。
【发明内容】
[0006]基于此，本发明的目的是提供一种枳实或枳壳提取物，该提取物具有止咳化痰的作用。
[0007]具体的技术方案如下:
[0008]一种枳实或枳壳提取物的制备方法，包括如下步骤:将枳实或枳壳全果粉碎，水提或醇提1-3次，同时收集挥发油，过滤合并滤液，加入或不加入有机溶剂萃取，然后浓缩成浸膏与挥发油合并，即得枳实或枳壳提取物。
[0009]水提取可以采用在室温或者在加热沸腾条件下进行，提取次数为1-3次，水的用量为水至少能没过药材，水用量过多不限。
[0010]醇提(乙醇提取)在室温条件下进行，提取次数为1-3次，醇的用量为至少能没过药材，乙醇用量过多不限。 乙醇可以采用无水乙醇或者各种浓度乙醇。
[0011]在其中一些实施例中，所述水提过程中水的用量为枳实或枳壳原料药体积的3-20倍；所述醇提过程采用乙醇作为溶剂，所述乙醇的用量为枳实或枳壳原料药体积的3-20倍。
[0012]在其中一些实施例中，所述水提过程中水的用量为枳实或枳壳原料药体积的5-8倍；所述醇提过程乙醇作为溶剂，所述乙醇的用量为枳实或枳壳原料药体积的5-15倍。
[0013]在其中一些实施例中，所述乙醇为无水乙醇或体积浓度为60-90%的乙醇溶液。
[0014]在其中一些实施例中，所述有机溶剂为氯仿、乙酸乙酯或石油醚，所述石油醚为石油醚-30、石油醚-60或石油醚-90。
[0015]本发明的另一目的是提供上述制备方法制备得到的枳实或枳壳提取物。
[0016]具体的技术方案如下:
[0017]上述枳实或枳壳提取物制备方法制备得到的枳实或枳壳提取物。
[0018]本发明的另一目的是提供上述制备方法得到的枳实或枳壳提取物的应用。
[0019]具体的技术方案如下:
[0020]上述制备方法得到的枳实或枳壳提取物在制备治疗止咳化痰的药物组合物中的应用。
[0021]本发明的另一目的是提供一种药物组合物。
[0022]具体的技术方案如下:
[0023]一种具有止咳化痰功效的药物组合物，其活性成分包括上述制备方法制备得到的枳实和/或枳壳提取物。
[0024]在其中一些实施例中，该药物组合物的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液或气雾剂。
[0025]本发明的优点如下:
[0026]1、本发明将枳实或枳壳做为单方使用，将枳实和/或枳壳提取物应用于治疗止咳化痰的药物，具备良好的止咳化痰效果。
[0027]2、本发明具有止咳化痰功效的药物组合物的药效学实验，在中山大学医学院动物实验中心进行，对本发明的药物组合物进行实验动物小白鼠的止咳化痰实验，结果表明:本发明的药物组合物的低、中、高剂量灌胃给药对刺激小鼠引起咳嗽的耐受时间，与空白对照组比较，均有显著延长，在统计学上有显著差异。
[0028]3、本发明具有止咳化痰功效的药物组合物对实验动物小鼠的化痰实验表明，本发明的药物组合物的低、中、高剂量灌胃给药对小鼠支气管分泌增加，与空白对照组比较，均有显著增加，在统计学上有显著差异。与阳性对照药物痰咳净比较，对小鼠支气管分泌液均有显著增加，在统计学上有显著差异。提示本发明的药物组合物具有止咳化痰的药理药效作用，且比阳性对照疗效要好。
[0029]4、将枳实或枳壳提取物与药学上可接受的辅料制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液或气雾剂等剂型的药物，这些剂型的药物具有以下特点:
[0030](1)给药方便，患者可自行完成；(2 )服用量小，疗效迅速；(3)携带方便；(4)质量较稳定。
[0031]综上，本发明的药物组合物采用枳实或枳壳全果为生药材原料，具备良好的止咳化痰结果，其生产方法简单，药效明显。
【具体实施方式】
[0032]本发明所使用的原料如下:
[0033]积实(Fructusaurantii immaturus)为芸香科植物酸澄 Citrus aurantium L.,枸橘(Poncirus trifoliata(L.) Raf.)或香圆(Citrus wilsonii Tanaka)的幼果。
[0034]积壳(Fructus aurantii)为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培变种的干燥未成熟果实。[0035]下面结合实施例对本发明作进一步说明。
[0036]实施例1
[0037]本实施例一种具有止咳化痰功效的药物组合物，由枳实水提取物为活性成分与药学上可接受的辅料组成。
[0038]制备方法如下:
[0039]( I)制备枳实水提取物:
[0040]枳实全果粉碎，过20目筛，加100°C水没过药材(水的用量为枳实原料药体积的5倍)，提取2次，每次I小时，过滤，同时收集挥发油，合并滤液，浓缩成浸膏与挥发油合并，即得枳实水提取物，提取率约30%左右。
[0041](2)将步骤(I)得到的枳实水提取物与常规辅料制成口服液。
[0042]实施例2
[0043]本实施例一种具有止咳化痰功效的药物组合物，由枳壳水提取物为活性成分与药学上可接受的辅料组成。
[0044]制备方法如下:
[0045]( I)制备枳壳水提取物:
[0046]枳壳全果粉碎，过20目筛，加100°C水没过药材(水的用量为枳壳原料药体积的8倍)，提取3次，每次I小时，过滤，同时收集挥发油，合并滤液，然后浓缩成浸膏与挥发油合并，即得枳壳水提取物，提取率约30%左右。
[0047](2)将步骤(I)得到的枳壳水提取物与常规辅料制成片剂或胶囊剂或颗粒剂或口服液。
[0048]实施例3
[0049]本实施例一种具有止咳化痰功效的药物组合物，由枳实和枳壳水提取物为活性成分与药学上可接受的辅料组成，其中枳实水提取物和枳壳水提取物的用量比为1:1。
[0050]制备方法如下:
[0051 ] (I)制备枳实或枳壳水提取物:
[0052]枳实或枳壳全果粉碎，过20目筛，加100°C水没过药材(水的用量为枳实或枳壳原料药体积的5倍)，提取3次，每次I小时，过滤，同时收集挥发油，合并滤液，然后浓缩成浸膏与挥发油合并，即得枳实或枳壳水提取物，提取率约30%左右。
[0053](2)将步骤(I)得到的枳实和枳壳水提取物按1:1比例混合后与常规辅料制成片剂或胶囊剂或颗粒剂或口服液。
[0054]实施例4
[0055]本实施例一种具有止咳化痰功效的药物组合物，由枳实醇提取物为活性成分与药学上可接受的辅料组成。
[0056]制备方法如下:
[0057]( I)制备枳实醇提取物:
[0058]枳实全果粉碎，不经过筛,加体积含量为60%的乙醇溶液没过药材(乙醇溶液的用量为枳实原料药体积的15倍),提取2次，每次I天，过滤，同时收集挥发油，合并滤液，加入有机溶剂(氯仿)萃取，然后浓缩成浸膏与挥发油合并，即得枳实醇提取物，提取率约30%左右。[0059](2)将步骤(I)得到的枳实醇提取物与常规辅料制成片剂或胶囊剂或颗粒剂。
[0060]实施例5
[0061]本实施例一种具有止咳化痰功效的药物组合物，由枳壳的醇提取物为活性成分与药学上可接受的辅料组成。
[0062]制备方法如下:
[0063]( I)制备枳壳醇提取物:
[0064]枳壳全果粉碎，不经过筛,加体积含量为90%的乙醇溶液没过药材(乙醇溶液的用量为枳实原料药体积的5倍)，提取2次，每次I天，过滤，同时收集挥发油，合并滤液，加入有机溶剂(乙酸乙酯或石油醚-60)萃取，然后浓缩成浸膏与挥发油合并，即得枳壳醇提取物，提取率约30%左右。
[0065](2)将步骤(I)得到的枳壳醇提取物与常规辅料制成片剂或胶囊剂或颗粒剂。
[0066]实施例6
[0067]本发明药物组合物的止咳药理学研究
[0068]1、实验动物:NIH小鼠，雌雄各半，清洁级标准，共40只，按体重大小排序，选用体重18~22g的健康动物，随机分成四组，每组10只。设阴性对照，阳性对照，枳实水提取物，枳壳水提取物等实验组。
[0069]2、样品来源与配制:
[0070](I)实施例1制备得到的药物组合物:枳实水提取物水溶液(相当于生药含量350mg/ml,给药剂量相当于生药3500mg/kg体重)。
[0071](2)实施例2制备得到的药物组合物:枳壳水提取物水溶液(相当于生药含量350mg/ml,给药剂量相当于生药3500mg/kg体重)。
[0072](3)美沙芬:片剂，美沙芬含量为15mg/片。取2片溶解于20毫升生理盐水中，制成悬液，浓度为3mg/ml,剂量为30mg/kg体重。
[0073](4)生理盐水(氯化钠注射液)，NaCl含量0.9%。
[0074]3、实验方法:(浓氨水喷雾法)
[0075]小鼠灌胃I小时后，开始接受浓氨水喷雾。按一定时间喷入浓氨水气雾，喷雾结束，立即取出小鼠，观察有无咳嗽反应。观察一分钟内咳嗽次数，若I分钟内出现3次以上典型咳嗽动作(腹肌收缩或缩胸，同时张大嘴，有时可有咳声)者，算作“有咳嗽”。否则算作“无咳嗽”。
[0076]4、实验过程:
[0077]用序贯法(上下法)求出引起半数小鼠咳嗽的喷雾时间(EDT5tl)15计算R值，若R值大于130%，说明药物有止咳作用。若R值大于150%，则表明有显著的止咳作用。计算公式如下:
[0078]EDT50=log_1c/n (式中η为动物数,c为rx值的总和，r为每剂量组的动物数，x为
剂量(即喷雾时间)的对数。)
[0079]
R =金歷?||.翌，X100%
对照组的EDT50
[0080]5、实验结果[0081]经统计，枳实和枳壳提取物且半数咳嗽时间及止咳效果见下表1。
[0082]本发明的实施例1枳实水提取物和实施例2枳壳水提取物，灌胃给药对刺激小鼠引起咳嗽的耐受时间比较，实施例1枳实水提取物和实施例2枳壳水体物对小鼠耐受时间有显著延长，在统计学上有显著差异。
[0083]表1各样品的止咳效果
[0084]
给药則量
EDTm) R位止啵
组别(mg生药
(秒)(%) 效果
量 /kg)
阴性对照组:26.68::~
阳性对照组
1562.09 225.42 显效
(氢溴酸右美沙芬)
权实水提取物组(实 施#1 I得
350055.63 204.28 显效
到的药物组合物)
枳壳水提取物组(实施例1得
350055.45 203.76 显效
到药物组合物)
[0085]实施例7
[0086]不同给药剂量的止咳药理学研究
[0087]1、实验动物:NIH小鼠，雄性，体重18.0-23.lg，清洁级标准，共75只。随机分成五组，每组15只。设阴性对照，阳性对照和枳实水提取物的高、中、低三个剂量组。
[0088]2、样品来源与配置:
[0089](I)实施例1制备得到药物组合物:枳实水提取物水溶液，折合生药含量为350mg/ml ο
[0090](2)高剂量组:实施例1的药物组合物直接给药(相当于生药含量350mg/ml，给药剂量相当于生药3500mg.kg体重)。
[0091](3)中剂量组:将实施例1的药物组合物，加生理盐水，按1:2稀释后给药(相当于生药含量117mg/ml,给药剂量相当于生药1167mg/kg体重)。
[0092](4)低剂量组:将实施例1的药物组合物，加生理盐水，按1:8稀释，稀释后给药(相当于生药含量38.9mg/ml,给药剂量相当于生药389mg/kg体重)。
[0093](5)阳性物采用美沙芬:片剂，美沙芬含量为15mg/片。取2片溶解于20毫升生理盐水中，制成悬液，浓度为3mg/ml,剂量为30mg/kg体重。
[0094]3、实验方法:同实施例6。
[0095]4、实验结果:[0096]经统计，各剂量组半数咳嗽时间及止咳效果见下表2。
[0097]表2枳实水提浸膏的止咳效果
[0098]
【权利要求】
1.一种枳实或枳壳提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤:将枳实或枳壳全果粉碎，水提或醇提1-3次，同时收集挥发油，过滤合并滤液，加入或不加入有机溶剂萃取，然后浓缩成浸膏与挥发油合并，即得枳实或枳壳提取物。
2.根据权利要求1所述的枳实或枳壳提取物的制备方法，其特征在于，所述水提过程中水的用量为枳实或枳壳原料药体积的3-20倍；所述醇提过程乙醇作为溶剂，所述乙醇的用量为枳实或枳壳原料药体积的3-20倍。
3.根据权利要求2所述的枳实或枳壳提取物的制备方法，其特征在于，所述水提过程中水的用量为枳实或枳壳原料药体积的5-8倍；所述醇提过程乙醇作为溶剂，所述乙醇的用量为枳实或枳壳原料药体积的5-15倍。
4.根据权利要求2或3所述的枳实或枳壳提取物的制备方法，其特征在于，所述乙醇为无水乙醇或体积浓度为60-90%的乙醇溶液。
5.根据权利要求1-3任一项所述的枳实或枳壳提取物制备方法方法，其特征在于，所述有机溶剂为氯仿、乙酸乙酯或石油醚，所述石油醚为石油醚-30、石油醚-60或石油醚-90。
6.由权利要求1-5任一项所述制备方法得到的枳实或枳壳提取物。
7.权利要求1-5任一项所述制备方法得到的枳实或枳壳提取物在制备治疗止咳化痰的药物组合物中的应用。
8.一种具有止咳化痰功效的药物组合物，其特征在于，其活性成分包括权利要求1-5任一项所述制备方法得到的枳实和/或枳壳提取物。
9.根据权利要求8所述的具有止咳化痰功效的药物组合物，其特征在于，该药物组合物的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒 剂、口服液或气雾剂。
【文档编号】A61K36/752GK103463257SQ201310350008
【公开日】2013年12月25日 申请日期:2013年8月12日 优先权日:2013年8月12日
【发明者】白杨, 刘小蓉 申请人:中国科学院广州生物医药与健康研究院