一种用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂及其制备方法，属于兽用中医药【技术领域】。该中草药微生态制剂主要由以下原料制备而成：原料药以重量份数计为：白头翁1?10份、黄连3?20份、黄柏5?15份、秦皮6?25份，菌液以体积分数计为：嗜酸乳杆菌菌液1?3份、粪肠球菌菌液1?6份、枯草芽孢杆菌菌液1?6份，菌液的总重量与原料药的总重量的比值为（1?5):(40?50)。上述中药与益生菌联用，在防治仔猪细菌性痢疾方面具有无抗药性、毒副作用小、不易产生有害残留等特点；益生菌能产生抗菌物质，并与有害细菌竞争生态位，抑制致病菌的生长繁殖，调整恢复肠道的菌群平衡，降低仔猪腹泻率，改善仔猪发育。
【专利说明】一种用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂及其制 备方法
【技术领域】
[0001] 本发明具体涉及一种用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂，以及该中草 药微生态制剂的制备方法，属于兽用中医药【技术领域】。
【背景技术】
[0002] 目前，因细菌感染引起的仔猪下痢十分常见，它包括由沙门氏菌感染引起的仔猪 副伤寒，由大肠杆菌感染引起的仔猪白痢、黄痢，由C型魏氏梭菌感染引起的仔猪红痢。仔 猪出现细菌性痢疾不但直接增加药物投入，降低饲料利用率，使养猪成本大幅度上升，而且 严重影响仔猪的育成率，威胁仔猪健康。当前，临床防治仔猪细菌性痢疾常用抗生素类药 品，但抗生素易产生耐药性，且仔猪胃肠功能不全，其治疗效果并不理想。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是提供一种用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂。
[0004] 同时，本发明还提供一种用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂的制备方 法。
[0005] 为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：
[0006] -种用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂，主要由以下原料制备而成： 原料药以重量份数计为：白头翁1?10份、黄连3?20份、黄柏5?15份、秦皮6?25份， 菌液以体积分数计为：嗜酸乳杆菌菌液1?3份、粪肠球菌菌液1?6份、枯草芽孢杆菌菌 液1?6份，菌液的总重量与原料药的总重量的比值为（1?5) : (40?50)。
[0007] 优选的，一种用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂，主要由以下原料制 备而成：原料药以重量份数计为：白头翁6份、黄连3份、黄柏5份、秦皮6份，菌液以体积分 数计为：嗜酸乳杆菌菌液1份、粪肠球菌菌液3份、枯草芽孢杆菌菌液2份，菌液的总重量与 原料药的总重量的比值为3:50。
[0008] 所述的嗜酸乳杆菌菌液的浓度为0. 5 X 108?1. 0 X 108CFU/ml。
[0009] 所述的粪肠球菌菌液的浓度为0. 5 X 108?1. 0 X 108CFU/ml。
[0010] 所述的枯草芽孢杆菌菌液的浓度为0. 5X 108?1. OX 108CFU/ml。
[0011] 各原料药功效简述如下：
[0012] 白头翁：为毛茛科白头翁属植物白头翁的根；含有三萜化合物如白头翁素、白桦 脂酸、3-氧代脂酸、白头翁皂苷A、B、C、D等多种有效成分；性味苦、寒，归胃、大肠经；能清 热解毒、凉血止痢、燥湿杀虫；主治赤白痢疾、鼻衄、血痔、寒热温疟、瘰疬、湿疹痈疮、眼目赤 痛等；现代药理学证明白头翁具有抗病原微生物、抗阿米巴原虫、抗其他病原体、抗肿瘤、抗 炎及增强免疫功能等作用。
[0013] 黄连：为毛根科黄连属植物黄连、三角叶黄连或云南黄连的根茎；含有生物碱类 如黄连碱、黄柏碱等多种活性成分；黄连性味苦，寒，归心、肝、胃、大肠经；能清热泻火，燥 湿，解毒；主治热病邪入心经之高热，烦躁，湿热胸痞，泄泻，痢疾，心火亢盛之心烦失眠，胃 热呕吐，消谷善饥，肝火目赤肿痛，以及热毒疮疡，疔毒走黄，牙龈肿痛，口舌生疮，痔血，湿 疹，烫伤等；现代药理学证明黄连对循环系统、神经系统产生影响，还具有抗微生物、抗原 虫、抗溃疡、抗病毒、抗炎、抗肿瘤、降血糖、抑制血小板聚集等作用。
[0014] 黄柏：为芸香科黄檗属植物黄皮树或黄檗的树皮；含有生物碱类如小檗碱、黄柏 碱、木兰花碱、药根碱等，还含有柠檬苦素、黄柏酮、菜油留醇、豆留醇等多种有效成分；性味 苦、寒，归肾、膀胱、大肠经；能清热燥湿、泻火解毒；主治湿热痢疾、泄泻、黄疸、骨蒸劳热、 口舌生疮、目赤肿痛、痈疽疮毒等；现代药理学证明黄柏具有抗病原微生物、解热和抗炎症、 抗血小板聚集等功效，对心血管系统、消化系统和中枢肾经系统具有促进作用等。
[0015] 秦皮：为木犀科白蜡树属植物大叶涔、尖叶涔、白蜡树和宿柱涔的树皮；含有马栗 树皮苷、马栗树皮素，还含有香豆素类如秦皮乙素、秦皮素及生物碱等多种活性成分；性味 苦、涩，寒，归肝、胆、大肠经；能清热燥湿、清肝明目；主治湿热泻痢、目赤肿痛、肺热气喘咳 嗽等；现代药理学证明秦皮具有抗菌、止咳祛痰作用等。
[0016] 一种用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂，可以采用常规方法制备。本 发明仅提供一种具体的制备方法，包括以下步骤：
[0017] (1)按照重量份数准确取白头翁、黄连、黄柏和秦皮，烘干后粉碎、过筛，再加水煎 煮3次，合并3次煎液，滤过得药液备用；
[0018] (2)按照体积份数准确取嗜酸乳杆菌菌液、粪肠球菌菌液和枯草芽孢杆菌菌液，混 匀后根据菌液总量与原料药总量之间的比值，将混合菌液加入到步骤（1)的药液中，在密闭 条件下厌氧发酵，发酵产物经冷冻干燥即得。
[0019] 所述步骤（1)中的烘干温度为60?80°C。
[0020] 所述步骤（1)中的过筛为过60?100目筛。
[0021] 所述步骤（1)中加水煎煮为每次煎煮加5?6倍量的水，煎煮1?2小时。
[0022] 所述步骤（2)中嗜酸乳杆菌菌液的制备方法为：先将嗜酸乳杆菌接种于斜面培养 基中，将斜面培养基上产生的悬浮液加入到MRS液体培养基中扩大培养，至对数生长期时 菌液的浓度为〇. 5X 108?1. OX 108CFU/ml即得。
[0023] 所述步骤（2)中粪肠球菌菌液的制备方法为：先将粪肠球菌接种于斜面培养基 中，将斜面培养基上产生的悬浮液加入到MRS液体培养基中扩大培养，至对数生长期时菌 液的浓度为〇. 5X 108?1. OX 108CFU/ml即得。
[0024] 所述步骤（2)中枯草芽孢杆菌菌液的制备方法为：先将枯草芽孢杆菌接种于斜面 培养基中，将斜面培养基上产生的悬浮液加入到LB液体培养基中扩大培养，至对数生长期 时菌液的浓度为〇. 5X 108?1. OX 108CFU/ml即得。
[0025] 所述步骤（2)中厌氧发酵的温度为30?37°C，发酵时间为36?72小时。
[0026] 用法与用量：混饮，每100g兑水200kg，连用2?3天，为预防量；治疗量加倍。
[0027] 本发明的有益效果：
[0028] 本发明是在中兽医学卫气营血辩证理论方法的指导下，筛选出白头翁、黄连、黄 柏、秦皮共4味纯天然中草药，按照君臣佐使原则配伍组方。方中白头翁清血分热毒为主 药；黄连苦寒清湿热、厚肠胃，黄柏泻下焦湿热，两药共为清解凉血的辅佐药；秦皮性寒，味 苦而涩，具有收敛止痢之功，与上药相配，清热解毒，凉血止痢之效俱备，以使清热毒解，痢 止而后重自除。
[0029] 本发明采用采用嗜酸乳杆菌、粪肠球菌和枯草芽孢杆菌制备微生态制剂，其中嗜 酸乳杆菌能调整肠道菌群平衡，抑制肠道不良微生物的增殖，分泌抗生物素类物质如嗜酸 乳菌素、嗜酸杆菌素、乳酸菌素等，对肠道致病菌产生拮抗作用；粪肠球菌有利于改善肠道 内微生态平衡，防治动物肠道菌丛区系紊乱，还能分解蛋白质为小肽，合成B族维生素，增 强巨嗜细胞的活性，促进动物的免疫反应，提高抗体水平等；枯草芽孢杆菌能迅速消耗环 境中的游离氧，造成肠道低氧，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道pH 值，间接抑制其它致病菌生长。刺激动物免疫器官的生长发育，激活T、B淋巴细胞，提高免 疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高群体免疫力。三种益生菌联用可 通过动物消化道生物的竞争性排斥作用，抑制病原菌繁殖，阻止病原菌吸附于肠壁，促进其 排出体外；补充有益菌群，调整动物肠道菌群微生态平衡；发挥营养助消化作用，提高饲料 转化率，合成营养物质，促进动物生长；还可通过增强非特异性免疫功能来预防疾病，提高 机体免疫力；抑制肠道内氨及胺等毒性物质的产生，改善环境卫生，净化环境。
[0030] 本发明将上述4味纯天然中草药与三种益生菌复配制备微生态制剂，可以在动物 体内产生多种水解酶，促进蛋白、淀粉、脂肪和半纤维素的分解，有利于饲料中营养物质的 消化吸收，同时可合成营养物质以及一些未知促生长因子参与新陈代谢，促进动物生长。将 二者联用来防治仔猪细菌性痢疾，标本兼治。不仅可以抑制病原微生物的生长，维持肠道生 态平衡，有效防治断乳仔猪的腹泻，还能提高仔猪成活率，促使机体产生抗菌活性物质，增 强免疫功能，提高仔猪的抗应激能力，同时促进仔猪肠道发育，增强消化酶的活性，提高采 食量，提高日增重，降低料重比。
[0031] 本发明制备的中草药微生态制剂在养猪生产中可阶段性或长期的通过饮水或拌 料的方式用药，有利于促进养猪业的健康发展与保障动物性食品的安全。
[0032] 本发明制备微生态制剂的方法简单、易操作，使用方便，成本低，适于大规模生产 及推广应用。
【具体实施方式】
[0033] 下述实施例仅对本发明作进一步详细说明，但不构成对本发明的任何限制。
[0034] 实施例1
[0035] 本实施例中用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂，由以下原料制备而 成：原料药以重量份数计为：白头翁1份、黄连20份、黄柏5份、秦皮25份，菌液以体积分数 计为：嗜酸乳杆菌菌液1份、粪肠球菌菌液6份、枯草芽孢杆菌菌液1份，菌液的总重量与原 料药的总重量的比值为1:50。
[0036] 本实施例中用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂的制备方法，包括以下 步骤：
[0037] (1)按照重量份数准确取白头翁、黄连、黄柏和秦皮，60°C烘干后粉碎，过60目筛， 再加水煎煮3次，每次煎煮加5倍量的水，煎煮1. 5小时，合并3次煎液，滤过得药液备用；
[0038] (2)按照体积份数准确取嗜酸乳杆菌菌液、粪肠球菌菌液和枯草芽孢杆菌菌液，混 匀后根据菌液总量与原料药总量之间的比值，将混合菌液加入到步骤（1)的药液中，在密闭 条件下厌氧发酵，发酵的温度为30°C，发酵时间为72小时，将发酵产物冷冻干燥即得。
[0039] 所述步骤（2)中嗜酸乳杆菌菌液、粪肠球菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液的制备方法 为：先将嗜酸乳杆菌、粪肠球菌、粪肠球菌分别接种于各自的斜面培养基中，将各个斜面培 养基上产生的悬浮液依次加入到MRS液体培养基、MRS液体培养基、LB液体培养基中扩大培 养，至对数生长期时菌液的浓度分别为0. 5X 108?1. OX 108CFU/ml即得。
[0040] 用法与用量：混饮，每l〇〇g兑水200kg，连用2?3天，为预防量；治疗量加倍。
[0041] 实施例2
[0042] 本实施例中用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂，由以下原料制备而 成：原料药以重量份数计为：白头翁6份、黄连3份、黄柏5份、秦皮6份，菌液以体积分数计 为：嗜酸乳杆菌菌液1份、粪肠球菌菌液3份、枯草芽孢杆菌菌液2份，菌液的总重量与原料 药的总重量的比值为3:50。
[0043] 本实施例中用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂的制备方法，包括以下 步骤：
[0044] (1)按照重量份数准确取白头翁、黄连、黄柏和秦皮，70°C烘干后粉碎，过100目 筛，再加水煎煮3次，每次煎煮加6倍量的水，煎煮2小时，合并3次煎液，滤过得药液备用；
[0045] (2)按照体积份数准确取嗜酸乳杆菌菌液、粪肠球菌菌液和枯草芽孢杆菌菌液，混 匀后根据菌液总量与原料药总量之间的比值，将混合菌液加入到步骤（1)的药液中，在密闭 条件下厌氧发酵，发酵的温度为35°c，发酵时间为50小时，将发酵产物冷冻干燥即得。
[0046] 所述嗜酸乳杆菌菌液、粪肠球菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液的制备方法同上。
[0047] 用法与用量：混饮，每100g兑水200kg，连用2?3天，为预防量；治疗量加倍。
[0048] 实施例3
[0049] 本实施例中用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂，由以下原料制备而 成：原料药以重量份数计为：白头翁10份、黄连3份、黄柏15份、秦皮6份，菌液以体积分数 计为：嗜酸乳杆菌菌液3份、粪肠球菌菌液1份、枯草芽孢杆菌菌液6份，菌液的总重量与原 料药的总重量的比值为1:8。
[0050] 本实施例中用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂的制备方法，包括以下 步骤：
[0051] (1)按照重量份数准确取白头翁、黄连、黄柏和秦皮，80°C烘干后粉碎，过80目筛， 再加水煎煮3次，每次煎煮加5倍量的水，煎煮1. 5小时，合并3次煎液，滤过得药液备用；
[0052] (2)按照体积份数准确取嗜酸乳杆菌菌液、粪肠球菌菌液和枯草芽孢杆菌菌液，混 匀后根据菌液总量与原料药总量之间的比值，将混合菌液加入到步骤（1)的药液中，在密闭 条件下厌氧发酵，发酵的温度为37°C，发酵时间为36小时，将发酵产物冷冻干燥即得。
[0053] 所述嗜酸乳杆菌菌液、粪肠球菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液的制备方法同上。
[0054] 用法与用量：混饮，每100g兑水200kg，连用2?3天，为预防量；治疗量加倍。
[0055] 对比例1
[0056] 本对比例中用于防治仔猪细菌性痢疾的中药组合物，由以下重量份数的原料药组 成：白头翁6份、黄连3份、黄柏5份、秦皮6份。制备方法包括以下步骤：按照重量份数准 确取各味原料药，粉碎后混匀、过1〇〇目筛即得粉剂。
[0057] 用法与用量：混饲，每100kg饲料拌药1kg，自由采食，连用3?5天。
[0058] 试验例
[0059] 试验动物：随机选取某养殖场5日龄仔猪150头，随机分为5组，每组30头。
[0060] 试验组别：试验组1?3依次饲喂实施例1?3制备的中草药微生态制剂，混饮， 每l〇〇g粉剂兑水200kg ;对照组饲喂对比例1制备的粉剂，混饮，每100g粉剂兑水200kg ; 空白对照组饲喂常规饮用水。
[0061] 试验方法：对150头5日龄仔猪按照分组依次饲喂添加实施例1?3制备粉剂的 饮用水、添加对比例1制备粉剂的饮用水以及常规饮用水，定时定量连续饲喂10天，每天观 察仔猪临床变化。10天后人工攻毒(致病性大肠杆菌和沙门氏菌)，攻毒后再定时定量连续 饲喂20天，记录发病数、死亡数和存活数，计算发病率、死亡率和存活率，试验结果详见下 表1。
[0062] 疗效判断标准：
[0063] 发病：试验中仔猪出现病症，腹泻，拉黄色、白色稀粪，精神萎靡不振；
[0064] 死亡：试验结束仔猪发病死亡；
[0065] 存活：试验期间出现症状，试验结束仔猪恢复如常。
[0066] 表1各处理组的试验结果
[0067]
【权利要求】
1. 一种用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂，其特征在于：主要由以下原料 制备而成：原料药以重量份数计为：白头翁1?10份、黄连3?20份、黄柏5?15份、秦皮 6?25份，菌液以体积分数计为：嗜酸乳杆菌菌液1?3份、粪肠球菌菌液1?6份、枯草 芽孢杆菌菌液1?6份，菌液的总重量与原料药的总重量的比值为（1?5) : (40?50)。
2. 根据权利要求1所述的用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂，其特征在 于：主要由以下原料制备而成：原料药以重量份数计为：白头翁6份、黄连3份、黄柏5份、 秦皮6份，菌液以体积分数计为：嗜酸乳杆菌菌液1份、粪肠球菌菌液3份、枯草芽孢杆菌菌 液2份，菌液的总重量与原料药的总重量的比值为3:50。
3. -种如权利要求1或2所述的用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂的制备 方法，其特征在于：包括以下步骤： (1) 按照重量份数准确取白头翁、黄连、黄柏和秦皮，烘干后粉碎、过筛，再加水煎煮3 次，合并3次煎液，滤过得药液备用； (2) 按照体积份数准确取嗜酸乳杆菌菌液、粪肠球菌菌液和枯草芽孢杆菌菌液，混匀后 根据菌液总量与原料药总量之间的比值，将混合菌液加入到步骤（1)的药液中，在密闭条件 下厌氧发酵，发酵产物经冷冻干燥即得。
4. 根据权利要求3所述的用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂的制备方法， 其特征在于：所述步骤（1)中的烘干温度为60?80°C。
5. 根据权利要求3所述的用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂的制备方法， 其特征在于：所述步骤（1)中的过筛为过60?100目筛。
6. 根据权利要求3所述的用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂的制备方法， 其特征在于：所述步骤（1)中加水煎煮为每次煎煮加5?6倍量的水，煎煮1?2小时。
7. 根据权利要求3所述的用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂的制备方法， 其特征在于：所述步骤（2)中嗜酸乳杆菌菌液的制备方法为：先将嗜酸乳杆菌接种于斜面 培养基中，将斜面培养基上产生的悬浮液加入到MRS液体培养基中扩大培养，至对数生长 期时菌液的浓度为〇. 5X 108?1. OX 108CFU/ml即得。
8. 根据权利要求3所述的用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂的制备方法， 其特征在于：所述步骤（2)中粪肠球菌菌液的制备方法为：先将粪肠球菌接种于斜面培养 基中，将斜面培养基上产生的悬浮液加入到MRS液体培养基中扩大培养，至对数生长期时 菌液的浓度为〇. 5X 108?1. OX 108CFU/ml即得。
9. 根据权利要求3所述的用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂的制备方法， 其特征在于：所述步骤（2)中枯草芽孢杆菌菌液的制备方法为：先将枯草芽孢杆菌接种于 斜面培养基中，将斜面培养基上产生的悬浮液加入到LB液体培养基中扩大培养，至对数生 长期时菌液的浓度为〇. 5X 108?1. OX 108CFU/ml即得。
10. 根据权利要求3所述的用于防治仔猪细菌性痢疾的中草药微生态制剂的制备方 法，其特征在于：所述步骤（2)中厌氧发酵的温度为30?37°C，发酵时间为36?72小时。
【文档编号】A61P1/12GK104208240SQ201310463380
【公开日】2014年12月17日 申请日期:2013年9月30日 优先权日:2013年9月30日
【发明者】陈建晖, 李凤娟, 李建正 申请人:郑州后羿制药有限公司