采用固相微萃取-气质联用筛查样本中毒性物质的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于分析化学与材料科学领域，具体设及一种采用固相微萃取-气质联用 筛查样本中毒性物质的方法。
【背景技术】
[0002] 法庭科学领域通常需要对新鲜器官组织、血液、体液、腐尸、腐泥等多种样本中的 众多毒性物质进行检测，毒性物质范围包括农药、鼠药、医源性药物（例如安眠镇静药物、 镇痛药物、麻醉药物、抗生素等）、毒品、食品添加剂、中草药等。然而，该些样本成分较为复 杂，特别是所含有的油脂、色素、蛋白质、酶等杂质易对毒性物质的检测产生干扰，因此如何 有效去除样本中的杂质、高效提取样本中的目标毒物成为需要研究的课题之一。
[0003] 此外，由于样本的复杂性、检测目标的不确定性W及检测范围的广泛性，很难做到 有针对性地对样本中的毒性物质进行检测，因此样本中毒性物质的筛查至关重要。然而，各 种毒性物质的理化性质、结构特点、色谱行为等性质各异，所要求的分析检测条件各异，因 此如何在同一条件下对样本中的多种毒性物质进行有效分离、灵敏检测成为目前法庭科学 领域毒物筛查与分析的难点及研究热点。
[0004] 固相微萃取（SolodPhaseMicro-Extration，SPME)是在固相萃取基础上发展起 来的一种新的萃取分离技术，与液-液萃取和固相萃取相比，具有操作时间短，样品量小， 无需萃取溶剂，适于分析挥发性与非挥发性物质。例如，公开号为CN102539609A的中国 专利公开了一种瓶内甲醋化-顶空固相微萃取-气相色谱质谱联用测定啤酒中游离脂肪酸 的检测方法，其利用固相微萃取纤维富集挥发性成分，并采用选择性和灵敏性良好的质谱 检测器进行检测，使游离脂肪酸的检测范围扩展到C8 ;0~C22 ;0。然而，该方法主要适用 于啤酒、发酵液、饮料、牛奶等液体样品，并且分析对象为仅针对结构相似的脂肪酸类物质， 其无法实现对样本中多种不同结构的毒性物质的快速筛查。
【发明内容】
[0005] 本发明提供一种采用固相微萃取-气质联用筛查样本中毒性物质的方法，用于解 决现有技术方法无法对样本中多种不同结构的毒性物质进行快速筛查等技术缺陷。
[0006] 本发明提供一种采用固相微萃取-气质联用筛查样本中毒性物质的方法，包括如 下步骤：
[0007] 采用水溶性有机溶剂和去离子水的混合溶液对样本进行提取，制得提取液；
[0008] 对所述提取液进行离屯、，收取上清液并除去上清液中的有机溶剂，再次离屯、并收 取上清液，制得样本液；
[0009] 将PDMS萃取头插入所述样本液中进行固相微萃取，萃取后取出PDMS萃取头，插入 气质联用仪中进行脱附，脱附样品随后进入色谱柱中进行GC-MS分析。
[0010] 在本发明中，所述PDMS萃取头指的是聚二甲基硅氧烷固相微萃取萃取头，所述 GC-MS分析指的是气相-质谱分析。在一实施方式中，所述水溶性有机溶剂为丙酬，并且所 述混合溶液中水溶性有机溶剂与去离子水的体积比为4 : 1。本发明人经大量研究发现： 采用体积比为4 : 1的丙酬和去离子水的混合溶液对样本进行提取时，不仅可W有效地去 除样本中的油脂、色素、蛋白等多种杂质，从而排除其对检测的不利影响，此外还能够在最 大范围内使大量结构不同的目标检测物质溶出，从而在检测目标不确定、检测范围广泛时 能够实现对样本中的多种毒性物质的快速筛查。混合溶液中水溶性有机溶剂体积过少可能 会导致某些目标检测物质无法溶出，而体积过大不利于对后续对有机溶剂的去除，较佳的 体积比为4 : 1。
[0011] 本发明对所述样本不作严格限制，特别是可W为器官组织、血液、体液、腐尸、腐泥 等生物样本。在一实施方式中，所述样本可W为体液或血液等液态样本，并且可W控制所 述混合溶液与所述样本的体积比为（1.5-2. 5) : 1;此外，本发明对所述提取的温度和时间 不作严格限制，其可W根据样本的种类、目标检测物质等进行确定，提取温度例如可W为室 温，提取时间例如可W为1-lOmin。
[0012] 在另一实施方式中，所述样本还可W为器官组织等固态样本，所述提取为超声波 提取，超声波提取有利于固态样本中目标检测物质的释放和溶出；并且可W控制所述混合 溶液与所述样本的体积/质量比为（1.5-2. 5) : 1，例如样本质量为Ig时，混合溶液的体积 为1. 5-2. 5mL。此外，超声波提取的温度可W为室温，提取时间可W为20-40min。
[0013] 本发明对上清液中有机溶剂的去除方式不作严格限定，例如可W采用温度为 40-60°C气体流除去上清液中的有机溶剂，所述气体流为空气流或氮气流，优选为45°C的 氮气流。进一步地，可W控制除去有机溶剂后的上清液的体积与样本的质量或体积比为 (0.5-1) : 1，例如样本体积为2mL时，除去有机溶剂后的上清液的体积可控制在1-2111以较 佳的为ImU从而保证无有机溶剂残留而影响目标毒性物质的检测。进一步地，再次离屯、并 收取上清液后，加去离子水稀释，去离子水稀释的稀释倍数可W为2-10倍。
[0014] 在一实施方式中，可W调节所述样本液的抑值为6. 5-7. 5后在室温下进行所述固 相微萃取，在该抑值下进行固相微萃取有利于在最大范围内使大量结构不同的目标检测 物质溶出；并且，可W控制所述固相微萃取的时间为20-40min，所述脱附的时间为l-5min。
[0015] 在本发明中，进行所述GC-MS分析时的色谱条件为出P-5MS、HP-1MS或HP-35MS 色谱柱，30mX0. 25mmX0. 25ym;进样口温度280°C;柱温；起始温度80°C，保持2min，W 20°C/min的速率升至280°C，保持16. 5min;载气为氮气，流速1血/min,分流比10 : 1。起 始温度过低时毒性物质的检测灵敏度降低，起始温度过高时部分毒性物质保留时间短，易 受干扰而不易准确检出，较佳的起始温度为80°C。
[0016] 进一步地，进行所述GC-MS分析时的质谱条件为：传输线温度250°C;四极杆温度 200°C;检测器电压1.IkV;离子化方式；EI源；溶剂延迟时间3min;扫描模式；全扫描模式， 扫描质量范围50-600m/z。
[0017] 在上述色谱条件下进行检测有利于同时在最大范围内检出大量结构不同的目标 检测物质，并且提高检测的灵敏度，从而有利于实现对样本中多种不同结构的毒性物质的 快速筛查。
[0018] 本发明对所述毒性物质的具体种类及成分不作严格限制，特别是所述毒性物质可 化选自农药、鼠药、医源性药物、毒品、食品添加剂和中草药中的一种或多种，尤其是所述毒 性物质包括农药、鼠药、医源性药物和毒品。
[0019] 进一步地，所述毒性物质选自异丙威、灭多威、仲了威、甲拌磯、快喃丹、五氯硝基 苯、二嗦磯、百菌清、特草灵、己草胺、敌碑、甲草胺、甲基对硫磯、甲蒙威、马拉硫磯、毒死婢、 对硫磯、水胺硫磯、=氯杀蛾醇、杀扑磯、了草胺、硫丹、唾嗦酬、=挫硫磯、氯氣化氧己酸醋、 胺菊醋、联苯菊醋、甲氯菊醋、氣氯氯菊醋、氯氯菊醋、奎禾灵、氯戊菊醋、毒鼠强、敌敌畏、芬 氣拉明、己比妥、布洛芬、非那西了、异戊己比妥、戊己比妥、杜冷了、司可己比妥、了卡因、氯 胺酬、利多卡因、曲马多、蒙普生、扑尔敏、美沙酬、舍曲林、阿米替林、可卡因、多虑平、布比 卡因、异丙嗦、保泰松、地芬巧多、地西泮、氯丙嗦、氯氮卓、多虑平、硝苯地平、咪达挫仑、酬 替芬、=氣拉嗦、芬太巧、氯氮平、艾司挫仑和阿普挫仑中的一种或多种。特别是，所述毒性 物质包括上述物质中的30种W上；尤其是，所述毒性物质包括上述物质中的60种W上。
[0020] 本发明的实施，至少具有W下优势：
[0021] 1、本发明的方法在采用有机溶剂和去离子水的混合溶液对样本进行提取后再进 行固相微萃取，不仅可W有效地去除样本中的多种杂质，从而排