食用土当归总有机酸提取纯化工艺的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种食用土当归总有机酸提取纯化工艺，属于制药【技术领域】。本发明解决的技术问题是提高食用土当归总有机酸的提取率和提高食用土当归总有机酸的纯度。本发明工艺依次进行如下步骤操作：先采用乙醇回流提取，加入NaCl进行盐析，再加入低价（极）性有机溶剂萃取，加入KOH进行碱化处理，加浓盐酸进行酸沉，加入NaCl进行盐析，再加入低价性有机溶剂萃取，最后进行浓缩减压干燥，即得到食用土当归总有机酸提取物。本发明采用最佳的食用土当归有机酸的提取纯化方案，能最大程度地提取出食用土当归中的总有机酸，提高了药材使用率，节约成本；对于提取环境无需特殊要求，提取纯化工艺稳定，操作简单，适用于工业化大生产。
【专利说明】食用土当归总有机酸提取纯化工艺
【技术领域】
[0001]本发明属于药物【技术领域】，具体涉及一种食用土当归总有机酸提取物纯化工艺。【背景技术】
[0002]食用土当归为多年生草本植物，是五加科惚木属植物，生于海拔1300~2500m的山坡草丛或林荫下，分布于湖北、安徽、江苏、广西、江西、福建和台湾等地区。本品是一种药食两用的传统中药，也是商品九眼独活的主流品种，具有祛风和血、解热镇痛、疏风补虚、利尿消肿之功效，主要用于治疗风湿痹痛、腰膝痠软、头痛目眩等证。现代药物化学研究表明食用土当归含有丰富的二萜羧酸、烟酸、丁二酸、香草酸、二十四烷酸及棕榈酸当归酸、巴豆酸、棕桐酸、硬脂酸、油酸及亚麻酸等有机酸类化合物，现代药理学研究表明这类有机酸化合物具有镇痛镇静等多种生物活性。
[0003]目前，食用土当归的有机酸的作用原理并不十分明确，对于当归的有机酸活性作用原理有待进一步的研究，在研究过程中需要对食用土当归的有机酸进行提取、分离及纯化。中国专利申请201310016091.3公布了一种食用土当归总有机酸提取工艺，该工艺公布了一种提取总有机酸的最佳技术方案，但是该专利申请未公布总有机酸提取物的分离纯化方法。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种最佳的食用土当归有机酸提取纯化方法，该方法能最大程度地提取出食用土当归中的总有机酸，并进行纯化，提高药材使用率，该方法工艺稳定、适用于工业化大生产。
[0005]本发明的目的是通过以下技术方案来实现的:
[0006]食用土当归总有机酸提取纯化工艺，它包括以下步骤:
[0007]S1:称取食用土当归粗粉，加入重量为食用土当归粗粉8倍量的95%乙醇加热回流提取2次，每次lh，抽滤，合并滤液，减压回收乙醇，得到食用土当归乙醇提取物。
[0008]S2:称取食用土当归乙醇提取物，用重量为食用土当归乙醇提取物15~20倍量的水溶解，得到食用土当归乙醇提取物样品溶液；
[0009]S3:在食用土当归乙醇提取物样品溶液中加入NaCl使其质量分数达0.30%~0.50%,再加入重量为食用土当归乙醇提取物样品溶液2~4倍量的低价性有机溶剂，萃取2~5次，合并萃取液；
[0010]S4:将S3步骤中的萃取液浓缩至食用土当归乙醇提取物15~20倍量的体积，用质量分数为0.5%~1.0%的KOH溶液等体积萃取2~4次，合并碱水层，加盐酸调PH至I~2，室温静置，加入NaCl使其质量分数达到0.50%,再用等体积低价性有机溶剂萃取2~4次，合并低价性有机溶剂；
[0011]S5:将S4步骤的低价性有机溶剂减压回收，得到食用土当归总有机酸提取物流浸膏，将流浸膏置减压干燥器中常温干燥，得到食用土当归总有机酸提取物。[0012]优选地，所述的S2步骤中用重量为食用土当归乙醇提取物的20倍量水溶解。
[0013]优选地，所述的S3步骤中将食用土当归乙醇提取物样品溶液用2倍量石油醚萃取4次。
[0014]优选地，所述的S4步骤中KOH溶液的浓度为1.0%。
[0015]优选地，所述的低价性有机溶剂为石油醚。
[0016]进一步优选提取纯化步骤为:
[0017]S1:称取食用土当归粗粉，加入重量为食用土当归粗粉8倍量的95%乙醇加热回流提取2次，每次lh，抽滤，合并滤液，减压回收乙醇，得到食用土当归乙醇提取物；
[0018]S2:称取食用土当归乙醇提取物，用重量为食用土当归乙醇提取物20倍量的水溶解，得到食用土当归乙醇提取物样品溶液；
[0019]S3:在食用土当归乙醇提取物样品溶液中加入NaCl使其质量分数达0.50%,再加入重量为食用土当归乙醇提取物样品溶液2倍量的石油醚，萃取4次，合并萃取液；
[0020]S4:将S3步骤中的萃取液浓缩至食用土当归乙醇提取物20倍量的体积，用浓度为
1.0%的KOH溶液等体积萃取3次，合并碱水层，加盐酸调PH至1，室温静置，加入NaCl使其质量分数达到0.50%，再用等体积石油醚萃取3次，合并石油醚；
[0021]S5:将S4步骤的石油醚减压回收，得到食用土当归总有机酸提取物流浸膏，将流浸膏置减压干燥器中常温干燥，得到食用土当归总有机酸提取物。
[0022]本发明的优点在于:采用最佳的食用土当归有机酸含量的提取纯化方案，能最大程度地提取出土当归中的总有机酸，提高了药材使用率，并进行纯化，有利于宝贵的天然资源的综合利用，进而节约生产成本；对于提取环境无需特殊要求，提取纯化方法工艺稳定，操作简单、方便应用于实际生产。
[0023]下面通过实验进一步说明本发明的效果:
[0024]I提取工艺的研究
[0025]1.1配制供试品溶液
[0026]精密称取食用土当归乙醇提取物，用无水乙醇少量多次溶解，过滤，将滤液转移至100ml锥形瓶中，加入1.2g活性炭粉末，并置于75°C水浴中加热30min，取出，趁热过滤，滤液定量转移至100ml容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，得到供试品溶液；
[0027]1.2有机酸含量测定
[0028]采用酸碱滴定法测定:用25ml移液管精密吸取供试品溶液25ml于100ml锥形瓶中，加酚酞指示剂2滴，摇匀，用0.009336mol/L的氢氧化钠滴定液滴定，边滴加边振摇，至溶液由无色变为淡粉色且在30s内不褪色，即为滴定终点的到达，记录消耗氢氧化钠滴定液的体积，平行测定2次，同时作空白对照；以贝壳杉烯酸计，每Iml氢氧化钠滴定液相当于
2.82Img贝壳杉烯酸(C20H3002)，按以下公式计算有机酸含量:
[0029]
【权利要求】
1.食用土当归总有机酸提取纯化工艺，其特征在于:它包括以下步骤: 51:称取食用土当归粗粉，加入重量为食用土当归粗粉8倍量的95%乙醇加热回流提取2次，每次lh，抽滤，合并滤液，减压回收乙醇，得到食用土当归乙醇提取物； 52:称取食用土当归乙醇提取物，用重量为食用土当归乙醇提取物15~20倍量的水溶解，得到食用土当归乙醇提取物样品溶液； 53:在食用土当归乙醇提取物样品溶液中加入NaCl使其质量分数达0.30%~0.50%，再加入重量为食用土当归乙醇提取物样品溶液2~4倍量的低价性有机溶剂，萃取2~5次，合并萃取液； 54:将S3步骤中的萃取液浓缩至食用土当归乙醇提取物15~20倍量的体积，用质量分数为0.5%~1.0%的KOH溶液等体积萃取2~4次，合并碱水层，加盐酸调PH至I~2，室温静置，加入NaCl使其质量分数达到0.50%，再用等体积低价性有机溶剂萃取2~4次，合并低价性有机溶剂； 55:将S4步骤的低价性有机溶剂减压回收，得到食用土当归总有机酸提取物流浸膏，将流浸膏置减压干燥器中常温干燥，得到食用土当归总有机酸提取物。
2.根据权利要求1所述的食用土当归总有机酸提取纯化工艺，其特征在于:所述的S2步骤中用重量为食用土当归乙醇提取物的20倍量水溶解。
3.根据权利要求1所述的食用土当归总有机酸提取纯化工艺，其特征在于:所述的S3步骤中在食用土当归乙醇提取物样品溶液中加入加NaCl使其质量分数达0.50%。
4.根据权利要求1所述的食用土当归总有机酸提取纯化工艺，其特征在于:所述的S4步骤中KOH溶液的质量分数为1.0%。
5.根据权利要求1所述的食用土当归总有机酸提取纯化工艺，其特征在于:所述的低价性有机溶剂为石油醚。
6.根据权利要求1-5任一所述的食用土当归总有机酸提取纯化工艺，其特征在于:它包括如下步骤: 51:称取食用土当归粗粉，加入重量为食用土当归粗粉8倍量的95%乙醇加热回流提取2次，每次lh，抽滤，合并滤液，减压回收乙醇，得到食用土当归乙醇提取物； 52:称取食用土当归乙醇提取物，用重量为食用土当归乙醇提取物的20倍量水溶解，得到食用土当归乙醇提取物样品溶液； 53:在食用土当归乙醇提取物样品溶液中加入NaCl使其质量分数达0.50%，再加入重量为食用土当归乙醇提取物样品溶液2倍量的石油醚，萃取4次，合并萃取液； S4:将S3步骤中的萃取液浓缩至食用土当归乙醇提取物20倍量的体积，用浓度为1.0%的KOH溶液等体积萃取3次，合并碱水层，加盐酸调PH至1，室温静置，加入NaCl使其质量分数达到0.50%，再用等体积石油醚萃取3次，合并石油醚； S5:将S4步骤的石油醚减压回收，得到食用土当归总有机酸提取物流浸膏，将流浸膏置减压干燥器中常温干燥，得到食用土当归总有机酸提取物。
【文档编号】A61K36/25GK103494850SQ201310472558
【公开日】2014年1月8日 申请日期:2013年10月11日 优先权日:2013年7月24日
【发明者】彭腾, 杨菁, 凌智群 申请人:成都中医药大学