抗-pd-l1抗体及它们用于增强t细胞功能的用途
【专利摘要】本申请涉及抗-PD-L1抗体，编码它们的核酸，其治疗性组合物，以及它们用于增强T细胞功能从而上调细胞介导的免疫应答的用途和用于治疗T细胞功能障碍病症的用途，所述病症包括感染(例如急性的和慢性的)和肿瘤免疫。
【专利说明】抗-PD-L1抗体及它们用于增强T细胞功能的用途
[0001] 本申请是申请日为2009年12月8日、发明名称为"抗-PD-Ll抗体及它们用于增 强T细胞功能的用途"的中国专利申请No. 200980149532. 9的分案申请。
[0002] 相关申请
[0003] 本申请根据35USC 119 (e)要求2008年12月9日提交的美国临时申请号 61/121092的优先权的权益，其公开的全文通过引用并入本文。 发明领域
[0004] 本发明一般涉及免疫功能和涉及增强T细胞功能，包括上调细胞介导的免疫应 答，和涉及T细胞功能障碍病症的治疗。
[0005] 发明背景
[0006] 共刺激或向T细胞提供两种不同信号是通过抗原呈递细胞（APCs)对静息T淋 巴细胞的淋巴细胞活化的广泛接受的模型。Lafferty等，Aust. J. Exp. Biol. Med. Sci. (澳大利亚实验生物学和医学科学杂志）^:27-42(1975)。这种模型进一步提供从非 自身中辨别自身和免疫耐受。Bretscher等，Science (科学）1盟:1042-1049(1970)； Bretscher, P. A.，P. N. A. S. USA 並：185-190 (1999) Jenkins 等，J. Exp. Med.(实验医学杂 志）1迎:302-319 (1987)。在识别呈递在主要组织相容性复合物（MHC)环境中的异源抗原肽 之后，初次信号或抗原特异性信号通过T细胞受体（TCR)转导。次级或共刺激信号通过表达 在抗原呈递细胞（APCs)上的共刺激分子传递给T细胞，诱导T细胞促进克隆扩增、细胞因 子分泌和效应子功能。Lenschow等，Ann. Rev. Immunol.(免疫学年度综沭）14:233 (1996)。 没有共刺激时，T细胞不感受抗原刺激，不启动有效免疫应答，还可导致对异源抗原的衰竭 或耐受（exhaustion or tolerance) 〇
[0007] 简单的两-信号模型可能是过于简化了，因为TCR信号的强度实际上对T 细胞活化和分化具有定量影响。Viola等，Science(科学）^:104-106(1996)； Sloan-Lancaster, Nature (自然）: I56-I59 (I"3)。此外，如果 TCR 信号强度足够高， 即使在没有共刺激信号时也可发生T细胞活化。更重要的是，T细胞对正性的和负性的 (positive and negative)次级共刺激信号均接收。此类正性的和负性的信号的调节对最 大化对宿主的保护性免疫应答同时维持免疫耐受和防止自身免疫是重要的。负性次级信号 对诱导T细胞耐受似乎是必需的，而正性信号促进T细胞的活化。尽管简单的两-信号模 型仍然提供对幼稚淋巴细胞的有效解释，宿主的免疫应答是动态过程，也可将共刺激信号 提供给暴露于抗原的T细胞。
[0008] 共刺激的机制有治疗意义，因为已经显示对共刺激信号的操作提供了增强或终止 基于细胞的免疫应答的手段。最近，已经发现T细胞功能障碍或无反应性（anergy)与诱导 且持续的表达抑制性受体程序性死亡1多肽（PD-i)同时发生。因此，治疗性靶向ro-i和 其它通过与ro-ι相互作用传导信号的分子（如程序性死亡配体I (ro-Li)和程序性死亡配 体2(PD-L2))是强烈感兴趣的领域。已经提出抑制ro-Ll信号传导作为增强用于治疗癌 症（例如肿瘤免疫）和感染（包括急性和慢性（例如持续性）感染）的T细胞免疫力的手 段。然而，因为仍然需要对针对这种途径的靶标的最佳治疗进行商业化，存在重大的尚未满 足的医疗需求。
[0009] 发明概沭
[0010] 本申请提供抗-PD-Ll抗体，包括编码此类抗体的核酸和含有此类抗体的组合物， 以及提供它们用于增强T细胞功能从而上调细胞介导的免疫应答的用途和提供治疗T细胞 功能障碍病症，所述病症包括感染（例如急性的和慢性的）和肿瘤免疫。
[0011] 在一个实施方案中，本发明提供分离的重链可变区多肽，其包含HVR-Hl、HVR-H2 和HVR-H3序列，其中：
[0012] (a)所述 HVR-Hl 序列是 GFTFSX1SWIiKSEQ ID NO: 1);
[0013] (b)所述 HVR-H2 序列是 AWIX2PYGGSX3YYADSVKG(SEQ ID N0:2);
[0014] (c)所述 HVR-H3 序列是 RHWPGGFDY(SEQ ID N0:3);
[0015] 而且其中七是D或G ;X 2是S或L ;X 3是T或S。
[0016] 在一个具体方面中，乂1是D ;X 2是S并且X 3是T。另一方面，所述多肽还包含根据 下式在HVR之间并置的可变区重链构架序列：（HC-FRl) - (HVR-Hl) - (HC-FR2) - (HVR-H2) - (H C-FR3)-(HVR-H3)-(HC-FR4)。再一方面，所述构架序列来自于人共有构架序列。还一方面， 所述构架序列是VH亚型III共有构架。又一方面，所述构架序列的至少一个如下所述：
[0017] HC-FRl 是 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS(SEQ ID NO:4)
[0018] HC-FR2 是 WVRQAPGKGLEWV(SEQ ID NO:5)
[0019] HC-FR3 是 RFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAR(SEQ ID N0:6)
[0020] HC-FR4 是 WGQGTLVTVSA(SEQ ID NO:7)。
[0021] 又一方面，所述重链多肽还与包含HVR-L1、HVR-L2和HVR-L3的可变区轻链组合， 其中：
[0022] (a)所述 HVR-Ll 序列是 RASQX4X5X6TX7X8A (SEQ ID NOs: 8);
[0023] (b)所述 HVR-L2 序列是 SASX9LXltlS (SEQ ID NOs: 9);
[0024] (c)所述 HVR-L3 序列是 QQX11X12X13X14PX15T (SEQ ID NOs: 10);
[0025] 而且其中34是0或￥35是乂或I 36是3或心乂7是六或F ;X；^V或L ;X；^F或 T J1。是 Y 或 A ;X n是 Y，G，F，或 S ;X 12是 L，Y，F 或 W ;X 13是 Y，N，A，T，G，F 或 I ;X 14是 H，V，P，T 或I ;父15是八，1，1?，？或T。
[0026] 又一方面，X4是 D ;X 5是 V ;X 6是 S ;X 7是 A ;X 8是 V ;X 9是 F ;X 1(|是 Y ;X 11是 Y ;X 12是 L ;乂13是Y ;X 14是H ;X 15是A。又一方面，所述轻链还包含根据下式在HVR之间并置的可变区 轻链构架序列：（LC-FRl) - (HVR-Ll) - (LC-FR2) - (HVR-L2) - (LC-FR3) - (HVR-L3) - (LC-FR4)。 又一方面，所述构架序列来自于人共有构架序列。又一方面，所述构架序列是VL κ I共有构 架。又一方面，所述构架序列的至少一个如下所述：
[0027] LC-FRl 是 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC(SEQ ID N0:11);
[0028] LC-FR2 是 WYQQKPGKAPKLLIY(SEQ ID N0:12);
[0029] LC-FR3 是 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC(SEQ ID N0:13);
[0030] LC-FR4 是 FGQGTKVEIKR(SEQ ID N0:14)。
[0031] 在另一个实施方案中，本发明提供分离的抗-PD-Ll抗体或抗原结合片段，其包含 重链和轻链可变区序列，其中：
[0032] (a)所述重链包含HVR-Hl、HVR-H2和HVR-H3,而且其中：
[0033] (i)所述 HVR-Hl 序列是 GFTFSX1SWIiKSEQ ID NO: 1);
[0034] (ii)所述 HVR-H2 序列是 AWIX2PYGGSX3YYADSVKG(SEQ ID N0:2);
[0035] (iii)所述 HVR-H3 序列是 RHWPGGFDY(SEQ ID N0:3);和
[0036] (b)所述轻链包含HVR-Ll、HVR-L2和HVR-L3,而且其中：
[0037] (i)所述 HVR-Ll 序列是 RASQX4X5X6TX7X8A (SEQ ID NOs: 8);
[0038] (ii)所述 HVR-L2 序列是 SASX9LXltlS (SEQ ID NOs: 9);和
[0039] (iii)所述 HVR-L3 序列是 QQX11X12X13X14PX15T (SEQ ID NOs: 10);
[0040] 而且其中夂是D或G ;X 2是S或L ;X 3是T或S ;X 4是D或V ;X 5是V或I ;X 6是S 或N而是A或F ;X 8是V或L ;X 9是F或T ;X 1(|是Y或A ;X 11是Y，G，F，或S ;X 12是L，Y，F或 W ;父13是 Y，N，A，T，G，F 或 I ;X 14是 H，V，P，T 或 I ;X 15是 A，W，R，P 或 T。
[0041] 在一个具体方面中，X1是D ;X 2是S并且X 3是T。另一方面，X 4是D ;X 5是V ;X 6是 S ;父7是 A ;X 8是 V ;X 9是 F ;X 1(|是 Y ;X ^是 Y ;X 12是 L ;X 13是 Y ;X 14是 H ;X 15是 A。又一方面， 父1是D ;X 2是S并且X 3是T, X 4是D ;X 5是V ;X 6是S ;X 7是A ;X 8是V ;X 9是F ;X 1(|是Y ;X ^是 Y ;X12是 L ;X 13是 Y ;X 14是 H 并且 X 15是 A。
[0042] 还一方面，所述重链可变区包含如下在HVR之间并置的一个或多个构架序列：(HC -FRl)-(HVR-Hl)-(HC-FR2)-(HVR-H2)-(HC-FR3)-(HVR-H3)-(HC-FR4)，所述轻链可变区包 含如下在HVR之间并置的一个或多个构架序列：（LC-FRI) - (HVR-LI) - (LC-FR2) - (HVR-L2) -(LC-FR3)-(HVR-L3)-(LC-FR4)。又一方面，所述构架序列来自于人共有构架序列。又一方 面，所述重链构架序列来自于Kabat亚型I、II或III序列。又一方面，所述重链构架序列 是VH亚型III共有构架。又一方面，所述重链构架序列的一个或多个如下所述：
[0043]
【权利要求】
I. 分离的重链可变区多肽，其包含HVR-H1，HVR-H2和HVR-H3序列，其中： (a) 所述 HVR-H1 序列是 GFTFSXiSWIlKSEQ ID N0:1); (b) 所述 HVR-H2 序列是 AWIX2PYGGSX3YYADSVKG(SEQ ID N0:2); (c) 所述 HVR-H3 序列是 RHWPGGFDY(SEQ ID N0:3); 而且其中夂是D或G ;X 2是S或L ;X 3是T或S。 2?权利要求1的多肽，其中X肩D ;X 2是S并且X 3是T。
3. 权利要求1的多肽，还包含根据下式在HVR之间并置的可变区重链构架序列： (HC-FR1)-(HVR-H1)-(HC-FR2)-(HVR-H2)-(HC-FR3)-(HVR-H3)-(HC-FR4)。
4. 权利要求3的多肽，其中所述构架序列来自于人共有构架序列。
5. 权利要求4的多肽，其中所述构架序列是VH亚型III共有构架。
6. 权利要求5的多肽，其中所述构架序列的一个或多个如下所述： HC-FR1 是EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS(SEQ ID N0:4) HC-FR2 是 WVRQAPGKGLEWV(SEQ ID N0:5) HC-FR3 是 RFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAR(SEQ ID N0:6) HC-FR4 是 WGQGTLVTVSA(SEQ ID N0:7)。
7. 权利要求1的分离的重链多肽，其与包含HVR-L1，HVR-L2和HVR-L3的可变区轻链 组合，其中： (a) 所述 HVR-L1 序列是 RASQX4X5X6TX7X8A(SEQ ID N0s:8); (b) 所述 HVR-L2 序列是 SASX9LX1CIS(SEQ ID N0s:9);和 (c) 所述 HVR-L3 序列是 QQXnX12X13X14PX15T(SEQ ID N0s:10); 而且其中义是D或V ;X 5是V或I ;X 6是S或N ;X 7是A或F ;X 8是V或L ;X 9是F或T ; Xi。是 Y 或 A ;X ^是 Y，G，F，或 S ;X 12是 L，Y，F 或 W ;X 13是 Y，N，A，T，G，F 或 I ;X 14是 H，V，P，T 或I ;父15是八，1，1?，？或T。
8. 权利要求7的多肽，其中X 4是D ;X 5是V ;X 6是S ;X 7是A ;X 8是V ;X 9是F ;X 1(l是Y ;X n 是 Y ;父12是 L ;X 13是 Y ;X 14是 H ;X 15是 A。
9. 权利要求7的多肽，还包含根据下式在HVR之间并置的可变区轻链构架序列： (LC-FR1)-(HVR-L1)-(LC-FR2)-(HVR-L2)-(LC-FR3)-(HVR-L3)-(LC-FR4)。
10. 权利要求9的多肽，其中所述构架序列来自于人共有构架序列。 II. 权利要求10的多肽，其中所述构架序列是VLk I共有构架。
12. 权利要求11的多肽，其中所述构架序列的一个或多个如下所述： LC-FR1 是DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC(SEQ ID NO:ll); LC-FR2 是 WYQQKPGKAPKLLIY(SEQ ID NO:12); LC-FR3 是 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC(SEQ ID NO:13); LC-FR4 是 FGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:14)。
13. 分离的抗-PD-L1抗体或抗原结合片段，其包含重链和轻链可变区序列，其中： (a)所述重链包含HVR-H1，HVR-H2和HVR-H3,而且其中： (i) 所述 HVR-H1 序列是 GFTFSXjWIlKSEQ ID N0:1); (ii) 所述 HVR-H2 序列是 AWIX2PYGGSX3YYADSVKG(SEQ ID N0:2); (iii) 所述 HVR-H3 序列是 RHWPGGFDY(SEQ ID N0:3);和 (b)所述轻链包含HVR-L1，HVR-L2和HVR-L3,而且其中： (iv) 所述 HVR-L1 序列是 RASQX4X5X6TX7X8A(SEQ ID N0s:8); (v) 所述 HVR-L2 序列是 SASX9LX1CIS(SEQ ID N0s:9); (vi) 所述 HVR-L3 序列是 QQXnX12X13X14PX15T(SEQ ID N0s:10); 其中夂是0或6;乂2是3或1^乂3是1'或S;X4可以是D或V;X 5可以是V或I ;X6可以 是S或N ;X7可以是A或F ;X 8可以是V或L ;X 9可以是F或T ;X 1(|可以是Y或A ;X n可以是 Y，G，F，或S;X12可以是L，Y，F或W;X13可以是Y，N，A，T，G，F或 I ;X14 可以是 H，V，P，T或 I ; X15可以是A，W，R，P或T。
14. 权利要求13的抗体或抗体片段，其中X :是D ;X 2是S并且X 3是T。
15. 权利要求13的抗体或抗体片段，其中X 4= D，X 5= V，X 6= S，X 7= A并且X 8= V，X 9 =F，并且 X1(l= Y，X n= Y，X 12= L，X 13= Y，X 14= H 并且 X 15= A。
16. 权利要求13的抗体或抗体片段，其中X D，X 2= S并且X 3= T，X 4= D，X 5= V，X 6=S，X7= A 并且 X 8= V，X 9= F，并且 X 10= Y，X n= Y，X 12= L，X 13= Y，X 14= H 并且 X 15 = A〇
17. 权利要求13-16中任意一项的抗体或抗体片段，其还包含： (a) 根据下式在HVR之间并置的可变区重链构架序列（HC-FR1)-(HVR-H1)-(HC-FR2)_( HVR-H2)-(HC-FR3)-(HVR-H3)-(HC-FR4)，和 (b) 根据下式在HVR之间并置的可变区轻链构架序列（LC-FR1) - (HVR-L1) - (LC-FR2)-( HVR-L2)-(LC-FR3)-(HVR-L3)-(LC-FR4)。
18. 权利要求17的抗体或抗体片段，其中所述构架序列来自于人共有构架序列。
19. 权利要求18的抗体或抗体片段，其中所述可变区重链构架序列是VH亚型III共有 构架。
20. 权利要求19的抗体或抗体片段，其中所述构架序列的一个或多个如下所述： HC-FR1 是EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS(SEQ ID N0:4); HC-FR2 是 WVRQAPGKGLEWV(SEQ ID NO:5); HC-FR3 是 RFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAR(SEQ ID NO:6); HC-FR4 是 WGQGTLVTVSA(SEQ ID NO:7)。
21. 权利要求18的抗体或抗体片段，其中所述可变区轻链构架序列是VL k I共有构架。
22. 权利要求21的抗体或抗体片段，其中所述构架序列的一个或多个如下所述： LC-FR1 是DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC(SEQ ID NO:ll); LC-FR2 是 WYQQKPGKAPKLLIY(SEQ ID NO:12); LC-FR4 是 FGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:14)。
23. 权利要求18的抗体或抗体片段，其中： (a)所述可变重链构架序列如下所述： (i) HC-FRl 是EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS(SEQ ID N0:4); (ii) HC-FR2 是 WVRQAPGKGLEWV(SEQ ID N0:5); (iii) HC-FR3 是 RFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAR(SEQ ID N0:6); (iv) HC-FR4 是 WGQGTLVTVSA(SEQ ID N0:7);和； (b)所述可变轻链构架序列如下所述： (i) LC-FRl 是DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC(SEQ ID N0:11); (ii) LC-FR2 是 WYQQKPGKAPKLLIY(SEQ ID N0:12); (iii) LC-FR3 是 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC(SEQ ID N0:13); (iv) LC-FR4 是 FGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:14)。
24. 权利要求23的抗体或抗体片段，还包含人恒定区。
25. 权利要求24的抗体或抗体片段，其中所述恒定区选自由IgGl，IgG2, IgG3和IgG4 组成的组。
26. 权利要求25的抗体或抗体片段，其中所述恒定区是IgGl。
27. 权利要求23的抗体或抗体片段，还包含鼠恒定区。
28. 权利要求27的抗体或抗体片段，其中所述恒定区选自由IgGl，IgG2A，IgG2B和 IgG3组成的组。
29. 权利要求28的抗体或抗体片段，其中所述恒定区是IgG2A。
30. 权利要求25或28的抗体或抗体片段，其具有降低的或最小的效应子功能。
31. 权利要求30的抗体或抗体片段，其中所述最小的效应子功能由更差效应子的Fc突 变产生。
32. 权利要求31的抗体或抗体片段，其中所述更差效应子的Fc突变是N297A。
33. 权利要求31的抗体或抗体片段，其中所述更差效应子的Fc突变是D265A/N297A。
34. 权利要求30的抗体或抗体片段，其中所述最小的效应子功能由去糖基化产生。
35. 抗体或抗原结合片段，其包含重链和轻链可变区序列，其中： (a) 所述重链包含 HVR-H1，HVR-H2 和 HVR-H3，其分别与 GFTFSDSWIH(SEQ ID N0:15)，AWISPYGGSTYYADSVKG(SEQ ID N0:16)和 RHWPGGFDY(SEQ ID N0:3)具有至少 85% 的整体序列同一性，和 (b) 所述轻链包含 HVR-L1，HVR-L2 和 HVR-L3,其分别与 RASQDVSTAVA(SEQ ID 勵：17),545?1^5(5￡〇10勵：18)和〇〇￥1^即41'(5￡〇10勵：19)具有至少85%的整体序列 同一I"生。
36. 权利要求35的抗体或抗体片段，其中所述序列同一性为至少90%。
37. 权利要求36的抗体或抗体片段，还包含： (a) 根据下式在HVR之间并置的可变区重链（VH)构架序列：〇1(^1?1)-〇^-111)-〇1(：- FR2)-(HVR-H2)-(HC-FR3)-(HVR-H3)-(HC-FR4)，和 (b) 根据下式在HVR之间并置的可变区轻链（VL)构架序列：仏(^^1)-〇^-11)-仏(：- FR2)-(HVR-L2)-(LC-FR3)-(HVR-L3)-(LC-FR4)。
38. 权利要求37的抗体或抗体片段，还包含来自于人共有序列的VH和VL构架区。
39. 权利要求38的抗体或抗体片段，其中所述VH构架序列来自于Kabat亚型I、II或 III序列。
40. 权利要求39的抗体或抗体片段，其中所述VH构架序列是Kabat亚型III共有构架 序列。
41. 权利要求40的抗体或抗体片段，其中所述VH构架序列如下所述： HC-FR1 是EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS(SEQ ID N0:4); HC-FR2 是 WVRQAPGKGLEWV(SEQ ID N0:5); HC-FR3 是 RFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAR(SEQ ID N0:6); HC-FR4 是 WGQGTLVTVSA(SEQ ID N0:7)。
42. 权利要求38的抗体或抗体片段，其中所述VL构架序列来自于Kabat k I、II、III 或IV亚型序列。
43. 权利要求42的抗体或抗体片段，其中所述VL构架序列是Kabat k I共有构架序 列。
44. 权利要求43的抗体或抗体片段，其中所述VL构架序列如下所述： LC-FR1 是DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC(SEQ ID N0:11); LC-FR2 是 WYQQKPGKAPKLLIY(SEQ ID N0:12); LC-FR3 是 GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC(SEQ ID N0:13); LC-FR4 是 FGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:14)。
45. 分离的抗-PD-L1抗体或抗原结合片段，其包含重链和轻链可变区序列，其中： (a) 所述重链序列与下述重链序列具有至少85%的序列同一性：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSfflHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISAD TSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSA(SEQ ID N0:20),和 (b) 所述轻链序列与下述轻链序列具有至少85%的序列同一性： DIQMTQSPSSLSASV⑶RVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTL TISSLQPEDFATYYCQQYLYHPATFGQGTKVEIKR(SEQ ID N0:21)。
46. 权利要求45的抗体或抗原结合片段，其中所述序列同一性为至少90%。
47. 分离的抗-PD-L1抗体或抗原结合片段，其包含重链和轻链可变区序列，其中： (a) 所述重链包含序列：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPCKGLEWVAWIS PYGGSTYYADSVKCRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSA(SEQ ID NO ： 20)，和 (b) 所述轻链包含序列：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLUYSAS FLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYLYH PATFGQGTKVEIKR(SEQ ID N0:21)。
48. 组合物，其包含权利要求13-47中任意一项的抗-PD-L1抗体或抗原结合片段和至 少一种药学上可接受的载体。
49. 分离的核酸，其编码权利要求1-11中任意一项的多肽。
50. 分离的核酸，其编码抗-PD-L1抗体或抗原结合片段的轻链或重链可变序列，其中： (a) 所述重链还包含HVR-H1，HVR-H2和HVR-H3序列，其分别与GFTFSDSWIH(SEQ ID N0:15)，AWISPYGGSTYYADSVKG(SEQ ID N0:16)和 RHWPGGFDY(SEQ ID N0:3)具有至少 85% 的序列同一性，或 (b) 所述轻链还包含HVR-L1，HVR-L2和HVR-L3序列，其分别与RASQDVSTAVA(SEQ ID 勵：17)，5六5卩1^5(5￡〇10勵：18)和〇〇丫1^即六1'(5￡〇10勵：19)具有至少85%的序列同一 性。
51. 权利要求50的核酸，其中序列同一性是90%。
52. 权利要求50的核酸，其中所述抗-PD-L1抗体还包含来自于人共有序列的VL和VH 构架区。
53. 权利要求52的核酸，其中所述VH序列来自于Kabat亚型I，II或III序列。
54. 权利要求52的核酸，其中所述VL序列来自于Kabat k I，II，III或IV亚型序列。
55. 权利要求50的核酸，其中所述抗-PD-L1抗体包含来自于鼠抗体的恒定区。
56. 权利要求50的核酸，其中所述抗-PD-L1抗体包含来自于人抗体的恒定区。
57. 权利要求56的核酸，其中所述恒定区是IgGl。
58. 权利要求57的核酸，其具有降低的或最小的效应子功能。
59. 权利要求58的核酸，其中所述最小的效应子功能由更差效应子的Fc突变产生。
60. 权利要求59的核酸，其中所述更差效应子的Fc突变是N297A。
61. 载体，其包含权利要求49-60中任意一项的核酸。
62. 宿主细胞，其包含权利要求61的载体。
63. 权利要求62的宿主细胞，其是真核的。
64. 权利要求63的宿主细胞，其是哺乳动物的。
65. 权利要求64的宿主细胞，其是中国仓鼠卵巢（CHO)细胞。
66. 权利要求62的宿主细胞，其是原核的。
67. 权利要求66的宿主细胞，其是大肠杆菌（E. coli)。
68. 制备抗-PD-L1抗体的方法，其包括在适合表达编码抗-PD-L1抗体或抗原结合片段 的载体的条件下培养权利要求62-67中任意一项的宿主细胞，并且回收所述抗体或片段。
69. 制品，其包含权利要求48的组合物和至少一种BNCA分子。
70. 制品，其包含权利要求48的组合物和至少一种化疗剂。
71. 权利要求70所述的制品，其中所述化疗剂是吉西他滨。
72. 制品，其包含权利要求48的组合物和至少一种对正性共刺激分子的激动剂。
73. 权利要求72所述的制品，还包含BNCA拮抗剂。
74. 制品，其包含权利要求48的组合物和至少一种抗生素。
75. 权利要求74所述的制品，其中所述抗生素是抗病毒剂。
76. 权利要求75所述的制品，其中抗病毒剂是逆转录酶抑制剂。
77. 权利要求76所述的制品，其中所述逆转录酶抑制剂是聚合酶抑制剂。
78. 权利要求75所述的制品，其中所述抗病毒剂是蛋白酶抑制剂。
79. 制品，其包含权利要求48的组合物和至少一种疫苗。
80. 增强T-细胞功能的方法，其包括向功能障碍的T-细胞施用有效量的权利要求48 的组合物。
81. 治疗T-细胞功能障碍的病症的方法，其包括向患有T-细胞功能障碍的病症的患者 施用治疗有效量的权利要求48的组合物。
82. 权利要求81的方法，其中所述T-细胞功能障碍的病症是感染。
83. 权利要求82的方法，其中所述感染是慢性的。
84. 权利要求81的方法，其中所述T-细胞功能障碍的病症是肿瘤免疫。
85. 权利要求83的方法，其中所述慢性感染是持续性的。
86. 权利要求83的方法，其中所述慢性感染是潜伏性的。
87. 权利要求83的方法，其中所述慢性感染是缓慢的。
88. 权利要求82的方法，其中所述感染是由选自由细菌，病毒，真菌和原生动物组成的 组的病原体导致的。
89. 权利要求88的方法，其中所述病原体是细菌并且所述方法还包括施用抗菌剂。
90. 权利要求88的方法，其中所述病原体是病毒并且所述方法还包括施用抗病毒剂。
91. 权利要求88的方法，其中所述病原体是真菌并且所述方法还包括施用抗真菌剂。
92. 权利要求88的方法，其中所述病原体是原生动物并且所述方法还包括施用抗原生 动物剂。
93. 权利要求88的方法，还包括施用疫苗。
94. 权利要求84的方法，其中所述方法还包括应用选自由下述各项组成的组的治疗方 案：放射疗法，化学疗法，靶向疗法，免疫疗法，激素疗法，血管发生抑制和姑息护理。
95. 权利要求84的方法，其中所述肿瘤免疫由选自由下述各项组成的组的癌症导致： 乳腺癌，肺癌，结肠癌，卵巢癌，黑色素瘤，膀胱癌，肾癌，肝癌，唾液腺癌，胃癌，神经胶质瘤， 甲状腺癌，胸腺癌，上皮癌，头和颈癌，胃癌和胰腺癌。
【文档编号】A61P33/02GK104479018SQ201410743500
【公开日】2015年4月1日 申请日期:2009年12月8日 优先权日:2008年12月9日
【发明者】布里安·欧文, 珍妮·张, 亨利·丘, 苏菲·M·莱哈尔, 希瑟.梅克尔, 桑吉·马里亚塔桑, 吴岩 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司