本发明涉及功能性食品和中药保健品领域，具体地，涉及一种抗酒精性肝损伤的石斛组合物及其制备方法和应用。
背景技术：
我国自古就是饮酒大国，酒文化更是源远流长。据世界卫生组织统计，当前我国长期饮酒者约2亿，一般饮酒者超过5亿，约80%的男性和20%女性有饮酒习惯，且随着我国经济的发展、经济活动的活跃、人们生活水平的提高及各方面压力的增大，饮酒者数量迅速增加，甚至造成了酒精滥用的现象。
进入人体的酒精主要依赖于肝脏代谢，因此长期超肝脏负荷过度饮酒，势必会造成肝细胞损伤，受损伤的肝细胞会产生自由基等系列介质，使肝细胞脂质过氧化，造成肝细胞反复变性、炎症、凋亡、坏死等病理变化，最终导致脂肪肝、肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝癌等。由此可见，对于有饮酒习惯的广大人群来说，保护肝脏、防治肝病有着极其重要的现实意义。据此分析，我国市场，乃至全球市场对防治酒精性肝损伤的护肝产品的需求量势必会越来越大。
虽然目前市场上已有相关的产品可供选择，但远远满足不了社会的需求，况且现有的防治肝损伤产品（如皮质激素、S-腺普甲硫氨酸等）大多数功效并不显著，更严重的是部分产品的长期服用会引发新的肝损伤，所以开发新的抗酒精性肝损伤的药物、保健品和功能型食品必然会成为该领域的发展趋势。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种抗酒精性肝损伤的石斛组合物，本发明提供的抗酒精性肝损伤的石斛组合物具有较显著的抗酒精性肝损伤作用，在一定程度上克服了现有护肝产品功效不明显、副作用大的问题。
本发明的另一目的在于提供上述抗酒精性肝损伤的石斛组合物在制备具有抗酒精性肝损伤作用的药品、保健品或功能型食品中的应用。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种抗酒精性肝损伤的石斛组合物，所述组合物由体积比为5：1～1：5的霍山石斛提取物和铁皮石斛提取物组成。
我国中草药资源丰富，大量试验研究和临床实践表明，许多中草药有较显著的保肝作用，毒副作用小，在防治肝损伤方面有着明显优势。中医认为石斛可滋补肝阴，纠正偏亢的肝阳，使肝之疏泄功能恢复正常。现代研究也表明，石斛在改善肝功能和护肝方面确实有良好的疗效，但有关石斛抗酒精性肝损伤的报道尚少。我国70多种石斛中约有40余种为药用石斛，石斛品种不同，其活性成分含量、质量和功效也不同，其中以霍山石斛与铁皮石斛功效最突出。
研究发现，多糖是石斛主要的药效成分，霍山石斛多糖分子量小，比其它种类的石斛多糖更易吸收，但霍山石斛中的多糖含量低于铁皮石斛。鉴于霍山石斛有效成分易吸收，功能齐全，但产量低，价格高；铁皮石斛有效成分含量高，产量相对较大，价格相对便宜。本发明将优势互补的两者进行有效组合，既提升了功效，又降低了成本，得到了一种功能显著的抗酒精性肝损伤产品。发明人经过众多尝试之后发现，当分别对霍山石斛和铁皮石斛进行提取，并将霍山石斛提取物和铁皮石斛提取物按体积比为5：1～1：5的比例配比时，制备得到的石斛组合物具有较显著的抗酒精性肝损伤作用，在一定程度上克服了现有护肝产品功效不明显、副作用大的问题。
优选地，所述组合物由体积比为1：1～3的霍山石斛提取物和铁皮石斛提取物组成。
优选地，所述铁皮石斛提取物的质量浓度为40～50%，所述霍山石斛提取物的质量浓度为25～40%。
优选地，所述铁皮石斛提取物的质量浓度为50%，所述霍山石斛提取物的质量浓度为40%。
在本发明中，所述铁皮石斛提取物或霍山石斛提取物的提取方法如下：
S1：将铁皮石斛或霍山石斛液氮研磨粉碎后，与水混合并浸泡；然后沸水浴的同时进行超声提取，趁热抽滤后取滤液，滤渣重复上述操作并合并滤液；减压蒸馏即得铁皮石斛或霍山石斛水提液；
S2：将铁皮石斛或霍山石斛液氮研磨粉碎后，与乙醇混合；然后水浴的同时进行超声提取，水浴温度以乙醇微沸为宜，趁热抽滤后取滤液，滤渣重复上述操作并合并滤液；减压蒸馏即得铁皮石斛或霍山石斛醇提液；
S3：将S1所得水提液和S2所得醇提液合并，浓缩即得铁皮石斛提取物或霍山石斛提取物。
优选地，S1中，浸泡的时间为18～24h。
优选地，S1或S2中，超声提取的时间为2～4h。
优选地，S1或S2中，减压蒸馏的温度为45～65℃。
本发明同时保护上述抗酒精性肝损伤的石斛组合物在制备具有抗酒精性肝损伤作用的药品、保健品或功能型食品中的应用。
更为具体地，所述抗酒精性肝损伤的石斛组合物在制备降低肝系数和血清ALT、AST、MDA含量的制剂中的应用。以及所述抗酒精性肝损伤的石斛组合物在制备提高血清SOD含量的制剂中的应用。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明以中医认为可滋补肝阴，促进肝脏疏泄功能的石斛为原料，通过水提和醇提的方法，分别得到石斛的水溶成分和醇溶成分，并将两者合并作为石斛最终提取物，较大程度地获取石斛的有效成分。本发明提供的石斛组合物具有较显著的抗酒精性肝损伤作用，在一定程度上克服了现有护肝产品功效不明显，副作用大的问题；另外，本发明中各提取物的的提取方法简单、成本低廉、安全有效、对环境无污染、适于推广，具有较高的社会效益和经济效益。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
除非特别说明，本发明所用试剂和材料均为市购。
实施例1 一种抗酒精性肝损伤的石斛组合物
（1）霍山石斛提取物的制备：
①取霍山石斛10份（如10g），液氮研磨粉碎后放入20倍体积（如200ml）的蒸馏水中，浸泡24h，沸水浴的同时超声提取2h，趁热抽滤后取滤液，滤渣按上述操作重复一次，合并两次滤液，60℃旋转蒸发仪减压蒸馏浓缩至合适体积（如10-20ml），作为霍山石斛水提液；
②取霍山石斛10份（如10g），液氮研磨粉碎，放入20倍体积（如200ml）95%的食用乙醇中，水浴的同时超声提取2h（水浴温度以乙醇微沸为宜），趁热抽滤，滤渣按上述操作重复一次，合并两次滤液，旋转蒸发仪减压蒸馏浓缩至合适体积（如10-20ml），作为霍山石斛醇提液；
③将①中的霍山石斛水提液和②中的霍山石斛醇提液合并，继续浓缩至合适体积（如10-20ml），作为霍山石斛最终提取物。
（2）铁皮石斛提取物的制备方法同（1）中的霍山石斛。
（3）石斛提取物的组合 将（1）中制得的霍山石斛提取物与（2）中制得的铁皮石斛提取物按体积比5∶1~1∶5进行组合，得到不同配比的石斛组合物系列。
试验例1 实施例1提供的石斛组合物对实验小鼠的抗酒精性肝损伤作用
方法：随机选取64只健康的SPF级昆明雄性小鼠（20±2g），在同等条件下适应性饲养一周后随机分成8组，分别为正常对照组、酒精肝损伤模型组、阳性对照组（当飞利肝宁组）、石斛组合物（霍山石斛∶铁皮石斛=5∶1、3∶1、1∶1、1∶3、1∶5）5组，每组8只。每日早上，各不同配比的石斛组合物组按剂量1.2g / (kg.d)灌胃给予对应配比的石斛组合物提取液，其中石斛的给药剂量［1.2g /(kg.d)］是由《药典》中石斛干品的人体（60kg）推荐量（6~12g/d）的中间量（8 g/d）为基准，乘以换算系数折算而来；阳性对照组按给药剂量0.5g/(kg.d)灌胃给予当飞利肝宁药液，另外，灌胃药液容量按10ml/kg进行，同时正常组和模型组灌胃给予等容量的蒸馏水；每天下午，除正常组小鼠外，其余各组按10ml/(kg.bw)灌胃给予体积分数为50%的乙醇，正常组给予等容量蒸馏水，连续30d，期间每日观察并记录小鼠的生活状态（精神状态、毛发状况、饮食、大小便等）。实验结束前禁食12h，称重，腹腔注射60mg/(kg.bw)的戊巴比妥钠溶液，腹主动脉取血，并取肝组织称重，称重后立即用液氮速冻并-80℃保存备用。血液标本用于测定ALT、AST、SOD、MDA等血清生化指标，肝组织标本用于计算肝系数及测定其它指标。
其中：小鼠肝系数的计算方式如下：肝脏系数=肝脏重量（mg）/体重（g），血清ALT、AST等反映肝功能活性的指标和血清SOD、MDA等反映肝脏抗氧化应激的指标，均严格按照南京建成生物工程公司生产的测试试剂盒说明的方法进行测定。实验结果如下：
（1）小鼠的生活状态情况
正常组小鼠生活状况一切正常，酒精性肝损伤组小鼠在灌胃酒精造模1周左右，出现饮食减少，毛发干枯无光泽，大便稀软、形体消瘦、易暴怒伤人等现象。各给药组一般情况好于酒精性肝损伤组，症状较轻，尤其是阳性对照组、［霍山石斛∶铁皮石斛=1∶1］组、［霍山石斛∶铁皮石斛=1∶3］组小鼠的生活状况几乎接近正常组小鼠。
（2）小鼠肝系数及肝功能指标（血清ALT、AST）
表2. 各实验组小鼠肝系数与血清ALT、AST检测结果（Mean±SD，n=8）
注：与正常组相比，##P＜0.01；与酒精肝模型组比较，**P＜0.01。
由表2结果可以看出，酒精肝损伤模型组小鼠肝系数以及肝功能指标（血清ALT、AST）显著高于正常组小鼠（##P＜0.01），提示运用酒精灌胃诱导小鼠出现肝损伤的模型基本建成。与酒精性肝损伤模型组小鼠相比，阳性对照组以及不同配比的石斛组合物系列组小鼠的肝系数和血清ALT、AST等反映肝功能损伤的指标显著下降，特别是［霍山石斛∶铁皮石斛=1∶1］组、［霍山石斛∶铁皮石斛=1∶3］组降低的最为明显，抗酒精性肝损伤的效果甚至优于阳性药（当飞利肝宁）。
（3）小鼠肝脏抗氧化应激指标（血清SOD、MDA）
表3. 各实验组小鼠血清SOD、MDA检测结果（Mean±SD，n=8）
注：与正常组相比，##P＜0.01；与酒精肝模型组比较，**P＜0.01
通过以上检测结果可知，酒精性肝损伤组小鼠血中抗氧化物SOD活性显著降低，MDA含量明显升高（P＜0.01）。阳性对照药及不同配比的石斛组合物可以在不同程度上升高SOD活性和降低MDA的水平，其中［霍山石斛∶铁皮石斛=1∶1］组、［霍山石斛∶铁皮石斛=1∶3］组效果最好，优于其他石斛组合物组和阳性对照组，与酒精性肝损伤模型组之间具有显著性差异（P＜0.01）。以上表明石斛组合物的抗酒精性肝损伤作用可能与其维持和保护肝脏抗氧化系统的平衡有关。
以上结果证实，石斛组合物具有较显著的抗酒精性肝损伤的功效，并且等量的霍山石斛与铁皮石斛分别按本专利中的方法提取后，提取液按体积比1∶1~1∶3组合时，更有利于其发挥抗酒精性肝损伤的功效。
以上所述的具体实施方式，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施方式而已，并不用于限定本发明的保护范围，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。