本发明属于麻醉药技术领域，涉及表面麻醉药技术领域，特别涉及一种表面麻醉药物组合物、微乳及其制备方法和应用。
背景技术：
我国在使用麻醉剂方面有着悠久的历史。在公元2世纪，华佗发明了“麻沸散”并进行了腹腔手术；公元652年和1596年，孙思邈和李时珍记载了曼陀罗花具有麻醉作用；另外，赵学敏也发现了由草乌、川乌和天南星等组成的麻醉药。
现代麻醉药以1884年carlkoller利用可卡因进行眼部局麻为发展标志之一。随后，n.lofgren和b.lundquist合成了利多卡因，boafekenstarn合成了罗哌卡因，开启了麻醉药研究的新篇章。
相对于针刺注射麻醉而言，表面麻醉是指麻醉药物透过粘膜而阻滞位于粘膜下的神经末梢，从而使粘膜产生麻醉现象的方法。通常而言，表面麻醉药是以溶液、凝胶和乳膏等形式存在。由于施药方式相对便捷且更易被患者接受，表面麻醉越来越受到人们的重视，并应用于一些重要的手术中，如yud等人公布了一种利用上喉神经阻滞联合环甲膜穿刺气管表面麻醉在脑外伤手术中的应用(yud,zhuy,yangz,etal.clinicalapplicationofsuperiorlaryngealnerveblockcombinedwiththyrocricocentesistrachealsurfaceanesthesiainemergencytrachealcannulationforcerebraltrauma[j].biomedicalresearch,2017,28(14):6343-6345.)。同时，如根据zangcs等人的的调查，表面麻醉在一些特定的手术中，是非常安全的(zangcs,sunj,huanght,etal.inhaledforeignbodiesinpediatricpatients:areviewandanalysisof3028cases[j].intjclinexppathol,2017,10(1):97-104.)。
一般情况下，在临床上使用的表面麻醉药多为传统药物的相应制剂。张文钰等人研究发现气管粘膜表面麻醉可减少全身麻醉应激反应和增加患者对导管的耐受程度，并发现利多卡因凝胶+丁卡因喉喷是最为理想的表面麻醉方式(张文钰,徐铭军,董经纬,等.气管黏膜表面麻醉对插拔管应激反应和患者耐管的研究[j].中国医师进修杂志,2007,30(12):15-17.)。杨静等人研究发现将利宁凝胶与恩纳乳膏涂布在气管导管表面，可以产生良好的气管表面麻醉效果(杨静,代光莉,罗方武,等.利宁、恩纳乳膏气管导管表面涂布行表面麻醉的临床观察[j].临床麻醉学杂志,2004,20(7):427-429.)。梅喜雪等人考察了20例取痣患者利用复方利多卡因乳膏的使用效果，表明复方利多卡因乳膏作为浅表麻醉剂具有临床操作简便、无创伤和患者易于接受的优点(梅喜雪,王斌,向红,等.复方利多卡因乳膏表面麻醉效果观察[j].中国美容医学杂志,2007,16(8):1134-1134.)。
虽然包含上述研究在内的报道均证明利用一些传统麻醉药进行表面麻醉是一种非常有效的麻醉方法，但是在进行表面麻醉时，仍有一些问题需要引起重视。
首先，药剂的渗透性是决定表面麻醉药起效时间快慢的因素之一。为了让药物发挥作用，研究者们进行了大量的改进性研究。中国专利cn100443079c研究了一种凝胶制剂，使得丁卡因或利多卡因更好的渗透，达到缩短起效时间的效果。
其次，麻醉的维持时间和深度对于临床手术而言有着重大的影响，在实际的临床工作中，不乏因表面麻醉效果不佳而产生的风险乃至事故，如zhangxy等人便报道了一例因表面麻醉效果不佳而引起的手术问题(zhangxy,hany,zhangyb,etal.entrapmentofalaryngotrachealtopicalanesthesiakitduringtracheobronchialforeignbodyremoval:acasereport[j].bmcanesthesiology,2018,18(1):60.)。
此外，麻醉后的寒颤也是值得关注的问题。麻醉后寒颤会导致机体代谢率升高，机体耗氧量增加，造成心肺负荷增加，而增大了心肺功能衰竭的风险。中国专利cn103920006b在预防寒颤方面，从中医药的角度进行了有益的研究。
因此，如何有效的解决上述三个问题，是表面麻醉药研究当中的重要课题。
利多卡因是临床上常见的麻醉药，也广泛用于表面麻醉(吴岩.利多卡因、丁卡因表面麻醉对结节性甲状腺肿伴甲亢患者拔管期的影响[d].吉林大学,2017.)。为了更好的利于利多卡因吸收，除了制备成乳膏之外，还被制备成微乳(黄亮.利多卡因微乳的制备工艺及体外经皮渗透的研究[d].第一军医大学,2006.)。
由于利多卡因有着相对明确的药理研究成果，在研究可同时解决起效时间、维持时间和预防寒颤方面问题的药物时，我们优先考虑将其作为成分之一。
通过文献调研，我们发现可与利多卡因进行联用以解决相应技术问题的报道较多。如陈灵娟利用利多卡因联合东莨菪碱用于治疗宫颈水肿的护理，并取得了良好的效果(陈灵娟.利多卡因和东莨菪碱联用治疗宫颈水肿的护理[j].中华现代护理杂志,2001,7(7):45-45.)。曹丽蓉等人利用地佐辛联合利多卡因用于减轻人工流产的痛苦(曹丽蓉,贺漪.地佐辛联合利多卡因用于人工流产530例[j].医药导报,2012,31(6):711-712.)。催晓艳等人发现利用利多卡因联合地佐辛用于无痛食管支架植入术，可降低心血管呼吸系统疾病的发生(崔晓艳,梁永祥,郭月琴,等.利多卡因联合地佐辛用于无痛食管支架置入术的研究[j].河北医药,2015(20):3125-3127.)。
不过，如何配置含有利多卡因且能解决上述三个表面麻醉问题的，据发明人所知，目前尚未见到报道。因此，这方面的研究是具有一定意义的。
技术实现要素：
针对现有技术的缺点和实际需求，本发明的目的之一在于提供一种表面麻醉药物组合物，按重量份计，该药物组合物由如下组分组成：
利多卡因2-3份、地佐辛0.5-1份、东莨菪碱1-2份、两面针乙醇提取物0.3-0.5份。
在初步文献调研中，我们发现地佐辛可作为镇痛麻醉药物使用(佘守章,许学兵.地佐辛——一个尚待进一步认识的独特镇痛药物[j].广东医学,2015,36(21):3261-3263.)。因此，我们首先将利多卡因和地佐辛进行联用，但并没有发现其对麻醉维持时间和麻醉起效时间方面有任何影响。另外，由于东莨菪碱在与利多卡因联用方面已有报道，且可以预防利多卡因的一些副作用(毛姗姗,朱仁艳,唐园,等.东莨菪碱对利多卡因中毒小鼠惊厥和死亡率的影响[j].徐州医学院学报,2007,27(9):612-614.)，我们尝试在利多卡因和地佐辛的基础上再加上东莨菪碱。不过，我们仍然未发现东莨菪碱的加入能带来任何积极的效果。
在上述探索的基础上，我们将目光转移中药方面。广西南宁市第一人民医院研制了一种表面酊，用于拔牙手术，并取得了良好的效果。该表面酊是由花椒、两面针、细辛和九里香利用乙醇提取并配置而得(黄宇虹,黄仕孙.表麻酊的制备与临床应用[j].中成药,2011,33(2):367-368.)。
首先，我们在利多卡因的基础上添加该表麻酊所有组分乙醇提物的干燥粉，发现同样未产生任何协同效果。此后，我们分别将该表麻酊的各个单一组分乙醇提物的干燥粉与利多卡因互配，也未发现所需的积极效果。
随后，我们在前期的研究基础上，将利多卡因、地佐辛、东莨菪碱和表麻酊中4种组分乙醇提物干燥粉进行两两或三三随机互配，同样也没有发现具有积极效果的组合物实验组。最终，我们尝试固定利多卡因、地佐辛和东莨菪碱三种组分不变，随机抽取表麻酊中各单一组分醇提物干燥粉与其互配，发现了本发明组合物具有令人惊喜的效果。在实验过程中，本发明组合物可以显著的延长麻醉维持时间并缩短药物起效时间。受此鼓舞下，我们考察了本发明组合物对于寒颤预防的效果。令人惊喜的是，本发明药物组合物对于寒颤的预防同样有着较好的效果。
根据《中国植物志》的记载：“两面针在局部应用时，对神经末梢有麻醉作用，对胃痛或关节肌肉痛有缓解作用。”，“因含有麻醉成分，可与其他药物配伍，用作粘膜麻醉剂。有认为它含有一木脂类lignan化合物c20h18o6有较好的解痉镇痛作用。做动物试验时，前者以直接作用于肠平滑肌，其镇痛作用则直达中枢。但也有认为与其所含生物碱有关。”
通过检索，目前将两面针与传统临床麻醉药(如利多卡因)联用的报道十分的少。利用两面针与其它药物进行联用偶见于一些中药配方之中，如中国专利cn104189210b、cn104940489a和cn106581340a等。本发明首次将常用的药物化合物利多卡因、地佐辛和东莨菪碱与中药两面针的乙醇提取物联用，并获得了令人满意的麻醉效果。
在本发明的研究过程中，我们发现地佐辛和东莨菪碱的加入是重要的，这提示我们在今后的工作中进一步关注两面针对于传统临床麻醉药物之间可能存在的协同效果的研究。
在本发明的基础上，为了便于使用，可以以本发明药物组合物作为活性成分，并选取合适的药学上可接受的辅料或者药学上可接受的载体制成相应的剂型。所述的剂型包括固体制剂、液体制剂、半固体制剂中的任何一种。
本发明所述两面针乙醇提取物是通过如下方法获得：
将两面针置于乙醇中进行回流提取，过滤得到浸膏后，进行喷雾干燥，即得。
在具体的操作中，所采用的乙醇的体积分数为70％，提取时间为1小时，乙醇的重量加入量为两面针重量的4倍。
由于将利多卡因制备成微乳相对于乳膏、凝胶和酊剂而言，具有优势(黄亮.利多卡因微乳的制备工艺及体外经皮渗透的研究[d].第一军医大学,2006.)，我们将本发明的药物组合物制备成相应的微乳。
因此，本发明的另外一个目的在于提供包含本发明所述药物组合物的的微乳，所述微乳的制备原料，按重量百分比计，包括：
2-3％利多卡因、0.5-1％地佐辛、1-2％东莨菪碱、0.3-0.5％两面针醇提物、9-11％油酸、30-35％cremophorrh-40、10-15％plurololeiquecc497、剩余为水。
cremophorrh-40又称氢化蓖麻油聚氧乙烯醚-40，plurololeiquecc为嘉法狮(gattefosse)公司生产的聚甘油油酸酯。
在本发明的微乳的制备中，油酸作为油相，cremophorrh-40作为乳化剂，plurololeiquecc497作为助乳化剂。
在制备微乳时，粒径的控制是比较重要的。在本发明的研究过程中，我们曾利用吐温-80作为乳化剂，发现所得微乳的粒径大于1000nm，而本发明微乳的粒径仅为200-250nm。
在实际微乳制备时，所采用的方法如下：将所述利多卡因、地佐辛、东莨菪碱和两面针醇提物溶于所述油酸中，然后与所述cremophorrh-40、plurololeiquecc497和水混合，室温下，高速搅拌5～10分钟，即得所述微乳。
本发明的另外一个目的在于提供上述药物组合物、上述微乳在制备表面麻醉药物方面的应用。所述表面麻醉药物包括口腔手术表面麻醉药物、人流手术表面麻醉药物或美容手术表面麻醉药物。
本发明的有益效果：
1、本发明的药物组合物具有麻醉起效快、麻醉维持时间长以及可以预防麻醉后寒颤的效果；
2、本发明所得微乳的粒径小且分布窄，透皮效果好。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行具体描述，有必要在此指出的是以下实施例只是用于对本发明进行进一步的说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的技术熟练人员根据上述发明内容所做出的一些非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。
在下面的各实施例中所用到的实验原料：
利多卡因(济南德信佳生物科技有限公司)、地佐辛(济南德信佳生物科技有限公司)、东莨菪碱(济南德信佳生物科技有限公司)、油酸(化学纯，天津科密欧化学试剂厂)、吐温-80(化学纯，南京威尔化工有限公司)、体积分数70％乙醇(自配)、去离子水(自制)、花椒、两面针、细辛、九里香、cremophorrh-40(sigma)、plurololeiquecc(上海嘉法狮贸易有限公司)。其中，花椒、两面针、细辛和九里香购于成都市中药材零售市场。
实施例1
1药物准备
1.1将花椒、两面针、细辛和九里香分别置于4倍量(重量)的70％(体积分数)乙醇溶液中，进行回流提取1小时，分别得到花椒浸膏、两面针浸膏、细辛浸膏和九里香浸膏。
对所得各个浸膏进行喷雾干燥，至含水量为8％以下，获得相应的浸膏干燥粉。
按照表1选择药物组合物。
表1
其中，“·”表示含有对应的成分，无“·”表示不含有对应的成分。表中各组中的各成分的添加量均为等量。
1.2微乳的制备
将表1中各组别对应的组合物分别置于油酸中作为油相，以吐温80为乳化剂，乙醇为助乳化剂，蒸馏水为水相。向油相中加入乳化剂和助乳化剂，其中乳化剂和助乳化剂km＝2，混合后，滴定加入蒸馏水，直至微乳形成。
2、蛙腿收缩实验
按照表1，准备75只蟾蜍，每组5只。参考《小组合作学习与脊蛙反射实验》(王小军.小组合作学习与脊蛙反射实验[j].课堂内外:教师版,2011(9):72-72.)和《蟾乌表面麻醉剂的药效学初步实验研究》(张艳,代佳音,张敏,等.蟾乌表面麻醉剂的药效学初步实验研究[j].中外健康文摘,2011,08(7):50-52.)预选合格脊蟾蜍，然后参考《利多卡因对蛙坐骨神经干动作电位传导速度的影响》进行坐骨神经的分离。
将第2部分中所得各个组别的微乳均匀的涂于分离出的左下肢坐骨神经，然后参考《蟾乌表面麻醉剂的药效学初步实验研究》(张艳,代佳音,张敏,等.蟾乌表面麻醉剂的药效学初步实验研究[j].中外健康文摘,2011,08(7):50-52.)，检测药物起效时间和药物作用持续时间。所得实验结果如表2所示。
表2
表2中的各组别序号与表1中的各组别序号对应，意为采用表1对应组别的组合物制备所得的微乳。
从表2中可知，当采用利多卡因、地佐辛、东莨菪碱和两面针乙醇浸膏干燥粉作为药物组合物制备微乳时，其起效时间和维持时间优于其它组别。从表2中我们可知，东莨菪碱、地佐辛、花椒浸膏干燥粉、细辛浸膏干燥粉的加入对于利多卡因的起效时间和维持时间影响不大，而九里香浸膏干燥粉对于利多卡因有着拮抗作用。
实施例2
虽然实施例1的结果表示利多卡因、地佐辛、东莨菪碱和两面针浸膏干燥粉具有协同增效作用，但并未考察各组分的添加配比对于实验结果的影响。发明人猜测其配比可能也是重要的影响因素。因此，按照表3的配方，发明人进行了进一步的实验。
表3
表3中，各成分均以重量份表示，如“0.5”表示0.5份。
将表3中药物组合物按照实施例1的制法制备成微乳，并按照与实施例1一致的实验方法，进行药物效果的评价，结果如表4所示。
表4
如表4所示，5-8组的效果明显的由于1-4组，这提示组分之间的添加比例对于药物起效时间和药物作用持续时间是重要的。这表明利多卡因、地佐辛、东莨菪碱和两面针乙醇提取物之间的协同增效作用受到各组分添加比例的影响。
实施例3
在实施例1和实施例2的基础上，我们进一步考察药物组合物对于麻醉后寒颤的影响。
我们将实施例2中的5-8组所得微乳涂覆在小鼠躯干上，分别作为实验组1-4，并以实施例1的1组作为对照组，考察寒颤发生率。本次实验中的受试小鼠为每组30只。结果如表5所示。
表5
由表5可知，本发明的药物组合物可以有效的避免麻醉后寒颤的发生。
实施例4
在实施例1和实施例2的基础上，我们进一步考察了更适宜的微乳的制备方法。这是因为实施例1和实施例2所得微乳的粒径较大，平均粒径在500～800nm之间，且粒径的分布范围较宽，不利于相应制剂的质量控制。
在实施例1的基础上，我们对乳化剂和助乳化剂进行了调整，以cremophorrh-40作为乳化剂，plurololeiquecc497作为助乳化剂，进行微乳的制备。
在实际微乳制备时，微乳的制备原料，按重量百分比计，由如下组分构成：2-3％利多卡因、0.5-1％地佐辛、1-2％东莨菪碱、0.3-0.5％两面针醇提物、9-11％油酸、30-35％cremophorrh-40、10-15％plurololeiquecc497、剩余为水。所采用的方法如下：将利多卡因、地佐辛、东莨菪碱和两面针浸膏干燥粉溶于油酸中，然后与所述cremophorrh-40、plurololeiquecc497和水混合，室温下，高速搅拌5～10分钟，即得所述微乳。
经过检测，所得微乳的平均粒径为232nm，85.6％集中在220-240nm区间。表明所得微乳易于产品质量控制。