桦褐孔菌提取物的制备方法及其在制备抗疱疹制剂的用途与流程

文档序号:15699412发布日期:2018-10-19 19:35阅读:410来源:国知局

本发明涉及一种提取物和其制备方法及其在药物领域中的用途,尤其涉及一种桦褐孔菌提取物和其制备方法及其在制备抗疱疹制剂的用途。



背景技术:

病毒是引起感染性疾病的主要元凶,危害性极大、影响面甚广。在科学高速发展的今天,仍是发达国家和许多发展中国家面临的最大困惑之一。近年来,由于病毒的肆意蔓延,抗病毒类药物发展较快,已成为抗感染药物中举足轻重的品种,而具有高度选择性、作用于细胞病毒代谢且对宿主无明显损害的药物仍是目前研究的重点。

20世纪90年代以来,在组合化学、高通量筛选技术的推动下,对病毒学和分子生物学理论的研究中,人们对病毒的复制环节、发病机理、抗病毒作用靶点有了进一步的认识,从而使抗病毒药物快速地发展。据《kaloramainformation》公布的一项研究结果表明,2005-2006年,世界抗病毒药品市场的增长率将逐渐达到一个高峰。新产品的上市和日益增长的需求推动全球的抗病毒药品达到了160亿美元的峰值。毋容置疑,新药仍是推动市场增长的源泉,而疫情的蔓延则是拉动抗感染类药物发展的动力。在非典型肺炎、禽流感病毒、疱疹病毒、呼吸道合胞病毒(rsv)和轮状病毒的轮番肆虐下,2006年全球疱疹和呼吸道抗病毒药(hra)市场销售额约为25亿美元,在进入新世纪后连续两年创下了13%的增长率。

由于病毒变异的速度远远高于新药的研制速度,并且容易对人工合成的化学药物产生抗药性,因此在药物市场中,天然药物异军突起,在提高免疫和抑制病毒方面发挥了重要作用。

桦褐孔菌(inonotusobliquus)隶属于真菌门、担子菌亚门、层菌纲的食药两用型的真菌,主要分布于寒冷地区,例如中国的黑龙江和吉林地区。在民间存在广泛的应用基础,用于防治各种癌症、心脏病、糖尿病等。



技术实现要素:

针对以上不足,本发明提供一种桦褐孔菌提取物及其制备方法和在抗疱疹病毒中的用途。

本发明通过以下技术方案达到以上目的:

第一方面,提供一种桦褐孔菌提取物,所述提取物包括桦褐孔菌水提物和桦褐孔菌醇提取物,所述桦褐孔菌水提物的重量比例为10%-80%,所述桦褐孔菌醇提取物的重量比例为10%-80%。

优选的,还包括乙醇,优选5%-40%的乙醇,例如10%乙醇。

优选的,所述桦褐孔菌醇提取物为桦褐孔菌子实体醇提取物。

进一步优选的,所述桦褐孔菌醇提取物通过以下步骤制备得到:将桦褐孔菌醇子实体低温脱水粉碎,然后在2-10倍体积的乙醇中浸提1-3次,每次1-4小时,超声波震荡,合并滤液,并可选地将滤液冷冻干燥成粉末。

进一步优选的,所述桦褐孔菌醇子实体低温脱水粉碎为在20℃以下的低温中脱水粉碎。

进一步优选的,所述乙醇为90%重量百分比的乙醇。

优选的,所述桦褐孔菌水提物为桦褐孔菌子实体水提物。

进一步优选的,所述桦褐孔菌水提物通过以下步骤制备得到:将桦褐孔菌醇提后的滤渣加入5-30倍水中超声提取1-4次,每次1-4小时,合并滤液,并可选地将滤液冷冻干燥成粉末。

进一步优选的,所述5-30倍水为5-30倍的20℃水。

在第二方面,提供一种桦褐孔菌醇提取物的制备方法,包括:

(1)将桦褐孔菌子实体在低温中脱水粉碎;

(2)加入2-10倍体积乙醇浸提1-3次,每次1-4小时,超声波震荡,合并滤液,将滤液浓缩冷冻干燥成粉末;

(3)将醇提后的滤渣加入5-30倍水超声提取1-4次,每次1-4小时,合并滤液,将滤液浓缩冷冻干燥成粉末;

(4)将水提物粉末和醇提物粉末混合,其中按重量比计,水提物比例为10%-80%,醇提物比例为10%-80%,可选地,加入5%-40%的乙醇以制成喷剂。

优选的,一种桦褐孔菌醇提取物的制备方法,包括:

(1)将桦褐孔菌子实体在20℃以下的低温中进行脱水粉碎;

(2)加入2-10倍体积90%的乙醇浸提1-3次,每次1-4小时,超声波震荡,合并滤液,将滤液浓缩冷冻干燥成粉末;

(3)将醇提后的滤渣加入5-30倍20℃水超声提取1-4次,每次1-4小时,合并滤液,将滤液浓缩冷冻干燥成粉末;

(4)将水提物粉末和醇提物粉末混合,其中按重量比计,水提物比例为10%-80%,醇提物比例为10%-80%,可选地,加入5%-40%的乙醇以制成喷剂。

在第三方面,提供一种上述制备方法制备得到的桦褐孔菌醇提取物。

在第四方面,提供一种上述桦褐孔菌醇提取物在预防和/或治疗和/或辅助治疗疱疹病毒相关疾病中的用途。

在第五方面,提供一种上述桦褐孔菌醇提取物在制备预防和/或治疗和/或辅助治疗疱疹病毒相关疾病的制剂中的用途。

优选的,所述制剂为喷剂。

本发明制备过程控制在低温的条件下进行,有效预防活性成分的分解和失活,根据醇与水之间的相溶性,增加了提取率,缩短了总的提取时间,进一步保持食用菌中活性物质的原始结构状态,以维持其天然药理作用,使其活性成份得到充分释放。

通过实验验证,发现本发明的提取物的副作用低,对疱疹病毒具有良好的抑制效果,且无耐药性的产生。

附图说明

图1为试验例1的hsv和水体外孵育2h后感染小鼠症状。

图2为试验例的hsv和桦褐孔菌提取物孵育2h后感染小鼠症状。

图3为试验例1的hsv感染2天后涂抹空白对照水后感染小鼠症状。

图4为hsv感染2天后涂抹桦褐孔菌提取物后感染小鼠症状。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明进行进一步说明。

实施例1

桦褐孔菌提取物及其制备方法:

将桦褐孔菌子实体在20℃以下的低温中进行脱水粉碎,加入8倍体积90%的乙醇浸提3次,每次3小时,并使用超声波震荡,活性物质溶解,抽滤后合并滤液,将滤液浓缩冷冻干燥成粉末待用;将醇提后的滤渣加入15倍20℃水超声提取3次,每次2小时,过滤后合并滤液,将滤液浓缩冷冻干燥成粉末待用;最后将水提物粉末和醇提物的粉末混合,其中水提物的重量百分比例为65%,醇提物重量百分比为25%,乙醇10%,制成喷剂。

实施例2

桦褐孔菌提取物及其制备方法:

将桦褐孔菌子实体在20℃以下的低温中进行脱水粉碎,加入6倍体积90%的乙醇浸提3次,每次3小时,并使用超声波震荡,速活性物质溶解,抽滤后合并滤液,将滤液浓缩冷冻干燥成粉末待用。将醇提后的滤渣加入20倍20℃水超声提取3次,每次2小时,过滤后合并滤液,将滤液浓缩冷冻干燥成粉末待用。最后将水提物粉末、醇提物粉末按照重量比例混合,其中水提物比例为55%,醇提物比例为35%,乙醇10%,制成喷剂。

实施例3:

对制备的桦褐孔菌醇提物和水提物进行成分分析发现,桦褐孔菌醇提物的主要成分是三萜类物质,水提物主要成分为多糖。

对制备桦褐孔菌醇提物和水提物的得率进行计算发现,桦褐孔菌醇提物的得率为0.5%-3%,水提物的得率为2%-8%。

试验例1

4周龄balb/c雄性小鼠,体重17-19g,由广东省医学实验动物中心提供。小鼠腹腔注射戊巴比妥钠麻醉后使用脱毛膏(薇婷)小鼠背部区域进行脱毛,脱毛后用温水搽拭干净残余脱毛膏,用碘酒、酒清消毒。用注射器针头轻刺脱毛区域皮肤,不同小鼠之间,尽量保证皮肤损伤程度一致。

15只小鼠随机分成3个重复组。每个重复组5只小鼠,分别采用4种不同的处理方式:

(1)水和病毒体外孵育2h后感染小鼠。

(2)实施例1的桦褐孔菌提取物和hsv病毒(每只小鼠接种106pfuhsv)体外孵育2h后感染小鼠。

(3)hsv感染2天后使用空白对照水,每天一次,每次涂抹10微升。

(4)hsv感染2天后使用实施例1的桦褐孔菌提取物(10mg/ml),每天一次,每次涂抹10微升。

实验结果:

(1)采用处理方式(1)的hsv和水体外孵育2h后感染小鼠。结果如图1所示,随着时间延长,小鼠出现典型的疱疹症状,背部伤口溃烂面积增大,小鼠第7(或第8天)右后支出现瘫痪,第10天均死亡。

(2)采用处理方式(2)的hsv和桦褐孔菌提取物孵育2h后感染小鼠,结果如图2所示,小鼠没有出现典型的疱疹症状,后期伤口愈合。

(3)采用处理方式(3)的hsv感染2天后空白对照水,结果如图3所示,小鼠第7(或第8天)右后支出现瘫痪,第10天均死亡。

(4)采用处理方式(4)的hsv感染2天后涂实施例1的桦褐孔菌提取物(10mg/ml),结果如图4所示,小鼠没有出现典型的疱疹症状,后期伤口愈合。

以上结果证实,本发明制得的桦褐孔菌提取物具有较好的抗hsv(疱疹病毒)的功效。

以上所述,仅为本发明的较佳的具体实施例,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围内。

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