本发明涉及缓解视疲劳中药组合物制备方法及其应用，属于中医药技术领域。
背景技术：
视疲劳是目前眼科常见的一种疾病，患者的症状多种多样，常见的有近距离工作不能持久，出现眼及眼眶周围疼痛、视物模糊、眼睛干涩、流泪等，严重者头痛、恶心眩晕。尤其近距离工作时，远达不到“舒适和持久”的用眼状态，严重者甚至出现恶心、呕吐等全身症状，严重干扰了患者的视觉和生活质量。尤其是随着电脑等视频终端的大量普及，使视疲劳的发生率呈逐渐上升的趋势。它不是独立的疾病，而是由于各种原因引起的一组疲劳综合症。其发生原因也是多种多样的，常见的有：1、眼睛本身的原因，如近视、远视、散光等屈光不正、调节因素、眼肌因素、结膜炎、角膜炎、所戴眼镜不合适等；2、全身因素，如神经衰弱、身体过劳、癔病或更年期的影响；3、环境因素，如光照不足或过强，光源分布不均匀或闪烁不定，注视的目标过小、过细或不稳定等。因此，视疲劳的防治越来越得到人们的关注。
如何全方位的满足治疗眼疲劳、视力差的问题，是需要进一步解决的技术难题。
目前市面上相关的技术产品有以下4类：
1、眼药水，属外用药液。
眼药水是眼科疾病最常用的药物剂型之一，对于许多眼病，眼药水都有直接、快捷的治疗作用。随着人们的生活方式和工作条件的改变，用眼的时间越来越多，比如长时间看电脑、玩手机、看电视、玩电子游戏等等，很容易患视觉疲劳症和干眼症。
这两种病症都以眼睛干涩不适为主要表现，于是很多人将眼药水变成了日常“必备药品”。其实眼药水，原则上是能不用就不用，没有必要常规使用。
眼药水为保持药物的无菌性和延长药物的有效期，其中一般都加入防腐剂保质。长期过度接触防腐剂，可能会对眼睛产生伤害，导致正常泪膜受到破坏，角膜上皮细胞出现损伤。绝大多数缓解疲劳的眼药水中也含有防腐剂成分，长期使用不仅对角膜上皮会产生损害，而且对结膜杯状细胞会严重损伤。
2、护眼仪，眼部按摩器，属医疗器械类。
护眼仪根据电脑根据眼部的高低轮廓与不同的穴位分布精心设计而成，并且根据中医经络学说，通过钕磁指或者采用气囊力压眼部同时按摩眼部穴位，刺激和锻炼视椎细胞和视神经，缓解睫状肌疲劳，减轻长时间用眼造成的眼睛干涩和疼痛，调和气血，促进新陈代谢。
护眼仪是缓解视疲劳的仪器，护眼仪又称视力保护训练机、视力恢复运动训练仪、视力训练机、健康保护的仪、眼部按摩器。
现在越来越多的近视患者选择护眼仪，认为他是物理疗法很科学对眼睛没伤害，于是乎有些高度近视的近视眼同学也选择护眼仪希望可以达到减缓近视的效果。其实科学家早就说过，在近视度数达到600度之后在选择护眼仪是相当不明智的选择，“加加明”护眼仪就强烈强调过，眼睛度数超过600的近视患者最好别使用“加加明”护眼仪，因为这已经是一个极端，不光是加加明，市面上任何一款主流的护眼仪都不可能有效，甚至有反效果。
3、明目地黄丸，属中药类。
中医对视疲劳认识较早，早在唐代便将其归于“肝劳”范畴。如孙思邈在《千金要方》中指出：“其读书、博弈等过度用目者，名曰肝劳。”并首次明确指出导致眼疾的十九种因素，包括“极目远视、数看日月、夜读细书、月下看书、抄写多年、雕镂细作、博弈不休、泣泪多年”等。中医认为，疲劳用眼会劳心伤神、耗气伤血，致使肝肾精血亏耗、心血亏虚，进而导致眼珠胀痛、头晕目眩。中医治疗视疲劳多遵循滋补肝肾、补血养心、调畅气机原则，常用的处方包括：知柏地黄汤、归脾汤及丹栀逍遥散等。
明目地黄丸的主要成分为熟地黄，山茱萸(制)，牡丹皮，山药，茯苓，泽泻，枸杞子，菊花，当归，白芍，蒺藜，石决明(煅)。辅料为蜂蜜。明目地黄丸具有滋肾，养肝，明目的功效。
明目地黄丸也存在一些不足：
一方面，明目地黄丸为传统制备工艺及服用方法，主要是水煎服(水一盅半，煎七、八分。食远温服)，且仅煎一次，传统的水提工艺参数没有，可见，传统上其工艺粗糙，有效成分含量较低，且服用、携带不方便，服用量大，也不适宜加工成其他剂型。明目地黄丸存在剂量大，服用不便(尤其是儿童)；生产操作易致溶散、崩解迟缓；含原药材粉末较多者卫生标准难以达标等问题。目前明目地黄丸以中药注册分类，本本发明属于片剂，为作用安全的药食同源的中药配方，提示安全指数较高。片剂溶出度及生物利用度较丸剂好，剂量准确，片剂内药物含量差异较小；质量稳定，片剂为干燥固体，且某些易氧化变质及易潮解的药物可借包衣加以保护，光线、空气、水分等对其影响较小；服用、携带、运输等较方便，机械化生产，产量大，成本低，卫生标准容易达到。
另一方面，明目地黄丸的适应症是用于肝肾阴虚，目涩畏光，视物模糊，迎风流泪。重点强调肝肾阴虚类型，适应人群以中老年人为主。
而本发明的配方为决明子、黄精、玉竹、菊花、橘皮、桑叶、枸杞子、黑枸杞、山药、地龙蛋白、叶黄素、胡萝卜素等，其组方比较全面，所含配方有活血类地龙蛋白成分，滋阴类的枸杞，山药，清热明目类的菊花，桑叶，决明子等，且含有胡萝卜素是目前最安全补充维生素a的产品(单纯补充化学合成维生素a，过量时会使人中毒)。它可以维持眼睛和皮肤的健康，改善夜盲症、皮肤粗糙的状况，有助于身体免受自由基的伤害。不宜与醋等酸性物质同时服用。叶黄素是一种重要的抗氧化剂，为类胡萝卜素家族，与玉米黄素共同存在，有缓解视疲劳的作用，如果眼红眼感，眼酸胀，视物模糊等等，在一定程度上，提高黄斑色素密度，保护黄斑，促进黄斑发育，有预防老年性黄斑变性的作用，因此，本配方对各类视力下降人群有较大的意义，如视力模糊、假行近视、眼涩流泪、弱视的预防和治疗均具有很好的疗效。
4、叶黄素护眼保健品，组方比较单一
保健食品缓解视疲劳的功能原理主要从三方面进行调理：1、补充营养元素缓解视疲劳。如：叶黄素、牛磺酸、β-胡萝卜素、维生素等营养元素可以缓解视疲劳。2、缓解眼部疾病造成的视疲劳。中医药整体辩证治疗观在治疗视疲劳方面有独特的疗效。3、缓解全身性疾病造成的视疲劳。通过对糖尿病、贫血、高血压、内分泌紊乱等各种疾病的调理来缓解视疲劳。
有的人以为保健品对疾病有直接疗效，混淆了保健品和药品的功效，甚至去看病还抱着一堆保健品。保健品只能预防和调节机体的亚健康状态，如果不经医生指导就盲目服用，就会影响治疗甚至加重病情。要知道将保健品以药品形式每天定量服用，一旦停用，往往会使服用者若有所失，造成心理的不适。
本发明的配方属于食品类，目前市面上的食品类护眼产品，基本属于空白，本发明解决了市场上的技术空白，从药食同源的方式，根源解决视疲劳问题。本发明能够通过药食同源原理根源上解决视疲劳、假性近视等问题，对比市面上的眼药水、视力平衡仪等各类产品效果都要好，安全无毒副作用。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种缓解视疲劳的中药组合物的制备方法和应用。
本发明缓解视疲劳的中药组合物组方是在金元四大家李东垣编著《东垣试效方》中经典古方“地芝丸”的基础上结合现代组方科学配伍而成。地芝丸配方为生地黄10g，天冬10g，橘皮5～10g，甘菊花5～10g，功效补益肝肾，主治目能远视，不能近视，常用于治疗老视、远视、散光。方中以生地黄、菊花补肾填精，益水之下源；天冬润肺滋阴，益水之上源；脾胃为生化之源，转输之枢，方中橘皮理脾胃，调气机，以助体内阴精水液的生成和输布。橘皮味苦微寒，有别于其它健脾药之甘温和行气药之辛温，可防辛温耗伤阴津。
本发明缓解视疲劳的中药组合物组方为决明子20～40份、黄精20～40份、玉竹20～40份、菊花20～40份、橘皮20～40份、桑叶20～40份、枸杞子1～10份、黑枸杞1～10份、山药1～10份、地龙蛋白0.5～2份、叶黄素0.005～0.015份和胡萝卜素0.015～0.045份。
现有技术中，地芝明目丸配方为生地黄、天冬、橘皮、甘菊花，本发明中，发明人将地黄、天冬滋阴之药调整为更为安全食用的黄精、玉竹，另加以决明子，桑叶，枸杞子，黑枸杞，山药，地龙蛋白，叶黄素，胡萝卜素等，该复方主要作用机制如下：其中决明子传统上甘、苦，性寒，微咸。归肝、大肠经。具有清肝明目，润肠通便。富含蒽醌、萘并吡喃酮和脂肪酸等类化学成分，药理研究表明其具有明目、降血脂、降血压、降血糖、润肠通便、保肝抗氧化、抗衰老、抑菌及抗癌等作用；黄精补气养阴，健脾，润肺，益肾，主要用于脾胃气虚，体倦乏力，胃阴不足，口干食少，肺虚燥咳，劳嗽咳血，精血不足，腰膝酸软，须发早白，内热消渴；玉竹养阴润燥，生津止渴，用于肺胃阴伤，燥热咳嗽，咽干口渴，内热消渴；黄精玉竹通过养阴达到明目的效果，菊花散风清热，平肝明目，清热解毒，应用于风热感冒，头痛眩晕，目赤肿痛，眼目昏花，疮痈肿毒；橘皮理气宽中，行滞消胀。用于胸胁气滞，胀满疼痛，食积不化，痰饮内停，胃下垂，脱肛，子官脱垂；，传统在地芝丸的作用于眼睛的作用机制为宽肠去去滞；:桑叶具有疏散风热、清肺润燥,清肝明目之效,是风热感冒,肺热燥咳,头晕头痛,目赤昏花患者的保健佳品；枸杞子滋肾，润肺，补肝，明目。治肝肾阴亏，腰膝酸软，头晕，目眩，目昏多泪，虚劳咳嗽，消渴，遗精，在预防酒精肝、化学性肝损伤、视网膜病变、青光眼等疾病方面也具有一定的功效；黑枸杞养肝明目、补肾益精、延缓衰老，现代药理研究表明具有抗衰老、美白护肤、降血压作用；山药健脾，补肺，固肾，益精。治脾虚泄泻，久痢，虚劳咳嗽，消渴，遗精、带下，小便频数。补脾养胃，生津益肺，补肾涩精，用于脾虚食少、久泻不止、肺虚喘咳、肾虚遗精、带下、尿频、虚热消渴；地龙蛋白含黄嘌呤、腺嘌呤、鸟嘌呤、胆碱等，具有解热、镇静、抗惊厥作用，地龙通过活血化瘀达到治疗视网膜静脉阻赛等；叶黄素是人体视网膜的主要色素成分，保护眼睛不受光线损害，延缓眼睛的老化及防止病变，可促进视网膜细胞中视紫质(rhodopsin)的再生成，可预防重度近视及视网膜剥离，并可增进视力、保护视力；胡萝卜素是一种具有生理活性的物质，在动物体内可转化成维生素a，可治疗夜盲症，干眼病及上皮组织角化症，是构成视觉细胞内的感光物质。
以上全方配方严谨，方药种类和剂量得到最合理的确认，显示了很好的缓解视疲劳的作用和效果。
本发明包括如下技术方案：
技术方案1：
缓解视疲劳的中药组合物的水提取制备方法，包括以下重量份的原料：决明子20～40份、黄精20～40份、玉竹20～40份、菊花20～40份、橘皮20～40份、桑叶20～40份、枸杞子1～10份、黑枸杞1～10份、山药1～10份、地龙蛋白0.5～2份、叶黄素0.005～0.015份和胡萝卜素0.015～0.045份；
制备方法包括如下步骤：取决明子、黄精、玉竹、菊花、橘皮和桑叶，按比例称取原料，加5～15倍水量浸泡20-30min，加热提取3次，第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算，合并提取液，浓缩获得的提取液至所述提取液体积为所述原料重量的3～5倍，获得初步浓缩提取液；进一步干燥至相对密度为1.0～1.2g/cm3的提取物；
将以上所得提取物磨成粉，另按比例称取枸杞子、黑枸杞和山药磨成粉，最后加入地龙蛋白、叶黄素和胡萝卜素，即得缓解视疲劳中药组合物。
技术方案2：
缓解视疲劳的中药组合物的醇提取制备方法，包括以下重量份的原料：决明子20～40份、黄精20～40份、玉竹20～40份、菊花20～40份、橘皮20～40份、桑叶20～40份、枸杞子1～10份、黑枸杞1～10份、山药1～10份、地龙蛋白0.5～2份、叶黄素0.005～0.015份和胡萝卜素0.015～0.045份；
制备方法包括如下步骤：取决明子、黄精、玉竹、菊花、橘皮和桑叶，按比例称取原料，加5～15倍65％～85％乙醇浸泡20-30min，加热提取3次，第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算，合并提取液，浓缩获得的提取液至所述提取液的体积为所述原料重量的3～5倍，获得初步浓缩提取液；进一步干燥至相对密度为1.0～1.2g/cm3提取物。
将以上所得提取物磨成粉，另按比例称取枸杞子、黑枸杞和山药磨成粉，最后加入地龙蛋白、叶黄素和胡萝卜素，即得缓解视疲劳中药组合物。
技术方案3：
缓解视疲劳的中药组合物的水提醇沉制备方法，包括以下重量份的原料：决明子20～40份、黄精20～40份、玉竹20～40份、菊花20～40份、橘皮20～40份、桑叶20～40份、枸杞子1～10份、黑枸杞1～10份、山药1～10份、地龙蛋白0.5～2份、叶黄素0.005～0.015份和胡萝卜素0.015～0.045份；
制备方法包括如下步骤：
1)制备浓缩液：取决明子、黄精、玉竹、菊花、橘皮和桑叶，按比例称取原料，加5～15倍水量浸泡20-30min，加热提取3次，第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算，合并提取液，浓缩获得的提取液至所述提取液体积为所述原料重量的3～5倍，获得初步浓缩提取液；
2)加乙醇沉淀：加适量乙醇到上述制备的初步浓缩提取液中，使溶剂含醇量为65～75％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇，得到精制液，浓缩，干燥即得提取物。
3)将以上所得提取物磨成粉，另按比例称取枸杞子、黑枸杞和山药磨成粉，最后加入地龙蛋白、叶黄素和胡萝卜素，即得缓解视疲劳中药组合物。
技术方案4：
缓解视疲劳的中药组合物的大孔树脂纯化制备方法，包括以下重量份的原料：决明子20～40份、黄精20～40份、玉竹20～40份、菊花20～40份、橘皮20～40份、桑叶20～40份、枸杞子1～10份、黑枸杞1～10份、山药1～10份、地龙蛋白0.5～2份、叶黄素0.005～0.015份和胡萝卜素0.015～0.045份；
制备方法包括如下步骤：
1)制备浓缩液：取决明子、黄精、玉竹、菊花、橘皮和桑叶，按比例称取原料，加5～15倍水量浸泡20-30min，加热提取3次，第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算，合并提取液，浓缩获得的提取液至所述提取液体积为所述原料重量的3～5倍，获得初步浓缩提取液；
2)大孔树脂纯化：分别加3～5倍体积热水到上步获得的初步浓缩提取液中，取上清液；将上清液过大孔树脂柱吸附，弃流出液；然后用1～5bv的水以0.5～2.5bv/小时的流速洗涤所述吸附柱，弃水洗液；之后采用50～70％的乙醇，洗脱体积3～5bv，以0.5～2.5bv/小时的流速洗脱吸附柱，收集该乙醇洗脱液，浓缩、干燥所述乙醇洗脱液，获得提取物。
3)将以上所得提取物磨成粉，另按比例称取枸杞子、黑枸杞和山药磨成粉，最后加入地龙蛋白、叶黄素和胡萝卜素，即得缓解视疲劳中药组合物。
技术方案5：
缓解视疲劳的中药组合物的大孔树脂纯化制备方法，包括以下重量份的原料：决明子20～40份、黄精20～40份、玉竹20～40份、菊花20～40份、橘皮20～40份、桑叶20～40份、枸杞子1～10份、黑枸杞1～10份、山药1～10份、地龙蛋白0.5～2份、叶黄素0.005～0.015份和胡萝卜素0.015～0.045份；
制备方法包括如下步骤：
1)制备浓缩液：取决明子、黄精、玉竹、菊花、橘皮和桑叶，按比例称取原料，加5～15倍65％～85％乙醇浸泡20-30min，加热提取3次，第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算，合并提取液，浓缩获得的提取液至所述提取液的体积为所述原料重量的3～5倍，获得初步浓缩提取液；
2)大孔树脂纯化：分别加3～5倍体积热水到上步获得的初步浓缩提取液中，取上清液；将上清液过大孔树脂柱吸附，弃流出液；上样后先用5bv的水洗涤所述吸附柱，弃水洗液；然后用1～5bv的水以0.5～2.5bv/小时的流速洗涤所述吸附柱，弃水洗液；之后采用50～70％的乙醇，洗脱体积3～5bv，以0.5～2.5bv/小时的流速洗脱吸附柱，收集该乙醇洗脱液，浓缩、干燥所述乙醇洗脱液，获得提取物。
3)将以上所得提取物磨成粉，另按比例称取枸杞子、黑枸杞和山药磨成粉，最后加入地龙蛋白、叶黄素和胡萝卜素，即得缓解视疲劳中药组合物。
技术方案6：
采用上述技术方案1-5的方法制备而得的中药组合物中，其含有以重量计，粗多糖不低于3.412％、蛋白质不低于1.314％、大黄酚不低于0.016％、橙黄决明素不低于0.006％、芦丁不低于0.007％、叶黄素不低于0.026％、胡萝卜素不低于0.079％。
技术方案7：
提供了含有上述技术方案1-5的方法制备而得的中药组合物的口服固体制剂，其中口服固体制剂包括：片剂、硬胶囊、软胶囊、颗粒剂、口服液；颗粒剂、硬胶囊以及片剂辅料选自淀粉、糖粉、乳糖、糊精、甜菊糖、预胶化淀粉、微晶纤维素、碳酸氢钙、甘露醇、羟丙基甲基纤维素、硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉、聚乙二醇类等常用辅料；软胶囊剂辅料选自聚乙二醇(聚乙二醇2000-6000)、蜂蜡、液体石蜡、植物油、甘油、明胶等。口服液辅料选用β-环糊精、山梨醇等，其中片剂具体指普通压制片、包衣片、糖衣片、薄膜衣片。
技术方案8：
上述技术方案1-5的方法制备而得的中药组合物在制备缓解视疲劳药物或保健品或普通食品中的应用。
技术方案9：
提供了缓解视疲劳“地芝明目丸”方水提取制备方法，其特征在于，包括以下重量份的原料：生地黄10、天冬10份、橘皮5～10份、菊花5～10份；
制备方法包括如下步骤：取生地黄、天冬、橘皮、菊花，加10倍水量浸泡20-30min，加热提取3次，第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算，合并提取液，浓缩获得的提取液至所述提取液体积为所述原料重量的3倍，获得初步浓缩提取液；进一步干燥至相对密度为1.0～1.2g/cm3提取物。
所得提取物中，梓醇不低于0.002％、毛蕊花糖苷不低于0.001％、柚皮苷不低于0.021％、新橙皮苷不低于0.016％、绿原酸不低于0.003％。
说明：
本发明中，所用的决明子、黄精、玉竹、菊花、橘皮、桑叶、枸杞子、黑枸杞、山药、地黄、天冬原料均为它们的中药饮片。
本发明中，所涉及的乙醇的百分浓度单位％均为体积百分浓度％v/v。
本发明具备以下优点：
1、本发明的中药组合物以决明子、黄精、玉竹、菊花、橘皮、桑叶、枸杞子、黑枸杞、山药为原料制备。其中决明子为豆科植物决明(cassiaobtusifolial.)或小决明(cassiatoral.)的干燥成熟种子，黄精为百合科植物滇黄精(polygonatumkingianumcoll.ethemsl.)、黄精(polygonatumsibiricumred.)或多花黄精(polygonatumcyrtonemahua)的干燥根茎，玉竹为百合科植物玉竹(polygonatumodoratum(mill.)druce)的干燥根茎，菊花为菊科植物菊(chrysanthemummorifoliumramat.)的干燥头状花序，橘皮(又称陈皮)为芸香科植物橘citrusreticulatablanco及其栽培变种的干燥成熟果皮，桑叶为桑科植物桑(morusalbal.)的干燥叶，枸杞子为茄科植物宁夏枸杞(lyciumbarbaruml.)的干燥成熟果实，黑枸杞为为茄科植物黑果枸杞(lyciumruthenicummurr)的果实，山药为薯蓣科植物薯蓣(dioscoreaoppositathunb.)的干燥根茎，地黄为玄参科植物地黄(rehmanniaglutinosalibosch.)的新鲜或干燥块根，天冬为百合科植物天门冬(asparaguscochinchinensis(lour.)merr.)的干燥块根。获得的中药组合物为所含各种药材活性成分协同起效的混合物，它不同于活性单体，其药效也不同于各种药材活性成分药效的简单加和。
2、本发明的缓解视疲劳中药组合物均以决明子、黄精、玉竹、菊花、橘皮、桑叶、枸杞子、黑枸杞、山药为原料，处方比例清晰明确。经查验相关文献可知其具体配方及比例如下：
决明子20～40份、黄精20～40份、玉竹20～40份、菊花20～40份、橘皮20～40份、桑叶20～40份、枸杞子1～10份、黑枸杞1～10份、山药1～10份、地龙蛋白0.5～2份、叶黄素0.005～0.015份、胡萝卜素0.015～0.045份。本配方是在古方的基础上添加新成分的新配方。
3、本发明采用了水提、醇提、水提醇沉、大孔树脂纯化等多种方法，从根本上保证缓解视疲劳中药汤剂的优越性，为制备成高质量的不同剂型产品提供保障。本发明提供的提取物的制备工艺能有效地富集主要活性成分如：粗多糖、蛋白质、大黄酚、橙黄决明素、芦丁、梓醇、毛蕊花糖苷、柚皮苷、新橙皮苷、绿原酸等。本发明的配方疗效比市面上的眼药水、视力平衡仪等护眼产品具有更好的疗效，眼药水为保持药物的无菌性和延长药物的有效期，其中一般都加入防腐剂保质。长期过度接触防腐剂，可能会对眼睛产生伤害，导致正常泪膜受到破坏，角膜上皮细胞出现损伤。绝大多数缓解疲劳的眼药水中也含有防腐剂成分，长期使用不仅对角膜上皮会产生损害，而且对结膜杯状细胞会严重损伤。器械类产品使用不方便，而且效果不佳，依赖性强。而本产品安全无毒副作用，从药食同源的角度根源上解决视疲劳和假性近视等问题。
本发明克服了“明目地黄丸”或“地芝丸”传统制备工艺以及适应症的不足，采用先进的制备工艺，严格把控质量，保证产品稳定，并且本发明产品具有更广的适应症和更好的疗效，数据详见实施例9-10。地芝丸为经典传统古方，组方含非药食同源产品，安全性比本发明差。且为传统中药制剂，制备工艺粗糙，因多种原因，市面并没有上市。
4、质量控制采用高效液相分析方法进行含量测定，简单易控。本发明的提取物的物质基础为一定比例的多个活性成分含量组成，对于该配方，尚为首次提出活性成分清晰的物质基础。体现发明专利的创新性。
5、本发明提供的大孔树脂纯化制备方法中采用树脂纯化方法，该方法简便、快捷、重现性好；所选用的大孔树脂吸附量大，解吸率大，可反复使用，降低工艺成本；所用的溶剂乙醇，价廉无毒。经大孔树脂纯化的制备方法得到的提取物与原方剂的水煎物相比，体积小、中药内在质量高，产品吸潮性减少、稳定性增加，容易制成外观美观的各种剂型。
6、本发明的制备方法所制备的提取物具缓解视疲劳功能。而且毒性低，具有很好的用药安全性，这充分提示了本工艺制备的提取物的临床用药的安全性。
7、本发明提供了缓解视疲劳“地芝明目丸”方水提取制备方法，包括以下重量份的原料：生地黄10、天冬10份、橘皮5～10份、菊花5～10份；
制备方法包括如下步骤：取生地黄、天冬、橘皮、菊花，加10倍水量浸泡20-30min，加热提取3次，第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算，合并提取液，浓缩获得的提取液至所述提取液体积为所述原料重量的3倍，获得初步浓缩提取液；进一步干燥至相对密度为1.0～1.2g/cm3提取物。
所得提取物中，梓醇不低于0.002％、毛蕊花糖苷不低于0.001％、柚皮苷不低于0.021％、新橙皮苷不低于0.016％、绿原酸不低于0.003％。
因此，本发明中所述的缓解视疲劳中药组合物适合工业化生产，具有很强的实用性。
具体实施方式
通过下面的实施例可以更好的理解本发明的本质，但不以任何方式限制本发明。
材料来源：决明子为豆科植物决明(cassiaobtusifolial.)或小决明(cassiatoral.)的干燥成熟种子，黄精为百合科植物滇黄精(polygonatumkingianumcoll.ethemsl.)、黄精(polygonatumsibiricumred.)或多花黄精(polygonatumcyrtonemahua)的干燥根茎，玉竹为百合科植物玉竹(polygonatumodoratum(mill.)druce)的干燥根茎，菊花为菊科植物菊(chrysanthemummorifoliumramat.)的干燥头状花序，橘皮(又称陈皮)为芸香科植物橘citrusreticulatablanco及其栽培变种的干燥成熟果皮，桑叶为桑科植物桑(morusalbal.)的干燥叶，枸杞子为茄科植物宁夏枸杞(lyciumbarbaruml.)的干燥成熟果实，黑枸杞为为茄科植物黑果枸杞(lyciumruthenicummurr)的果实，山药为薯蓣科植物薯蓣(dioscoreaoppositathunb.)的干燥根茎，地黄为玄参科植物地黄(rehmanniaglutinosalibosch.)的新鲜或干燥块根，天冬为百合科植物天门冬(asparaguscochinchinensis(lour.)merr.)的干燥块根。其中材料均通过商业途径购买。
地龙蛋白，卫健委2009年第18号公告列为新资源食品
叶黄素，属于食品添加剂gb2760-2014
胡萝卜素，属于食品添加剂gb2760-2014
实施例1水提取方法制备缓解视疲劳中药组合物
方法1：按比例称取决明子20公斤、黄精20公斤、玉竹20公斤、菊花20公斤、橘皮20公斤和桑叶20公斤，以水为溶剂提取，0.60吨水量浸泡20min，加热提取3次(第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算)，合并提取液，浓缩获得的提取液至所述提取液体积为所述原料重量的3倍，获得初步浓缩提取液；进一步干燥至相对密度为1.0g/cm3的提取物。
将以上所得提取物磨成粉，另称取枸杞子1公斤、黑枸杞1公斤、山药1公斤磨成粉，最后加入地龙蛋白0.5公斤、叶黄素0.005公斤和胡萝卜素0.015公斤，即得缓解视疲劳中药组合物(批号为18010106)。
方法2：按比例称取决明子40公斤、黄精40公斤、玉竹40公斤、菊花40公斤、橘皮40公斤和桑叶40公斤，以水为溶剂提取，3.60吨水量浸泡30min，加热提取3次(第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算)，合并提取液，浓缩获得的提取液至所述提取液体积为所述原料重量的5倍，获得初步浓缩提取液；进一步干燥至相对密度为1.2g/cm3的提取物。
将以上所得提取物磨成粉，另称取枸杞子10公斤、黑枸杞10公斤和山药10公斤磨成粉，最后加入地龙蛋白2公斤、叶黄素0.015公斤和胡萝卜素0.045公斤，即得缓解视疲劳中药组合物(批号为18010208)。
方法3：按比例称取决明子30公斤、黄精30公斤、玉竹30公斤、菊花30公斤、橘皮30公斤和桑叶30公斤，以水为溶剂提取，1.80吨水量浸泡25min，加热提取3次(第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算)，合并提取液，浓缩获得的提取液至所述提取液体积为所述原料重量的4倍，获得初步浓缩提取液；进一步干燥至相对密度为1.1g/cm3的提取物。
将以上所得提取物磨成粉，另称取枸杞子5公斤、黑枸杞5公斤、山药5公斤磨成粉，最后加入地龙蛋白1公斤、叶黄素0.010公斤和胡萝卜素0.030公斤，即得缓解视疲劳中药组合物(批号为18010309)。
实施例2醇提取方法制备缓解视疲劳中药组合物
方法1：按比例称取决明子20公斤、黄精20公斤、玉竹20公斤、菊花20公斤、橘皮20公斤和桑叶20公斤，以65％乙醇为溶剂提取，0.60吨65％乙醇浸泡20min，加热提取3次，第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算(每次的回流提取时间从沸腾后开始计算)，提取液合并，静置24小时，过滤取上清液，将上清液浓缩到原药材的3倍，获得初步浓缩提取液；进一步干燥至相对密度为1.0g/cm3的提取物。
将以上所得提取物磨成粉，另称取枸杞子1公斤、黑枸杞1公斤、山药1公斤磨成粉，最后加入地龙蛋白0.5公斤、叶黄素0.005公斤和胡萝卜素0.015公斤，即得缓解视疲劳中药组合物(批号为18020423)。
方法2：按比例称取决明子40公斤、黄精40公斤、玉竹40公斤、菊花40公斤、橘皮40公斤和桑叶40公斤，以85％乙醇为溶剂提取，3.60吨85％乙醇浸泡30min，加热提取3次，第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算(每次的回流提取时间从沸腾后开始计算)，提取液合并，静置24小时，过滤取上清液，将上清液浓缩到原药材的5倍，获得初步浓缩提取液；进一步干燥至相对密度为1.2g/cm3的提取物。
将以上所得提取物磨成粉，另称取枸杞子10公斤、黑枸杞10公斤、山药10公斤磨成粉，最后加入地龙蛋白2公斤、叶黄素0.015公斤和胡萝卜素0.045公斤，即得缓解视疲劳中药组合物(批号为18020524)。
方法3：按比例称取决明子30公斤、黄精30公斤、玉竹30公斤、菊花30公斤、橘皮30公斤和桑叶30公斤，以75％乙醇为溶剂提取，1.80吨75％乙醇浸泡25min，加热提取3次，第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算(每次的回流提取时间从沸腾后开始计算)，提取液合并，静置24小时，过滤取上清液，将上清液浓缩到原药材的4倍，获得初步浓缩提取液；进一步干燥至相对密度为1.1g/cm3的提取物。
将以上所得提取物磨成粉，另称取枸杞子5公斤、黑枸杞5公斤、山药5公斤磨成粉，最后加入地龙蛋白1公斤、叶黄素0.010公斤和胡萝卜素0.030公斤，即得缓解视疲劳中药组合物(批号为18020625)。
实施例3水提醇沉方法制备缓解视疲劳中药组合物
方法1：按比例称取决明子20公斤、黄精20公斤、玉竹20公斤、菊花20公斤、橘皮20公斤和桑叶20公斤，以水为溶剂提取，加0.60吨水量浸泡20min，加热提取3次(第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算)，合并提取液，浓缩获得的提取液至所述提取液体积为所述原料重量的3倍，获得初步浓缩提取液；
边搅拌边缓慢加入适量乙醇，使溶剂含醇量为65％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇，得到精制液，浓缩，干燥获得提取物。
将以上所得提取物磨成粉，另称取枸杞子1公斤、黑枸杞1公斤、山药1公斤磨成粉，最后加入地龙蛋白0.5公斤、叶黄素0.005公斤和胡萝卜素0.015公斤，即得缓解视疲劳中药组合物(批号为18030518)。
方法2：按比例称取决明子40公斤、黄精40公斤、玉竹40公斤、菊花40公斤、橘皮40公斤和桑叶40公斤，以水为溶剂提取，3.60吨水量浸泡30min，加热提取3次(第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算)，合并提取液，浓缩获得的提取液至所述提取液体积为所述原料重量的5倍，获得初步浓缩提取液；
边搅拌边缓慢加入适量乙醇，使溶剂含醇量为75％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇，得到精制液，浓缩，干燥获得提取物。
将以上所得提取物磨成粉，另称取枸杞子10公斤、黑枸杞10公斤、山药10公斤磨成粉，最后加入地龙蛋白2公斤、叶黄素0.015公斤和胡萝卜素0.045公斤，即得缓解视疲劳中药组合物(批号为18030620)。
方法3：按比例称取决明子30公斤、黄精30公斤、玉竹30公斤、菊花30公斤、橘皮30公斤和桑叶30公斤，以水为溶剂提取，1.80吨水量浸泡25min，加热提取3次(第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算)，合并提取液，浓缩获得的提取液至所述提取液体积为所述原料重量的4倍，获得初步浓缩提取液；
边搅拌边缓慢加入适量乙醇，使溶剂含醇量为70％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇，得到精制液，浓缩，干燥获得提取物。
将以上所得提取物磨成粉，另称取枸杞子5公斤、黑枸杞5公斤、山药5公斤磨成粉，最后加入地龙蛋白1公斤、叶黄素0.010公斤和胡萝卜素0.030公斤，即得缓解视疲劳中药组合物(批号为18030722)。
实施例4大孔树脂方法一制备缓解视疲劳中药组合物
方法1：按比例称取决明子20公斤、黄精20公斤、玉竹20公斤、菊花20公斤、橘皮20公斤和桑叶20公斤，以水为溶剂提取，0.60吨水量浸泡20min，加热提取3次(第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算)，合并提取液，浓缩获得的提取液至所述提取液体积为所述原料重量的3倍，获得初步浓缩提取液；
将初步浓缩提取液加3倍热水稀释，加入适量中药澄清剂壳聚糖，离心，去沉淀，取上清液，上样于d101大孔树脂柱(在上样前分别用酸，碱，水，醇对树脂柱进行前处理)，上样后先用1bv纯水冲洗，水溶液弃除，改用3bv的50％乙醇洗脱，洗脱液流速为0.5bv/h，收集该乙醇洗脱液。继续减压回收溶剂，收集浸膏，干燥获得提取物。
将以上所得提取物磨成粉，另称取枸杞子1公斤、黑枸杞1公斤、山药1公斤磨成粉，最后加入地龙蛋白0.5公斤、叶黄素0.005公斤和胡萝卜素0.015公斤，即得缓解视疲劳中药组合物(批号为18040817)。
方法2：按比例称取决明子40公斤、黄精40公斤、玉竹40公斤、菊花40公斤、橘皮40公斤和桑叶40公斤，以水为溶剂提取，3.60吨水量浸泡30min，加热提取3次(第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算)，合并提取液，浓缩获得的提取液至所述提取液体积为所述原料重量的5倍，获得初步浓缩提取液；
将初步浓缩提取液加5倍热水稀释，加入适量中药澄清剂壳聚糖，离心，去沉淀，取上清液，上样于d101大孔树脂柱(在上样前分别用酸，碱，水，醇对树脂柱进行前处理)，上样后先用5bv纯水冲洗，水溶液弃除，改用5bv的70％乙醇洗脱，洗脱液流速为2.5bv/h，收集该乙醇洗脱液。继续减压回收溶剂，收集浸膏，干燥获得提取物。
将以上所得提取物磨成粉，另称取枸杞子10公斤、黑枸杞10公斤、山药10公斤磨成粉，最后加入地龙蛋白2公斤、叶黄素0.015公斤和胡萝卜素0.045公斤，即得缓解视疲劳中药组合物(批号为18040927)。
方法3：按比例称取决明子30公斤、黄精30公斤、玉竹30公斤、菊花30公斤、橘皮30公斤和桑叶30公斤，以水为溶剂提取，1.80吨水量浸泡25min，加热提取3次(第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算)，合并提取液，浓缩获得的提取液至所述提取液体积为所述原料重量的4倍，获得初步浓缩提取液；
将初步浓缩提取液加4倍热水稀释，加入适量中药澄清剂壳聚糖，离心，去沉淀，取上清液，上样于d101大孔树脂柱(在上样前分别用酸，碱，水，醇对树脂柱进行前处理)，上样后先用2.5bv纯水冲洗，水溶液弃除，改用4bv的60％乙醇洗脱，洗脱液流速为1.5bv/h，收集该乙醇洗脱液。继续减压回收溶剂，收集浸膏，干燥获得提取物。
将以上所得提取物磨成粉，另称取枸杞子5公斤、黑枸杞5公斤、山药5公斤磨成粉，最后加入地龙蛋白1公斤、叶黄素0.010公斤和胡萝卜素0.030公斤，即得缓解视疲劳中药组合物(批号为18041021)。
实施例5大孔树脂方法二制备缓解视疲劳中药组合物
方法1：按比例称取决明子20公斤、黄精20公斤、玉竹20公斤、菊花20公斤、橘皮20公斤和桑叶20公斤，以65％乙醇为溶剂提取，0.60吨65％乙醇浸泡20min，加热提取3次，第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算(每次的回流提取时间从沸腾后开始计算)，提取液合并，静置24小时，过滤取上清液，将上清液浓缩到原药材的3倍，获得初步浓缩提取液；
将浓缩提取液加3倍热水稀释，加入适量中药澄清剂壳聚糖，离心，去沉淀，取上清液，上样于d101大孔树脂柱(在上样前分别用酸，碱，水，醇对树脂柱进行前处理)，上样后先用5bv水(用1％盐酸调节ph为5)洗涤所述吸附柱，弃水洗液；再用中性1bv水溶液洗脱，水溶液弃除，改用3bv的50％乙醇洗脱，洗脱流速为0.5bv/h，收集该乙醇洗脱液。继续减压回收溶剂，收集浸膏，干燥获得提取物。
将以上所得提取物磨成粉，另称取枸杞子1公斤、黑枸杞1公斤、山药1公斤磨成粉，最后加入地龙蛋白0.5公斤、叶黄素0.005公斤和胡萝卜素0.015公斤，即得缓解视疲劳中药组合物(批号为18051103)。
方法2：按比例称取决明子40公斤、黄精40公斤、玉竹40公斤、菊花40公斤、橘皮40公斤和桑叶40公斤，以85％乙醇为溶剂提取，3.60吨85％乙醇浸泡30min，加热提取3次，第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算(每次的回流提取时间从沸腾后开始计算)，提取液合并，静置24小时，过滤取上清液，将上清液浓缩到原药材的5倍，获得初步浓缩提取液；
将浓缩提取液加5倍热水稀释，加入适量中药澄清剂壳聚糖，离心，去沉淀，取上清液，上样于d101大孔树脂柱(在上样前分别用酸，碱，水，醇对树脂柱进行前处理)，上样后先用5bv水(用1％盐酸调节ph为6)洗涤所述吸附柱，弃水洗液；再用中性5bv水溶液洗脱，水溶液弃除，改用洗5bv的70％乙醇洗脱，洗脱流速为2.5bv/h，收集该乙醇洗脱液。继续减压回收溶剂，收集浸膏，干燥获得提取物。
将以上所得提取物磨成粉，另称取枸杞子10公斤、黑枸杞10公斤、山药10公斤磨成粉，最后加入地龙蛋白2公斤、叶黄素0.015公斤和胡萝卜素0.045公斤，即得缓解视疲劳中药组合物(批号为18051205)。
方法3：按比例称取决明子30公斤、黄精30公斤、玉竹30公斤、菊花30公斤、橘皮30公斤、桑叶30公斤，以75％乙醇为溶剂提取，1.80吨75％乙醇浸泡25min，加热提取3次，第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算(每次的回流提取时间从沸腾后开始计算)，提取液合并，静置24小时，过滤取上清液，将上清液浓缩到原药材的4倍，获得初步浓缩提取液；
将浓缩提取液加4倍热水稀释，加入适量中药澄清剂壳聚糖，离心，去沉淀，取上清液，上样于d101大孔树脂柱(在上样前分别用酸，碱，水，醇对树脂柱进行前处理)，上样后先用5bv水(用1％盐酸调节ph为5.5)洗涤所述吸附柱，弃水洗液；再用中性3bv水溶液洗脱，水溶液弃除，改用洗4bv的60％乙醇洗脱，洗脱流速为1.5bv/h，收集该乙醇洗脱液。继续减压回收溶剂，收集浸膏，干燥获得提取物。
将以上所得提取物磨成粉，另称取枸杞子5公斤、黑枸杞5公斤、山药5公斤磨成粉，最后加入地龙蛋白1公斤、叶黄素0.010公斤和胡萝卜素0.030公斤，即得缓解视疲劳中药组合物(批号为18051228)。
实施例6水提取方法制备缓解视疲劳“地芝明目丸”方提取物
方法1：按比例称取生地黄10g、天冬10g、橘皮5g、菊花5g，以水为溶剂提取，0.30吨水量浸泡20min，加热提取3次(第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算)，合并提取液，浓缩获得的提取液至所述提取液体积为所述原料重量的3倍，获得初步浓缩提取液；进一步干燥至相对密度为1.0g/cm3的提取物(批号为18050617)。
方法2：按比例称取生地黄10g、天冬10g、橘皮10g、菊花10g，以水为溶剂提取，0.40吨水量浸泡20min，加热提取3次(第一次提取2.5h，第二次提取1h，第三次提取30min，每次的提取时间从沸腾后开始计算)，合并提取液，浓缩获得的提取液至所述提取液体积为所述原料重量的3倍，获得初步浓缩提取液；进一步干燥至相对密度为1.2g/cm3的提取物(批号为18050621)。
实施例7缓解视疲劳中药组合物的口服制剂制备方法
1)缓解视疲劳中药组合物颗粒剂的制备
处方：(缓解视疲劳中药组合物分别取自于实施例1、实施例2、实施例3、
实施例4、实施例5、实施例6的缓解视疲劳中药组合物)
缓解视疲劳中药组合物：500.0g
淀粉：200.0g
磷酸氢钙：150.0g
糊精：100.0g
乳糖：50.0g
称取上述处方量缓解视疲劳中药组合物，加入上述处方量的辅料，加60％乙醇制软材，过20目制粒，50～60℃鼓风干燥(水份控制在5％～8％)，过16目筛整粒，即得缓解视疲劳中药组合物颗粒。
2)缓解视疲劳中药组合物包衣片的制备
处方：(缓解视疲劳中药组合物分别取自于实施例1、实施例2、实施例3、
实施例4、实施例5、实施例6的缓解视疲劳中药组合物)
缓解视疲劳中药组合物：500.0g
预胶化淀粉：200.0g
微晶纤维素：230.0g
甜菊糖：25.0g
蔗糖：25.0g
硬脂酸镁：10.0g
微粉硅胶：10.0g
包衣剂：诺彩tm胃溶包衣剂(适量)
称取上述处方量的缓解视疲劳中药组合物，加入上述处方量的辅料(硬脂酸镁、微粉硅胶外加)，加60％乙醇制软材，过20目制粒，50～60℃鼓风干燥(水份控制在5％～8％)，过16目筛整粒，与外加辅料硬脂酸镁、微粉硅胶混合均匀，压片，包衣，即得缓解视疲劳中药组合物包衣片。
3)缓解视疲劳中药组合物胶囊剂的制备
处方：(缓解视疲劳中药组合物分别取自于实施例1、实施例2、实施例3、
实施例4、实施例5、实施例6的缓解视疲劳中药组合物)
缓解视疲劳中药组合物：500.0g
羟丙甲纤维素：40.0g(一半外加一半內加)
预胶化淀粉：190.0g
微晶纤维素：200.0g
乳糖：25.0g
糖粉：25.0g
硬脂酸镁：10.0g
滑石粉：10.0g
称取上述处方量缓解视疲劳中药组合物，加入上述处方量的辅料(硬脂酸镁、滑石粉外加)，加60％乙醇制软材，过20目制粒，50～60℃鼓风干燥(水份控制在5％～8％)，过16目筛整粒，与外加辅料硬脂酸镁、微粉硅胶混合均匀，用充填机进行填充，即得缓解视疲劳中药组合物胶囊。
4)缓解视疲劳中药组合物软胶囊剂的制备
处方：(缓解视疲劳中药组合物分别取自于实施例1、实施例2、实施例3、
实施例4、实施例5、实施例6的缓解视疲劳中药组合物)
缓解视疲劳中药组合物：500.0g
植物油：140.0g
山梨醇：100.0g
甘油：50.0g
液体石蜡：60.0g
明胶：150.0g
称取上述处方量缓解视疲劳中药组合物与上述处方量的植物油、山梨醇混合均匀，将明胶与甘油分别盛装于贮液槽中，两液通过同心管状的双层喷头以不同速度喷出，使一定量的胶液将一定量的药液包裹后，滴入另一种不相互溶的冷却液(液体石蜡)中，胶液接触冷却液后因表面张力作用变为球形，并逐渐凝固而成软胶囊。
5)缓解视疲劳中药组合物口服液的制备
处方：(缓解视疲劳中药组合物分别取自于实施例1、实施例2、实施例3、
实施例4、实施例5、实施例6的缓解视疲劳中药组合物)
缓解视疲劳中药组合物：500.0g
β-环糊精：140.0g
蔗糖：100.0g
蒸馏水260.0g
称取上述处方量缓解视疲劳中药组合物，加入上述处方量的辅料，加蒸馏水溶解，搅拌均匀，即得缓解视疲劳中药组合物口服液。
实施例8缓解视疲劳中药组合物的活性成分测定
1、粗多糖的含量测定
(1)对照品溶液的制备：取葡萄糖对照品适量，精密称定，加水制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。
(2)硫酸蒽酮溶液的制备：精密称取蒽酮0.1g，加80％的硫酸溶液100ml使溶解，摇匀，即得。
(3)标准曲线的制备：分别精密量取对照品溶液0.2ml、0.4m1、0.6ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml，置10ml具塞试管中，加水至2.0ml，精密加入硫酸蒽酮溶液6ml，摇匀，置水浴中加热15min，取出，放入冰浴中冷却15min，以相应的试剂为空白，在625nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
(4)供试品溶液的制备：取按本发明实例1、2、3、4、5所述的方法分别制得上述中药组合物各1个批号约2g，精密称定，置索氏提取器中，加水90ml，电加热器加热回流提取至提取液无色，提取液转移至100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密量取10ml，加入乙醇150ml，摇匀，4℃放置12小时，取出，离心，倾去上清液，沉淀加水溶解，转移至50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
(5)测定法：精密量取供试品溶液2ml，置10ml具塞试管中，精密加入硫酸蒽酮溶液6ml，摇匀，置水浴中加热15分钟，取出，放人冰浴中冷却15分钟，以相应的试剂为空白，在625nm波长处测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含葡萄糖的重量(mg)，计算，即得。本品按干燥品计算，含粗多糖以无水葡萄糖(c6h12o6)计。
2、蛋白质的含量测定
(1)仪器
电热恒温水浴锅(郑州长城)、紫外分光光度计(岛津uv-2600)、电子天平(赛多利斯cpa225d)、索氏提取器、电加热器(郑州长城drt-sx)、超声波清洗器(昆山舒美kq-300)、全自动凯氏定氮仪(福斯zrqf-f305)
(2)药品与试剂
葡萄糖对照品(中国药品生物制品检定所，批号为20051126)、本发明实例1、2、3、4、5所述的方法分别制得上述中药组合物，硫酸，香草醛，冰乙酸，高氯酸，乙酸乙酯、氢氧化钠、甲基红、溴甲酚绿均为分析纯。
(3)蛋白质含量测定
精密称定样品0.2～0.3g，加入10g催化剂后，再加入12ml浓硫酸，放入消化炉中，在420℃下消化2小时，待样品冷却后放入全自动凯氏定氮仪中，选择程序为加入40ml的稀释液(水)、60ml碱液(40％氢氧化钠)、30ml接收液(1l1％硼酸溶液+10ml溴甲酚绿指示液+7ml甲基红指示液)，并按照全自动凯氏定氮仪的操作规程检测，以硫酸滴定液(0.05mol/l)滴定，待反应液的颜色由绿色变为浅红色时即为反应终点。同法操作空白。
3、大黄酚、橙黄决明素、芦丁、叶黄素、胡萝卜素、梓醇、毛蕊花糖苷、橙皮苷、新橙皮苷、绿原酸和木犀草苷的含量测定
(1)色谱条件
agilent1260高效液相色谱仪，紫外检测器(dad)，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，c18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；大黄酚(中国食品药品检定研究院，批号：110773-20101)、橙黄决明素(中国食品药品检定研究院，批号：110663-20201)的检测波长：284nm，流动相：乙腈-0.1％磷酸溶液(0～15min，40：60；15～30min，40→90：60→10；30～40min，90：10)；芦丁(中国食品药品检定研究院，批号：110887-20101)的检测波长：358nm，流动相：甲醇-0.5％磷酸溶液(0～5min，30：70；5～10min，30→35：70→65；10～15min，35→40：65→60；15～18min，40→50：60→50)；叶黄素(中国食品药品检定研究院，批号：110368-20012)的检测波长：446nm，流动相：乙腈-甲醇(95：5)；β胡萝卜素(中国食品药品检定研究院，批号：110564-20162)的检测波长：450nm，流动相：甲醇-乙腈-水(73.5：24.5：2)；梓醇(中国食品药品检定研究院，批号：110368-20167)的检测波长：210nm，流动相：乙腈-0.1％磷酸溶液(1：99)；毛蕊花糖苷(中国食品药品检定研究院，批号：110468-20153)的检测波长：334nm，流动相：乙腈-0.1％醋酸水溶液(73.5：24.5：2)；柚皮苷和新橙皮苷(中国食品药品检定研究院，批号：110347-20166)的检测波长：283nm，流动相：乙腈-水(20：80)；；绿原酸(中国食品药品检定研究院，批号：110457-20159)的检测波长：348nm，流动相：乙腈-0.1％磷酸溶液(0～11min，，10→18：90→82；11～30min，18→20：82→80；30～40min，20：80)，流速：1.0ml/min；柱温：30℃；进样量：10μl。
(2)缓解视疲劳中药组合物样品的制备
按本发明实例1、2、3、4、5所述的方法分别制得上述中药组合物各1个批号。
(3)标准品溶液的配制
取大黄酚、橙黄决明素对照品适量，精密称定，加无水乙醇-乙酸乙酯(2：1)制成每1ml含大黄酚30μg、橙黄决明素20μg的混合溶液，即得；取芦丁对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；取叶黄素对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含13μg的溶液，即得；取β-胡萝卜素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；取梓醇对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含10μg的溶液，即得；取毛蕊花糖甘对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含10μg的溶液，即得；取柚皮苷、新橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含柚皮苷和新橙皮苷各80μg的溶液，即得；取绿原酸对照品适量，精密称定，加70％甲醇制成每1ml含35μg的溶液，即得。
(4)测定方法
分别取各批号的上述中药组合物样品适量，精密称定约10-25mg，转移至50ml容量瓶中，加甲醇40ml，常温下超声30min，取出冷却到室温，加甲醇至刻度，摇匀，吸取适量，定容至50ml，摇匀，即可测定。根据外标一点法计算各成分含量。结果见表1。
表1缓解视疲劳中药组合物各组分含量测定结果
故缓解视疲劳中药组合物，其含有以重量计，粗多糖不低于3.412％、蛋白质不低于1.314％、大黄酚不低于0.016％、橙黄决明素不低于0.006％、芦丁不低于0.007％、叶黄素不低于0.026％、胡萝卜素不低于0.079％。
表2缓解视疲劳“地芝丸”方提取物各组分含量测定结果
故缓解视疲劳“地芝丸”方提取物，其含有以重量计，梓醇不低于0.002％、毛蕊花糖苷不低于0.001％、柚皮苷不低于0.021％、新橙皮苷不低于0.016％、绿原酸不低于0.003％。
实施例9缓解视疲劳中药组合物在缓解视疲劳方面的应用
一、人体试食试验
通过考察服用本发明试样前后对受试者视力疲劳的影响，对本发明改善视疲劳的保健功能进行功能学评价。
1受试者纳入和排除标准
(参考卫生部颁发的《保健食品检验与评价技术规范实施手册》)
1.1受试者纳入标准
1.1.1儿童、青少年或成人。
1.1.2长期用眼，视力易疲劳者。
1.2受试者排除标准
1.2.1不符合纳入年龄标准的受试者；对保健食品过敏者。
1.2.2患有感染性眼部疾病者，角膜云翳、圆雉角膜等内外眼疾患者。
1.2.3患有眼底疾病或合并有心血管、脑血管、肝、肾、造血系统等疾病。
1.2.4短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判断者。
1.2.5长期服用其它有关治疗视力的药物或使用其它治疗方法，未能终止者。
1.2.6不符合纳入标准，未按规定服用，或资料不全等影响功效或安全性判断者。
1.3观察指标
1.3.1安全性指标
1.3.1.1血、尿常规检查，体格检查。
1.3.1.2肝、肾功能检查(儿童受试者不测定此项)。
1.3.1.3胸透、心电图、腹部b超检查(于试验前检查一次，儿童受试者不测定此项)。
1.3.2功效性指标(于试验开始及结束时检查)
1.3.2.1眼科检查，眼痛、眼胀、畏光、视物模糊、干涩等症状。
1.3.2.2明视持久度：测定方法见《保健食品检验与评价技术规范实施手册》附录。
1.3.2.3远视力。
1.4视力疲劳症状判定方法，见表1
表1视力疲劳症状判定方法(半定量积分法)
注：“偶感”是指1-2次/2天；“时有”是指1-3次/天；“经常”是指>3次/天
1.5数据处理和统计分析
将试验期收集的数据录入数据库，进行分析和统计学处理。症状积分和明视持久度为计量资料，改善率和总有效率为计数资料，分别采用t检验和检验进行x2比较。均以p<0.05或p<0.01为其差异显著性的标准。
2病例选择及分组
年龄20～40岁，长期用眼，视力疲劳，愿意接受30天试验者。采用自身和组间两种对照设计。根据症状及视力检查情况，同时考虑年龄、性别等因素，按随机、双盲法分成试验组和对照组，每组人数102人。
3给样方法
实验组：给予由实施例1-7制成的缓解视疲劳中药组合物，样品1-1(批号：18010106)、样品1-2(批号：18010208)、样品1-3(批号：18010309)、样品2-1(批号：18020423)、样品2-2(批号：18020524)、样品2-3(批号：18020625)、样品3-1(批号：18030518)、样品3-2(批号：18030620)、样品3-3(批号：18030722)、样品4-1(批号：18040817)、样品4-2(批号：18040927)、样品4-3(批号：18041021)、样品5-1(批号：18051103)、样品5-2(批号：18051205)、样品5-3(批号：18051228)、样品6-1(批号：18050617)、样品7-1(“明目地黄丸”批号：16052616)共十七组。每次10mg，每日2次。
对照组：给予杞菊地黄口服液，湖北东信惠济堂药业有限公司生产(批号20180112)，每次10ml，每日2次。
4功效判定标准
4.1眼科症状
症状改善：眼痛、眼胀、畏光、视物模糊、眼干涩任一症状改善1分及1分以上即为改善，5种症状任一改善且其他症状无恶化即判定症状改善。
有效：症状改善且明视持久度前后相差大于等于0.1，并经统计比较差异有显著性。
无效：未达到有效标准。
4.2明视持久度：平均明视持久度提高大于等于10％。
4.3远视力：试验前后眼视力对比。
5结果
实验组大部分患者服用本发明实施例1后，眼痛、眼胀、畏光、视物模糊、眼干涩等症状得到了不同程度的改善。
表2受试样对受试者视疲劳症状的影响
注：试验组与对照组相比，*p＜0.05。
由表2可知，试验组和对照组受试者视疲劳的症状均得到了良好的改善。试验组与对照组相比，其改善视疲劳症状的功能更优，显著优于对照组，并且试验组(实施例4-5)效果最好，试验组(实施例3)效果其次，试验组(实施例1-2)效果相对较差，试验组(实施例7)效果最差(p＜0.05)。
表3受试样对受试者远视力的影响(n＝102，x±s)
注：试验组与对照组相比，*p＜0.05。
由表3可知，受试后，试验组远视力改善明显，与对照组相比具有显著性差异，并且试验组(实施例4-5)效果最好，试验组(实施例3)效果其次，试验组(实施例1-2，6，7)效果相对较差(p＜0.05)。表明试验组对视疲劳受试者的保健功能更加佳。
表4受试样对受试者明视持久度的影响(n＝102，x±s)
注：试验组与对照组相比，*p＜0.05。
由表4可知，试验组和对照组受试者试验后平均明视持久度提高均大于10％，认为两组明视持久度均得到了改善。但试验组与对照组相比，试验组的明视持久度更高(有显著性差异)，并且试验组(实施例4-5)效果最好，试验组(实施例3)效果其次，试验组(实施例1-2，6，7)效果相对较差(p＜0.05)。表明本发明中药组合物具有更好的提高明视持久度的功能。
结论：本发明中药组合物能有效改善视疲劳症状，改善远视力，以及提高明视持久度，达到缓解视疲劳的作用。
实施例10缓解视疲劳中药组合物的急性毒理实验
预实验：按急性毒理实验方法，选用昆明小鼠50只，禁食、不禁水12h。把实施例1(批号：18010106)中提取物配制成最大浓度的混悬液，含生药3.678g/ml(以不堵塞灌胃器为限度)。每只小鼠每次灌胃约为1.2ml/20g(体重)，24h内灌胃3次，间隔4h。然后按常规饲养，并观察小鼠的毒性反应情况(外观、活动、呼吸、分泌物、排便、死亡等)，且连续称重7天。因以最大给药浓度、最大给药容量，均未测出半数致死量(ld50)，故做最大给药量实验。
最大给药量实验：在预试验的基础上，采用最大给药量法，选用昆明种小白鼠50只，雌雄各半，体重(20±2)g。给药前均禁食、不禁水12h。并按预实验方法配药，以每只小鼠给予最大生药浓度3.678g/ml，最大体积1.2ml/20g的药液灌胃，以观察14天内小鼠的外观、饮食、活动、排泄、死亡等情况。14天后以颈椎脱臼法处死小鼠，解剖后观察其重要脏器(心、肝、脾、肺、肾、胃、肠等)的变化。
1)一般表现
给药后14天内，实验组小鼠均饮食正常，皮毛光滑，活动自如，大小便正常，无异常分泌物，其呼吸系统、心血管系统、神经系统、消化系统与泌尿系统均未见异常，小鼠全部存活。其每天最大给药量均为每公斤大于236g。
2)体重变化情况
给药后14天内，2组小鼠体重均增加，通过分析给药后7天、14天2个时间内中药组与对照组的体重变化，发现2组体重无显著性差异(p＞0.05)。
3)主要脏器观察
2组小鼠经大体解剖并通过肉眼观察，未见脏器肿大、萎缩、坏死等异常现象，主要脏器均无任何不良病变，与空白对照组相近。说明实施例1(批号：18010106)中提取物无毒。以实施例1其他批号和实施例2-6的所有批号的提取物为样品，重复上述实验，发现所有样品均无毒。
综上所述，提示本药无毒，其临床用药量是一个安全的剂量，临床用药安全。