本发明属于动保制剂
技术领域：
，具体涉及一种蜂胶碘纳米乳及其制备方法。
背景技术：
：蜂胶(propolis)为具有芳香气味的不透明胶状固体，颜色呈黄褐色或灰褐色，味微苦，不溶于水，溶于乙醚、乙醇等，它是蜜蜂从树芽、树皮或其他植物的幼芽上采集的树脂，在蜜蜂加工时，混入腭腺分泌物和蜂蜡及其它有效成分而得。蜂胶醇提物中含有大量黄酮类、芳香酸、脂肪酸及萜烯类化合物，因而具有广谱抗菌、抗病毒和免疫增强作用。络合碘是碘和表面活性剂通过络合的方式而形成的不定型络合物。由于表面活性剂有很多种，配方和制作工艺也有很多种，因而，生成的碘伏种类繁多，有文献报道的碘伏就有100多种，我国市场上销售的碘伏也有10多种，如聚乙二醇碘、壬基酚聚氧乙烯醚碘、聚醇醚碘、洗必泰碘等等，这些碘都只能以液体状态存在，稳定性差，杀菌水平低，毒副作用参差不齐，在西方发达国家早被淘汰。固体络合碘在自然环境中较稳定，而配制成液体的络合碘，温度、自然挥发、水中矿物质等外界条件对其有效碘含量影响极大。在水温低或水硬度大的条件下，会出现沉淀等现象。目前市场上大多数络合碘产品，都存在上述缺点和不足，主要问题是有效成分碘含量会挥发降低，二是受水质特别是温度、水中矿物质等因素影响，限制了络合碘药效的发挥。纳米乳是由水、乳化剂、助乳化剂和油等自发形成、粒径在1～100nm的热力学稳定、各向同性的透明或半透明的均匀分散体系。纳米乳具有提高难溶性药物的溶解度，增强不稳定药物的稳定性的特点。药物纳米化后可以直接进入机体或病原微生物的细胞膜、不需要能量和载体的协助，生物利用度显著增高，另外，还具有一定的缓释和靶向作用，属于热力学稳定系统，已成为药物新剂型研究的热点之一。由于目前蜂胶碘类产品存在上述一系列缺点不足，给临床应用带来了很大困难，因此研发一种克服上述缺点不足的产品是该领域科研技术人员急待解决的新课题之一。技术实现要素：针对现有技术中存在的不足，本发明提供一种质量稳定、生物利用度高的蜂胶碘纳米乳，其制备工艺简单，条件温和。本发明的技术方案如下：一种蜂胶碘纳米乳，由以下组分按重量组成：酒制蜂胶4～15g、络合碘2～15g、三聚磷酸钠5～10g、聚氧化乙烯1～5g、月桂酰二乙醇胺5～10g、丙二醇10～35g、蒸馏水920～980g。上述技术方案中，三聚磷酸钠和聚氧乙烯的质量比为1:1-10:1；优选地，三聚磷酸钠和聚氧乙烯的质量比为5:1。在一个优选的技术方案中，蜂胶碘纳米乳由以下组分按重量组成：酒制蜂胶4g、络合碘2g、三聚磷酸钠5g、聚氧化乙烯1g、月桂酰二乙醇胺5g、丙二醇10g、蒸馏水980g。在一个优选的技术方案中，蜂胶碘纳米乳由以下组分按重量组成：酒制蜂胶5g、络合碘5g、三聚磷酸钠5g、聚氧化乙烯2g、月桂酰二乙醇胺6g、丙二醇15g、蒸馏水970g。在一个优选的技术方案中，蜂胶碘纳米乳由以下组分按重量组成：酒制蜂胶10g、络合碘8g、三聚磷酸钠7g、聚氧化乙烯3g、月桂酰二乙醇胺7g、丙二醇20g、蒸馏水950g。在一个优选的技术方案中，蜂胶碘纳米乳由以下组分按重量组成：酒制蜂胶10g、络合碘9g、三聚磷酸钠9g、聚氧化乙烯4g、月桂酰二乙醇胺8g、丙二醇25g、蒸馏水940g。在一个优选的技术方案中，蜂胶碘纳米乳由以下组分按重量组成：酒制蜂胶15g、络合碘15g、三聚磷酸钠10g、聚氧化乙烯5g、月桂酰二乙醇胺10g、丙二醇35g、蒸馏水920g。上述蜂胶碘纳米乳的制备方法，步骤如下：(1)按质量称取月桂酰二乙醇胺、酒制蜂胶、丙二醇，混合搅拌均匀；(2)按质量称取络合碘、三聚磷酸钠、聚氧化乙烯，加入部分称取好的蒸馏水，搅拌均匀；(3)将(2)所得溶液缓慢加入(1)中，不断搅拌，最后加入剩余蒸馏水，即得澄清的蜂胶碘纳米乳。本发明的有益效果为：1、工艺简单，条件温和，制备时间短，设备要求低；2、本发明制备的纳米乳有效成分碘稳定性好、生物利用度高，其粒径分布范围在35～90nm之间，符合纳米级材料的基本特征；3、本发明原料的选择及用量的限定，是本发明制备纳米乳的关键之处，原料之间相互作用，配合本发明的制备方法，制备出稳定性好、生物利用度高的纳米乳。具体实施方式在本发明中所使用的术语，除非有另外说明，一般具有本领域普通技术人员通常理解的含义。下面结合具体实施例，并参照数据进一步详细的描述本发明。以下实施例只是为了举例说明本发明，而非以任何方式限制本发明的范围。不同表面活性剂对纳米乳的影响为了得到较好的纳米乳，分别从阴离子表面活性剂、两性离子表面活性剂、非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂中选取具有代表性的表面活性剂进行对比试验。试验过程如下：将上述几种表面活性剂(分别10g)与10g酒制蜂胶混合均匀，然后将络合碘水溶液(含有10g络合碘，900g蒸馏水)逐滴加入上述混合均匀的酒制蜂胶液中，300r/min搅拌5min，再5000r/min离心30min，考察所形成乳剂的稳定性。试验结果如表1所示：表1不同表面活性剂对纳米乳的影响试验结果表明，除非离子表面活性剂月桂酰二乙醇胺能形成稳定的乳剂外，其它均无法形成稳定乳剂，因此选择非离子表面活性剂月桂酰二乙醇胺作为表面活性剂。不同助表面活性剂对纳米乳的影响试验为了得到更好的纳米乳，进行助表面活性剂的筛选，以对纳米乳的稳定性影响和助表面活性剂用量为指标进行筛选试验。试验过程如下：以月桂酰二乙醇胺作为表面活性剂，将10g月桂酰二乙醇胺与10g酒制蜂胶混合，添加不同助表面活性剂后混合均匀，然后将络合碘水溶液(含有10g络合碘，900g蒸馏水)逐滴加入上述混合均匀的酒制蜂胶液中，300r/min搅拌5min，再5000r/min离心30分钟，考察所形成乳剂的稳定性，以消耗的助表面活性剂质量最小者为最佳选择。上述助表面活性剂的添加量是逐渐增加的，纳米乳的形成经历一个从粘稠、稍浑浊、稍稀薄到澄清的过程，最终以形成的纳米乳在5000r/min离心30分钟条件下，是否分层作为依据，再在离心不分层的前提下，考察助表面活性剂的用量。试验结果如表2所示：表2不同助表面活性剂对纳米乳的影响试验助表面活性剂名称正丁酸乙醇甘油peg-200丙二醇助表面活性剂用量(g)不形成65553520由此可见，使用月桂酰二乙醇胺作为表面活性剂时，除正丁酸外，甘油、乙醇、peg-200作为助表面活性剂，都能形成乳剂，但是消耗的助表面活性剂用量不一，为了减少对环境的污染和对畜禽机体的不良刺激。所以，选择丙二醇作为助表面活性剂比较合适。不同增稠剂对纳米乳的影响为了得到更好的蜂胶碘纳米乳，进一步降低纳米乳中碘的挥发，保持碘的稳定性，对不同的增稠剂进行筛选。试验过程如下：将10g月桂酰二乙醇胺与10g酒制蜂胶混合，添加20g丙二醇，混合混匀。将不同种类的增稠剂0.5g添加于络合碘水溶液(含有10g络合碘，900g蒸馏水)中混合均匀，再将混合溶液逐滴加入上述混合均匀的酒制蜂胶液中，300r/min搅拌5min，再5000r/min离心30分钟，考察所形成乳剂的稳定性。试验结果如表3所示：表3不同增稠剂对乳剂的影响名称黄原胶聚氧乙烯羧甲基纤维素钠稳定性稍分层稳定稍分层试验结果表明，聚氧乙烯形成的乳剂比较稳定。不同螯合剂对纳米乳的影响为了得到更好的蜂胶碘纳米乳，进一步降低纳米乳中碘的挥发，保持碘的稳定性，对不同的螯合剂进行筛选。试验过程如下：将10g月桂酰二乙醇胺与10g酒制蜂胶混合，添加20g丙二醇，混合混匀。将不同种类的螯合剂1g添加于络合碘混合水溶液(含有10g络合碘，0.5g聚氧乙烯，900g蒸馏水)中混合均匀，再将混合溶液逐滴加入上述混合均匀的酒制蜂胶液中，300r/min搅拌5min，再5000r/min离心30分钟，考察所形成乳剂的稳定性。试验结果如表4所示：表4不同螯合剂对乳剂的影响名称柠檬酸钠edta-2na三聚磷酸钠稳定性分层稳定但乳剂中有絮状物稳定试验结果表明，三聚磷酸钠形成的乳剂比较稳定。螯合剂和增稠剂复配比例对纳米乳粒径和碘含量的影响试验为了保持蜂胶碘纳米乳中碘更好的稳定性，进一步降低纳米乳中碘的挥发，保持碘的稳定性，对螯合剂和增稠剂进行复配试验，以此观察对纳米乳粒径的影响和碘含量的影响。将10g月桂酰二乙醇胺与10g酒制蜂胶混合，添加20g丙二醇，混合混匀。将三聚磷酸钠、聚氧乙烯分别按照10:1、8:1、5:1、2:1、1:1的比例(两者共10g)分别添加于络合碘水溶液(含有10g络合碘，900g蒸馏水)中混合均匀，再将混合溶液逐滴加入上述混合均匀的酒制蜂胶液中，300r/min搅拌5min；取部分乳剂5000r/min离心30分钟后检测粒径，考察所形成乳剂的稳定性；取部分乳剂放入60℃高温试验箱中，第7天检测碘含量，然后与0天碘含量值比较，以其降低值大小考察所形成乳剂中碘含量的稳定性。试验结果如表5所示：表5螯合剂和增稠剂复配比例对纳米乳的影响试验比例10:18:15:12:11:1平均粒径(nm)60.357.535.648.652.5碘含量降低值％0.2110.2010.1160.1210.123试验结果表明，三聚磷酸钠和聚氧乙烯的比例为5:1时，形成的纳米乳平均粒径最小，碘的含量经过60℃高温试验箱7天，降低值最小。实施例1一种纳米乳的制备方法，按如下步骤进行：(1)称取月桂酰二乙醇胺5g、酒制蜂胶4g、丙二醇10g，混合搅拌均匀；(2)称取络合碘2g、三聚磷酸钠5g、聚氧化乙烯1g，加入500g蒸馏水中，搅拌均匀；(3)将(2)所得溶液缓慢加入(1)中，不断搅拌，最后加入剩余蒸馏水480g，即得澄清的蜂胶碘纳米乳。酒制蜂胶由杭州和蜂园保健品有限公司生产，批号fj20111001；络合碘由上海维酮材料科技有限公司生产，批号20200203。实施例2一种纳米乳的制备方法，按如下步骤进行：(1)称取月桂酰二乙醇胺6g、酒制蜂胶5g、丙二醇15g，混合搅拌均匀；(2)称取络合碘5g、三聚磷酸钠5g、聚氧化乙烯2g，加入500g蒸馏水中，搅拌均匀；(3)将(2)所得溶液缓慢加入(1)中，不断搅拌，最后加入剩余蒸馏水470g，即得澄清的蜂胶碘纳米乳。酒制蜂胶由杭州和蜂园保健品有限公司生产，批号fj20111001；络合碘由上海维酮材料科技有限公司生产，批号20200203。实施例3一种纳米乳的制备方法，按如下步骤进行：(1)称取月桂酰二乙醇胺7g、酒制蜂胶10g、丙二醇20g，混合搅拌均匀；(2)称取络合碘8g、三聚磷酸钠7g、聚氧化乙烯3g，加入550g蒸馏水中，搅拌均匀；(3)将(2)所得溶液缓慢加入(1)中，不断搅拌，最后加入剩余蒸馏水400g，即得澄清的蜂胶碘纳米乳。酒制蜂胶由杭州和蜂园保健品有限公司生产，批号fj20111001；络合碘由上海维酮材料科技有限公司生产，批号20200203。实施例4一种纳米乳的制备方法，按如下步骤进行：(1)称取月桂酰二乙醇胺8g、酒制蜂胶10g、丙二醇25g，混合搅拌均匀；(2)称取络合碘9g、三聚磷酸钠9g、聚氧化乙烯4g，加入540g蒸馏水中，搅拌均匀；(3)将(2)所得溶液缓慢加入(1)中，不断搅拌，最后加入剩余蒸馏水400g，即得澄清的蜂胶碘纳米乳。酒制蜂胶由杭州和蜂园保健品有限公司生产，批号fj20111001；络合碘由上海维酮材料科技有限公司生产，批号20200203。实施例5一种纳米乳的制备方法，按如下步骤进行：(1)称取月桂酰二乙醇胺10g、酒制蜂胶15g、丙二醇35g，混合搅拌均匀；(2)称取络合碘15g、三聚磷酸钠10g、聚氧化乙烯5g，加入600g蒸馏水中，搅拌均匀；(3)将(2)所得溶液缓慢加入(1)中，不断搅拌，最后加入剩余蒸馏水320g，即得澄清的蜂胶碘纳米乳。酒制蜂胶由杭州和蜂园保健品有限公司生产，批号fj20111001；络合碘由上海维酮材料科技有限公司生产，批号20200203。对比例1一种乳剂的制备方法，按如下步骤进行：(1)称取吐温-8010g、酒制蜂胶15g、丙二醇35g，混合搅拌均匀；(2)称取络合碘15g、三聚磷酸钠10g、聚氧化乙烯5g，加入600g蒸馏水中，搅拌均匀；(3)将(2)所得溶液缓慢加入(1)中，不断搅拌，最后加入剩余蒸馏水330g，即得蜂胶碘乳剂。酒制蜂胶由杭州和蜂园保健品有限公司生产，批号fj20111001；络合碘由上海维酮材料科技有限公司生产，批号20200203。对比例2一种乳剂的制备方法，按如下步骤进行：(1)称取月桂酰二乙醇胺10g、酒制蜂胶15g、丙二醇35g，混合搅拌均匀；(2)称取络合碘15g、三聚磷酸钠10g、聚乙二醇-2005g，加入600g蒸馏水中，搅拌均匀；(3)将(2)所得溶液缓慢加入(1)中，不断搅拌，最后加入剩余蒸馏水320g，即得蜂胶碘乳剂。酒制蜂胶由杭州和蜂园保健品有限公司生产，批号fj20111001；络合碘由上海维酮材料科技有限公司生产，批号20200203。纳米乳的粒径测定采用激光散射技术，使用英国马尔文公司生产的2000型激光粒度仪对实施例1-5以及对比例1-2所制备的纳米乳的颗粒直径进行测定，测量时试验温度25.7℃。检测结果如表6所示，实施例1-5所制备的纳米乳的粒径分布范围在35nm～90nm之间，符合纳米级材料的基本特征。表6实施例和对比例所述乳剂的粒径实施例实施例1实施例2实施例3实施例4实施例5对比例1对比例2粒径(nm)35.665.266.566.267.8112.5143.7纳米乳的水溶性试验实施例1-5制备的纳米乳能迅速以任意比例溶于水中，溶液澄清、无沉淀分层，说明纳米乳水溶性良好。纳米乳的稳定性试验按照《中华人民共和国药典》2000年版附录要求，将实施例1-5制备的纳米乳以5000r/min离心30分钟，均未观察到分层现象，证明纳米乳的稳定性符合要求。对比例1和对比例2均出现分层现象。1、物理稳定性考察(1)离心试验采用离心稳定参数法，取50ml离心管分别装入待测纳米乳30ml，以5000r/min分别离心10分钟、20分钟、30分钟，然后用电位滴定法(2015年版药典二部附录ⅶa)检测原纳米乳和分离后下液层的碘含量，计算离心稳定参数ke。结果如表7所示。ke＝(a0-a)/a0×100％a0为原纳米乳的碘含量。a为原纳米乳经离心后离心管下层的碘含量。试验结果如表7所示：表7离心试验不同时间下纳米乳的稳定性参数(ke)时间/分钟0分钟10分钟20分钟30分钟实施例10.0100.0130.1010.103实施例20.0100.0120.1060.108实施例30.0110.0150.1070.108实施例40.0110.0140.1060.110实施例50.0110.0130.1050.108对比例10.013稍分层分层分层对比例20.014稍分层分层分层试验结果表明，离心试验对纳米乳的离心稳定参数ke值几乎没有影响。(2)振摇试验各取10ml纳米乳，密封于25ml试管中，于25℃恒温水浴振荡器里100rpm振摇，分别在12h、24h、48h、72h取样，用电位滴定法(2015年版药典二部附录ⅶa)检测各取样时间下原纳米乳和分离后下液层的碘含量，计算离心稳定参数ke。结果如表8所示。ke＝(a0-a)/a0×100％a0为原纳米乳的碘含量。a为原纳米乳经离心后离心管下层的碘含量。试验结果如表8所示：表8不同振摇时间下的纳米乳的稳定性参数(ke)试验结果表明，连续振摇对纳米乳的离心稳定参数ke值影响不大。(3)高温试验将纳米乳密封，分别于40℃、60℃、70℃的条件下放置10天，分别于0天、5天、10天考察纳米乳的粒径。试验结果如表9所示：表9不同温度对纳米乳粒径(nm)的影响试验结果表明，不同温度下对纳米乳粒径无明显变化，但长时间储存应避免高温。(4)加速试验将纳米乳在温度40℃的条件下放置6个月，考察1个月、2个月、3个月、6个月的纳米乳的粒径分布。试验结果如表10所示：表10加速试验对纳米乳粒径(nm)的影响试验结果表明，在加速试验条件下，纳米乳的粒径无明显变化。2、化学稳定性试验(1)影响因素试验将纳米乳密封，分别于40℃、60℃、70℃的条件下放置10天，分别于0天、5天、10天考察纳米乳中碘的含量变化。试验结果如表11所示：表11不同温度条件下纳米乳中碘的含量(％)变化试验结果表明，纳米乳在上述实验条件下放置，碘的含量在储存期内无明显变化。(2)加速试验纳米乳在温度40℃的条件下放置6个月，考察1个月、2个月、3个月、6个月的纳米乳中碘的含量变化。试验结果如表12所示：表12加速试验对纳米乳中碘含量(％)的影响试验结果表明，在加速试验条件下，纳米乳中碘的含量无明显变化。以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。当前第1页12