专利名称：微生物的灭活、破坏方法
技术领域：
本发明涉及旨在杀菌、杀病毒、消毒或灭菌的微生物灭活、破坏方法。
目前已提出各种方法，可高效地破坏包括绿脓杆菌、大肠杆菌等细菌及真菌或病毒等的微生物，进行杀菌、消毒、灭菌处理。然而，可以认为，这些方法皆未对微生物的特性作充分研究。例如，人们已知其中有电化学杀菌方法，但该方法的使用却以下述事实为前提，即，使微生物接触电极表面或电介质，阻碍其生化反应而破坏微生物。细菌通常在其表面带有负电荷，为阳极所吸引，接触，从而发生菌体的破坏，这是事实。但是，如菌体量增多，菌体内部的原生质(蛋白液)会蓄积，而出现蛋白质保护了细菌的状态，这是由于形成某种电屏蔽状态，导致杀菌功能降低，也易产生电极维修保养的问题，这样，其实用化也被认为有困难。
然而，本发明者们注意到细菌的破坏状况，考虑到微生物的特性，就微生物是以何种机制被破坏的作了种种研究。其结果，确认了这一现象即细菌在接触阳极之前，就在喷出细胞质的同时发生崩溃的。而且，根据以上的认识，又了解到，作为微生物电容器的菌体，当其在静电场中接受的电荷超过其静电容时，则发生细胞膜的破坏，菌体死亡。本发明即基于这样的见解而提出。
与本发明有关的微生物的灭活、破坏方法，其主要在于，第一，通过具有电能的液体、气体或固体给微生物以电能；第二，由此，使其电荷量增加(上升)，而超过微生物所具有的细胞内外的静电容的限度，及/或促进微生物细胞内外的渗透性；第三，使微生物细胞发生不可逆的变化，及/或使微生物细胞的界面膜发生破裂。
本发明中的具有电能的液体最好使用带电荷的水，微生物处于该带电荷的水溶液中给以电能。上述带电荷的水可以是带静电的水(荷电水)，蓄电水、功能水、电解处理水、强氧化电位水、强酸性电解生成的水溶液、电离水、非电离水或带电水中之任一种。又，具有电能的气体指带有电荷的气体，具有电能的固体指蓄电体。
另外，也可使用电极。此时，微生物的灭活、破坏方法主要在于第一，通过电极对含有微生物的液体通电，对处于与电极非接触状态的微生物给予电能；第二，使所带电荷上升，超过微生物所具有的细胞内外的静电容限度，及/或促进微生物细胞内外的渗透性；第三，使微生物细胞发生不可逆的变化，及/或使微生物细胞的界面膜发生破坏。另外，通过电极通电可以是电介性通电，也可以是非电介性通电。
在以上或以下的说明中，“微生物”用作包括真菌的细菌或病毒等的总称。又，“界面膜”在广义上，用作对从外界遮蔽细胞的原生质的界面膜、外膜、原生质膜、细胞壁等的总称。另外，“破裂”具有广义，直接意指在细胞膜的弹性很强时，膜发生强烈收缩，其内容物(原生质)呈辐射状向多方面散乱喷出的状态；或在细胞膜的弹性较小，且细胞的内压很高时，(细胞膜)发生局部破坏，(内容物)发生平行喷出，周围无散乱的状态；或在细胞膜的弹性较小，而外压相对较低时，同时发生平行喷出和周围散乱的状态等；但是，“破裂”并不限于这些，间接地包括胀压破坏，可广义地包括作为菌体破坏的一般现象的溶解、脱水、凝固、融解、穿透等的破坏状态。
再有，“带电荷的水”用作荷电水、蓄电水、功能水、电解处理水、强氧化电位水、强酸性电解生成的水溶液、电离水、非电离水或带电水等的总称。又，“通电”不限于加了电解质(NaCl及其它)那样的溶液的电介性通电，也包含对于如纯水或精制水等一般被认为无导电性的溶液的非电介性通电。而且，在后一场合，本发明得们确认，使活菌浮游于纯水或精制水中通电时，可得到比电介性通电为小的电流。已阐明，这是由于存在于菌体间的一种跳跃传导作用(非电介性通电的一种)，菌体形成了流向阳极方向的恒定流动。
而且，“渗透”(osmosis)意指由于可透过水、但不能透过溶质的分隔，溶液中的水移向浓度高的一侧的现象，如渗透压升高则与界面膜的破坏有关。再有，“不可逆的变化”用于表于阻碍界面膜的物质交换的状态，及导致界面膜自身的变性、变质或原生质的变性、变质的状态的变化的总称。
发明实施形式第一实施形式选金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、念珠菌及流感嗜血杆菌作为微生物，使分别浮游于预先以微量加至多个试样上的0.01ml的精制水或自来水中，然后，以结核菌素注射器逐滴滴下强氧化电位水，组合使用附有微分差干涉装置的倒置型系统显微镜IX-70(奥林巴斯公司制)，配合14英寸监控器(附CCD)，使所用装置最终放大倍数达4500倍，对微生物作立体层状的灭活、破坏状态的检查。
强氧化电位水的每一滴为0.01ml，逐滴滴下，作五阶段观察。可以看到，上述微生物中之任一种都在滴下1滴时有70％、2滴时有80％、3滴时有99％的微生物细胞发生破裂形成碎屑。滴入4滴时碎屑增加，最后滴入5滴时，微生物细胞几近100％呈现崩溃状态。
绿脓杆菌比起其它的微生物来，为较强的细菌，但是，值得注意的是，其微生物细胞与上述其它菌同样崩溃。然而，在念珠菌的场合，大概由于其本身为不动的真菌，难以看到界面破坏，但几乎所有的菌体都停止摇动，仍可确认念球菌失活或者破坏。另外，在滴下3滴时，菌体虽未破裂，但有处于不动状态的菌体，而非常罕见地，具有微小的浮游性的菌体。第二实施形式准备好多个试样，分别在其上以微量供给0.01ml的精制水或0.01ml的自来水，分别选用金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、念珠菌及流感嗜血杆菌作为微生物，使其浮游。再分别通过铂电极，对精制水给予0.2mA-0.3mA12V的电能，对自来水给予0.5mA12V的电能，可看到99％的菌体细胞膜发生破裂。第三实施形式使用由等离子体放电产生的电离性气体作为具有电能的气体。在多个试样上微量供给0.01ml的精制水，分别选用金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、念珠菌及流感嗜血杆菌作为微生物，使其分别浮游。将放电管置于上述微生物附近，使放电管的外周产生的电离性气体发生作用。可以看到，99％的菌体的细胞膜发生破裂。由此可确认，对微生物给予电能，既使微生物处于非接触状态，也可对该微生物进行所要求的灭活和破坏。第四实施形式使用带电的碳粉作为具有电能的固体。在多个试样上微量供给0.01ml的精制水，选用金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、念珠菌及流感嗜血杆菌作微生物，使其各浮游水中。再对其撒以微量碳粉，可看到，同样有99％的菌体的细胞膜破裂。另外，同样使用带电的聚合物粉末，作为具有电能的固体，取代碳粉，可得到同样的结果。第五实施形式对可在湿润后培养的干燥活菌，施加以带电碳粉，结果，该干燥活菌的培养度极低。
发明的效果根据本发明，给予了电能的细胞，因其界面膜破裂，具有杀菌、杀病毒、消毒的效果，且灭菌效果非常高。另外的优良效果是，给予微生物的电能，只要是具有电能，液体、气体或固体都可使用，因此，可按欲灭活、杀死的微生物浮游或存在的部位、局部、场所，适当选用非常广的范围的电能给予方法。
权利要求
1.一种微生物的灭活、破坏方法，其特征在于，通过具有电能的液体、气体或固体，给微生物以电能，由此使其电荷量增加，而超过微生物所具有的细胞内外的静电容限度，使微生物细胞发生不可逆的变化，及/或使微生物细胞的界面膜发生破裂。
2.一种微生物的灭活、破坏方法，其特征在于，通过具有电能的液体、气体或固体，给微生物以电能，促进微生物细胞内外的渗透性，使微生物细胞发生不可逆的变化，及/或使微生物细胞的界面膜发生破裂。
3.一种微生物的灭活、破坏方法，其特征在于，通过具有电能的液体、气体或固体，给微生物以电能，由此，使基电荷量增加，而超过微生物所具有的细胞内外的静电容限度，且促进微生物细胞内外的渗透性，从而使微生物细胞发生不可逆的变化，及/或使微生物细胞的界面膜破裂。
4.如权利要求1-3中之任一项所述的微生物的灭活、破坏方法，其特征在于，具有电能的液体为带电荷的水，使微生物处于该带电水溶液中而给予电能。
5.如权利要求4所述的微生物的灭活、破坏方法，其特征在于，所述带电荷的水为荷电水、蓄电水、功能水、电解处理水、强氧化电位水、强酸性电解生成的水溶液、电离水、非电离水或带电水。
6.如权利要求1-3之任一项所述的微生物的灭活、破坏方法，其特征在于，具有电能的气体为带有电荷的气体。
7.如权利要求1-3之任一项所述的微生物的灭活、破坏方法，其特征在于，具有电能的固体为蓄电体。
8.一种微生物微生物的灭活、破坏方法，其特征在于，通过电极对含有微生物的液体通电，对与电极处于非接触状态的微生物给予电能，使其电荷增加，超过微生物所具有的细胞内外的静电容限度，使微生物细胞发生不可逆的变化，及/或使微生物细胞的界面膜发生破裂。
9.一种微生物的灭活、破坏方法，其特征在于，通过电极对含有微生物的液体通电，对处于与电极非接触状态的微生物给予电能，促进微生物细胞内外的渗透性，使微生物细胞发生不可逆的变化，及/或使微生物细胞的界面膜发生破裂。
10.一种微生物的灭活、破坏方法，其特征在于，通过电极对含有微生物的液体通电，对处于与电极非接触状态的微生物给予电能，使其电荷量增加，超过该微生物所具有的细胞内外的静电容限度，且促进微生物细胞内外的渗透性，使微生物细胞发生不可逆的变化，及/或使微生物细胞的界面膜破裂。
11.如权利要求8-10之任一项所述的的微生物的灭活、破坏方法，其特征在于，所述通电为电介性通电或非电介性通电。
全文摘要
本发明提供了一种对微生物的更有效的灭活、破坏方法，本发明通过具有电能的液体、气体或固体给微生物以电能，微生物所具电荷增加，而超过微生物的细胞内外的静电容限度，使微生物细胞发生不可逆的变化，及/或使微生物细胞的界面膜破裂。
文档编号A61K9/22GK1146489SQ9511909
公开日1997年4月2日 申请日期1995年12月28日 优先权日1995年9月28日
发明者吉田劝持, 住冈辉明, 徐海涛 申请人:重塑21株式会社