专利名称：抑制pdeiv的2－氰基亚氨基咪唑衍生物的制作方法
技术领域：
本发明关于具有磷酸二酯酶Ⅳ(PDEⅣ)与细胞活素抑制活性的2-氰基亚氨基咪唑衍生物及其制备；其进一步关于包含彼等的组合物，以及其作为医药的用途。
于1995年2月23日由Smithkline Beecham公司发表的WO95/05386揭示苯乙胺衍生物，譬如N-[2-(3-环戊氧基-3-甲氧苯基)乙基]酰亚氨基二脲与N′-氰基-1-[2-(3-环戊氧基-4-甲氧苯基)乙基]羧酰亚胺酰胺，可用以治疗磷酸二酯酶Ⅳ相关的疾病状态。其亦二般性地揭示含有氰胍部分的苯乙胺衍生物。
本发明的化合物在结构上异于技艺上已知的PDEⅣ抑制剂，在于其不变地含有2-氰基亚氨基咪唑部分的事实。其具有治疗利用性，以治疗与PDEⅣ的异常的酶或催化活性有关联的疾病状态，及/或与生理学上有害的过量细胞活素有关联的疾病状态，特别是过敏性、异位性及炎性疾病。本发明的化合物亦具有极少胃肠副作用，此副作用经常与PDEⅣ抑制剂有关。
本发明关于具有下式的2-氰基亚氨基咪唑衍生物
其N-氧化物形式、药学上可接受的酸或碱加成盐及立体化学异构形式，其中R1与R2各独立为氢；C1-6烷基；二氟甲基；三氟甲基；C3-6环烷基；饱和5-、6-或7-元杂环，其含有一或两个选自氧、硫或氮的杂原子；二氢茚基；6,7-二氢-5H-环戊吡啶基；双环并[2.2.1]-2-庚烯基；双环并[2.2.1]庚烷基；C1-6烷基磺酰基；芳基磺酰基；或被一或两个取代基取代的C1-10烷基；各取代基独立选自芳基、吡啶基、噻吩基、呋喃基、二氢茚基、6,7-二氢-5H-环戊吡啶基、C3-7环烷基及含有一或两个选自氧、硫或氮的杂原子的饱和5-、6-或7-元杂环；R3为氢、卤基或C1-6烷氧基；R4为氢；卤基；C1-6烷基；三氟甲基；C3-6环烷基；羧基；C1-4烷氧羰基；C3-6环烷氨基羰基；芳基；Het1；或被氰基、氨基、羟基、C1-4烷羰基氨基、芳基或Het1取代的C1-6烷基；或R4为下式基团-O-R7(a-1)；或-NH-R8(a-2)；其中R7为氢；C1-6烷基；被羟基、羧基、C1-4烷氧羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)-氨基、Het1或芳基取代的C1-6烷基；R8为氢；C1-6烷基；C1-4烷基羰基；被羟基、羧基、C1-4烷氧羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、Het1或芳基取代的C1-6烷基；R5为氢、卤基、羟基、C1-6烷基或C1-6烷氧基；或R4与R5可一起采用而形成下式二价基团-(CH2)n-(b-1)；-CH2-CH2-O-CH2-CH2-(b-2)；-CH2-CH2-N(R9)-CH2-CH2- (b-3)；或-CH2-CH=CH-CH2- (b-4)；其中n为2、3、4或5；R9为氢、C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基或对-甲苯磺酰基；R6为氢或C1-4烷基；或R4与R6可一起采用而形成式-(CH2)m-二价基团；其中m为1、2、3或4；-A-B-为下式二价基团-CR10=CR11- (c-1)；或-CHR10-CHR11- (c-2)；其中各R10与R11独立为氢或C1-4烷基；及L为氢；C1-6烷基；C1-6烷羰基；C1-6烷氧羰基；被一或两个选自包括羟基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧羰基、单-与二(C1-4烷基)氨基、芳基及Het2的取代基取代的C1-6烷基；C3-6烯基；被芳基取代的C3-6烯基；哌啶基；被C1-4烷基或芳基C1-4烷基取代的哌啶基；C1-6烷基磺酰基或芳基磺酰基；芳基为苯基或被一、二或三个取代基取代的苯基，取代基选自卤基、羟基、CI-4烷基、CI-4烷氧基、C3-6环烷基、三氟甲基、氨基、硝基、羧基、C1-4烷氧基羰基及C1-4烷羰基氨基；Het1为吡啶基；被C1-4烷基取代的吡啶基；呋喃基；被C1-4烷基取代的呋喃基；噻吩基；被C1-4烷羰基氨基取代的噻吩基；羟基吡啶基，被C1-4烷基或C1-4烷氧基-C1-4烷基取代的羟基吡啶基；咪唑基；被C1-4烷基取代的咪唑基；噻唑基；被C1-4烷基取代的噻唑基；噁唑基；被C1-4烷基取代的噁唑基；异喹啉基；被C1-4烷基取代的异喹啉基；喹啉酮基，被C1-4烷基取代的喹啉酮基；吗福啉基；哌啶基；被C1-4烷基、C1-4烷氧羰基或芳基C1-4烷基取代的哌啶基；六氢吡嗪基；被C1-4烷基、C1-4烷氧羰基或芳基C1-4烷基取代的六氢吡嗪基；及Het2为吗福啉基；哌啶基；被C1-4烷基或芳基C1-4烷基取代的哌啶基；六氢吡嗪基；被C1-4烷基或芳基C1-4烷基取代的六氢吡嗪基；吡啶基；被C1-4烷基取代的吡啶基；呋喃基；被C1-4烷基取代的呋喃基；噻吩基或被C1-4烷基或C1-4烷羰基氨基取代的噻吩基。
一些式(Ⅰ)化合物亦可以其互变异构形式存在。此种形式虽然并未明确地显示于上文式中，但意欲包含在本发明范围内。特定言之，于式(Ⅰ)化合物中，其中L为氢者，可以其相应的互变异构形式存在。
于R1与R2中，含有一或两个选自氧、硫或氮杂原子的饱和5-、6-或7-元杂环，可适当地选自杂环类，例如四氢呋喃基、二氧五环基、四氢吡咯基、吗福啉基、哌啶基、六氢吡嗪基及四氢吡喃基。该杂环族基团借任何碳原子或于适当情况下借氮原子连接至氧原子或C1-10烷基。
亦于R1与R2中，6,7-二氢-5H-环戊吡啶基一词，亦称为6,7-二氢-5H-吡啉啶基，其意欲表示6,7-二氢-5H-环戊[b]吡啶或6,7-二氢-5H-环戊[c]吡啶基，且可借任何脂族或芳族碳原子连接至分子的其余部分。
于本文中使用的卤基一词，为氟基、氯基、溴基及碘基的总称；C1-4烷基意谓包括具有1至4个碳原子的直链或分枝状饱和烃类，例如甲基、乙基、1-甲基乙基、1,1-二甲基乙基、丙基、2-甲基丙基及丁基；C1-6烷基一词意谓包括C1-4烷基及其具有5或6个碳原子的较高碳同系物，例如2-甲基丁基、戊基、己基及其类似基团；C1-6烷基一词意为包括C2-6烷基及其具有1个碳原子的较低碳同系物，譬如甲基；C1-10烷基意谓包括C1-6烷基及其具有7至10个碳原子的较高碳同系物，例如庚基、辛基、壬基、癸基、1-甲基己基、2-甲基庚基及其类似基团；C3-6烯基一词定义含有一个双键并具有3至6个碳原子的直链与分枝链烃基，例如2-丙烯基、3-丁烯基、2-丁烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、3-甲基-2-丁烯基及其类似基团；及连接至氮原子的该C3-6烯基的碳原子较佳为饱和；C3-6环烷基一词为环丙基、环丁基、环戊基及环已基的总称；C3-7环烷基一词意谓包括C3-6环烷基与环庚基；C1-4烷二基一词意谓包括具有1至4个碳原子的直链与分枝状饱和二价烃基，例如亚甲基、1,2-乙烷二基、1,1-乙烷二基、1,3-丙烷二基、1,2-丙烷二基、1,4-丁烷二基、2-甲基-1,3-丙烷二基及其类似基团。
于前文定义中及于后文中使用的卤基C1-4烷二基，定义为单-或多卤基取代的C1-4烷二基，特别是被一或多个氟原子取代的C1-4烷二基。
于上文中指出的药学上可接受的酸加成盐，意谓包括酸加成盐形式，其可合宜地使用适当酸类处理式(Ⅰ)化合物的碱形式而获得，该酸类譬如无机酸，例如氢卤酸，如盐酸或氢溴酸，硫酸、硝酸、磷酸及类似酸；或有机酸，例如醋酸、羟基醋酸、丙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、顺丁烯二酸、反丁烯二酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、苯磺酸、对-甲苯磺酸、环己烷氨基磺酸、柳酸、对-氨基柳酸、双羟萘酸及类似酸。反之，该酸加成盐形式可经由使用适当碱处理而转化成自由态碱形式。
含有酸性质子的式(Ⅰ)化合物，亦可经由使用适当有机与无机碱处理而转化成其无毒性金属或胺加成盐形式。适当碱盐形式包括例如铵盐、碱金属与碱土金属盐，例如锂、钠、钾、镁、钙盐等，与有机碱的盐，例如苄星(benzathine)、N-甲基-D-葡萄糖胺、海巴胺的盐，及与譬如精氨酸、赖氨酸等氨基酸的盐。
加成盐一词亦包括式(Ⅰ)化合物能够形成的水合物及溶剂加成形式。此种形式的实例为例如水合物、醇化物及其类似物。
式(Ⅰ)化合物的N-氧化物形式，意谓包括式(Ⅰ)化合物中的一或数个氮原子被氧化成所谓N-氧化物者。
于前文使用的“立体化学异构形式”一词，定义式(Ⅰ)化合物可具有的所有可能的异构形式。除非另有提及或指示，否则化合物的化学命名表示所有可能的立体化学异构形式的混合物，该混合物含有基本分子结构的所有非对映异构体及对映异构体。更具体地说，立体原中心可具有R-或S-构型，且=N-CN及经取代的C3-6烯基部分可具有E-或Z-构型。
于后文中任何时候使用的式(Ⅰ)化合物一词，亦意谓包括其N-氧化物形式、药学上可接受的酸或碱加成盐及所有立体异构形式。
于本发明中的一些式(Ⅰ)化合物及一些中间物，可含有不对称碳原子。该化合物及该中间物的纯立体化学异构形式，可借由本领域已知的程序获得。例如，非对映异构物可借物理方法，譬如选择性结晶化作用，或层析技术，例如逆流分布、液相层析法，及其类似方法进行分离。对映异构物可得自外消旋混合物，其方式是首先以适当解析剂例如对映性酸，使该外消旋混合物转化成非对映异构物盐或化合物的混合物，然后例如借由选择性结晶化作用或层析技术，例如液相层析及其类似方法物理分离所述非对映异构盐或化合物；及最后转化该经分离的非对映异构物盐或化合物成为其相应的对映异构物。纯立体化学异构形式，亦可得自适当中间物与起始物质的纯立体化学异构形式，其条件是所介入的反应以立体特异方式发生。式(Ⅰ)化合物的纯与混合的立体化学异构形式，意欲包含在本发明的范围中。
一种分离式(Ⅰ)化合物及中间物的对映异构形式的替代方式，涉及液相层析法，特别是使用手性固定相的液相层析。
此等化合物之一组特殊族群，包括下述式(Ⅰ)化合物，其中R1与R2各独立为氢；C1-6烷基；二氟甲基；三氟甲基；C3-6环烷基；含有一或两个选自氧、硫或氮的杂原子的饱和5-、6-或7-元杂环；二氢茚基；双环并[2.2.1]-2-庚烯基；双环并[2.2.1]庚烷基；C1-6烷基磺酰基；芳基磺酰基；或被一或两个取代基取代的C1-10烷基；取代基各独立选自芳基、吡啶基、噻吩基、呋喃基、C3-7环烷基，及含有一或两个选自氧、硫或氮的杂原子的饱和5-、6-或7-元杂环。
令人感兴趣的式(Ⅰ)化合物为其中R1与R2各独立为C1-6烷基；C3-6环烷基；二氟甲基；含有一或两个选自氧、硫或氮杂原子的饱和5-、6-或7-元杂环，其较佳为四氢呋喃基；二氢茚基；或被芳基、二氢茚基、6,7-二氢-5H-环戊吡啶基或C3-6环烷基取代的C1-10烷基。
亦令人感兴趣的式(Ⅰ)化合物为其中R5为氢，且R4为氢、羟基或C1-6烷基，更特定言之，R4为甲基。
另一个令人感兴趣的式(Ⅰ)化合物族群为，其中L为氢、C1-6烷氧羰基或被一或两个苯环取代的C1-6烷基。
特定化合物为下述式(Ⅰ)化合物，其中R1为环戊基、四氢呋喃基、环丙基甲基、5-苯基戊基、2-二氢茚基乙基、6,7-二氢-5H-环戊[b]吡啶基或二氢茚基；及R2为甲基或二氟甲基。
较佳化合物为该特定化合物中R3、R5、R6、R10、R11及L均为氢者。
最佳者为下列化合物[1-[2-[4-(二氟甲氧基)-3-[(四氢-3-呋喃基)氧基]苯基]丙基]-1,3-二氢-2H-亚咪唑-2-基]氰胺；与[1-[2-[4-(甲氧基)-3-[(1,3-二氢-2H-茚-2-基)氧基]苯基]丙基]-1,3-二氢-2H-亚咪唑-2-基]氰胺，其N-氧化物、其立体化学异构形式及其药学上可接受的加成盐。
于后文中任何时候使用时，R1至R11、Y、-A-B-及L均如式(Ⅰ)下所定义者，除非另有述及。
式(Ⅰ)化合物，其中-A-B-为式(c-1)基团且L为氢者，该化合物以式(Ⅰ-a-1)表示，其可合宜地借由式(Ⅱ)中间物或其官能性衍生物，于适当酸例如盐酸存在下的环化作用制备。
该环化作用可在对反应呈惰性的溶剂中进行，例如四氢呋喃或1,4-二氧六环或其混合物。搅拌与加热可提高反应速率。
在此及下述制备中，可将反应产物自反应介质中分离，及若必要则根据此项技艺中一般已知的方法进一步纯化，例如萃取、结晶、研制及层析。
特定言之，式(Ⅰ-a-1)化合物，其中R5为羟基，该化合物以式(Ⅰ-a-1-1)表示，其可以类似自式(Ⅱ)中间物制备式(Ⅰ-a-1)化合物所述的方式，经由式(Ⅱ-1)中间物，其中P为氢或较佳为三甲基硅烷基保护基或其官能性衍生物，借环化作用制备。
式(Ⅰ)化合物，其中-A-B-为式(c-2)基团且L为氢，该化合物以式(Ⅰ-a-2)表示，其可经由式(Ⅲ)中间物或其官能性衍生物，于适当试剂例如氰基碳亚氨二硫代酸二甲酯或N-氰基碳亚胺酸二苯酯存在下，借环化作用获得。
或者，式(Ⅰ)化合物可经由将式(Ⅳ)有机金属中间物，其中M为适当金属离子或金属配合离子，例如Li+、(MgBr)+、B(OH)2+或Sn(CH3)3+，在对反应呈惰性的溶剂中，与适当式(Ⅴ)2-氰基亚氨基咪唑衍生物，其中W1为反应性离去基例如卤素，反应而制成。在R4与R5一起采用并形成式(b-1)、(b-2)、(b-3)或(b-4)基团的情况下，W1亦可为氰化物部分，其条件是式(Ⅳ)中间物为Grignard试剂。
该反应可在对反应呈惰性的溶剂中进行，例如二甲氧基乙烷、四氢呋喃或乙醚。搅拌与加热可提高反应速率。若在该反应中使用式(Ⅴ)中间物，其中L被适当保护基取代，则式(Ⅰ)化合物，其中L为氢，该化合物以式(Ⅰ-a)化合物表示，可使用技艺上已知的去保护反应获得。
式(Ⅰ)化合物亦可按照技艺上已知官能基转换程序互相转化。
例如，式(Ⅰ)化合物其中L不为氢，该化合物以式(Ⅰ-b)表示，其可经由将式(Ⅰ-a)化合物与L′-W2(Ⅵ)反应而制成，其中L′与在式(Ⅰ)下所定义的L相同但不为氢，且W2为反应性离去基，譬如卤原子。
亦可使用技艺上已知的加成反应，以使式(Ⅰ-a)化合物转化成式(Ⅰ-b)化合物。
式(Ⅰ)化合物亦可按照技艺上已知用以将三价氮转化成其N-氧化物形式的程序，转化成其相应的N-氧化物形式。该N-氧化反应通常可经由将式(Ⅰ)起始物质与3-苯基-2-(苯磺酰基)氧氮丙啶或与适当有机或无机过氧化物反应而进行。适当无机过氧化物包括例如过氧化氢，碱金属或碱土金属过氧化物，例如过氧化钠、过氧化钾、适当有机过氧化物可包括过氧酸，例如苯碳过氧酸或卤基取代的苯碳过氧酸，例如3-氯苯碳过氧酸，过氧烷酸，例如过氧醋酸，烷基氢过氧化物，例如氢过氧化叔丁基。适当溶剂为例如水，低碳烷醇类例如乙醇等，烃类例如甲苯，酮类例如2-丁酮，卤化烃类例如二氯甲烷，及此种溶剂的混合物。
上文所提及的中间物，可按照技艺上已知的技术制备。
特定言之，式(Ⅱ)中间物可经由首先将式(Ⅶ)胺与氰基碳亚氨二硫代酸二甲酯或氰基碳亚胺酸二苯酯或其官能性衍生物反应而制成。该反应可合宜地在对反应呈惰性的溶剂中，例如二氯甲烷、苯或甲苯，视情况在冰浴上冷却，并于碱譬如N,N-二乙基乙胺或碳酸氢钠存在下进行。经如此获得的中间物，可接着与式(Ⅷ)中间物或其官能性衍生物反应，以形成式(Ⅱ)中间物。该反应可合宜地在对反应呈惰性的溶剂例如1,4-二氧六环中，于碱例如N,N-二乙基乙胺存在下，及视情况于催化剂例如N,N-二甲基-吡啶胺存在下进行。搅拌与提高温度可提高反应速率。
或者，上述反应可以相反顺序进行，意即首先使式(Ⅷ)中间物与氰基碳亚氨二硫代酸二甲酯或氰基碳亚胺酸二苯酯或其官能性衍生物反应，及接着使如此形成的中间物与式(Ⅶ)胺反应。
式(Ⅲ)中间物，其中R11为氢，该中间物以式(Ⅲ-1)表示，其可以下述方式制备，首先使式(Ⅶ)胺与式(Ⅸ)氰基衍生物，其中W3为适当脱离基例如卤素，于碱例如碳酸钠存在下，在对反应呈惰性的溶剂例如N,N-二甲基甲酰胺中反应。接着，可将在如此形成的中间物中的氰化物部分，使用适当还原剂，例如氢化锂铝或氢，于催化剂例如阮尼镍存在下还原，因此获得式(Ⅲ-1)中间物。
一些式(Ⅶ)中间物描述于WO92/00968、WO93/15044及WO93/15045中。
特定言之，式(Ⅶ)中间物可经由将式(Ⅹ)中间物，其中W4为适当脱离基譬如卤素，与式(Ⅺ)中间物，其中M为适当金属离子或金属配合物离子，例如Li+或(MgBr)+，且P为适当保护基，例如(1,1-二甲基乙基)氧基羰基，反应而制成。经如此获得的经保护式(Ⅶ)中间物，可接着借由技艺上已知的技术例如酸水解去保护。
式(Ⅶ)中间物，其中R6为氢，该中间物以式(Ⅶ-1)表示，其可经由使式(Ⅻ)中间物中的不饱和碳-氮键，以适当还原剂譬如甲硼烷-四氢呋喃-配合物、氢化锂铝或氢，于催化剂例如阮尼镍存在下还原而制成。于式(Ⅻ)中间物中的氰化物部分，亦可被其官能性衍生物例如肟部分取代。
一些式(Ⅻ)中间物描述于WO92/00968、WO93/15044及WO93/15045中。
特定言之，式(Ⅻ)中间物，其中R5为经保护的羟基且R4为氢，该中间物以式(Ⅻ-1)表示，其可合宜地经由将式(ⅩⅢ)醛与式(ⅩⅣ)试剂或其官能性衍生物，其中P为保护基，例如三甲基硅烷基及其类似基团，在对反应呈惰性的溶剂中譬如二氯甲烷，并于催化量的ZnI2或其官能性衍生物存在下，反应而制成。该式(Ⅻ-1)中间物可按上述进一步反应，以在最后形成其中R5为羟基的式(Ⅰ)化合物。
式(ⅩⅢ)醛可合宜地以类似Mitsunobu Oyo在合成期刊，1-28,1981中所述的反应程序制成。
在本发明中的一些式(Ⅰ)化合物及一些中间物，含有至少一个不对称碳原子。该化合物与该中间物的纯立体化学异构形式，可应用技艺上已知的程序获得。例如，非对映异构物可借物理方法，譬如选择性结晶化作用，或层析技术，例如逆流分布、液相层析法，及其类似方法进行分离。对映异构物可得自外消旋混合物，其方式是首先以适当解析剂例如手性酸，使该外消旋混合物转化成非对映异构物盐或化合物的混合物；然后以物理方式分离该非对映异构物盐或化合物的混合物，例如借由选择性结晶化作用或层析技术，例如液相层析及其类似方法；及最后转化该经分离的非对映异构物盐或化合物成为其相应的对映异构物。
式(Ⅰ)化合物的纯立体化学异构形式，亦可得自适当中间物与起始物质的纯立体化学异构形式，其条件是所介入的反应以立体特异方式发生。式(Ⅰ)化合物的纯与混合的立体化学异构形式，意欲包含在本发明的范围中。
式(Ⅰ)化合物，其N-氧化物形式、药学上可接受的酸或碱加成盐及立体化学异构形式，为族群Ⅳ(cAMP-专一族群)的磷酸二酯酶(PDE)同功酶的有效抑制剂。
cAMP(腺苷酸环状3′,5′-单磷酸盐)为一种主要第二信使，其浓度会经过酶譬如激酶的活化作用，而影响特定细胞活动。已知PDEⅣ会使cAMP水解成其相应的不活性5′-单磷酸盐代谢产物。因此，PDEⅣ的抑制作用会导致升高cAMP在特定细胞中的含量，该细胞譬如呼吸平滑肌细胞，及极多种炎性细胞，意即某些淋巴细胞，例如嗜碱细胞、嗜中性白血球与嗜伊红细胞、单细胞及肥大细胞。许多过敏性、异位性及炎性疾病，被认为是因为高于正常的PDEⅣ浓度所造成，其会造成低cAMP含量及如此受感染的细胞对于刺激性刺激作用的过敏性(该过敏性的实例为例如过量组织胺自嗜碱细胞及肥大细胞释出，或过量的过氧化物阴离子基团借由嗜伊红细胞形成)。因此，具有有效磷酸二酯酶Ⅳ抑制性的本发明化合物，在减轻及/或治疗过敏性、异位性及炎性疾病上，被认为有用药剂。PDEⅣ抑制剂的功能性作用，为例如呼吸平滑肌松驰、支气管扩大、血小板凝集抑制作用及白血球介体释出的抑制作用。过敏性疾病的实例，为支气管气喘、唇炎、结合膜炎、接触性皮肤炎与湿疹、刺激性肠疾病、脱氢形式湿疹、荨麻疹、脉管炎、女阴炎；异位性疾病的实例为皮肤炎与湿疹、脚部冰冷、气喘、过敏性鼻炎；及相关疾病为例如牛皮癣及其他过高增殖性疾病。
本发明因此亦关于如上文定义的式(Ⅰ)化合物作为医药的用途，特别是作为治疗异位性疾病的医药或作为抗气喘医药的用途。因此，本发明的化合物可用于制造治疗异位性或气喘性疾病，更特别是异位性皮炎用的药剂。
式(Ⅰ)化合物的PDEⅣ抑制活性，可在“以杆状病毒病媒在昆虫细胞中制成的重组人类单淋巴细胞(MNL)磷酸二酯酶ⅣB型的抑制作用”的试验中证实。可使用数种活体内及活体外试验，以证实式(Ⅰ)化合物在治疗上述过敏性、异位性及炎性疾病上的实用性。此种试验为例如“天竺鼠气管在活体外的支气管缩小”，“天竺鼠气管在活体内的支气管缩小”，及活体内试验“花生四烯酸于老鼠中所引至的耳翼发炎”，“TPA于老鼠中所引至的耳朵发炎”，及“于老鼠中的延迟型过敏性”。
再者，本发明化合物对于族群Ⅲ(cGMP-抑制的族群)的磷酸二酯酶同功酶，仅具有极低抑制活性。特别是PDEⅢ的抑制作用，会导致cAMP在心肌中的升高，于是造成对于心脏收缩力以及对于心脏松弛的影响。在上述过敏性、异位性及炎性疾病的治疗中，心与血管影响显然是不期望的。因此，当本发明化合物在如其抑制PDEⅢ的极低浓度下抑制PDEⅣ时，其治疗用途可经调整以避免心与血管副作用。
技艺上已知的PDEⅣ抑制剂，经常会造成不利的胃肠副作用。但是，本发明的大部分化合物，对于胃肠道具有极少作用，其可在“老鼠中的热食胃排空作用”的试验中证实。
于本文中使用的PDEⅢ与Ⅳ命名，指由J.A.Beavo与D.H.Reifsnyder，于TIPS回顾，1990年4月，第150-155页中的分类。
本发明的化合物亦具有细胞活素抑制活性。细胞活素为任何被分泌的多肽，其借由调制细胞在免疫或炎性回应间的交互作用，而影响其他细胞的功能。细胞活素的实例为单细胞活素与淋巴细胞活素，且其可借由极多种细胞产生。例如，单细胞活素通常被称为借由单核细胞譬如巨噬细胞及/或单细胞产生与分泌，但许多其他细胞会产生单细胞活素，譬如天然杀伤细胞、成纤维细胞、嗜碱细胞、嗜中性白血球、内皮细胞、脑部星形细胞、骨髓基质细胞、表皮角质细胞及β-淋巴细胞。淋巴细胞活素通常被称为由淋巴细胞制成。细胞活素的实例，包括间白血球活素-1(IL-1)、间白血球活素-2(IL-2)、间白血球活素-6(IL-6)、间白血球活素-8(IL-8)、α-肿瘤坏死因子(αTNF)及β-肿瘤坏死因子(βTNF)。
特别想要被抑制的细胞活素，为αTNF。过度或未经调节的TNF产生，与媒介或加重多种疾病有关联，其包括风湿性关节炎、风湿性脊椎炎、骨关节炎、痛风性关节炎及其他关节炎症状；败血病、败血性休克、内毒素休克、革兰氏阴性败血病、毒性休克征候群、成人呼吸困难征候群、脑型虐、慢性肺炎性疾病、硅土沈著病、肺结节病、骨质耗损疾病、再灌注伤害、接枝对宿主反应、同种移植排斥、由于感染所致的发热及肌痛，譬如流行性感冒，感染或恶性的续发性恶病质，后天免疫不全征候群(AIDS)的续发性恶病质，AIDS、ARC(AIDS相关复征)、瘢瘤形成、瘢痕组织形成、Crohn氏疾病、溃疡性结肠炎或热病。
式(Ⅰ)化合物的细胞活素抑制活性的细胞活素抑制活性，譬如αTNF制造的抑制作用，可在“于人类全血液培养物中的细胞活素制造”的活体外试验中证实。
此外，预期本发明的化合物将不会或极少显示内分泌副作用。这可借由例如“活体内睾酮”试验、“芳香酶活性的活体外抑制作用”试验及“芳香酶活性的活体内抑制作用”试验证实。
鉴于主题化合物的有用PDEⅣ与细胞活素抑制性质，故其可被调配成供投药目的用的各种医药组合物，其包含药学上可接受的载剂，及作为活性成分的治疗上有效量的式(Ⅰ)化合物。为制备本发明的医药组合物，故将作为活性成分的治疗上有效量的特定化合物，呈碱或酸加成盐形式，与药学上可接受的载剂合并成密切互混物，其可采取极多种形式，依所要投药的制剂形式而定。一般期望此等医药组合物呈单一剂量形式，以较佳地适于口服、直肠、局部、经皮、借吸入或借非经肠注射投药。例如，在制备呈口服剂量形式的组合物时，任何常用医药媒质均可采用，譬如在口服液体制剂例如悬浮液、糖浆、酏剂及溶液的情况中，为水、二醇类、油类、醇类等；或在粉末、丸剂、胶囊及片剂的情况中，为固体载剂，譬如淀粉、糖、高岭土、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。由于片剂与胶囊易于投药，故其代表最有利的口服剂量单位形式，于此情况中虽然采用固体医药载剂。对于非经肠组合物而言，载剂经常包含无菌水，至少占大部分，惟其他成分例如为帮助溶解者，可加入其中。例如可制备可注射溶液，其中载剂包含盐水溶液、葡萄糖溶液或盐水与葡萄糖溶液的混合物。亦可制备可注射悬浮液，于此种情况中可采用适当液体载剂、悬浮剂及其类似物。在适合经皮投药的组合物中，载剂视情况包含浸透加强剂及/或适当可润湿剂，视情况与较少比例而具有任何性质的适当添加剂并用，此添加剂对于皮肤不会造成任何显著有害作用。该添加剂可促进对皮肤的投药，及/或可帮助制备所要的组合物。此等组合物可以各种方式投药，例如作成经皮贴药、作成点滴或作成软膏。作为供局部涂敷用的适当组合物者，可列举所有常供局部投药的药物用的组合物，例如乳剂、冻胶、敷料、洗发剂、酊剂、糊剂、软膏、药膏、粉末等。该组合物的涂敷可借气溶胶，例如使用推进剂，譬如氮、二氧化碳、氟利昂，或未使用推进剂，譬如泵送喷雾剂、滴剂、洗剂、或半固体，譬如稠化组合物，其可借由海绵块涂敷。特定言之，可合宜地使用譬如药膏、乳剂、冻胶、油膏等的半固体组合物。
为提高式(Ⅰ)化合物在医药组合物中的溶解度及/或安定性，可有利地采用α-、β-或γ-环糊精或其衍生物，特别是羟烷基取代的环糊精，例如2-羟丙基-β-环糊精。共溶剂譬如醇类，亦可改良式(Ⅰ)化合物在医药组合物中的溶解度及/或安定性。在含水组合物的制剂中，主题化合物的加成盐显然是更适合的，此由于其增加的水溶解度所致。
特别有利的是调配前述医药组合物呈易于投药及剂量均匀性的剂量单位形式。剂量单位形式指适合作为单一剂量的物理上分开的单位，各单位含有经计算以产生所要治疗作用的预定量的活性成分，且伴随着所需要的医药载剂。此种剂量单位形式的实例，为片剂(包括经刻划或涂层片剂)、胶囊、丸剂、粉末包、扁片、可注射溶液或悬浮液等，及其分离的多重药剂。
本发明亦关于一种治疗患有与PDEⅣ的异常酶或催化活性有关联的疾病状态，及/或与生理学上有害的过量细胞活素有关联的疾病状态，特别是过敏性、异位性及炎性疾病，更特别是气喘性与异位性疾病，最特别是异位性皮炎的温血动物的方法。该方法包括投予与医药载剂呈互混物的治疗上有效量的式(Ⅰ)化合物，或其N-氧化物形式、药学上可接受的酸或碱加成盐或立体化学异构形式。
一般而言，预期的有效每日量为0.01毫克/千克至10毫克/千克体重。得以显见的是，该有效每日量可被降低或增加，依受治疗病患的回应及/或依开立本发明化合物的医师的评估而定。因此，上文所述有效每日量范围仅为指引，并非意欲限制本发明的范围或用途至任何程度。
下述实例意欲说明而非限制本发明的范围。实验部分一些式(Ⅰ)化合物的绝对立体化学构型，并非以实验方式测定。在此等情况中，首先被单离的立体化学异构形式称为“A”，而第二个则称为“B”，无需进一步指出实际立体化学构型。
于后文中，“THF”意谓四氢呋喃，“RT”意谓室温，“DMF”意谓N,N-二甲基甲酰胺，及“DIPE”意谓二异丙基醚。A．中间化合物的制备实例A．1a)于N2流动下，将碳酸钾(0.0569摩尔)逐滴添加至4-二氟甲氧基-3-羟基苯甲醛(0.053摩尔)与(四氢-3-呋喃醇)-4-甲基苯磺酸酯(15.35克)在DMF(100毫升)中的混合物内。将反应混合物在100℃下搅拌4小时。使混合物冷却，且逐滴添加(四氢-3-呋喃醇)-4-甲基苯磺酸酯(3.98克)在DMF(40毫升)中的溶液，并将反应混合物在100℃下搅拌3小时，然后在RT下过夜，蒸发溶剂，并将残留物在饱和Na2CO3水溶液中洗涤，然后以DIPE萃取。将已分离的有机层干燥、过滤及蒸发溶剂，产生17.77克(±)-4-(二氟甲氧基)-3-[(四氢-3-呋喃基)氧基]苯甲醛(中间物1)。
b)将硼氢化钠溶液(0.0177摩尔)分次添加至中间物1(0.0532摩尔)在甲醇(100毫升)中的溶液内，并将反应混合物在RT下搅拌1小时。蒸发溶剂，残留物以水洗涤，及以CH2Cl2萃取。将已分离的有机层干燥、过滤，及蒸发溶剂。残留物借开放式管柱层析于硅胶上纯化(溶离剂CH2Cl2/2-丙酮96/4及90/10；CH2Cl2/CH3OH96/4)。收集纯溶离分并蒸发溶剂，产生11.3克(81％)(±)-4-(二氟甲氧基)-3-[(四氢-3-呋喃基)氧基]苯甲醇(中间物2)。
c)将中间物2(0.039摩尔)在甲苯(45毫升)中的溶液，逐滴添加至SOCl2(0.059摩尔)与DMF(0.0019摩尔)在甲苯(75毫升)中的混合物内，于40℃下搅拌。将所形成的反应混合物在40℃下搅拌，直到已停止HCl-气体释出为止。蒸发溶剂，并将残留物使用饱和NaHCO3水溶液洗涤，及以CH2Cl2萃取。将已分离的有机层干燥、过滤，及蒸发溶剂，产生10.59克(96％)(±)-4-(二氟甲氧基)-3-[(四氢-3-呋喃基)氧基]苯甲醇(中间物3)。
d)将KCN(0.076摩尔)在H2O(4毫升)中的混合物，经加热至80℃后，逐滴添加至中间物3(0.038摩尔)在DMF(82.4毫升)中的混合物内，在60℃下搅拌。将所形成的反应混合物在60℃下搅拌30分钟。使反应混合物冷却，以水洗涤，以DIPE萃取。使萃液干燥、过滤，并蒸发滤液，产生8.23克(80％)(±)-4-(二氟甲氧基)-3-[(四氢-3-呋喃基)氧基]苯乙腈(中间物4)。
以类似方式制备3-(环丙基甲氧基)-4-甲氧基苯乙腈(中间物5)；3-[(1,3-二氢-2H-茚-2-基)氧基]-4-甲氧基苯乙腈(中间物6)；(±)-4-甲氧基-3-[(四氢-3-呋喃基)氧基]苯乙腈(中间物7)；4-甲氧基-3-[(5-苯基戊基)氧基]苯乙腈(中间物8)；4-(二氟甲氧基)-3-[(5-苯基戊基)氧基]苯乙腈(中间物23)。实例A．2a)于N2流动下，将N-(1-甲基乙基)-2-丙胺锂盐(0.0325摩尔；1M，在THF中)逐滴添加至冷却至-78℃的中间物4(0.0309摩尔)与THF(70毫升)中。将混合物在-78℃下搅拌30分钟。逐滴添加碘化碘甲烷(0.034摩尔)，并将反应混合物在RT下搅拌2小时。将混合物以饱和NH4Cl水溶液骤冷，并以醋酸乙酯萃取。将已分离的有机层干燥、过滤及蒸发溶剂。残留物借短的开放式管柱层析，于硅胶上纯化(溶离剂CH2Cl2)，然后借HPLC于硅胶上纯化(溶离剂己烷/醋酸乙酯3/2)。收集纯溶离份并蒸发溶剂，产生4.64克(53％)(±)-4-(二氟甲氧基)-α-甲基-3-[(四氢-3-呋喃基)氧基]苯乙腈(中间物9)。
b)将中间物9(0.0129摩尔)在CH3OH/NH3(100毫升)中的混合物，在RT下使用阮尼镍(3克)作为催化剂进行氢化。在H2吸收后，过滤催化剂并蒸发滤液，产生3.66克(98％)(±)-4-(二氟甲氧基)-β-甲基-3-[(四氢-3-呋喃基)氧基]苯乙胺(中间物10)。
c)将中间物10(0.0158摩尔)与N-氰基-碳亚胺酸二苯酯(0.0158摩尔)在乙醇(60毫升)中的混合物在RT下搅拌过夜。蒸发溶剂，并将残留物借开放式管柱层析于硅胶上纯化(溶离剂己烷/醋酸乙酯3/2及CH2Cl2/CH3OH96/4、90/10及85/5)。收集纯溶离分并蒸发溶剂，产生5.11克(74％)(±)-N-氟基-N-[2-[4-(二氟甲氧基)-3-[(四氢-3-呋喃基)氧基]苯基]丙基]氨基碳亚胺酸苯酯(carbamimidate)(中间物11)。
d)将2,2-二甲氧基乙胺(0.0129摩尔)、N,N-二乙基乙胺(0.023摩尔)及N,N-二甲基-4-吡啶胺(0.0059摩尔)在1,4-二氧六环(30ml)中的混合物，添加至中间物11(0.0117摩尔)在1,4-二氧六环(10毫升)中的于RT下搅拌溶液内。将反应混合物搅拌及回流过夜。蒸发溶剂，并将残留物以水及1N NaOH洗涤，然后以CH2Cl2萃取。将已分离的有机层干燥、过滤及蒸发溶剂。残留物借开放式管柱层析于硅胶上纯化(溶离剂CH2Cl2/CH3OH96/4)。收集纯溶离份及蒸发溶剂，产生4.97克(95％)(±)-N″-氰基-N-[2-[4-(二氟甲氧基)-3-[(四氢-3-呋喃基)氧基]苯基]丙基]-N′-(2,2-二甲氧基乙基)胍(中间物12)。
以类似方式制备(±)-N″-氰基-N-[2-[3-(环戊基氧基)-4-甲氧苯基]丙基]-N′-(2,2-二甲氧基乙基)胍(中间物13)；(±)-N″-氰基-N-[2-[3-(环戊基氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]丙基]-N′-(2,2-二甲氧基乙基)胍(中间物14)；N″-氰基-N-[2-[3-(环戊基氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]乙基]-N′-(2,2-二甲氧基乙基)胍(中间物15)；
(±)-N″-氰基-N-[2-[3-(环丙基甲氧基)-4-(二氟甲氧基)苯基]丙基]-N′-(2,2-二甲氧基乙基)胍(中间物16)；(±)-N″-氰基-N-[2-[3-(1,3-二氢-2H-茚-2-基)氧基]-4-甲氧苯基]丙基]-N′-(2,2-二甲氧基乙基)胍(中间物17)；(±)-N″-氰基-N-[2-[3-(环丙基甲氧基)-4-甲氧苯基]丙基]-N′-(2,2-二甲氧基乙基)胍(中间物18)；(±)-N″-氰基-N-(2,2-二甲氧基乙基)-N′-[2-[4-甲氧基-3-[(5-苯基戊基)氧基]苯基]丙基]胍(中间物19)；(±)-N″-氰基-N-(2,2-二甲氧基乙基)-N′-[2-[4-甲氧基-3-[(四氢-3-呋喃)氧基]苯基]丙基]胍(中间物20)；N″-氰基-N′-(2,2-二甲氧基乙基)-N-[2-[4-(二氟甲氧基)-3-[(5-苯基戊基)氧基]苯基]丙基]胍(中间物24)；N″-氰基-N′-[2-[3-[(2,3-二氢-1H-茚-2-基)氧]-4-甲氧苯基]乙基]-N-(2,2-二甲氧基乙基)胍(中间物25)；(±)-N″-氰基-N-[2-[3-[2-(2,3-二氢-1H-茚-2-基)乙氧基]-4-甲氧苯基]丙基]-N′-(2,2-二甲氧基乙基)胍(中间物27)；(±)-N″-氰基-N-[2-[3-[(2,3-二氢-1H-茚-2-基)氧基]-4-甲氧苯基]-2-[(四氢-2H-吡喃-2-基)氧基]乙基]-N′-(2,2-二甲氧基乙基)胍(中间物28)。实例A．3a)将(±)-3-(环戊基氧基)-4-甲氧基-β-甲基苯乙胺(0.029摩尔)、氯乙腈(0.0146摩尔)及碳酸钠(0.0219摩尔)在DMF(200毫升)中的混合物，于60℃下搅拌5小时。将反应混合物过滤并蒸发滤液。残留物以水洗涤，然后以2-甲氧基-2-甲基丙烷萃取。将已分离的有机层干燥、过滤及蒸发溶剂。残留物借开放式管柱层析于硅胶上纯化(溶离剂CH2Cl2；CH2Cl2/2-丙酮96/4与90/10；然后是CH2Cl2/CH3OH80/20)。收集纯溶离份并蒸发溶剂，产生3.24克(77％)(±)-[[2-[3-(环戊基氧基)-4-甲氧苯基]丙基]氨基]乙腈(中间物21)。
b)将中间物21(0.0117摩尔)在NH3/CH3OH(60毫升)中的混合物，在RT下使用阮尼镍(2克)作为催化剂进行氢化。于H2吸收后，过滤催化剂并蒸发滤液。残留物使用10％HCl水溶液处理，并将此混合物以醋酸乙酯萃取。分离液层。使水相碱化，然后以醋酸乙酯萃取。将已分离的有机层干燥、过滤及蒸发溶剂，产生2.71克(75％)(±)-N-[2-[3-(环戊基氧基)-4-甲氧苯基]丙基]-1,2-乙二胺(中间物22)。实例A．4a)将6,7-二氢-5H-环戊并[b]吡啶-7-醇(0.03544摩尔)、3-羟基-4-甲氧基苯甲醛(0.0322摩尔)及三苯膦(0.0322摩尔)在THF(100毫升)中的混合物，于5℃及N2大气下搅拌。逐滴添加双(1-甲基乙基)重氮烷二羧酸酯(0.0322摩尔)，并将所形成的反应混合物在RT下搅拌12小时。蒸发溶剂。将CH2Cl2添加至残留物中。混合物以水洗涤，干燥，过滤及蒸发溶剂。残留物在硅胶上纯化，于玻璃滤器上进行(溶离剂CH2Cl2/CH3OH，从100/0至98.5/1.5)。收集所要的溶离份，并蒸发溶剂。使残留物溶于2-丙醇中，并以HCl/2-丙醇转化成盐酸盐(1∶1)。蒸发溶剂。将残留物在DIPE中搅拌，过滤并干燥，产生8.2克(83％)3-[(5,6-二氢-7H-吡啉啶-7-基)氧基]-4-甲氧基苯甲醛盐酸盐(中间物34)。
b)将三甲基硅烷甲腈(0.1472摩尔)在CH2Cl2(60毫升)中的溶液，逐滴添加至3-[(2,3-二氢-1H-茚-2-基)氧基]-4甲氧基-苯甲醛(0.1227摩尔)与碘化锌(0.0016摩尔)在CH2Cl2(240毫升)中的混合物内。将所形成的混合物在RT下搅拌一小时。将粗制反应混合物以水及盐水洗涤，然后以CH2Cl2萃取。将已分离的有机层干燥、过滤及蒸发溶剂。残留物自DIPE结晶。将沉淀物过滤并干燥，产生37.39克(83％)(±)-3-[(2,3-二氢-1H-茚-2-基)氧基]-4-甲氧基-α-[(三甲基硅烷基)氧基]苯乙腈(中间物29)。
c)使中间物29(0.1116摩尔)溶解于甲醇中。添加HCl(3N,25毫升)。将混合物搅拌5分钟。蒸发大部分溶剂，并添加CH2Cl2。分离有机层，以饱和NaHCO3水溶液洗涤，干燥，过滤及蒸发溶剂。使残留物溶解于CH2Cl2(350毫升)中，添加3,4-二氢-2H-吡喃(0.2231摩尔)与4-甲基苯磺酸(催化量)，并将所形成的反应混合物在RT下搅拌过夜。将混合物以饱和NaHCO3水溶液洗涤、干燥、过滤及蒸发溶剂。将残留物借短的开放式管柱层析于硅胶上纯化(溶离剂己烷/醋酸乙酯，9/1，然后是8/2)。收集所要的溶离份并蒸发溶剂，产生28.01克(66％)(±)-3-[(2,3-二氢-1H-茚-2-基)氧基]-4-甲氧基-α-[(四氢-2H-吡喃-2-基)氧基]苯乙腈(中间物30)。实例A．5a)将二碳酸双(1,1-二甲基乙基)酯(1.268摩尔)在CH2Cl2(1800毫升)中的溶液。逐滴添加至(±)-3-[(2,3-二氢-1H-茚-2-基)氧基]-4-甲氧基-β-甲基苯乙胺(1.208摩尔)在CH2Cl2(1800毫升)中的溶液内。将混合物在RT下搅拌2小时。蒸发溶剂。将残留物在己烷中搅拌，过滤并干燥，产生420克(±)-[2-[3-[(2,3-二氢-1H-茚-2-基)氧基]-4-甲氧苯基]丙基]氨基甲酸1,1-二甲基乙酯(中间物31)。
b)将中间物31(1.056摩尔)借对映性管柱层析，于Chiralpack AD上纯化与分离(溶离剂己烷/C2H5OH/CH3OH90/10/10)。收集所要的溶离份，并蒸发溶剂，产生268克B-[2-[3-[(2,3-二氢-1H-茚-2-基)氧基]4-甲氧苯基]丙基]氨基甲酸1,1-二甲基乙酯(中间物32)。
c)将中间物32(0.67摩尔)在HCl(670毫升；6N)及甲醇(2700毫升)中的混合物，搅拌及回流90分钟。蒸发溶剂。使残留物溶于CH2Cl2中。将有机溶液以H2O(1000毫升)及饱和NaHCO3溶液洗涤。分离有机层、干燥、过滤及蒸发溶剂，产生158克(99％)(B)-3-[(2,3-二氢-1H-茚-2-基)氧基]-4-甲氧基-β-甲基苯乙胺(中间物33)。
根据实例A.2.b至A.2.d中所述的程序，使中间物33进一步反应，以形成(B)-N″-氰基-N-[2-[3-[(2,3-二氢-1H-茚-2-基)氧基]4-甲氧苯基]丙基]-N’-(2,2-二甲氧基乙基)胍(中间物26)。B．式(Ⅰ)化合物的制备实例B．1将中间物22(0.0068摩尔)与氰基碳亚氨二硫代酸二甲酯(0.0068摩尔)在乙醇(20毫升)中的混合物，搅拌并回流2天。蒸发溶剂，并首先将残留物借短的开放式管柱层析于硅胶上纯化(溶离剂CH2Cl2、CH2Cl2/CH3OH96/4及90/10)，然后借HPLC纯化两次(1.溶离剂CH2Cl2/CH3OH90/10，及2．溶离剂CH2Cl2/CH3OH96/4)。收集纯溶离份并蒸发溶剂，产生0.3克(13％)(±)-[1-[2-[3-(环戊基氧基)-4-甲氧苯基]丙基]-2-亚四氢咪唑基(imidazdidinylidene)]氰胺(化合物1)。实例B．2将HCl0.5N(0.0162摩尔)逐滴添加至中间物12(0.0108摩尔)在1,4-二氧六环(20毫升)中的溶液内，搅拌及在冰浴中冷却。将反应混合物在RT下搅拌2天。(其替代方式是，可将1,4-二氧六环以THF取代，并可将反应混合物回流1小时，代替在RT下搅拌2天)。将反应混合物以水处理，以稀NaOH溶液碱化，然后以醋酸乙酯萃取。将已分离的有机层干燥、过滤及蒸发溶剂。残留物借开放式管柱层析于硅胶上纯化(溶离剂CH2Cl2/2-丙酮96/4；CH2Cl2/CH3OH96/4)，及借HPLC于硅胶上纯化两次(1．溶离剂CH2Cl2/CH3OH 96/4，及2．溶离剂CH2Cl2/CH3OH97/3)。收集纯溶离份并蒸发溶剂，产生0.64克(15％)(±)-[1-[2-[4-(二氟甲氧基)-3-[(四氢-3-呋喃基)氧基]苯基]丙基]-1,3-二氢-2H-亚咪唑-2-基(imidazd-2-ylidene)]氰胺(化合物2；熔点67.8℃)。实例B．3a)借对映性管柱层析，于Chiralpak AD(20微米，250克，5cm，流量60毫升/分钟；溶离剂已烷/乙醇/甲醇80/15/5)上，使化合物7(0.00644摩尔)分离成其对映异构物。收集两组所要的溶离份。蒸发第一组(A)溶离份的溶剂。将残留物在DIPE中搅拌，过滤，以DIPE洗涤，然后干燥。将残留物借管柱层析，于Kromasil硅胶上进一步纯化(200克，5微米，溶离剂CH2Cl2/CH3OH100/0，于30分钟后为90/10)。收集纯溶离份并蒸发溶剂。将残留物在DIPE中搅拌，过滤，以DIPE洗涤，然后干燥，产生0.39克(50％)(+)-(A)-[1-[2-[3-[(2,3-二氢-1H-茚-2-基)氧基]-4-甲氧基-苯基]丙基]-1H-咪唑-2-基]氰胺；[α]D20=+95.46°(c≈0.1％，在CH3OH中)(化合物16)。
蒸发第二组(B)-溶离份的溶剂。将残留物在DIPE中搅拌，过滤，以DIPE洗涤，然后干燥。将残留物借管柱层析，于Kromasil硅胶上纯化(200克，5微米，溶离剂CH2Cl2/CH3OH100/0，于30分钟后为90/10)。收集纯溶离份，并蒸发溶剂。将残留物在DIPE中搅拌，过滤，以DIPE洗涤，然后干燥，产生0.5克(90％)(-)-(B)-[1-[2-[3-[(2,3-二氢-1H-茚-2-基)氧基]-4-甲氧基苯基]丙基]-1H-咪唑-2-基]氰胺；[α]D20=-109.04°(c=0.1％，在CH3OH中)(化合物17)。
b)将化合物17(0.0026摩尔)在DMF(40毫升)中的混合物，在0℃下搅拌。添加氢化钠(0.0028摩尔；60％)，并将混合物在0℃下搅拌30分钟，及在RT下30分钟。逐滴添加溴甲基苯(0.0028摩尔)在DMF(10毫升)中的溶液，并将所形成的反应混合物在RT下搅拌3小时。蒸发溶剂，添加甲苯，并在回转式蒸发器上共沸。使残留物溶于CH2Cl2中。添加水。分离有机层，干燥，过滤及蒸发溶剂。将残留物借短的管柱层析于硅胶上纯化(溶离剂CH2Cl2/CH3OH98/2)。收集所要的溶离份并蒸发溶剂，产生0.7克(63％)(B)-[1-[2-[3-[(2,3-二氢-1H-茚-2-基)氧基]-4-甲氧基-苯基]丙基]-3-苯基甲基-1H-咪唑-2-基]氰胺(化合物23)。实例B．4将HCl(0.0268摩尔；0.5N)添加至中间物28(0.0179摩尔)在THF(250毫升)中的溶液内，搅拌及在冰浴中冷却。将反应混合物搅拌并回流1.5小时，然后在冰浴中冷却。使混合物于水与醋酸乙酯之间作分液处理并以固体Na2CO3碱化。分离有机层，干燥，过滤及蒸发溶剂。残留物借短的开放式管柱层析于硅胶上纯化(溶离剂CH2Cl2/CH3OH97/3，然后是95/5)。收集所要的纯溶离份。蒸发溶剂并使残留物自CH3CN结晶，过滤并干燥，产生(35％)(±)-[1-[2-[3-[(2,3-二氢-1H-茚-2-基)氧基]-4-甲氧苯基]-2-羟基乙基］-1,3-二氢-2H-亚咪唑-2-基(imidazol-2-ylidine)]氰胺(化合物21)。
表1列出根据上文实例之一所制成的式(Ⅰ)化合物。
表1
C．药理学实例实例C.1以杆状病毒媒在昆虫细胞中制成的重组人类单核淋巴细胞(MNL)磷酸二酯酶ⅣB型的抑制作用本发明化合物对于过敏性与异位性疾病的减轻及/或治疗作用，借由活体外检测系统评估，以检测出对于重组人类MNL磷酸二酯酶ⅣB型的抑制作用。
在以重组杆状病毒感染后七十二小时，采集昆虫细胞并在500克重力下造粒5分钟。使细胞溶解于10毫升溶胞缓冲剂中，其包含20mMTris、10mM EGTA、2mM Na2EDTA、1％Triton-X-100、1mMNa3VO4、10mM NaF、2微克/毫升亮肽素、胃蛋白酶抑制素与抑肽酶、0.3微克/毫升苯甲脒及100微克/毫升TPCK,pH值7.5。于冰上5分钟后，将已溶解的细胞于4℃下，在4000rpm下离心15分钟。将所形成的上层清液经过0.45微米滤器(Millipore)过滤，并将其引进TBS缓冲剂(50mM Tris、150mM NaCl,pH值7.4)中。
将含有ⅣB型磷酸二酯酶(PDE)的上层清液，接着装填至5毫升抗-FLAG-M2亲和力凝胶管柱上，该管柱已预先使用5毫升100mM甘氨酸pH值3.5活化，并以20毫升50mM Tris、150mM NaCl pH值7.4达成平衡。在以平衡用缓冲剂洗涤管柱后，使PDEⅣ溶离在含有37.5微升1M Tris pH值8的1.5毫升溶离份中。使溶离份对着20mMTris、2mM Na2EDTA及400mM NaCl pH值7.5渗析过夜，并测试PDEⅣ活性。于SDS PAGE与Western吸墨纸(抗-FLAG-M)上进行鉴定。汇集活性溶离份，引至10％甘油中，并在-70℃下储存。
培育混合物(pH值8)(200微升)含有20mM Tris、10mM硫酸镁、0.8μM3H-cAMP(310mCi/毫摩尔)及Ⅳ型磷酸二酯酶，其量依酶活性而定。蛋白质浓度经选择，其显示在37℃下，于最高10分钟的培育期间，磷酸二酯酶活性的线性增加，且其中低于10％的最初受质被水解。
当测试不同化合物对于磷酸二酯酶活性的作用时，将未具有cAMP的培养基以化合物或其载剂(DMSO-1％最后浓度)培育5分钟。酶反应借由添加3H-cAMP开始，并于稍后，在转移微滴定板于100℃下的水浴中5分钟后，于10分钟停止。于冷却至室温后，添加碱性磷酸酶(0.25微克/毫升)，并将混合物于37℃下培育20分钟。接着将100微升混合物施加至已充填300微升DEAE-Sephadex-A25悬浮液的GF-B滤器-微滴定板(Millipore)。将此板以75微升20mM Tris pH值7.5洗涤3次，并收集滤液，以在Packard Top Count闪烁计数器中计算。
本发明化合物对于重组人类MNL磷酸二酯酶PDE ⅣB的抑制作用，在不同浓度的本发明化合物下度量。IC50值(以M表示)是自如此获得的抑制作用值，以图形方式计算而得，并列于表2中。表2<
D．组合物实例下述配方举例说明适合对动物与人类病患进行系统或局部投药的根据本发明的典型医药组合物。
使用在整个此等实例中的“活性成分”(A.I.)，是关于式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的加成盐。实例D.1涂膜片剂片剂核芯的制备将100克A.1.、570克乳糖及200克淀粉的混合物充分混合，然后以5克十二基硫酸钠与10克聚乙烯基四氢吡咯酮在约200毫升水中的溶液湿化。将湿粉末混合物筛滤、干燥及再一次筛滤。然后添加100克微晶性纤维素与15克氢化植物油。将整体充分混合并压缩成片剂，获得10,000个片剂，各包含10毫克活性成分。涂层于10克甲基纤维素在75毫升变性乙醇中的溶液内，添加5克乙基纤维素在150毫升二氯甲烷中的溶液。然后添加75毫升二氯甲烷与2.5毫升1,2,3-丙烷三醇。使10克聚乙二醇熔融并溶解于75毫升二氯甲烷中。将后述溶液添加至前者中，然后添加2.5克十八酸镁、5克聚乙烯基四氢吡咯酮及30毫升浓缩着色悬浮液，及将整体均化。以如此获得的混合物在涂覆装置中涂覆片剂核芯。实例D.2:2％局部乳膏于200毫克羟丙基β-环糊精在纯水中的溶液内，添加20毫克A.1.，同时搅拌。添加盐酸，直到完全溶解为止，及接着添加氢氧化钠直到pH值6.0为止。于搅拌时，添加50毫克甘油与35毫克聚花楸酸酯60，并将混合物加热至70℃。将所形成的混合物添加至具有温度为70℃的100毫克矿物油、20毫克硬脂基醇、20毫克鲸蜡醇、20毫克单硬脂酸甘油酯及15毫克花楸酸酯60的混合物中，同时慢慢混合。于冷却至低于25℃后，添加其余纯水，足量至1克，并将混合物混合至均匀。
权利要求
1．一种具有下式的化合物
其N-氧化物形式、药学上可接受的酸或碱加成盐或立体化学异构形式，其中R1与R2各独立为氢；C1-6烷基；二氟甲基；三氟甲基；C3-6环烷基；饱和5-、6-或7-元杂环，其含有一或两个选自氧、硫或氮的杂原子；二氢茚基；6,7-二氢-5H-环戊吡啶基；双环并[2.2.1]-2-庚烯基；双环并[2.2.1]庚烷基；C1-6烷基磺酰基；芳基磺酰基；或被一或两个取代基取代的C1-10烷基，各取代基独立选自芳基、吡啶基、噻吩基、呋喃基、二氢茚基、6,7-二氢-5H-环戊吡啶基、C3-7环烷基及含有一或两个选自氧、硫或氮的杂原子的饱和5-、6-或7-元杂环；R3为氢、卤基或C1-6烷氧基；R4为氢；卤基；C1-6烷基；三氟甲基；C3-6环烷基；羧基；C1-4烷氧羰基；C3-6环烷氨基羰基；芳基；Het1；或被氰基、氨基、羟基、C1-4烷羰基氨基、芳基或Het1取代的C1-6烷基；或R4为下式基团-O-R7(a-1)；或-NH-R8(a-2)；其中R7为氢；C1-6烷基；被羟基、羧基、C1-4烷氧羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)-氨基、Het1或芳基取代的C1-6烷基；R8为氢；C1-6烷基；C1-4烷基羰基；被羟基、羧基、C1-4烷氧羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、Het1或芳基取代的C1-6烷基；R5为氢、卤基、羟基、C1-6烷基或C1-6烷氧基；或R4与R5可一起采用而形成下式二价基团-(CH2)n- (b-1)；-CH2-CH2-O-CH2-CH2-(b-2)；-CH2-CH2-N(R9)-CH2-CH2-(b-3)；或-CH2-CH=CH-CH2- (b-4)；其中n为2、3、4或5；R9为氢、C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基或对-甲苯磺酰基；R6为氢或C1-4烷基；或R4与R6可一起采用而形成式-(CH2)m-二价基团；其中m为1、2、3或4；-A-B-为下式二价基团-CR10=CR11- (c-1)；或-CHR10-CHR11-(c-2)；其中各R10与R11独立为氢或C1-4烷基；及L为氢；C1-6烷基；C1-6烷羰基；C1-6烷氧羰基；被一或两个选自包括羟基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧羰基、单-与二(C1-4烷基)氨基、芳基及Het2的取代基取代的C1-6烷基；C3-6烯基；被芳基取代的C3-6烯基；哌啶基；被C1-4烷基或芳基C1-4烷基取代的哌啶基；C1-6烷基磺酰基或芳基磺酰基；芳基为苯基或被一、二或三个取代基取代的苯基，取代基选自卤基、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C3-6环烷基、三氟甲基、氨基、硝基、羧基、C1-4烷氧基羰基及C1-4烷羰基氨基；Het1为吡啶基；被C1-4烷基取代的吡啶基；呋喃基；被C1-4烷基取代的呋喃基；噻吩基；被C1-4烷羰基氨基取代的噻吩基；羟基吡啶基，被C1-4烷基或C1-4烷氧基-C1-4烷基取代的羟基吡啶基；咪唑基；被C1-4烷基取代的咪唑基；噻唑基；被C1-4烷基取代的噻唑基；噁唑基；被C1-4烷基取代的噁唑基；异喹啉基；被C1-4烷基取代的异喹啉基；喹啉酮基，被C1-4烷基取代的喹啉酮基；吗福啉基；哌啶基；被C1-4烷基、C1-4烷氧羰基或芳基C1-4烷基取代的哌啶基；六氢吡嗪基；被C1-4烷基、C1-4烷氧羰基或芳基C1-4烷基取代的六氢吡嗪基；及Het2为吗福啉基；哌啶基；被C1-4烷基或芳基C1-4烷基取代的哌啶基；六氢吡嗪基；被C1-4烷基或芳基C1-4烷基取代的六氢吡嗪基；吡啶基；被C1-4烷基取代的吡啶基；呋喃基；被C1-4烷基取代的呋喃基；噻吩基或被C1-4烷基或C1-4烷羰基氨基取代的噻吩基。
2．权利要求1的化合物，其中R1与R2各独立为氢；C1-6烷基；二氟甲基；三氟甲基；C3-6环烷基；含有一或两个选自氧、硫或氮杂原子的饱和5-、6-或7-元杂环；二氢茚基；双环并[(2.2.1)]-2-庚烯基；双环并[2.2.1]庚烷基；C1-6烷基磺酰基；芳基磺酰基；或被一或两个取代基取代的C1-10烷基，各取代基独立选自芳基、吡啶基、噻吩基、呋喃基、C3-7环烷基及含有一或两个选自氧、硫或氮的杂原子的饱和5-、6-或7-元杂环。
3．权利要求1或2的化合物，其中R1与R2各独立为C1-6烷基；C3-6环烷基；二氟甲基；含有一或两个选自氧、硫或氮杂原子的饱和5-、6-或7-元杂环；二氢茚基；或被芳基、二氢茚基、6,7-二氢-5H-环戊吡啶基或C3-6环烷基取代的C1-10烷基。
4．权利要求1至3中任一项的化合物，其中R4为C1-6烷基。
5．权利要求1至4中任一项的化合物，其中R1为环戊基、四氢呋喃基、环丙基甲基、5-苯基戊基、6,7-二氢-5H-环戊并[b]吡啶基或二氢茚基；R2为甲基或二氟甲基；及R3、R5、R6、R10、R11及L均为氢。
6．权利要求1的化合物，其中该化合物为[1-[2-[4-(二氟甲氧基)-3-[(四氢-3-呋喃基)氧基]苯基]丙基]-1,3-二氢-2H-咪唑-2-基]氰胺；与[1-[2-[4-(甲氧基)-3-[(1,3-二氢-2H-茚-2-基)氧基]苯基]丙基]-1,3-二氢-2H-亚咪唑-2-基(imidazol-2-ylidene)]氰胺，或其N-氧化物、立体化学异构形式或药学上可接受的加成盐。
7．一种组合物，其包含药学上可接受的载剂，及作为活性成分的治疗上有效量的权利要求1至6中任一项的化合物。
8．一种制备权利要求7的组合物的方法，其特征在于将药学上可接受的载剂与治疗上有效量的权利要求1至6中任一项的化合物密切混合。
9．权利要求1至6中任一项的化合物，其作为医药使用。
10．一种权利要求1至6中任一项的化合物在治疗异位性或气喘性疾病的药剂的制造中的用途。
11．一种制备权利要求1的化合物的方法，其特征在于a)式(Ⅱ)中间物或其官能性衍生物，其中R1至R6、R10及R11均如在权利要求1中的定义，
在对反应呈惰性的溶剂中，及于适当酸存在下的环化作用；因而形成式(Ⅰ-a-1)化合物；b)式(Ⅱ-1)中间物，其中R1至R4、R6、R10及R11均如在权利要求1中的定义，且P为氢或三甲基硅烷基保护基或其官能性衍生物，
在对反应呈惰性的溶剂中，及于适当酸存在下的环化作用；因而形成式(Ⅰ-a-1-1)化合物；c)式(Ⅲ)中间物或其官能性衍生物，其中R1至R6、R10及R11均如在权利要求1中的定义
在对反应呈惰性的溶剂中，及于氰基碳亚氨基二硫代酸二甲酯或N-氰基碳亚胺酸二苯酯存在下的环化作用；因而形成式(Ⅰ-a-2)化合物；d)使式(Ⅳ)有机金属中间物，其中R1至R3均如在权利要求1中的定义，及M为适当金属离子或金属配合离子
在对反应呈惰性的溶剂中，与适当的式(Ⅴ)2-氰基亚氨基咪唑衍生物反应，其中R4至R6、L及-A-B-均如在权利要求1中的定义，及W1为反应性脱离基；及若需要则按照技术上已知的转换作用，将式(Ⅰ)化合物彼此转化，且再者，若需要则经由以酸处理，使式(Ⅰ)化合物转化成具治疗活性的无毒酸加成盐，或经由以碱处理而转化成具治疗活性的无毒碱加成盐，或反之，经由以碱处理，使酸加成盐形式转化成自由态碱，或经由以酸处理，使碱加成盐转化成自由态酸；以及，若需要则制备其立体化学异构形式或N-氧化物形式。
全文摘要
本发明关于具有下式的2－氰基亚氨基咪唑衍生物其N－氧化物形式、药学上可接受的加成盐及立体化学异构形式,其中R
文档编号A61P11/00GK1232456SQ97198460
公开日1999年10月20日 申请日期1997年9月24日 优先权日1996年10月2日
发明者E·J·E·弗雷纳, F·J·菲尔南德兹－家德, J·I·安德雷斯-吉尔 申请人:詹森药业有限公司