去分化植物细胞的美容用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于美容领域，涉及蔷薇属（Rosa sp.)植物的去分化植物细胞作为活性剂 对皮肤和毛发的美学护理的用途。
[0002] 本发明还涉及来源于兰蔻蔷薇丛（Lanc6merosebush)的去分化植物细胞的细 胞系，所述去分化植物细胞能够且有效地修复皮肤的再生能力。
[0003] 特别地，本发明涉及来源于兰蔻品种的蔷薇丛的去分化植物细胞的细胞系，所述 去分化植物细胞能够且有效地修复具有低的再生潜力的重建皮肤的模型的再生能力，并 且对来源于人体皮肤活体组织检查（头皮和包皮）的真皮干细胞、皮肤干细胞（SKP)的库 (reservoir)的自我更新能力有效。
【背景技术】
[0004] 皮肤是一种在个体的整个生命中持续地自我更新的组织。这种自我更新能力通过 存在于表皮基底层中的角质形成细胞得以保持。这种细胞群，一方面，包括干细胞，所述干 细胞是一种稀有细胞，其特征是具有非常可观的长期的扩增潜能以及自我更新能力，另一 方面，包括被称作祖细胞的细胞，当祖细胞向角质层迀移时，增殖活跃并且可能分化。
[0005] 对于毛囊，已知上皮隔室和真皮隔室的相互作用对毛发的形态发生和再生长以及 维持毛囊周期是必不可少的。这两个隔室功能的维持依赖于各种干细胞库的存在和活性。 上皮干细胞的第一库已经在啮齿类动物的被称作"隆突"的区域被确认（Cotsarelis等， Cell，1990,61 :1329)。自从该第一次发现以来，角质成形细胞干细胞的其他库已经被确认， 并且，在人类中，出现多个更活跃或较不活跃的库，其嵌入毛囊的外跟鞘（ORS)中（Rochat 等，Ce 11，1994, 76 :1063 ;Commo 等，Differentiation，2000,66 :157 ; Jaks 等，Nature Genetics, 2008,40 :1291)〇
[0006] 至于真皮隔室，容纳在真皮乳头及结缔组织鞘中的被称作SKP(皮肤源性前体细 胞）的细胞，已经被确认在小鼠的毛发生长诱导及皮肤修复中作为多能细胞（Biernaskie 等，Cell Stem Cell，2009,5:310)。数个团队已经证明SKP存在于人体组织中，尤其在毛囊 的真皮乳头中（Toma 等，Stem Cells，2005, 23:727 ;Hunt 等，Stem Cells，2008, 26:163)。
[0007] 尤其通过外皮表面的大量变型、肤色暗沉以及表面不均一性（平滑外观丧失）、弹 性丧失、出现皱纹、创伤后的修复/愈合减缓、表皮变薄和/或毛发脱落和/或变白、毛发密 度减小等，来显不皮肤室的老化。
[0008] 在皮肤和毛发上的所有这些可见的变化表明皮肤隔室的再生能力的改变。它们也 表明确保这些组织的内稳态和自我更新的基本的生物学功能随着年龄增长被损害。
[0009] 现有数据表明，随着年龄增长，表皮中的再生细胞数量不会减少（Giangreco等， Aging Cell，2008, 7 :250)，但是它们的功能性显示出极大地受控制基底层再生能力的微环 境的改变的影响。因此，与年龄相关的皮肤质量的下降呈现出与这些细胞的改变的再生能 力关联。在细胞的微环境的关键组分中，可以提到细胞间相互作用、基底室的物理约束、以 及周围细胞和真皮隔室的常驻型细胞分泌的旁分泌因子。
[0010]同样地，与脱发或者自然老化相关的毛发数量的减少和/或毛发质量的降低也表 明变化的再生能力。事实上，已经证明：与未脱发头皮的毛囊相比，脱发头皮的毛囊长度收 缩，并且具有较少的增殖的角质形成细胞（Ashrafussaman等，Acta Histochem Cytochem， 2010,43 :9)。此外，近来研宄表明缺乏表皮干细胞转化为祖细胞在雄激素源性脱发中起着 重要作用（Garza等，J Clin Invest，2010)。在真皮隔室中，体外培养中来源于脱发头皮的 真皮乳头的细胞增殖缓慢，并且，相较于来源于未脱发头皮的细胞，显示出过早老化（Bahta 等，J Invest Dermatol，2008,128 :1088)，随着年龄增长，SKP的数量减少已经在人体组织 中发现（Gago等，Stem Cells，2009,27 :1164)。所有这些观察结果暗示毛囊隔室的再生能 力的改变与脱发和/或自然老化有关。
[0011] 因此，为了找到抵制皮肤和毛发与年龄关联的改变的解决办法，应尤其关注再生 细胞，或甚至是皮肤和毛发的干细胞。
[0012] 去分化植物细胞起源于Haberland在1902年的研宄。在过去的40年中，植物细 胞培养物已经被用于感兴趣的代谢产物的生产以及完全一样的植株的增殖（体细胞胚胎 发生）。这种植物生物技术是基于细胞全能性的概念："任何一个植物细胞能够去分化并且 再生成另一个与所述细胞来源相同的新个体。"去分化植物细胞是来源于器官（叶、茎、根、 花瓣等）的植物细胞，其经过培养、再次生成它的去分化形式，即失去了它的叶、茎、根、花 瓣的特异性，能够再次生成完整的植株。
[0013] 未分化植物细胞相当于源自植物分生组织细胞的真正的植物干细胞，并且不具有 器官特异性的生物学历史。
[0014] WO 2009/151302 和 KR 2009-0118877 描述了含有来源于人参（Panax ginsen)的 形成层或者红豆杉属（Taxus genus)植物的未分化植物细胞的抗老化或抗氧化的组合物。
[0015] EP 1 985 280描述了来源于蔷薇科（Rosaceae)植物、尤其是来源于苹果树 (Malus domestica，苹果）的去分化植物细胞的用途，用来保护面对各种内在和外在压力的 皮肤的干细胞，尤其用来治疗与年龄相关的皮肤和毛发的损害。
[0016] EP 1 699 423描述了来源于嗜盐植物的去分化植物细胞的冻干物的用途，用于复 原皮肤表面。
[0017] DE-A-102 009 027 361和EP 2 266 529描述了去分化植物细胞的用途，尤其是 来源于苹果属（Malus genus)植物的去分化植物细胞的用途，用于处理毛发角蛋白纤维、尤 其保护它们免受紫外线辐射，或者用于治疗老化的皮肤。
[0018] EP 0 909 556描述了一种蔷薇科植物提取物的用途，特别是蔷薇的提取物，可选 地从未分化植物细胞中获得，作为缓激肽拮抗剂用于处理各种病症、尤其是皮肤病症。
[0019] W02011121051描述了来源于阿干（argania)树的去分化的、非诱导细胞的培养物 的制剂，该制剂用于治疗老化皮肤、炎症和症痕的用途，以及该制剂的生产。
[0020] W0200482643描述了一种包含乳香、乳香（Boswelia)或黄荆（Negundo)的去分化、 诱导植物细胞并且显示提神作用的美容组合物。
[0021] EP2436759描述了来源于前科（Solanaceae)植物的形成层并且显示抗老化作用 的未分化细胞系。
[0022] EP2436758描述了来源于银杏科（Ginkgoaceae)植物的形成层并且显示增强的抗 氧化作用的未分化细胞系。
[0023] EP2436757描述了来源于菊科（Asteraceae)植物的形成层并且显示增强的抗炎 作用的未分化细胞系。
[0024] W02010137879描述了来源于杨柳科（Salicaceae)植物的形成层并且显示增强的 抗炎作用的去分化细胞系。
[0025] EP1064932描述了显示除臭作用的去分化细胞的用途。
[0026]EP1244464描述了火绒草属（Leontopodium genus)的去分化植物细胞的提取物 作为抗紫外线的遮蔽剂的用途。
[0027] 因此，据申请人所知，没有文献提及获取具有如本说明书所述的特定的美容性能 的蔷薇丛的去分化细胞系。
[0028] 需要确定技术方案，用于提高再生细胞（包括皮肤和毛发的干细胞）的功能性和 /或活性，用于在个体的整个生命期中保持皮肤质量和功能、以及毛发质量、密度和形状，以 及尤其用于预防和/或治疗与年龄关联的皮肤和毛发外观的影响。
[0029] 特别地，需要提供新型的活性剂，用于抵制皮肤或毛发的组织再生中的缺陷，尤其 用于减轻表皮变薄、提高皮肤外观、消除皱纹、减缓和/或阻止脱发、或者减缓和/或阻止毛 发变白。
【发明内容】
[0030] 本发明的目的尤其是满足这些需求。
[0031] 根据本发明的第一方面，本发明涉及蔷薇属植物的、尤其是兰蔻蔷薇丛的植物的 去分化的植物细胞、或者所述细胞的提取物或冻干物作为用来护理老化的皮肤或老化的毛 发的活性剂的美容用途。
[0032] 出乎意料地，发明人发现蔷薇的去分化植物细胞、或者所述细胞的提取物或冻干 物已经被证明：在体外尤其能够且有效地修复由几乎不存在上皮干细胞和祖细胞的角质形 成细胞群形成的重建皮肤的模型的再生能力。在包括处理两周的三周培养后，已经观察到 上皮细胞厚度的增加以及形态质量（基底层的组织、成层和分化，等）的非常明显的改进。
[0033] 发明人已表明，蔷薇去分化植物细胞、或者所述细胞的提取物或冻干物，通过优化 表皮和真皮之间的通讯，至少部分地产生促再生（pro-regenerating)效应。事实上，发明 人已经发现使用本发明的蔷薇去分化植物细胞、或者所述细胞的提取物或冻干物处理具有 降低的再生潜能的重建皮肤，诱导许多可扩散的生物因子的表达，尤其是，对表皮再生具有 有益效果而被熟知的KFG(角质形成细胞生长因子）的表达。因此，发明人已经发现，蔷薇 去分化植物细胞、或者所述细胞的提取物或冻干物，已经被证明特别地能够且有效地诱导 皮肤产生恢复包含干细胞和祖细胞的基底层的再生能力的生理因子。
[0034] 出乎意料地，发明人已经发现，蔷薇去分化植物细胞、或者所述细胞的提取物或冻 干物，已经被证明对于刺激来自于人体活组织检查（头皮和包皮）的真皮干细胞、SKP的库 的自我更新能力特别有效。因此，可以观察到，在处理10天后，SKP的自我更新能力提高了 约65%。这种活性剂评价研宄可以得到结论：在体外，SKP的自我更新能力可以受到使用蔷 薇去分化植物细胞、或者所述细胞的提取物或冻干物的处理的积极影响。
[0035] 出人意料地，发明人也示出，蔷薇去分化植物细