"可以用于指变化小于10%、小于9%、小 于8%、小于7%、小于6%、小于5%、小于4%和小于3%。在一些实施方案中，术语"微不 足道的影响"可以用于指由大约3%至大约10%的变化（增量为1% )。例如所关注的化合 的活性可以增强大约10 %至大约300%、大约20 %至大约200%、大约25 %至大约250%、 大约30 %至大约300%、大约35 %至大约275%、大约40 %至大约225%、大约15 %至大约 100%或其中的任何范围内的量（增量为1% )。
[0046] 提供了由水蛭移出全唾液的方法。在这些实施方案中，所述的方法可以包含向水 蛭提供取食刺激剂；在水蛭中诱导反刍，所述的诱导包含将水蛭放置在温度低于大约o°c 的环境中；以及在冷却水蛭的反刍中，收集未精制的全唾液。
[0047] 任一技术人员将理解的是具有治疗唾液的任何水蛭都可以用于本文提供的 教导中。在一些实施方案中，所述的水蛭可以属于水蛭科，水蛭亚科，或者其可以属于 选自 hirudo、菲牛虫至、aliolimantis、limantis、asiaticobdella、goddardobdella、 limnobdella、北美水輕、oxyptychus、philobdella中的属。在一些实施方案中，所述 的水輕可以选自欧洲医輕（hirudo medicinalis)、药用水輕（hirudo troctina)、日本 医虫至（hirudo nipponia)、hirudo orientalis、hirudo verbana、菲牛虫至、hirudinaria javanica、 南 非 水虫至(aliolimantis africana)、aliolimantis michaelseni、 aliolimantis oligodonta、 aliolimantis buntonesis、 limantis nilotica、 limantis cf. nilotica、limantis paluda、asiaticobdella fenestrata、goddardobdella elegans、 limnobdella mexicana、macrobdella decora、macrobdella diploteria、macrobdella diletra> oxyptychus brasiliensis> oxyptychus striatus> philobdella floridana> philobdella gracilis。
[0048] 在一些实施方案中，所述的水蛭可以属于山蛭科，或者其可以属于选自 chtonobdella、haemadipsa、idiobdella、malagdbdella、nesophilaemon 中的属。在这些 实施方案中，所述的水輕可以为选自chtonobdella bilineata、chtonobdella whitmani、 haemadipsa interrupta、haemadipsa sylvestris、haemadipsa sumatrana、idiobdella seychellensis、malagdbdella fallax、nesophilaemon skottsbergi 中的种。
[0049] 在一些实施方案中，所述的水輕可以属于xerobdellidae科，或者其可以属于选 自diestecostoma、mesobdella、xerobdella中的属D在这些实施方案中，所述的水輕可以 为选自 diestecostoma magna、diestecostoma mexicana、diestecostoma trujillensis、 mesobdella gemmata、xerobdella lecomtei 中的种。
[0050] 在一些实施方案中，所述的水輕可以属于黄輕科，或者其可以属于选自haemopis、 whitmania中的属D在这些实施方案中，所述的水輕可以选自选自haemopis grandis、 haemopis kingi、haemopis sanguisuga、haemopis terrestris、whitmania laevis 中的 种。
[0051] 在一些实施方案中，所述的水輕可以属于semiscolecidae科，或者其可以属于选 自patagoniobdella、semiscolex中的属D在这些实施方案中，所述的水輕可以选自选自 patagoniobdella fraternal、patagoniobdella variabilis、semiscolex intermedius、 semiscolex lamothei、semiscolex similis 中的种。
[0052] 在一些实施方案中，所述的水輕可以属于americobdellidae科，或者其可以属于 选自americobdella中的属 D在这些实施方案中，所述的水輕可以选自选自americobdella valdiviana 中的种。
[0053] 在一些实施方案中，所述的水輕可以属于cylicobdellidae科，或者其可以属于 选自cylicobdella中的属D在这些实施方案中，所述的水輕可以选自选自cylicobdella coccinea 中的种
[0054] 在一些实施方案中，所述的水蛭可以属于erpobdellidae科。在这些实施方案中， 所述的水輕可以选自选自erpobdella mentezuma中的种。
[0055] 在一些实施方案中，所述的水蛭可以根据表1分类。
[0056] 表 1
【主权项】
1. 一种由水蛭移出全唾液的方法，该方法包含： 向水蛭提供取食刺刺激剂； 诱导所述的水蛭反刍，所述的诱导包含将所述的水蛭放置在温度低于大约〇°c的环境 中；以及 在所述的冷却的水蛭的反刍中，收集未精制的全唾液。
2. 权利要求1所述的方法，其中所述的收集包含挤压所述的水蛭，从而增加所收集的 未精制的全唾液的量。
3. 权利要求1所述的方法，其进一步包含通过将所述的水蛭在温度范围为大约5°C至 大约40°C的水浴中温暖来使所述的水蛭复苏。
4. 权利要求1所述的方法，其中所述的方法进一步包含建立精制的全唾液提取物；所 述的建立包含由所述的未精制的全唾液移出固体成分。
5. 权利要求4所述的方法，其中所述的方法进一步包含冻干分开体积的、所述的精制 的全唾液提取物，所述的体积均不超过大约2ml。
6. 权利要求1所述的方法，所述的水蛭为菲牛蛭。
7. -种建立水蛭的冻干的全唾液提取物的方法，其中所述的提取物具有改善的稳定 性，所述的方法包含： 向水蛭提供取食刺刺激剂； 诱导所述的水蛭反刍，所述的诱导包含将所述的水蛭放置在温度范围为大约_5°C至大 约15 °C的环境中； 在所述的冷却的水蛭的反刍中，收集未精制的全唾液； 由所述的未精制的全唾液移出固体成分，从而建立精制的全唾液；以及 冻干分开体积的、所述的精制的全唾液提取物，所述的体积均不超过大约2ml。
8. 权利要求7所述的方法，其中所述的收集包含挤压所述的水蛭，从而增加所收集的 未精制的全唾液的量。
9. 权利要求7所述的方法，其进一步包含通过将所述的水蛭在温度范围为大约5°C至 大约40°C的水浴中温暖来使所述的水蛭复苏。
10. 权利要求7所述的方法，所述的水蛭为菲牛蛭。
11. 一种水蛭的稳定的冻干的全唾液提取物，其包含： 体积均不超过大约2ml的冻干的、精制的全唾液提取物，该提取物是通过由未精制的 全唾液移出固体成分而精制的，从而建立所述的精制的全唾液； 其中当所述的提取物在低于大约_20°C的温度下储存以用于使用时，其具有稳定的活 性，所述的提取物在至少6个月内保持所述的活性的至少70%。
12. 权利要求11所述的提取物，所述的水蛭为菲牛蛭。
13. -种药物配制物，其包含权利要求11所述的提取物以及药物可接受的载体。
14. 一种治疗实体肿瘤的方法，其包含向受试对象给药有效量的权利要求11所述的提 取物。
15. -种治疗液体肿瘤的方法，其包含向受试对象给药有效量的权利要求11所述的提 取物。
16. -种治疗糖尿病的方法，其包含向受试对象给药有效量的权利要求11所述的提取 物。
17. -种治疗病毒疾病的方法，其包含向受试对象给药有效量的权利要求11所述的提 取物。
18. -种治疗寄生虫疾病的方法，其包含向受试对象给药有效量的权利要求11所述的 提取物。
19. 一种给予抗氧化剂治疗的方法，其包含向受试对象给药有效量的权利要求11所述 的提取物。
20. -种治疗抗细菌疾病的方法，其包含向受试对象给药有效量的权利要求11所述的 提取物。
【专利摘要】本发明提供了用于分离和使用水蛭全唾液提取物的方法。该方法可以包含：向水蛭提供取食刺刺激剂；诱导所述的水蛭反刍，所述的诱导包含将所述的水蛭放置在温度低于大约0℃的环境中；以及在所述的冷却的水蛭的反刍中，收集未精制的全唾液。所述的方法可以包含通过将所述的水蛭在温度范围为大约5℃至大约40℃下温暖来使所述的水蛭复苏。此外，还提供了水蛭的稳定的冻干的全唾液提取物，当所述的提取物在低于大约-20℃的温度下储存以用于使用时，其具有稳定的活性，所述的提取物在至少6个月内保持所述的活性的至少70％。所述的提取物可以用于治疗实例肿瘤、治疗液体肿瘤、治疗糖尿病、治疗病毒疾病、治疗寄生虫疾病、治疗抗细菌疾病或者起到抗氧化剂的作用。
【IPC分类】A61K9-19, C07K1-14, A01K67-033, A61K35-62
【公开号】CN104837495
【申请号】CN201380048148
【发明人】A·梅尔祖克, A·M·加维, A·M·阿卜杜尔卡德, M·阿拉马
【申请人】比奥佩普解决方案有限公司
【公开日】2015年8月12日
【申请日】2013年9月17日
【公告号】CA2882533A1, EP2895178A2, US8501241, US8685462, US8784896, US8790711, US8932642, US8962034, US9005667, US9017732, US9144587, US20140079798, US20140079799, US20140079800, US20140356448, US20140363518, US20150086645, US20150099006, US20150182562, US20150196607, WO2014049447A2, WO2014049447A3