N-甲基5-羟色胺和相关物质用于治疗/减少绝经期相关热潮红的发生的制作方法
【专利说明】N-甲基5-羟色胺和相关物质用于治疗/减少绝经期相关热潮红的发生
[0001]发明简述
[0002]本发明涉及N-甲基5-羟色胺葡糖苷(“匪S-葡糖苷”)和/或N-甲基5-羟色胺(WS)或其它WS前体在治疗、预防或改善绝经期相关热潮红(也被称为潮热)中的用途。匪S-葡糖苷可获自植物来源，例如Zanthoxylum piperitum种子或种子提取物。本发明还涉及多种植物提取物(包括黑升麻)的用途，其已经用以下的至少一种加强:N-甲基5-羟色胺(“NMS”)、NMS_ 葡糖苷、Zanthoxylum piperitum 种子、含 NMS-葡糖苷的 Zanthoxylumpiperitum种子提取物、其它匪S前体或其混合物。
[0003]发明背景
[0004]黑升麻(被称为Actaea racemos 和 Cimicifuga ramcemosa 二者)提取物含有许多未被完全了解的营养物。尽管如此，基于它减轻绝经期相关热潮红并改善情绪的传闻和有限的临床证据，人类已经使用黑升麻达几个世纪。黑升麻中的一种营养物N-甲基5-羟色胺(^S)令人关注，因为关于这种成分的现有数据为以下主张提供了一些支持，艮P，某些黑升麻提取物可有益于改善热潮红。参见，例如，Powell等人2008J.Agric.FoodChem.56:11718。
[0005]5-羟色胺(5-HT)受体参与体温调节(特别是5-HT7异构体；图1A)，且人类中的临床试验表明:选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRI)有效治疗热潮红的症状。这些发现证明:5_羟色胺信号传导在体温调节中有一些重要性。有趣的是，相较于其它5-HT受体，NMS优先结合5-肌7受体；且它激活5-HT7受体的亲和力(EC5tl= 22nM ;图1B)等价于5-羟色胺自身的亲和力。然而，单一黑升麻剂量中可能的匪S浓度(80mg黑升麻提取物中?30ppm)仅能递送2.4 μ g WS。在60-kg人类女性中，该剂量大致转化为最高0.18nM的浓度。该NMR浓度对结合5-HT7足够高，但它可能不足以独立地对5-HT 7(图1B)或5-HT转运体(SERT ；图1C)产生功能性作用。因为黑升麻提取的效率在生产批次之间可不同，所以该剂量问题可为临床研宄中利用黑升麻时观察到的混合结果提供一些解释。此外，黑升麻提取物被标准化为黄肉楠碱含量，而非NMS。
[0006]减轻绝经期症状所需的匪S剂量很可能高于黑升麻所能提供的剂量，因此，本领域需要能用于改善绝经期症状(例如热潮红)的匪S天然来源。
[0007]发明详述
[0008]依照本发明，已发现:Zanthoxylum piperitum(通常被称为日本辣椒)种子(包括其成熟种子)含有WS前体N-甲基5-羟色胺5-0-β-葡糖苷(“WS-葡糖苷”)，其以充足的浓度存在并以充足的效率被代谢以提供有效量的匪S用于改善绝经期症状，包括热潮红/潮热。因此，本发明的一方面是日本辣椒种子或含有匪S-葡糖苷的日本辣椒种子提取物在食品补充剂或营养品中用于控制绝经期症状的用途。
[0009]因此:
[0010]a)日本辣椒种子或者含有NMS或NMS-葡糖苷的日本辣椒种子提取物或者其混合物；或者
[0011]b) NMS-葡糖苷
[0012]c)含有WS或匪S-葡糖苷的其它植物来源或其混合物
[0013]d)无论何种来源的能够被代谢成WS的其它WS前体
[0014]可以以有效量单独或以混合物使用以减轻绝经期症状(包括热潮红)，或者可与匪S组合使用以使所述组合为改善热潮红的有效量。
[0015]可用于本发明中的匪S可以是植物制品(例如提取物)的一部分。一种潜在来源是黑升麻，但日本辣椒由于已知较高浓度的NMS前体而成为优选的来源。或者，可使用无论何种来源的合成WS。
[0016]因此，本发明还提供
[0017]a)无论何种物种的任何植物提取物，其含有最低有效剂量的WS、WS前体；或其混合物；
[0018]b)包含最低有效剂量的匪S或匪S前体的组合物的用途，无论匪S是否来源于植物提取物；
[0019]c)植物提取物的用途，所述植物提取物天然含有WS或WS前体，但低于有效剂量，其中已加入额外的NMS或前体以使NMS或前体的总量达到有效量；
[0020]d)上述的组合；
[0021]e)任意上述a-d与有益于控制绝经期、围绝经期和/或绝经后期症状的其它成分的组合的用途。
[0022]本发明还提供预防、治疗、改善和/或降低绝经期、围绝经期和/或绝经后期症状的严重性或发生的方法，所述方法包括:
[0023]施用有效量的成分至经历所述症状的女性或绝经期、围绝经期和/或绝经后期的女性，所述成分选自:NMS_葡糖苷、NMS、Zanthoxylum piperitum种子、包含NMS-葡糖苷的Zanthoxylum piperitum种子提取物、草酸匪S、匪S氢氯化物、匪S 二氢氯化物；和其混合物。
[0024]本发明还涉及植物提取物(优选地黑升麻和日本辣椒)的混合物，其共同含有有效量的至少一种选自以下的活性成分:NMS、NMS前体或其混合物。
[0025]本发明的另一方面是食品补充剂或营养品，其中有效对抗绝经期症状的唯一活性成分是WS、WS前体或其混合物。
[0026]日本辣椒Zanthoxylum piperitum含有为黑升麻多50倍的NMS (以其前体形式，例如匪S-葡糖苷)，其也可被用作本发明的一部分。因此，Zanthoxylum可作为匪S的可行替代来源。
[0027]本发明的另一方面是匪S、匪S-葡糖苷或其它匪S前体(单独地或以混合物)作为营养品或药物组合物中针对热潮红的唯一成分的用途。
[0028]还考虑了 Zanthoxylum提取物与葛藤和大豆提取物，或染料木黄酮组合的用途。
[0029]定义
[0030]当在本文中使用时，应用下述定义:
[0031]“NMS前体”是吸收后转变成WS的化合物。该定义中包括的具体化合物为:草酸WS、匪S氢氯化物、匪S 二氢氯化物和匪S葡糖苷。“其它匪S前体”指的是除了匪S-葡糖苷之外的匪S前体。
[0032]“预防”并非旨在保证所有可能的热潮红不发生。相反，它被用来表示经历热潮红的风险降低，发病率降低，严重性减轻，且/或一般而言的与它们有关的不适得到改善。它还可被用于表示:经历热潮红之间的时间间隔增加。
[0033]“围绝经期”是绝经期(停止月经期至少12个月)之前的一段时间，其具有一个或更多个如下特征:雌激素水平不均衡地上升/下降、月经周期不排卵、经历绝经期症状(例如热潮红、睡眠问题、情绪变化、骨质疏松或阴道干燥)但仍然经历月经周期。这通常出现在40多岁女性中。
[0034]“绝经期”是女性不再有月经期的点。卵巢已经停止产生卵以及产生大部分其雌激素。当女性已连续12个月无月经期时，即诊断为“绝经期”。
[0035]“绝经后期”:绝经期之后的时间。当女性已一整年无月经期时，她被认为处于绝经后期。
[0036]附图简述
[0037]图1.N-甲基5-羟色胺(^S)可通过5-HT7受体减轻热潮红并可通过抑制5_羟色胺摄取改善情绪。A)在野生型(WT)动物中，当5-HT7受体被激活时，其降低体温；但在5-111'7敲除(KO)动物中，5-HT7激动剂不降低体温(Hedlund等人，2004)。B) NMS最大程度激活5-HT7受体出现在50-100nM且EC 50为?22nM。C)匪S最大程度抑制5-羟色胺再摄取转运体出现在1-10M且IC5tl为?500nM(亲和力比百忧解(Prozac)低100倍；Powell等人，2008)。
[0038]图2.评估膳食匪S对绝经期动物模型中的热潮红和情绪相关行为的影响的研宄设计。使动物经受手术诱导的绝经期(卵巢切除术；0VX)并饲喂含不同水平匪S的膳食。然后，检测动物在开放场地的活动活性、在高架十字迷宫(elevated plus maze)上的焦虑状行为和在游泳试验中的抑郁状行为。然后利用静脉内(1.v.)降钙素基因相关肽(CGRP)诱导热潮红并监测皮肤温度。CGRP挑战后2小时，收集组织。缩略语:s.c.，皮下；st.，直身体重换算(straight body weight convers1n) ;BSA，体表面积换算；BC 540，黑升麻商业剂量；cAMP，环腺苷单磷酸；Vmax，酶反应的最大速度；SERT，5-羟色胺转运体；IC5tl，最高半抑制浓度；Imax，最高抑制浓度。
[0039]图3.在实验诱导的热潮红期间，皮肤温度的代表性原始数据和基线-校正数据。未接受膳食处理的动物(Oug/kg/d ^S)具有最高基础温度和超过它们的计算基线的最高CGRP反应。通过其膳食接受0.48或18.5ug/kg/dNMS的动物展示出比未经处理的对照更低的基础温度和更低的CGRP反应。接受皮下雌二醇且不接受膳食匪S的动物(正对照)具有最低的基础温度和最低的CGRP反应。
[0040]图4.膳食WS降低了基线皮肤温度并减弱了 CGRP诱导的热潮红反应。与未经处理的对照相比，接受18.5ug/kg/d匪S的组具有降低的基础皮肤温度。当利用重复测量ANOVA分析基线校正数据并利用单向ANOVA分析曲线下面积时，检测到匪S对热潮红反应的类似效果。将不具有与其相关的日内(within-day)对照的处理组从分析中除去。统计参数在图中。误差线代表平均数标准误差(SEM)。在Tukey’ s事后检验中，不共有共同字母的处理彼此具有显著性差异(P〈0.05)。
[0041]图5.N-甲基5-羟色胺(NMS)提高了去卵巢雌性大鼠中的循环(血浆)雌二醇水平，这暗示:WS调节17 β -雌二醇的非