卵巢合成和/或分泌。Α)膳食补充WS以剂量依赖性方式增加血浆雌二醇。补充雌二醇的动物具有最高水平的血浆雌二醇。B)日内对照数据。将补充雌二醇组(较高)和未补充雌二醇组(较低)的ANOVA参数插入每幅图中。在Tukey事后检验中，不共有共同字母的处理彼此具有显著性差异(p〈0.05)。误差线代表SEM0
[0042]图6.在切除卵巢雌性大鼠中，膳食匪S未改变体重且未使子宫增重(uterotrophic) ο A)补充匪S组和对照膳食组之间无平均体重差异；与所有其它组相比，在整个实验过程中，植入(implant)雌二醇的动物具有显著降低的体重。B和C)当贯穿研宄或在研宄结束时检验时，作为原始重量百分比的重量变化在膳食处理组之间无差异，例外是植入雌二醇的动物。D)补充80天后，匪S未改变子宫重量；与切除卵巢对照和所有补充匪S的组相比，植入雌二醇的动物具有显著较高的子宫重量。在适当情况下，通过重复测量ANOVA或单向ANOVA判定组之间的显著性差异(p〈0.05)，随后进行Tukey事后检验(***，P<0.0ODo当检测到显著的主效果时，将ANOVA参数插入每幅图中。误差线代表SEM。
[0043]图7.膳食匪S未改变切除卵巢雌性大鼠中的情绪行为测量。A)在强迫游泳试验(FST ;总试验时间为600s)的第二阶段期间，植入雌二醇的动物不动的时间较少(抗抑郁状行为)。B)在FST的第二阶段期间，攀爬时间在组之间无显著差异。C)在开放场地(用于焦虑状行为和运动的试验)，在30分钟的试验期间，在场地(arena)中行进的总距离在组之间无差异。D)在高架十字迷宫中(用于焦虑状行为的试验)所有组中的总探索行为都低，且在开放臂花费的时间(镇静行为)在组之间无差异。通过单向ANOVA和随后的Tukey’s事后检验(*，P<0.05)判定组之间的显著性差异(p〈0.05)。当检测到显著的主效果时，将ANOVA参数插入各图中。误差线代表SEM。
[0044]图8.用于评估来自碾磨的Zanthoxylum种子的膳食匪S-葡糖苷对绝经期动物模型中的热潮红和情绪相关行为的影响的随访研宄设计。如第一研宄(图2)，使动物经受手术诱导的绝经期(卵巢切除术；0VX)。在该第二研宄中，饲喂一些动物重复2次剂量匪S的膳食，同时饲喂其它动物碾磨的Zanthoxylum种子以提供等效剂量的匪S-葡糖苷。然后，检验动物在开放场地的运动活性、在高架十字迷宫上的焦虑状行为和在游泳试验中的抑郁状行为。然后利用静脉内(1.v.)降钙素基因相关肽(CGRP)诱导热潮红并监测皮肤温度。CGRP挑战后2小时，收集组织。
[0045]图9.来自碾磨的Zanthoxylum种子的膳食匪S-葡糖苷以类似于雌二醇和匪S的方式减弱了 CGRP诱导的热潮红反应。A)重复测量ANOVA检测到:接受Zanthoxylum种子的动物具有降低的热潮红反应，其与未经处理的对照显著不同，但等效于给予雌二醇或等效剂量的化学合成草酸匪S的动物。B)当利用单向ANOVA分析曲线下面积时，检测到了对热潮红反应的类似效果。统计参数在图中。误差线代表平均数标准误差(SEM)。在Tukey’ s事后检验中，不共有共同字母的处理彼此具有显著性差异(P〈0.05)。
[0046]图10.类似于第一研宄，随访研宄证明:Zanthoxylum种子和匪S未改变情绪行为测量。在A)开放场地(用于焦虑状行为和运动的试验)、B)高架十字迷宫(用于焦虑状行为的试验)或C)强迫游泳试验(用于抑郁状行为的试验)中，未检测到显著处理效果。误差线代表SEM。
[0047]图11.来自Zanthoxylum种子的膳食匪S-葡糖苷未使切除卵巢雌性大鼠的子宫增重，但可已改变体重。A)类似于第一研宄，Zanthoxylum种子和匪S未改变子宫重量，但正如预期，接受雌二醇的动物具有比切除卵巢对照和所有其它组显著更高的子宫重量。B)经过一段时间，作为原始重量百分比的重量变化在对照和补充辣椒组或补充匪S组之间存在差异。与所有其它组相比，在实验过程中，植入雌二醇的动物具有显著较低的体重。C)然而，如同第一研宄，当在研宄结束时检验时，作为原始重量百分比的总重量变化在膳食处理之间无差异，例外是植入雌二醇的动物。在适当情况下，通过重复测量ANOVA或单向ANOVA判定组之间的显著性差异(p〈0.05)。在Tukey’s事后检验中，不共有共同字母的处理彼此具有显著性差异(p〈0.05)。为了简化的目的，将ANOVA参数从⑶和(C)中去除。误差线代表SEM。
[0048]此处报告的研宄聚焦于膳食匪S和匪S-葡糖苷对绝经期动物模型中的热潮红反应和情绪相关行为的影响。如图2和图8中的研宄设计所示，使动物经受手术诱导的绝经期并饲喂含不同水平WS或WS-葡糖苷的膳食。我们检验了被补充动物在开放场地的运动活性、在高架十字迷宫上的焦虑状行为和在游泳试验中的抑郁状行为。然后，我们实验诱导了热潮红反应并监测动物的皮肤温度变化。这项工作的总体目标是为WS或WS-葡糖苷作为膳食补充剂用于绝经期女性，或经历绝经期症状的围绝经期或绝经后期阶段的女性、或期望降低经历所述症状的风险的女性提供支持数据。
[0049]匪S、匪S-葡糖苷或其它匪S前体的植物来源
[0050]可用作匪S、匪S-葡糖苷和/或其它匪S前体的来源的植物包括！Zanthoxylum物种，例如 Z.piperitum、Z.simulans、Z.bungeanum、Z.schinifolium、Z.nitidum、Z.rhetsa、Z.alatum、Z.acanthopodium 和 / 或 Z.americanum。优选的来源是 Z.piperitum.。
[0051]此外，还已知柑橘类植物含有匪S前体，因此也可以使用Citrus bergamia(佛手柑)、梓檬、橙子、橘子(mandarin orange)、番石植蜜柑(chinotto)、香橡。柑橘类植物中的化合物可发现于叶子、皮、内果皮和种子中。
[0052]也可以使用Collema 属的地衣，包括 C.cristatum、C.callopismum、C.flaccidum和 C.fuscovirens0
[0053]可通过简单地挤压、研磨或粉化来制备种子以供使用。可根据本领域众所周知的方法制造提取物，例如，通过(an)利用溶剂(例如甲醇、乙醇、乙酸乙酯、二乙醚、正己烷、二氯甲烷)，或利用超临界流体(例如二氧化碳(纯净的或与其它溶剂例如醇混合)或氧化二氮提取；(b)水蒸馏以获得精油；或(C)利用热气(例如氮气)提取/蒸馏。
[0054]根据本发明的种子的摄取不同于仅仅作为香料或调味品(例如许多亚洲或受亚洲影响的(Asian-1nspired)食物菜肴中所使用的)的种子的摄取，因为本发明考虑在缺乏伴随(accompanying)食物的情况下使用匪S-葡糖苷。因此，本发明明确排除与食物混合的WS-葡糖苷或WS-葡糖苷前体(例如在加香料的餐食或小吃中)的摄取。
[0055]剂量
[0056]成年人的每日剂量中需要存在的NMS “有效剂量”为至少5微克至225毫克、优选地50微克至100毫克；更优选地100微克至75毫克。或者，有效剂量为每天至少5、10、25、50、100、200、250、500、750、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000 或 4500 微克。或者，所述量为每天至少500微克，且优选地更高。
[0057]对于日本辣椒种子，“有效剂量”为每天50-20000mg种子；优选地每天约80-2500mg种子或更高。
[0058]对于匪S-葡糖苷，成年人的每日剂量中应该存在的“有效剂量”为至少5微克至225毫克、优选地50微克至100毫克；更优选地100微克至75毫克。或者，有效剂量为每天至少 5、10、25、50、100、200、250、500、750、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000或5500微克。或者，所述量为每天至少600微克，且优选地更高。
[0059]对于其它WS-前体，有效量将被计算为产生有效量的WS (如上所述)所需前体的量。
[0060]可使用带有质谱检测的液相色谱证实WS和WS-葡糖苷的含量。可执行类似于Yanase等人，2010中的提取方法。
[0061]可以单次剂量或可在一整天中以多次较小剂量(例如每天2次、每天3次)或以另一种方便的剂量方案摄取如前所述的活性成分的每日剂量。推荐定期消耗，即持续至少一周，优选地持续至少一个月，更优选地持续能够被称为“长期”的时间段，即长于一个月的持续时间。
[0062]制剂
[0063]根据本发明的膳食补充剂和营养品组合物可以是任何适于施用至人类的草本制剂(galenic)形式，尤其是任何通常用于经口施用的形式，例如，固体形式，例如片剂、丸剂、颗粒、糖衣丸、胶囊和泡腾制剂(例如粉末和片剂)，或液体形式，例如溶液、乳剂或悬浮液例如饮料、糊剂和油质悬浮液。可将糊剂封装在硬壳或软壳胶囊中，其中所述胶囊的特点为:例如(鱼、猪、家禽、奶牛)明胶、植物蛋白或木质磺酸盐的基质。其它应用形式的实例是用于经皮、肠胃外或可注射施用的形式。膳食补充剂和营养品组合物的形式可以为控释(缓释)制剂。
[0064]根据本发明的膳食和营养品组合物还可含有保护性水胶体(例如树胶、蛋白质、改性淀粉)、粘合剂、成膜剂、包封剂/材料、壁/壳材料、基质化合物、包衣、乳化剂、表面活化剂、增溶剂(油、脂肪、錯、卵磷脂等)、吸附剂、载剂、填充剂、共-化合物(co-compound)、分散剂、润湿剂、加工助剂(溶剂)、流化剂、掩味剂、增重剂、成胶剂(jellyfying agent)、凝胶形成剂、抗氧化剂和抗微生物剂。
[0065]提供下列非限制性实施例以更好阐释本发明。
实施例
[0066]方法
[0067]动物达到约60天龄，在整个研宄期间对其