有机化合物的制作方法
【专利说明】
[0001] 相关申请的交叉引用
[0002] 本申请要求于2012年1月16日提交的美国临时申请No. 61/587, 030的优先权， 其内容以引用方式整体并入。
[0003] 本发明在来自美国国立卫生研宄院的批准No. HL19278、U54CA143930和MH083257 的资助下进行。美国政府具有本发明的某些权利。
技术领域
[0004] 本发明涉及可用于抑制或减少血小板沉积、粘附和/或聚集的化合物和组合物。 本发明还涉及药物洗脱支架和治疗或预防血栓形成性病症的方法，所述血栓形成性病症包 括中风、心肌梗死、不稳定型心绞痛、在血管成形术或支架置入后的急性闭塞、由外周血管 外科手术诱导的血栓形成、或由心房纤颤或炎症引起的外周血管疾病或血栓形成性病症。
【背景技术】
[0005] 在血管损伤位点处的血小板聚集是介导原发性止血堵塞和病理性血栓形成二者 形成的动态过程。已详细研宄了血小板表面蛋白在流动条件下引导血小板聚集成血栓的机 制。除了引导起始血小板粘附之外、细胞表面受体相互作用活化胞内信号传导。胞内信号 传导刺激血栓形成性物质从血小板颗粒释放。信号传导还介导血小板整合素 a IIbe 3的 活化，血小板整合素 a IIbf3 3促进血小板在损伤位点处牢固粘附。
[0006] 动脉血栓形成介导冠状动脉疾病、脑血管疾病和外周血管疾病中的组织梗塞，因 此是美国患病率和死亡率的单一最常见原因。血小板是动脉血栓形成的关键介体。因此， 鉴定抑制血小板功能的化合物对于医学具有重要意义。
[0007] 血小板形成身体的原发性止血方式，因此，已发展处探查脉管系统的内皮完整性 缺陷的精细的机制。该机制涉及响应于内皮下基质、剪切力、邻近血小板、肾上腺轴以及可 溶性拟蛋白、核苷酸和脂质信号的能力。尽管这种生理活化剂众多，但是血小板仅具有主要 功能输出的一小部分功能。在活化时，血小板变化形状、聚集且分泌其粒状内含物。血小板 活化的过程涉及由功能上完整的静息血小板专有的活性的表达，包括例如，ATP释放、5-羟 色胺释放、溶酶体释放、α颗粒释放、密集颗粒释放，以及活化血小板的标记物[包括但不 限于P-选择素和活化aIIbf3 3(GPIIb/IIIa)受体]的细胞表面表达。而且，血小板活化 导致血小板彼此聚集，以及与非血小板周围细胞附接。血小板的粒状内含物供应另外的粘 附分子、生长因子、凝血酶和在血栓形成过程和治愈过程起始中有帮助的其它特化分子。
[0008] 除了冠状动脉疾病/心肌梗死、脑血管疾病和外周血管疾病之外，与不适当的血 小板活性和动脉血栓形成相关的疾病和病症还包括，例如稳定型和不稳定型心绞痛、短暂 性脑缺血发作、胎盘功能不全、继外科手术（例如主动脉冠状动脉的搭桥手术、血管成形术 和支架置入，以及心脏瓣膜置换术）之后的不期望的血栓形成、或继心房纤颤之后的血栓 形成。血小板活性的抑制剂可以为这些疾病或病症的每一种提供治疗性和预防性益处。还 可能的是，不恰当的血小板活化在静脉血栓形成中起作用，以使血小板抑制剂可用于治疗 或预防与此类血栓形成相关的病症。
[0009] 在血小板活化与炎症，尤其过敏性炎症（例如在哮喘中）和在动脉粥样硬化损害 的位点处的炎症之间的发生联系。因此，抑制血小板活化的化合物还可以用于治疗或预防 涉及炎症的病症。
[0010]目前存在许多靶向血小板功能的市售试剂。例如，阿司匹林是相对弱的血小板抑 制剂。然而，阿司匹林可在敏感个体中导致威胁生命的过敏反应。
[0011] 另一血小板抑制剂是噻氯匹定（Ticlid. TM.、Roche Pharmaceuticals)。因为其需 要生产有效的活性代谢物，所以噻氯匹定的作用延迟24~48小时。药物还可以导致血栓形 成性血小板减少性紫癜以及威胁生命的白血球减少症、恶心、腹痛、消化不良、腹泻和皮瘆。
[0012] 氯P比格雷（Plavix. TM.，Bristol-Meyers Squibb/Sanofi Pharmaceuticals)是需 要为其疗效产生活性代谢物的另一血小板抑制剂。因此，氯吡格雷为其效应还具有至少数 小时的延迟。氯吡格雷还可以导致血栓形成性血小板减少紫癜。药物还已经与许多副作用 相关，所述副作用包括皮瘆、水肿、高血压、高胆固醇血症、恶心、腹痛、消化不良、腹泻、泌尿 道感染、肝酶升高和关节痛。
[0013] 普拉格雷和替格瑞洛已被批准为用作血小板抑制剂的P2Y12抑制剂，但是与氯吡 格雷类似，观察到大出血，包括非致命的以及致命的出血。
[0014] 血小板抑制剂阿昔单抗（c7E3Fab、Reopro?，制造商-Centocor B. V.，经销商-Eli Lilly and Co.)仅可用于胃肠外形式。药物可导致重度血小板减少。除非给予血小板输注， 否则其抗血小板作用持续数天，因此，在威胁生命的动脉闭塞的情况下（例如，在心肌梗死 的情况下的紧急心脏手术）可使有时需要的手术复杂化。
[0015] 口服抗_a IIbf3 3剂拉米非班、西拉非班、奥波非班和珍米洛非班仅有有限临床 经验，它们均未被批准用于人类使用。类似地，磷酸二酯酶抑制剂西洛他唑、曲匹地尔和三 氟柳的临床经验是有限的。磷酸二酯酶抑制剂双嘧达莫具有更多的临床经验，但其活性相 对较弱，所以除非与阿司匹林组合，它不经常被使用。
[0016] 本领域需要另外的血小板粘附和聚集抑制剂，用于治疗和预防疾病或与血小板粘 附和聚集异常相关的病症。
[0017] 已知整合素 a IIb β 3为在人血小板表面上的受体。由于异二聚体复合物由a IIb 和β 3亚单位二者组成，二聚体负责结合粘附性血浆蛋白，最为显著的是纤维蛋白原和血 管假性血友病因子（vWF)。通过a IIbf33的纤维蛋白原、vWF和其它配体的结合主要通 过肽识别序列Arg-Gly-Asp (RGD)或纤维蛋白原γ链十二肽HHLGGAKQAGDV介导。认为 a IIb^ 3的构象变化在配体与受体结合时发生，导致配体诱导的结合位点（LIBS)的暴露， 如通过LIBS-特异性单克隆抗体（mAb)检测的。与不同R(K)⑶样配体复合的整合素的电 子显微术和晶体结构支持以下理论：整合素在配体结合之后或期间经受主要的构象变化。
[0018] 目前存在两种小分子a IIbf3 3抑制剂：环状高精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸肽（埃 替非巴肽）和RGD拟肽类（替罗非班）。两种抑制剂通过竞争性阻断纤维蛋白原的结合位 点起作用。尽管两种化合物已表明显著性临床益处，但是替罗非班（Aggrastat. TM. ,Merck and Co.，Inc.)仅可用于胃肠外形式，并且可导致血小板减少、眩晕和血管迷走神经反应。 埃替非巴肽（Integrilin. TM.，COR Therapeutics, Inc.，Key Pharmaceuticals Inc.)也仅 可用于胃肠外给药，并且其也可以导致血小板减少和低血压。a IIb β 3上部的晶体结构研 宄表明这些抑制剂结合a IIb和β 3亚单位的金属离子依赖性粘附位点（MIDAS)中的二价 阳离子二者。据信与MIDAS金属离子的相互作用诱导β 3的构象变化，这导致在a IIb^ 3 抑制剂疗法后血栓形成性并发症的风险增加。
【发明内容】
[0019] 之前，我们科学家已鉴定能够在不诱导一种或更多种整合素 f3 3LIBS-特异性单 克隆抗体（mAb)的结合的情况下抑制纤维蛋白原结合和血小板聚集的a IIb β 3抑制剂。在 美国专利申请 No. 12/514,286(U.S.公布 No. 2010/0150913,现为 U.S.专利 No. 8, 173,661) 和PCT/US11/44267中公开了这些抑制剂，其各自的内容通过引用整体并入本文。我们科 学家目前已鉴定更多的能够在不诱导整合素 β 3LIBS的结合的情况下抑制纤维蛋白原结 合和血小板聚集的a IIbf3 3抑制剂。本发明因此提供a IIbf3 3拮抗剂、药物组合物、包含 a IIb β 3拮抗剂的药物洗脱支架以及使用a IIb β 3拮抗剂进行治疗和预防的新方法。
[0020] 在第一方面，本发明提供呈游离形式或盐形式的化学式P的化合物：
[0021]
[0022]其中：
[0023] i) A为碳或氮；
[0024] ii) B为碳或氣，前提条件是当B为氣时，1?3不存在；
[0025] iii) R2SH或卤素（例如氟）；
[0026] iv) Ra、Ra'、Rb、Rb'、Rc、R d、R/、&和 R e' 为 H ;
[0027] v) R3和R4独立地为氢、卤素（例如溴）、(ν4烃基（例如甲基、乙基、乙烯基（-CH = CH2)、丙烯基（-C(CH) = CH2)或异丙基）、卤代Cp4烃基（例如CF 3)、羟基-Cp4烃基（-C(H) (OH) CH3或-CH2(OH))或乙酰基，前体条件是当A和B均为碳时，RjPR4不同时为氢。
[0028] 在另一个实施方式中，化学式P的化合物为呈游离形式或盐形式的化学式I的化 合物：
[0029]
[0030] 其中：
[0031] vi)R2SH;
[0032] vii)Ra、Ra'、Rb、Rb'、R c、Rd、Rd'、RjPRe' 为Η;
[0033] viii) R3和R4独立地为氢、卤素（例如溴）、C η烃基（例如甲基、乙基、乙烯基（-CH =CH2)、丙烯基（-C (CH) = CH2)或异丙基）、卤代Cp4烃基（例如CF3)、羟基-Cg烃基（-C (H) (OH)CH3)或乙酰基，前体条件是馬和R4不同时为氢。
[0034] 在第一方面的另一其它实施方式中，本发明提供如下呈游离形式或盐形式的化学 式P和化学式I的化合物：
[0035] I. 1.化学式P或化学式I的化合物，其中馬和R 4独立地为卤素（例如溴）；
[0036] 1. 2.化学式P或化学式I、或I. 1的化合物，其中馬和R4独立地为溴；
[0037] L 3.化学式P或化学式I的化合物，其中馬和R 4独立地为C η烃基（例如甲基、 乙基、乙烯基（-CH = CH2)、丙烯基（-C(CH) = CH2)或异丙基）；
[0038] 1.4.化学式P或化学式I、或1.3的化合物，其中RjPR 4独立地为甲基；
[0039] 1. 5.化学式P或化学式I、或1. 3的化合物，其中馬和R 4独立地为乙基；
[0040] 1. 6.化学式P或化学式I、或1. 3的化合物，其中馬和1?4独立地为乙烯基（-CH = CH2)；
[0041] 1.7.化学式P或化学式I、或1.3的化合物，其中馬和1?4独立地为丙烯基（-C(CH) =CH 2);
[0042] 1. 8.化学式P或化学式I、或1. 3的化合物，其中馬和R4独立地为异丙基；
[0043] 1.9.化学式P或化学式I、或1.3的化合物，其中RjPR4独立地为卤代C η烃基 (例如CF3);
[0044] 1. 10.化学式P或化学式I、或1. 3的化合物，其中馬和R 4独立地为羟基-C η烃 基（2-羟乙基）或乙酰基；
[0045] 1. 11.化学式P或化学式I、或1. 3的化合物，其中馬和R 4独立地为2-羟乙基；
[0046] 1. 12.化学式P或化学式I、或1. 3的化合物，其中馬和R4独立地为乙酰基；
[0047] 1. 13.化学式P或化学式I的化合物，其中馬或R4为氢，而另一 R取代基为卤素 (例如溴）、Ci_4烃基（例如甲基、乙基、乙烯基（-CH = CH2)、丙烯基（-C(CH) = CH2)或异丙 基）、卤代CV4烃基（例如CF 3)、羟基-CV4烃基（-C (H) (OH) CH 3)或乙酰基；
[0048] 1. 14.化学式P或化学式I或者1. 13的化合物，其中馬或R4为氢，而另一 R取代 基如化学式I. 1~I. 13的任一个中所述；
[0049] 1. 15.化学式P或式1. 13或1. 14的化合物，其中R3为氢；
[0050] 1.16.化学式P或化学式I或者式1.13、1.14或1.15中的一个的化合物，其中R3 为氢，并且&为C H烃基；
[0051] 1. 17.化学式P或化学式I或者式1. 13~1. 16的任一个的化合物，其中R3为氢， 并且&为甲基；
[0052] 1. 18.化学式P或化学式I或者式1. 13~1. 16的任一个的化合物，其中R3为氢， 并且&为乙基；
[0053] 1. 19.化学式P或化学式I或者式1. 13或1. 14的任一个的化合物，其中R4为氢， 并且R3为卤素（例如溴）Xh烃基（例如甲基、乙基、乙烯基（-CH = CH2)、丙烯基（-C(CH) =CH2)或异丙基）、卤代Cp4烃基（例如CF 3)、羟基-Cp4烃基（-C (H) (OH) CH 3)或乙酰基；
[0054] 1.20.化学式P或化学式I或者式1.13、1.14或1.19的任一个的化合物，其中R4 为氢，并且R3如式I. 1~1. 12的任一个中所述；
[0055] 1.21.化学式P或化学式I或者式1.13、1.14或1.19的任一个的化合物，其中R4 为氢，并且馬为C η烃基；
[0056] 1.22.化学式P或化学式I或者式1. 13、1. 14、1. 19或1.20的任一个的化合物，其 中R4为氢，并且R 3为甲基；
[0057] 1.23.化学式P或化学式I或者式1. 13、1. 14、1. 19或1.20的任一个的化合物，其 中R4为氢，并且R 3为乙基；
[0058] 1. 24.化学式P或化学式I或者式1. 3的化合物，其中馬和R 4为C ^烃基；
[0059] 1. 25.化学式P或式1. 24的化合物，其中&为甲基；
[0060] 1. 26.化学式P或式1. 24的化合物，其中&为乙基；
[0061] 1.27.化学式P或式1.24、1.25或1.26的化合物，其中馬为甲基；
[0062] 1. 28.化学式P或者式I. 1~1. 27的任一个的化合物，其中A为碳或氮；
[0063] 1. 29.化学式P或者式I. 1~1. 28的任一个的化合物，其中A为碳；
[0064] 1. 30.化学式P或者式I. 1~1. 28的任一个的化合物，其中A为氮；
[0065] 1.31.化学式P或者式I. 1~1.29的任一个的化合物，其中B为碳或氮，前提条件 是当B为氣时，1?3不存在；
[0066] 1. 32.化学式P或式I. 1~1. 29的任一个的化合物，其中B为碳；
[0067] 1.33.化学式P或式I. 1~1.29的任一个的化合物，其中，B为氮，且馬不存在； 1.34.化学式P或者式1.1~1.14、1.19、1.25~1.33的任一个的化合物，其中馬为-CH 2(OH)；
[0068] 1. 35.化学式P、或式I. 1~1. 34的任一个的化合物，其中馬为H ;
[0069] 1. 36.化学式P、或式I. 1~1. 34的任一个的化合物，其中R2为卤素（例如氟）；
[0070] 1. 37.化学式P的化合物，其中：
[0071] i)A 为氮；
[0072] ii)B 为碳；
[0073] iii) R2SH或卤素（例如氟）；
[0074] iv) Ra、Ra'、Rb、Rb'、Rc、R d、R/、&和 R e' 为 H ;
[0075] v) RjPR4独立地为氢、卤素（例如溴）、C η烃基（例