一种龙血树叶提取物及其制备方法、其药物组合物、制剂与应用_2

文档序号:9280580阅读:来源:国知局
. Chen的干燥叶为原料制备得到,所述的龙血树叶提取物总黄酮含量多I. 0%,并不得检出 鞣质、树脂和草酸盐。
[0022] 所述的龙血树叶采收时间为每年的7~9月。
[0023] 本发明所述的龙血树叶提取物的制备方法,其特征在于包括以下步骤: A、 将原料龙血树叶粉碎过筛,加入重量比10~15倍的磷酸氢二钠水溶液,于10~30°C浸 泡30~120min,20~30°C超声提取4~5h,过滤得到提取液; B、 提取液中滴加盐酸搅拌中和并调节pH值至3~5,10~30 °C静置沉降8~48h,真空抽滤, 过滤物水洗至抽滤的滤出液pH为6. 5~7. 5,抽干; C、 在B步骤抽干后的过滤物中加入重量比30~40倍的乙醇溶液于60~70°C下萃取2~4 次,合并萃取液,加入萃取液重量百分比〇. 1~〇. 5%的针用活性炭,加热至沸后静置降温至 30~40°C,用0. 45 μ m的微孔薄膜过滤得到滤液; D、 将滤液干燥得到目标物龙血树叶提取物。
[0024] A步骤中所述的粉碎过筛为粉碎过40~60目筛。
[0025] A步骤中所述的磷酸氢二钠水溶液的质量体积浓度为15~25%。
[0026] A步骤中所述的超声提取的频率为20kHz ~800K Hz。
[0027] B步骤中所述的盐酸的体积浓度为10%。
[0028] C步骤中所述的乙醇的体积浓度为70~80%。
[0029] D步骤中所述的干燥是于50~60°C真空喷粉干燥。
[0030] 本发明所述的龙血树叶提取物的制剂,是在所述的龙血树叶提取物中加入药学上 可以接受的辅料制备成片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、注射液、冻干粉针、贴剂、膏剂、 巴布剂、酊剂、搽剂、喷雾剂或气雾剂。
[0031] 本发明所述制剂为口服制剂、注射用制剂和外用制剂,所述的口服制剂包括片 剂、胶囊、颗粒剂、丸剂和滴丸剂等,所述的注射用制剂包括注射液和冻干粉针等,所述的 外用制剂包括贴剂、膏剂、巴布剂、酊剂、搽剂、喷雾剂和气雾剂等。
[0032] 本发明的应用为所述的龙血树叶提取物在制备防治骨质疏松和/或降血糖药物 中的应用。
[0033] 下面以实施例对本发明做进一步说明: 实施例1龙血树叶提取物1的制备 药材基源与采收时间:本实验所用龙血树叶系海南龙血树Dracaena cambodiana Pierre ex Gagnep.的干燥树叶,产地为云南孟连。于2014年8月份采摘,于日光下自然晒 干。
[0034] 制备方法: 干燥的龙血树叶经拣选后,用粉碎机粉碎,过50目筛,称取上述树叶粗粉10kg,加入 100 kg的20%磷酸氢二钠水溶液,室温静置浸润30分钟以上,于20-25Γ条件下连续超声 提取5h。
[0035] 上述提取液用型号为2815的丙纶单丝滤布过滤,滤液收集后,滴加10%盐酸搅拌 中和并调节PH至3,室温静置沉降8h以上,真空抽滤,过滤物反复水洗、抽滤至滤出液呈中 性,抽干,得过滤物0. 95 kg。
[0036] 上述抽干后的过滤物0. 95 kg,用28. 5 kg的浓度为70%的乙醇加热至65-70°C 萃取三次,合并萃取液,加入液体重量0. 1%的针用活性炭,加热至沸后静置降温至30°C,用 0. 45 μ m微孔薄膜过滤。
[0037] 收集上述微孔薄膜过滤后的滤液,于50-55Γ真空喷粉干燥,即得龙血树叶提取物 0. 52 kg,提取物得率5. 2% (按粗粉投量计)。
[0038] 实施例2龙血树叶提取物2的制备 药材基源与采收时间:本实验所用龙血树叶系剑叶龙血树Dracaena cochinchinensis (Lour.) S. C. Chen的干燥树叶,产地为云南普洱。于2014年7月份采摘,于日光下自然 晒干。
[0039] 制备方法: 干燥的龙血树叶经拣选后,用粉碎机粉碎,过50目筛。称取上述树叶粗粉30kg,加入 450 kg的20%磷酸氢二钠水溶液,室温静置浸润30分钟以上,于25-30°C条件下连续超声 提取4h。
[0040] 上述提取液用型号为2815的丙纶单丝滤布过滤,滤液收集后,滴加10%盐酸搅拌 中和并调节PH至5,室温静置沉降8h以上,真空抽滤,过滤物反复水洗、抽滤至滤出液呈中 性,抽干,得过滤物2. 67 kg。
[0041] 上述抽干后的过滤物2. 67 kg,用106. 8 kg的浓度为80%的乙醇加热至60-65°C 萃取三次,合并萃取液,加入液体重量0. 5%的针用活性炭,加热至沸后静置降温至40°C,用 0. 45 μ m微孔薄膜过滤。
[0042] 收集上述微孔薄膜过滤后的滤液,于55_60°C真空喷粉干燥,即得龙血树叶提取物 1. 48 kg,提取物得率4. 9% (按粗粉投量计)。
[0043] 实施例3龙血树叶提取物的质量检测 1、供试样品: 龙血树叶提取物1 :按本发明实施例1制备; 龙血树叶提取物2 :按本发明实施例2制备。
[0044] 2、实验仪器与试剂 UV-2700紫外分光光度计(日本岛津公司);AB204-N型电子天平(瑞士 Mettler公司)。 芦丁对照品,由中国生物制品检验所提供;其他试剂均为分析纯,水为去离子水。
[0045] 3、实验方法 3. 1总黄酮含量的测定 对照品溶液的制备:精密称取在120°C减压干燥至恒重的芦丁对照品适量,加60%乙醇 制成每1ml含0.1 mg的溶液,即得。
[0046] 供试品溶液的制备:精密量称取供试样品10mg,置50ml量瓶中,加60%乙醇稀释 至刻度,摇勾,即得。
[0047] 测定法:精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5ml,分别置IOml量瓶中,各加入5% 亚硝酸钠溶液〇. 3ml,摇匀,放置6分钟。分别加入10%硝酸铝溶液0. 3ml,摇匀,放置6分 钟,再加入lmol/L氢氧化钠溶液4ml,用60%乙醇稀释至刻度,摇匀,放置10分钟。同时取 供试品溶液5ml,加60%乙醇稀释至10ml,作为空白。照分光光度法(中国药典2010年版一 部附录V B),在505nm波长处测定吸收度,减去校正,计算,即得。本品总黄酮含量以无水 芦丁(C27H 31A6)计,结果见表1。
[0048] 3. 2鞣质的检查 取供试样品I mg,加新配制的含1%鸡蛋清的生理盐水5ml,混匀后,放置10分钟。若 出现浑浊或沉淀,则表示有鞣质检出;反之,则表示无鞣质检出。
[0049] 3. 3树脂的检查 取供试样品5 mg,加氯仿10ml,振摇提取,分取氯仿液,蒸干,残渣加冰醋酸2ml使溶 解,置具塞试管中,加水3ml,混匀,放置30分钟。若有絮状物析出,表示有树脂检出;反之 ,则表示无树脂检出。
[0050] 3. 4草酸盐的检查 取供试样品2 mg,依《中国药典》2010年版一部附录IX S法检查。若出现浑浊或沉淀, 则表示有草酸盐检出;反之,则表示无草酸盐检出。
[0051] 4.实验结果 本发明龙血树叶提取物的质量检测结果见表1。
[0052] 表1本发明龙血树叶提取物的质量检测结果
实施例4龙血树叶提取物的降血糖作用实验 1、供试样品: 龙血树叶提取物1 :按本发明实施例1制备; 龙血树叶提取物2 :按本发明实施例2制备。
[0053] 2、实验动物 昆明种小鼠,体重19-21g,昆明医科大学实验动物中心提供。
[0054] 3、实验方法 健康昆明种小鼠 50只,雌雄各半,体重19-21g,随机分为5组:正常对照组、模型 组、二甲双胍对照组(l〇〇mg/kg)、龙血树叶提取物1组(100mg/kg)、龙血树叶提取物2组 (100mg/kg)。除正常对照组外,其余小鼠尾静脉注射四氧啼啶(100mg/kg),72h后测定血清 葡萄糖水平。二甲双胍对照组、龙血树叶提取物1组、龙血树叶提取
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