物2组每天灌胃给药1 次，正常对照组、模型组给予等体积蒸馏水，连续7天。于末次给药后lh，从小鼠眼眶静脉 丛取血，离心取血清后用试剂盒测定血糖水平。结果见表2。
[0055] 4.实验结果 供试药物对糖尿病小鼠的降血糖作用实验结果见表2。
[0056] 表2 供试药物对糖尿病小鼠的降血糖作用实验结果（X土s，n=10)
上述实验表明，龙血树叶提取物1和龙血树叶提取物2均具有明显的降血糖作用。
[0057] 实施例5 龙血树叶提取物的抗骨质疏松作用实验 1、供试样品： 龙血树叶提取物1 :按本发明实施例1制备； 龙血树叶提取物2 :按本发明实施例2制备。
[0058] 2、实验方法 取处于对数生长期的SD大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs)，用0.25%胰蛋白酶消化 后配成50000个/mL的单细胞悬液。以每孔100 μ L体积将细胞接种于96孔板，置37 °C， 5%C02、95%湿度的培养箱培养。待细胞生长至70%融合后弃去培养基，重新加入含有不同浓 度龙血树叶提取物的新鲜培养液IOOy L，每个孔设6个平行孔，并设置不加药的细胞对 照孔和溶剂空白对照孔。药物作用72h后，每孔加入10 μ L新鲜配制的MTT染液（10g/L)， 于37°C培养箱继续培养8h，弃去上层液，每孔加入100 μ L的DMS0,低速震荡15min，用酶标 仪于492nm波长处测定各孔吸光度（A)。按下面公式计算龙血树叶提取物作用下的细胞增 殖率：细胞增殖率（％) =(药物作用孔A值一细胞对照孔A值)/(细胞对照孔A值一溶 剂空白对照孔A值）X 100%。实验结果见表3。
[0059] 3、实验结果 供试药物对SD大鼠 BMSCs增殖率的影响见表3。
[0060] 表3 供试药物对SD大鼠 BMSCs增殖率的影响（X土s，n=6)
骨髓间充质干细胞（BMSCs)是一种多能干细胞，能够分化成成骨细胞并反映测试药 物对骨质疏松症的治疗效果。上述实验表明，龙血树叶提取物1和龙血树叶提取物2均对 SD大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs)的增殖具有明显促进作用，并呈现一定的量效关系，提 示它们对骨质疏松症具有治疗作用。
[0061] 实施例6 药物组合物 本发明实施例1制备的龙血树叶提取物 12% 赖氨酸 15% 淀粉 51% 微晶纤维素 15% 硬脂酸镁 7% 粉碎后过筛，混合即得。
[0062] 实施例7 药物组合物 本发明实施例2制备的龙血树叶提取物 30% 精氨酸 70% 粉碎后过筛，混合即得。
[0063] 实施例8药物组合物 本发明实施例2制备的龙血树叶提取物 8% 淀粉 52% 微晶纤维素 27% 羧甲基淀粉钠 13% 粉碎后过筛，混合即得。
[0064] 实施例9 片剂 本发明实施例1制备的龙血树叶提取物 8% 淀粉 52% 微晶纤维素 27% 羧甲基淀粉钠 13% 将本发明实施例1制备的龙血树叶提取物、淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠混合后于 压片机上压片，即得。
[0065] 实施例10 胶囊 本发明实施例2制备的龙血树叶提取物 12% 赖氨酸 15% 淀粉 51% 微晶纤维素 15% 硬脂酸镁 7% 将本发明实施例2制备的龙血树叶提取物、赖氨酸、淀粉、微晶纤维素和硬脂酸镁，混 合后填充入硬明胶胶囊中，即得。
[0066] 实施例11注射液 本发明实施例1制备的龙血树叶提取物 3% 精氨酸 7% 注射用水 90% 将本发明实施例2制备的龙血树叶提取物加精氨酸及适量注射用水，搅拌均匀，加入 〇. 1 %针用活性碳，吸附，过滤脱碳，补加注射用水至规定量，微孔过滤膜过滤，按5mL/支灌 封，KKTC湿热灭菌30min，经灯检合格，即得。
[0067] 实施例12 冻干粉针剂 本发明实施例1制备的龙血树叶提取物 6% 精氨酸 14% 乙醇 12% 甘露醇 14. 5 % 注射用水 53.5% 将本发明实施例2制备的龙血树叶提取物加精氨酸、乙醇搅拌溶解，加甘露醇及适量 注射用水，搅拌均匀，加入0. 1 %针用活性碳，吸附，过滤脱碳，补加注射用水至规定量，微孔 过滤膜过滤，按3mL/支分装，冷冻干燥，封装，经检验合格，即得。
【主权项】
1. 一种龙血树叶提取物，其特征在于所述的龙血树叶提取物是以百合科龙血树属 植物海南龙血树 Dracaena cambodiana Pierreex Gagnep.或剑叶龙血树 Dracaena cochinchinensis ( Lour. ) S. C. Chen的干燥叶为原料制备得到，所述的龙血树叶提取 物总黄酮含量多1. 〇%，并不得检出鞣质、树脂和草酸盐。2. 根据权利要求1所述的龙血树叶提取物，其特征在于所述的龙血树叶采收时间为每 年的7~9月。3. -种权利要求1或2所述的龙血树叶提取物的制备方法，其特征在于包括以下步 骤： A、 将原料龙血树叶粉碎过筛，加入重量比10~15倍的磷酸氢二钠水溶液，于10~30°C浸 泡30~120min，20~30°C超声提取4~5h，过滤得到提取液； B、 提取液中滴加盐酸搅拌中和并调节pH值至3~5，10~30 °C静置沉降8~48h，真空抽滤， 过滤物水洗至抽滤的滤出液pH为6. 5~7. 5,抽干； C、 在B步骤抽干后的过滤物中加入重量比30~40倍的乙醇溶液于60~70°C下萃取2~4 次，合并萃取液，加入萃取液重量百分比〇. 1~〇. 5%的针用活性炭，加热至沸后静置降温至 30~40°C，用0. 45 y m的微孔薄膜过滤得到滤液； D、 将滤液干燥得到目标物龙血树叶提取物。4. 根据权利要求3所述的龙血树叶提取物的制备方法，其特征在于A步骤中所述的磷 酸氢二钠水溶液的质量体积浓度为15~25%;所述的超声提取的频率为20kHz ~800kHz。5. 根据权利要求3所述的龙血树叶提取物的制备方法，其特征在于B步骤中所述的盐 酸的体积浓度为10%。6. 根据权利要求3所述的龙血树叶提取物的制备方法，其特征在于C步骤中所述的乙 醇的体积浓度为70~80%。7. 根据权利要求3所述的龙血树叶提取物的制备方法，其特征在于D步骤中所述的干 燥是于50~60°C真空喷粉干燥。8. -种以权利要求1或2所述的龙血树叶提取物为活性成分的药物组合物，其特征在 于是由含有治疗有效量的所述龙血树叶提取物及药学上可接受的其他药物活性成分或药 用辅料组成。9. 一种权利要求1或2所述龙血树叶提取物的制剂，其特征在于是在所述的龙血树叶 提取物中加入药学上可以接受的辅料制备成片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、注射液、 冻干粉针、贴剂、膏剂、巴布剂、酊剂、搽剂、喷雾剂或气雾剂。10. -种权利要求1或2所述的龙血树叶提取物的应用，其特征在于所述的龙血树叶提 取物在制备防治骨质疏松和/或降血糖药物中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种龙血树叶提取物及其制备方法、其药物组合物、制剂与应用。所述的龙血树叶提取物是以百合科龙血树属植物海南龙血树Dracaena？cambodiana？Pierreex？Gagnep.或剑叶龙血树Dracaena？cochinchinensis(Lour.)S.C.Chen的干燥叶为原料制备得到，所述的龙血树叶提取物总黄酮含量≥1.0%，并不得检出鞣质、树脂和草酸盐。本发明制备得到的龙血树叶提取物具有防治骨质疏松和降血糖的显著效果，在临床上有广阔的应用前景。本发明提供的龙血树叶提取物的制备方法具有原料易得，操作简单，经济环保，产品质量稳定可控的优点，适合于产业化规模生产。
【IPC分类】A61P19/10, A61K36/896, A61P3/10
【公开号】CN104998022
【申请号】CN201510385431
【发明人】周荣光, 杨兆祥, 赵加强
【申请人】昆药集团股份有限公司
【公开日】2015年10月28日
【申请日】2015年7月4日