用于递送活性剂的可溶解的形成凝胶的膜的制作方法
【专利说明】用于递送活性剂的可溶解的形成凝胶的膜 相关申请的交叉引用
[0001] 本申请要求2013年3月15日递交的美国临时申请号61/790, 132的权益，其内容 通过引用引入本说明书。 发明背景 A.技术领域
[0002] 本发明一般性涉及对用于治疗创伤有用的可溶解的、形成凝胶的膜的方法和组合 物，所述膜一旦溶解时给所述创伤部位释放活性酶。 B.【背景技术】 相关技术的说明
[0003] 创伤中的焦痂和其它坏死组织的存在会阻碍愈合过程，引起创伤变成缓慢愈合或 "慢性"创伤。糖尿病足溃疡、静脉腿溃疡、动脉腿溃疡、褥疮溃疡、郁积溃疡、皮肤溃疡、烧伤 和压力溃疡是这样的创伤的例子。
[0004] 酶法创伤清创剂可以被用于消化焦痂和其它坏死组织，从而促进创伤的愈合过 程。这样的酶法创伤清创剂是能够消化焦痂和其它坏死组织的酶。优选蛋白质水解酶，因为 焦痂创伤通常含有多样性的蛋白质。但是，在市售产品中难以维持这样的酶的稳定性。因 为蛋白质水解酶能够自我分解，将它们以维持所述酶的活性和稳定性的方式递送至所述创 伤部位是困难的。此外，目前用于将清除剂提供给创伤部位的方法没有均匀地将所述清除 剂递送至整个受感染的区域。
[0005] 因此，仍然有以下解决方案的需要：所述方案有效平衡酶的活性和酶的稳定性，并 且在要被治疗的区域上提供所述酶的均匀递送。
【发明内容】
[0006] 本发明人提供用于递送活性剂（诸如用于治疗创伤的那些活性剂）的可溶解的、 形成凝胶的膜。如本文所述，所述膜为固体和不可流动的，但是一旦接触水或其它水性介 质（例如缓冲液或盐溶液或来自所述创伤自身的它水性介质）能够溶解形成保留在所述创 伤上的水凝胶。该膜解决了以下问题：（1)在给酶的功能提供最佳条件的制剂中平衡酶的 活性和稳定性以及（2)半固体产品的非均匀性递送，导致不佳的剂量控制。通过举例的方 式，本发明提供了包含水可溶性醚、亲水性流变学改性剂和蛋白质水解酶（例如嗜热菌蛋 白酶）的可溶解的、形成凝胶的膜。这样的组合物可以很容易地作为干燥膜被施加于创伤， 所述干燥膜然后用水或其它水性介质溶解形成水凝胶并且将所述酶和/或其它药物以活 性形式均匀地释放到创伤区域。
[0007] 在一些方面，本发明公开了可溶解的、形成凝胶的膜，其包含：水溶性纤维素醚； 亲水性流变学改性剂；以及蛋白质水解酶，其中所述可溶解的、形成凝胶的膜具有小于 15% (重量/重量）的含水量，并且当其与水或其它水性介质接触时所述可溶解的、形成 凝胶的膜能够形成水凝胶。在整个说明书中提供了纤维素醚的非限制性例子。这样的例 子包括羟烷基纤维素醚（例如羟乙基纤维素、羟丙基纤维素或羟丙基甲基纤维素或其任意 组合或所有所述的纤维素醚）。在一些方面，所述纤维素醚可以是非离子纤维素醚。所述 膜内的水溶性纤维素醚或亲水性流变学改性剂的量可以根据需要变化以获得在所述膜水 合时所形成的水凝胶中特定的粘度。当所述膜具有小于15% (重量/重量）的含水量时， 其被认为是"干燥的"或"脱水的"。例如，所述膜可以具有〇、1%、2%、3%、4%、5%、6%、 7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%或14%(重量/重量）或者可以由其推出的任意百分 比的含水量。在某些实施方案中，由所述膜被溶解于水或其它水性介质中得到的水凝胶具 有1，000-100,OOOcps的粘度，所述粘度为使用BrookfieldRV型粘度计、使用具有#SC4-14 的转子（spindle)和#S(34_6R的室（chamber)的小样品适配器在室温下于10rpm读取1 分钟测得。例如，由所述膜被溶解于水或其它水性介质中得到的水凝胶可以具有1，〇〇〇、 5, 000、10, 000、15, 000、20, 000、25, 000、30, 000、35, 000、40, 000、45, 000、50, 000、55, 000、 60, 000、65, 000、70, 000、75, 000、80, 000、85, 000、90, 000、95, 000 或 100,OOOcps的粘度或 其可以由其推出的任意粘度，其为使用BrookfieldRV型粘度计、使用具有#SC4-14的转子 (spindle)和#S(34-6R的室（chamber)的小样品适配器在室温下于10rpm读取1分钟测得。
[0008] 所述可溶解的、形成凝胶的膜可以含有由本领域普通技术人员为了期望的效果而 选择的任意蛋白质水解酶。蛋白质水解酶的某些、非限制性的例子包括嗜热菌蛋白酶、胶原 酶和木瓜蛋白酶。在特定实施方案中，所述蛋白质水解酶为嗜热菌蛋白酶。在某些实施方 案中，所述蛋白质水解酶为结晶形式。
[0009] 可以基于所期望的用途调整所述膜的厚度。例如，所述膜的厚度可以在从 10-1000ym的范围内。在特定实施方案中，所述膜的厚度为10、20、30、40、50、60、70、80、 90、100、150、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950 或 100ym，或可以由其推出的任意厚度。
[0010] 当与水或其它水性介质接触时，所述可溶解的、形成凝胶的膜能够形成水凝胶。例 如，所述膜可以能够以0.l-l〇〇mg/min的速率溶解于水和其它水性介质。在一些实施方案 中，所述膜能够以 〇?l、〇. 2、0. 3、0. 4、0. 5、0. 6、0. 7、0. 8、0. 9、1、5、10、15、20、25、30、35、40、 45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或10011^/111111的速率，或可以由其推出的任意速率 溶解于水或其它水性介质。在某些实施方案中，所述可溶解的、形成凝胶的膜可以能够以 0. 5-10mg/min的速率溶解于水和其它水性介质。例如，所述膜能够以0. 5、1. 0、1. 5、2. 0、 2. 5、3. 0、3. 5、4. 0、4. 5、5. 0、5. 5、6. 0、6. 5、7. 0、7. 5、8. 0、8. 5、9. 0、9. 5、或 10.Omg/min的速 率，或可以由其推出的任意速率溶解于水或其它水性介质。
[0011] 所述可溶解的、形成凝胶的膜可以含有本领域普通技术人员为获得期望的结果而 选择的任意重量百分比的蛋白质水解酶。在一些实施方案中，所述重量百分比不低于所述 膜干重的0.1%并且当其存储于室温（定义为20°C -25°c) 24个月时减少不超过10%。在 一些实施方案中，所述膜可以含有结晶形式的蛋白质水解酶。
[0012] 所述可溶解的、形成凝胶的膜可以包含本领域普通技术人员为获得期望的结果而 选择的任意百分比的水溶性纤维素醚或其组合。在一些方面，所述膜包含50-70% (重量/ 重量）或55-65% (重量/重量）的水溶性纤维素醚或其组合。例如，所述膜可以包含50、 51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69或70%或可以由其推出 的任意百分比（重量/重量）的水溶性纤维素醚或水溶性纤维素醚组合。例如，在一些实 施方案中，所述膜包含25-35 % (重量/重量）的羟乙基纤维素和25-35 % (重量/重量） 的羟丙基甲基纤维素。
[0013]所述可溶解的、形成凝胶的膜可以包含本领域普通技术人员获得期望的结果选择 的任意百分比的亲水性流变学改性剂。在一些方面，所述膜包含15-25% (重量/重量）的 所述亲水性流变学改性剂。亲水性流变学改性剂的非限制性例子包括多元醇（例如聚乙二 醇（PEG))、甘油和丙二醇。在某些实施方案中，所述多元醇为聚乙二醇（PEG)。在一些实施 方案中，所述聚乙二醇为PEG-400或PEG-600。
[0014]所述可溶解的、形成凝胶的膜可以包含任意百分比的蛋白质水解酶。例如，所述膜 可以包含5-15% (重量/重量）的所述蛋白质水解酶。在一些方面，所述膜包含5、6、7、8、 9、10、11、12、13、14或15%或可以由其推出的任意百分比（重量/重量）的所述蛋白质水 解酶。在一些实施方案中，所述膜可以包含结晶形式的蛋白质水解酶。
[0015]在一些实施方案中，所述可溶解的、形成凝胶的膜包括金属盐。例如，所述金属盐 可以是氯化钠或氯化钙或其混合物。所述膜还可以包括防腐剂，例如对羟基苯甲酸甲酯、对 羟基苯甲酸丙酯或苯氧乙醇或其混合物。在某些实施方案中，所述膜是无菌的。
[0016]在某些方面，所述可溶解的、形成凝胶的膜如下进行生产：(a)获得包含3-7% (重 量/重量）的纤维醚或其组合、1-3 % (重量/重量）的亲水性流变学改性剂和Tris缓冲 液（10mM，pH= 7. 5)的第一混合物；(b)获得包含蛋白质水解酶、金属盐和Tris缓冲液 (10mM，pH= 7. 5)的第二混合物；（c)将所述第一和第二混合物混合在一起以获得水凝胶； 以及（d)干燥来自步骤（c)的所述水凝胶以获得所述可溶解的、形成凝胶的膜。以这种方 式所生产的这样的膜可以含有本文所述的任意蛋白质水解酶（例如嗜热菌蛋白酶、胶原酶 和木瓜蛋白酶）。在某些方面，这样的膜包括嗜热菌蛋白酶。
[0017]本发明还公开了治疗或清除创伤的方法，其包括给需要清除的创伤局部施用任意 的本文所公开的可溶解的、形成凝胶的膜。这样的创伤可以是慢性创伤。可以从本发明所 公开的组合物和方法受益的慢性创伤的非