限制性的例子包括糖尿病足溃疡、静脉腿溃疡、 动脉腿溃疡、褥疮溃疡、郁积溃疡、皮肤溃疡、烧伤或压力溃疡。所清除的创伤可以包括坏死 组织，例如焦痂。
[0018]在本发明所公开的方法中，水和其它水性介质可以在所述可溶解的、形成凝胶的 膜被施加至所述创伤之前被施加至所述创伤。在一些方面，水和其它水性介质在所述膜被 施加至所述创伤之后被施加至所述可溶解的、形成凝胶的膜。在一些实施方案中，水或其它 水性介质可以在施用所述可溶解的、形成凝胶的膜之前被施加至所述创伤，并且水或其它 水性介质也可以在所述膜被施加至所述创伤之后被施加至所述可溶解的、形成凝胶的膜。 在这些情况的每种情况下，水或者其它水性介质将接触所述膜并引起所述水凝胶的形成。 可以有用的水性介质的一个例子是盐水溶液。此外，在一些方面，绷带、创伤敷料或纱布可 以在所述膜被施加至所述创伤之后被施加至所述可溶解的、形成凝胶的膜上。
[0019] 术语"室温"定义为20°C-25°C。
[0020] 术语"大约（about) "或"大致（approximately) "被定义为如本领域普通技术人 员所理解的接近，并且在一个非限制性的实施方案中，所述术语定义成在10 %内，优选5 % 内，更优选1%内以及最优选〇. 5%内。
[0021]术语"抑制（inhibiting) "、"减少（reducing) "、"治疗（treating) " 或这些术语 的任意变化包括任何可测量的降低或完全抑制而获得期望的结果。例如，在某些实施方案 中，"治疗"指创伤上焦痂中的减少。类似地，术语"有效的"是指足以实现期望的、预期的或 想要的结果。
[0022] 当其与术语"包含"结合使用时，词"a"或"an"的使用可以是指"一个（one) "，但 它也与"一个或更多"、"至少一个"和"一个或大于一个"的意思一致。
[0023]词"包含（comprising) "（以及包含的任何形式，如"comprise"和"comprises"）、 "具有（having) "（以及具有的任何形式，如"have"和"has"）、"包括（including) "（以及 包括的任何形式，如"includes"和"include"）或"含有（containing)"（以及含有的任何 形式，如"contains"和"contain"）是包含式的（inclusive)或开放式的并且不排除另外 的、没有记载的元素（element)或方法步骤。
[0024] 用于其用途的组合物和方法可以"包含"整个说明书所公开的任何成分或步骤、 "基本上由整个说明书所公开的任何成分或步骤组成"或"由整个说明书所公开的任何成分 或步骤组成"。至于过渡短语"基本上由......组成"，在一个非限制性的方面，在本说明书 中所公开的组合物和方法的基本和新的特征包括所述膜的稳定蛋白质水解酶并向创伤部 位提供所述活性蛋白质水解酶的均匀递送的能力。
[0025] 本发明考虑了在本说明书中所讨论的任何实施方案能够针对本发明的任意方法 或组合物进行实施，并且反之亦然。此外，本发明的组合物可以被用于获得本发明的方法。
[0026] 通过以下详细说明，本发明的其它目的、特征和优点将变得明显。但是，应当理解 的是尽管表示了本发明的具体实施方案，所述详细说明和具体的实施例仅以举例说明的方 式给出，因为通过该详细说明，本发明的精神和范围内的各种改变和修饰对于本领域技术 人员来说将变得明显。
【附图说明】
[0027] 图1.显示本发明的干燥膜产品的应用，所述产品然后溶解形成凝胶。
[0028] 图2.显示由溶解的膜所形成的凝胶的物理外观的照片。对已被倒置的实验室试 管内的溶解的膜进行拍照。溶解成更粘的凝胶的膜更可能留在创面（woundbed)中。
[0029]图3.使用由使用胶原或弹性蛋白所制备的人工焦痂进行体外清除实验。含有嗜 热菌蛋白酶的膜与嗜热菌蛋白酶凝胶和菠萝蛋白酶凝胶进行比较。所述膜和所述嗜热菌蛋 白酶凝胶均比所述菠萝蛋白酶凝胶更有效地消化胶原和弹性蛋白，所述菠萝蛋白酶凝胶含 有10%的菠萝蛋白酶。
[0030]图4.使用由使用纤维蛋白所制备的人工焦痂进行体外清除实验。含有嗜热菌蛋 白酶的膜与嗜热菌蛋白酶凝胶和菠萝蛋白酶凝胶进行比较。所述膜和所述嗜热菌蛋白酶凝 胶均比所述菠萝蛋白酶凝胶更有效地消化纤维蛋白，所述菠萝蛋白酶凝胶含有10 %的菠萝 蛋白酶。
[0031] 图5.用于将所述膜施加至创伤的一个程序图解说明。第一，用盐水弄湿所述创 伤。第二，将所述膜施加至被弄湿的创伤。在所述膜被施加至所述创伤之后，用盐水弄湿所 述膜。然后，将预先用盐水浸泡的不粘创伤的敷料施加至所述膜的顶上。然后用例如医用 敷料和胶带（tape)固定所述敷料。
[0032] 图6.猪体内研究嗜热菌蛋白酶膜和凝胶、木瓜蛋白酶-尿素膏和SANTYL?胶原 酶膏的清创效力。
【具体实施方式】
[0033] 有效的创伤清洁和清除有助于愈合过程。在创面中存在的失去活力的组织是不期 望的一一其作为细菌生长的贮器、含有水平升高的炎症介质，其促进所述创伤部位的慢性 炎症并损伤细胞迀移。用于清除创伤的四个最常见的方法包括手术、自我分解、酶法和机械 清除。
[0034] 至于酶法清除，目前SANTY丨，胶原酶膏是在美国市场上唯一批准的清除药物产 品。该产品是利用胶原酶作为清除剂的疏水膏。当其他人试图使用不同的清除剂和各种制 剂的同时，所面对的问题包括缺乏稳定性和缺乏均匀性递送。这些与清除剂相关的问题限 制了其有效用于清除创伤。
[0035] 本发明人提供用于递送活性剂（诸如用于治疗创伤的那些活性剂）的可溶解的、 形成凝胶的膜。该膜解决了以下问题：（1)在给酶的功能提供最佳条件的制剂中平衡酶的 活性和稳定性以及（2)半固体产品的非均匀性递送，导致不佳的剂量控制。通过举例的方 式，本发明提供了包含水可溶性醚、亲水性流变学改性剂和蛋白质水解酶（例如嗜热菌蛋 白酶）的可溶解的、形成凝胶的膜。这样的组合物可以很容易地作为干燥膜被施加于创伤， 所述干燥膜然后溶解形成水凝胶并且均匀地和以活性形式将所述酶和/或其它药物释放 到创伤区域。 膜
[0036] 本发明的组合物被配制为膜。特别地，本发明提供了含有结晶状态的活性酶的脱 水的膜。一旦溶解，形成水凝胶，并且所述酶变得有活性并从所形成的水凝胶释放。 1.蛋白质水解酶
[0037] 蛋白质水解酶可有效用于本发明所公开的方法和组合物，特别是用于涉及创伤治 疗的应用。有用的蛋白质水解酶包括嗜热菌蛋白酶、胶原酶、木瓜蛋白酶和其它蛋白酶。
[0038] 嗜热菌蛋白酶是热稳定的金属蛋白酶，其在疏水性残基亮氨酸、苯丙氨酸、缬氨 酸、异亮氨酸、丙氨酸和甲硫氨酸的N-末端进行裂解。最佳消化温度范围是30_85°C。嗜 热菌蛋白酶活性的最佳pH为pH5. 0-8. 5。该酶有若干市售来源。一个这样的来源是由 Promega公司（Madison,Wisconsin(USA))出售的冻干的嗜热菌蛋白酶。另一种冻干的嗜热 菌蛋白酶产品是由Sigma-Aldrich(St.Louis,Missouri(USA))出售的。来自这两种产品的 嗜热菌蛋白酶获取自嗜热解H元芽孢杆菌（Bacillusthermoproteolyticusrokko)。另一个 嗜热菌蛋白酶的制造商和供应商是AmanoEnzyme,Inc.，Japan。嗜热菌蛋白酶的CAS号为 9073-78-3。
[0039] 胶原酶是源自细菌溶组织梭菌（Clostridiumhistolyticum)的金属蛋白酶。 它对消化胶原特别有用。在溶组织梭菌（C.histolyticum)中发现了两个胶原酶基因， colG和colH。二者可以一起起作用来分解胶原底物。所述胶原酶的最佳pH为6-9， 并且与其它蛋白酶相比它通常稳定。目前在美国市场上的胶原酶产品是由Healthpoint Biopharmaceuticals生产的。
[0040] 木瓜蛋白酶是另一种广泛使用的蛋白酶，其获取自木瓜树。与嗜热菌蛋白酶和胶 原酶不同，木瓜蛋白酶是半胱氨酸蛋白酶。它是一种非特异性蛋白酶，其能够消化许多种蛋 白质。与嗜热菌蛋白酶或胶原酶相比它更不稳定，并且预计木瓜蛋白酶的自我分解降解是 显著的。木瓜蛋白酶能够在广泛的pH条件范围内发挥功能，其最佳pH为6。尽管历史上木 瓜蛋白酶被用于创伤清除，但是在美国没有批准的、可市售获得的木瓜蛋白酶产品。 2. 纤维素醚
[0041] 纤维素醚是高分子量化合物，其能够通过将纤维素的葡萄糖单位中的羟基的氢 原子用烷基、羟烷基或羧烷基取代而得到。烷基纤维素醚的非限制性的例子包括甲基纤 维素（MC)、乙基纤维素（EC)和乙基甲基纤维素（EMC)。羟烷基纤维素醚的非限制性的例 子包括羟乙基纤维素（HEC)、羟丙基纤维素（HPC)、羟甲基纤维素（HMC)、羟丙基甲基纤维 素（HPMC)、乙基羟基乙基纤维素（EHEC)、羟乙基甲基纤维素（HEMC)、甲基羟乙基纤维素 (MHEC)、甲基羟丙基纤维素（MHPC)和羟乙基羧甲基纤维素（HECMC)。羧烷基纤维素醚的非 限制性的例子包括羧甲基纤维素（CMC)和羧甲基羟乙基纤维素（CMHEC)。在一些特定方面， 所述纤维素醚可以是非离子纤维素醚。与嗜热菌蛋白酶类似，这些纤维素醚的每一个都有 范围广泛的市售来源（例如，DowChemicalCompany(USA)、Ashland(USA)、Samsung