一种刺五加提取物的制备方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及一种中药提取物制备方法，具体涉及一种刺五加提取物的制备方法。
【背景技术】
[0002] 刺五加（Acanthopanaxsenticosus)为五加科植物，其干燥根和莖具有舒筋活血、 益气健脾及补肾安神的药用功效。现代中医药制剂学中将刺五加经提取加工制成注射液， 主要功效为平补肝肾，益精壮骨，用于治疗肝肾不足所致的短暂性脑缺血发作，脑动脉硬 化，脑血栓形成及脑栓塞等病症；同时也用于治疗冠心病，心绞痛合并神经衰弱和更年期综 合症等。
[0003] 刺五加中的主要活性成分为黄酮、皂苷类及多糖，苷类含量最高的是刺五加苷 B(紫丁香苷）和刺五加苷E，也含有多种氨基酸、脂肪酸、维生素及矿物质。近年来，有较多 关于刺五加活性物质提取分离的技术研究被报道或推广应用，主要目的是提高刺五加中总 黄酮、紫丁香苷及刺五加苷E的含量或纯度，降低其杂质成分的含量，以提高刺五加制剂的 有效性、稳定性及用药安全性。
[0004] 如中国专利申请CN101084953A-种制备刺五加提取液/物的方法；CN101810656A 一种刺五加提取物及其药物组合物；CN102579532A-种刺五加组合物、含其制剂及其检测 方法等，均是以水溶液提取刺五加药材，再经过醇沉或大孔树脂过滤等方法制备刺五加提 取物。这些现有技术方法中均存在提取速率缓慢，提取周期长，有效成分提取率低，溶剂使 用量大，导致后处理过程复杂，相应产生的的杂质增加，不经增加了生产成本，还大大影响 了刺五加提取物在药物制剂中的质量，不利于产业化生产和刺五加制剂的药用安全。
【发明内容】
[0005] 为了解决上述现有技术中存在的问题，本发明提供一种提取速率快、有效成分提 取率高的刺五加提取物制备方法。
[0006] 本发明采用的技术方案为将刺五加药材经乙醇提取、石硫处理、醇沉、灭菌超滤、 浓缩袋式干燥等工序制备而成。
[0007] 具体包括以下步骤：
[0008] 1) 3~8体积倍量的40~70%乙醇逆流提取刺五加药材，合并提取液，浓缩至相 对密度为1. 20~1. 25(80°C测）；
[0009] 2)用5~10体积倍量的纯化水稀释，搅拌均匀后，过滤，待滤液温度30 °C~50 °C 时，用石灰乳调节pH值至碱性，搅拌，再用硫酸调节pH值至酸性，继续搅拌，静置，滤取上清 液并回收浓缩至相对密度为1. 15~1. 25 (80°C测）得到浓缩膏；
[0010] 3)加入浓度93 %以上乙醇使药液乙醇浓度达到75 %~85 %，充分搅拌，静 置12~24小时，滤取上清液，滤液回收乙醇至无醇味，并浓缩至相对密度为1. 11~ 1. 25(80°C测）；
[0011] 4)用注射用水稀释至含总黄酮约5. 0~20.Omg/ml，搅拌均勾后，过滤，滤液调pH 值4. 0~6. 0,搅拌均匀，高温灭菌，冷藏12~24小时，调pH值为酸性，经0. 45μm微孔滤 膜过滤澄清后，采用1~10万级超滤，再将滤液浓缩至相对密度为1. 20~1. 25 (80°C测）， 带式干燥，得刺五加提取物干燥粉。
[0012] 上述方法，所述步骤1)逆流提取中乙醇为40%~70%的乙醇，优选为55%的乙 醇，逆流提取流速为25~35min/罐，提取温度为30~80°C，提取时间为0. 5~2小时；
[0013] 步骤2)中所述石灰乳为10%~20%的石灰乳，优选为15%，所述碱性为pH值 10~12,优选pH值11 ;所述硫酸为10%~20%硫酸，优选为15%硫酸，所述酸性为pH值 5.0~6. 5,优选pH值6 ;
[0014] 步骤3)中所述浓度大于或等于93%的乙醇，优选为95%的乙醇；
[0015] 步骤4)中所述高温灭菌处理为115~121°C下40~60分钟；调节pH值酸性至 5. 5~6. 5,微孔滤膜过滤中膜孔镜为0. 45μm; 1~10万级超滤过程中，所用超滤膜的单位 为截留分子量；带式干燥的温度为80~105°C，时间为0. 5~2小时。
[0016] 上述步骤中所涉及的" ％ "含量均为体积百分比。
[0017] 优选地，所述刺五加提取物由以下方法制备：
[0018] 1) 3~8体积倍量的40 %~70%乙醇逆流提取刺五加药材，逆流提取流速为25~ 35min/罐，提取温度为30~80°C，提取时间为0. 5~2小时，合并提取液，浓缩至相对密度 为 1. 20 ~1. 25(80°C测）；
[0019] 2)用5~10体积倍量的纯化水稀释，搅拌均匀后，过滤，待滤液温度30°C~50°C 时，用10~20 %的石灰乳调节pH值至10. 0~12. 0,搅拌，再用10~20 %的硫酸调节pH 值至5. 0~6. 5,继续搅拌，静置，滤取上清液并回收浓缩至相对密度为1. 15~1. 25 (80°C 测）得到浓缩膏；
[0020] 3)加入浓度93 %以上乙醇使药液乙醇浓度达到75 %~85 %，充分搅拌，静 置12~24小时，滤取上清液，滤液回收乙醇至无醇味，并浓缩至相对密度为1. 11~ 1. 25(80°C测）；
[0021] 4)用注射用水稀释至含总黄酮约5. 0~20.Omg/ml，搅拌均勾后，过滤，滤液调pH 值4. 0~6. 0,搅拌均匀，115~121 °C灭菌40~60分钟，冷藏12~24小时，调pH值5. 5~ 6. 5,经0. 45μm微孔滤膜过滤澄清后，采用1~10万级超滤，再将滤液浓缩至相对密度为 1. 20~1. 25(80°C测），温度80~105°C下带式干燥0. 5~2小时，得刺五加提取物干燥粉。
[0022] 更优选地，所述刺五加提取物由以下方法制备：
[0023] 1) 6体积倍量的55%乙醇逆流提取刺五加药材，逆流提取流速为30min/罐，提取 温度为50°C，提取时间为1小时，合并提取液，浓缩至相对密度为1. 25 (80°C测）；
[0024] 2)用8体积倍量的纯化水稀释，搅拌均匀后，过滤，待滤液温度40°C时，用15%的 石灰乳调节pH值至11，搅拌，再用15 %的硫酸调节pH值至6,继续搅拌，静置，滤取上清液 并回收浓缩至相对密度为1. 25 (80°C测）得到浓缩膏；
[0025] 3)加入浓度95%的乙醇使药液乙醇浓度达到80%，充分搅拌，静置16小时，滤取 上清液，滤液回收乙醇至无醇味，并浓缩至相对密度为1. 11 (80°C测）；
[0026] 4)用注射用水稀释至含总黄酮约5. 0~20.Omg/ml，搅拌均勾后，过滤，滤液调pH 值5. 0,搅拌均匀，120°C灭菌50分钟，冷藏16小时，调pH值5,经0. 45μm微孔滤膜过滤澄 清后，采用10万级超滤，再将滤液浓缩至相对密度为1. 20 (80°C测），温度80°C下带式干燥 1小时，得刺五加提取物干燥粉。
[0027] 与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
[0028] 本发明所提供的方法中刺五加药材经乙醇逆流提取和现有技术中水加热提取或 水回流提取相比具有显著的优势，不仅减少了溶剂的使用节省能耗，而且在逆流提取过 程中药材和提取溶剂保持一定速率的逆向运动（发明人研究发现尤其在50°C下，流速为 30min/罐，提取1小时，提取率最佳），使药材中的有效成分物质提取更加充分，提高有效物 质的提取率，提取速率更快，缩短提取周期；其次提取过程中溶剂的使用量减少，也避免引 入更多的杂质，使浓缩后处理更为简便。
[0029] 其次，刺五加药材经乙醇逆流提取后用石灰乳调碱，使有效成分中黄酮类与之形 成螯合物，再加硫酸进行调酸，使黄酮类成分溶于溶液中，而杂质成分沉淀下来，在经过后 续的醇沉处理，有效除去大分子蛋白质等物质。高温灭菌后进一步使用超滤，提高包含所得 刺五加提取物制剂的安全性，同时也最大程度减少有效成分的损失，有效控制刺五加提取 物中总黄酮、紫丁香苷及刺五加苷E有效成分的含量。最后采用采用带式干燥，提高干燥效 率和受热时间，改善提取物粉末颜色。
[0030] 本发明提供的方法还具有操作简单，节省生产周期，安全高效的优点特别适合工 业化生产。
【具体实施方式】
[0031] 除非另有定义，本发明使用的所有技术和科学术语的含义与本发明所属技术领域 普通技术人员通常理解的含义相同。通常，本发明使用的命名及下述实验方法都是本领域 公知的或常用的，若未特别指明，本发明实施例中所用的试验材料。试剂盒仪器等均可市售 获得。为了使本发明所解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合具体 实施例，对本发明作进一步的说明。
[0032] 实施例1 :刺五加提取物的制备
[0033] 1)3体积倍量（18L)的40%乙醇逆流提6kg取刺五加药材，逆流提取流速为 25min/罐，提取温度为30°C，提取时间为2小时，合并提取液，浓缩至相对密度为1. 20 (80°C 测）；
[0034] 2)用5体积倍量的纯化水稀释，搅拌均匀后，过滤，待滤液温度30°C时，用10%的 石灰乳调节pH值至10. 0,搅拌，再用10 %的硫酸调节pH值至5. 0,继续搅拌，静置，滤取上 清液并回收浓缩至相对密度为1. 15 (80°C测）得到浓缩膏；
[0035] 3)加入浓度93%的乙醇使药液乙醇浓度达到75%，充分搅拌，静置12小时，滤取 上清液，滤液回收乙醇至无醇味，并浓缩至相对密度为1. 11 (80°C测）；
[0036] 4)用注射用水稀释至含总黄酮约5. 0~20.Omg/ml，搅拌均勾后，过滤，滤液调pH 值4. 0,搅拌均匀，115°C灭菌60分钟，冷藏12小时，调pH值5. 5,经0. 45μm微孔滤膜过滤 澄清后，采用1万级超滤，再将滤液浓缩至相对密度为1. 20 (80°C测），温度80°C下带式干燥 2小时，得刺五加提取物干燥粉。
[0037] 实施例2 :刺五加提取物的制备
[0038] 1) 8体积倍量（40L)的70 %乙醇逆流提取5kg刺五加药材，逆流提取流速 为35min/罐，提取温度为80°C，提取时间为0. 5小时，合并提取液，浓缩至相对密度为 1. 25(80°C测）；
[0039] 2)用10体积倍量的纯化水稀释，搅拌均匀后，过滤，待滤液温度50°C时，用20%的 石灰乳调节pH值至12. 0,搅拌，再用20 %的硫酸调节pH值至6. 5,继续搅拌，静置，滤取上 清液并回收浓缩至相对密度为1. 25 (80°C测）得到浓缩膏；
[0040] 3)加入浓度98%以上乙醇使药液乙醇浓度达到85%，充分搅拌，静置24小时，滤 取上清液，滤液回收乙醇至无醇味，并浓缩至相对密度为1.