二价疫苗组合物以及其用于治疗肿瘤的用图
【专利说明】二价疫苗组合物以及其用于治疗肿瘤的用途
[0001] 发明技术领域
[0002] 本发明涉及应用于人类健康的生物技术和免疫学。特别地，本发明涉及用于治疗 恶性肿瘤的疫苗制剂。
[0003] 发明背景
[0004] 受体Herl和Her2是具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白，其属于称为ErbB家 族的具有四个受体的家族（NormannoN等人，（2005)TheErbBreceptorsandtheir ligandsinCancer:anoverview.CurrDrugTargets6 (3):243-257)〇Herl在肺 肿瘤、乳腺肿瘤、头颈肿瘤、结肠肿瘤、胰腺肿瘤、膀胱肿瘤、卵巢肿瘤和成胶质细胞 瘤(BrandTM等人，（2011)MolecularmechanismsofresistancetotheEGFR monoclonalantibodycetuximab.CancerBiolTher11 (9):777_792)、前列腺肿瘤 (ZhauHY等人，（1996)Androgen-repressedphenotypeinhumanprostatecancer. ProcNatlAcadSciUSA93(26):15152-15157;LiuXH等人，（1993)Androgens regulateproliferationofhumanprostatecancercellsincultureby increasingtransforminggrowthfactor-alpha(TGF-alpha)andepidermalgrowth factor(EGF)/TGF-alphareceptor.JClinEndocrinolMetab77 (6):1472-1478 ; NealDE等人，（1985)Epidermal-growth-factorreceptorsinhumanbladder cancer:comparisonofinvasiveandsuperficialtumours.Lancet1 (8425):366-368 ; GullickWJ等人，Expressionofepidermalgrowthfactorreceptorsonhuman cervical,ovarian,andvulvalcarcinomas.CancerRes46(1) :285-292；SalomonDS等 人，（1995)Epidermalgrowthfactor-relatedpeptidesandtheirreceptorsinhuman malignancies.CritRevOncolHematol19(3):183-232)中具有高的表达DHerl的过表 达与在头颈肿瘤和肺肿瘤中的差的疾病预后相关，其中具有高的疾病复发的风险（Turkeri LN等人，（1998)，Impactoftheexpressionofepidermalgrowthfactor,transforming growthfactoralpha，andepidermalgrowthfactorreceptorontheprognosis ofsuperficialbladdercancer.Urology51 (4):645-649;ChowNH等人，（1997) Significanceofurinaryepidermalgrowthfactoranditsreceptorexpression inhumanbladdercancer.AnticancerRes17(2B) :1293-1296)，和与在具有卵巢癌 症、结肠癌症、膀胱癌症、甲状腺癌症和头颈癌症的患者中的存活率降低相关（Grandis 等人，（1998)DownmodulationofTGF-alphaproteinexpressionwithantisense oligonucleotidesinhibitsproliferationofheadandnecksquamouscarcinomabut notnormalmucosalepithelialcells.JCellBiochemr69 (1):55-62)〇
[0005] 此外，Herl的表达水平与对常规疗法的抗性相关联（HolbroT等人，（2003) TheErbBreceptorsandtheirroleincancerprogression.ExpCellRes 284(1) :99-110) ^类似地，在乳腺肿瘤、胃肿瘤、卵巢肿瘤和前列腺肿瘤中，已发现相比于在 正常组织中的表达而言异常的Her2表达（TaiW等人，（2010)TheroleofHER2incancer therapyandtargeteddrugdelivery.JControlRelease146(3):264_275)d 此外， 在呼吸道的恶性转化中观察到了该受体的反常（AndradeFilho等人，2010)并且这种反 常构成了对于抗_Herl疗法的肿瘤抗性机制（Brand等人，（2011)Molecularmechanisms ofresistancetotheEGFRmonoclonalantibodycetuximab.CancerBiolTher 11 (9) :777-792)。已经将在乳腺肿瘤中Her2的过表达与较低的总存活率和没有复发的存 活率相关联。
[0006] 许多上面提及的肿瘤共表达高水平的Herl和Her2,并且该过表达与患者的存 活率降低相关（WisemanSM等人，（2005)Coexpressionofthetypelgrowthfactor receptorfamilymembersHER-1，HER-2,andHER_3hasasynergisticnegative prognosticeffectonbreastcarcinomasurvival.Cancer. 5 月 1 日，103 (9) : 1770-7) 〇 有着Her2-阳性乳腺肿瘤的患者具有高的与该疾病相关的死亡的风险，和另外，在这些 肿瘤中Herl和Herf的共表达显著地增加了该风险，这表明在这些癌中Herl的表达对 于Her2的表达的临床影响具有协同效应（SuoZ等人，（2002)EGFRfamilyexpression inbreastcarcinomas.c-erbB-2andc-erbB_4receptorshavedifferenteffects onsurvival.JPathol196 (1) : 17-25)。已经通过实验证明，在细胞恶性转化中在这些 受体的相互作用中存在协同作用（KokaiY等人，（1989)Synergisticinteractionof pl85c_neuandtheEGFreceptorleadstotransformationofrodentfibroblasts. Cell58(2) :287-292)。其中已证实了Herl和Herf的共表达的肿瘤的其他例子为脑癌症、 卵巢癌症、头颈癌症、肺癌症、食道癌症和结肠癌症（EmanuelSL等人，（2008)Cellularand invivoactivityofJNJ-28871063,anonquinazolinepan-ErbBkinaseinhibitor thatcrossestheblood-brainbarrieranddisplaysefficacyagainstintracranial tumors.MolPharmacol73(2) :338-348;AkoE等人，（2007)Thepan-erbBtyrosine kinaseinhibitorCI_1033inhibitshumanesophagealcancercellsinvitroandin vivo.OncolRep17(4) :887-893;VenkateswarluS等人，（2002)Autocrineheregulin generatesgrowthfactorindependenceandblocksapoptosisincoloncancer cells.Oncogene21 (1):78-86)。
[0007] 在文献中很好地用文件证明了在肿瘤中受体Herl和Her2的异常表达和共表达的 生理学作用。这些受体，通过形成二聚体和异二聚体（Pinkas-KramarskiR等人，（1996) DiversificationofNeudifferentiationfactorandepidermalgrowthfactor signalingbycombinatorialreceptorinteractions.ΕΜΒ0J15 (10):2452-2467)， 来调节在肿瘤生物学中必不可少的过程，例如持续增殖、血管发生、凋亡的抑制、代谢重 编程以及侵入和转移的能力（HanahanD等人，（2011):Hallmarksofcancer:thenext generation.Cell144(5):646-674)〇
[0008]这两种受体Herl和Herf具有相似的结构，其由胞外结构域（ECD)、简单的跨膜 结构域和具有酪氨酸激酶活性的胞内结构域组成。Herl的ECD(ECD-Herl)和Herf的 ECD(ECD-Herf)分别具有105kDa和110kDa的分子量，并且其在空间中的构象不依赖于该分 子的其余部分。它们由四个称为Ι、Π、ΙΙΙ和IV的亚结构域形成。亚结构域I和III是形成 配体结合位点的区域，并且在它们之中存在有潜在的糖基化位点。亚结构域II是对于在所 述受体之间出现二聚化来说关键的区域，并且被称为"二聚化臂"(GarrettΤΡ等人，（2002) Crystalstructureofatruncatedepidermalgrowthfactorreceptorextracellular domainboundtotransforminggrowthfactoralpha.CellllO(6):763-773；Ferguson KM等人，（2003)EGFactivatesitsreceptorbyremovinginteractionsthat autoinhibitectodomaindimerization.MolCell11 (2):507-517)〇
[0009] 迄今已经描述了七种对于Herl的配体，并且其中对于肿瘤来说最重要的是表皮 生长因子（EGF)，其具有促进表达该受体的表皮细胞增殖的效应；转化生长因子（TGF);和 双调蛋白（Normanno等人，（2005)TheErbBreceptorsandtheirligandsincancer:an overview.CurrDrugTargets6(3) :243-257)DECD-Herl处于多种构象的动态平衡中，所 述多种构象包括"闭合的"构象和其中亚结构域Π处于更柔韧状态的构象。配体的结合使 该平衡向着"伸展的"或有活性的构象（这是能胜任二聚化的构象状态）移动（Ferguson KM, (2008)Structure-basedviewofepidermalgrowthfactorreceptorregulation. AnnuRevBiophys37 353-373)〇
[0010] 然而，对于Her2,还未鉴定出任何特异的配体。通过该受体的信号传导不依赖 于生长因子，因