一种治疗阴道炎的药物组合物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物医药技术领域，具体地说，是关于一种治疗阴道炎的药物组合物 及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 细菌性阴道炎是一种较为常见的妇科炎症，包括霉菌性阴道炎和念珠菌性阴道 炎，主要是由细菌感染所导致。常见病症有瘙痒、外阴红斑、白带异常等，严重的导致阴道粘 膜红肿、溃疡，给患者带来了严重的痛苦。目前细菌性阴道炎的治疗方法主要是通过外用抗 真菌类药物。如纳米银、硝酸咪康唑或中药成分如苦参碱和黄柏提取物等。在使用抗菌药物 治疗阴道炎时短时间内效果明显，但是停药后，有相当比例的患者病情会反复。这是由于前 期炎症造成的阴道粘膜创伤未完全修复愈合，抵御外源物质的皮肤屏障尚未形成，造成了 细菌的二次感染。
[0003 ]人表皮生长因子(hEGF)能刺激粘膜表皮细胞分裂，可促进炎症治疗期间的粘膜损 伤修复，加速阴道粘膜屏障的形成。但在炎症治疗过程中，一旦粘膜屏障形成，便阻碍了 hEGF的透皮吸收，使得常规hEGF无法继续对阴道粘膜组织进行彻底修复。
【发明内容】
[0004] 本发明的第一个目的在于提供一种治疗阴道炎的药物组合物，能够用于细菌性阴 道炎的治疗。
[0005] 为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
[0006] 本发明的治疗阴道炎的药物组合物是以透皮EGF和抗菌药为原料，以卡波姆和丙 二醇为辅料制成。
[0007] 根据本发明，所述抗菌药为纳米银或硝酸咪康唑。
[0008] 根据本发明，所述药物组合物的配方如下： 透皮 EGF 0. 0Q01%-0. 01%
[0009] 纳米银 0.05% 卡波姆 0,5%
[0010]丙三醇 1.0% 余量为水_。
[0011]优选的，所述药物组合物的配方如下： 透皮 EGF 0.01% 纳米银 0,05%
[0012] 卡波姆 α? 丙三醇 10_% 余量为水。.
[0013] 根据本发明，所述药物组合物的配方如下： 透皮 EGF 0. 0001%-0, 01% 硝酸咪康唑 21:
[0014] 卡波姆 0.5% 丙三醇 10% 余量为水。.
[0015] 根据本发明，所述卡波姆为卡波姆940。
[0016] 根据本发明，所述药物组合物的形式包括喷剂、乳剂、凝胶、软膏、硬膏和油剂。
[0017] 本发明的第二个目的在于提供一种上述所述的药物组合物的制备方法，包括以下 步骤：
[0018] Α、将原料和辅料按上述所述的用量准备好，备用；
[0019] Β、配制溶液基质：
[0020] 将步骤A中的卡波姆、丙三醇加入容器中，加入去离子水，搅拌混匀，高温高压灭 囷，取出，冷却，备用；
[0021] C、将纳米银或硝酸咪康唑溶于丙三醇中，并投入基质中迅速搅拌混匀；
[0022] D、往基质中加入三乙醇胺，并缓慢搅拌，直至基质成为凝胶；
[0023] E、加入原料，在无菌条件下，将步骤A中的透皮EGF过滤除菌；
[0024] F、将过滤好的透皮EGF溶液加入到凝胶基质中，加去离子水，采用灭菌玻璃棒搅 拌，搅拌均匀，分装至消毒的阴道给药器中，10克/支。
[0025] 本发明的第三个目的在于提供一种上述所述的药物组合物在制备治疗阴道炎的 药物中的应用。
[0026] 本发明的治疗阴道炎的药物组合物，其有益效果是:在常规抗菌药治疗炎症过程 中，透皮EGF可修复炎症病灶处的皮肤屏障，阻止细菌的进一步感染，使得阴道炎的治疗时 间更短，比单独抗菌药的治疗效果更佳。
【附图说明】
[0027] 图1为药物对阴道炎模型大鼠血清IL-I含量的影响土S，n=lG)。
[0028] 图2为药物对阴道炎模型大鼠阴道脏器指数的影响（5 ±s，n:=m):e [0029]图3为正常对照组的镜检图。
[0030]图4为模型组的镜检图。
[0031]图5为模型组的另一镜检图。
[0032] 图6为采用实施例3的透皮EGF联合纳米银组给药后的镜检图。
[0033] 图7为采用实施例3的透皮EGF联合纳米银组给药后的另一镜检图。
[0034] 图8为采用实施例2的透皮EGF联合硝酸咪康唑组给药后的镜检图。
[0035] 图9为采用实施例2的透皮EGF联合硝酸咪康唑组给药后的另一镜检图。
【具体实施方式】
[0036] 以下结合具体实施例，对本发明作进一步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本 发明而非用于限定本发明的范围。
[0037]本实施例中所述的透皮EGF为中国专利文献CN102247603B中公开的透皮EGF，是一 种通过将蛋白类药物与透皮增强肽融合组成的融合蛋白。
[0038] 实施例1-6治疗阴道炎的药物组合物的制备
[0039] 本实施例的治疗阴道炎的药物组合物的配方如以下表1所示：
[0040] 表1治疗阴道炎的药物组合物的配方
[0043] 按表1所示的配方，通过以下步骤制备外用凝胶制剂：
[0044] A、将原料和辅料按表1的用量准备好，备用；
[0045] B、配制溶液基质：
[0046] 将步骤A中的卡波姆940、丙三醇加入容器中，加入去离子水，搅拌混匀，高温高压 灭菌，取出，冷却，备用；
[0047] C、将纳米银或硝酸咪康唑溶于丙三醇中，并投入基质中迅速搅拌混匀；
[0048] D、往基质中加入三乙醇胺，并缓慢搅拌，直至基质成为凝胶；
[0049] E、加入原料，在无菌条件下，将步骤A中的透皮EGF过滤除菌；
[0050] F、将过滤好的透皮EGF溶液加入到凝胶基质中，加去离子水，采用灭菌玻璃棒搅 拌，搅拌均匀，分装至消毒的阴道给药器中，10克/支。
[0051] 其中，步骤B中的高温高压灭菌时间为20min;步骤E采用0.22μπι针头过滤器过滤除 菌。
[0052] 实施例7对白色念珠菌致阴道炎模型动物的治疗作用的实验方法
[0053] 1、阴道炎模型制备
[0054] (1)造模大鼠双侧卵巢切除：除正常组大鼠外，其余各组大鼠禁食不禁水16~17h， 戊巴比妥钠35mg/kg腹腔注射麻醉，无菌条件下摘除双侧卵巢。术后皮下注射青霉素10万u/ 只，每天1次，连续3天，防止感染。术后第4天开始，逐只做阴道涂片检查，连续3天，未见阴道 上皮角化细胞，造模大白鼠均处于动情间期，证明卵巢摘除完全。
[0055] (2)制造假动情期，造成免疫功能低下:术后第7天开始皮下注射乙烯雌酚2mg/kg， 每天1次，连续4天，进行阴道涂片检查，出现大量角化上皮细胞，证明已出现假动情期。即日 开始除注射乙烯雌酚外，加皮下注射氢化可的松60mg/kg，每天1次，连续3天，造成动物全身 免疫功能低下。
[0056] (3)阴道感染白色念球菌:术后第11天，用灭菌0.25ml注射器接小白鼠灌胃针头， 抽取含白色念球菌0.25 X IO6CFU的菌液，造模大白鼠取头朝下位，将0.1 ml白色念球菌液注 入阴道内，原位停留1~2min，防止菌液溢出。24h后，用同样方法再感染1次。感染后造模动 物隔日交替皮下注射乙烯雌酚或氢化可的松各2次，以保持假动情期和全身免疫功能低下 状态，增加白色念球菌在阴道内的易感性。感染后4天(术后第15天），可见造模大白鼠外阴 红肿，伴少量白色分泌物，用无菌棉签蘸取分泌物，分泌物镜检可见假菌丝和成群孢子，造 模成功。
[0057] 2、动物的分组及给药
[0058]取体重180~220g雌性大鼠150只，其中140只按照上述方法造模，另外10只作为假 手术组(正常对照组），只开腹不进行切除卵巢。将造模成功阳性大鼠筛选100只分组。随机 均分为指定组，每组10只，分别为模型对照组、纳米银组、硝酸咪康唑组、透皮EGF组以及实 施例1~6的药物组合物组，各组给药剂量如表3和表6所示。在白念菌感染后第4天开始给 药，各鼠阴道内按剂量注入给药，每天分2次给药，间隔4h，连续给药7天。
[0059] 3、检测指标
[0060] 末次药后2小时称体重后，用20%乌拉坦麻醉，腹主动脉取血，Elisa法检测及IL-I 含量;并取阴道及宫颈称重计算重量指数，再取一块组织备检，取阴道组织（lcm，厚约0.1~ 0.3cm)l块做普通光镜标本，观察阴道黏膜形态变化。用10%中性甲醛固定，石蜡包埋、切 片，HE染色，光镜观察，统计病理积分。
[0061 ]阴道指数(g/1 OOg体重）=阴道重量(g) * 100/体重(g)
[0062] 病理积分计分标准见表2:
[0063] 表2病理积分计分标准
[0065] 4、统计学分析
[0066] 数据用均数土标准差（i ± s)表示，各组均数之间比较采用SPSS 20.0统计软件 进行ANOVA方差及两两比较的Dunnett-t检验。
[0067] 实施例8透皮EGF联合纳米银用于阴道炎治疗
[0068] 1、药物对阴道炎模型大鼠血清IL-I含量的影响
[0069] 白细胞介素 I(IL-I)在体内的含量决定着炎症的水平。通过检测大鼠阴道阻止的 IL-I水平，表3结果显示，模型对照组大鼠血清IL-I含量显著增加，与正常对照组比较有显 著性差异(P〈〇.01)，说明此时模型大鼠处于炎症状态；阳性对照药纳米银组可显著降低血 清IL-1含量，与模型对照组比较有显著性差异(P〈0.01 )，透皮EGF联合纳米银组(按实施例 3-6的药物组合物进行给药)可显著降低阴道炎模型大鼠血清IL-I水平，与模型对照组比较 有显著性差异(P〈〇. 05或P〈0.01);单独使用透皮EGF组(按实施例1的药物组合物进行给药） 与模型对照组比较未见显著性差异(P>〇.05);在等倍剂量下(P>0.05)，详见表3和图1。
[0070] 表