一种玛卡烯、玛卡酰胺的提取分离方法
【专利摘要】本发明属于生物提取领域，公开了一种玛卡烯、玛卡酰胺的提取分离方法，其包括如下步骤：步骤1）浸泡和紫外照射，步骤2）混匀，步骤3）临界CO2萃取和浓缩，步骤4）石油醚萃取，步骤5）洗脱，步骤6）脱色、浓缩和干燥。本发明提取工艺，通过浸泡、萃取、洗脱、脱色以及浓缩等工艺，具有收率高、产品纯度好、操作工艺简单等优点。
【专利说明】一种玛卡烯、玛卡酰胺的提取分离方法
[0001]
技术领域
[0002]本发明属于生物提取领域，具体涉及一种玛卡烯、玛卡酰胺的提取分离方法。
【背景技术】
[0003]玛卡(学名:Lepidium meyenii Walp)，(西班牙语:Maca)。主要出产于南美洲安第斯山脉和中国云南丽江，是一种十字花科植物。叶子椭圆，根茎形似小圆萝卜，可食用，是一种纯天然食品，营养成份丰富。玛卡的下胚轴可能呈金色或者淡黄色、红色、紫色、蓝色、黑色或者绿色。淡黄色的根最常见，形状、味道也最好。玛卡富含高单位营养素，对人体有滋补强身的功用。黑色玛卡是被公认为效果最好的玛卡，产量极少。玛卡原产高海拔山区，适宜在高海拔、低玮度、高昼夜温差、微酸性砂壤、阳光充足的土地中生长;种植地区主要分布于南美州安第斯山脉以及中国云南丽江的玉龙雪山地区，这两大主产区有较大面积的适种土地。而中国云南其他地区和新疆、西藏等地区也有少量种植。
[0004]玛卡烯是美国华裔植物学家ZhengB.L发现的玛卡特有的两种独一无二的活性物质，主要成分为:η-节基十六酞胺、节基-(92)十八稀酰胺、η-节基-(92、122)-二稀十八酞胺、节基_(92、122、152)-二稀十八駄胺、η-节基十八烧酰胺，及η-节基辛酰胺、η-节基-16-羟基-9-氧化-1OE 12Ε 14Ε-辛葵三烯酰胺、η-苄基-16羟基-9，16-二氧-1OE 12Ε 14Ε-辛葵三烯酰胺等17个同系物。玛卡酰胺和玛卡烯在玛卡提取物中含量为0.6%。玛卡酰胺和玛卡烯是引起性功能改善的主要物质，而丰富的氨基酸可帮助人体在中枢神经内传递信息，对性活动更是具有重要的调控作用。
[0005]目前，有一些研究做过一些玛卡酰胺和玛卡烯的提取工作，但是大多存在提取效率低、纯度差以及工艺复杂等缺陷，不适合大规模工业化生产。
【发明内容】
[0006]本发明的目的是解决现有技术中玛卡酰胺和玛卡烯提取工艺提取率低、提取成本高以及操作工艺繁琐等缺陷，提供了一种玛卡烯、玛卡酰胺的提取分离方法。
[0007]本发明是通过如下技术方案来实现的:
一种玛卡烯、玛卡酰胺的提取分离方法，其包括如下步骤:步骤I)浸泡和紫外照射，步骤2)混勾，步骤3)临界CO2萃取和浓缩，步骤4)石油醚萃取，步骤5)洗脱，步骤6)脱色、浓缩和干燥。
[0008]具体地，所述提取分离方法包括如下步骤:
步骤I)浸泡和紫外照射:取玛卡鲜根为原料，洗净，浸泡在6%(w/w)的氯化钠溶液中6小时，然后取出，晾干，粉碎成8-10目的粉末，再用紫外线照射15分钟；
步骤2)混匀:将步骤I)的粉末与硅藻土按照1:1的质量比混合均匀得到混合物；
步骤3)临界CO2萃取和浓缩:采用临界CO2萃取方式，用95%的乙醇作为夹带剂，控制萃取压力为27.5-29.5MPa，萃取时间为3_4小时，萃取温度为40 V ;重复萃取一次，合并两次萃取液，置于真空蒸发器中，在真空度为0.82MPa，温度为43°C的条件下进行蒸发浓缩得到浓缩液；
步骤4)石油醚萃取:向浓缩液中添加两倍重量的石油醚，在60-90°C萃取，然后静置分层，收集下层的水相用于多糖类物质的提取；
步骤5)洗脱:将步骤4)所得上层石油醚相进行减压蒸发，回收石油醚，残留液与氧化铝粉末按照1:1的质量比混合搅拌均匀，晾干，然后添加到氧化铝洗脱柱，用石油醚进行洗脱，收集洗脱液；
步骤6)脱色、浓缩和干燥:往洗脱液中添加3%(w/w)的活性炭，在回流状态下保持脱色40min，过滤，浓缩滤液，然后在40-60°C干燥2小时，得到含有玛卡烯、玛卡酰胺的提取物。
[0009]优选地，所述紫外线的强度为2000uW/cm2。
[0010]所述硅藻土的粒径为50-100目。
[0011 ] 所述氧化铝粉末的粒径为100-200目。
[0012]本发明取得的有益效果主要但不限于以下几点:
本发明提取工艺，通过浸泡、萃取、洗脱、脱色以及浓缩等工艺，具有收率高、产品纯度好、操作工艺简单等优点；
本发明采用临界CO2萃取方式和石油醚相结合的方式，提高了收率，避免了单一方式造成的有效成分损失；
提取工艺中采用硅藻土与玛卡粉末混合，可通过硅藻土的吸附作用，使得细胞壁稳定性进一步下降，细胞胀裂过程加剧，提高活性成分的浸出率，同时吸附力较小，容易解离，而且硅藻土的成本小于树脂等吸附材料，减轻了企业负担；
玛卡细胞经盐环境以及强紫外线逆境胁迫，可以诱导活性分子的分泌，而且使得细胞壁处于不稳定状态，玛卡烯、玛卡酰胺等生物碱的浸出相应增加，提高了产量；
氧化铝粉末用于去除杂质，提高了产品的纯度；
采用本发明提取分离方法成本较低，而且溶剂消耗少成本低廉，产品纯度和收率高，提取时间缩短，操作步骤简单，工业化应用前景广阔。
【具体实施方式】
[0013]为了使本技术领域的人员更好地理解本申请中的技术方案，下面将结合本申请具体实施例，对本发明进行更加清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。
[0014]实施例1
一种玛卡烯、玛卡酰胺的提取分离方法，其包括如下步骤:
步骤I):取丽江玛卡种植区的玛卡鲜根(含水率57%)为原料100g，洗净，浸泡在6%(w/w)的氯化钠溶液中6小时，然后取出，晾干，粉碎成8目的粉末，再用紫外线照射15分钟，紫外线强度为2000uW/cm2;
步骤2):将步骤I)的粉末与硅藻土按照1:1的质量比混合均匀得到混合物;所述硅藻土的粒径为50目； 步骤3):采用临界CO2萃取方式，用95%的乙醇作为夹带剂，控制萃取压力为27.5MPa，萃取时间为3小时，萃取温度为40°C;重复相同的萃取条件再萃取一次，合并两次萃取液，置于真空蒸发器中，在真空度为0.82MPa，温度为43°C的条件下进行蒸发浓缩得到浓缩液；
步骤4):向浓缩液中添加两倍重量的石油醚，在60°C萃取，然后静置分层，收集下层的水相用于多糖类物质的提取；
步骤5):上层石油醚相进行减压蒸发，回收石油醚，残留液与氧化铝粉末按照1:1的质量比混合搅拌均匀，晾干，然后添加到氧化铝洗脱柱，以距开口处40cm为佳，用石油醚进行洗脱，收集洗脱液；
步骤6):往洗脱液中添加3%(w/w)的活性炭，在回流状态下保持脱色40min，过滤，浓缩滤液，然后在40°C干燥2小时，得到含有玛卡烯、玛卡酰胺的提取物。
[0015]共获得玛卡提取物69.2g，经HPLC检测，玛卡烯含量为1.71%,玛卡酰胺含量为0.023%ο
[0016]实施例2
一种玛卡烯、玛卡酰胺的提取分离方法，其包括如下步骤:
步骤I):取丽江玛卡种植区的玛卡鲜根(含水率58%)为原料100g，洗净，浸泡在6%(w/w)的氯化钠溶液中6小时，然后取出，瞭干，粉碎成10目的粉末，再用紫外线照射15分钟，紫外线强度为2000uW/cm2;
步骤2):将步骤I)的粉末与硅藻土按照1:1的质量比混合均匀得到混合物;所述硅藻土的粒径为100目；
步骤3):采用临界CO2萃取方式，用95%的乙醇作为夹带剂，控制萃取压力为29.5MPa，萃取时间为4小时，萃取温度为40°C;重复相同的萃取条件再萃取一次，合并两次萃取液，置于真空蒸发器中，在真空度为0.82MPa，温度为43°C的条件下进行蒸发浓缩得到浓缩液；
步骤4):向浓缩液中添加两倍重量的石油醚，在80°C萃取，然后静置分层，收集下层的水相用于多糖类物质的提取；
步骤5):上层石油醚相进行减压蒸发，回收石油醚，残留液与氧化铝粉末按照1:1的质量比混合搅拌均匀，晾干，然后添加到氧化铝洗脱柱，以距开口处40cm为佳，用石油醚进行洗脱，收集洗脱液；
步骤6):往洗脱液中添加3%(w/w)的活性炭，在回流状态下保持脱色40min，过滤，浓缩滤液，然后在60°C干燥2小时，得到含有玛卡烯、玛卡酰胺的提取物。
[0017]共获得玛卡提取物67.8g，经HPLC检测，玛卡烯含量为1.76%，玛卡酰胺含量为0.021%ο
[0018]对比例I
操作工艺同实施例1，不同在于缺少步骤I)浸泡到氯化钠溶液和紫外照射的步骤;共获得玛卡提取物68.2g，经HPLC检测提取物中玛卡烯含量为1.08%，玛卡酰胺含量为0.013%。
[0019]对比例2
操作工艺同实施例1，不同在于缺少步骤2);共获得玛卡提取物68.6g，经HPLC检测提取物中玛卡烯含量为1.54%，玛卡酰胺含量为0.018%。
[0020]
最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。
【主权项】
1.一种玛卡烯、玛卡酰胺的提取分离方法，其包括如下步骤:步骤I)浸泡和紫外照射，步骤2)混勾，步骤3)临界CO2萃取和浓缩，步骤4)石油醚萃取，步骤5)洗脱，步骤6)脱色、浓缩和干燥。2.根据权利要求1所述的提取分离方法，其特征在于，所述提取分离方法包括如下步骤: 步骤I)浸泡和紫外照射:取玛卡鲜根为原料，洗净，浸泡在6%(w/w)的氯化钠溶液中6小时，然后取出，晾干，粉碎成8-10目的粉末，再用紫外线照射15分钟； 步骤2)混匀:将步骤I)的粉末与硅藻土按照1:1的质量比混合均匀得到混合物； 步骤3)临界CO2萃取和浓缩:采用临界CO2萃取方式，用95%的乙醇作为夹带剂，控制萃取压力为27.5-29.5MPa，萃取时间为3-4小时，萃取温度为40°C ;重复萃取一次，合并两次萃取液，置于真空蒸发器中，在真空度为0.82MPa，温度为43°C的条件下进行蒸发浓缩得到浓缩液； 步骤4)石油醚萃取:向浓缩液中添加两倍重量的石油醚，在60-90°C萃取，然后静置分层，收集下层的水相用于多糖类物质的提取； 步骤5)洗脱:将步骤4)所得上层石油醚相进行减压蒸发，回收石油醚，残留液与氧化铝粉末按照1:1的质量比混合搅拌均匀，晾干，然后添加到洗脱柱，用石油醚进行洗脱，收集洗脱液； 步骤6)脱色、浓缩和干燥:往洗脱液中添加3%(w/w)的活性炭，在回流状态下保持脱色40min，过滤，浓缩滤液，然后在40-60°C干燥2小时，得到含有玛卡烯、玛卡酰胺的提取物。3.根据权利要求2所述的提取分离方法，其特征在于，所述紫外线的强度为2000uW/cm2。4.根据权利要求2所述的提取分离方法，其特征在于，所述硅藻土的粒径为50-100目。
【文档编号】A61K36/31GK105832801SQ201610337869
【公开日】2016年8月10日
【申请日】2016年5月22日
【发明人】谢海涛, 谢来宾, 董景峰, 陈佩, 王鹏亭, 柴行, 周秋云
【申请人】深圳市先康达生物科技有限公司