用于控释或缓释给药的微球的制作方法
【专利摘要】本发明涉及到一种新型的可以缓释或控释治疗成分的微球制剂组合物及制备方法，主要用于分子量不超过10KD的蛋白或者肽。组合物包含至少一种治疗成分、辅助剂(例如，pH敏感成分，即溶解度随pH发生变化)、生物可降解聚合物。治疗成分和辅助剂以粒径小于10um的细粒形式存在，并被包封于构成微球骨架的生物可降解聚合物中。本发明还提供了制备上述微球组合物的制备方法，治疗成分与辅助剂原位沉淀形成好的细微颗粒再后续制备成微球。微球制剂实现了治疗成分的长期控释以及超过95％的高包封率。
【专利说明】用于控释或缓释给药的微球
[0001 ]相关文件与相关申请
[0002] 本申请主张中国专利申请CN201103974717的申请日，2011年12月5日为其优先权 日。上述申请的内容作为参考整合在本申请中。
[0003] 本发明的领域
[0004] 本发明涉及到一种肽药物艾塞那肽的缓释剂型的组成，以及这一剂型的制剂方 法。
[0005] 本发明的背景
[0006] 基于聚合物的肽或其他水溶性药物的缓释剂型的技术挑战含有初始突释、不完全 释放、在初始或任何阶段的滞后释放、以及活性成分由于聚合物降解产生的酸性而降解。为 了使缓释剂型能够注射，载有药物的聚合物往往被制备成直径为数十微米的微球，使活性 物质包封于其中。这种场合，微球的包封效率和大小的控制对于治疗实践上可行的微球制 剂成为一个关键。尽管一些肽药物的微球制剂已经上市，上述问题并没有得到很好的解决。 这些问题在目前销售中的艾塞那肽微球上便很明显:疗效为一周的艾塞那肽微球在注射后 第三周才开始释放。本发明揭示了能够解决上述微球制剂的问题的微球配方和方法，其特 别适用于肽如艾塞那肽。
[0007] 微球有着多种制备方法，如溶剂挥发法、共乳化法、喷雾干燥法、超声波辅助雾化 法、以及微流控法。最常用的工艺包括将载有药物的聚合物溶液在与之不互溶的连续相中 乳化形成胚胎微球后的溶剂挥发或萃取。当药物是肽或其他水溶性成份时，多重乳化，即将 一个乳液在另一个连续相中进一步乳化便成为必要。
[0008] 单重乳化法只适用于脂溶性成份，其可以与作为缓释控制的聚合物一同溶解在有 机溶剂中。所形成的共溶液进一步分散在亲水连续相中，形成胚胎微球，再通过溶剂的挥发 或萃取固化。然而，多数场合，生物物质，如蛋白和肽，只溶解在水中，复乳化法成为必须。如 果后一步乳化的连续相是水溶液，包封于聚合物有机相液珠中的蛋白或肽溶液会泄漏到亲 水连续相中，致使包封率降低。对于有着脆弱的构象的蛋白，有机相/水相界面可能是引起 蛋白变性和聚集的有害因素。
[0009] 为避免微包封过程中活性成份向连续相的泄漏，与聚合物溶液不互溶的非水相液 体，如硅油，被用作后一步乳化载药聚合物溶液的连续相。由于多数蛋白和肽不溶于硅油， 包封率可得到实质性的提高。采用硅油或其他非水连续相的主要缺点在于其必须从微球表 面清除。可观用量的、可与硅油互溶的有机溶剂便不得不用来清洗微球，造成环境问题。
[0010] 另外一个变通的方法是将蛋白或肽成份事先制备成固体颗粒，再进行微包封。这 一方法叫作"油包固体水包油"（S/0/W)法。本发明将使用S/0/W法，其中将蛋白或肽转化为 固体颗粒的方法是新颖的。
[0011] 从注射的方便计，微球的直径需在几微米到200微米之间，多数情况下最好在20-200微米内。因此，被包封的蛋白或肽的初始颗粒应明显地小于最终的微球。蛋白或肽颗粒 的合理的直径应调控在几个微米或更低。
[0012] 为了降低初始颗粒的尺度，一些研究者通过在肽水溶液中添加与水互溶的低极性 溶剂使之沉淀。然而，这些与水互溶溶剂挥发性较低，难以通过蒸发除去。这样的场合，萃取 法成为除去这些溶剂的有效方法。
[0013] 本发明的总结
[0014] 本发明揭示了一种缓释微球剂型的配方，其可在所设计的时段提供接近线性模式 的肽释放。本发明还揭示了制备这一微球制剂的方法。这一微球制剂至少含有一种肽(或其 他活性成份如分子量小于IOK-可定义为小分子量的蛋白）和一种辅助成份(如其溶解度随 PH变化的pH敏感成份），两者均以微粒状，以及至少一种可生物降解聚合物。该pH敏感成份 (辅助成份的一种）帮助缓冲（中和)聚合物降解产生的酸性并通过调控渗透压在聚合物降 解过程及后降解过程中加速药物的释放。作为制备该微球组合(剂型）的方法之一，肽的细 微颗粒及直径足够小(零点几到几微米)的PH敏感成份首先要在其溶解的溶液中沉淀出来。 然后，将所形成的混悬液在水相连续相中分散(乳化），形成胚胎微球，再进一步固化。这一 工艺过程按一下步骤列出。
[0015] a)将治疗成份(如艾塞那肽)溶于极性溶剂(称为溶液1，如DMSO或DMF);
[0016] b)将辅助成份(如pH敏感成份)溶于水；
[0017] C)将步骤a)及步骤b)制备的溶液与极性较低的溶剂(称为溶剂2,如溶解可降解聚 合物的二氯甲烷)以任意顺序混合，使肽和PH敏感成份沉淀出来；
[0018] d)将步骤c)制备的混悬液分散于水相连续相，以形成胚胎微球；
[0019] e)去除聚合物中的有机溶剂(溶剂1和溶剂2)，固化胚胎微球。
[0020] 上述组合及工艺过程中所描述的肽或小分子量蛋白包含艾塞那肽、其他GLP-I受 体激动剂、胰岛素、降f丐素、亮丙瑞林、曲普瑞林、奥曲肽、及以上的类似物。Ieuprore I in、 1：1^口1:〇代1;[11、0(31^601:丨(16、及类似的治疗性肽。上述组合中的口!1敏感剂选自1%(0!02、]\%(1)3、 Zn(OH)2及Zn⑶3。上述组合中用于实现缓释或控释的聚合物可以是聚乳酸-聚羟基乙酸 (PLGA)、聚乳酸(PLA)、聚环己内脂(PCL)、或CBZ-聚伪丝氨酸。聚合物应溶于可原位沉淀药 物(如肽或蛋白）的溶剂2。
[0021] 这一微球(组合)设计及其制剂方法能够大幅提高微包封(药物担载)效率，降低肽 或蛋白在长时间缓释周期中的降解，改善药物释放模式的线性。
[0022]附图的简要说明
[0023]图1:原位形成的艾塞纳肽颗粒及载有艾塞纳肽的微球的形态
[0024]图2:艾塞纳肽累计释放曲线，释放介质：PBS(pH=7.4) ,Mg(OH)2的含量：（0.0% ? ；6.06% Α；8.825·；11.43%·)
[0025] 图3: C57小鼠经皮下注射艾塞纳肽微球后血糖浓度，注射微球的艾塞那肽剂量分 别为：1 · 25ug/20g，2 · 5ug/20g，5ug/20g 和 10ug/20g ·
[0026] 图4:皮下注射艾塞纳肽微球（?)和空白微球（▲)后的SD大鼠体内中的血药浓度 曲线
[0027]本发明的详细描述
[0028] 组合物的设计
[0029] 本发明包括改进了的蛋白肽微球剂型，以及微包封工艺，其称之为油包固-水包油 方法(S/0/W)，用以制备所说的微球剂型(组合物）。所指的组合物及其制备方法的改进包括 将肽(或没有结构稳定性问题的蛋白）和/或PH敏感剂通过在溶解聚合物溶液(上文中提到 的溶液2)中沉淀形成细微颗粒。为了保证满意的高包封率和释放动力学，这些沉淀的颗粒 的直径应该在IOmi以下，约Ιμπι最优。
[0030] 工作原理
[0031] 由于固化处理大为降低了肽(或蛋白）在疏水的聚合物基质中的溶解速率，其在S/ 0/W法的微包封过程中，仅有少量的水渗入，肽(或蛋白）渗漏到水相连续相的机会可被阻 滞。
[0032] 在体内（或体外)缓释过程中，生物可降解聚合物(如PLGA)形成微球的基质可以吸 收体液(或水）导致注射后的微球缓慢溶胀。在有限的体液(或水)渗入到聚合物基质的阶 段，PH敏感剂迅速溶解，产生有效的渗透压，加速聚合物的溶胀，同时加速肽的释放。当更多 的水(或体液)进入聚合物基质时，PH敏感试剂已经到达饱和溶解度，不再进一步增加渗透 压。在缓释速率通常会下降的后期阶段，PH敏感剂的溶解度在由聚合物(如PLGA)降解产生 的酸环境中增加。
[0033] 为了确保微球(组合物)设计的工作机制有效，肽(或蛋白以及其他活性成分)颗粒 的尺寸必须足够小。一般规律是内部颗粒(被微包封在另一颗粒，即微球，中的颗粒)的尺寸 应小于(包封它的)微球尺寸的5%。要达到如此小而的尺寸和相对均一的药物内部颗粒，助 剂(诸如PH敏感的试剂），一个原位沉淀的步骤被包括在这个制备过程中（方法）敏感剂 可选自Mg(OH) 2, MgCO3, Zn(OH)2和ZnCO3,而肽(或蛋白或别的药物)及辅助剂(诸如pH敏感试 剂）的原位沉淀则可通过将其在优良溶剂和不良溶剂的混合得以实现。具体操作过程包括 将药物和助剂溶解在优良溶剂中，然后将所形成的溶液与其不良溶剂混和，促使沉淀形成。 不过，其不良溶剂应当是起控释作用的生物降解聚合物的良溶剂。起到缓释或控释释放的 聚合物包括聚乳酸-聚羟基乙酸(PLGA)，聚乳酸(PLA)，聚己内酯(PCL)，聚氯甲酸苄酯-伪丝 氨酸内酯(PCBZ-pSL).这种聚合物应当是容易溶解在溶剂2中，而药物(蛋白或肽)容易在其 溶液中原位形成好的颗粒沉淀。
[0034] 制备过程
[0035]理解了工作原理，操作过程便简直接。基本的步骤与本发明的总结里描述的相同。 为了提供读者更容易理解，我们再次将制备步骤列出如下：
[0036] a)将治疗成分(如艾塞纳肽)溶于极性溶剂中（溶剂1，如:DMSO或DMF);
[0037] b)将助剂(如其溶解度随pH值变化而变化的pH敏感剂)溶于水中；
[0038] c)将上述步骤a)和b)制备的溶液与弱极性溶剂(溶剂2,如溶解了生物可降解的聚 合物的溶剂二氯甲烷），以任意顺序混和，以沉淀肽和PH敏感剂。
[0039] d)将上述步骤c)形成的混悬液分散到的水相连续相中，以形成胚胎微球；
[0040] e)通过除去聚合物相的有机溶剂(溶剂1和溶剂2)，固化上述步骤d形成的胚胎微 球。
[0041] 关于溶剂1(溶解了肽或蛋白的溶剂）与溶剂2以及辅助剂(诸如pH敏感试剂)水溶 液之间的混合顺序，操作者可任意安排，1)将肽(或蛋白）溶液加到溶剂2中；2)将溶剂2加到 肽溶液中；3)将pH敏感剂水溶液加到溶剂2中；4)将溶剂2加到pH敏感剂水溶液中；或所有溶 液一起混和。该组合物中的pH敏感剂选自Mg (0H) 2、MgC03、Zn (0H) 2和ZnCO3。
[0042]微粒分散于聚合物溶液的体系一旦形成（S/0)其便可通过文献报道诸如油包固_ 水包油法(S/0/W)、喷雾干燥法、或冷冻喷雾干燥法(在冷的液体中，如液氮中）制备成微球。
[0043] 溶解肽的极性溶剂挥发性很小的情况下，萃取法应成为去除所制备的微球中的溶 剂的方法选项。
[0044] 为使药物颗粒和亲水性助剂颗粒均匀地分布在油包固（S/0)混悬液中，可在该助 剂水溶液加入表面活性剂。表面活性剂包括但不限于:油酸钠，硬脂酸钠，十二烷基磺酸钠， 聚乙烯醇，羧甲基纤维素钠，卵磷脂，明胶，透明质酸，两两混合或它们的混合物。
[0045] 本发明用艾塞纳肽(Exendin-4)作为一个例子来说明微球组合物和其制备方法。 艾塞纳肽是美国西南吉拉毒蜴进食时唾液中分泌的含有39个氨基酸的肽。EXendin-4是胰 高血糖素样肽-I(GLP-I)类似物，同源于哺乳动物GLP-I氨基序列的53%，是一个有效的 GLP-I受体激动剂。Exendin-4可以促进胰岛素分泌，发挥葡萄糖浓度依赖性降糖作用，抑制 分泌胰高血糖素和抑制胰岛细胞凋亡和延缓胃内容物排空和抑制胃肠道蠕动及其它别的 生理活性，适合用来治疗2-型糖尿病。Exendin-4的这些生理活性是类似于GLP-I，但是GLP-1在体内被两个肽降解酶IV(DPPIV)迅速降解。GLP-I半衰期仅仅1-2分钟，可迅速被降解。但 是由于一定耐受性，Exendin-4不容易被DPPIV酶降解，体内的循环时间增加到60-90分钟。 因此艾塞纳肽被看作是下一代理想治疗II型糖尿病的治疗物质。
[0046] 由于所有的肽和蛋白（那些没有结构稳定性的问题的蛋白）具有高度类似的分子 结构和物理化学性质，用来制备艾塞纳肽的方法和剂型过程作为揭示制备这类肽或蛋白的 一个例子加以说明这个方法同样适用于制备这些类似的蛋白或肽的剂型。因此艾塞纳肽将 作为一个例子来帮助理解本发明，但不用于限定本发明的权利。
[0047] 另一个代表性的不限定权利的例子是，聚合物可以是聚乳酸或聚羟基乙酸，或它 们的混合物，其在弱极性的溶剂2中的浓度为5 % -25 % W/V，更优的浓度为7.5 % -2 % W/V。 实施例
[0048]这个实施例用的聚合物是聚乳酸-聚羟基乙酸(PLGA，乳酸:羟基乙酸=50:50，分 子量为14-16k，黏度:0.39)。
[0049] 改进的S/0/W微包封方法
[0050]艾塞纳肽微球的制备采用了S/0/W原位乳化溶剂挥发法。艾塞纳肽的DMSO溶液和 一定量的Mg(0H) 2加到2ml二氯甲烷含有IOOmg PLGA的溶液混和形成油包固（S/0)的乳液。 上述乳液转移到水相（1 %的PVA溶液）中，形成水包油-油包固（S/0/W)乳液。同时以250转/ 分钟的速度搅拌，微球残留的溶剂，在室温，被萃取4个小时而除去。然后离心收集微球并用 二次蒸馏水洗涤微球三次。
[0051 ] 载药量和包封率分析
[0052]取冷冻干燥的微球（10-15mg)溶于0.5ml的二氯甲烷，再涡旋振荡后，将该混悬液 离心（5000转/分，5分钟），收集颗粒并干燥后，溶于0.5ml蒸馏水。取200μ1用于液相色谱 (HLPC)分析(安捷伦1000,安捷伦科技，美国），其中分离采用反相C-18柱，流动相为0.1 % (V/V)TFA作为缓冲溶液A，0.1%(V/V)TFA+80%(V/V)乙腈作为缓冲溶液B，梯度洗脱60-40%B洗脱40分钟。艾塞纳肽定量检测的波长为 :280nm。药物的载药量=被包封的实际载药 的量*100/微球重量。包封率=试验测定载药量*100/理.论上的载药量。载药量和包封率如 下表1，所有剂型的包封率均在90以上。
[0053] 表1随不同Mg(OH)2含量，艾塞纳肽微球的包封率和载药量。误差：土SD。
[0055] 微球的形态和颗粒粒径分配
[0056] PLGA微球的粒径和表面形态才用日本JSM-6700F(JE0L，日本)扫描电镜(SEM)进行 观察。测试样品用双面导电胶固定在金属靶粧上，然后采用JFC-1600喷雾镀膜器在低于5Pa 真空下，镀上一层金膜(约60nm厚）。如图1所示，艾塞那肽微粒的平均粒径小于200nm，适于 采用微球进行微包封。图1还显示了原位SOW法结合SPG膜制备的艾塞那肽微球的SEM图像。 所形成的艾塞纳肽微球的粒径约60μπι，分布在狭窄的范围内。
[0057] 微球体外释放试验
[0058] 取20~30mg的微球置于试管，加入1ml PBS(pH = 7.4)。这个混合物放在37°C中 IOOrpm恒温摇动。每隔一段时间，离心样品取上清液100μΙ用于HPLC分析(安捷伦1100,安捷 伦科技，美国）。同时在试管内补充1〇〇μ1的新鲜PBS，使总的体积保持恒定。然后，这些混合 物进行激烈的震荡重新混悬微球。混悬液重新放到37°C中IOOrpm恒温振荡。图2显示了不同 的Mg(OH) 2的含量，艾塞纳肽累积释放率，释放介质：PBS(pH = 7.4)，氢氧化镁的含量： (0.0% .4.06% 825·; 11.43%·)。没有Mg(OH)2的处方，7天后，累积释放不到 20%;然而含有11.43%的1%(0!〇2,27天后，累积释放超过77%;8.82%的1%(0!〇2累积释放 为66.33% Ig(OH)2加速了初期的释放速率是我们所期望的，原因是水快速进入微球导致 Mg(OH)2溶解产生的渗透压加速艾塞纳肽的释放速率。在释放初期，药物的释放速率主要是 被扩散到微球内部的水控制。随后，没有Mg(OH) 2的微球，一个快速释放期出现，然后60%的 释放来自于第7天到第16天，然而微球的释放总量不到30%。在这个释放期里，PLGA材料开 始降解产生酸，并进一步加速PLGA的降解。在这个释放期，药物释放速率通常是PLGA降解速 率决定。含有Mg (OH) 2的微球，Mg (OH) 2可以中和PLGA降解产生的酸，以至使得PLGA降解的速 率变慢同没有Mg (0H) 2的微球相比较。最后所有微球的累积释放30天全部完成。含有6.06 % 的Mg(OH)2的微球，在释放期内，几乎达到零级释放动力学。
[0059] 在C57小鼠上药效评价
[0060] 将按上面处方制备好的微球皮下注入C57小鼠体内进行药效学评价。随机分成6 组，一组给艾塞纳肽溶液，另外4组分别给4个不同剂量的微球，最后剩下的一组给生理盐 水。实验前，所有动物进行空腹血糖检测（空腹12小时），并测定其基础血糖。结果正常后方 可开始正式实验。糖负荷为测血糖前半小时腹腔注射，剂量为:20%葡萄糖水溶液，0.2ml/ 20g b. w.。然后再一次测定血糖的浓度。血糖相对于基础血糖的变化值用来评价其药效。血 糖的浓度变化测定是用葡萄糖氧化酶试剂盒测定小鼠尾静脉血的血糖。所有动物于实验前 一天下午5:00腹腔注射糖溶液，第二天上午9:00接受血糖测定。艾塞纳肽溶液组(皮下注射 给药），在每次糖负荷之前，剂量为〇. 〇25yg/20g;艾塞纳肽微球组的四个剂量分别为:6.25μ g/20g、12 · 5yg/20g、25yg/20g、和 50yg/20g。生理盐水组为 O · 2ml/20g 的生理盐水。为 了评估 用这种方法制备的艾塞纳肽微球的药效学，我们选择了含有6.06%的Mg(OH)2艾塞纳肽微 球对C57小鼠皮下给药。如图3所示，在没有给药前，所有组的基础血糖没有显著的差异，然 而每组糖负荷后，微球组，10天后，血糖降低的多比溶液组的多。微球中含有艾塞纳肽剂量 为2.5yg和5yg的组，可以达到17天降糖效果。当剂量增加到10yg/20g时，调节血糖的水平可 以到达20天。
[00611 艾塞那肽在SD大鼠血浆浓度
[0062]艾塞那肽的药动学用雄性SD大鼠评价。SD大鼠接受单针皮下注射艾塞那肽微球， 助悬液为2mg/ml/kg的CMC-Na和甘露醇；均匀分散的微球在2分钟内注射完。血样的采取采 用含有甘素钠的真空采血管进行尾静脉取血;采血时间点为:给药前、给药4小时后、和1、3、 5、7、10、13、16、20天。然后把血样用500(^的离心力进行离心，收集血浆样品，并把血浆样品 储存在-20 °C的冰箱，待分析其含艾塞那肽的浓度。用Exendin-4的ELISA试剂盒测定血液中 艾塞那肽的浓度(Ek-070-94,凤凰制药，美国）。艾塞那肽的标准曲线的根基试剂盒提供要 求建立用10%大鼠血浆进行稀释，进行测定。如图4显示艾塞纳肽微球经(含有6.06%的Mg (0H) 2，剂量为2mg/kg)皮下注射后在SD大鼠体内中的血药浓度曲线。艾塞那肽的血浆浓度 迅速升高，在4小时内达到22.7ng/ml，随后艾塞那肽的浓度保持22.7ng/ml 1以上，直到16 天。在第13天Cmax仍然达到57. lng/ml，是不少于平均的血衆浓度的3倍。
【主权项】
1. 一种处于微球形式的用以包封并控释或缓释一种或多种治疗物质的组合物，其包含 至少一种治疗成分、辅助剂以及包封所述一种或多种治疗成分和所述辅助剂的生物可降解 聚合物。2. 权利要求1所述的处于微球形式的组合物，其中所述一种或多种治疗成分为肽、分子 量不超过10K的蛋白或其他亲水性成分。3. 权利要求1所述的处于微球形式的组合物，其中所述辅助剂为溶解度依pH的不同而 变化的pH敏感剂。4. 权利要求1所述的处于微球形式的组合物，其中所述生物可降解聚合物是可用于人 体的那些生物可降解聚合物。5. 权利要求1所述的处于微球形式的组合物，其中所述一种或多种治疗成分和所述辅 助剂处于直径小于ΙΟμπι、最好约Ιμπι的细粒的形式，同时所述生物可降解聚合物包封。6. 权利要求2所述的处于微球形式的组合物，其中所述肽选自艾塞那肽、艾塞那肽类似 的GLP-1受体激动剂、降钙素、亮丙瑞林、曲普瑞林、奥曲肽以及以上的类似物。7. 权利要求3所述的处于微球形式的组合物，其中所述pH敏感剂选自Mg (0Η) 2、MgC03、Ζη (OH)2&ZnC〇3。8. 权利要求4所述的处于微球形式的组合物，其中所述生物可降解聚合物选自聚乳酸-聚羟基乙酸(PLGA)、聚乳酸(PLA)、聚环己内脂(PCL)、或CBZ-聚伪丝氨酸。9. 一种用于制备权利要求1所述的处于微球形式的组合物的方法，其步骤含有： a) 将一种或多种治疗成分(如艾塞那肽)溶解在极性溶剂(溶剂1)中； b) 将辅助剂(如pH敏感剂)溶于水中； c) 将步骤a)中制备的溶液和步骤b)中制备的溶液以任意顺序与低极性溶剂(溶剂2,如 溶解了生物可降解聚合物的二氯甲烷)混合，以沉淀所述一种或多种治疗成分和所述辅助 剂； d) 将步骤c)中制备的混悬液分散到水相连续相中，以形成胚胎微球； e) 从聚合物相中除去有机溶剂(溶剂1与溶剂2)，使步骤d)中形成的胚胎微球固化。10. 权利要求9所述的方法，其中所述一种或多种为肽、分子量不超过10K的蛋白或其他 亲水性成分。11. 权利要求9所述的方法，其中所述辅助剂为溶解度依pH的不同而变化的pH敏感剂。12. 权利要求9所述的方法，其中所述生物可降解聚合物是可用于人体的那些生物可降 解聚合物。13. 权利要求9所述的方法，其中所述一种或多种治疗成分和所述辅助剂的沉淀的尺寸 在直径上小于l〇ym并且最好约Ιμπι。14. 权利要求9所述的方法，其中步骤c)的顺序可以为以下任意一种：1)将步骤a)中制 备的溶液加入溶液2中；2)将溶液2加入步骤a)制备的溶液中；3)将步骤b)中制备的溶液加 入溶液2中；4)将溶液2加入步骤b)中制备的溶液中；或者将上述液体一起混合。15. 权利要求9所述的方法，其中所述极性溶剂（溶液1)为DMS0或DMF，并且低极性溶剂 为二氯甲烷或乙酸乙酯。16. 权利要求10所述的方法，其中所述肽选自艾塞那肽、艾塞那肽类似的GLP-1受体激 动剂、降钙素、亮丙瑞林、曲普瑞林、奥曲肽、及以上的类似物。17. 权利要求11所述的方法，其中所述pH敏感剂选自Mg (OH) 2、MgC〇3、Zn (OH) 2及ZnC〇3。18. 权利要求12所述的方法，其中所述生物可降解聚合物选自聚乳酸-聚羟基乙酸 (PLGA)、聚乳酸(PLA)、聚环己内脂(PCL)、或CBZ-聚伪丝氨酸。
【文档编号】A61J3/00GK105979934SQ201280057268
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2012年12月5日
【发明人】金拓, 胡振华, 袁伟恩
【申请人】金拓