一种用于绣球菌栽培的基质的制作方法

文档序号:17690216发布日期:2019-05-17 20:59阅读:434来源:国知局
本发明涉及一种菌类培养载体,更具体的说是涉及一种用于绣球菌栽培的基质。
背景技术
:绣球菌,又名绣球菇,拉丁学名为Sparassiscrispa,是非褶孔菌目、绣球菌科、绣球菌属。子实体中等至大形,肉质,由一个粗壮的柄上发出许多分枝,枝端形成无数曲折的瓣片,形似巨大的绣球而得名。因其具有超高的激活免疫能力,在日本有“梦幻神奇菇”之称。普通蘑菇生长在阴面,而绣球菇每天需要10h以上的照射,是世界上唯一的“阳光蘑菇”。在欧美、日本极为畅销,价格昂贵。绣球菌还因为含有大量的β葡聚糖,抗氧化物质,维生素C、维生素E,做为美容产品的有效成分,对祛除黑色素沉淀等肌肤问题具有良好的功效。现有技术中,大多通过无土栽培来实现对绣球菌的培养,无土栽培的主要载体是琼脂,而琼脂对于绣球菌来说无法很好地起到锁定营养物质的能力,使得绣球菌长势不佳。技术实现要素:针对现有技术存在的不足,本发明的目的在于提供一种替代琼脂的用于绣球菌栽培的基质。为实现上述目的,本发明提供了如下技术方案:一种用于绣球菌栽培的基质,包括下列重量份组成:载体:100份;营养物质:60份;水:50份;所述载体包括下列重量份组成:丙烯酸单体100份草酰胺:10份对乙氧基苯甲酰胺:5份4-过氧羟基环磷酰胺:5份磷酸三(丁氧基乙基)酯:5份交联剂:1份引发剂:0.5份补强剂:2份马来酰胺酸:5份磷酸烯醇丙酮酸:3份;所述营养物质包括下列重量份组成:淀粉:30份葡聚糖:10份维生素B1:0.05份磷酸铵:0.5份蛋白胨:5份D-葡萄糖-6-磷酸:0.5份葡萄糖酸内酯:5份氨基葡萄糖硫酸钠盐:0.5份EDTA二钠钙:0.1份丙酸钠:5份二羟乙基甘氨酸钠:0.5份。作为本发明的进一步改进:所述交联剂为1,1-环己基二乙酸单酰胺、N,N'-二(2-羟乙基)乙二酰胺、三乙酰氧基(乙基)硅烷的混合物。作为本发明的进一步改进:所述交联剂为质量比为2:1:1的1,1-环己基二乙酸单酰胺、N,N'-二(2-羟乙基)乙二酰胺、三乙酰氧基(乙基)硅烷的混合物。作为本发明的进一步改进:所述引发剂为过硫酸钾。作为本发明的进一步改进:所述补强剂为N-苯基甲磺酰胺。作为本发明的进一步改进:包括下述方法制备:步骤一:按照上述配方称取;步骤二:配制pH为6.0~7.2的丙烯酸钠溶液,通过氢氧化钠进行调节;步骤三:添加全部草酰胺、对乙氧基苯甲酰胺、4-过氧羟基环磷酰胺混合均匀进行预热,升温至30℃,保温30分钟;步骤四:加入二分之一的交联剂、全部的引发剂,升温至60℃进行初步聚合1小时;步骤五:加入剩余的交联剂以及补强剂、马来酰胺酸、磷酸烯醇丙酮酸继续在60℃下反应40分钟,得到聚合物;步骤六:将步骤五中得到的聚合物与磷酸三(丁氧基乙基)酯混合,在40℃条件下保温30分钟得到载体。作为本发明的进一步改进:所述基质的制备方法为:将营养物质与水进行混合,之后再将载体浸泡入带有营养物质的水溶液中通过载体将整个溶液吸收,得到培养基质。本发明在载体的主体的选择上,选用丙烯酸单体为主体,聚丙烯酸为常用的载体材料,具有较好的吸水性能,以及本身具有较好的惰性,不会较为稳定,不会对菌类造成损害。之后草酰胺、对乙氧基苯甲酰胺、4-过氧羟基环磷酰胺的混合物加入其中,在30℃下进行保温,这一步主要是为了对草酰胺、对乙氧基苯甲酰胺、4-过氧羟基环磷酰胺表面的活性基团进行活化,在之后加入交联剂和引发剂之后,能够直接进行反应,使得反应时间缩短,提高工作效率。草酰胺、对乙氧基苯甲酰胺的加入主要是为了调节丙烯酸的交联结构,在交联剂加入后,能够使得草酰胺、对乙氧基苯甲酰胺与交联剂一起与丙烯酸形成三维网状结构,使得交联的效率提高,能够得到有相对形状的载体,同时加入的4-过氧羟基环磷酰胺同样能够参与到交联反应中去,同时4-过氧羟基环磷酰胺表面带有的基团能够对于后期真菌需要的营养物质具有较好的锁定性,防止营养物质在载体中流失。同时草酰胺、对乙氧基苯甲酰胺也有助于4-过氧羟基环磷酰胺聚合在整体载体上,使得4-过氧羟基环磷酰胺上的活性基团能够稳定在整个在体上。交联剂的选择上,选用1,1-环己基二乙酸单酰胺、N,N'-二(2-羟乙基)乙二酰胺、三乙酰氧基(乙基)硅烷的混合物,通过三者的复配使用,能够使得载体能够更加充分地对营养物质的锁定,能够更好地与丙烯酸、草酰胺、对乙氧基苯甲酰胺、4-过氧羟基环磷酰胺发生交联,保证整个载体结构的稳定性。随后加入的马来酰胺酸、磷酸烯醇丙酮酸主要是起到对最终载体起到一个定型作用,使得的内部交联更加紧密。马来酰胺酸能够进一步与载体聚合,使得载体能够具有一个较好的韧性,磷酸烯醇丙酮酸能够进一步交联进载体,进一步促进载体对营养物质的锁定效果,从而促进真菌生长。补强剂的加入,主要是对整个载体起到一个补强作用,避免了载体材料过于松散。具有一定强度,能够适应逐渐长大的真菌的栽培。最后加入磷酸三(丁氧基乙基)酯能够对整个载体体系粘度做一个调整,同时磷酸三(丁氧基乙基)酯本身也具有较好的锁定营养物质的作用。在营养物质的选择上,选用淀粉、葡聚糖作为主要的碳源,作为绣球菌生长所需的必备提供碳源的物质,蛋白胨、维生素B1也提供了日常所需。磷酸铵、D-葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖酸内酯起到一种调节剂的作用,能够促进营养物质和载体的结合,减少了营养在载体中的流失,提高绣球菌的产率。氨基葡萄糖硫酸钠盐、EDTA二钠钙、丙酸钠、二羟乙基甘氨酸钠由于分子结构上与载体具有相似性,能够提供微量元素的同时,还能够提高微量元素在载体中的稳定性。具体实施方式实施例:一种用于绣球菌栽培的基质,包括下列重量份组成:载体:100份;营养物质:60份;水:50份;所述载体包括下列重量份组成:丙烯酸单体100份草酰胺:10份对乙氧基苯甲酰胺:5份4-过氧羟基环磷酰胺:5份磷酸三(丁氧基乙基)酯:5份交联剂:1份引发剂:0.5份补强剂:2份马来酰胺酸:5份磷酸烯醇丙酮酸:3份;所述营养物质包括下列重量份组成:淀粉:30份葡聚糖:10份维生素B1:0.05份磷酸铵:0.5份蛋白胨:5份D-葡萄糖-6-磷酸:0.5份葡萄糖酸内酯:5份氨基葡萄糖硫酸钠盐:0.5份EDTA二钠钙:0.1份丙酸钠:5份二羟乙基甘氨酸钠:0.5份。所述交联剂为1,1-环己基二乙酸单酰胺、N,N'-二(2-羟乙基)乙二酰胺、三乙酰氧基(乙基)硅烷的混合物。所述交联剂为质量比为2:1:1的1,1-环己基二乙酸单酰胺、N,N'-二(2-羟乙基)乙二酰胺、三乙酰氧基(乙基)硅烷的混合物。所述引发剂为过硫酸钾。所述补强剂为N-苯基甲磺酰胺。包括下述方法制备:步骤一:按照上述配方称取;步骤二:配制pH为6.0~7.2的丙烯酸钠溶液,通过氢氧化钠进行调节;步骤三:添加全部草酰胺、对乙氧基苯甲酰胺、4-过氧羟基环磷酰胺混合均匀进行预热,升温至30℃,保温30分钟;步骤四:加入二分之一的交联剂、全部的引发剂,升温至60℃进行初步聚合1小时;步骤五:加入剩余的交联剂以及补强剂、马来酰胺酸、磷酸烯醇丙酮酸继续在60℃下反应40分钟,得到聚合物;步骤六:将步骤五中得到的聚合物与磷酸三(丁氧基乙基)酯混合,在40℃条件下保温30分钟得到载体。所述基质的制备方法为:将营养物质与水进行混合,之后再将载体浸泡入带有营养物质的水溶液中通过载体将整个溶液吸收,得到培养基质。将绣球菌菌种(保藏编号:ACCC51488,购自中国农业微生物菌种资源库)接种于马铃薯固体培养基(PDA)上活化,培养温度25-28℃,培养时间14天。按10%的接种量接种至实施例和对比例制备的基质中,在自然pH值条件下,装瓶,然后在25℃,转速150rpm,自然光照条件下进行振荡培养20d,6000rpm离心10分钟,去掉上清液,得到绣球菌菌丝体,测定其产率。产率实施例8.6g/L本发明在载体的主体的选择上,选用丙烯酸单体为主体,聚丙烯酸为常用的载体材料,具有较好的吸水性能,以及本身具有较好的惰性,不会较为稳定,不会对菌类造成损害。之后草酰胺、对乙氧基苯甲酰胺、4-过氧羟基环磷酰胺的混合物加入其中,在30℃下进行保温,这一步主要是为了对草酰胺、对乙氧基苯甲酰胺、4-过氧羟基环磷酰胺表面的活性基团进行活化,在之后加入交联剂和引发剂之后,能够直接进行反应,使得反应时间缩短,提高工作效率。草酰胺、对乙氧基苯甲酰胺的加入主要是为了调节丙烯酸的交联结构,在交联剂加入后,能够使得草酰胺、对乙氧基苯甲酰胺与交联剂一起与丙烯酸形成三维网状结构,使得交联的效率提高,能够得到有相对形状的载体,同时加入的4-过氧羟基环磷酰胺同样能够参与到交联反应中去,同时4-过氧羟基环磷酰胺表面带有的基团能够对于后期真菌需要的营养物质具有较好的锁定性,防止营养物质在载体中流失。同时草酰胺、对乙氧基苯甲酰胺也有助于4-过氧羟基环磷酰胺聚合在整体载体上,使得4-过氧羟基环磷酰胺上的活性基团能够稳定在整个在体上。交联剂的选择上,选用1,1-环己基二乙酸单酰胺、N,N'-二(2-羟乙基)乙二酰胺、三乙酰氧基(乙基)硅烷的混合物,通过三者的复配使用,能够使得载体能够更加充分地对营养物质的锁定,能够更好地与丙烯酸、草酰胺、对乙氧基苯甲酰胺、4-过氧羟基环磷酰胺发生交联,保证整个载体结构的稳定性。随后加入的马来酰胺酸、磷酸烯醇丙酮酸主要是起到对最终载体起到一个定型作用,使得的内部交联更加紧密。马来酰胺酸能够进一步与载体聚合,使得载体能够具有一个较好的韧性,磷酸烯醇丙酮酸能够进一步交联进载体,进一步促进载体对营养物质的锁定效果,从而促进真菌生长。补强剂的加入,主要是对整个载体起到一个补强作用,避免了载体材料过于松散。具有一定强度,能够适应逐渐长大的真菌的栽培。最后加入磷酸三(丁氧基乙基)酯能够对整个载体体系粘度做一个调整,同时磷酸三(丁氧基乙基)酯本身也具有较好的锁定营养物质的作用。在营养物质的选择上,选用淀粉、葡聚糖作为主要的碳源,作为绣球菌生长所需的必备提供碳源的物质,蛋白胨、维生素B1也提供了日常所需。磷酸铵、D-葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖酸内酯起到一种调节剂的作用,能够促进营养物质和载体的结合,减少了营养在载体中的流失,提高绣球菌的产率。氨基葡萄糖硫酸钠盐、EDTA二钠钙、丙酸钠、二羟乙基甘氨酸钠由于分子结构上与载体具有相似性,能够提供微量元素的同时,还能够提高微量元素在载体中的稳定性。以上所述仅是本发明的优选实施方式,本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例,凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。应当指出,对于本
技术领域
的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理前提下的若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。当前第1页1 2 3 
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