本发明属于食用真菌栽培
技术领域：
，具体涉及一种人工栽培华美牛肝菌的方法。
背景技术：
：华美牛肝菌(boletusspeciosus)又名红见手，是云南省资源较丰富的一种野生食用菌，味道鲜美，每年发生于秋季,是一项大宗林特产品，在海拔8oom以上的马尾松林中都有分布。营养价值较高,含有丰富的矿质元素及氨基酸组分。华美牛肝菌作为一种外生菌根菌，其菌根结构是长期协同进化的结果，生态条件、营养方式以及子实体分化发育的条件尚不明确，而且由于华美牛肝菌的菌丝体缺乏分解木质素、纤维素、半纤维素的酶类，对营养成分需求苛刻，导致其菌种分离培养以及菇体人工培养非常困难，尽管世界各国已投入大量的人力、物力对其进行引种驯化和人工栽培的研究，但目前所采集销售的美味牛肝菌仍完全依赖于野生资源，尚未有人工成功培育出子实体的报道。技术实现要素：为解决现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于提供一种可以促进华美牛肝菌对营养成分吸收的人工栽培方法，满足当前对华美牛肝菌的需求，缓解对野生自然资源的压力，保护生态，同时为华美牛肝菌的商业化栽培奠定基础。为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：一种人工栽培华美牛肝菌的方法，包括以下步骤：(1)菌棒培养，其中菌棒原料包括以下重量百分比的组分：马尾松木屑70-80份，米糠15-25份，玉米粉30-40份，纤维素酶0.6-1.0份，kh2po46-10份，mgso45-10份；(2)制备覆土材料，取20-60目的无菌土壤，加入6-9％的有机肥，拌匀后暴晒3-5d即得覆土材料，暴晒期间每2h翻堆1次，保持土壤含水量65-80％；(3)覆土培养出菇，于菌棒表面覆盖上4-7cm厚的覆土材料，置于温室大棚，保持温室大棚温度16-24℃、湿度75-85％、光照强度100-750lx直至覆土层表面冒出华美牛肝菌子实体幼蕾；(4)分蕾覆土培养出菇，将菌棒上华美牛肝菌子实体幼蕾插入铺有覆土材料的温室大棚的培养床中，幼蕾间间隔10-15cm，保持温室大棚温度23-25℃、湿度75-85％、光照强度100-750lx，每2d喷洒0.2-0.3％的纤维素酶液，直至华美牛肝菌子实体幼蕾发育成熟。在其中一个实施例，所述方法步骤(1)菌棒制备方法为按重量份比准确称取米糠、玉米粉，均匀拌入马尾松木屑中，将kh2po4、mgso4用适量的水溶解后喷洒入马尾松木屑堆，含水量为55-65％，ph为4.8-5.8，混匀后分装于菌种袋中，于1-1.5kg/cm2下灭菌，冷却后将相应重量份比的纤维素酶溶于华美牛肝菌液体菌种中并接种于菌种袋培养，待菌丝体长满菌袋即得菌棒。在其中一个实施例，所述灭菌方法为环氧乙烷气体灭菌法、湿热灭菌法或干热灭菌法。在其中一个实施例，所述方法步骤(1)中菌棒原料包括以下重量百分比的组分：马尾松木屑73-78份，米糠18-22份，玉米粉32-37份，纤维素酶0.7-0.9份，kh2po47-9份，mgso46-9份。在其中一个实施例，所述方法步骤(1)中菌棒原料包括以下重量百分比的组分：马尾松木屑75份，米糠20份，玉米粉35份，纤维素酶0.8份，kh2po48份，mgso47.5份。在其中一个实施例，所述方法步骤(2)的土壤为菜园土、灰沙土或紫色土。在其中一个实施例，所述方法步骤(2)的有机肥为兔粪、木薯渣或菜籽饼。与现有技术相比，本发明在菌棒原料中添加纤维素酶，可将菌棒原料中的纤维素转化成简单糖，克服华美牛肝菌菌丝体因缺乏分解纤维素、半纤维素的酶类而无法充分利用营养成分导致菇体难以成熟的缺陷，同时在培养过程中及时补充纤维素酶液，最终提高了华美牛肝菌对菌棒营养成分的利用率；增加了菌袋上华美牛肝菌子实体幼蕾的数量；满足当前对华美牛肝菌的需求，缓解对野生自然资源的压力，保护生态，同时为华美牛肝菌的商业化栽培奠定基础。具体实施方式为使本
技术领域：
的技术人员能更好地理解本发明的技术方案，下面结合实施例对本发明技术方案进行详细说明。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。1.菌棒原料配方实施例1马尾松木屑70份，米糠15份，玉米粉30份，纤维素酶0.6份，kh2po46份，mgso45份。实施例2马尾松木屑73份，米糠18份，玉米粉32份，纤维素酶0.7份，kh2po47份，mgso46份。实施例3马尾松木屑75份，米糠20份，玉米粉35份，纤维素酶0.8份，kh2po48份，mgso47.5份。实施例4马尾松木屑78份，米糠22份，玉米粉37份，纤维素酶0.9份，kh2po49份，mgso49份。实施例5马尾松木屑80份，米糠25份，玉米粉40份，纤维素酶1.0份，kh2po410份，mgso410份。对比例1马尾松木屑75份，米糠20份，玉米粉35份，kh2po48份，mgso47.5份。按照实施例1-5、对比例1的配方，菌棒可通过以下方法制备：按重量份比准确称取米糠、玉米粉，均匀拌入马尾松木屑中，将kh2po4、mgso4用适量的水溶解后喷洒入马尾松木屑堆，含水量为55-65％，ph为4.8-5.8，混匀后分装于菌种袋中，于1-1.5kg/cm2下环氧乙烷气体灭菌法、湿热灭菌法或干热灭菌法，冷却后将相应重量份比的纤维素酶溶于华美牛肝菌液体菌种中并接种于菌种袋培养，待菌丝体长满菌袋即得菌棒。2.华美牛肝菌的人工栽培实施例6(1)按实施例1配方所得菌棒培养至菌丝体长满菌袋；(2)制备覆土材料，取20目的无菌菜园土，加入6％的兔粪，拌匀后暴晒3d即得覆土材料，暴晒期间每2h翻堆1次，保持土壤含水量65％；(3)覆土培养出菇，于菌棒表面覆盖上4cm厚的覆土材料，置于温室大棚，保持温室大棚温度16℃、湿度75％、光照强度100lx直至覆土层表面冒出华美牛肝菌子实体幼蕾；(4)分蕾覆土培养出菇，将菌棒上华美牛肝菌子实体幼蕾插入铺有覆土材料的温室大棚的培养床中，幼蕾间间隔10cm，保持温室大棚温度23℃、湿度75％、光照强度100lx，每2d喷洒0.2％的纤维素酶液，直至华美牛肝菌子实体幼蕾发育成熟。实施例7(1)按实施例3配方所得菌棒培养至菌丝体长满菌袋；(2)制备覆土材料，取40目的无菌菜园土、灰沙土或紫色土，加入7.5％的木薯渣，拌匀后暴晒4d即得覆土材料，暴晒期间每2h翻堆1次，保持土壤含水量72.5％；(3)覆土培养出菇，于菌棒表面覆盖上5.5cm厚的覆土材料，置于温室大棚，保持温室大棚温度20℃、湿度80％、光照强度425lx直至覆土层表面冒出华美牛肝菌子实体幼蕾；(4)分蕾覆土培养出菇，将菌棒上华美牛肝菌子实体幼蕾插入铺有覆土材料的温室大棚的培养床中，幼蕾间间隔12.5cm，保持温室大棚温度24℃、湿度80％、光照强度425lx，每2d喷洒0.25％的纤维素酶液，直至华美牛肝菌子实体幼蕾发育成熟。实施例8(1)按实施例5配方所得菌棒培养至菌丝体长满菌袋；(2)制备覆土材料，取60目的无菌菜园土、灰沙土或紫色土，加入9％的兔粪、木薯渣或菜籽饼，拌匀后暴晒5d即得覆土材料，暴晒期间每2h翻堆1次，保持土壤含水量80％；(3)覆土培养出菇，于菌棒表面覆盖上7cm厚的覆土材料，置于温室大棚，保持温室大棚温度24℃、湿度85％、光照强度750lx直至覆土层表面冒出华美牛肝菌子实体幼蕾；(4)分蕾覆土培养出菇，将菌棒上华美牛肝菌子实体幼蕾插入铺有覆土材料的温室大棚的培养床中，幼蕾间间隔15cm，保持温室大棚温度25℃、湿度85％、光照强度750lx，每2d喷洒0.3％的纤维素酶液，直至华美牛肝菌子实体幼蕾发育成熟。对比例2(1)按对比例1配方所得菌棒培养至菌丝体长满菌袋；(2)制备覆土材料，取40目的无菌菜园土、灰沙土或紫色土，加入7.5％的木薯渣，拌匀后暴晒4d即得覆土材料，暴晒期间每2h翻堆1次，保持土壤含水量72.5％；(3)覆土培养出菇，于菌棒表面覆盖上5.5cm厚的覆土材料，置于温室大棚，保持温室大棚温度20℃、湿度80％、光照强度425lx直至覆土层表面冒出华美牛肝菌子实体幼蕾；(4)分蕾覆土培养出菇，将菌棒上华美牛肝菌子实体幼蕾插入铺有覆土材料的温室大棚的培养床中，幼蕾间间隔12.5cm，保持温室大棚温度24℃、湿度80％、光照强度425lx，每2d喷洒0.25％的纤维素酶液，直至华美牛肝菌子实体幼蕾发育成熟。因菌棒原料的营养成分中纤维素居多，以纤维素的利用率代表菌棒营养成分的利用率。采用比色法测定实施例1、3、5、对比例1菌棒中纤维素的初始含量及实施例6-8、对比例2中华美牛肝菌子实体幼蕾长出后菌棒中的纤维素含量，结果见表1。表1菌棒纤维素含量变化表菌棒来源初始含量/％幼蕾长出后含量/％纤维素利用率/％实施例140.316.758.56实施例347.612.673.53实施例552.320.960.03对比例147.526.843.58从表1结果可知添加有纤维素酶的实施例1、3、5的纤维素利用率显著高于未添加纤维素酶的对比例1，可见纤维素酶的添加确实提高了华美牛肝菌对菌棒营养成分的利用率。统计实施例6-8、对比例2菌袋中华美牛肝菌子实体幼蕾的平均数量，结果见表2。表2实施例6-8、对比例2菌袋中华美牛肝菌子实体幼蕾的平均数量菌袋来源子实体幼蕾数(个)实施例626实施例728实施例826对比例218从表2可知添加有纤维素酶的实施例6-8的子实体幼蕾数显著高于未添加纤维素酶的对比例2，可见纤维素酶的添加能增加菌袋上华美牛肝菌子实体幼蕾的数量。显然，上述8个实施例仅是本发明的部分实施例，而不是全部实施例。基于本发明的启示，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本方面所保护的范围。当前第1页12