本发明涉及叶面肥领域，尤其涉及一种含鱼蛋白氨基酸的叶面肥及其制备方法。
背景技术：
：鱼蛋白氨基酸在种植中使用较少，但其在植物生长促进中的研究已经被人们所认识。寡糖在农业生产应用中，不仅能使作物长势好，有稳定而显著的增收效果，还可作为土壤改良剂，尤其是其在抑制植物病害方面已逐渐成为人们研究的热点。大量研究表明，寡糖可以诱导植物产生广谱的抗性、增强植物的自身防卫能力、抑制多种植物病原微生物的生长，而且其无毒并可为微生物降解，对环境不会产生污染，这使其作为一种新型的绿色农药在农业生产中发挥重要的作用。当前农业及水产品加工生产中，果渣及鱼骨、虾壳、蟹壳等加工下脚料数量巨大，可以作为生产寡糖和氨基酸的生产原料，制成的鱼蛋白氨基酸水溶肥，含有丰富的寡糖和可溶性矿物质等营养成分，而且鱼蛋白氨基酸和寡糖的配合使用，对于植物生长和土壤改良效果显著。当前技术中关于鱼蛋白氨基酸在农业中的使用较少，但是寡糖在肥料上的应用较多，如专利号为cn201610587239.2的一种分级酶解法制备含寡糖海藻有机肥的方法，将新鲜的海洋藻类植物洗净、除杂、浸泡、磨浆，并制备酶溶液，将酶溶液分次加入到海藻底料中，实现分级酶解得到含有寡糖的有机肥，但是其制作中缺少多种有机质的配合使用，难以发挥出寡糖的土壤活性作用；又如专利号为cn201610098115.8的一种能增强植物抗性的液体复合肥、其制备方法及应用，采用海藻酸钠寡糖、尿素硝酸铵溶液、磷酸二氢钾、微肥和助剂，使得液体复合肥具有缓解小麦多种胁迫和促进植株生长的双重功效，但是缺少微生物的使用，不能最大化发挥寡糖对植物的促进效果，所以，研究一种针对鱼蛋白氨基酸和寡糖配合全面促进植物生长的肥料极有必要。技术实现要素：本发明针对现有技术中的不足，提供了一种含鱼蛋白氨基酸的叶面肥，以促进植物生长，强化植株对土壤营养的吸收，该叶面肥由以下原料制备而成：以质量份计，寡糖提取物3-5份、果渣酶解液20-40份、水产品加工下脚料发酵液40-50份、吸附载体5-8份、活菌培养液10-15份、分散剂5-8份、水40-50份；所述寡糖提取物由质量比为15-18:6-9:1-2的虾壳、蟹壳、酿酒酵母培养物制备而成；所述酿酒酵母培养物由5-8份土豆、1-2份青苜蓿、0.3-0.5份酿酒酵母、15-18份清水发酵而成；所述果渣酶解液由80-90份猕猴桃果渣、30-50份苹果渣、30-50份地瓜果渣、15-18份橘子渣、5-8份纤维素酶、3-6份果胶酶制作而成；所述水产品加工下脚料发酵液由鱼贝类、水产品加工下脚料发酵制成；所述活菌培养液由质量比为1-2:3-5:10:50-80的光和细菌、固氮菌、蛋白胨、水混合而成。进一步的，所述吸附载体为由质量比为1:3-5的竹炭粉、膨润土粉混合而成；所述竹炭粉的细度为700-800目，所述膨润土粉的细度为1000-1200目。进一步的，所述分散剂为蔗糖酯。本发明所述的含鱼蛋白氨基酸的叶面肥，制备方法如下：（1）制备酿酒酵母培养物将土豆清洗打浆，把浆液和清水混合，在100-120℃下加热30-50min，冷却备用；将青苜蓿清洗磨浆，先用微波处理10-15s，然后在150-180℃下处理20-30s，冷却备用；将土豆混合液、青苜蓿浆液混合，加入酿酒酵母，在38-40℃活化10-15h；（2）壳聚糖酶解将虾壳、蟹壳在0.1-0.2个标准大气压、50-60℃下烘2-3h，然后粉碎为80-100目的粉末，将粉末和上一步骤制成的酿酒酵母培养物混合，调节混合物含水量为150-200%；在37-39℃下发酵3-5天；（3）壳聚糖的提取将上一步骤的发酵产物置于真空容器中，室温下，通入酸雾，直至容器内压强升高到8-10个标准大气压，保持压强50-60min，然后恢复至常压，通入粉末质量20-30倍的纯净水，搅拌均匀，调节混合液的氯化氢质量分数为10-12%，以500-600r/min的速率在40-50℃下搅拌30-50min，过滤，滤渣用清水冲洗3-5次，将滤渣置于其质量15-18倍的质量分数20-25%的氢氧化钠溶液中，在搅拌1-2h后过滤，用清水冲洗至中性干燥即可；所述酸雾由质量比为3-5:1-2:10-15的氯化氢、二氧化硫、二氧化碳混合而成；（4）寡糖的制备将壳聚糖粉末与清水按照质量比1:10-13混合，在混合液中通入臭氧，使得臭氧浓度为1-4mg/l，搅拌30-50min，然后用醋酸将溶液的ph调节至6-6.5，加入过氧化氢，使得溶液中过氧化氢浓度质量分数为15-18%，搅拌8-13h，过滤，将滤液减压干燥得到寡糖；（5）果渣酶解液制备将猕猴桃果渣、苹果渣、地瓜果渣、橘子渣混合，加水调节混合物含水量200-250%，用0.1-0.2mol/l的稀硫酸调节溶液ph为5-5.5，加入纤维素酶，果胶酶在40-45℃下搅拌3-5h，再将温度升高至50-55℃搅拌1-2h，常温静置6-8h用500-600目滤布过滤即可；（6）活菌培养液的制备将蛋白胨、水混合，在120-140℃下加热30-50min，冷却至常温，加入光和细菌、固氮菌在35-37℃活化5-8h即可；（7）叶面肥制备将寡糖提取物、分散剂、吸附载体、水混合得到混合物a；将果渣酶解液、水产品加工下脚料发酵液、活菌培养液混合，在30-35℃下发酵5-8天，加入混合物a搅拌均匀即可。本发明的有益效果：本发明通过微波处理青苜蓿，结合高温瞬间作用，增强高温对青苜蓿的消毒效果，减少酿酒酵母培养中杂菌的生长，提高酿酒酵母培养物的生物活性，使得后续壳聚糖的提取和寡糖制备能高效推进。本发明通过在壳聚糖提取中，使用酸雾增压，利用气体的强渗透性，在高压下使酸雾浸透到发酵产物中，可以在发酵产物中活细胞呼吸时浸透到细胞内部，由内而外的腐蚀细胞，破坏细胞膜和细胞壁，使得分解酶溶出，扩散到虾壳、蟹壳粉末周围，在水溶液中强化甲壳素的分解，进一步促进壳聚糖的形成与溶解，提高壳聚糖的得率，使得制备出来的寡糖具有更多的亲水性基团。本发明通过在壳聚糖混合液中用臭氧氧化，促进壳聚糖糖苷键的断裂，降低壳聚糖分子量，提高下一步形成寡糖的得率。本发明通过在制备寡糖提取物时使用酿酒酵母培养物发酵，利用酿酒酵母分泌物中甲壳素脱乙酰酶促进甲壳素的降解，提高壳聚糖在酸溶液中的溶出，而且，酿酒酵母发酵中产生的其他酶系和有机酸会促进虾壳、蟹壳粉末的钙质溶解、有机质的分散，将大分子物质碎片化，提高后续酸提取中的物质接触面积，提高壳聚糖的提取效率；通过酿酒酵母的酶解来提高壳聚糖制备的寡糖的生物亲和性，使得叶面肥相容性更好，易于叶面喷施，促进叶面肥在植株表面的凝结。本发明通过在酿酒酵母中使用青苜蓿，提高酿酒酵母培养物中的维生素、酶等生物活性物质含量，促进酿酒酵母的繁殖，减少酿酒酵母在虾壳、蟹壳粉末中的适应期，提高酿酒酵母的产酶量促进甲壳素的酶解。本发明通过在果渣中使用橘子渣，增加果渣中的有机酸含量，降低果渣的ph，提高果渣的酶解效果，促进叶面肥混合发酵时活菌培养液的扩繁，提高叶面肥中活菌多糖的含量，使得活菌多糖与分散剂协同作用，利于叶面肥整体稳定性的提升，增强叶面肥在植株表面的浸透效果，促进寡糖在细胞中的扩散，最大限度的发挥出寡糖的生长促进作用，而且果渣酶解后产生的可溶性有机质及矿物成分可以被植株表面吸收，促进植株细胞的分化和器官功能的完善，提高植株的免疫力。而且，当使用本发明叶面肥直接施用到土壤中时，可以促进土壤中益生菌群的形成，通过高活性的微生物群落增强土壤速效养分的形成，使得在寡糖促进的基础上通过充沛的营养供给进一步的促进植株生长，与寡糖形成协同作用。本发明使用水产品加工下脚料发酵液与活性菌体形成均匀的混配体系，通过发酵液中的菌群和其他菌群促进叶面肥中的矿物质电离，将蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，施用时利于分散进入叶面毛孔，加速植株表面对营养的吸收、可以促进叶的光合作用，提高植株叶绿素的含量，强化蒸腾作用，增强植株对土壤营养的吸收。本发明通过使用光合细菌，促进原料发酵中二氧化碳的同化，减少叶面肥中有机碳的流失，为其他微生物提供更多的有机碳源，吸收原料发酵中杂菌产生的中的胺类、硫化物等不利成分，促进溶液体系的的良性循环，为哈茨木霉、乳酸菌等目标微生物提供优良的环境，提高叶面肥生物活性，促进植株叶面光合物质的形成。而且施用到土壤中可以增强有益菌群对土壤致病微生物的抑制作用，刺激作物分泌氨基乙酰丙酸类似物，促进植株叶绿素的合成，增强寡糖对植株生长的促进作用，强化植株的物质积累，增强植株抵抗力。同时促进固氮菌的生长，提高土壤水肥的自持能力，在土壤中形成环境抗逆性强的微生态群落。使用本发明叶面肥种植60天的圆叶菠菜，单株鲜重超过10g，叶绿素含量超过23mg/g，菠菜心腐病感染率降低到0.05%以下，土壤细菌数量超过7.8×106个/g，土壤放线菌超过9×104个/g，脲酶含量超过0.6ug/（g·24h）。具体实施方式实施例1一种含鱼蛋白氨基酸的叶面肥，由以下原料制备而成：以质量份计，寡糖提取物3份、果渣酶解液20份、水产品加工下脚料发酵液40份、吸附载体5份、活菌培养液10份、分散剂5份、水40份；所述寡糖提取物由质量比为15:6:1的虾壳、蟹壳、酿酒酵母培养物制备而成；所述酿酒酵母培养物由5份土豆、1份青苜蓿、0.3份酿酒酵母、15份清水发酵而成；所述果渣酶解液由80份猕猴桃果渣、30份苹果渣、30份地瓜果渣、15份橘子渣、5份纤维素酶、3份果胶酶制作而成；所述吸附载体为由质量比为1:3的竹炭粉、膨润土粉混合而成；所述竹炭粉的细度为700目，所述膨润土粉的细度为1000目；所述活菌培养液由质量比为1:3:10:50的光和细菌、固氮菌、蛋白胨、水混合而成；所述分散剂为蔗糖酯；所述水产品加工下脚料发酵液由鱼贝类、水产品加工下脚料发酵制成，详细制作方法按照专利号cn201810521499.9鱼蛋白氨基酸水溶肥的方法中实施例1制作。本实施例所述的含鱼蛋白氨基酸的叶面肥，制备方法如下：（1）制备酿酒酵母培养物将土豆清洗打浆，把浆液和清水混合，在100℃下加热30min，冷却备用；将青苜蓿清洗磨浆，先用微波处理10s，然后在150℃下处理20s，冷却备用；将土豆混合液、青苜蓿浆液混合，加入酿酒酵母，在38℃活化10h；（2）壳聚糖酶解将虾壳、蟹壳在0.1个标准大气压、50℃下烘2h，然后粉碎为80目的粉末，将粉末和上一步骤制成的酿酒酵母培养物混合，调节混合物含水量为150%；在37℃下发酵3天；（3）壳聚糖的提取将上一步骤的发酵产物置于真空容器中，室温下，通入酸雾，直至容器内压强升高到8个标准大气压，保持压强50min，然后恢复至常压，通入粉末质量20倍的纯净水，搅拌均匀，调节混合液的氯化氢质量分数为10%，以500r/min的速率在40℃下搅拌30min，过滤，滤渣用清水冲洗3次，将滤渣置于其质量15倍的质量分数20%的氢氧化钠溶液中，在搅拌1h后过滤，用清水冲洗至中性干燥即可；所述酸雾由质量比为3:1:10的氯化氢、二氧化硫、二氧化碳混合而成；（4）寡糖的制备将壳聚糖粉末与清水按照质量比1:10混合，在混合液中通入臭氧，使得臭氧浓度为1mg/l，搅拌30min，然后用醋酸将溶液的ph调节至6，加入过氧化氢，使得溶液中过氧化氢浓度质量分数为15%，搅拌8h，过滤，将滤液减压干燥得到寡糖；（5）果渣酶解液制备将猕猴桃果渣、苹果渣、地瓜果渣、橘子渣混合，加水调节混合物含水量200%，用0.1mol/l的稀硫酸调节溶液ph为5，加入纤维素酶，果胶酶在40℃下搅拌3h，再将温度升高至50℃搅拌1h，常温静置6h用500目滤布过滤即可；（6）活菌培养液的制备将蛋白胨、水混合，在120℃下加热30min，冷却至常温，加入光和细菌、固氮菌在35℃活化5h即可；（7）叶面肥制备将寡糖提取物、分散剂、吸附载体、水混合得到混合物a；将果渣酶解液、水产品加工下脚料发酵液、活菌培养液混合，在30℃下发酵5天，加入混合物a搅拌均匀即可，其中。实施例2一种含鱼蛋白氨基酸的叶面肥，由以下原料制备而成：以质量份计，寡糖提取物5份、果渣酶解液40份、水产品加工下脚料发酵液50份、吸附载体8份、活菌培养液15份、分散剂8份、水50份；所述寡糖提取物由质量比为18:9:2的虾壳、蟹壳、酿酒酵母培养物制备而成；所述酿酒酵母培养物由8份土豆、2份青苜蓿、0.5份酿酒酵母、18份清水发酵而成；所述果渣酶解液由90份猕猴桃果渣、50份苹果渣、50份地瓜果渣、18份橘子渣、8份纤维素酶、6份果胶酶制作而成；所述竹炭粉的细度为800目，所述膨润土粉的细度为1000目；所述活菌培养液由质量比为1:3:10:80的光和细菌、固氮菌、蛋白胨、水混合而成；所述分散剂为蔗糖酯；所述水产品加工下脚料发酵液由鱼贝类、水产品加工下脚料发酵制成，详细制作方法按照专利号cn201810521499.9鱼蛋白氨基酸水溶肥的方法中实施例1制作。本实施例所述的含鱼蛋白氨基酸的叶面肥，制备方法如下：（1）制备酿酒酵母培养物将土豆清洗打浆，把浆液和清水混合，在120℃下加热50min，冷却备用；将青苜蓿清洗磨浆，先用微波处理15s，然后在180℃下处理30s，冷却备用；将土豆混合液、青苜蓿浆液混合，加入酿酒酵母，在40℃活化15h；（2）壳聚糖酶解将虾壳、蟹壳在0.2个标准大气压、60℃下烘3h，然后粉碎为100目的粉末，将粉末和上一步骤制成的酿酒酵母培养物混合，调节混合物含水量为200%；在39℃下发酵5天；（3）壳聚糖的提取将上一步骤的发酵产物置于真空容器中，室温下，通入酸雾，直至容器内压强升高到10个标准大气压，保持压强60min，然后恢复至常压，通入粉末质量30倍的纯净水，搅拌均匀，调节混合液的氯化氢质量分数为12%，以600r/min的速率在50℃下搅拌50min，过滤，滤渣用清水冲洗5次，将滤渣置于其质量18倍的质量分数25%的氢氧化钠溶液中，在搅拌2h后过滤，用清水冲洗至中性干燥即可；所述酸雾由质量比为5:2:15的氯化氢、二氧化硫、二氧化碳混合而成；（4）寡糖的制备将壳聚糖粉末与清水按照质量比1:13混合，在混合液中通入臭氧，使得臭氧浓度为4mg/l，搅拌50min，然后用醋酸将溶液的ph调节至6.5，加入过氧化氢，使得溶液中过氧化氢浓度质量分数为18%，搅拌13h，过滤，将滤液减压干燥得到寡糖；（5）果渣酶解液制备将猕猴桃果渣、苹果渣、地瓜果渣、橘子渣混合，加水调节混合物含水量250%，用0.2mol/l的稀硫酸调节溶液ph为5.5，加入纤维素酶，果胶酶在45℃下搅拌5h，再将温度升高至55℃搅拌2h，常温静置8h用-600目滤布过滤即可；（6）活菌培养液的制备将蛋白胨、水混合，在140℃下加热50min，冷却至常温，加入光和细菌、固氮菌在37℃活化8h即可；（7）叶面肥制备将寡糖提取物、分散剂、吸附载体、水混合得到混合物a；将果渣酶解液、水产品加工下脚料发酵液、活菌培养液混合，在35℃下发酵8天，加入混合物a搅拌均匀即可。实施例3一种含鱼蛋白氨基酸的叶面肥，由以下原料制备而成：以质量份计，寡糖提取物4份、果渣酶解液33份、水产品加工下脚料发酵液46份、吸附载体7份、活菌培养液13份、分散剂7份、水49份；所述寡糖提取物由质量比为18:6:1的虾壳、蟹壳、酿酒酵母培养物制备而成；所述酿酒酵母培养物由5份土豆、2份青苜蓿、0.3份酿酒酵母、18份清水发酵而成；所述果渣酶解液由90份猕猴桃果渣、30份苹果渣、50份地瓜果渣、15份橘子渣、8份纤维素酶、3份果胶酶制作而成；所述竹炭粉的细度为800目，所述膨润土粉的细度为1000目；所述活菌培养液由质量比为2:3:10:80的光和细菌、固氮菌、蛋白胨、水混合而成；所述分散剂为蔗糖酯；所述水产品加工下脚料发酵液由鱼贝类、水产品加工下脚料发酵制成，详细制作方法按照专利号cn201810521499.9鱼蛋白氨基酸水溶肥的方法中实施例1制作。本所述的含鱼蛋白氨基酸的叶面肥，制备方法如下：（1）制备酿酒酵母培养物将土豆清洗打浆，把浆液和清水混合，在111℃下加热50min，冷却备用；将青苜蓿清洗磨浆，先用微波处理15s，然后在150℃下处理30s，冷却备用；将土豆混合液、青苜蓿浆液混合，加入酿酒酵母，在40℃活化10h；（2）壳聚糖酶解将虾壳、蟹壳在0.2个标准大气压、50℃下烘3h，然后粉碎为100目的粉末，将粉末和上一步骤制成的酿酒酵母培养物混合，调节混合物含水量为150%；在39℃下发酵3天；（3）壳聚糖的提取将上一步骤的发酵产物置于真空容器中，室温下，通入酸雾，直至容器内压强升高到10个标准大气压，保持压强50min，然后恢复至常压，通入粉末质量30倍的纯净水，搅拌均匀，调节混合液的氯化氢质量分数为10%，以600r/min的速率在50℃下搅拌30min，过滤，滤渣用清水冲洗5次，将滤渣置于其质量18倍的质量分数20%的氢氧化钠溶液中，在搅拌2h后过滤，用清水冲洗至中性干燥即可；所述酸雾由质量比为5:1:10的氯化氢、二氧化硫、二氧化碳混合而成；（4）寡糖的制备将壳聚糖粉末与清水按照质量比1:13混合，在混合液中通入臭氧，使得臭氧浓度为4mg/l，搅拌30min，然后用醋酸将溶液的ph调节至6.5，加入过氧化氢，使得溶液中过氧化氢浓度质量分数为15%，搅拌13h，过滤，将滤液减压干燥得到寡糖；（5）果渣酶解液制备将猕猴桃果渣、苹果渣、地瓜果渣、橘子渣混合，加水调节混合物含水量250%，用0.1mol/l的稀硫酸调节溶液ph为5.5，加入纤维素酶，果胶酶在40℃下搅拌5h，再将温度升高至50℃搅拌2h，常温静置6h用500目滤布过滤即可；（6）活菌培养液的制备将蛋白胨、水混合，在140℃下加热30min，冷却至常温，加入光和细菌、固氮菌在37℃活化5h即可；（7）叶面肥制备将寡糖提取物、分散剂、吸附载体、水混合得到混合物a；将果渣酶解液、水产品加工下脚料发酵液、活菌培养液混合，在35℃下发酵5天，加入混合物a搅拌均匀即可。为验证本发明效果，设置如下对比例：对比例1与实施例1的区别是寡糖提取物制备中不加酿酒酵母培养物；对比例2与实施例1的区别是酿酒酵母培养物制备中不加青苜蓿；对比例3与实施例1的区别是果渣酶解液制备中不加橘子渣；对比例4与实施例1的区别是，同等干质量下，将水产品加工下脚料发酵液换成日照市赫洋工贸有限公司的鱼蛋白酶解氨基酸肥；对比例5与实施例1的区别是活菌培养液中不使用光和细菌；对比例6与实施例1的区别是制备方法中青苜蓿未经微波处理；对比例7与实施例1的区别是制备方法中壳聚糖提取未经酸雾处理；对比例8与实施例1的区别是寡糖制备中壳聚糖混合液未经臭氧处理；对比例9与实施例1的区别是寡糖由郑州康源化工产品有限公司提供的壳寡糖；对比例10与实施例1的区别是不使用寡糖提取物；对比例11与实施例1的区别是不使用分散剂；对比例12按照专利号cn201110203624.x的方案实施。试验例选择面积15亩的种植园，园内土壤营养成分差异不显著，将种植园分为15个区域，编为实验组1-3，对照组1-12，每组面积相同，园内统一规格种植圆叶菠菜，菠菜统一田间管理。在菠菜生长出3片真叶时，每隔十天用叶面肥稀释500倍，喷施植株叶面及根部土壤，喷施量为25kg/亩，实验组1-3喷施实施例1-3叶面肥，对照组1-12喷施对比例1-12叶面肥，各组间不产生相互影响，8周后采收菠菜，检测各组菠菜指标。实验结果：单株鲜重g叶绿素含量mg/g菠菜心腐病感染率土壤细菌数量（×106个/g）土壤放线菌数量（×104个/g）脲酶含量ug/（g·24h）实施例130.3524.360.03%7.8211.270.67实施例230.1123.770.01%9.219.810.75实施例330.9225.910.05%7.9610.330.61对比例125.4118.080.10%2.433.390.43对比例223.2517.370.18%2.874.070.39对比例324.7116.880.17%2.863.580.38对比例425.8917.560.11%3.243.450.34对比例526.0319.050.14%2.474.330.40对比例627.5920.500.09%5.936.180.55对比例726.4917.430.10%4.055.780.41对比例825.5718.720.13%5.974.100.47对比例928.0921.450.12%5.145.510.53对比例1025.0117.220.18%3.013.230.36对比例1126.3617.890.15%3.234.650.41对比例1223.0917.450.17%2.143.510.27由表可以看出，使用本发明叶面肥后圆叶菠菜的物质积累迅速，抵抗力增强，土壤活性显著增高。当前第1页12