专利名称：：一种血红蛋白在冷冻干燥工艺中的保护方法
技术领域：
：本发明涉及到血红蛋白冷冻千燥工艺中的优化工艺，尤其是一种血红蛋白在冷冻干燥工艺中的保护方法。(二)
背景技术：
：目前，由于溶液中的血红蛋白不稳定，在溶氧、光照下迅速自动氧化为高铁血红蛋白，进而失去携氧能力，冷冻干燥的血红蛋白较稳定，因此大多采用冷冻干燥的方法达到长期稳定保存的目的。但是冷冻干燥过程本身要导致大量高铁血红蛋白产生。现在，在冷冻干燥过程中控制高铁血红蛋白的增加的办法是在冻干前，对血红蛋白溶液脱氧，但是这种办法操作繁琐，很难保证脱氧彻底。(三)
发明内容本发明的发明目的是发明一种血红蛋白在冷冻干燥工艺中的保护方法，它通过在胎盘血红蛋白的冷冻千燥中，加入保护剂，并选用合适PH值，以得到。本发明的技术方案为一种血红蛋白在冷冻干燥工艺中的保护方法，其特征在于它包括以下步骤①在血红蛋白的冷冻干燥中，温度-30-6(TC，压强38mtorr,时间:1236小时，向血红蛋白溶液，浓度8.0—9.0g/100ml中加入糖类保护剂；②在4.08.2的范围内调整PH值；③得到高质量可以长期稳定保存的血红蛋白冻干粉。上述所说步骤①中的血红蛋白溶液可以是人胎盘血溶解液或过期库存人血溶解液。上述所说步骤①中加入的糖类保护剂为单糖或二糖。上述所说步骤①中加入的糖类保护剂为蔗糖、葡萄糖或者葡萄糖和蔗糖的混合物，优选蔗糖和葡萄糖的混合物；其中葡萄糖和蔗糖混合物中，葡萄糖和蔗糖的质量比为1:41:2。上述所说步骤①中所加糖类保护剂与血红蛋白溶液中所含血红蛋白的质量比不小于1:4。上述所说步骤①中血红蛋白的形态可以为氧合血红蛋白、脱氧血红蛋白或者它们的混合体，优选氧合血红蛋白。本发明的优越性在于通过加入保护剂，选用合适的PH值，对血红蛋白溶液进行冻干，操作简单方便；得到的纯化血红蛋白冻干粉，高铁血红蛋白值在5%以内；且长期冷藏，高铁血红蛋白无明显增加。具体实施例方式实施例l:--种血红蛋白在冷冻干燥工艺中的保护方法，其特征在于它包括以下步骤①在血红蛋白的冷冻干燥中，温度5(TC，压强5mtorr，时间24小时，向血红蛋白溶液，浓度8.0—9.0g/100ml中加入糖类保护剂；②调整PH值为7.2;③得到高质量可以长期稳定保存的血红蛋白冻千粉。上述所说步骤①中的血红蛋白溶液是人胎盘血溶解液。上述所说步骤①中加入的糖类保护剂为葡萄糖。上述所说步骤①中所加糖类保护剂与血红蛋白溶液中所含血红蛋白的质量比为1:4。上述所说步骤①中血红蛋白的形态为氧合血红蛋白和脱氧血红蛋白的混合体。实施例2:—种血红蛋白在冷冻干燥工艺中的保护方法，其特征在于它包括以下步骤①在血红蛋白的冷冻干燥中，温度50°C，压强5mtorr,时间24小时，向血红蛋白溶液，浓度8.0—9.0g/100ml中加入糖类保护剂；②调整PH值为7.2;③得到高质量可以长期稳定保存的血红蛋白冻千粉。上述所说步骤①中的血红蛋白溶液是人胎盘血溶解液。上述所说步骤①中加入的糖类保护剂为蔗糖。上述所说步骤①中所加糖类保护剂与血红蛋白溶液中所含血红蛋白的质量比为1:4。上述所说步骤①中血红蛋白的形态为氧合血红蛋白和脱氧血红蛋白的混合体。实施例3:—种血红蛋白在冷冻干燥工艺中的保护方法，其特征在于它包括以下步骤①在血红蛋白的冷冻干燥中，向血红蛋白溶液中加入糖类保护剂；②调整PH值为7.2;③得到高质量可以长期稳定保存的血红蛋白冻干粉。上述所说歩骤①中的血红蛋白溶液是人胎盘血溶解液。上述所说步骤①中加入的糖类保护剂为蔗糖和葡萄糖的混合物。上述所说步骤①中所加糖类保护剂与血红蛋白溶液中所含血红蛋白的质量比为1:4。上述所说步骤①中血红蛋白的形态为氧合血红蛋白和脱氧血红蛋白的混合体。实施例4:一种血红蛋白在冷冻干燥工艺中的保护方法，其特征在于它包括以下步骤①在血红蛋白的冷冻干燥中，向血红蛋白溶液中加入糖类保护剂；②调整ra值为7.2;③得到高质量可以长期稳定保存的血红蛋白冻干粉。上述所说步骤①中的血红蛋白溶液是人胎盘血溶解液。上述所说步骤①中加入的糖类保护剂为蔗糖。上述所说步骤①中所加糖类保护剂与血红蛋白溶液中所含血红蛋白的质量比为1:4。上述所说步骤①中血红蛋白的形态为氧合血红蛋白。实施例5:—种血红蛋白在冷冻干燥工艺中的保护方法，其特征在于它包括以下步骤①在血红蛋白的冷冻干燥中，向血红蛋白溶液中加入糖类保护剂；②调整ra值为8.0;③得到高质量可以长期稳定保存的血红蛋白冻千粉。上述所说步骤①中的血红蛋白溶液是人胎盘血溶解液。上述所说步骤①中加入的糖类保护剂为蔗糖和葡萄糖的混合物。上述所说步骤①中所加糖类保护剂与血红蛋白溶液中所含血红蛋白的质量比为1:4。上述所说步骤①中血红蛋白的形态为氧合血红蛋白和脱氧血红蛋白的混合体。本发明试验分析1、脱氧条件下，不同保护剂对高铁血红蛋白的影响50ml，7g/100ml，纯化血红蛋白溶液共3份，分别加入5%的蔗糖，5%葡萄糖，2.5%蔗糖+2.5%葡萄糖，通氮气抽真空脱氧，进行冷冻千燥。制冷室温度一46。C，压强5mttor，千燥时间24小时。得到冻千品的高铁血红蛋白值如下.-<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>2、不同PH对冻干后高铁血红蛋白的影响50ml，7g/100ml，纯化血红蛋白溶液共2份，一份调PH为7.2,另一份用磷酸氢二钠溶液PH为8.0，加2%葡萄糖/3%蔗糖，进行冷冻干燥。制冷室温度一46。C，压强5mttor，千燥时间24小时。得到冻干品的高铁血红蛋白值如下<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>3、不同血红蛋白形态对高铁影响50ml，7g/100ml，纯化血红蛋白溶液共2份，加入3%蔗糖，一份用抽真空，通氮脱氧，得氧合，脱氧的混合体；另一份不脱氧，即氧合血红蛋白形态。<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>权利要求1、一种血红蛋白在冷冻干燥工艺中的保护方法，其特征在于它包括以下步骤①在血红蛋白的冷冻干燥中，温度-30～-60℃，压强3～8mtorr，时间12～36小时，向血红蛋白溶液，浓度8.0-9.0g/100ml中加入糖类保护剂；②在4.0～8.2的范围内调整PH值；③得到高质量可以长期稳定保存的血红蛋白冻干粉。2、根据权利要求1所说的一种血红蛋白在冷冻干燥工艺中的保护方法，其特征在于所说步骤①中的血红蛋白溶液可以是人胎盘血溶解液或过期库存人血溶解液。3、根据权利要求1所说的一种血红蛋白在冷冻干燥工艺中的保护方法，其特征在于所说步骤①中加入的糖类保护剂为单糖或二糖。4、根据权利要求1所说的一种血红蛋白在冷冻干燥工艺中的保护方法，其特征在于所说歩骤①中加入的糖类保护剂为蔗糖、葡萄糖或者葡萄糖和蔗糖的混合物，优选蔗糖和葡萄糖的混合物；其中葡萄糖和蔗糖混合物中，葡萄糖和蔗糖的质量比为1:41:2。5、根据权利要求1所说的一种血红蛋白在冷冻干燥工艺中的保护方法，其特征在于所说步骤①中所加糖类保护剂与血红蛋白溶液中所含血红蛋白的质量比不小P1:4。6、根据权利要求1所说的一种血红蛋白在冷冻干燥工艺中的保护方法，其特征在于所说步骤①中血红蛋白的形态可以为氧合血红蛋白、脱氧血红蛋白或者它们的混合体，优选氧合血红蛋白。全文摘要一种血红蛋白在冷冻干燥工艺中的保护方法，其特征在于它包括以下步骤①在血红蛋白的冷冻干燥中，温度-30～-60℃，压强3～8mtorr，时间12～36小时，向血红蛋白溶液，浓度8.0-9.0g/100ml中加入糖类保护剂；②在4.0～8.2的范围内调整pH值；③得到高质量可以长期稳定保存的血红蛋白冻干粉。其优越性在于通过加入保护剂，选用合适的pH值，对血红蛋白溶液进行冻干，操作简单方便；得到的纯化血红蛋白冻干粉，高铁血红蛋白值在5％以内；且长期冷藏，高铁血红蛋白无明显增加。文档编号C07K14/805GK101200498SQ20061013034公开日2008年6月18日申请日期2006年12月15日优先权日2006年12月15日发明者涛李,李凤娟,杨成民,梁伟光,智王申请人:天津协和生物科技发展有限公司