溶杆菌素酰胺的制作方法

专利名称：溶杆菌素酰胺的制作方法
技术领域：
本发明涉及下式的化合物
其中 R1表示2-甲基丙-1-基，2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基，苄基，2-吡啶基甲基，3-吡啶基甲基，2-噻吩基甲基，3-噻吩基甲基或1，3-噻唑-4-基甲基， 其中苄基，2-吡啶基甲基，3-吡啶基甲基，2-噻吩基甲基，3-噻吩基甲基和1，3-噻唑-4-基甲基可以被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，三氟甲基，甲基和甲氧基， R2表示2-甲基丙-1-基，2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基，苄基，2-吡啶基甲基，3-吡啶基甲基，2-噻吩基甲基，3-噻吩基甲基或1，3-噻唑-4-基甲基， 其中苄基，2-吡啶基甲基，3-吡啶基甲基，2-噻吩基甲基，3-噻吩基甲基和1，3-噻唑-4-基甲基可以被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，三氟甲基，甲基和甲氧基， R3表示氢，C1-C4-烷基，C3-C7-环烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基或5-或6-元杂芳基甲基， 其中环烷基，环烷基甲基，苯基，苄基，杂芳基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基，C1-C4-烷基氨基羰基和通过氮结合的5-或6-元杂环基， R4表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基，5-或6-元杂芳基甲基，三甲基甲硅烷基甲基或2-氨基-2-氧代乙基， 其中烷基可以被1-3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基， 且 其中环烷基，环烷基甲基，苯基，苄基，杂芳基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基， R5表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基，5-或6-元杂芳基甲基，三甲基甲硅烷基甲基或2-氨基-2-氧代乙基， 其中烷基可以被1-3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基， 且 其中环烷基，环烷基甲基，苯基，苄基，杂芳基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基， R6表示C1-C6-烷基， 其中烷基被选自由下列组成的组的取代基取代氨基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基，[氨基-(亚氨基)甲基]氨基，2-吡啶基，3-吡啶基和4-吡啶基， R7表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基，5-或6-元杂芳基甲基或三甲基甲硅烷基甲基， 其中烷基可以被1-3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基， 并且 其中环烷基，环烷基甲基，苯基，苄基，杂芳基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基， R8表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基，5-或6-元杂芳基甲基，三甲基甲硅烷基甲基或2-氨基-2-氧代乙基， 其中烷基可以被1-3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基， 并且 其中环烷基，环烷基甲基，苯基，苄基，杂芳基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基， R9表示氢，C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基，5-或6-元杂芳基甲基，三甲基甲硅烷基甲基或2-氨基-2-氧代乙基， 其中烷基可以被1-3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基， 并且 其中环烷基，环烷基甲基，苯基，苄基，杂芳基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基， R10表示氢，C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基，5-或6-元杂芳基甲基，三甲基甲硅烷基甲基，2-氨基-2-氧代乙基，2-氨基-1-羟基-2-氧代乙基，(氨基磺酰基)(羟基)甲基，2-(C1-C4-烷基氨基)-2-氧代乙基或2-(C1-C4-烷基氨基)-1-羟基-2-氧代乙基， 其中烷基可以被选自由下列组成的组的取代基取代卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基， 并且 其中环烷基，环烷基甲基，苯基，苄基，杂芳基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基， R11表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基，5-或6-元杂芳基甲基，三甲基甲硅烷基甲基，2-氨基-2-氧代乙基，2-氨基-1-羟基-2-氧代乙基，(氨基磺酰基)(羟基)甲基，2-(C1-C4-烷基氨基)-2-氧代乙基或2-(C1-C4-烷基氨基)-1-羟基-2-氧代乙基， 其中烷基可以被选自由下列组成的组的取代基取代卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基， 并且 其中环烷基，环烷基甲基，苯基，苄基，杂芳基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基， 和它的盐、它的溶剂合物或它的盐的溶剂合物， 除了下式的化合物以外，
其中 R1表示2-甲基丙-1-基，2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基，苄基，2-吡啶基甲基，3-吡啶基甲基，2-噻吩基甲基，3-噻吩基甲基或1，3-噻唑-4-基甲基， 其中苄基，2-吡啶基甲基，3-吡啶基甲基，2-噻吩基甲基，3-噻吩基甲基和1，3-噻唑-4-基甲基可以被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，三氟甲基，甲基和甲氧基， R2表示2-甲基丙-1-基，2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基，苄基，2-吡啶基甲基，3-吡啶基甲基，2-噻吩基甲基，3-噻吩基甲基或1，3-噻唑-4-基甲基， 其中苄基，2-吡啶基甲基，3-吡啶基甲基，2-噻吩基甲基，3-噻吩基甲基和1，3-噻唑-4-基甲基可以被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，三氟甲基，甲基和甲氧基， 并且 R12表示氢或甲基， 及其盐，其溶剂合物及其盐的溶剂合物。
本发明的化合物是式(I)的化合物及其盐、溶剂合物及其盐的溶剂合物和前药，由式(I)包括的和以下提及的式的化合物和它们的盐、溶剂合物、所述盐的溶剂合物和前药，以及由式(I)包括的并且在下文提及的作为示例性实施方案的化合物和它们的盐、溶剂合物、所述盐的溶剂合物和前药，就由式(I)所涵盖并且在后来提及的化合物而言，它们还不是盐、溶剂合物、所述盐的溶剂合物和前药。
取决于它们的结构，本发明的化合物可以以立体异构型(对映异构体，非对映异构体)形式存在。因此，本发明涉及对映异构体或非对映异构体及其各自的混合物。从对映异构体和/或非对映异构体的这些混合物中，立体异构纯的组分可以以已知方式分离出来。
如果本发明的化合物可以以互变异构形式存在，本发明包括所有的互变异构形式。
优选用于本发明的目的盐是本发明的化合物的生理可接受的盐。然而，本身不适合于药物应用但是可以用于例如分离或纯化本发明的化合物的盐或混合盐也被包括在内。对于本发明的目的而言，混合盐是指含有两种或多种不同酸或碱的加成盐，例如三氟乙酸盐甲磺酸盐。
本发明化合物的生理可接受的盐包括无机酸、羧酸和磺酸的酸加成盐，例如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸、富马酸、马来酸和苯甲酸的盐。
本发明的化合物的生理可接受的盐还包括常用的碱的盐，诸如，作为实例，并且优选地碱金属盐(例如，钠和钾盐)，碱土金属盐(例如钙和镁盐)和衍生自氨或具有1-16个碳原子的有机胺的铵盐，所述有机胺诸如作为实例，并且优选地，乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二异丙胺、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二环已胺、二甲基氨基乙醇、普鲁卡因、二苄胺、N-甲基吗啉、精氨酸、赖氨酸、乙二胺和N-甲基哌啶。
对于本发明的目的而言，溶剂合物指通过与溶剂分子的配位作用形成固体或液体状态的复合物的本发明的化合物的那些形式。水合物是溶剂合物的特殊形式，其中与水发生配位作用。
对于本发明的目的而言，除非另外指出，取代基具有下列含义 烷基本身以及烷氧基，烷基氨基，烷基羰基，烷氧基羰基和烷基羰基氨基中的“alk(烷基)”和“alkyl(烷基)”表示通常具有1至6个、优选1至4个、特别优选1至3个碳原子的直链或支链烷基基团，作为实例并且优选甲基、乙基、正丙基、异丙基、叔丁基、2，2-二甲基丙-1-基、2，2-二甲基丁-1-基、正戊基和正己基。
烷氧基，作为实例并且优选表示甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、叔丁氧、正戊氧基和正己氧基。
烷氧基羰基作为实例并优选表示甲氧基羰基，乙氧基羰基，正-丙氧基羰基，异丙氧基羰基，叔-丁氧羰基，正-戊氧基羰基和正-己氧基羰基。
烷基氨基表示具有一个或两个(彼此独立地选择的)烷基取代基的烷基氨基，作为实例并且优选甲基氨基，乙基氨基，正-丙基氨基，异丙基氨基，叔-丁基氨基，正-戊基氨基，正-己基氨基，N，N-二甲基氨基，N，N-二乙基氨基，N-乙基-N-甲基氨基，N-甲基-N-正-丙基氨基，N-异丙基-N-正-丙基氨基，N-叔-丁基-N-甲基氨基，N-乙基-N-正-戊基氨基和N-正-己基-N-甲基氨基。C1-C3-烷基氨基，例如，表示具有1至3个碳原子的单烷基氨基基团或每个烷基取代基具有1至3个碳原子的二烷基氨基基团。
烷基氨基羰基表示具有一个或两个烷基取代基(彼此独立地选择)的烷基氨基羰基，作为实例并且优选地甲基氨基羰基，乙基氨基羰基，正丙基氨基羰基，异丙基氨基羰基，叔丁基氨基羰基，正戊基氨基羰基，正已基-氨基羰基，N，N-二甲基氨基羰基，N，N-二乙基氨基羰基，N-乙基-N-甲基氨基羰基，N-甲基-N-正丙基氨基羰基，N-异丙基-N-正丙基氨基羰基，N-叔丁基-N-甲基氨基羰基，N-乙基-N-正戊基氨基羰基和N-正已基-N-甲基氨基羰基。C1-C3-烷基氨基羰基表示例如具有1-3个碳原子的单烷基氨基羰基原子团或每个烷基取代基具有1-3个碳原子的二烷基氨基羰基。
环烷基表示通常具有3至7个碳原子的环烷基基团，作为实例并优选为环丙基，环丁基，环戊基，环己基和环庚基。
杂环基表示具有5或6个环原子和最多3个选自N，O，S，SO，SO2系列的杂原子和/或杂基团的单环，杂环基团，其中氮原子也可以形成N-氧化物。杂环基基团可以是饱和的或部分饱和的，作为实例并优选为吡咯烷-2-基，吡咯烷-3-基，吡咯啉基，四氢呋喃基，四氢噻吩基，吡喃基，哌啶-1-基，哌啶-2-基，哌啶-3-基，哌啶-4-基，噻喃基，吗啉-1-基，吗啉-2-基，吗啉-3-基。
杂芳基表示具有5或6个环原子和最多4个选自S，O和N的杂原子的芳香族单环基团，作为实例并且优选地噻吩基，呋喃基，吡咯基，噻唑基，噁唑基，咪唑基，吡啶基，嘧啶基和哒嗪基。
卤素表示氟，氯，溴和碘，优选氟和氯。
优选式(I)的化合物，其中 R1表示2-甲基丙-1-基，2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基，苄基，2-吡啶基甲基或3-吡啶基甲基， 其中苄基，2-吡啶基甲基和3-吡啶基甲基可以被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，三氟甲基和甲基， R2表示2-甲基丙-1-基，2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基，苄基，2-吡啶基甲基或3-吡啶基甲基， 其中苄基，2-吡啶基甲基和3-吡啶基甲基可以被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，三氟甲基和甲基， R3表示C1-C4-烷基，苯基，苄基，2-吡啶基，3-吡啶基或4-吡啶基， 其中苯基，苄基，2-吡啶基，3-吡啶基和4-吡啶基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-烷基氨基， R4表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基甲基，苄基，5-或6-元杂芳基甲基或三甲基甲硅烷基甲基， 其中烷基可以被羟基取代基取代， 并且 其中环烷基甲基，苄基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基， R5表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基甲基或三甲基甲硅烷基甲基， 其中烷基可以被选自由下列组成的组的取代基取代卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基， 并且 其中环烷基甲基，苯基，苄基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-烷基氨基， R6表示C1-C6-烷基， 其中烷基被选自由下列组成的组的取代基取代氨基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基，[氨基-(亚氨基)甲基]氨基，2-吡啶基，3-吡啶基和4-吡啶基， R7表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基甲基或三甲基甲硅烷基甲基， 其中烷基可以被选自由下列组成的组的取代基取代卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基， 并且 其中环烷基甲基，苯基，苄基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-烷基氨基， R8表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基甲基，苄基，5-或6-元杂芳基甲基或三甲基甲硅烷基甲基， 其中烷基可以被羟基取代基取代， 并且 其中环烷基甲基，苄基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基， R9表示氢，C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，苯基，三甲基甲硅烷基甲基或2-氨基-2-氧代乙基， 其中甲基可以被选自由下列组成的组的取代基取代羟基，氨基和巯基， 并且 其中环烷基和苯基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-烷基氨基， R10表示氢，C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，苯基，三甲基甲硅烷基甲基，2-氨基-2-氧代乙基，2-氨基-1-羟基-2-氧代乙基，(氨基磺酰基)(羟基)甲基，2-(C1-C4-烷基氨基)-2-氧代乙基或2-(C1-C4-烷基氨基)-1-羟基-2-氧代乙基， 其中烷基可以被选自由下列组成的组的取代基取代卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基， 并且 其中环烷基和苯基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-烷基氨基， R11表示甲基或乙基， 其中甲基和乙基可以被选自由下列组成的组的取代基取代羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基， 及其盐，其溶剂合物及其盐的溶剂合物， 除了式(Ia)的化合物以外，所述式(Ia)中 R1表示2-甲基丙-1-基，2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基，苄基，2-吡啶基甲基或3-吡啶基甲基， 其中苄基，2-吡啶基甲基和3-吡啶基甲基可以被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，三氟甲基和甲基， R2表示2-甲基丙-1-基，2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基，苄基，2-吡啶基甲基或3-吡啶基甲基， 其中苄基，2-吡啶基甲基和3-吡啶基甲基可以被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，三氟甲基和甲基， 并且 R12表示氢或甲基， 及其盐，其溶剂合物及其盐的溶剂合物。
还优选式(I)的化合物，其中 R1表示2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基或3-吡啶基甲基， R2表示2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基或3-吡啶基甲基， R3表示C1-C4-烷基，3-吡啶基或苯基， 其中3-吡啶基或苯基可以被选自由下列组成的组的取代基取代卤素，氰基，甲基，甲氧基，二甲基氨基和二乙基氨基， R4表示-CH(OH)-C1-C5-烷基或-CH(OH)苯基， 其中-CH(OH)苯基可以被1-3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-二烷基氨基， R5表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基甲基，苄基或三甲基甲硅烷基甲基， R6表示直链C2-C4-烷基， 其中烷基被选自由下列组成的组的取代基取代氨基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基， R7表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基甲基，苄基或三甲基甲硅烷基甲基， R8表示C1-C4-烷基，-CH2-OH，-CH(OH)-C1-C5-烷基或-CH(OH)苯基， 其中-CH(OH)苯基可以被1-3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-二烷基氨基， R9表示氢，C1-C6-烷基，羟基甲基或2-氨基-2-氧代乙基， R10表示氢，C1-C4-烷基，2-氨基-2-氧代乙基或2-氨基-1-羟基-2-氧代乙基， 其中C1-C4-烷基可以被选自由下列组成的组的取代基取代氨基和羟基，除了R10不是4-氨基丁-1-基以外， R11表示甲基， 其中甲基被选自由下列组成的组的取代基取代羟基和氨基， 及其盐，其溶剂合物及其盐的溶剂合物， 除了式(Ia)的化合物以外，所述式(Ia)中 R1表示2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基或3-吡啶基甲基， R2表示2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基或3-吡啶基甲基， 并且 R12表示氢或甲基， 及其盐，其溶剂合物及其盐的溶剂合物。
还优选式(I)的化合物，其中 R1表示2-甲基丙-1-基，2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基或苄基， 其中苄基可以被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，三氟甲基和甲基， 或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
还优选式(I)的化合物，其中 R1表示2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基或三甲基甲硅烷基甲基， 或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
优选式(I)的化合物，其中 R2表示2，2-二甲基丙-1-基或3-吡啶基甲基， 或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
还优选式(I)的化合物，其中 R3表示苯基，苄基，2-吡啶基，3-吡啶基或4-吡啶基， 其中苯基，苄基，2-吡啶基，3-吡啶基和4-吡啶基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-烷基氨基， 或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
还优选式(I)的化合物，其中 R3表示苯基， 其中苯基可以被选自由下列组成的组的取代基取代卤素，氰基，甲基，甲氧基，二甲基氨基和二乙基氨基， 或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
还优选式(I)的化合物，其中 R8表示-CH(OH)-C1-C5-烷基或-CH(OH)苯基， 其中-CH(OH)苯基可以被1-3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-二烷基氨基，和 或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
还优选式(I)的化合物，其中 R10表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基，5-或6-元杂芳基甲基，三甲基甲硅烷基甲基，2-氨基-2-氧代乙基，2-氨基-1-羟基-2-氧代乙基，(氨基磺酰基)(羟基)甲基，2-(C1-C4-烷基氨基)-2-氧代乙基或2-(C1-C4-烷基氨基)-1-羟基-2-氧代乙基， 其中烷基可以被选自由下列组成的组的取代基取代卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基， 并且 其中环烷基，环烷基甲基，苯基，苄基，杂芳基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基， 或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
优选式(I)的化合物，其中 R10表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，苯基，三甲基甲硅烷基甲基，2-氨基-2-氧代乙基，2-氨基-1-羟基-2-氧代乙基，(氨基磺酰基)(羟基)-甲基，2-(C1-C4-烷基氨基)-2-氧代乙基或2-(C1-C4-烷基氨基)-1-羟基-2-氧代乙基， 其中烷基可以被选自由下列组成的组的取代基取代卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基， 并且 其中环烷基和苯基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-烷基氨基， 或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
还优选式(I)的化合物，其中 R10表示甲基，乙基，2-氨基-2-氧代乙基或2-氨基-1-羟基-2-氧代乙基， 其中甲基和乙基可以被羟基取代基取代， 或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
本发明还涉及制备式(I)的化合物的方法，其中 [A]式(II)的化合物
其中 R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10和R11具有上述含义， 首先与式(III)的化合物反应，
其中 R1和R2具有上述含义， Y1表示叔丁氧羰基或苄氧基羰基，并且 X1表示卤素，优选地溴，氯或氟，或羟基， 并然后与酸和/或通过氢解反应， 或 [B]式(IV)的化合物
其中 R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10和R11具有上述含义， 首先与式(V)的化合物反应，
其中 R1，R2和R3具有上述含义，并且 Y1表示叔丁氧羰基或苄氧基羰基， 并且然后，在4-步合成中， a)与氟化物试剂如氟化四丁基铵反应， b)与酸反应， c)当适合时在碱的存在下与脱水剂反应，和 d)通过氢解反应。
方法[A] 如果X1是卤素，第一步的反应通常在惰性溶剂中，当合适时在存在碱的情况下，优选在大气压下在-30℃至50℃的温度范围内进行。
惰性溶剂的实例是四氢呋喃、二氯甲烷、吡啶、二噁烷、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷或二甲基甲酰胺；优选吡啶或二甲基甲酰胺。
碱的实例是三乙胺、二异丙基乙胺或N-甲基吗啉；优选二异丙基乙胺。
如果X1是羟基，第一步的反应一般在脱水剂存在下、在惰性溶剂中，当合适时在碱存在下，优选在大气压下在-30℃至50℃的温度范围内进行。
惰性溶剂的实例是卤代烃诸如二氯甲烷或三氯甲烷，烃诸如苯、硝基甲烷、二噁烷、二甲基甲酰胺或乙腈。同样可以采用这些溶剂的混合物。特别优选二氯甲烷或二甲基甲酰胺。
适合的脱水剂的实例有碳二亚胺，诸如N，N′-二乙基-，N，N′-二丙基-，N，N′-二异丙基-，N，N′-二环已基碳二亚胺，N-(3-二甲基氨基异丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)，N-环已基碳二亚胺-N’-丙氧基甲基聚苯乙烯(PS-碳二亚胺)或羰基化合物，诸如羰二咪唑，或1，2-噁唑鎓(oxazolium)化合物诸如2-乙基-5-苯基-1，2-噁唑鎓-3-硫酸盐或2-叔-丁基-5-甲基异噁唑鎓高氯酸盐，或酰基氨基化合物，诸如2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1，2-二氢喹啉，或丙膦酸酐，或氯甲酸异丁酯，或二(2-氧代-3-噁唑烷基)磷酰氯，或苯并三唑基氧基三-(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐，或O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HBTU)，2-(2-氧代-1-(2H)-吡啶基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(TPTU)，O-(1H-6-氯苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(TCTU)或O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU)，或1-羟基苯并三唑(HOBt)，或苯并三唑-1-基氧基三-(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐(BOP)，或苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷子基)鏻六氟磷酸盐(PyBOP)或N-羟基琥珀酰亚胺，或这些与碱的混合物。
碱是，例如，碱金属碳酸盐，诸如，例如，碳酸钠或碳酸钾，或碳酸氢盐，或有机碱诸如三烷基胺，例如，三乙胺、N-甲基吗啉、N-甲基哌啶、4-二甲基氨基吡啶或二异丙基乙胺。
优选利用HATU或利用EDC在HOBt存在下进行所述缩合。
该方法第二步中与酸的反应优选在0℃至40℃的温度范围内在大气压下发生。
因此适当的酸是二噁烷中的氯化氢，乙酸中的溴化氢或二氯甲烷中的三氟乙酸。
该方法第二步中的氢解通常在溶剂中在氢和披钯活性碳的存在下、优选在0℃至40℃的温度范围内在大气压下进行。
溶剂例如有醇，如甲醇，乙醇，正丙醇或异丙醇，混合以水和乙酸或盐酸水溶液；乙醇、水和乙酸的混合物，或异丙醇和盐酸水溶液的混合物是优选的。
方法[B] 式(IV)的化合物与式(V)的化合物的反应通常在惰性溶剂中、在脱水剂的存在下，当合适时存在碱，优选在大气压下在-30℃至50℃的温度范围内进行。
惰性溶剂是，例如，卤代烃诸如二氯甲烷或三氯甲烷，烃诸如苯、硝基甲烷、二噁烷、二甲基甲酰胺或乙腈。同样可以采用这些溶剂的混合物。特别优选二氯甲烷或二甲基甲酰胺。
适合的脱水剂的实例有碳二亚胺诸如N，N′-二乙基-，N，N′-二丙基-，N，N′-二异丙基-，N，N′-二环已基碳二亚胺，N-(3-二甲基氨基异丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)，N-环已基碳二亚胺-N’-丙氧基甲基聚苯乙烯(PS-碳二亚胺)或羰基化合物诸如羰二咪唑，或1，2-噁唑鎓(oxazolium)化合物诸如2-乙基-5-苯基-1，2-噁唑鎓-3-硫酸盐或2-叔-丁基-5-甲基异噁唑鎓高氯酸盐，或酰基氨基化合物诸如2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1，2-二氢喹啉，或丙膦酸酐，或氯甲酸异丁酯，或二(2-氧代-3-噁唑烷基)磷酰氯，或苯并三唑基氧基-三-(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐，或O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HBTU)，2-(2-氧代-1-(2H)-吡啶基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(TPTU)，O-(1H-6-氯苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(TCTU)或O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU)，或1-羟基苯并三唑(HOBt)，或苯并三唑-1-基氧基三-(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐(BOP)，或苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷子基)鏻六氟磷酸盐(PyBOP)或N-羟基琥珀酰亚胺，或这些与碱的混合物。
碱是，例如，碱金属碳酸盐，诸如，例如，碳酸钠或碳酸钾，或碳酸氢盐，或有机碱诸如三烷基胺，例如，三乙胺、N-甲基吗啉、N-甲基哌啶、4-二甲基氨基吡啶或二异丙基乙胺。
优选利用HATU或利用EDC和HOBt的混合物进行所述缩合。
该另外的方法的第一步(a)中与氟化四丁基铵的反应通常在惰性溶剂中、优选在0℃至40℃的温度范围内在大气压下发生。
惰性溶剂是，例如，卤代烃诸如二氯甲烷或三氯甲烷，或醚如四氢呋喃或二噁烷。特别优选四氢呋喃。
该方法第二步(b)中与酸的反应优选在0℃至40℃的温度范围内在大气压下发生。
其中适当的酸是二噁烷中的氯化氢，乙酸中的溴化氢或二氯甲烷中的三氟乙酸。
该方法第三步(c)中的反应的发生类似于式(IV)化合物与式(V)化合物的反应。
该方法第四步(d)中的氢解通常在溶剂中在氢和披钯活性碳的存在下、优选在0℃至40℃的温度范围内在大气压下发生。
溶剂例如有醇，如甲醇，乙醇，正丙醇或异丙醇，混合以水和乙酸或盐酸水溶液；乙醇、水和乙酸的混合物，或异丙醇和盐酸水溶液的混合物是优选的。
式(II)的化合物是已知的或可以通过使式(VI)的化合物
其中 R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10和R11具有上述含义， 首先与下式的化合物反应
其中 R3具有上述含义，并且 R13表示氰基甲基，对硝基苯基，邻硝基苯基，2，4-二硝基苯基，2，4，5-三氯苯基，五氯苯基，五氟苯基(Pfp)，N-羟基苯邻二甲酰亚胺基，N-羟基琥珀酰亚胺基(O-Su)，1-羟基哌啶基或5-氯-8-羟基喹啉基， 随后在3步合成中 a)与酸反应， b)与脱水剂反应，如果适合时在碱存在下进行，和 c)通过氢解反应 进行制备。
式(VI)的化合物与式(VII)的化合物的反应通常在惰性溶剂中、如果合适在碱存在下，优选在-30℃到50℃的温度范围内在大气压下发生。
惰性溶剂的实例是四氢呋喃，二氯甲烷，吡啶，二噁烷，二甲基乙酰胺，N-甲基吡咯烷或二甲基甲酰胺，优选吡啶或二甲基甲酰胺。
该方法第一步(a)中与酸的反应优选在0℃至40℃的温度范围内在大气压下发生。
其中适当的酸是二噁烷中的氯化氢，乙酸中的溴化氢或二氯甲烷中的三氟乙酸。
该方法第二步(b)中的反应的发生类似于式(IV)化合物与式(V)化合物的反应。
该方法第三步(c)中的氢解通常在溶剂中在氢和披钯活性碳的存在下、优选在0℃至40℃的温度范围内在大气压下发生。
溶剂的实例是醇，如甲醇，乙醇，正丙醇或异丙醇，混合以水和乙酸或盐酸水溶液；优选乙醇、水和乙酸的混合物，或异丙醇和盐酸水溶液的混合物。
式(III)，(V)和(VII)的化合物是已知的或者可以从相应的原材料通过已知方法或通过以下所述方法合成。
式(IV)和(VI)的化合物是已知的或可以从相应的原材料，在溶液中使用适合的保护基或在固相上通过已知的肽合成方法，或通过下述的方法进行合成。
本发明化合物的制备可以通过下列合成反应路线举例说明。
合成方案1
合成方案2
合成方案3
本发明的化合物显示不能预测的有价值的药理学作用范围。它们显示抗菌活性。
它们因此适用于用作治疗和/或预防人和动物疾病的药物。
本发明的化合物特征在于与溶杆菌素相比更低的肾毒性。
本发明化合物的特征在于在中性至碱性水性介质中改善的稳定性。该性质改善了本发明化合物的贮存和作为药物的给药。
所述九酯肽类作为细菌细胞壁生物合成的抑制剂起作用。
本发明的制剂针对细菌和类细菌的微生物是特别有效的。它们因此特别适于在人和兽医学中由这些病原体所引起的局部和全身感染的预防和化学疗法。
原则上，可以将本发明的制剂用于针对具有细菌细胞壁(胞壁质球囊)和相应酶系统的全部细菌和类细菌的微生物，例如下列病原体或下列病原体的混合物 革兰氏阴性球菌(淋病奈瑟氏菌(Neisseria gonorrhoeae))还有革兰氏阴性杆菌诸如肠杆菌科(Enterobacteriaceae)，例如大肠杆菌(Escherichia coli)、流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)、假单胞菌属(Pseudomonas)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter)(弗氏柠檬酸杆菌(C.freundii)、C.divernis)、沙门氏菌属(Salmonella)和志贺氏杆菌属(Shigella)；此外还有肠杆菌属(Enterobacter)(产气肠杆菌(E.aerogenes)、成团肠杆菌(E.agglomerans))、哈夫尼菌属(Hafnia)、沙雷氏菌属(Serratia)(粘质沙雷氏菌(S.marcescens)、普罗威登斯菌属(Providencia)、耶尔森氏菌属(Yersinia)，还有不动杆菌属(Acinetobacter)、布兰汉氏球菌属(Branhamella)和衣原体(Chlamydia)。而且，所述抗菌谱包括严格厌氧菌诸如，例如，脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)，消化球菌属(Peptococcus)、消化链球菌属(Peptostreptococcus)、以及梭状芽胞杆菌属(Clostridium)的代表；此外还有分枝杆菌属(Mycobacteria)，例如结核分枝杆菌(M.tuberculosus)。本发明的化合物对于革兰氏阳性球菌显示特别显著的效果，所述革兰氏阳性球菌例如葡萄球菌(Staphylococci)(金黄色葡萄球菌(S.aureus)、表皮葡萄球菌(S.epidermidis)、溶血葡萄球菌(S.haemolyticus)、肉葡萄球菌(S.carnosus))、肠球菌属(enterococci)(粪肠球菌(E.faecalis)、屎肠球菌(E.faecium))和链球菌属(streptococci)(无乳链球菌(S.agalactiae)、肺炎链球菌(S.pneumoniae)、化脓链球菌(S.pyogenes))。
上述病原体列表仅应被解释为是例举性的而绝非限制性的。可以提到的由所述病原体或混合感染所引起并且可以通过本发明的制剂预防、改善或治愈的疾病例如有 在人中的感染性疾病，例如，无并发症的和并发的尿路感染，无并发症的皮肤和表皮感染，并发的皮肤和软组织感染，医院-和社区获得性肺炎，医院肺炎，慢性支气管炎的急性恶化和继发细菌感染，急性中耳炎，急性鼻窦炎，链球菌咽炎，细菌性脑膜炎，无并发症的淋球菌和非-淋球菌尿道炎/宫颈炎，急性前列腺炎，心内膜炎，无并发症的和并发的腹内感染，妇科感染，盆腔炎疾病，细菌性阴道病，急性和慢性骨髓炎，急性细菌性关节炎，发热性中性白细胞减少患者(febrile neutropenic patients)中的经验疗法，还有菌血症，MRSA感染，急性传染性腹泻，幽门螺杆菌(Helicobacterpylori)感染，手术后的感染，牙原性感染(odontogenic infections)，眼科感染，手术后的感染(包括门静脉周脓肿、创伤感染、胆道感染，乳腺炎和急性阑尾炎)，囊性纤维化病和支气管扩张症。
除人之外，还可以在其它物种中治疗细菌感染。可以提到的实例是 猪腹泻、肠源性毒血症(enterotoxemia)、败血症、痢疾、沙门氏菌病、子宫炎-乳腺炎-乳泌缺乏综合征(agalactiae syndrome)、乳腺炎； 反刍动物(牛、绵羊、山羊)腹泻、败血症、支气管性肺炎、沙门氏菌病、巴斯德菌病、生殖器感染； 马支气管性肺炎、关节病、分娩的和分娩后感染、沙门氏菌病； 狗和猫支气管肺炎、腹泻、皮炎、耳炎、尿路感染、前列腺炎； 家禽(小鸡、火鸡、鹌鹑、鸽子、观赏鸟类及其它)大肠杆菌感染、慢性呼吸道疾病、沙门氏菌病、巴斯德菌病、鹦鹉热。
它同样可以在饲养和抚养生产性和观赏用鱼类中治疗细菌病，所述抗菌谱从而在上述病原体上还延伸到其它病原体诸如，例如，巴斯德菌属(Pasteurella)、布鲁氏菌属(Brucella)、弯曲杆菌属(Campylobacter)、李斯特菌属(Listeria)、丹毒丝菌属(Erysipelothris)、棒状杆菌(Corynebacteria)、疏螺旋体属(Borellia)、密螺旋体(Treponema)、诺卡氏菌属(Nocardia)、立克次氏体(Rickettsia)、耶尔森氏菌属(Yersinia)。
本发明还涉及本发明的化合物用于治疗和/或预防疾病，特别是细菌感染性疾病的应用。
本发明还涉及本发明的化合物用于治疗和/或预防疾病，特别是上述疾病的应用。
本发明还涉及本发明的化合物用于制备治疗和/或预防疾病、特别是上述疾病的药物的应用。
优选将本发明的化合物用于制备适于预防和/或治疗细菌疾病的药物。
本发明还涉及利用抗菌有效量的本发明化合物治疗和/或预防疾病的方法，所述疾病特别是上述疾病。
本发明还涉及包含至少一种本发明化合物和至少一种或多种另外的活性成分的药物，特别是用于治疗和/或预防上述疾病。组合用的优选活性成分是具有抗菌活性的化合物，其具有不同的作用范围，特别是补充的作用范围，和/或对本发明的化合物是有协同作用的。
本发明的化合物可以全身和/或局部起作用。为此目的，它们可以以适合的方式进行施用，所述方式诸如，例如通过口服的、肠胃外的、经肺的、经鼻的、舌下的、舌的、颊的、直肠的、皮肤的、透皮的、结膜的或耳的途径，或作为植入物或支架。
本发明的化合物可以以适合于这些给药途径的给药形式进行施用。
适合于口服给药的是这样的给药形式，其按照现有技术发挥功能并且快速地和/或以改进的方式递送本发明的化合物，并且其包括晶体形式和/或非晶形形式和/或溶解形式的本发明的化合物，诸如，例如片剂(未包衣的或包衣片剂，例如具有延迟溶解或者是不可溶的并且控制本发明化合物释放的肠溶衣或包衣)，快速在口腔中崩解的片剂或薄膜/糯米纸囊剂，薄膜/冻干物，胶囊(例如硬或软明胶胶囊)，糖衣片剂，颗粒剂，丸剂，粉末，乳剂，混悬剂，气溶胶或溶液。
肠胃外给药的发生可以避免吸收步骤(例如，静脉内、动脉内、心脏内、脊髓内或腰椎内)，或包含吸收(例如，肌内、皮下、皮内、经皮或腹膜内)。适合于肠胃外给药的给药形式特别是，用于注射和输注的，以溶液、混悬液、乳剂、冻干物或无菌粉末形式存在的制剂。
适合于其它给药途径的实例是用于吸入的药物形式(特别是粉末吸气器，喷雾器)，滴鼻剂，溶液，喷雾剂；可以通过舌、舌下或颊施用的片剂，薄膜/糯米纸囊剂或胶囊；栓剂，用于耳或眼的制剂，阴道胶囊，水性混悬液(洗剂，振摇混合物)，亲脂性混悬液，软膏剂，乳膏剂，透皮治疗系统(如，例如贴片)，乳，糊剂，泡沫，扑粉，植入物或支架。
可以将本发明的化合物转化成为所述的给药形式。这可以以本身已知的方式通过混合以惰性、非毒性的药用的赋形剂来进行。这些赋形剂包括，特别是，载体(例如微晶纤维素，乳糖，甘露醇)，溶剂(例如液体聚乙二醇)，乳化剂和分散剂或湿润剂(例如十二烷基硫酸钠，聚氧基失水山梨糖醇油酸酯)，粘合剂(例如聚乙烯吡咯烷酮)，合成的和天然的聚合物(例如白蛋白)，稳定剂(例如抗氧化剂诸如抗坏血酸)，颜料(例如无机颜料诸如氧化铁)和味道和/或气味矫正剂。
本发明还涉及这样的药物和将其用于前述目的的应用，所述药物包括至少一种本发明的化合物，以及通常地一种或多种惰性、非毒性药用的赋形剂。
通常，以约0.001到100mg/kg，优选地约0.1到10mg/kg体重的静脉内给药量施用从而获得有效效果被证明有利的，并且口服给药所用的剂量是约0.01到50mg/kg，优选地0.5到10mg/kg体重。
然而，可能需要的是，当需要时偏离提及的量，其具体地作为体重、给药途径、对活性成分的个体行为、制剂类型和在施用发生过程中的时间或间隔的函数。因此，在某些情形中以少于前述最小量进行的施用可以是充分的，而在其它情形中，必须超过提及的上限。在更大量的施用的情形中，可以推荐将这些分成一天内的多个单独剂量。
除非另外指出，在下述测试和实施例中的百分比是重量百分比；份是重量份。液体/液体溶液的溶剂比率、稀释比率和浓度数据在每种情形中都是基于体积。
后附的图显示选择的示例性化合物和作为比较例的溶血杆素的稳定性图。这些显示

图1在略碱性的水溶液中，溶杆菌素和溶杆菌素的降解产物的浓度随时间变化的图。
图2在略碱性的水溶液中，实施例19的化合物的浓度随时间变化的图。
图3在略碱性的水溶液中，实施例23的化合物的浓度随时间变化的图。
图4在略碱性的水溶液中，实施例25的化合物的浓度随时间变化的图。
图5在略碱性的水溶液中，实施例40的化合物的浓度随时间变化的图。
A.实施例 缩写 abs.无水 aq. 水性 BHI 脑心浸液 Boc 叔丁氧羰基 conc. 浓缩的 DCC 二环己基碳二亚胺 DCI 直接化学电离(在MS中) DCM 二氯甲烷 DIEAN，N-二异丙基乙胺 DMAP4-N，N-二甲基氨基吡啶 DMSO二甲亚砜 DMF N，N-二甲基甲酰胺 EA 乙酸乙酯 EDC 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(也 为EDCI) EDCxHCl 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸 盐 EDTA 乙二胺四乙酸 EI电子碰撞电离(MS中) eq. 当量 ESI 电喷雾电离(MS中) Ex. 实施例 h 小时 HATU O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基 脲鎓六氟磷酸盐 HOBt1-羟基苯并三唑 HPLC高压，高效液相色谱法 LC-MS 液相色谱-偶联质谱法 LDA 二异丙基氨基化锂 LHMDS 六甲基二硅基胺基锂 LLA D-Leu-Leu-(3-环已基)Ala (3-环已基) LLF D-Leu-Leu-Phe MALDI 基体-辅助的激光脱附/电离 MIC 最低抑制浓度 Min 分钟(单数)/分钟(复数) MRSA耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌 MS 质谱法 MTBE甲基叔丁醚 NCCLS 国家临床实验室标准委员会 (National Committee for Clinical Laboratory Standards) neg.负的 NMM N-甲基吗啉 NMR 核磁共振光谱法 org.有机的 p.a.分析级(pro analysi) Pd 钯 Pd-C披钯碳 pos.正的 PTFE聚四氟乙烯 quant. 定量 RP-HPLC 反相HPLC RT 室温 Rf 保留因子(在薄层色谱中) Rt 保留时间(在HPLC中) sat.饱和的 TBAF氟化四丁基铵 TBTU O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓四 氟硼酸盐 TCTU O-(1H-6-氯苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲 鎓四氟硼酸盐 TFA三氟乙酸 TFE2，2，2-三氟乙醇 THF四氢呋喃 TMGN，N，N，N-四甲基胍 TMSE 2-(三甲基甲硅烷基)乙基 TOF飞行时间 UV 紫外线 VRSA 耐万古霉素的金黄色葡萄球菌 XPHOS 二环已基(2’，4’，6’-三异丙基二苯基-2-基)膦 Z，Cbz 苄氧基羰基 参考文献 对于肽和环酯肽(cyclodepsipeptides)的命名法，参考 1.A Guide to IUPAC Nomenclature of Organic Compounds(有机化合物的IUPAC命名委员会的指导)(推荐1993)，1993，Blackwell科学出版社。
2.Nomenclature and symbolism for amino acids and peptides.(氨基酸和肽的命名和符号)推荐1983.IUPAC-IUB Joint Commission on BiochemicalNomenclature(IUPAC-IUB关于生物化学命名法的联合委员会)，UK.Biochemical Journal(英国生物化学杂志)1984，219，345-373，和引用的参考文献。
材料和方法 分析方法 方法1HPLC仪器类型HP 1100系列；UV DAD；柱PhenomenexSynergi 2μ Hydro-RP Mercury 20mm x 4mm；洗脱剂A11的水+0.5ml的50％甲酸，洗脱剂B11的乙腈+0.5ml的50％甲酸；梯度0.0分钟90％A→2.5分钟30％A→3.0分钟5％A→4.5分钟5％A；流速0.0分钟1ml/分钟，2.5分钟/3.0分钟/4.5分钟。2ml/分钟；烘箱50℃；UV检测210nm. 方法2HPLC仪器类型HP 1050系列；UV DAD；柱PhenomenexSynergi 2μ Max-RPMercury 20mm x 4mm；洗脱剂A11的水+0.05％TFA，洗脱剂B11的乙腈；梯度0.0分钟90％A→2.5分钟30％A→3.0分钟5％A→4.5分钟5％A；流速0.0分钟1ml/分钟，2.5分钟/3.0分钟/4.5分钟。2ml/分钟；烘箱50℃；UV检测210nm. 方法3HPLC仪器类型HP 1050/1100系列；UV DAD 1100系列；柱Kromasil C18，60 x 2.1mm，3.5μm；洗脱剂A水/0.5％高氯酸，洗脱剂B乙腈；梯度0-0.5分钟2％B，0.5-4.5分钟2-90％B，4.5-6.5分钟90％B，6.5-6.7分钟90-2％B，6.7-7.5分钟2％B；流速0.75ml/分钟，烘箱30℃，UV检测210nm. 方法4仪器具有DAD检测的HP1100；柱Kromasil 100 RP-18，60mm x 2.1mm，3.5μm；洗脱剂A5ml的高氯酸(70％)/l的水，洗脱剂B乙腈；梯度0分钟2％B，0.5分钟2％B，4.5分钟90％B，9分钟90％B，9.2分钟。2％B，10分钟2％B；流速0.75ml/分钟；柱温.30℃；检测UV210nm. 方法5仪器具有DAD的安捷伦(Agilent)1100(G1315B)，双泵(G1312A)，自动取样器(G1313A)，溶剂脱气装置(G1379A)和柱自动调温器(G1316A)；柱安捷伦Zorbax Eclipse XDB-C8 4.6 x 150 x 5mm；柱温30℃；洗脱剂A0.05％ 70％在水中的高氯酸；洗脱剂B乙腈；流速2.00ml/分钟；梯度0-1分钟10％B，斜度，4-5分钟90％B，斜度，5.5分钟10％B. 方法6仪器具有DAD的安捷伦1100(G1315B)，双泵(G1312A)，自动取样器(G1313A)，溶剂脱气装置(G1379A)和柱自动调温器(G1316A)；柱安捷伦Zorbax Eclipse XDB-C8 4.6 x 150 x 5mm；柱温30℃；洗脱剂A0.01％在水中的TFA；洗脱剂B0.01％在乙腈中的TFA；流速2.00ml/分钟；梯度0-1分钟10％ B，斜度，4-5分钟90％ B，斜度，5.5分钟10％ B. 方法7具有DAD的安捷伦1100(G1315B)，双泵(G1312A)，自动取样器(G1313A)，脱气装置(G1379A)和柱自动调温器(G1316A)；柱Synergi4 Hydro-RP 80A，4.6 x 150 x 5mm；烘箱温度30℃；洗脱剂A水+0.05％ 70％高氯酸；洗脱剂B乙腈；流速2.00ml/分钟；梯度0-1分钟10％ B，斜度，4-5分钟90％ B，斜度，5.5分钟10％ B. 方法8仪器具有DAD的安捷伦1100(G1315B)，双泵(G1312A)，自动取样器(G1313A)，溶剂脱气装置(G1379A)和柱自动调温器(G1316A)；柱安捷伦Eclipse XDB-C8 4.6 x 150 x 5mm；柱温40℃；洗脱剂A0.05％ 70％在水中的高氯酸；洗脱剂B甲醇；流速2.00ml/分钟；等度0-7分钟55％ B. 方法9HPLC仪器类型HP 1050系列；UV DAD；柱Zorbax 300mSB-C18 3.5μ，4.6mm x 150mm；洗脱剂A11的水+0.1％ TFA，洗脱剂B400ml的乙腈/600ml的水+0.1％ TFA；梯度0.0分钟100％A，1.3分钟10％B，18.0分钟80％B，20.0分钟80％B，21.0分钟100％B，25.0分钟100％B，26.0分钟0％B，30.0分钟0％B.流速1ml/分钟；烘箱40℃；UV检测210nm. 方法10HPLC仪器类型HP 1050系列；UV DAD；柱Zorbax 300mSB-C1 83.5μ，4.6mm x 150mm；洗脱剂A11的水+0.1％TFA，洗脱剂B乙腈；梯度0.0分钟100％A，15.0分钟100％B，17.0分钟100％B，18.0分钟100％A.流速1ml/分钟；烘箱40℃；UV检测210nm. 方法11HPLC仪器类型HP 1050系列；UV DAD；柱Zorbax 300mSB-C18 3.5μ，4.6mm x 150mm；洗脱剂A11的水+0.1％TFA，洗脱剂B400ml的乙腈/600ml的水+0.1％TFA；梯度0.0分钟100％A，2.0分钟10％B，50.0分钟80％B，52.0分钟100％B，55.0分钟100％A，60.0分钟100％A.流速1ml/分钟；烘箱40℃；UV检测210nm. 方法12HPLC仪器类型HP 1050系列；柱SymmetryPrepTMC18，Waters，50 x 2.1mm，3.5μm；洗脱剂A水/0.1％TFA，洗脱剂B乙腈；梯度0-3分钟0％B，3.01-9分钟100％B，9.01-11分钟100％B，11.01-12分钟0-100％A；烘箱40℃；流速0.4ml/分钟；UV检测210nm. 方法13HPLC仪器类型HP 1100系列；UV DAD；柱ChromolithSpeed ROD RP18；洗脱剂A11的水+0.05％TFA，洗脱剂B11的乙腈；梯度0.0-0.5分钟95％A，0.51-3.0分钟5-95％B，3.01-3.80分钟95％A；流速5ml/分钟；烘箱40℃；UV检测210nm. 方法14柱(不锈钢柱，尺寸250 x 4.6mm)；静止相(手性硅胶/聚酰胺复合材料KBD 5326，基于选择剂聚(N-异丁烯酰基-L-亮氨酸二环丙基甲基酰胺)；洗脱剂乙酸乙酯，等度；流速1ml/分钟；温度25℃；UV检测220nm；样品注射10μl. 方法15静止相(Chiralcel OD)；洗脱剂异已烷/i-PrOH9/1，等度；流速2ml/分钟；温度25℃；UV检测254nm. 方法16HPLC仪器类型HP 1100系列；柱Chiralpack AD-H 250mm x 4.6mm；洗脱剂A异已烷，洗脱剂B乙醇+0.2％TFA+1％H2O；等度；流速1ml/分钟；烘箱40℃；UV检测230nm. 方法17Daicel Chiralpak AD-H 5μm 250mm x 4.6mm，已烷/2-丙醇/甲醇85/6/9，流速2.0ml/分钟，UV检测254nm. 方法18MS仪器类型Micromass ZQ；HPLC仪器类型WatersAlliance 2795/HP 1100；柱Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury20mm x 4mm；洗脱剂A11的水+0.5ml的50％甲酸，洗脱剂B11的乙腈+0.5ml的50％甲酸；梯度0.0分钟90％A→2.5分钟30％A→3.0分钟5％A→4.5分钟5％A；流速0.0分钟1ml/分钟，2.5分钟/3.0分钟/4.5分钟2ml/分钟；烘箱50℃；UV检测210nm. 方法19MS仪器类型Micromass ZQ；HPLC仪器类型WatersAlliance 2795/HP 1100；柱Phenomenex Gemini 3μ C-18 100

，30mm x3mm；洗脱剂A11的水+0.5ml的50％甲酸，洗脱剂B11的乙腈+0.5ml的50％甲酸；梯度0.0分钟90％A→2.5分钟30％A→3.0分钟5％A→4.5分钟5％A；流速0.0分钟1ml/分钟，2.5分钟/3.0分钟/4.5分钟2ml/分钟；烘箱50℃；UV检测210nm. 方法20UV检测210nm.MS仪器类型Micromass ZQ；HPLC仪器类型Waters Alliance 2795；柱Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury20mm x 4mm；洗脱剂A11的水+0.5ml 50％的甲酸，洗脱剂B11的乙腈+0.5ml的50％甲酸；梯度0.0分钟90％A→2.5分钟30％A→3.0分钟5％A→4.5分钟5％A；流速0.0分钟1ml/分钟，2.5分钟/3.0分钟/4.5分钟2ml/分钟；烘箱50℃；UV检测210nm. 方法21仪器具有HPLC安捷伦系列1100的Micromass QuattroLCZ；柱Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20mm x 4mm；洗脱剂A11的水+0.5ml的50％甲酸，洗脱剂B11的乙腈+0.5ml的50％甲酸；梯度0.0分钟90％A→2.5分钟30％A→3.0分钟5％A→4.5分钟5％A；流速0.0分钟1ml/分钟，2.5分钟/3.0分钟/4.5分钟2ml/分钟；烘箱50℃；UV检测208-400nm. 方法22仪器具有HPLC安捷伦系列1100的Micromass平台LCZ；柱Thermo Hypersil GOLD 3μ 20mm x 4mm；洗脱剂A11的水+0.5ml的50％甲酸，洗脱剂B11的乙腈+0.5ml的50％甲酸；梯度0.0分钟100％A→0.2分钟100％A→2.9分钟30％A→3.1分钟10％A→5.5分钟10％A；烘箱50℃；流速0.8ml/分钟；UV检测210nm. 方法23MS仪器类型Micromass LCT(ESI pos./neg.)；HPLC仪器类型HP 1100系列；UV DAD 1100系列；柱SymmetryPrepTMC18，Waters，50 x 2.1mm，3.5μm；洗脱剂A水/0.1％甲酸，洗脱剂B乙腈/0.1％甲酸；梯度0-1分钟0％B，1-6分钟0-90％B，6-8分钟90-100％B，8-10分钟100％B，10-10.1分钟100-0％B，10.1-12分钟0％B，然后将色谱柱再生.烘箱40℃，流速0.5ml/分钟(在10.1分钟简短地至1ml/分钟)，UV检测210nm. 方法24TOF-HR-MS-ESI+光谱用Micromass LCT仪器记录(毛细管电压3.2KV，锥电压42V，源温度120℃，去溶剂化温度280℃)。A注射器泵(哈弗装置(Harvard Apparatus))用于为此目的的样品递送。将亮氨酸-脑磷脂(Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu)用作标准。
方法25MALDI-MS/MS研究在4700蛋白质组(Proteomics)分析仪(Applied Biosystems(应用生物系统)，弗雷明汉，马萨诸塞，美国)上进行，所述分析仪装备有TOF/TOF离子光学系统和200Hz NdYAG激光器(355nm)。准分子离子在离子源中使用8kV加速，使用电子偏转器(MS1)选择，并在布置在MS1和MS2之间的冲击室中与氩原子撞击。获得的碎片离子使用15kV再加速，并使用第二次飞行质量分析仪(MS2)进行表征。
制备色谱法 方法26仪器Gilson Abimed HPLC；双泵系统；柱Nucleodur C18Gravity，Macherey-Nagel，5μm；250 x 21mm；洗脱剂A水/0.05％-0.1％TFA，洗脱剂B乙腈；梯度0-8分钟5％B，8-40分钟5-60％B，40-60分钟60％B，60-75分钟60-100％B，75-80分钟100％B，然后将色谱柱再生；流速7-15ml/分钟；UV检测器210nm. 方法27仪器Gilson Abimed HPLC；双泵系统；柱Nucleodur C18Gravity，Macherey-Nagel，5μm；250 x 21mm；洗脱剂A水/0.05％-0.1％TFA，洗脱剂B乙腈；梯度0-8分钟 5％B，8-40分钟 5-60％B，40-60分钟60％B，60-75分钟 60-100％B，75-80分钟 100％B，然后将色谱柱再生；流速7-15ml/分钟；UV检测器210nm. 方法28仪器Gilson Abimed HPLC；双泵系统；柱Nucleodur C18Gravity，Macherey-Nagel，5μm；250×40mm；洗脱剂A水/0.05-0.1％TFA，洗脱剂B乙腈/0.05-0.1％ TFA；梯度0-10分钟10％B，10-24分钟10-30％B，24-28分钟30-50％B，28-35分钟50％B，35-45分钟50-60％B，45-53分钟60-70％B，53-60分钟60-90％B，60-70分钟100％B，然后将色谱柱再生；流速15-45ml/分钟；UV检测器210nm. 方法29仪器Gilson AbimedHPLC；双泵系统；柱Nucleodur C18Gravity，Macherey-Nagel，5μm；250 x 21mm；洗脱剂A水/0.2％乙酸，洗脱剂B乙腈/0.2％乙酸；梯度0-10分钟10％B，10-24分钟10-30％B，24-28分钟30-50％B，28-35分钟50％B，35-45分钟50-60％B，45-53分钟60-70％B，53-60分钟60-90％B，60-70分钟100％B，然后将色谱柱再生；流速7-15ml/分钟；UV检测器210nm. 方法30仪器Gilson Abimed HPLC；双泵系统；柱Nucleodur C18Gravity，Macherey-Nagel，5μm；250×40mm；洗脱剂A水/0.2％乙酸，洗脱剂B乙腈/0.2％乙酸；梯度0-10分钟 10％B，10-24分钟 10-30％B，24-28分钟 30-50％B，28-35分钟 50％B，35-45分钟 50-60％B，45-53分钟 60-70％B，53-60分钟 60-90％B，60-70分钟 100％B，然后将色谱柱再生；流速15-45ml/分钟；UV检测器210nm. 方法31仪器Gilson Abimed HPLC；双泵系统；柱Kromasil-100AC18，5μm；250 x 30mm；洗脱剂A水/0.25％乙酸，洗脱剂B乙腈；梯度0-3分钟 5％B，3-30分钟 5-100％B，30-38分钟 100％B，然后将色谱柱再生；流速25ml/分钟；UV检测器210nm. 方法32仪器Gilson Abimed HPLC；双泵系统；柱Kromasil-100AC18，5μm；250 x 30mm；洗脱剂A水/0.05-0.5％ TFA，洗脱剂B乙腈；梯度0-5分钟 5％B，5.01-10分钟 10％B，10.01-20分钟 40％B，20.01-27分钟50％B，27.01-40分钟 60％B，40.01-45分钟 90％B，45.01-60分钟 100％B；流速15-60ml/分钟；UV检测器210nm. 方法33Gilson Abimed HPLC；UV检测器210nm；柱KromasilRP-18 5μm，

250 x 20mm；洗脱剂A水+0.05％ TFA，洗脱剂B乙腈+0.05％ TFA流速10ml/分钟；0-3分钟 10％ B，斜度，30-38分钟90％B，38-45分钟 10％ B. 方法34Gilson Abimed HPLC；UV检测器210nm；柱GromsilODS-4HE 10μm，250 x 40mm；洗脱剂A水+0.05％ TFA，洗脱剂B乙腈+0.05％ TFA流速20ml/分钟；0-3分钟 10％ B，斜度，30-35分钟90％ B，35-40分钟 90％ B. 方法35仪器Gilson Abimed HPLC；双泵系统；柱WatersSymmetry-PrepTMC18，7μm，300 x 19mm；洗脱剂A水/0.2％冰醋酸，洗脱剂B乙腈；梯度0-8分钟 5％B，8-25分钟 5-100％B，25.01-40分钟100％B，然后将色谱柱再生；流速15ml/分钟；UV检测器210nm. 方法36仪器Gilson Abimed HPLC；双泵系统；柱WatersSymmetry-PrepTMC18，7μm，300 x 19mm；洗脱剂A水/0.1％ TFA，洗脱剂B乙腈；梯度0-5分钟 5％B，5.01-32分钟 5-100％B，32.01-35分钟100％B，然后将色谱柱再生；流速15ml/分钟；UV检测器210nm. 方法37柱Kromasil-100 C18，5μm；250 x 20mm；洗脱剂25％水+0.2TFA/75％乙腈；等度；0-8.5分钟；流速25ml/分钟；UV检测器220nm；温度30℃. 方法38柱(不锈钢柱，尺寸250 x 30mm)；静止相(手性硅胶/聚酰胺复合材料KBD 5326，基于选择剂聚(N-异丁酰基-L-亮氨酸二环丙基甲基酰胺)；洗脱剂乙酸乙酯，等度；流速25ml/分钟；温度24℃；UV检测225nm；样品重复注射2000μl. 方法39柱(不锈钢柱，尺寸430 x 75mm)；静止相(手性硅胶/聚酰胺，基于选择剂聚(N-异丁酰基-D-亮氨酸二环丙基甲基酰胺)；洗脱剂异已烷(80％)/THF(20％)，等度；流速200ml/分钟；温度24℃；UV检测254nm；样品重复注射10000μl. 方法40柱(不锈钢柱，尺寸250 x 20mm)；静止相(DaicelChiralpak AD-H，5μm)；洗脱剂异已烷(70％)/2-丙醇+0.2％乙酸+1％水(30％)，等度；流速15ml/分钟；温度29℃；UV检测220nm；样品重复注射750μl. 方法41Gilson Abimed HPLC；柱Daicel Chiralpak AD-H 5μm；250 x20mm；洗脱剂A异已烷，洗脱剂B0.2％乙酸/1％水/2-丙醇；等度；流速15ml/分钟；UV-检测器212nm 方法42柱(不锈钢柱，尺寸500 x 40mm)；静止相(DaicelChiralpak AD 20μm)，异已烷/异丙醇/甲醇95/2/3，流速100ml/分钟，UV检测230nm. 方法43仪器Gilson Abimed HPLC；UV检测器210nm；双泵系统；柱SymmetryPrepTMC18，Waters，7μm；300mm x 19mm；流速25ml/分钟；洗脱剂A水/0.2％ TFA，洗脱剂B乙腈；梯度0-10分钟 15-65％B，然后将色谱柱再生。
方法44Gilson Abimed HPLC；UV检测器210nm；柱WatersSymmetry-PrepTM C-18，7μm，300 x 19mm；洗脱剂A水+0.05％ TFA，洗脱剂B乙腈+0.05％ TFA流速10ml/分钟；0-3分钟 10％B，斜度，30-38分钟 90％B，38-45分钟 10％B. 方法45在不加压下在Sephadex LH-20(法玛西亚(Pharmacia))上进行凝胶色谱分离。根据UV活性(UV检测器，254nm，Knauer)进行分级(ISCO Foxy 200级分收集器)，柱尺寸32×7cm(1000-100μmol规模)；30×4cm(100-10μmol规模)；25×2cm(10-1μmol规模)。将甲醇用作洗脱剂。
方法46Gilson Abimed HPLC；UV检测器210nm；柱BiotageFlash40 RP-18或相容的模块Varian Metaflash C18 40M，35μm，150 x40mm；洗脱剂A水+0.05％ TFA，洗脱剂B乙腈+0.05％ TFA流速40ml/分钟；0-3分钟 10％B，斜度，30-38分钟 90％B，38-45分钟10％B. 方法47通过反相色谱法制备分离二氢溶杆菌素的片段1-3和4-11的胰凝乳蛋白酶裂解。柱源15-RPC(GE-HealthCare(GE-健康护理))，直径5cm，长度12cm，体积235ml.洗脱剂A0.1％在水中的乙酸。洗脱剂B0.1％在甲醇中的乙酸.流速30ml/分钟。UV检测215nm，280nm.上样约6-7mg总蛋白/ml树脂。样品上样将柱用洗脱剂A平衡，将0.2μm-过滤的裂解混合物溶液置于其上并且将所述柱用洗脱剂A洗涤。洗脱0-45％在约18柱体积内，随后用约1.3柱体积的100％B洗涤。分级50ml的级分从洗脱开始收集。CIP柱以减少的流速(5ml/分钟)用2柱体积的1N氢氧化钠溶液洗涤。
分析氨基酸和肽的具体方法 方法48使用来自Eppendorf/Biotronik的LC 3000氨基酸分析仪进行氨基酸分析。使用稍作修改的标准Eppendorf/Biotronik分离操作方法。分离操作方法和分析仪的功能详细描述在仪器手册中(Handbuch des

LC 3000，Wissenschaftliche

GmbH Biotronik，Maintal，1996)。
方法49毛细管电泳容许肽和蛋白在电场中基于它们的电荷分离。分离的质量由此取决于所用的缓冲液，pH，温度和添加剂。使用的毛细管是所谓的融合的硅胶柱，其内径是50-100μm。该方法是评估肽的纯度和监测酶促裂解产物形成的良好标准。从毛细管柱上，肽二氢溶杆菌素和八氢溶杆菌素在约21分钟洗脱，片段4-11在约18分钟洗脱，1-3(LLF)在约24分钟洗脱，1-3(LLA(3-环已基))在约22分钟洗脱，脱酰胺的形式以双峰的形式在约30分钟(1-11)和24分钟(4-11)洗脱。在24小时后，在缓冲液中观察到脱酰胺产物的较大增加。通过在玻璃柱(长度72cm，内径50μm)上的毛细管电泳研究起始化合物二氢溶杆菌素和八氢溶杆菌素或混合物的4ng的酶促裂解产物。条件电流90μA，柱温25℃，100mM磷酸盐缓冲液，pH 3.0，UV检测210nm，在3秒内在压力下上样。
方法50将溶解在60％乙腈/0.1％ TFA中的3nmol的片段上样到用

预温育的测序仪的薄层上。使用正常的测序仪循环对蛋白质进行测序。通过在线HPLC，辅以40pmol PTH标准物的方式鉴定PTH-氨基酸。通过它们相对于标准氨基酸的位置鉴定非蛋白生成的氨基酸。通过第一PTH循环的氨基酸估计肽的纯度。在4-12阶段对各种肽进行测序。
另外的分析和制备方法 方法51仪器具有HPLC安捷伦系列1100的Micromass QuattroLCZ；柱Phenomenex Onyx Monolithic C18，100mm x 3mm.洗脱剂A11的水+0.5ml的50％甲酸，洗脱剂B11的乙腈+0.5ml的50％甲酸；梯度0.0分钟 90％A→2分钟 65％A→4.5分钟 5％A→6分钟 5％A；流速2ml/分钟；烘箱40℃；UV检测208-400nm. 方法52MS仪器类型Micromass ZQ；HPLC仪器类型WatersAlliance 2795；柱Phenomenex Synergi 2.5μ MAX-RP 100A Mercury 20mm x 4mm；洗脱剂A11的水+0.5ml的50％甲酸，洗脱剂B11的乙腈+0.5ml的50％甲酸；梯度0.0分钟 90％A→0.1分钟 90％A→3.0分钟 5％A→4.0分钟 5％A→4.01分钟 90％A；流速2ml/分钟；烘箱50℃；UV检测210nm. 方法53仪器安捷伦1100，具有DAD(G1315B)，双泵(G1312A)，自动取样器(G1313A)，溶剂脱气装置(G1379A)和柱自动调温器(G1316A)；柱安捷伦Zorbax Eclipse XDB-C8 4.6 x 150 x 5mm；柱温30℃；洗脱剂A0.01％在水中的TFA；洗脱剂B0.01％在乙腈中的TFA；流速2.00ml/分钟；梯度0-1分钟10％B，斜度，10-14分钟90％，再调节。
方法54仪器安捷伦1100，具有DAD(G1315B)，双泵(G1312A)，自动取样器(G1313A)，溶剂脱气装置(G1379A)和柱自动调温器(G1316A)；柱安捷伦Zorbax Eclipse XDB-C8 4.6 x 150 x 5mm；柱温30℃；洗脱剂A0.01％在水中的TFA；洗脱剂B0.01％在乙腈中的TFA；流速1.40ml/分钟；梯度0分钟10％ B，斜度，2.5-5分钟90％，再调节. 方法55柱(不锈钢柱，尺寸250 x 20mm)；静止相(DaicelChiralpak AD-H，5μm)；洗脱剂异已烷(90％)/乙醇+0.2％ AcOH+1％H2O(10％)，等度；流速15ml/分钟；温度30℃；UV检测220nm；样品重复注射500μl. 方法56柱(不锈钢柱，尺寸250 x 4.6mm)；静止相(Daicel ChiralpakAD-H，5μm)；洗脱剂异已烷(90％)/乙醇+0.2％ AcOH+1％ H2O(10％)，等度；流速1.0ml/分钟；温度30℃；UV检测220nm；样品注射10μl. 方法57柱柱Kromasil 100 C18，60 x 2.1mm 3.5μm，柱烘箱30℃，流速0.75ml/分钟，检测器210nm，运行时间15分钟；洗脱剂A具有5ml的HClO4/升水的水)，洗脱剂B乙腈；梯度0-1分钟 2％B，斜度，9-13分钟，98％ B，再调节. 方法58(手性制备HPLC，Chiralpak AD-H 40-60)；柱(不锈钢柱，尺寸250 x 20mm)；静止相(Daicel Chiralpak AD-H，5μm)；洗脱剂异已烷(40％)/乙醇+0.2％ AcOH+1％ H2O(60％)，等度；流速15ml/分钟；温度30℃；UV检测220nm；样品重复注射500μl. 方法59(手性分析HPLC，Chiralpak AD-H 40-60)；柱(不锈钢柱，尺寸250 x 4.6mm)；静止相(Daicel Chiralpak AD-H，5μm)；洗脱剂异已烷(40％)/乙醇+0.2％ AcOH+1％ H2O(60％)，等度；流速1.0ml/分钟；温度30℃；UV检测220nm；样品注射10μl. 一般操作方法 操作方法1(用TFA去除Boc保护基) 将Boc-保护的化合物悬浮在二氯甲烷(1/5-1/10的反应溶液)中，然后在氩气保护气氛下加入二氯甲烷中的30％的TFA(在100-1毫摩尔的级别上约1ml/10mg的原材料，在100-1微摩尔的级别上约1ml/1mg)，将混合物在室温下搅拌直至HPLC色谱图显示完全转化(例如方法1)。然后真空蒸馏掉溶剂，其中浴温不应当超过30℃。将粗产物悬浮在甲苯中，在旋转蒸发仪上再次浓缩并在高真空下干燥。重复该步骤数次(2-5次)。如果产物的纯度不足，在适当时通过色谱法，例如通过制备HPLC或通过凝胶色谱法进行纯化。
操作方法2(用30％在二氯甲烷中的TFA去除Boc保护基)将原材料吸收在30％ TFA(在二氯甲烷中的溶液)中并在室温搅拌30分钟。接着将所述溶剂在真空中蒸馏除去，其中浴温不应该超过30℃。接着在油泵真空下将所述产物干燥到恒重。
操作方法3(用在二噁烷中的4N盐酸去除Boc保护基)在氩气保护气氛下，提供在二噁烷(2-3ml)中的N-(叔丁氧羰基)-保护的化合物(1mmol)。在室温或当在冰中冷却并剧烈搅拌时，逐滴加入在二噁烷(30ml)中的4N盐酸。持续搅拌直到分析HPLC(方法1)显示完全转化(约30分钟到2小时)。将所述反应混合物在真空中在室温蒸发。将粗制产物吸收在少量二氯甲烷中并再次在真空中去除溶剂。用甲苯(2次)和用二氯甲烷(2次)重复该步骤数次。最终，将粗制产物冷冻干燥或在高真空干燥后立即进一步反应。如果产物的纯度不足，适当时通过色谱法，例如通过制备HPLC或凝胶色谱法进行纯化。
操作方法4(氢化酯裂解1)将肽苄酯溶解于甲醇或二噁烷(约3·10-4-2·10-3mol/l)中，随后加入0.1％TFA或0.1N盐酸(6-10当量)水溶液，在氩气保护气氛下，加入10％披钯碳(10mol％)。在室温，在大气压下进行氢化直到分析HPLC(例如方法1)显示完全的转化。过滤反应混合物(例如通过硅藻土，

)，在真空中浓缩并在高真空下干燥。如果产物的纯度不足，如果适当时通过色谱法，例如通过制备HPLC或凝胶色谱法进行纯化。
操作方法5(氢化酯裂解2)将肽苄酯溶解于甲醇(约3·10-4-2·10-3mol/l)中，随后在氩气保护气氛下，加入10％披钯碳(2-10mol％)。在室温，在大气压下进行氢化直到分析HPLC(例如方法1)显示完全的转化。过滤反应混合物(例如通过硅藻土，

)，在真空中浓缩并在高真空下干燥。如果产物的纯度不足，适当时通过色谱法，例如通过制备HPLC或凝胶色谱法进行纯化。
操作方法6(水解性酯裂解，水解)在氩气保护气氛下将羧酸酯(3mmol)提供到THF/水/DMF 200/100/2.5(20ml)中。在严格温度控制0℃下，将粉末氢氧化锂(3.6mmol，1.2当量)分份加入剧烈搅拌的溶液中。当在2h后通过分析HPLC(方法13)观察到没有完全转化时，再次加入固体氢氧化锂(3.3mmol，1.1当量)。重复该操作直至完全转化，随后将反应混合物在0℃下用0.1N盐酸水溶液调整到pH 3-4，真空浓缩并随后冷冻干燥。然后将粗产物凝胶-色谱分离(例如方法45)和/或通过制备HPLC(例如方法31)精制。
操作方法7(在树脂上的肽偶联)将结合于氯三苯甲基树脂的Fmoc-保护的氨基酸与20％的在DMF中的哌啶溶液混合并振摇30分钟。接着用通过玻璃料抽吸滤去溶液，再加入哌啶溶液，并再持续振摇30分钟。用抽吸滤去溶液，并将所述树脂用DMF，甲醇，THF和二氯甲烷洗涤。
将去保护的聚合物悬浮在DMF(1ml溶剂/100mg树脂)中并加入溶解在DMF中的Fmoc-保护的氨基酸(1.3-2.0当量)，DIEA(2.0-3.0当量)和TBTU(1.5-2.0当量)。将树脂在室温振摇过夜。对于后处理，将所述聚合物在玻璃料上通过吸滤收集并随后用DMF，THF和二氯甲烷洗涤。
在样品在乙酸/三氟乙醇/二氯甲烷1:1:3中去除后，可以通过分析证实获得的肽。
操作方法8(在Chemspeed机器人上进行自动固相合成) 仪器 Chemspeed ASW 2000，配有75ml反应器并用抽吸直接过滤到溶剂废弃物中。通过涡旋混合。
试剂 使用在N2位置上具有N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]保护基(Fmoc基团)的氨基酸。
除了在N2位置的Fmoc保护基外，在下列氨基酸的侧链中使用另外的保护基精氨酸和D-精氨酸在胍官能团上分别携带[(2，2，5，7，8-五甲基-3，4-二氢-2H-色烯-6-基)磺酰基(PMC基团)；丝氨酸和苏氨酸分别作为O3-叔丁基丝氨酸和苏氨酸进行侧链保护。在赖氨酸，鸟氨酸，2，4-二氨基丁酸和2，3-二氨基丁酸的侧链中的氨基是用苄氧基羰基(Cbz基团)保护的。
方法 将1.7g的2-氯三苯甲基氯树脂(Iris Biotech，CAS No 42074-68-0)(用α-Fmoc-保护的氨基酸预上样的，0.85mmol/g)无水提供在每个反应器中，加入17ml的DMF，并将所述混合物振摇30分钟。通过吸滤去除DMF。
为了合成所述的八肽，进行7个去保护-偶联循环，其每个由下列步骤组成 1.)Fmoc去除 -加入12.75ml的DMF和4.25ml的哌啶。
-将所述混合物振摇30分钟。
-通过吸滤去除DMF/哌啶混合物。
-加入12.75ml的DMF和4.25ml的哌啶。
-将所述混合物振摇10分钟。
-通过吸滤去除DMF/哌啶混合物。
2.)洗涤步骤(重复5次) -加入17ml的DMF。
-将所述混合物振摇30分钟。
-通过吸滤去除DMF。
3.)氨基酸偶联 -加入溶解于DMF的10.2ml的相应的Fmoc-氨基酸(1.5当量)。
-加入6.8ml的溶解于DMF的TBTU(2当量)。
-加入二异丙基乙胺(3当量)。
-将所述反应混合物振摇2小时，接着通过吸滤除去。
4.)洗涤步骤(重复3次) -加入17ml的DMF。
-将所述混合物振摇30分钟。
-通过吸滤去除DMF。
在最后一个反应步骤后，将已经通过吸滤收集的产物树脂用10ml的二氯甲烷转移到滤器中，通过过滤收集并洗涤两次，每次用5ml的二氯甲烷。
操作方法9(以完全去保护去除)将具有肽的树脂在反应器中与具有在DCM中50％ TFA(对于在操作方法8中所述大小的混合物20ml溶液)的玻璃料基质混合，加入三异丙基硅烷(100μl)和水(100μl)，并将所述混合物在室温振摇过夜。接着通过吸滤去除深色溶液，用4份DCM洗涤树脂，每次振摇2分钟，并再次通过吸滤收集。合并滤液并将溶剂蒸馏除去。残余物用MTBE搅拌，通过吸滤收集并吸收在甲醇中。最终，将甲醇在真空中蒸馏除去。
操作方法10(与桥头活性酯偶联)将八肽和活性酯(化合物17A或化合物277A(1.1当量)在0℃溶解于DMF(20-40μl/μmol的八肽)并加入DIEA(4-5当量)。将所述反应混合物在室温再搅拌90分钟到2小时。将所述混合物吸收在乙腈中并通过色谱法纯化。合并包含产物的级分并冷冻干燥。
操作方法11(环化)将起始化合物溶解于DMF(约50μl/μmol)并将所述溶液冷却到0℃。加入4-甲基吗啉(6当量)和HATU(3当量)并将所述混合物在0℃搅拌2小时。直接通过上样完全的反应混合物和根据方法45或提及的HPLC方法之一分离进行后处理。合并包含产物的级分并冷冻干燥或在旋转式蒸发仪上浓缩。
操作方法12(使用哌啶去除Fmoc基团)在0℃将肽与THF和哌啶的混合物(4+1，约20μl/μmol)混合。随后，将所述混合物在该温度搅拌1小时。将反应混合物直接通过方法45纯化并合并包含产物的级分并浓缩。
操作方法13(在液相阶段使用HATU进行肽偶联)将具有未保护的N端的环状肽(例如，示例性化合物407，408，409，等)和二肽(例如化合物8A，10A，等)(1.5当量)溶解于DMF(约30-80μl/μmol的环肽)并将所述溶液冷却到0℃。加入4-甲基吗啉(4当量)和HATU(1.6当量)并将所述混合物在室温搅拌2小时。接着用3ml的甲醇终止反应并根据方法45通过色谱法纯化。合并包含产物的级分并浓缩。
起始化合物 实施例1A D-亮氨酰-L-亮氨酰-L-苯基丙氨酰-[(3R)-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰—L-异亮氨酰-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-天冬酰胺酰]-丝氨酸三氟乙酸盐(二氢溶杆菌素) 和 实施例2A D-亮氨酰-L-亮氨酰-[3-环已基-L-丙氨酰]-[(3R)-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰—L-异亮氨酰-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-天冬酰胺酰]-丝氨酸三氟乙酸盐(八氢溶杆菌素) 二氢溶杆菌素

通过在WO 2004/099239中所述的发酵及其分离来制备溶杆菌素双三氟乙酸盐。将溶杆菌素双三氟乙酸盐(20g，13.29mmol)溶解于两份异丙醇/水9:2(每份110ml)中。在氩气保护气氛下，加入披钯碳(10％；每种情况中5g)。将反应混合物(在脱气后)在80-70巴的氢压下在40℃于加压的压热器中搅拌12小时。再次将披钯碳(10％；5g)加入反应中。将反应混合物(在脱气后)再在80-70巴的氢压下在40℃于加压的压热器中搅拌12小时。将反应混合物再次(在脱气后)在80-70巴的氢压下在40℃于加压的压热器中搅拌12小时。现在通过分析HPLC(方法10)不再能检测到溶杆菌素。通过硅藻土过滤反应混合物，在真空中浓缩并在高真空下干燥。获得20.10g(理论值的99％)的产物(60％二氢溶杆菌素，40％八氢溶杆菌素)。
实施例3A [(3R)-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰—L-异亮氨酰-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-天冬酰胺酰]-丝氨酸三氟乙酸盐
二氢/八氢溶杆菌素混合物的制备胰凝乳蛋白酶裂解 底物浓度为5mg/ml 将20g的二氢-(约40％)和八氢溶杆菌素(约60％)溶解于400ml的甲醇并接着加入3400ml的裂解缓冲液(0.1M碳酸氢铵/0.5M尿素pH 8)。在加入酶之前，将所述溶液在干燥烘箱中升温到37℃。加入800mg的胰凝乳蛋白酶(100ml的胰凝乳蛋白酶溶液水/乙二醇1:1，4mg/ml；1:25；预温到37℃)并在37℃进行反应。在0.5，1小时后取200μl的等分试样，用200μl的30％乙腈/0.1％ TFA终止酶裂解。在15分钟内在进行酶裂解的同时通过HPLC分析样品(保留时间片段4-11约3.6分钟，片段1-3(LLF)约9.6分钟，片段1-3(LLA(3-环已基))约11.3分钟)(溶剂A0.1％TFA，溶剂B 60％乙腈/0.1％ TFA，梯度0分钟30％ B，10分钟80％ B，11分钟100％ B，12分钟30％ B，15分钟30％ B；流速0.7ml/分钟，温度40℃，UV检测210nm)。在60分钟后用150ml的乙腈和约30ml的TFA终止酶反应。溶液的pH应该在1和2之间。可以将溶液存贮在-20℃直到进行制备分离。
用蛋白白介素-4双突变蛋白Arg(121)→Asp(121)/Tyr(124)→Asp(124)(拜耳健康护理(Bayer Healthcare)AG，D-Wuppertal)通过对照裂解，测试所用的胰凝乳蛋白酶批次的活性(70U/mg)。
制备纯化首先将上述的裂解混合物的500ml份的溶液在真空下通过硅藻土层，接着通过压力过滤漏斗(450μm，具有预先过滤器)过滤。将滤液上样到Varian Metaflash C-18 40M柱体中。用下列操作方法进行洗脱溶剂A0.05％在水中的TFA，溶剂B0.05％在乙腈中的TFA。流速50ml/分钟；0-3分钟5％ B；斜度；30分钟90％ B，33分钟。90％ B。合并包含产物的级分并进行冷冻干燥。从合并的包含产物的级分获得11.8g(理论值的87％)的标题化合物。
实施例4A (Z)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-4，4-二甲基戊-2-烯酸甲酯
将新戊醛(303.2g，3.41mol，10当量)和{[(叔丁氧)羰基]氨基}(二甲氧基磷酰基)乙酸甲酯(101.5g，0.341mol，1.0当量)溶解于THF(800ml)并冷却到-70℃。在-70℃，将TMG(78.7g，0.683mmol，6.95ml，2.0当量)缓慢逐滴加入并接着将所述混合物在-70℃搅拌4小时，随后在室温搅拌4天。浓缩反应混合物并接着通过用乙酸乙酯(两次500ml)和水振摇提取，用饱和的氯化钠溶液(100ml)洗涤合并的有机相并通过硫酸钠干燥。在浓缩后，将粗产物进行色谱分离(1.5kg的硅胶，洗脱剂环已烷/乙酸乙酯5:1)。获得67g(理论值的76％)的标题化合物。
备选地，在水性后处理后，粗制产物可以通过从环已烷/乙酸乙酯进行结晶而纯化。
Rf(硅胶，环已烷/乙酸乙酯 4:1)＝0.5 LC-MS(方法18)Rt＝2.5分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝158(100)[M-C4H8-CO2+H]+，280(5)[M+Na]+. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ 1.08(s，9H，C(CH3)3)，1.38(s，9H，OC(CH3)3)，3.61(s，3H，CO2CH3)，6.40(s，1H，Hβ)，8.14(s，1H，NH)。
13C NMR(126MHz，d6-DMSO)δ 28.46(3C)，29.53(3C)，33.28，52.22，78.89，125.62，147.05，154.67，166.25. HR-TOF-MS(方法24)C13H23NO4[M+H]+实测值258.1696，计算值.258.1700. 实施例5A N2-(叔丁氧羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酸甲酯
将(2Z)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-4，4-二甲基戊-2-烯酸甲酯(实施例4A，60g，233.2mmol)溶解于乙醇p.a./二噁烷3:1(1000ml)。用针(needle)使氩气保护气氛通过(～10分钟)。将溶液置于超声波浴中(约5分钟)并加入(+)-1，2-双[(2R，5R)-二乙基phospholano]苯(环辛二烯)铑(I)三氟甲磺酸盐(600mg，1重量％)。在3.5巴的氢压和在室温将所述混合物氢化3天。通过硅藻土过滤反应混合物，并浓缩洗脱物。将所述粗产物进行色谱分离(硅胶，洗脱剂环已烷/乙酸乙酯 4:1)。获得60g(理论值的99％)的标题化合物。
[α]20Na＝+5°(c＝0.33，在CHCl3中)。
DCI-MS(NH3)m/z(％)＝221(100)，260(40)[M+H]+，277(100)[M+NH4]+. 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 0.93(s，9H，C(CH3)3)，1.40(m，10H，OC(CH3)3)，1.68(“d”，J＝14.5Hz，2H，Hβ)，3.68(s，3H，OCH3)，4.30(t，J＝7.9Hz，1H，Hα)，4.81(d，br，J＝7.7Hz，1H，NH)。
13C NMR(126MHz，CDCl3)δ 28.30(3C，CH2C(CH3)3)，29.52(3C，OC(CH3)3)，30.61(CH2C(CH3)3)，46.27(CβH2)，51.19(Hα)，52.17(OCH3)，79.79(OC(CH3)3)，155.11(NHCO2)，174.39(CO2CH3)。
HR-TOF-MS(方法24)C26H51N2O8计算值519.3640，实测值519.3634[M+H]+. 实施例6A N2-(叔丁氧羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酸
将N-叔丁氧羰基-3-叔丁基-D-丙氨酸甲酯(实施例5A，60g，231mmol)溶解于THF p.a.(463ml)。在室温，缓慢逐滴加入一水合氢氧化锂(19.4g，462.7mmol)在水(463ml)中的溶液。当HPLC色谱(方法1)显示完全的转化(约20小时)时，使用1N盐酸水溶液将反应混合物小心调节到pH 3-4，同时在冰中冷却。将固体氯化钠(150g)加入反应混合物，接着将其用乙酸乙酯(500ml)提取两次。用饱和的氯化钠溶液洗涤合并的有机相，接着用硫酸钠干燥并过滤。将滤液在旋转式蒸发仪上浓缩并在高真空下干燥。获得55.4g(理论值的98％)的标题化合物。
HPLC/UV-Vis(方法3)Rt＝4.2分钟。
DCI-MS(NH3)m/z(％)＝263(100)[M+NH4]+，280(5)[M+N2H7]+. 1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝0.96(s，9H，C(CH3)3)，1.42(m，10H，OC(CH3)3，Hβ)，1.79(，，d“，J＝14.4Hz，2H，Hβ)，4.31(t，J＝8.0Hz，1H，Hα)，4.82(d，J＝8.4Hz，1H，NH)。
13C NMR(126MHz，CDCl3)δ＝28.32(3C)，29.54(3C)，30.74，45.92，51.24，80.19，155.41，178.93. HR-TOF-MS(方法24)C24H47N2O8计算值491.3327，实测值491.3328[2M+H]+. 实施例7A [N2-(叔丁氧羰基)-(3-叔丁基-D-丙氨酰)]-(3-叔丁基-L-丙氨酸)甲酯
在-20℃，将HOBt(3当量，39.4g，292mmol)，NMM(3当量，32.1ml，291.8mmol)，N-叔丁氧羰基-3-叔丁基-D-丙氨酸(实施例6A，1.0当量，97.3mmol)，EDC(2当量，37.3g，194.6mmol)和另外的NMM(2当量，21.4ml，194.5mmol)连续加入3-叔丁基-L-丙氨酸甲酯盐酸盐(1.1当量，21g，107mmol)在二氯甲烷p.a.(1.41)中的溶液。将反应混合物缓慢升温到室温(约12h)，其中通过HPLC观察到胺成分完全的转化。接着用饱和的碳酸氢钠水溶液(300ml)，5％柠檬酸水溶液(500ml)，饱和碳酸氢钠水溶液(500ml)和饱和的氯化钠溶液将反应混合物洗涤。将反应混合物通过硫酸钠干燥并过滤。将反应混合物在真空中蒸发到干燥并接着在高真空下干燥。获得36g(理论值的96％)的标题化合物，其不经过纯化而进行反应。
[α]20Na＝+24°(c＝0.10，在CH2Cl2中)。
DCI-MS(NH3)m/z(％)＝387(40)[M+H]+，404(100)[M+NH4]+. LC-MS(方法20)Rt＝2.6分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝287(100)[M-C5O2H8+H]+，387(60)[M+H]+. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ 0.95(s，br，18H，tBu)，1.35(dd，1H)，1.45(s，9H，OtBu)，1.50(dd，1H)，1.65(dd，1H)，1.95(dd，br，1H)，3.70(s，3H，OCH3)，4.15(，，t“，br，1H)，4.55(，，t“，br，1H)，4.80(d，1H)，6.65(d，br，1H)。
13C NMR(126MHz，d6-DMSO)δ 28.39(3C，C(CH3)3)，29.49(3C，C(CH3)3)，29.67(3C，C(CH3)3)，30.40(C(CH3)3)，30.44(C(CH3)3)，44.25，45.12，49.56，52.06，52.21，78.17，154.93，173.00，173.35. HR-TOF-MS(方法24)C20H39N2O5[M+H]+实测值387.2860，计算值387.2859. 实施例8A [N2-(叔丁氧羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-3-叔丁基-L-丙氨酸
将实施例7A(36g，93.1mmol)的化合物溶解于THF p.a.(279ml)。在约10℃，缓慢逐滴加入一水合氢氧化锂(7.82g，186.3mmol，2当量)在水(187ml)中的溶液。当HPLC色谱图(方法1)显示完全的转化(约20小时)，在200m巴下去除反应混合物中的THF，并接着用MTBE(200ml)提取。将有机相用乙酸乙酯(500ml)稀释，接着与水混合并用1N盐酸水溶液小心调节到pH 3-4。将合并的有机相用饱和的盐水洗涤，通过硫酸钠干燥，过滤，在真空中蒸发并在高真空下干燥。获得97.4g(理论值的97％)的标题化合物。
LC-MS(方法18)Rt＝2.26分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝373(100)[M+H]+. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ 0.83(s，br，18H，tBu)，1.31(s，9H，OtBu)，1.40(m，2H，β-CH2)，1.48(dd，J＝14.1，9.4Hz，1H，β-CH)，1.59(dd，J＝14.1，2.7Hz，1H，β-CH′)，3.98(m，1H，α-CH)，4.12(m，1H，α-CH)，6.73(d，J＝9.1Hz，1H，NH)，7.72(d，J＝7.9Hz，1H，NH)，12.42(s，br，1H，CO2H)。
13C NMR(126MHz，d6-DMSO)δ 28.49(3C)，29.66(3C)，29.78(3C)，30.52，30.58，44.63(β-CH2)，45.24(β-CH2)，49.67(α-CH)，52.40(α-CH)，78.29，155.05，172.97，174.61. HR-TOF-MS(方法24)C19H37N2O5计算值373.2702，实测值373.2717[M+H]+. 实施例9A (3-叔丁基-D-丙氨酰)-3-叔丁基-L-丙氨酸盐酸盐
将实施例8A的化合物(4.5g，12.1mmol)预先溶解在二噁烷(3ml)中。在室温，逐滴加入盐酸在二噁烷(30.2mmol，120mmol，10当量)中的4N溶液。将反应混合物搅拌30分钟，在真空中蒸发并在高真空下干燥。获得标题化合物，其为无色的固体(3.5g，99％理论值)。
LC-MS(方法18)Rt＝1.52分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝273.6(100)[M+H]+；ESInegm/z＝271.5(100)[M-H]-. 1H NMR(500MHz，d6-DMSO)δ 0.85(s，9H，tBu)，0.86(s，9H，tBu)，1.49(dd，J＝14.3，1.6Hz，1H，β-CH)，1.50(d，J＝13.8Hz，1H，β-CH)，1.64(dd，J＝14.3，4.0Hz，1H，β-CH)，1.71(dd，J＝14.3，6.9Hz，1H，β-CH)，3.77(，，t“，J＝6.5Hz，1H，α-CH)，4.14(m，1H，α-CH)，8.27(s，br，3H)，8.94(d，J＝8.2Hz，1H，NH)，12.58(s，br，1H，CO2H)。
13C NMR(126MHz，d6-DMSO)δ 28.41(3C)，29.50(3C)，30.08，30.38，44.46，44.80，50.03，50.30，169.10，173.98. HR-TOF-MS(方法24)C14H29N2O3计算值273.2173，实测值273.2167[M+H]+. 实施例10A [N2-(苄氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-3-叔丁基-L-丙氨酸
在氩气保护气氛下，将二肽(实施例9A，3.73g，12.1mmol)溶解于THF(170ml)中。在0℃加入水(170ml)，苄氧基羰基氧基琥珀酰亚胺酯(4.52g，18.1mmol，1.5当量)和NMM(4.28g，4.23mmol，3.5当量)，随后在室温剧烈搅拌直到所有的原材料反应(数小时，HPLC监测，方法1)。用冰醋酸猝灭混合物。THF在真空中去除。用乙酸乙酯层覆盖剩余的水相，使用4N盐酸酸化到pH<3，接着用乙酸乙酯提取数次。将有机相用饱和的氯化钠溶液洗涤，通过硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将得到的泡沫用乙腈搅拌，由此形成无色的固体，其通过过滤收集并且用少量乙腈洗涤。在将其浓缩后，该方法可以用滤液再重复数次。将合并的固体在高真空下干燥，由此获得标题化合物，其为固体。将剩余的母液浓缩并通过制备HPLC(方法26)纯化。获得标题化合物(合并的固体和来自HPLC分离的纯化产物)，其为无色的固体(3.49g，71％理论值)。
HPLC/UV-Vis(方法1)Rt＝2.6分钟。
LC-MS(方法21)Rt＝2.46分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝363(60)，407(100)[M+H]+.ESInegm/z＝297(100)，405.5(40)[M-H]-. 1H NMR(500MHz，d6-DMSO)δ 0.81(s，9H，tBu)，0.83(s，9H，tBu)，1.40-1.44(m，2H，β-CH2)，1.49(dd，J＝14.3，9.7Hz，1H，β-CH)，1.58(dd，J＝13.5，1.4Hz，1H，β-CH)，4.07(m，1H，α-CH)，4.13(m，1H，α-CH)，4.94(d，J＝12.3Hz，1H，CHHPh)，4.99(d，J＝12.5Hz，1H，CHHPh)，7.25-7.32(m，5H，ArH)，7.92(d，J＝8.5Hz，1H，NH)。
13C NMR(126MHz，d6-DMSO)δ 29.49(3C)，29.75(3C)，30.41，30.46，44.52，45.11，49.55，52.73，65.49，127.70(2C)，127.91，128.48(2C)，137.31，155.59，172.52，174.50. HR-TOF-MS(方法24)C22H34N2O5计算值407.2541，实测值407.2531[M+H]+. 实施例11A 甲基-(2R*，3R*)-N2-[(苄氧基)羰基]-N2-[(苄氧基)羰基氨基]-3-[(叔丁氧-羰基)氨基]苯丙氨酸酯
在氩气保护气氛下，在反应溶剂THF(300ml)中提供六甲基二硅基胺基锂(157.5mmol，157.5ml，2.2当量)在THF中的1N溶液。在-78℃，缓慢逐滴加入(rac)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-3-苯基丙酸甲酯(A.V.Rao Rama，A.K.Singh，Ch.V.N.S.Varaprasad，Tetrahedron Lett.，1991，32，4393-4396)(20g，71.2mmol)的溶液。将所述混合物在-25℃搅拌10分钟，并接着再次冷却到-78℃。以一份将氮杂二羧酸二苄酯(34.2g，114.6mmol，1.6当量)加入反应混合物中。将所述混合物在-60到-45℃搅拌3小时。为了终止反应，将所述混合物再次冷却到-78℃，加入乙酸(20.5ml，358mmol，5当量)并接着将所述混合物升温到0℃，最终加到室温。将反应混合物在真空中蒸发并吸收在乙酸乙酯(1000ml)中。将混悬液用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤2次，用水洗涤1次，用5％柠檬酸水溶液洗涤1次并用饱和氯化钠水溶液洗涤1次。所有的水相用乙酸乙酯单独反提取。所有的有机相在真空中蒸发并再次吸收在二氯甲烷(2000ml)中，过滤，通过硫酸钠干燥，再次过滤，在真空中蒸发并在高真空下干燥。获得7.2g(理论值的18％)的标题化合物，其为固体。浓缩二氯甲烷相的滤液(见上)，接着再次从甲醇中进行结晶，由此获得13.2g(理论值的26％)的标题化合物。
LC-MS(方法23)Rt＝6.8分钟； MS(ESIpos.)m/z(％)＝578(40)[M+H]+，1156(100)[2M+H]+. MS(ESIneg.)m/z(％)＝576(100)[M-H]-. 实施例12A (2S*，3R*)-N2-[(苄氧基)羰基]-N2-[(苄氧基)羰基氨基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]苯丙氨酸甲酯
在氩气保护气氛下，在0℃，将TMG(50ml，399mmol)加入甲基-(2R*，3R*)-N2-[(苄氧基)羰基]-N2-[(苄氧基)羰基氨基]-3-[(叔丁氧羰基)-氨基]苯丙氨酸酯(实施例11A，20.5g，35.5mmol)在无水DMF p.a.(750ml)中的溶液。使反应混合物融化并且搅拌直到HPLC色谱法(方法1)显示完全的转化(约60％产物)(约12小时)，从而接着通过加入乙酸(pH 4-6)终止反应。反应混合物在室温在真空中蒸发并吸收在乙酸乙酯中。有机相用水洗涤2次，用5％柠檬酸洗涤2次，用水洗涤1次，用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤两次，用饱和的氯化钠水溶液洗涤1次，通过硫酸钠干燥，过滤，在真空中蒸发并在高真空下干燥。将粗制产物通过制备HPLC(方法30)或急骤色谱法(硅胶，环已烷/乙酸乙酯3:1)纯化。获得7.7g(理论值的37％)的标题化合物和5g的起始化合物(理论值的25％)。
HPLC/UV-Vis(方法1)Rt＝3.0分钟。
LC-MS(方法10)Rt＝3.0分钟； MS(ESIpos.)m/z(％)＝478(100)[M-Boc+H]+，578(30)[M+H]+. LC-MS(方法23)Rt＝7.0分钟； MS(ESIpos.)m/z(％)＝578(40)[M+H]+，1156(100)[2M+H]+. MS(ESIneg.)m/z(％)＝576(100)[M-H]-. 实施例13A 甲基-(2S*，3R*)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]苯丙氨酸酯
在氩气保护气氛下，将阮内镍(61mg，约10mol％)加入(2S*，3R*)-N2-[(苄氧基)羰基]-N2-[(苄氧基)羰基氨基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]苯丙氨酸甲酯(实施例12A，705mg，1.22mmol)在甲醇/二氯甲烷1:1(42ml)中的溶液。将反应混合物在80巴的氢压下和在室温在加压的压热器中氢化(40小时)。HPLC色谱图显示完全的转化。在氩气保护气氛下，通过玻璃料过滤反应混合物并将所述玻璃料用甲醇/水/0.2％乙酸洗涤数次。将所述滤液在真空中蒸发并在高真空下干燥。获得固体(约3g)，接着将其悬浮在超声波浴的乙酸乙酯中。将所述混悬液与EDTA(400mg)在7％碳酸氢钠水溶液(400ml)中的EDTA(400mg)的溶液混合。将水相用乙酸乙酯(100ml，三次)提取。接着，将合并的有机相用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤1次，并用饱和的氯化钠水溶液洗涤两次。用乙酸乙酯分别反提取所有的水相。接着，将合并的有机相通过硫酸钠干燥，过滤并在高真空下干燥。获得的产物是固体(1.26g，定量的)，其无需精制而进一步反应。
HPLC/UV-Vis(方法2)Rt＝1.7分钟。
LC-MS(方法23)Rt＝4.1分钟； MS(ESIpos.)m/z(％)＝239(100)，295(80)[M+H]+. 实施例14A 甲基(2S*，3R*)-N2-[(苄氧基)羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]苯丙氨酸酯
在0℃，在氩气保护气氛下，将NMM(260mg，2.6mmol，2.1当量)加入甲基(2S*，3R*)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]苯丙氨酸酯(实施例13A，360mg，1.2mmol)和N-苄氧基羰基氧基琥珀酰亚胺酯(610mg，2.44mmol，2当量)在THF(25ml)中的溶液。将所述反应混合物缓慢升温(12小时)，由此通过HPLC(方法2)观察到完全的转化。加入乙酸(0.7ml)，并将所述混合物随后在真空中浓缩和通过制备HPLC(方法31)纯化。获得396mg(理论值的76％)的标题化合物。
HPLC/UV-Vis(方法2)Rt＝2.7分钟。
LC-MS(方法23)Rt＝6.4分钟； MS(ESIpos.)m/z(％)＝329(100)[M-C4H8-CO2+H]+，429(80)[M+H]+，858(60)[2M+H]+. 实施例15A (2S*，3R*)-N2-[(苄氧基)羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]苯丙氨酸
在氩气保护气氛下，提供甲基(2S*，3R*)-N-[(苄氧基)羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]苯丙氨酸酯(实施例15A，755mg，1.76mmol)在THF/水 2:1(30ml)中的溶液。在0℃，在剧烈搅拌的同时，缓慢逐滴加入脱气的1％的一水合氢氧化锂(86.5mg，3.6mmol，2当量)的水溶液。将所述混合物在室温搅拌直到HPLC色谱图(方法1)显示完全的转化(约1小时)。随后加入乙酸(0.5ml)，并将反应混合物在真空中浓缩并用乙酸乙酯(100ml)层覆盖。接着，将所述水相用5％柠檬酸(pH 2-3)酸化并接着用乙酸乙酯(50ml)提取三次。将合并的有机相用饱和的氯化钠水溶液(20ml)洗涤2次，通过硫酸钠干燥，过滤，在真空中浓缩并在高真空下干燥。获得750mg(定量)的标题化合物的粗制产物，其通过制备HPLC(方法31)进行精制。
HPLC/UV-Vis(方法1)Rt＝2.4分钟。
LC-MS(方法23)Rt＝6.1分钟； MS(ESIpos.)m/z(％)＝359(100)，415(60)[M+H]+，829(60)[2M+H]+. MS(ESIneg.)m/z(％)＝413(100)[M-H]-. 实施例16A (3R)-N2-[(苄氧基)羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-L-苯丙氨酸
将(2S*，3R*)-N-[(苄氧基)羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]苯丙氨酸(实施例15A，750mg，1.8mmol)的对映异构体的混合物通过制备HPLC(方法38)分离。获得334mg(98％ee，45％理论值)的(2S，3R)-N-[(苄氧基)羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]苯丙氨酸(标题化合物)和275mg(98％ee，37％理论值)(2R，3S)-N-[(苄氧基)-羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]苯丙氨酸(另外的对映异构体)。
通过方法14确定对映异构体。
[α]20Na＝+22°(c＝0.50在氯仿中)(标题化合物)。
[α]20Na＝-20°(c＝0.49在氯仿中)(另外的对映异构体)。
实施例17A 五氟苯基(3R)-N2-[(苄氧基)羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-L-苯丙氨酸酯
在二氯甲烷(30ml)中提供实施例16A的化合物(2.0g，4.83mmol)并在0℃加入五氟苯酚(4.4g，24.13mmol，5当量)和EDC(1.4g，7.24mmol，1.5当量)。将所述反应缓慢到达室温并在该温度搅拌过夜。对于后处理，在旋转式蒸发仪上在30℃的最大水浴温度下将溶剂完全去除，并在通过制备HPLC(方法28)精制残余物后，分离2.3g(83.3％理论值)的产物。
HPLC(方法1)Rt＝3.44分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝3.23分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝581(13)[M+H]+，525(100)[M-C4H8+H]+. 1H NMR(500MHz，d6-DMSO)δ＝1.36(s，9H，3CH3)，4.97(d，J＝7.1Hz，2H，PhCH2O)，5.15(dd，J＝9.7，4.8Hz，1H)，5.49(dd，J＝10.2，4.6Hz，1H)，7.18(d，J＝10.4Hz，1H，ArH)，7.25-7.42(m，8H，ArH)，7.68(d，J＝10.4Hz，1H，NH)，7.90(d，J＝9.8Hz，1H，NH)。
13C NMR(126MHz，d6-DMSO)δ＝27.97，54.33，58.72，65.75，78.65，124.10，126.48，127.37127.46，127.82，128.23(2C)，136.40/138.36(C-F)，136.54，138.49/140.27(C-F)，139.34/141.40(C-F)，154.72，156.04，167.10. HR-TOF-MS(方法24)C28H26N2O6[M+H]+实测值581.1719，计算值581.1706. 实施例18A 2，5-二氧代吡咯烷-1-基(3R)-N2-[(苄氧基)羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-L-苯丙氨酸酯
在氩气保护气氛下，在二氯甲烷(10ml)中提供(3R)-N-[(苄氧基)羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-L-苯丙氨酸(实施例16A，100.0mg，241.28μmol)，并将所述溶液冷却到0℃，加入N-羟基琥珀酰亚胺(33.3mg，289.53μmol，1.2当量)和EDC(55.5mg，289.53μmol，1.2当量)并将所述混合物在0℃搅拌过夜。对于后处理，在30℃的水浴温度，将溶剂在旋转式蒸发仪上完全去除，并在通过制备HPLC(方法32)精制后，分离96.0mg(77.8％理论值)的产物。
HPLC(方法1)Rt＝2.53分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝2.58分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝529(28)[M+NH4]+，412(100)。
实施例19A 甲基[N2-[(苄氧基)羰基]-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-L-苯丙氨酸酯]
在氩气保护气氛下，在二氯甲烷(5ml)中提供N-苄氧基羰基-保护的二肽(实施例10A，58.4mg，0.14mmol)，将所述溶液随后冷却到-10℃，并将HOBt(77.7mg，0.57mmol，4当量)，NMM(47μl，43.7mg，0.43mmol，3当量)和EDC(55.1mg，0.29mmol，2当量)连续加入，最终加入示例性化合物13A(94.0mg，0.14mmol，1当量)，和NMM 32μl，29.1mg，0.29mmol，2当量)。将所述反应缓慢升温到室温并在该温度过夜搅拌。对于后处理，将沉淀物滤去，在30℃的水浴温度将滤液在旋转式蒸发仪上浓缩，和在通过制备HPLC(方法31)精制残余物后，获得77.9mg(79.4％理论值)的产物。
HPLC(方法1)Rt＝3.12分钟。
LC-MS(方法23)Rt＝7.05分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝683(100)[M+H]+，1366(75)[2M+2H]2+. 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝0.89(d，J＝4.6，9H，CH2C(CH3)3)，0.96(d，J＝2.9，9H，CH2C(CH3)3)，1.23-1.49(m，11H包括1.39(s，9H，OC(CH3)3)，1.85(m，2H，CH2C(CH3)3)，3.59/3.68(2s，3H，OCH3)，4.04(m，1H，αCH)，4.41(m，1H，αCH)，4.88-5.42(m，6H)，5.99(m，1H，NH)，6.22(m，1H，NH)，7.13-7.42(m，10H，ArH)。
HR-TOF-MS(方法24)C37H55N4O8计算值683.4015，实测值683.4033[M+H]+. 实施例20A [N2-(苄氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-{(叔丁氧羰基)氨基}-L-苯丙氨酸]
在0℃，将所述酯(实施例19A，1.0g，1.46mmol)提供在THF(100ml)和水(50ml)的混合物中，并逐滴加入0.5％的氢氧化锂溶液(12ml，59.6mg，2.49mmol，1.7当量)。将所述溶液在0℃搅拌4小时直到完全转化。对于后处理，将反应物与磷酸二氢钾(996.4mg，7.32mmol)混合，在30℃的水浴温度将所述溶剂在旋转式蒸发仪上完全去除，并将所述残余物通过制备HPLC(方法28)纯化。获得737.0mg(75.3％理论值)的产物。
HPLC(方法1)Rt＝2.86分钟。
LC-MS(方法21)Rt＝2.89分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝669(20)[M+H]+，569(100)[M-C4H8-CO2+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C36H53N4O8[M+H]+实测值669.3881，计算值669.3858. 实施例21A 2，5-二氧代吡咯烷-1-基[N2-(苄氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-{(叔丁氧羰基)氨基}-L-苯丙氨酸酯]
在氩气保护气氛下，将示例性化合物20A(30.0mg，44.85μmol)溶解于二氯甲烷(6ml)，并将所述溶液冷却到0℃，加入N-羟基琥珀酰亚胺(6.2mg，53.83μmmol，1.2当量)，EDC(10.3mg，53.83μmol，1.2当量)和

分子筛，将所述混合物0℃搅拌过夜。将溶剂在30℃的最大水浴温度在旋转式蒸发仪上去除，将残余物吸收在乙酸乙酯中并用5％柠檬酸溶液(2次)和饱和的氯化钠溶液(2次)连续洗涤，将有机相通过硫酸钠干燥并过滤，在30℃的水浴温度将所述溶剂在旋转式蒸发仪上浓缩，并在RP柱体(洗脱剂乙酸乙酯)上精制后，从残余物分离34.0mg(98.7％理论值)的产物。
HPLC(方法1)Rt＝2.99分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝2.88分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝766(57)[M+H]+，666(100)[M+H-C4H8-CO2]+. 实施例22A N2-(叔丁氧羰基)-L-别苏氨酸
将L-别-苏氨酸(3.15g，26.44mmol)溶解于水-二噁烷(1+2，75ml)，加入二碳酸二叔丁酯(6.35g，29.09mmol，1.1当量)和三乙胺(4.79ml，34.38mmol，1.3当量)并将所述混合物在室温搅拌过夜。接着，将溶剂在真空中去除。将残余物吸收在乙酸乙酯中并用1M柠檬酸提取。将水相再用乙酸乙酯提取数次，直到在其中不再能检测到任何产物(HPLC，方法5)。接着，将合并的有机提取物通过硫酸钠干燥，浓缩并在油泵真空下干燥直到恒重。将所述产物进一步反应，不经过进一步纯化。产率6.5g的粗制产物。
HPLC(方法5)Rt＝3.23分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.51分钟，MS(ESIneg)m/z(％)＝217.8(100)[M-H]-. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝1.08(d，J＝5.4Hz，3H)，1.38(s，9H)，3.72-3.84(m，2H)，6.77(d，J＝7.4Hz，1H)。
实施例23A N2-(叔丁氧羰基)-L-别苏氨酸苄酯
所述方法以与下列文献类似的方式进行；S.B.Cohen，R.Halcomb，J.Am.Chem.Soc 2004，124，2534-25M 43.W.Jiang，J.Wanner，R.J.Lee，P.-Y.Bounaud，D.L.Boger，J.Am.Chem.Soc 2003，125，1877-1887。
将实施例22A的化合物(6.8g的粗制产物，26.44mmol)置入甲醇(177ml)中，加入碳酸铯(5.56g，17.06mmol，0.63当量)，搅拌所述混合物直到完全溶解。接着通过蒸馏除去溶剂，加入DMF(42ml)和接着加入苄基溴(4.06ml，34.12mmol，1.26当量)。将所述混合物搅拌16小时，接着将所述DMF在真空中基本除去。将所述残余物置入水中并用3份二氯甲烷提取。将合并的有机相通过硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。将所述粗制产物在Biotage RP18-Flash(水-乙腈梯度0-5分钟。10％乙腈，3-30分钟。10-90％乙腈，30-35分钟。90％乙腈；流速20ml/分钟。)上进行纯化。产率5.00g(16.16mmol，52％理论值)。
HPLC(方法5)Rt＝4.36分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝2.39分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝332.6(25)[M+H]+. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝1.09(d，J＝6.4，3H)，1.37(s，9H)，3.82(m，1H)，3.95(dd，J＝6.4，J＝8.1Hz)，4.98(d，J＝5.4Hz，1H)，5.09(d，J＝12.7Hz，1H)，5.16(d，J＝12.7Hz，1H)，7.10(d，J＝8.1Hz，1H)，7.31-7.37(m，5H)。
实施例24A L-别苏氨酸苄酯三氟乙酸盐
根据操作方法2，将来自实施例23A的530mg的化合物与8.0ml的TFA溶液反应。将所述粗制产物(589mg，定量)进行进一步的反应，而无需进一步纯化。
HPLC(方法5)Rt＝3.18分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.24分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝210.0(100)[M+H]+. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝1.15(d，J＝6.6Hz，3H)，4.09-4.10(m，2H)，5.26(s，2H)，7.36-7.44(m，5H)，8.34(br.S，2H)。
实施例25A [N2-(叔丁氧羰基)-L-异亮氨酰]-L-别苏氨酸苄酯
将实施例24A的化合物(2.30g 7.12mmol)和N-(叔丁氧羰基)-L-异亮氨酸(2.14g，9.25mmol，1.3当量)溶解于DMF(21.0ml)。加入4-甲基吗啉(1.3ml，12.02mmol，1.7当量)和HATU(3.52g，9.25mmol，1.3当量)，并将所述混合物在室温搅拌16小时。接着，首先按照方法45随后根据方法46，通过色谱法纯化完全的混合物。产率1.75g(4.14mmol，58％理论值)，其为浅米色无定形固体。
HPLC(方法5)Rt＝4.59分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝2.56分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝423.8(70)[M+H]+. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝0.74-0.78(m，6H)，1.01-1.07(m，2H)，1.10(d，J＝6.3Hz，3H)，1.37(s，9H)，1.64-1.66(m，1H)，3.86-3.94(m，1H)，4.28(dd，J＝7.3，J＝7.3Hz，1H)，5.05(d，J＝5.6Hz)，5.09(d，J＝12.7Hz，1H)，5.13(d，J＝12.7Hz1H)，6.70(d，J＝9.0Hz，1H)，7.31-7.36(m，5H)，8.11(d，J＝8.1Hz)。
HR-TOF-MS(方法24)C22H35N2O6计算值423.2490，实测值423.2489[M+H]+. 实施例26A L-异亮氨酰-L-别苏氨酸苄酯三氟乙酸盐
根据方法2，将实施例25A的化合物(224mg，0.53mmol)用8.0ml的TFA溶液处理。获得253mg的实施例26A的粗制产物(约91％纯，0.53mmol，定量)并在不经过进一步纯化的情况下反应。
HPLC(方法5)Rt＝3.51分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.58分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝323.6(100)[M+H]+. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝0.77-0.86(m，6H)，1.02(m，1H)，1.15(d，J＝6.4Hz，3H)，1.45(m，1H)，1.77(m，1H)，3.97(m，1H)，4.34(m，1H)，5.11(d，J＝12.5Hz，1H)，5.16(d，J＝12.5Hz，1H)，7.37-7.39(m，5H)，7.47(m，1H)，8.07-8.08(m，3H)，8.69(d，J＝7.3Hz，1H)。
实施例27A [N2-(叔丁氧羰基)-D-精氨酰]-L-异亮氨酰-L-别苏氨酸苄酯
将实施例26A的化合物(253mg91％纯度，0.53mmol)和N2-(叔丁氧羰基)-D-精氨酸(145mg，0.53mmol，1当量)溶解于DMF(3.0ml)。加入4-甲基吗啉(76μl，0.70mmol，1.3当量)和HATU(221mg，0.58mmol，1.1当量)，并将所述混合物在室温搅拌16小时。接着，将完全的混合物置于HPLC柱上并通过色谱法(方法34)纯化。产率364mg(0.53mmol，99％理论值)。
HPLC(方法5)Rt＝3.91分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝2.04分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝579.9(100)[M+H]+. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝0.72-1.16(m，8H)，1.37(s，9H)，1.46(m，2H)，1.60(m，1H)，1.69(m，1H)，3.06(m，2H)，3.93-4.01(m，2H)，4.25(m，1H)，4.33(m，1H)，5.07-5.14(m，2H)，6.96(d，J＝7.8，1H)，7.35(m，5H)，7.45(m，1H)，7.66(d，J＝8.8)，8.33(m，1H)。
实施例28A D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酸苄酯双三氟乙酸盐
根据操作方法2，将实施例27A的化合物(237mg，0.34mmol)用2.0ml的TFA溶液处理。获得255mg的实施例28A的粗制产物(94％纯度，0.34mmol，定量)，并将其在不经过进一步纯化的情况下反应。
HPLC(方法5)Rt＝3.42分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.42分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝479.3(50)[M+H]+. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝0.73-0.81(m，5H)，1.11-1.19(m，5H)，1.33-1.49(m，3H)，1.74(m，3H)，3.10(m，2H)，3.88-3.95(m，2H)，4.25(dd，J＝6.8，J＝7.1Hz，1H)，4.46(dd，J＝7.3，J＝8.8Hz，1H)，5.09(d，J＝12.5Hz，1H)，5.15(dd，J＝12.5Hz)，7.36(m，5H)，7.61(m，1H)，8.10(m，2H)，8.51(d，J＝7.6Hz，1H)，8.57(d，J＝9.0Hz，1H)。
实施例29A [N2-(叔丁氧羰基)-L-亮氨酰]-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酸苄酯三氟乙酸盐
将实施例28A的化合物(240mg，0.34mmol)和N-(叔丁氧羰基)-L-亮氨酸(79mg，0.34mmol，1当量)溶解于二氯甲烷-DMF(5+1，6ml)中。加入二异丙基乙胺(296μl，1.70mmol，5当量)和HATU(194mg，0.51mmol，1.5当量)并将所述混合物在室温搅拌24小时。接着，将完全的混合物置于凝胶色谱柱上并通过色谱法纯化(方法45，洗脱剂是甲醇)。产率146mg(0.18mmol，53％理论值)。
HPLC(方法5)Rt＝4.15分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.92分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝692.8(100)，[M+H]+. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝0.72-1.23(m，22H)，1.37(s，9H)，1.38-1.71(m，3H)，3.08(m，2H)，3.91-4.00(m，2H)，4.26(m，1H)，4.33-4.42(m，2H)，5.07-5.15(m，2H)，6.92(d，J＝7.8Hz，1H)，7.35(m，5H)，7.47(m，1H)，7.88(d，J＝8.1Hz，1H)，7.93(d，J＝9.0Hz，1H)，8.35(d，J＝7.3Hz，1H)。
实施例30A L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酸苄酯双三氟乙酸盐
根据操作方法2，将实施例29A的化合物(220mg，0.27mmol)用2.0ml的TFA溶液处理。获得223mg的实施例28A的粗制产物(0.27mmol，定量.)并在不经过进一步纯化的情况下反应。
HPLC(方法4)Rt＝3.80. LC-MS(方法22)Rt＝2.54分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝592.4(2)[M+H]+. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝0.73-1.11(m，13H)，1.22-1.74(m，12H)，3.11(m，4H)，3.60(m，2H)，3.87(m，1H)，3.95(m，1H)，4.25(m，1H)，4.38(dd，J＝7.8，J＝8.6Hz，1H)，4.64(dd，J＝7.8，J＝13.7Hz，1H)，5.09(d，J＝12.7Hz，1H)，5.13(d，J＝12.7Hz，1H)，7.35(m，5H)，7.58(m，1H)，8.07(m，2H)，8.25(d，J＝8.8Hz，1H)，8.39(d，J＝7.6Hz，1H)，8.77(d，J＝8.3Hz，1H)。
实施例31A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酸苄酯三氟乙酸盐
将实施例30A的化合物(223mg，0.27mmol)和N-(叔丁氧羰基)-(3R)-3-羟基-L-亮氨酸(89mg，0.33mmol，1.22当量)溶解于DMF(6ml)并将所述溶液冷却到-20℃。加入4-甲基吗啉(150μl，1.36mmol，5当量)和HATU(165mg，0.44mmol，1.6当量)，并将所述混合物在室温搅拌16小时。接着，将完全的混合物置于凝胶色谱柱上并通过色谱法纯化(方法45，洗脱剂是甲醇)。产率188mg(0.20mmol，74％理论值)。
HPLC(方法5)Rt＝4.24分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.99分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝821.9(100)[M+H]+. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝0.71-0.90(m，15H)，1.00(m，1H)，1.10(d，J＝6.4Hz，3H)，1.24-1.26(m，3H)，1.38(s，9H)，1.42-1.71(m，6H)，3.06-3.17(m，3H)，3.45(m，1H)，3.61(m，1H)，3.93(m，1H)，4.05(m，1H)，4.26(m，1H)，4.35(m，2H)，4.54(d，J＝7.8Hz，1H)，5.07-5.15(m，2H)，5.45(d，J＝9.0Hz，1H)，7.35(m，5H)，7.46(m，1H)，7.85(d，J＝7.8Hz，1H)，7.89(d，J＝8.8Hz，1H)，7.97(d，J＝8.1Hz，1H)，8.35(d，J＝7.6Hz，1H)。
实施例32A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酸三氟乙酸盐
将实施例31A的化合物(100mg，0.11mmol)溶解于冰醋酸(4.3ml)，加入10％披钯活性碳(22mg)，并将所述混合物在室温在大气压下氢化2小时。将所述催化剂通过过滤去除，并将所述滤液冷冻干燥。将所述粗制产物通过色谱法纯化(方法33)。获得58mg(60μmol，55％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.75分钟。
LC-MS(方法1方法19)Rt＝1.80分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝731.8(100)[M+H]+. 实施例33A O4-甲基[N2-(叔丁氧羰基)甘氨酰]-(3S)-3-羟基-L-天冬氨酸酯
将(3S)-3-羟基天冬氨酸通过G.Cardillo，L.Gentilucci，A.Tolomelli，C.Tomasini，Synlett 1999，1727-1730的方法制备并且以类似于P.G.Mattingly，M.J.Miller，J.Org.Chem.(有机化学杂志)1983，48，3556-3559的方法，使用微波辐射，在密闭的反应器中，转化为(2S，3S)-2-氨基-3-羟基-4-甲氧基-4-氧代丁酸盐酸盐。将(2S，3S)-2-氨基-3-羟基-4-甲氧基-4-氧代丁酸盐酸盐(447mg，2.24mmol)溶解于DMF(9ml)。将所述溶液冷却到0℃，加入Boc-甘氨酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯(763mg，2.91mmol，1.3当量)，DMAP(14mg，0.11mmol，0.05当量)并最终加入DIPEA(1170μl，6.72mmol，3当量)。使所述混合物缓慢升温到室温并接着搅拌2小时。将所述混合物用冰醋酸酸化，与乙腈混合并在Sephadex LH 20(方法45)上进行色谱法。合并包含产物的级分，浓缩并再次进行色谱分离(方法46)。将获得的产物(761mg，定量)进行进一步的反应，而无需进一步纯化。对于分析目的，通过HPLC(方法44)获得纯的样品。
HPLC(方法5)Rt＝3.15分钟 LC-MS(方法1)Rt＝1.17分钟，MS(ESIpos)＝321.2[M+H]+. [α]20Na＝+39°(c＝0.55，MeOH)。
1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝1.40(s，9H)，3.49-3.60(m，2H)，3.61(s，3H)，4.29(m，1H)，4.73(d，J＝6.6Hz，1H)，7.01(m，1H)，7.49(d，J＝6.99Hz，1H)。
13C-NMR(d6-丙酮，126MHz，DEPT)δ(ppm)＝28.5(CH3)，42.2(CH2)，51.8(CH3)，53.7(CH)，56.0(CH)，79.2(四重峰(quat))，169.6(四重峰)，169.7(四重峰)，172.8(四重峰)，173.8(四重峰)。
HR-TOF-MS(方法24)C12H22N2O8[M+H]+计算值321.1298，实测值321.1299. 实施例34A [N2-(叔丁氧羰基)甘氨酰]-[(3S)-3-羟基-O4-甲基-L-天冬氨酰]-O3-(叔丁基)-L-丝氨酸苄酯
将实施例33A的化合物(390mg，1.22mmol)和O-(叔丁基)-L-丝氨酸苄酯(445.14mg，1.22mmol，1当量)溶解于DMF(9ml)。将所述溶液冷却到0℃，接着加入2.44ml(2当量)的4-甲基吗啉在DMF中的1M溶液，随后加入HATU(925mg，2.44mmol，2当量)。将所述混合物在0℃搅拌约15分钟，再加入2.44ml(2当量)的4-甲基吗啉溶液，并将所述混合物在室温搅拌2小时。接着，加入水并用2份乙酸乙酯提取混合物，用1M柠檬酸，浓碳酸氢钠和浓盐水洗涤合并的有机提取物。接着，将有机相通过硫酸钠干燥，将所述溶剂蒸馏除去，并将所述残余物进行色谱分离(方法46)。产率413mg(61％理论值)其为固体。
HPLCRt＝4.46分钟。
LC-MSRt＝2.37分钟。MS(ESIpos)554.4[M+H]+. [α]20Na＝-1.7(c＝0.57，CH3CN)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝1.09(s，9H)，1.45(s，9H)，3.17(br s，1H)，3.50-3.56(dd，J＝2.85Hz，J＝8.8Hz，1H)，3.59(s，3H)，3.61-3.67(m，3H)，4.66(s，1H)，4.70-4.72(m，1H)，4.97(dd，J＝2.7Hz，J＝8.65Hz，1H)，5.14(d，J＝12.3Hz，1H)，5.19(br s，1H)，5.23(d，J＝12.3Hz，1H)，7.11(d，J＝7.45Hz，1H)，7.19(d，J＝8.5Hz，1H)，7.46(m，5H)。
13C-NMR-DEPT(126MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝28.5(CH3)，29.6(CH3)，45.5(CH2)，54.4(CH3)，54.5(CH)，55.9(CH)，62.8(CH2)，68.6(CH2)，71.7(CH)，75.0(四重峰)，81.8(四重峰)，129.6(CH)，129.7(CH)，129.9(CH)，136.7(四重峰)，157.3(四重峰)，169.9(四重峰)，171.2(四重峰)，173.4(四重峰)。
HR-TOF-MSC26H40N3O10[M+H]+计算值554.2714，实测值554.2707. 实施例35A [N2-(叔丁氧羰基)甘氨酰]-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-O3-(叔丁基)-L-丝氨酸苄酯
将化合物34A(430mg，0.78mmol)溶解于乙腈(30ml)并冷却到0℃。加入浓氨水(15ml)并将所述混合物搅拌约15分钟。只要反应一结束(通过HPLC检测，方法5)，就加入乙酸酸化，并用水稀释混合物。将所述混合物用2份乙酸乙酯提取。用浓盐水洗涤合并的有机提取物，通过硫酸钠干燥，浓缩并通过HPLC纯化。产率158mg(38％理论值)，其为固体。
[α]20Na＝-16°(c＝0.53，MeOH)。
HPLCRt＝4.18分钟。LC-MSRt＝2.14分钟，MS(ESIpos)m/z＝539.4[M+H]+. HR-TOF-MSC25H39N4O9[M+H]+计算值539.2717，实测值539.2709. 1H NMR(300MHz，d6DMSO)δ(ppm)＝1.05(s，9H)，1.38(s，9H)，3.50-3.56(m，2H)，3.61-3.67(m，2H)，4.33(s，1H)，4.48(m，1H)，4.71(m，1H，5.10(d，J＝12.7Hz，1H)，5.19(d，J＝12.7Hz，1H)，7.07(m，1H)，7.17(br s，1H)，7.33-7.46(m，6H)，7.65(d，J＝8.8Hz，1H)，7.83(d，J＝7.7Hz，1H)。
13C-NMR-DEPT(126MHz，d6-丙酮)δ(ppm)＝27.54(CH3)，28.58(CH3)，44.73(CH2)，54.06(CH)，55.67(CH)，62.61(CH2)，67.08(CH2)，71.64(CH)，73.90(四重峰)，79.70(四重峰)，128.75(CH)，128.82(CH)，129.25(四重峰)，137.20(四重峰)，157.04(四重峰)，170.56，170.62(四重峰)，170.72(四重峰)，174.13(四重峰)。
实施例36A 苄基甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-O3-(叔丁基)-L-丝氨酸三氟乙酸盐
根据操作方法2，使55mg(100μmol)的示例性化合物35A在2ml的试剂溶液中反应。使所述产物反应，而不需经过进一步纯化。产率50mg(定量)。
HPLC(方法3)Rt＝3.05分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.22分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝383.0(100)[M+H]+. 实施例37A {(3R)-N2-[(苄氧基)羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-L-苯基丙氨酰}-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸三氟乙酸盐
在DMF(70ml)中提供来自实施例3A的降解产物(2.8g，2.53mmol)和来自实施例17A的化合物(1.5g，2.53mmol，1当量)。将所述溶液冷却到0℃，加入DIEA(2.64ml，2.0g，15.14mmol，6当量)并将反应混合物缓慢升温到室温，在该温度搅拌其3小时。将所述溶剂在旋转式蒸发仪上部分去除，在此过程中，浴温不应该超过30℃。在通过制备HPLC精制后(方法28)，分离2.2g(61.4％理论值)的产物。
HPLC(方法9)Rt＝17.03分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.79分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1301(28)[M+H]+，601(100)[M-C4H8-CO2+2H]2+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1300(100)[M-H]-. 实施例38A {(3R)-N2-[(苄氧基)羰基]-3-氨基-L-苯基丙氨酰}-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸三氟乙酸盐
根据操作方法1，从实施例37A的化合物(2.2g，1.55mmol)去除Boc保护基。在色谱法(方法28)后，获得1.8g(87.1％理论值)的产物。
HPLC(方法9)Rt＝12.37分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.17分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1201(8)[M+H]+，601(100)[M+2H]2+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1199(100)[M-H]-. 实施例39A {(3R)-N2-[(苄氧基)羰基]-3-氨基-L-苯基丙氨酰}-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺三氟乙酸盐
在氩气保护气氛中，在DMF(700ml)中提供实施例38A的化合物(1.3g，0.89mmol)，将所述溶液冷却到0℃，接着随后加入HATU(1.0g，2.68mmol，3当量)和NMM(0.8ml，0.7g，7.14mmol，8当量)。在0℃，在温和的氩气气流下搅拌3小时后，转化完全。对于后处理，将反应与甲醇(30ml)混合，将溶剂在30℃的水浴温度在旋转式蒸发仪上去除，将所述残余物悬浮在超声波浴中的甲醇(30ml)中，将已经分离的沉淀物通过过滤去除。将滤液在30℃的最大水浴温度在旋转式蒸发仪上浓缩，并在通过制备HPLC精制(方法28)后，获得905.6mg(78.3％理论值)的目标化合物。
HPLC(方法9)Rt＝15.09分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.75分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1183(100)[M+H]+. 实施例40A 五氟苯基{N2-[(苄氧基)羰基]-3-叔丁基-D-丙氨酰}-{3-叔丁基-L-丙氨酰}-[(3R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-L-苯丙氨酸酯]
在氩气保护气氛下，在二氯甲烷(5ml)中提供酸(实施例20A，170.0mg，0.25mmol)并将其冷却到0℃，随后加入二苯基亚膦酸五氟苯酯(146，5mg，0.38mmol，1.5当量)和NMM(140μl，128.5mg，1.27mmol，5当量)。将所述反应缓慢升温到室温并在该温度搅拌过夜。对于后处理，将所述溶剂在30℃的水浴温度在旋转式蒸发仪上去除，将残余物通过制备HPLC(方法32)纯化，再将浓缩的产物级分与甲苯和二氯甲烷混合，随后再在30℃的水浴温度在旋转式蒸发仪上彻底去除溶剂，将所述残余物冷冻干燥2小时，并将所述产物存贮在-25℃。获得130.8mg(61.6％理论值)的产物。
HPLC(方法1)Rt＝3.30分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝3.42分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝835(100)[M+H]+，735(54)[M-C4H8-CO2+H]+，MS(ESIneg.)m/z(％)＝833(60)[M-H]-，183(100)。
实施例41A 氯三苯甲基-树脂-结合的O3-(叔丁基)-N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-丝氨酸
在二氯甲烷(40ml)中提供氯三苯甲基氯-树脂(4.0g，5.96mmol)，并随后加入O-(叔丁基)-N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-丝氨酸(8.0g，20.86mmol，3.5当量)和DIEA(10.3ml，7.7g，59.60mol，10当量)。在室温振摇20小时后，通过在玻璃料上吸滤收集聚合物，并随后用二氯甲烷/甲醇/DIEA17/2/1(3次)，二氯甲烷(三次)，DMF(2次)和二氯甲烷(3次)连续洗涤。
去除了乙酸/三氟乙醇/二氯甲烷1:1:3的样品提供相应的fmoc-保护的氨基酸。
HPLC(方法13)Rt＝1.95分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝2.38分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝384(35)[M+H]+，767(10)[2M+H]+，105(100)；MS(ESIpos)m/z(％)＝382(25)[M-H]-，765(10)[2M-H]-，160(100)。
实施例42A 氯三苯甲基-树脂-结合的{N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-N4-三苯甲基-L-天冬酰胺酰}-[O3-(叔丁基)-L-丝氨酸]
如在操作方法7中所述，从聚合物(实施例41A，2.0g，2.98mmol)去除Fmoc保护基。使结合到树脂的去保护的氨基酸随后与N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-N-三苯甲基-L-天冬酰胺(3.6g，5.96mmol，2当量)，DIEA(1.5ml，1.2g，8.94mmol，3当量)和TBTU(1.9g，5.96mmol)反应过夜以得到Fmoc-保护的二肽。聚合物的后处理以类似于操作方法7的方式进行。在样品移去后，证实相应的侧链保护的二肽。
HPLC(方法13)Rt＝2.43分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝3.10分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝740(5)[M+H]+，243(100)；MS(ESIpos)m/z(％)＝738(40)[M-H]-，516(85)[M-Fmoc-H]-，542(100)。
HR-TOF-MS(方法24)C45H46N3O7[M+H]+实测值740.3342，计算值740.3331. 实施例43A 氯三苯甲基-树脂-结合的{N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]甘氨酰}-(N4-三苯甲基-L-天冬酰胺酰)-[O3-(叔丁基)-L-丝氨酸]
如操作方法7中所述，Fmoc保护基从聚合物中去除(实施例42A，2.0g，2.98mmol)。使结合于树脂的去保护的二肽随后与N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]甘氨酸(1.8g，5.96mmol，2当量)，DIEA(1.5ml，1.2g，8.94mmol，3当量)和TBTU(1.9g，5.96mmol，2当量)反应过夜以得到Fmoc-保护的三肽。聚合物的后处理以类似于操作方法7的方式进行。在样品去除后证实相应的侧链保护的三肽。
HPLC(方法13)Rt＝2.33分钟。
LC-MS(方法21)Rt＝2.99分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝797(5)[M+H]+，243(100)；MS(ESIpos)m/z(％)＝795(40)[M-H]-，573(100)[M-Fmoc-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C47H49N4O8[M+H]+实测值797.3556，计算值797.3545. 实施例44A 氯三苯甲基-树脂-结合的{O3-(叔丁基)-N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-别苏氨酰}-甘氨酰-(N4-三苯甲基-L-天冬酰胺酰)-[O3-(叔丁基)-L-丝氨酸]
如操作方法7中所述，将Fmoc保护基从聚合物中去除(实施例43A，1000.0mg，1.49mmol)。与树脂结合的去保护的三肽随后与O-(叔丁基)-N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]别苏氨酸(1184.5mg，2.98mmol，2当量)，DIEA(772μl，577.7mg，3当量)和TBTU(956.6mg，2.98mmol，2当量)反应过夜以得到Fmoc-保护的四肽。聚合物的后处理以类似于操作方法7的方式进行。在样品去除后证实相应的侧链-保护的四肽。
HPLC(方法13)Rt＝2.48分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝3.02分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝954(100)[M+H]+；MS(ESIpos)m/z(％)＝752(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C55H64N5O10[M+H]+实测值954.4663，计算值954.4648. 实施例45A 氯三苯甲基-树脂-结合的{N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]}-L-异亮氨酰-[O3-(叔丁基)]-L-别苏氨酰-甘氨酰-(N3-三苯甲基-L-天冬酰胺酰)-[O3-(叔丁基)-L-丝氨酸]
如操作方法7中所述，将Fmoc保护基从聚合物中去除(实施例44A，1000.0mg，1.49mmol)。结合于树脂的去保护的四肽随后与N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-异亮氨酸(1053.2mg，2.98mmol，2当量)，DIEA(772μl，577.7mg，4.47mmol，3当量)和TBTU(956.6mg，2.98mmol，2当量)反应过夜以得到F-moc-保护的五肽。聚合物的后处理以类似于操作方法7的方式进行。在样品去除后证实相应的侧链-保护的五肽。
HPLC(方法13)Rt＝2.57分钟。
LC-MS(方法21)Rt＝3.23分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1067(13)[M+H]+，243(100)。
HR-TOF-MS(方法24)C61H75N6O11[M+H]+实测值1067.5488，计算值1067.5489. 实施例46A N5-[(苄氧基)羰基]-{N5-[{[(苄氧基)羰基]氨基}(亚氨基)甲基]-N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-D-鸟氨酸}
将N5-[(苄氧基)羰基]-N5-[{[(苄氧基)羰基]氨基}(亚氨基)甲基]-N2-(叔丁氧羰基)-D-鸟氨酸(4.90g，9.03mmol)[M.Jetten等，Tetrahedron Lett.(四面体通讯)1991，32，6025-6028]在4M的在二噁烷(150ml)中的盐酸和二氯甲烷(150ml)中，在室温搅拌过夜。将溶剂完全蒸发并将所述残余物在真空中干燥。随后在二氯甲烷(180ml)中提供去保护的胺(180ml)并加入DIEA(4.5ml，3.5g，27.09mmol，3当量)和氯三甲基硅烷(2.3ml，2.0g，18.061mmol，2当量)，将混合物在回流下搅拌过夜。冷却溶液(0℃)，并加入DIEA(3.0ml，2.3g，18.06mmol，2当量)和(9-芴基甲基)氯甲酸酯(2.3g，9.03mmol，1当量)，将所述混合物升温到室温并在该温度搅拌过夜。对于后处理，将所述反应物用二氯甲烷稀释并用10％柠檬酸水溶液洗涤，将有机相通过硫酸钠干燥，将所述溶剂在旋转式蒸发仪上去除并将所述残余物在真空中干燥。在将粗制产物精制后(方法37)，分离2.0g(32.4％理论值)的标题化合物。
LC-MS(方法21)Rt＝2.99分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝665(100)[M+H]+； MS(ESIneg)m/z(％)＝663(30)[M-H]-，333(100)。
实施例47A 氯三苯甲基-树脂-结合的[N5-(苄氧基羰基)-N5-({[苄氧基羰基]氨基}-{亚氨基}甲基)-N2-({9H-芴-9-基甲氧基}羰基)-D-鸟氨酰]-L-异亮氨酰-[O3-(叔丁基)-L-别苏氨酰]-甘氨酰-(N3-三苯甲基-L-天冬酰胺酰)-[O3-(叔丁基)-L-丝氨酸]
如操作方法7中所述，将Fmoc保护基从聚合物(实施例45A，1000.0mg，1.49mmol)中去除。使结合于树脂的去保护的五肽随后与Fmoc-保护的氨基酸(实施例46A，1980.9mg，2.98mmol，2当量)，DIEA(772μl，577.7mg，4.47mmol，3当量)和TBTU(956.6mg，2.98mmol，2当量)反应过夜以得到F-moc-保护的六肽。聚合物的后处理以类似于操作方法7的方式进行。将聚合物结合的六肽立即进行进一步处理，而没有经过分析证实。
实施例48A 氯三苯甲基-树脂-结合的{N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-亮氨酰}-[N5-(苄氧基羰基)-N5-({[苄氧基羰基]氨基}{亚氨基}甲基)-D-鸟氨酰]-L-异亮氨酰-[O3-(叔丁基)-L-别苏氨酰]-甘氨酰-(N3-三苯甲基-L-天冬酰胺酰)-[O3-(叔丁基)-L-丝氨酸]
如操作方法7中所述，将Fmoc保护基从聚合物(实施例47A，1000.0mg，1.49mmol)中去除。将结合于树脂的去保护的六肽随后与N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-亮氨酸(1053.2mg，2.98mmol，2当量)，DIEA(779μl，577.7mg，4.47mmol，3当量)和TBTU(956.7mg，2.98mmol，2当量)反应过夜以得到F-moc-保护的七肽。聚合物的后处理以类似于操作方法7的方式进行。在样品去除后，证实相应的侧链-保护的七肽。
LC-MS(方法18)Rt＝3.51分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1605(100)[M+H]+. 实施例49A {N2-[叔丁氧羰基]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]}-L-亮氨酰}-[N5-(苄氧基羰基)-N5-({[苄氧基羰基]氨基}{亚氨基}甲基)-D-鸟氨酰]-L-异亮氨酰-[O3-(叔丁基)-L-别苏氨酰]-甘氨酰-(N3-三苯甲基-L-天冬酰胺酰)-[O3-(叔丁基)-L-丝氨酸]
如操作方法7中所述，将Fmoc保护基从聚合物(实施例48A，1000.0mg，1.49mmol)中去除。使结合于树脂的去保护的七肽随后与(3R)-3-羟基-N-(叔丁氧羰基)-L-亮氨酸(552.7mg，2.24mmol，1.5当量)，DIEA(597μl，442.9mg，3.43mmol，2.3当量)和TBTU(717.6mg，2.24mmol，1.5当量)反应过夜以得到F-moc-保护的八肽。聚合物的后处理以类似于操作方法7的方式进行。
在乙酸，三氟乙醇和二氯甲烷(1:1:3)的溶液中将八肽完全从聚合物中去除。对于后处理，通过在玻璃料上过滤去除树脂，将滤液在真空中浓缩并最终通过色谱法纯化(方法32)。获得56mg(16％理论值)的标题化合物。
LC-MS(方法18)Rt＝3.48分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1613(15)[M+H]+，806(60)[M+2H]2+，243(100)；MS(ESIneg)m/z(％)＝1611(100)[M+H]+. 实施例50A [(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-{N5-[苄氧基羰基]-N5-[{[苄氧基羰基]氨基}(亚氨基)甲基]-D-鸟氨酰}-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸
将肽(实施例49A，22.0mg，13.65μmol)在TFA(5.25ml)和水(0.25ml)中提供，随后加入对甲酚(10.0mg，92.48μmol)，并将所述溶液在室温搅拌1小时。对于后处理，将溶剂在30℃的水浴温度在旋转式蒸发仪上去除。在通过制备HPLC精制残余物后(方法26)，获得4.4mg(27.9％理论值)的产物。
HPLC(方法1)Rt＝2.07分钟 LC-MS(方法18)Rt＝2.12分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1158(5)[M+H]+，579(100)[M+2H]2+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1156(100)[M-H]-. 实施例51A [N2-(苄氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-{(3R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-L-苯基丙氨酰}-{(3R)-3-羟基-L-亮氨酰}-L-亮氨酰-{N5-[苄氧基羰基]-N5-[{[苄氧基羰基]氨基}(亚氨基)甲基]-D-鸟氨酰}-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸
将胺(实施例50A，4.0mg，3.46μmol)和活化的酸(实施例40A，3.2mg，3.82μmol，1.1当量)在DMF(500μl)中提供，将所述溶液冷却到0℃，随后加入DIEA(4μl，2.7mg，20.74mmol，6当量)，将所述反应物升温到室温并在该温度过夜搅拌。对于后处理，将所述溶剂在30℃的水浴温度在旋转式蒸发仪上去除，通过凝胶色谱法(方法45，洗脱剂甲醇)纯化残余物，在通过制备HPLC精制后(方法26)，获得3.0mg(24.0％理论值)的产物。
HPLC(方法10)Rt＝11.37分钟 LC-MS(方法18)Rt＝3.37分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝904(100)[M+2H]2+. 实施例52A [N2-(苄氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-{(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰}-{(3R)-3-羟基-L-亮氨酰}-L-亮氨酰-{N5-[苄氧基羰基]-N5-[{[苄氧基羰基]氨基}(亚氨基)甲基]-D-鸟氨酰}-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸三氟乙酸盐
根据一般操作方法1，将Boc保护基从示例性化合物51A(2.5mg，1.38μmol)去除。在通过制备HPLC精制后(方法26)，获得2.2mg(87.3％理论值)的产物。
HPLC(方法9)Rt＝24.14分钟 LC-MS(方法18)Rt＝2.63分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝854(100)[M+2H]2+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1706(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C84H123N16O22[M+H]+实测值1707.8989，计算值1707.8993. 实施例53A [N2-(苄氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-{(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰}-{(3R)-3-羟基-L-亮氨酰}-L-亮氨酰-{N5-[苄氧基羰基]-N5-[{[苄氧基羰基]氨基}(亚氨基)甲基]-D-鸟氨酰}-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸三氟乙酸盐C1.11-N3.3-内酰胺
在氩气保护气氛下，将去保护的胺(实施例52A，2.0mg，1.10μmol)在DMF(1ml)中提供，将所述溶液冷却到0℃，加入HATU(1.3mg，3.29μmol，3当量)和NMM(0.7μl，0.7mg，6.58μmol，6当量)，并使反应物缓慢到室温并在该温度搅拌过夜。对于后处理，将所述溶液通过制备HPLC纯化(方法26)。获得1.9mg(90.1％理论值)的目标化合物。
HPLC(方法10)Rt＝10.70分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝3.25分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1691(53)[M+H]+，846(100)[M+2H]2+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1688(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C84H121N16O21[M+H]+实测值1689.8929，计算值1689.8887. 实施例54A {(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰}-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-{O3-(叔丁基)-L-别苏氨酰}-甘氨酰-{N4-三苯甲基-L-天冬酰胺酰}-[O3-(叔丁基)-L-丝氨酸]
通过在甲醇(20ml)中的氢解作用1小时，将苄基酯-保护的化合物(实施例49A，62.0mg，38.46μmol)转化为产物。
在通过制备HPLC进行色谱分离(方法26)后，获得目标化合物(34.3mg，61.2％理论值)。
HPLC(方法1)Rt＝2.51分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝2.36分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1343(38)[M+H]+，243(100)；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1341(100)[M-H]-. 实施例55A [(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
将示例性化合物54A(32.0mg，21.95μmol)在TFA(7.3ml)，水(250μl)和三异丙基硅烷(323μl)的溶液中在室温搅拌2小时。对于后处理，将所述溶剂在30℃的水浴温度在旋转式蒸发仪上去除，并将所述残余物在真空中在30℃的水浴温度用甲苯浓缩1次，用二氯甲烷浓缩1次。在高真空下干燥后，将所述粗制产物溶解于0.1％TFA水溶液中并用MTBE提取，将分离的水相在真空中浓缩，随后通过制备HPLC(方法27)精制。获得22.5mg(91.8％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法9)Rt＝8.38分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.30分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝889(12)[M+H]+，445(100)[M+2H]2+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝887(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C37H69N12O13[M+H]+实测值889.5102，计算值889.5102. 实施例56A [N2-(苄氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-{(3R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-L-苯基丙氨酰}-{(3R)-3-羟基-L-亮氨酰}-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸三氟乙酸盐
将示例性化合物55A(19.0mg，17.00μmol)和40A(15.6mg，18.70μmol)在DMF(1ml)中提供，在0℃加入N，N-二异丙基胺(18μl，13.2mg，102.00mmol，6当量)，并将所述混合物在该温度搅拌2小时。将所述反应物升温到室温，并接着搅拌过夜。对于后处理，将所述溶液在真空中浓缩并最终通过制备HPLC(方法26)精制。获得24.4mg(86.7％理论值)的目标化合物。
HPLC(方法9)Rt＝23.17分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝2.37分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝720(100)[M-C4H8-CO2+2H]2+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1438(100)[M-C4H8-CO2-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C73H119N16O20[M+H]+实测值1539.8772，计算值1539.8782. 实施例57A [N2-(苄氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-{(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰}-{(3R)-3-羟基-L-亮氨酰}-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
根据操作方法1，将示例性化合物56A(23.0mg，13.91μmol)转化为去保护的胺。在精制后(方法26)，获得19.9mg(85.8％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法9)Rt＝17.05分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.98分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1441(3)[M+H]+，720(100)[M+2H]2+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1438(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C68H111N16O18[M+H]+实测值1439.8271，计算值1439.8257. 实施例58A [N2-(苄氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-{(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰}-{(3R)-3-羟基-L-亮氨酰}-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺三氟乙酸盐
在氩气保护气氛下，将去保护的胺(实施例57A，19.0mg，11.39μmol)在DMF(10ml)中提供，将所述溶液冷却到0℃，加入HATU(13.0mg，34.18μmol，3当量)和NMM(8μl，6.9mg，68.35μmol)并将所述反应物在4℃静置3天。对于后处理，在0℃将甲醇加入混合物，并将所述混合物在30℃的最大水浴温度在真空中浓缩，最终通过制备HPLC(方法26)精制。获得14.0mg(80.0％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法9)Rt＝22.44分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝2.30分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1422(12)[M+H]+，711(100)[M+2H]2+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1420(28)[M-H]-，710(100)[M-2H]2-. HR-TOF-MS(方法24)C68H109N16O17[M+H]+实测值1421.8165，计算值1421.8152. 实施例59A (3R)-3-[(叔丁基氧基羰基)氨基]-L-苯丙氨酸
根据操作方法5，在1小时内，将示例性化合物16A(1000.0mg，2.41mmol)用在甲醇(100ml)中的10％钯/碳(100mg，93.98μmol，4mol％)转化成标题化合物。在通过硅藻土过滤去除催化剂并浓缩后，获得624.0mg(92.3％)的粗制产物。
HPLC(方法9)Rt＝10.27分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.52分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝281(82)[M+H]+，561(10)[2M+H]+，225(100)；MS(ESIneg.)m/z(％)＝279(70)[M-H]-，559(5)[2M-H]-，205(100)。
1H NMR(500MHz，d6-DMSO)δ＝1.34(s，9H，OC(CH3)3)，3.51(d，J＝4.8Hz，1H，Hα)，4.88(dd，J＝8.6Hz，4.8Hz，1H，Hβ)，7.21-7.35(m，7H，ArH，NH2)，8.04(d，J＝8.6Hz，NH)。
13C NMR(126MHz，d6-DMSO)δ＝28.04(3C)，53.81，56.27，78.06，127.24，127.42(2C)，128.07(2C)，138.99，154.12，167.93. HR-TOF-MS(方法24)C14H21N2O4[M+H]+实测值281.1506，计算值281.1496. 实施例60A [N2-(苄氧基羰基)-D-亮氨酰]-L-亮氨酸甲酯
在0℃，将N2-(苄氧基羰基)-D-亮氨酸(BACHEM目录号z13351.)(6.37g，24mmol))和L-亮氨酸甲酯(3.49g，24mmol，1当量)溶解于DMF(75ml)，并接着加入NMM(5.28ml，48mmol，2当量)和HATU(13.69g，36mmol，1.5当量)。将所述混合物在室温搅拌3小时。加入MTBE和饱和的碳酸氢钠水溶液，并进行提取。用第二份的MTBE反萃取水相，并接着用1M柠檬酸并且再次用饱和的碳酸氢钠溶液洗涤合并的有机相，通过硫酸钠干燥并在真空中浓缩。将所述残余物通过色谱法以两份进行纯化(Biotage 40M，环已烷/乙酸乙酯3+1)。产率7.85g(80％理论值)。
HPLC(方法5)Rt＝4.82分钟。
LCMS(方法18)Rt＝2.65分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝393(100)[M+H]+. [α]20Na＝-5.2°(c＝0.52，MeOH)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝0.77-0.92(m，12H)，1.31-1.66(m，6H)，3.60(s，3H)，4.10(m，1H)，4.28(m，1H)，5.02(s，2H)，7.25-7.38(m，6H)，8.23(d，1H)。
13C-NMR(126MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝21.1(CH3)，21.5(CH3)，22.8(CH3)，22.9(CH3)，24.2(CH)，41.0(CH2)，50.0(CH)，51.8(CH3，OCH3)，52.9(CH)，65.3(CH2，OCH2Ph)，127.6(CH，芳族-C)，127.7(CH，芳族-C)，128.3(CH，芳族-C)，137.1((C四重峰，芳族-C)，155.8(C四重峰，NCOC(CH3)3)，172.4(C四重峰，C＝O)，172.9(C四重峰，C＝O)。
实施例61A [N2-(苄氧基羰基)-D-亮氨酰]-L-亮氨酸
将化合物60A(7.70g，19.62mmol)置入200ml的THF/水(3+1)中，冷却到0℃并加入一水合氢氧化锂(1.65g，39.24mmol，2当量)。将所述混合物在0℃搅拌直到根据HPLC监测，反应已经结束(约45分钟)。将大部分的THF在真空中蒸馏除去，接着通过加入柠檬酸将pH调节到约4，并将所述混合物用2份乙酸乙酯提取。通过硫酸钠干燥合并的有机相，过滤并浓缩。获得的产物是无定形物质，其产率为6.87g(89％理论值)。
HPLC(方法5)Rt＝4.45分钟。
LCMS(方法18)Rt＝2.39分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝379(100)[M+H]+，757(40)[2M+H]+. [α]20Na＝+4.7°(c＝0.50，MeOH)。
1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝0.77-0.92(m，12H)，1.34-1.68(m，6H)，4.04-4.26(m，2H)，5.02(s，2H)，7.25-7.38(m，6H)，8.12(d，1H)，12.50(br.s，1H)。
HR-TOF-MS(方法24)C20H31N2O5[M+H]+计算值379.2228，实测值379.2216. 实施例62A 五氟苯基N-[苄氧基羰基]-D-亮氨酰-L-亮氨酸酯
根据制备方法(实施例17A)，将示例性化合物61A(1000.0mg，2.64mmol)，五氟苯酚(2431.7mg，13.21mmol，5当量)和EDC(759.8mg，3.96mmol，1.5当量)转化为标题化合物。在精制后(方法28)，获得1.3g(93.0％理论值)的产物，其贮存于-25℃直到进一步使用。
HPLC(方法1)Rt＝3.08分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝3.26分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝545(100)[M+H]+，1089(43)[2M+H]+. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ＝0.78-0.99(m，12H，2[CH(CH3)2])，1.30-1.88(m，6H)，4.16(m，1H，Hα)，4.38-4.55(2m，1H，Hα)，4.95-5.11(m，2H，PhCH2)，7.21-7.38(m，5H，ArH)，7.41(d，J＝7.4Hz，1H，NH)，8.69(d，J＝7.0Hz，1H，NH)。
实施例63A {N2-(苄氧基羰基)-D-亮氨酰}-L-亮氨酰-[(3R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-L-苯丙氨酸]
在氩气保护气氛下，将氨基酸(实施例59A，493.0mg，1.76mmol和羧酸-活化的二肽(实施例62A，1197.0mg，1.76mmol)在DMF(50ml)中提供，并随后在0℃将DIEA(2.4ml，1818.4mg，14.07mmol，8当量)加入溶液。在加入碱后，使反应物缓慢达到室温并在该温度搅拌直到完全转化(3小时)。对于后处理，将磷酸二氢钾(2.4g，17.59mmol，10当量)加入反应物中并将所述混合物搅拌10分钟，将所述固体滤去，并在30℃的水浴温度在真空中浓缩滤液。在精制后(方法28)，分离750.0mg(66.6％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法1)Rt＝2.72分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝2.86分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝641(100)[M+H]+，541(76)[M-C4H8-CO2+H]+，1281(42)[2M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝639(100)[M-H]-，1280(92)[2M-H]-. 实施例64A 五氟苯基N-[(苄氧基)羰基]-D-亮氨酰-L-亮氨酰-[(3R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-L-苯丙氨酸酯]
根据实施例方法(实施例17A)，在二氯甲烷(10ml)中使用EDC(89.8mg，0.49mmol，1.5当量)从三肽(实施例63A，200mg，0.31mmol)和五氟苯酚(287.3mg，1.56mmol，5当量)制备标题化合物。通过在0℃将反应物搅拌2小时获得完全的转化并将其在冰箱中在4℃静置过夜。在精制后(方法32)，获得211.0mg(83.8％理论值)的产物。
HPLC(方法1)Rt＝3.23分钟。
LC-MS(方法21)Rt＝3.22分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝807(30)[M+H]+，707(100)[M-C4H8-CO2+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝805(10)[M-H]-，183(100)。
实施例65A 氯三苯甲基-树脂-结合的{O3-[叔丁基]-N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-苏氨酰-甘氨酰-(N3-三苯甲基-L-天冬酰胺酰)-[O3-(叔丁基)-L-丝氨酸]
如操作方法7中所述，将Fmoc保护基从聚合物中去除(实施例43A，1000.0mg，1.49mmol)。随后使与树脂结合的去保护的三肽与O-(叔丁基)-N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-苏氨酸[Echner，Hartmut；Voelter，Wolfgang；Liebigs Ann.Chem.；GE；1988；1095-1098](1184.5mg，2.98mmol，2当量)，DIEA(779μl，577.7mg，4.47mmol，3当量)和TBTU(956.6mg，2.98mmol，2当量)反应过夜以得到F-moc-保护的四肽。聚合物的后处理以类似于操作方法7的方式进行。在样品去除后，证实了相应的侧链-保护的肽。
LC-MS(方法20)Rt＝3.07分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝955(80)[M+H]+，243(100)；MS(ESIneg)m/z(％)＝953(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C55H64N5O10[M+H]+实测值954.4636，计算值954.4648. 实施例66A 氯三苯甲基-树脂-结合的{N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-异亮氨酰}-{[O3-(叔丁基)]-L-苏氨酰}-甘氨酰-(N3-三苯甲基-L-天冬酰胺酰)-[O3-(叔丁基)-L-丝氨酸]
如操作方法7中所述，使Fmoc保护基从聚合物中去除(实施例65A，1000.0mg，1.49mmol)。使结合于树脂的去保护的四肽随后与N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-异亮氨酸(1053.2mg，2.98mmol，2当量)(H.Echner等，Liebigs Ann.Chem.1988，1095-1098)，DIEA(779μl，577.7mg，4.47mmol，3当量)和TBTU(956.6mg，2.98mmol，2当量)反应过夜以得到F-moc-保护的五肽。聚合物的后处理以类似于操作方法7的方式进行。在样品去除后，证实相应的侧链-保护的肽。
HPLC(方法13)Rt＝2.61分钟。
LC-MS(方法21)Rt＝3.26分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1068(15)[M+H]+，243(100)；MS(ESIneg)m/z(％)＝1066(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C61H75N6O11[M+H]+实测值1067.5503，计算值1067.5489. 实施例67A 氯三苯甲基-树脂-结合的{N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-[N5-(亚氨基-{[(2，2，5，7，8-五甲基-3，4-二氢-2H-色烯-6-基)磺酰基]氨基}甲基)-D-鸟氨酰]}-L-异亮氨酰-[O3-(叔丁基)-L-苏氨酰]-甘氨酰-(N3-三苯甲基-L-天冬酰胺酰)-[O3-(叔丁基)-L-丝氨酸]
如操作方法7中所述，将Fmoc保护基从聚合物中去除(实施例66A，1000.0mg，1.49mmol)。使结合于树脂的去保护的五肽随后与N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-N5-(亚氨基{[(2，2，5，7，8-五甲基-3，4-二氢-2H-色烯-6-基)磺酰基]氨基}甲基)-L-鸟氨酸(1283.9mg，1.94mmol，1.3当量)，DIEA(779μl，577.7mg，4.47mmol，3当量)和TBTU(956.6mg，2.98mmol，2当量)反应过夜以得到Fmoc-保护的六肽。聚合物的后处理以类似于操作方法7的方式进行。在样品去除后证实相应的侧链-保护的肽。
LC-MS(方法20)Rt＝3.24分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1490(85)[M+H]+，282(100)；MS(ESIpos)m/z(％)＝1488(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C81H105N10O15S[M+H]+实测值1489.7456，计算值1489.7477. 实施例68A 氯三苯甲基-树脂-结合的{N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-亮氨酰}-[N5-(亚氨基{[(2，2，5，7，8-五甲基-3，4-二氢-2H-色烯-6-基)磺酰基]氨基}甲基)-D-鸟氨酰]-L-异亮氨酰-[O3-(叔丁基)-L-苏氨酰]-甘氨酰-(N3-三苯甲基-L-天冬酰胺酰)-[O3-(叔丁基)-L-丝氨酸]
如操作方法7中所述，Fmoc保护基从聚合物中去除(实施例67A，1000.0mg，1.49mmol)。使结合于树脂的去保护的六肽随后与N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-亮氨酸(1053.2mg，2.98mmol，2当量)，DIEA(779μl，577.7mg，4.47mmol，3当量)和TBTU(956.6mg，2.98mmol，2当量)反应过夜以得到F-moc-保护的七肽。聚合物的后处理以类似于操作方法7的方式进行。在样品去除后证实相应的侧链-保护的肽。
LC-MS(方法18)Rt＝3.54分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1602(100)[M+H]+；MS(ESIpos)m/z(％)＝1600(100)[M-H]-. 实施例69A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-[N5-(亚氨基-{[(2，2，5，7，8-五甲基-3，4-二氢-2H-色烯-6-基)磺酰基]氨基}甲基)-D-鸟氨酰]-L-异亮氨酰-[O3-(叔丁基)-L-苏氨酰]-甘氨酰-(N3-三苯甲基-L-天冬酰胺酰)-[O3-(叔丁基)-L-丝氨酸]
如操作方法7中所述，使Fmoc保护基从聚合物中去除(实施例68A，1000.0mg，1.49mmol)。使结合于树脂的去保护的七肽随后与(3R)-3-羟基-N-(叔丁氧羰基)-L-亮氨酸(552.7mg，2.24mmol，1.5当量)，DIEA(597μl，442.9mg，3.43mmol，2.3当量)和TBTU(717.6mg，2.24mmol，1.5当量)反应过夜以得到Fmoc-保护的八肽。聚合物的后处理以类似于操作方法7的方式进行。
将结合于树脂的八肽在乙酸，三氟乙醇和二氯甲烷(1:1:3)的溶液中从聚合物中完全去除。对于后处理，将树脂通过玻璃料过滤，并将所述滤液在真空中浓缩并最终通过色谱法(方法28)进行纯化。获得418.0mg(17.4％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法13)Rt＝2.85分钟。
HPLC(方法1)Rt＝3.32分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝3.39分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝1610(40)[M+H]+，806(100)[M+2H]2+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1608(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C83H125N12O18S[M+H]+实测值1609.8971，计算值1609.8951. 实施例70A [(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
在氩气保护气氛下，将示例性化合物69A(200.0mg，0.12mmol)在TFA(25.3ml)，水(667μl)和三异丙基硅烷(667μl)的溶液中在室温搅拌1小时。对于后处理，将所述溶剂在30℃的水浴温度在旋转式蒸发仪上去除，并将所述残余物在30℃的水浴温度在真空中用甲苯浓缩一次，用二氯甲烷浓缩一次。将所述残余物溶解于0.1％TFA水溶液中，并用MTBE提取一次，将分离的水相在真空中浓缩并随后通过制备HPLC(方法26)精制。获得138.0mg(99.5％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法9)Rt＝8.60分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.43分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝889(15)[M+H]+，445(100)[M+2H]2+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝887(100)[M-H]-. 实施例71A [N2-(苄氧基羰基)-D-亮氨酰]-L-亮氨酰-[(3R)-N3-(叔丁氧羰基)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-{(3R)-3-羟基-L-亮氨酰}-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸三氟乙酸盐
如关于示例性化合物56A的制备方法所述，使用N，N-二异丙胺(65μl，48.6mg，375.96μmol，6当量)从八肽(实施例70A，70.0mg，62.66μmol)，羧酸-活化的三肽(实施例64A，60.7mg，75.19μmol，1.2当量)制备标题化合物。将所述反应物在室温过夜几乎完全转化。在色谱法(方法26)后，获得73.9mg(72.5％理论值)的产物。
HPLC(方法9)Rt＝22.16分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝2.07分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1512(25)[M+H]+，706(100)[M+2H]2+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1510(18)[M-H]-，700(100)。
HR-TOF-MS(方法24)C71H115N16O20[M+H]+实测值1511.8474，计算值1511.8469. 实施例72A [N2-(苄氧基羰基)-D-亮氨酰]-L-亮氨酰-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
根据操作方法1，将示例性化合物71A(70.0mg，43.06μmol)转化为去保护的胺。在精制后(方法26)，获得45.0mg(63.7％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法9)Rt＝16.77分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.85分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1412(10)[M+H]+，706(100)[M+2H]2+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1410(90)[M-H]-，650(100)。
HR-TOF-MS(方法24)C66H107N16O18[M+H]+实测值1411.7958，计算值1411.7944. 实施例73A [N2-(苄氧基羰基)-D-亮氨酰]-L-亮氨酰-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺三氟乙酸盐
根据制备方法(实施例58A)，从示例性化合物73A(42.0mg，25.61μmol)，HATU(29.2mg，76.83μmol，3当量)和NMM(17μl，15.5mg，153.66μmol)制备标题化合物。通过在室温搅拌3小时获得完全的转化。在精制后(方法26)，分离34.1mg(88.3％理论值)的产物。
HPLC(方法9)Rt＝20.29分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝2.06分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1393(32)[M+H]+，797(100)[M+2H]2+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1391(100)[M-H]-，695(32)[M-2H]2-. HR-TOF-MS(方法24)C66H105N16O17[M+H]+实测值1393.7848，计算值1393.7839. 实施例74A N5-[苄氧基羰基]-N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-D-鸟氨酸
将N5-[(苄氧基)羰基]-D-鸟氨酸(3.8g，14.27mmol)[Ulhaq，Saraj等；Bioorg.Med.Chem.(生物有机医学化学)；EN；7；9；1999；1787-1796]在二氯甲烷(190ml)中提供，加入DIEA(2.4ml，1.8g，17.27mmol，1当量)和氯三甲基硅烷(3.6ml，3.1g，28.53mmol，2当量)并将混合物在回流下搅拌过夜。再次冷却反应物(0℃)并加入DIEA(4.7ml，3.7g，28.54mmol，2当量)和(9-芴基甲基)氯甲酸酯(3.7g，14.27mmol，1当量)，将所述混合物升温到室温并在该温度搅拌过夜。对于后处理，将所述反应物用二氯甲烷稀释并用10％柠檬酸水溶液洗涤，将有机相通过硫酸钠干燥，在旋转式蒸发仪上去除所述溶剂并将所述混合物在真空中干燥。获得6.5g(93.2％理论值)的标题化合物。
LC-MS(方法18)Rt＝2.57分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝489(100)[M+H]+，977(100)[2M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝487(80)[M-H]-，975(100)[2M-H]-. 实施例75A 氯三苯甲基-树脂-结合的{N5-[苄氧基羰基]-N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)-羰基]-D-鸟氨酰}-L-异亮氨酰-[O3-(叔丁基)-L-别苏氨酰]-甘氨酰-(N4-三苯甲基-L-天冬酰胺酰)-[O3-(叔丁基)-L-丝氨酸]
如操作方法7中所述，将Fmoc保护基从聚合物中去除(实施例45A，1000.0mg，1.49mmol)，使结合于树脂的去保护的五肽随后与Fmoc-保护的氨基酸(实施例74A，1455.9mg，2.98mmol，2当量)，DIEA(779μl，577.7mg，4.47mmol，3当量)和TBTU(956.8mg，2.98mmol，2当量)反应过夜以得到F-moc-保护的六肽。聚合物的后处理以类似于操作方法7的方式进行。在样品去除后证实相应的侧链-保护的肽。
HPLC(方法13)Rt＝2.73分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝3.27分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1316(100)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝1314(100)[M+H]+. 实施例76A 氯三苯甲基-树脂-结合的{N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-亮氨酰}-{N5-[(苄氧基)羰基]-D-鸟氨酰}-L-异亮氨酰-[O3-(叔丁基)-L-别苏氨酰]-甘氨酰-(N4-三苯甲基-L-天冬酰胺酰)-[O3-(叔丁基)-L-丝氨酸]
如操作方法7中所述，将Fmoc保护基从聚合物(实施例75A，1000.0mg，1.49mmol)中去除。使结合于树脂的去保护的六肽随后与N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-亮氨酸(1053.2mg，2.98mmol，2当量)，DIEA(779μl，577.7mg，4.47mmol，3当量)和TBTU(956.8mg，2.98mmol，2当量)反应过夜以得到F-moc-保护的七肽。聚合物的后处理以类似于操作方法7的方式进行。在样品去除后证实相应的侧链-保护的肽。
HPLC(方法13)Rt＝2.84分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝3.36分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1429(95)[M+H]+，1430(100)；MS(ESIpos)m/z(％)＝1427(80)[M-H]-，1428(100)。
HR-TOF-MS(方法24)C61H75N6O11[M+H]+实测值1067.5488，计算值1067.5489. 实施例77A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-[N5-(苄氧基羰基)-D-鸟氨酰]-L-异亮氨酰-[O3-(叔丁基)-L-别苏氨酰]-甘氨酰-[N4-三苯甲基-L-天冬酰胺酰]-[O3-(叔丁基)-L-丝氨酸]
如操作方法7中所述，将Fmoc保护基从聚合物中去除(实施例76A，1000.0mg，1.49mmol)。接着，使结合于树脂的去保护的七肽与(3R)-3-羟基-N-(叔丁氧羰基)-L-亮氨酸[Oliyai，Reza，Siahaan，Teruna J.，Stella，Valentino J.；Pharm.Res.；EN；12；3；1995；323-328](552.7mg，2.24mmol，1.5当量)，DIEA(597μl，442.9mg，3.43mmol，2.3当量)和TBTU(717.6mg，2.24mmol，1.5当量)反应过夜以得到Fmoc-保护的八肽。聚合物的后处理以类似于操作方法7的方式进行。
将结合于树脂的八肽在乙酸，三氟乙醇和二氯甲烷(1:1:3)的溶液中从聚合物中完全去除。对于后处理，将树脂通过玻璃料过滤，并将所述滤液在真空中浓缩并最终通过色谱法(方法28)进行纯化。获得604.0mg(28.3％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法13)Rt＝2.68分钟。
HPLC(方法1)Rt＝3.15分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝3.26分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝1437(100)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1435(100)[M-H]-. 实施例78A [(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-[N5-(苄氧基羰基)-D-鸟氨酰]-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸三氟乙酸盐
如在示例性方法(实施例70A)中所述，标题化合物制备自示例性化合物77A(200.0mg，0.14mmol)。在室温(1小时)完全转化后，将溶液在30℃的水浴温度在真空中浓缩，在30℃的水浴温度，用甲苯浓缩一次，用二氯甲烷浓缩一次，并最终通过制备RP-HPLC(方法26)精制。获得121.0mg(79.3％理论值)。
HPLC(方法9)Rt＝13.26分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝3.04分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝981(100)[M+H]+，491(10)[M+2H]2+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝979(100)[M-H]-. 实施例79A [N2-(苄氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-{(3R)-N3-(叔丁氧羰基)-3-氨基-L-苯基丙氨酰}-{(3R)-3-羟基-L-亮氨酰}-L-亮氨酰-[N5-苄氧基羰基-D-鸟氨酰(ornityl)]-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸
使用N，N-二异丙基胺(57μl，42.2mg，326.7μmol，6当量)，如在示例性方法56A)中所述，标题化合物制备自八肽(实施例78A，59.6mg，54.44μmol)，羧酸-活化的三肽(实施例40A，50.0mg，59.89μmol，1.1当量)。使反应物在室温过夜完全转化。在精制后(方法26)，获得52.9mg(59.5％理论值)的产物。
HPLC(方法10)Rt＝10.32分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝3.07分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1633(40)[M+H]+，817(90)[M+2H]2+，767(100)；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1631(65)[M-H]-，761(100)。
HR-TOF-MS(方法24)C80H123N14O22[M+H]+实测值1631.8898，计算值1631.8931. 实施例80A [N2-(苄氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-{(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰}-{(3R)-3-羟基-L-亮氨酰}-L-亮氨酰-[N5-(苄氧基羰基)-D-鸟氨酰]-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸三氟乙酸盐
根据操作方法1，将示例性化合物79A(50.0mg，30.64μmol)转化为去保护的胺。在精制后(方法26)，获得27.5mg(54.5％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法9)Rt＝21.85分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝2.18分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1533(20)[M+H]+，766(100)[M+2H]2+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1531(58)[M-H]-，764(12)[M-2H]2-，710(100)。
HR-TOF-MS(方法24)C75H114N14O20[M+H]+实测值1531.8385，计算值1531.8407. 实施例81A [N2-(苄氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-{(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰}-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-[N5-(苄氧基羰基)-D-鸟氨酰]-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺
根据制备方法(实施例58A)，从示例性化合物80A(25.0mg，15.19μmol)，HATU(17.3mg，45.57μmol，3当量)和NMM(10μl，9.2mg，91.14μmol)制备标题化合物。在4℃，在3天后获得完全的转化。在精制(方法26)后，分离21.0mg(91.3％理论值)的产物。
HPLC(方法9)Rt＝26.28分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝2.98分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1514(20)[M+H]+，758(100)[M+2H]2+. HR-TOF-MS(方法24)C75H113N14O19[M+H]+实测值1513.8298，计算值1513.8301. 实施例82A (2R*，3R*)-N2-[(苄氧基)羰基]-N2-[(苄氧基)羰基氨基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-O-甲基酪氨酸甲酯
在氩气保护气氛下，将在THF中的1M LHMDS溶液(213.3mmol，213.3ml，2.2当量)提供在反应溶剂THF(1.351)中。在-78℃，缓慢逐滴加入(rac)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-3-(4-甲氧基苯基)丙酸甲酯(D.M.Kalvin，R.W.Woodard，J.Org.Chem(有机化学杂志)，50，13，1985，2259-2263)(30g，96.9mmol)的溶液。将所述混合物在-25℃搅拌10分钟，接着再次冷却到-78℃。将一份的氮杂二羧酸二苄酯(46.3g，155.2mmol，1.6当量)加入反应混合物中。将所述混合物在-60到-45℃搅拌2小时。为了终止反应，将所述混合物再次冷却到-78℃并加入乙酸(29.1ml，484.9mmol，5当量)，接着将所述混合物升温到0℃并最终升温到室温。反应混合物在真空中蒸发并置入乙酸乙酯中(1000ml)。将所述混悬液用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤2次，用水洗涤2次，用5％柠檬酸水溶液洗涤2次，用饱和的氯化钠水溶液洗涤1次。将所有的水相用乙酸乙酯单独地反提取。在真空中蒸发所有的有机相并再次置入二氯甲烷(2000ml)中，过滤，通过硫酸镁干燥，再次过滤并在真空中蒸发。将所述残余物用环已烷搅拌，通过过滤收集并在高真空下干燥。获得25.7g(44％理论值)的标题化合物，其为固体。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝4.97分钟。
HPLC/UV-Vis(方法3)Rt＝5.00分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝2.87分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝508(100)，608(20)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝532(50)，606(100)[M-H]-. 实施例83A (2S*，3R*)-N2-[苄氧基羰基]-N2-[(苄氧基羰基)氨基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-O-甲基酪氨酸甲酯
在0℃，在氩气保护气氛下，将TMG(5.78ml，46.1mmol，11.2当量)加入实施例82A(2.5g，4.1mmol)在无水DMF p.a.(87ml)中的溶液。使反应混合物融化并且搅拌直到HPLC色谱图(方法5)显示完全的转化(约70％产物)(约24小时)，从而接着通过加入乙酸(pH 4-6)终止反应。使反应混合物在真空中蒸发，并在室温置入乙酸乙酯中。将有机相用水洗涤2次，用5％柠檬酸洗涤2次，用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤1次，用饱和的氯化钠水溶液洗涤1次，通过硫酸镁干燥，过滤，在真空中蒸发并在高真空下干燥。通过急骤色谱法(硅胶，甲苯/乙酸乙酯 20:1)纯化粗制产物。获得1.89g(73％理论值)的标题化合物。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝5.11分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝5.37分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝3.07分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝508(100)，608(20)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝532(100)，606(30)[M-H]-. IR νmax(NaCl，cm-1)3281，2974，1755，1740，1686，1508，1457，1416，1323，1288，1267，1208，1168，1137，1043，1027. 1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ＝1.29(s，9H，tBu)，3.29(s，3H，OCH3)，3.72(s，3H，COOCH3)，4.80-5.20(m，6H)，6.84(d，J＝8.5Hz，1H)，7.20-7.40(m，12H，ArH)，7.50-7.65(m，1H，NH)。
HR-TOF-MS(方法24)C32H38N3O9[M+H]+计算值608.2603，实测值608.2588. 实施例84A (+)-(2R，3S)-N2-[苄氧基羰基]-N2-[(苄氧基羰基)氨基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-O-甲基酪氨酸甲酯
将实施例83A的对映异构体的混合物(10.6g，17.44mmol)通过制备HPLC(方法39)分离。获得4.18g(99.5％ee，79％理论值)的标题化合物和5.2g(99.5％ee，98％理论值)的(-)对映异构体(实施例85A)。
通过方法15测定对映异构体。
HPLC/UV-Vis(方法15)Rt＝3.86分钟。
[α]20Na＝+54°(c＝0.24，在MeOH中)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝5.11分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝5.23分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝3.07分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝508(100)，608(20)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝532(100)，606(30)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C32H38N3O9[M+H]+计算值608.2603，实测值608.2592. 实施例85A (-)-(2S，3R)-N2-[苄氧基羰基]-N2-[(苄氧基羰基)氨基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-O-甲基酪氨酸甲酯
制备以类似于实施例84A的方式进行。
通过方法15确定对映异构体。
HPLC/UV-Vis(方法15)Rt＝7.20分钟。
[α]20Na＝-34°(c＝0.27，在MeOH中)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝5.11分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝5.21分钟。
LC-MS(方法23)Rt＝2.87分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝508(100)，608(90)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝532(60)，606(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C32H38N3O9[M+H]+计算值608.2603，实测值608.2594. 实施例86A (2S*，3R*)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-O-甲基酪氨酸甲酯
在氩气保护气氛下，将阮内镍(约1g)加入实施例83A(2.81g，4.62mmol)在甲醇/二氯甲烷 1:1(100ml)中的溶液。将反应混合物在80巴的氢压和在室温下，在加压的压热器中氢化(12小时)。HPLC色谱图(方法8)显示完全的转化。在氩气保护气氛下，通过玻璃料/硅藻土层过滤反应混合物并将玻璃料用甲醇洗涤数次。将所述滤液在真空中蒸发并在高真空下干燥。获得的产物是固体(1.50g，定量)，将其进一步反应，而不需要精制。
HPLC/UV-Vis(方法8)Rt＝3.66分钟。
实施例87A (+)-(2R，3S)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-O-甲基酪氨酸甲酯
在氩气保护气氛下，将阮内镍(约0.8g)加入实施例84A(4.00g，6.58mmol)在甲醇/二氯甲烷 1:1(100ml)中的溶液。将反应混合物在80巴的氢压下和在室温在加压的压热器中氢化(72小时)。在氩气保护气氛下，通过玻璃料/硅藻土层过滤反应混合物，并将玻璃料用甲醇洗涤数次。将滤液在真空中蒸发并置入乙酸乙酯中。将EDTA(2g)在50％饱和碳酸氢钠水溶液(700ml)中的溶液加入所述溶液中。用乙酸乙酯(100ml)提取水相5次。接着，将合并的有机相用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤2次并用饱和的氯化钠水溶液洗涤2次。将所有的水相用乙酸乙酯单独反提取。接着，将合并的有机相通过硫酸镁干燥，过滤并在高真空下干燥。获得的产物是固体(1.04g，49％理论值，96％ee)。
HPLC/UV-Vis(方法16)Rt＝7.8分钟。
[α]20Na＝+7.7°(c＝0.34，在MeOH中)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝3.69分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝3.87分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.17分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝208(90)，269(100)，325(40)[M+H]+. IR νmax(NaCl，cm-1)2933，1737，1709，1611，1511，1365，1243，1164，1030. 实施例88A (-)-(2S，3R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-O-甲基酪氨酸甲酯
在氩气保护气氛下，将阮内镍(约0.7g)加入实施例85A(5.20g，8.56mmol)在甲醇/二氯甲烷 1:1(140ml)中的溶液。将反应混合物在80巴的氢压下和在室温在加压的压热器中氢化(72小时)。在氩气保护气氛下，通过玻璃料/硅藻土层过滤反应混合物并将所述玻璃料用甲醇洗涤数次。将滤液在真空中蒸发并置入乙酸乙酯中。将所述混合物通过硅胶色谱法(环已烷/乙酸乙酯 3:1→1:3)纯化并通过制备HPLC(方法31)进行分离。获得标题化合物(324mg，91％ee，8％理论值)。
HPLC/UV-Vis(方法16)Rt＝9.3分钟。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝3.69分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝3.84分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.17分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝208(90)，269(100)，325(40)[M+H]+. 1H NMR(500MHz，d6-DMSO)δ＝1.37(s，9H，C(CH3)3)，3.53(s，3H，OCH3)，3.74(s，3H，OCH3)，4.26(m，1H，β-CH)，5.00(t，J＝9.0Hz，1H，β-CH)，6.93(d，J＝8.0Hz，2H，ArH)，7.23(d，J＝8.0Hz，2H，ArH)，7.52(d，J＝10.0Hz，1H，NH)，8.45(br.s，2H，NH2)。
实施例89A (2S*，3R*)-N2-[苄氧基羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-O-甲基酪氨酸甲酯
在氩气保护气氛下，在0℃，将NaHCO3(0.58g，6.94mmol，1.5当量)和碘化四-N-丁铵(0.17g，0.47mmol，0.1当量)加入实施例86A(1.5g，4.62mmol)和N-苄氧基羰基氧基琥珀酰亚胺酯(1268mg，5.09mmol，1.1当量)在二氯甲烷/水(1:2，150ml)中的溶液中。将反应混合物缓慢升温(12小时)，由此通过HPLC观察到完全的转化(方法1)。将柠檬酸的溶液(5％)加入所述溶液。用二氯甲烷(100ml)提取水相三次。接着，将合并的有机相用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤2次，并用饱和的氯化钠水溶液洗涤2次。接着，将合并的有机相通过硫酸镁干燥，过滤并在高真空下干燥。获得的产物是标题化合物，其为固体(2.1g，99％理论值)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝4.73分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝4.68分钟。
IR νmax(NaCl，cm-1)3356，1737，1680，1514，1242，1161，1026，1004. 1H NMR(500MHz，d6-DMSO)δ＝1.36(s，9H，C(CH3)3)，3.61(s，3H，OCH3)，3.73(s，3H，OCH3)，4.51(dd，J＝9.5，4.0Hz，1H，α-H/β-H)，4.94(m，2H，PhCH2O)，5.20(dd，J＝10.0，4.0Hz，1H，α-H/β-H)，6.87(d，J＝8.5Hz，2H，ArH)，7.15-7.22(m，4H，ArH)，7.29-7.37(m，3H，ArH)，7.50(d，J＝10.0Hz，1H，NH)，7.57(d，J＝10.0Hz，1H，NH)。
13C NMR(126MHz，d6-DMSO)δ＝27.9，51.9，53.8，54.9，58.9，65.4，78.3，113.5，126.8，127.3，127.5，127.7，128.2，130.9，136.6，154.6，155.9，158.2，170.6. HR-TOF-MS(方法24)C25H30N2O7[M+H]+实测值459.2140，计算值459.2126. 实施例90A (+)-(2R，3S)-N2-[苄氧基羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-O-甲基酪氨酸甲酯
实施例87A(1.0g，3.08mmol)以类似于例如89A的制备方法反应(反应时间12小时)。将粗制产物通过制备HPLC(方法32)进行纯化。获得1.4g(61％理论值，96％ee)的标题化合物。
HPLC/UV-Vis(方法16)Rt＝7.3分钟。
[α]20Na＝+4.0°(c＝0.17，在MeOH中)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝4.73分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝4.81分钟。
IR νmax(NaCl，cm-1)3346，1741，1707，1680，1517，1270，1248，1160，1028，1007. LC-MS(方法23)Rt＝2.63分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝298(100)，459(30)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝383(100)，457(10)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C25H30N2O7[M+H]+实测值459.2128，计算值459.2126. 实施例91A (-)-(2S，3R)-N2-[苄氧基羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-O-甲基酪氨酸甲酯
实施例88A(0.32g，0.98mmol)以类似于例如89A的制备方法进行反应(反应时间12h)。获得的产物是标题产物，其为固体(0.38g，85％理论值)。
HPLC/UV-Vis(方法16)Rt＝6.3分钟。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝4.73分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝4.81分钟。
LC-MS(方法23)Rt＝2.60分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝298(100)，459(70)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝383(100)，457(10)[M-H]-. 实施例92A (2S*，3R*)-N2-[苄氧基羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-O-甲基酪氨酸
在氩气保护气氛下，将实施例89A(759mg，1.69mmol)的溶液提供在THF/水 2:1(12ml)中。在0℃，在剧烈搅拌的同时，缓慢逐滴加入一水合氢氧化锂(81mg，3.39mmol，2.05当量)的水溶液。将所述混合物在室温搅拌直到HPLC色谱图(方法5)显示完全的转化(约3小时)。随后加入磷酸氢钾(225mg)，将反应混合物在真空中浓缩，并用乙酸乙酯(100ml)层覆盖。接着，用5％柠檬酸(pH 2-3)酸化水相，接着用乙酸乙酯(50ml)提取三次。将合并的有机相用饱和的氯化钠水溶液(20ml)洗涤2次，通过硫酸钠干燥，过滤，在真空中浓缩并在高真空下干燥。获得标题化合物(735mg定量)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝4.45分钟。
LC-MS(方法21)Rt＝2.33分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝389(100)，445(90)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝335(60)，443(100)[M-H]-. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ＝1.35(s，9H，C(CH3)3)，3.72(s，3H，OMe)，4.35-4.40(m，1H，α-H)，4.94(s，2H，PhCH2O)，5.19(dd，J＝10.0，4.0Hz，1H，β-H)，6.86(d，J＝9.0Hz，2H)，7.17-7.34(m，7H，ArH)，7.44-7.48(m，2H，2NH)，12.9(s，br，1H，CO2H)。
实施例93A (+)-(3S)-N2-[苄氧基羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-O-甲基-D-酪氨酸
方法A通过制备HPLC(方法40)分离实施例92A的对映异构体的混合物(735mg，2.83mmol)。获得319mg(99.5％ee，43％理论值)的标题化合物和307mg(99.5％ee，42％理论值)的另一种对映异构体(实施例94A)。
通过方法16确定对映异构体。
HPLC/UV-Vis(方法16)Rt＝10.9分钟。
[α]20Na＝+8°(c＝0.04，在MeOH中)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝4.45分钟。
LC-MS(方法21)Rt＝2.33分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝389(100)，445(90)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝335(60)，443(100)[M-H]-. IR νmax(NaCl，cm-1)3358，2978，1705，1683，1615，1515，1245，1167，1027. HR-TOF-MS(方法24)C23H29N2O7[M+H]+实测值445.1976，计算值445.1970. 方法B实施例93A(1.30g，2.83mmol)以类似于实施例92A(反应时间2小时)的制备方法的方式反应。作为产物，获得作为固体产物的标题化合物(0.61g，48％理论值，95％ee)。
HPLC/UV-Vis(方法16)Rt＝10.9分钟。
[α]20Na＝+15°(c＝0.23，在MeOH中)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝4.41分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝4.54分钟。
HR-TOF-MS(方法24)C23H28N2O7Na[M+Na]+实测值467.1788，计算值467.1794. 实施例94A (-)-(3R)-N2-[苄氧基羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-O-甲基-L-酪氨酸
方法A根据实施例93A(方法A)的制备方法 HPLC/UV-Vis(方法16)Rt＝13.3分钟。
[α]20Na＝-10°(c＝0.12，在MeOH中)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝4.45分钟。
LC-MS(方法21)Rt＝2.33分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝389(100)，445(90)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝335(60)，443(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C23H29N2O7[M+H]+实测值445.1976，计算值445.1970. 方法B实施例90A(0.38g，0.84mmol)以类似于实施例92A的方法的方式反应(反应时间2h)。作为产物，获得作为固体的标题化合物(0.132g，35％理论值，94％ee)。
HPLC/UV-Vis(方法16)Rt＝13.3分钟。
[α]20Na＝-5°(c＝0.1，在MeOH中)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝4.41分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝4.49分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝2.38分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝389(100)，445(100)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝335(60)，443(100)[M-H]-. 13C NMR(126MHz，d6-DMSO)δ＝28.0，53.9，54.9，58.8，65.2，78.2，113.4，127.2，127.3，127.6，128.1，128.2，131.7，136.8，154.7，156.0，158.1，171.4. HR-TOF-MS(方法24)C23H29N2O7[M+H]+实测值445.1966，计算值445.1970. 实施例95A 2-异丙基-5-甲基环已基(1S，2R，5R)-[(3S)-N2-[苄氧基羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]]-O-甲基-D-酪氨酸酯
在氩气保护气氛下，提供实施例93A(34mg，76μmol，1当量)和(1S，2R，5S)-(+)-薄荷醇(12mg，76μmol，1当量)在二氯甲烷中的溶液。在0℃，加入DMAP(17.3mg，84μmol，1.1当量)并将DCC(17.3mg，84μmol，1.1当量)在二氯甲烷(0.5ml)中的溶液缓慢逐滴加入。将所述混合物在室温搅拌直到HPLC色谱图(方法5)显示完全的转化(约2小时)。将反应混合物随后通过硅藻土过滤并在真空中浓缩，加入乙酸乙酯/石油醚 3:1。白色固体沉淀并通过过滤去除。将滤液浓缩并通过硅胶色谱法进行预纯化(石油醚/乙酸乙酯 3:1)。通过制备HPLC(方法43)纯化。获得标题化合物(17mg，38％理论值)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝5.74分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝5.72分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝3.46分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝483(100)，527(80)，583(40)[M+H]+. 1H NMR(500MHz，d6-DMSO)δ＝0.71(d，3H，J＝7Hz，CH3)，0.81(d，3H，J＝7Hz，CH3)，0.81-0.84(m，3H)，0.87(d，3H，J＝7Hz，CH3)，1.00-1.06(m，1H)，1.22-1.28(m，1H)，1.35(s，9H，C(CH3)3)，1.61-1.70(m，3H)，1.89-1.92(m，1H)，3.72(s，3H，OMe)，4.49(dd，1H，J＝4.5，9.5Hz，β-H)，4.59(dt，J＝4.0，11.0Hz，1H，O-CH)，4.91(d，J＝12.0Hz，1H，PhCH2O)，4.97(d，J＝12.0Hz，1H，PhCH2O)，5.17(dd，J＝4.5，9.5Hz，1H，β-H)，6.86(d，2H，J＝9.0Hz，ArH)，7.16-7.24(m，4H，ArH)，7.28-7.34(m，3H，ArH)，7.46(d，1H，J＝8.0Hz，NH)，7.55(d，1H，J＝8.0Hz，NH)。
实施例96A 2-(三甲基甲硅烷基)乙基(+)-(3S)-N2-[苄氧基羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-O-甲基-D-酪氨酸酯
将实施例93A(261mg，0.59mmol)，2-(三甲基甲硅烷基)乙醇(694mg，5.87mmol，10当量)和

分子筛(约20mg)在无水二氯甲烷p.a.(10ml)中的混合物在氩气保护气氛下，在室温搅拌10分钟。随后，在-30℃，加入DCC(244mg，1.17mmol，2当量)和DMAP(71mg，0.59mmol，1当量)。使反应混合物融化(约12小时)并在室温搅拌直到HPLC色谱图(方法5)显示完全的转化(12小时)。在室温，反应混合物在真空中蒸发并通过硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯 3:1)纯化。获得244mg(76％理论值，99％ee)的标题化合物。
HPLC/UV-Vis(方法16)Rt＝8.2分钟。
[α]20Na＝+10°(c＝0.1，在MeOH中)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝5.34分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝5.42分钟。
IR νmax(NaCl，cm-1)3361，2931，2118，1735，1706，1681，1515，1247，1165，1019. LC-MS(方法21)Rt＝3.16分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝166(100)，545(15)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C28H41N2O7Si[M+H]+实测值545.2678，计算值545.2678. 实施例97A 2-(三甲基甲硅烷基)乙基(-)-(3R)-N2-[苄氧基羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-O-甲基-L-酪氨酸酯
实施例94A(130mg，0.29mmol)以类似于实施例96A的方式反应(反应时间12小时)。作为产物，获得作为固体的标题化合物(149mg，94％理论值，>99.5％ee)。
HPLC/UV-Vis(方法16)Rt＝7.2分钟。
[α]20Na＝-9°(c＝0.1，在MeOH中)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝5.34分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝5.32分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝3.24分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝545(100)[M+H]+. 实施例98A 2-(三甲基甲硅烷基)乙基(+)-(3S)-3-氨基-N2-[苄氧基羰基]-O-甲基-D-酪氨酸酯三氟乙酸盐
将实施例96A(222mg，0.41mmol，1当量)悬浮在二氯甲烷(3ml)中，并且随后，在氩气保护气氛下，加入三氟乙酸(9ml)，将所述混合物在室温搅拌15分钟直到HPLC色谱图显示完全的转化(方法5)。接着将所述溶剂在真空中蒸馏除去，在该过程中浴温不应该超过30℃。将所述粗制产物通过制备HPLC(方法43)纯化。获得179mg(79％理论值，>99.5％ee)的标题化合物。
HPLC/UV-Vis(方法16)Rt＝8.66分钟。
[α]20Na＝+20°(c＝0.22，在MeOH中)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝4.33分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝4.55分钟。
IR νmax(NaCl，cm-1)2956，1672，1613，1518，1251，1181，1138，1029. LC-MS(方法18)Rt＝2.18分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝225(100)，549(100)[M+H]+. 1H NMR(500MHz，d6-DMSO)δ＝-0.07(s，9H，Si(CH3)3)，0.43-0.52(m，2H，CH2Si)，3.75(s，3H，OMe)，3.74-3.78(m，1H，CH2CH2Si)，3.82-3.88(m，1H，CH2CH2Si)，4.38-4.42(m，1H，β-H)，4.58(tapp，J＝约9.0Hz，1H，α-H)，5.08(s，2H，PhCH2O)，6.98(d，2H，J＝8.5Hz，ArH)，7.34-7.40(m，8H，ArH)，8.07(d，1H，J＝8.0Hz，NH)，8.49(s，br，2H，2NH)。
13C NMR(125MHz，d6-DMSO)δ＝-1.8(3C，(Si(CH3)3))，16.3(CH2Si)，54.5(Cβ)，55.1(Cα)，57.7(OMe)，62.9(CH2CH2Si)，66.0(PhCH2O)，113.9(2C)，125.3，127.8(2C)，127.9，128.3(2C)，129.4(2C)，136.4，155.8(CO2Bn)，159.9，168.9(CO2TMSE)。
HR-TOF-MS(方法24)C23H33N2O5Si[M+H]+实测值445.2168，计算值445.2154. 实施例99A 2-(三甲基甲硅烷基)乙基(-)-(3R)-3-氨基-N2-[苄氧基羰基]-O-甲基-L-酪氨酸酯三氟乙酸盐
将实施例96A(120mg，0.22mmol)以类似于实施例98A(反应时间50分钟)的方式反应。作为产物，获得作为固体的标题化合物(71mg，56％理论值，>99.5％ee)。
HPLC/UV-Vis(方法16)Rt＝7.49分钟。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝4.33分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝4.50分钟。
IR νmax(NaCl，cm-1)2956，1672，1613，1518，1251，1181，1138，1029. HR-TOF-MS(方法24)C23H33N2O5Si[M+H]+实测值445.2151，计算值445.2154. 实施例100A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸三氟乙酸盐
方法A在氩气保护气氛下，将二碳酸二叔丁酯(369mg，1.69mmol，2.5当量)和N-甲基吗啉(68mg，680μmol，1当量)加入来自实施例3A的降解产物(690mg，680μmol)在水-二噁烷 1:2(30ml)中的溶液。搅拌反应混合物直到HPLC色谱图(方法1)显示完全的转化(约48小时)。将磷酸二氢钾(5当量)加入反应混合物并将所述混合物在真空中浓缩，通过制备HPLC纯化(方法43或方法30，随后是通过加入TFA(2000μmol，作为在乙腈-水 1:1中的0.05％溶液))进行色谱产物的盐的复分解作用。获得531mg(70％理论值)的标题化合物。
方法B将Edman3.0前体三氟乙酸盐(100mg，0.1mmol，1当量)首先进行凝胶色谱法(方法45，MeOH，0.2％ TFA)。将二碳酸二叔丁酯(43mg，0.2mmol，2当量)在室温加入该物质在水(1ml)和二噁烷(2ml)中的溶液，并逐滴加入NMM(21.6μL，0.2mmol，2当量)。将反应混合物在室温搅拌直到(约12小时)分析HPLC监测(方法8)显示足够的转化(>99％)。加入磷酸二氢钾(67mg，0.49mmol，5当量)，在旋转式蒸发仪上浓缩反应混合物并接着通过制备HPLC(方法26)进行精制。获得83mg(76％理论值)的标题化合物。
[α]20Na＝-18.0°(c＝0.19，在甲醇中)。
HPLC/UV-Vis(方法2)Rt＝1.7分钟。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝3.57分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝3.79分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.70分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝453(100)，1005(80)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1003(100)[M-H]-. LC-MS(方法23)Rt＝4.6分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝453.5(60)[M-C4H8-CO2+2H]2+，1006(100)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1004(100)[M-H]-. IR νmax(NaCl，cm-1)3288，2966，2359，2341，1645，1520，1368，1160，1137，1054. 1H NMR(500MHz，d5-吡啶)δ＝9.72(br.s，1H，NH-Glu6)，9.31(br d，J＝约7.0Hz，1H，NH-Arg3)，9.23(d，J＝6.0Hz，1H，NH-Leu2)，9.19(br.s，1H，εNH-Arg3)，9.00(d，J＝9.0Hz，1H，NH-βOH-Asn7)，8.88(d，J＝7.0Hz，1H，NH-Thr5)，8.78(d，J＝7.0Hz，1H，NH-Ile4)，8.64(d，J＝7.5Hz，1H，NH-Ser8)，8.40(br.s，1H，NH2-βOH-Asn7)，8.34(br.s，1H，NH2-βOH-Asn7)，5.96(d，J＝8.0Hz，1H，αCH-βOH-Asn7)，5.51(s，1H，βCH-βOH-Asn7)，5.11-5.09(m，1H，αCH-Ser8)，5.04(t，J＝7.5Hz，1H，αCH-Thr5)，4.95-4.91(m，3H，αCH-Arg3和αCH-βOH-Leu1和αCH-Leu2)，4.82(t，J＝7.0Hz，1H，αCH-Ile4)，4.71-4.66(m，1H，βCH-Thr5)，4.44(dd，J＝4.5和10.5Hz，1H，βCH-Ser8)，4.31-4.26(m，3H，βCH-Ser8和βCH-βOH-Leu1和αCH-Gly6)，4.20(dd，J＝6.0和16.5Hz，1H，αCH-Gly6)，3.43(br d，J＝约6.0Hz，2H，δCH-Arg3)，2.39-2.36(m，2H，βCH-Arg3和βCH-Ile4)，2.27-2.20(m，1H，βCH-Arg3)，2.10-2.05(m，2H，γCH-βOH-Leu1和γCH-Arg3)，1.93-1.79(m，4H，βCH-Leu2，γCH-Leu2，γCH-Arg3和γCH-Ile4)，1.55(d，J＝6.0Hz，3H，γCH3-Thr5)，1.45(s，9H，O-tBu)，约1.47(隐藏的，1H，γCH-Ile4)，1.17-1.15(m，4H，δCH3-βOH-Leu1和γCH-Ile4)，1.05(d，J＝6.0Hz，3H，δCH3-βOH-Leu1)，1.05(t，J＝7.0Hz，3H，δCH3-Ile4)，0.80(d，J＝6.0Hz，3H，δCH3-Leu2)，0.78(d，J＝6.0Hz，3H，δCH3-Leu2)。
13C NMR(125MHz，d5-吡啶)δ＝175.58(γCO-βOH-Asn7)，174.23(CO-βOH-Leu1)，173.97(CO-Arg3)，173.89(CO-Ser8或CO-Leu2)，173.69(CO-Thr5)，173.55(CO-Ser8或CO-Leu2)，172.48(CO-Ile4)，170.90(CO-βOH-Asn7)，170.50(CO-Gly6)，158.67(ζC-Arg3)，157.06(CO-Boc)，79.13(C-Boc)，77.09(βCH-βOH-Leu1)，72.29(βCH-βOH-Asn7)，68.32(βCH-Thr5)，63.24(βCH-Ser8)，59.79(αCH-Ile4)，59.60(αCH-Thr5)，58.35(αCH-βOH-Leu1)，57.11(αCH-βOH-Asn7)，56.94(αCH-Ser8)，54.06(αCH-Arg3)，53.60(αCH-Leu2)，44.32(αCH2-Gly6)，41.75(δCH2-Arg3)，40.41(βCH2-Leu2)，36.70(βCH-Ile4)，31.56(γCH-βOH-Leu1)，29.47(βCH2-Arg3)，28.48(Me3-Boc)，26.11(γCH-Arg3)，25.74(γCH2-Ile4)，24.93(γCH-Leu2)，22.94(δCH3-Leu2)，21.71(δCH3-Leu2)，21.20(γCH-Thr5)，19.48(δCH3-βOH-Leu1)，19.43(δCH3-βOH-Leu1)，16.02(γCH-Ile4)，11.20(δCH3-Ile4)。
HR-TOF-MS(方法24)C42H77N12O16[M+H]+实测值1005.5560，计算值1005.5576. 实施例101A N2-(苄氧基羰基)-N3-{N2.1-叔丁氧羰基[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酰}-(3S)-3-氨基-O-甲基-D-酪氨酸(2-(三甲基甲硅烷基)乙基)酯三氟乙酸盐
在氩气保护气氛下，在0℃，首先将HATU(2.5当量，71mg，186μmol)加入实施例98A(1.2当量，50mg，89μmol)，八肽酸(实施例100A，1.0当量，83mg，75μmol)和N-甲基吗啉(3.5当量，29μmol)在无水二甲基甲酰胺(0.5ml)中的溶液。将反应混合物在0℃搅拌(约3小时)。反应混合物接着显示胺成分的完全的转化(HPLC监测，方法5)。将固体磷酸二氢钾(101mg，746μmol，10当量)加入反应混合物并过滤混合物，接着在高真空下蒸发并通过色谱法纯化(方法43)。获得96.5mg(84％理论值)的产物。
[α]20Na＝-6°(c＝0.04，在甲醇中)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝4.47分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝4.88分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝2.26分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝652(100)，1432(50)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1430(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C65H107N14O20Si[M+H]+实测值1431.7570，计算值1431.7550. 实施例102A N2-(苄氧基羰基)-N3-{N2.1-叔丁氧羰基[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酰}-(3R)-3-氨基-O-甲基-L-酪氨酸(2-(三甲基甲硅烷基)乙基)酯三氟乙酸盐
实施例99A(65mg，0.116mmol)以类似于实施例101A的方式反应(反应时间150分钟)。作为产物，获得作为固体的标题化合物(111mg，74％理论值)。
[α]20Na＝-17°(c＝0.09，在甲醇中)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝4.47分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝4.87分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝2.16分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝652(100)，1432(60)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1430(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C65H107N14O20Si[M+H]+实测值1431.7509，计算值1431.7550. 实施例103A N2-(苄氧基羰基)-N3-{N2.1-叔丁氧羰基[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酰}-(3S)-3-氨基-O-甲基-D-酪氨酸三氟乙酸盐
在氩气保护气氛下，在无水THF(4ml)中提供实施例101A(96mg，62μmol)。在室温剧烈搅拌的同时，逐滴加入1N TBAF-THF溶液(310μl，5当量)。以30分钟的规则间隔加入另外多份的TBAF(每份5当量)。在约45当量后，HPLC色谱图(方法5)显示完全的转化。反应混合物接着用磷酸二氢钾(253mg，约30当量)中和。过滤反应混合物，在真空中蒸发并通过制备HPLC纯化(方法43)。获得83mg(93％理论值)的标题化合物。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝3.93分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝4.27分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝2.00分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝616(100)，1332(20)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1330(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C60H95N14O20[M+H]+实测值1331.6844，计算值1331.6842. 实施例104A N2-(苄氧基羰基)-N3-{N2.1-叔丁氧羰基[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酰}-(3R)-3-氨基-O-甲基-L-酪氨酸三氟乙酸盐
实施例102A(105mg，0.068mmol)以类似于实施例103A(共45当量的TBAF)的方式反应。作为产物，获得作为固体的标题化合物(90mg，99％理论值)。
[α]20Na＝-9°(c＝0.135，在甲醇中)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝3.93分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝4.15分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.80分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝616(100)，1332(40)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝664(60)，1330(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C60H95N14O20[M+H]+实测值1331.6840，计算值1331.6842. 实施例105A N2-(苄氧基羰基)-N3-{[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酰}-(3S)-3-氨基-O-甲基-D-酪氨酸三氟乙酸盐
根据方法1，实施例103A(10mg，7μmol)在氩气保护气氛下反应。在冷冻干燥后，获得9.3mg(99.9％理论值)的标题化合物。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝3.47分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.50分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝616(100)，1232(5)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1230(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C55H87N14O18[M+H]+实测值1231.6300，计算值1231.6318. 实施例106A N2-(苄氧基羰基)-N3-{N2.1-叔丁氧羰基[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酰}-(3R)-3-氨基-O-甲基-L-酪氨酸
根据操作方法1，实施例104A(240mg，166μmol)在氩气保护气氛下反应。在冷冻干燥后获得116mg(57％理论值)的标题化合物。
[α]20Na＝-24°(c＝0.07，在甲醇中)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝3.47分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝3.83分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.51分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝616(100)，1232(5)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1230(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C55H87N14O18[M+H]+实测值1231.6361，计算值1231.6318. 实施例107A N2.1-(苄氧基羰基)-[(3S)-3-氨基-O-甲基-D-酪氨酰)]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺三氟乙酸盐
在氩气保护气氛下，在0℃，首先将HATU(1.5mg，8μmol，5当量)加入实施例105A(1.9mg，2μmol，1当量)和NMM(1.7μL，15μmol，10当量)在无水DMF(200μl)的溶液中。将反应混合物在0℃搅拌(约90分钟)。接着，反应混合物显示胺成分的完全的转化(HPLC监测，方法5)。加入固体磷酸二氢钾(20当量，4.2mg，31μmol)，并过滤反应混合物，接着在高真空下蒸发并通过色谱法纯化(方法45)。获得1.8mg(96％理论值)的产物。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝3.65分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝3.91分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.67分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝1214(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C55H85N14O17[M+H]+实测值1213.6232，计算值1213.6312. 实施例108A N2.1-(苄氧基羰基)-[(3R)-3-氨基-O-甲基-L-酪氨酰)]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺三氟乙酸盐
实施例106A(120mg，0.097mmol)以类似于实施例107A的方式反应(反应时间1h)。获得标题化合物，其为固体(39mg，33％理论值)。
[α]20Na＝-58°(c＝0.07，在甲醇中)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝3.71分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝3.98分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.74分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝1214(100)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1212(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C55H85N14O17[M+H]+实测值1213.6227，计算值1213.6312. 实施例109A [(3S)-3-氨基-O-甲基-D-酪氨酰]]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺双三氟乙酸盐
在氩气保护气氛下，将实施例107A(65mg，49μmol)溶解于甲醇(5ml)并加入10％的披钯碳(10mg)以及1N盐酸水溶液(250μl)。在室温和在大气压下进行氢化直到(约90分钟)分析HPLC(方法5)显示完全转化。过滤反应混合物(通过硅藻土，

或注射器滤器，Biotage，PTFE)，在真空中浓缩并通过色谱法纯化(方法43)。获得40.6mg(63％理论值)的标题化合物。
[α]20Na＝-21°(c＝0.06，在甲醇中)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝3.28分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝3.55分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.20分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝540(100)，1079(20)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1077(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C47H78N14O15[M+H]+实测值1079.5835，计算值1079.5844. 实施例110A [(3R)-3-氨基-O-甲基-L-酪氨酰]]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺双三氟乙酸盐
使实施例108A(12mg，9μmol)以类似于实施例109A的制备方法的方式反应(反应时间90分钟)。作为产物，获得作为固体的标题化合物(10.3mg，87％理论值)。
[α]20Na＝-52°(c＝0.03，在甲醇中)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝3.18分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝3.52分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.25分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝540(100)，1079(5)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1077(100)[M-H]-. 实施例111A [N2-(苄氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3S)-3-氨基-O-甲基-D-酪氨酰)]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺三氟乙酸盐
在-30℃，在氩气保护气氛下，首先将HATU(2.2mg，6μmol，2.5当量)加入实施例109A(3.0mg，2μmol，1.0当量)，二肽酸(实施例10A，2.3mg，6μmol，2.5当量)和NMM(11μmol，5当量)在无水DMF(1ml)中的溶液。搅拌反应混合物并缓慢升温(约1小时)到0℃。将NMM(6μmol，每次2.5当量)和HATU(6μmol，每次2.5当量)以定时间隔(30分钟)加入反应混合物中，直到HPLC监测(方法5)显示胺成分的完全的转化。总共，对此需要约20当量的NMM和HATU。加入固体磷酸二氢钾(9.4mg，69μmol，30当量)并过滤反应混合物，接着在高真空下蒸发并通过色谱法纯化(方法43)。获得2mg(55％理论值)的产物。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝4.2分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝4.49分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝2.07分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝734(100)[M+2H]2+，1468(20)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝678(100)，732(5)[M-2H]2-，1466(10)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C69H111N16O19[M+H]+实测值1467.8228，计算值1467.8206. 实施例112A [N2-(苄氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-O-甲基-L-酪氨酰)]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺三氟乙酸盐
制备以类似于实施例111A的方式从实施例109A的化合物(30mg，23μmol)和示例性化合物10A(23.3mg，57μmol，2.5当量)进行。将所述粗制产物通过色谱法纯化(方法43)，由此在冷冻干燥后，获得25mg(69％理论值)的产物，其为固体。
[α]20Na＝-62°(c＝0.06，在甲醇中)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝4.4分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝2.31分钟。
MS(ESIpos.)m/z(％)＝734(100)[M+2H]2+，1468(20)[M+H]+； MS(ESIneg.)m/z(％)＝678(70)，733(100)[M-2H]2-，1466(10)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C69H111N16O19[M+H]+实测值1467.8206，计算值1467.8206. 实施例113A 3-氨基-3-(4-溴苯基)丙酸
将4-溴苯甲醛(50.0g，270mmol)，丙二酸(28.1g，270mmol)和乙酸铵(27.7g，359mmol，1.3当量)溶解于乙醇(400ml)。将所述混合物在回流下加热16小时。在玻璃滤器漏斗上收集得到的固体，通过吸滤收集并用乙醇洗涤。接着，将所述残余物从甲醇(80ml)收集。随后其用乙酸乙酯研磨并通过吸滤收集。获得41.0g(0.16mmol，62％理论值)的标题化合物，其为无色结晶固体。
HPLC(方法5)Rt＝3.13分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝0.97分钟，MS(ESIneg.)m/z(％)＝242.0(100)和244.0(80)[M-H]-. 1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ＝2.36-2.38(m，2H，2-H)，4.25(“t”，J＝6.8，7.6Hz，2H，3-H)，6.56(d，J＝16.1Hz，1H，N-H)，7.38(d，J＝8.5Hz，1H，N-H)，7.52-7.71(m，4H，芳族(arom)。H)。
13C-NMR(126MHz，DCOOD)δ＝36.5(CH2，C-2)，51.9(CH，C-3)，123.7(C四重峰)，129.2(CH)，132.4(CH)，133.5(C四重峰)，174，0(C四重峰，C-1)。
HR-TOF-MS(方法24)C9H11NO2Br[M+H]+计算值243.9968，实测值243.9980. 实施例114A 3-氨基-3-(4-溴苯基)丙酸甲酯盐酸盐
在氩气保护气氛下，将41.0g(157mmol)的化合物113A悬浮在甲醇(1000ml)中。加入102ml(410mmol，2.6当量)的在1，4-二噁烷中的4M盐酸。在加入盐酸后，原材料自发溶解，并将所述混合物在室温搅拌过夜。接着，将所述混合物在真空中浓缩到干燥。获得了产物(51.8g，纯度约69％，产率77％理论值)，其为固体并在没有进一步纯化的情况下应用于下一个步骤。
HPLC(方法5)Rt＝3.35分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.24分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝240.9(20)和242.8(20)[M-NH2+H]+. 1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ＝2.99(dd，J2，3＝8.7Hz，J2，2＝16.4Hz，1H，2-HA)，3.16(dd，J2，3＝4.0Hz，J2，2＝16.4Hz，1H，2-HB)，3.56(s，3H，OCH3)，4.62(br.s，1H，3-H)，7.49(d，J＝8.5Hz，2H，2‘-H)，7.65(d，J＝8.5Hz，2H，2‘-H)，8.64(br.s，2H，NH2)。
13C-NMR(126MHz，CDCl3)δ＝43.8(CH2，C-2)，51.8(CH3，OCH3)，52.1(CH，C-3)，121.2(C四重峰，C-4‘)，128.0(CH，C-芳族.)，131.7(CH，C-芳族.)，143.6(C四重峰，C-1‘)，172.2(C四重峰，C-1)。
HR-TOF-MS(方法24)C10H13NO2Br[M+H]+计算值258.0125，实测值258.0119. 实施例115A N-丁氧基羰基-3-氨基-3-(4-溴苯基)丙酸甲酯
将化合物114A(51.8g，121mmol，69％纯度)溶解于1，4-二噁烷/水(2:1，540ml)。加入二碳酸二叔丁酯(29.1g，133mmol，1.1当量)和三乙胺(38.8ml，28.22g，2.3当量)，并将所述混合物在室温搅拌150分钟。将二噁烷在真空中滤去，并加入150ml的乙酸乙酯和200ml饱和碳酸氢钠水溶液。部分产物115A自发沉淀并且通过过滤分离。分离滤液的相，并将有机相用0.5M柠檬酸洗涤，通过硫酸钠干燥并浓缩。通过用甲醇研磨从残余物获得另外的级分115A。总产率32.9g(92mmol，76％理论值)的标题化合物，其为固体。
HPLC(方法5)Rt＝4.80分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝2.37分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝358.0(15)和360.0(15)[M+H]+. 1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ＝1.34(s，9H，COC(CH3)3)，2.62-2.79(m，2H，2-H)，3.55(s，3H，OCH3)，4.87(dd，J1＝7.9Hz，J2＝15.1Hz，1H，3-H)，7.26(d，J2‘，3‘＝8.3Hz，2H，2‘-H)，7.51(d，J2‘，3‘＝8.3Hz，2H，3‘-H)。
13C-NMR(126MHz，CDCl3)δ＝28.3(CH3，COC(CH3)3)，40.4(CH2，C-2)，50.6(CH，C-3)，51.9(CH3，OCH3)，79.9(C四重峰，COC(CH3)3)，121.4(C四重峰，C-4‘)，127.9(CH，C-芳族.)，131.7(CH，C-芳族.)，140.3(C四重峰，C-1‘)，155.0(C四重峰，COC(CH3)3，171.2(C四重峰，C-1)。
HR-TOF-MS(方法24)C15H21NO4Br[M+H]+计算值358.0649，实测值358.0659. 实施例116A (S)-N-丁氧基羰基-3-氨基-3-(4-溴苯基)丙酸甲酯
通过手性HPLC(方法42)将外消旋化合物115A分离为标题化合物(96％ee)及另一种对映异构体(>99％ee)。在每轮上样750mg的115A。在每种情形中，定量分离50％理论值的(S)对映异构体(实施例116A)和(R)对映异构体。
通过方法17确定对映异构体。
HPLC/UV-VIS(方法17)Rt＝4.31分钟。(标题化合物) [α]20Na＝-38.6(c＝1.0，MeOH)。(标题化合物) HPLC/UV-VIS(方法17)Rt＝3.82分钟。(另外的对映异构体) [α]20Na＝+36.8(c＝1.0，MeOH)。(另外的对映异构体) 实施例117A (S)-N-丁氧基羰基-3-氨基-3-(4-二甲基氨基苯基)丙酸甲酯
当进行该反应时，必需小心严格排除氧和水分并且在干燥氩气保护气氛下保持试剂，因为否则只有不充足的转化发生。因为微波的大小限制批次的规模，将更大量分成多份约7mmol的实施例116A，并顺序处理。
将实施例116A(2.5g，6.98mmol)，二甲基胺(1M，在THF中，16ml，32mmol，4.6当量)，XPHOS(0.4g，0.84mmol，0.12当量)，碳酸铯(3.2g，9.75mmol，1.4当量)和双(二亚苄基丙酮)钯(0)(0.20g，0.35mmol，0.05当量)在20ml的微波反应器中在氩气保护气氛下混合并卷曲密封。将所述混合物在微波反应器(Emrys Optimizer单模式实验室微波反应器)中，在170℃加热1小时。在冷却后，用水和乙酸乙酯进行提取，并将有机相通过硫酸钠干燥。将所述溶剂去除，并将残余物溶解于甲醇，过滤溶液并浓缩滤液。获得产率2.0g(6.19mmol，89％理论值)的117A，其纯度足以用于进一步的反应。
对于分析目的，通过制备HPLC(方法33)精制实施例117A的样品。
HPLC(方法5)Rt＝3.60分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.84分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝323.3(100)[M+H]+. [α]20Na＝-31.0(c＝1.0，MeOH)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ＝1.35(s，9H，COC(CH3)3)，2.63(dd，J2，3＝6.6Hz，Jgem＝15.5Hz，1H，2-HA)，2.72(dd，J2，3＝8.8Hz，Jgem＝15.5Hz，1H，2-HB)，2.93(s，6H，N(CH3)2)，3.54(s，3H，OCH3)，4.84(m，1H，3-H)，6.88(br.s，2H，2‘-H)，7.20(d，J2‘，3‘＝8.3Hz，2H，3‘-H)，7.36(d，J＝8.8Hz，1H，N-H)。
13C-NMR(126MHz，CDCl3)δ＝28.3(CH3，COC(CH3)3)，40.3(CH2，C-2)，44.9(CH3，N(CH3)2)，50.3(CH，C-3)，52.0(CH3，OCH3)，80.1(COC(CH3)3)，119.1(CH，C-3‘)，128.0(CH，C-2‘)，140.3(C四重峰，C-1‘)，144.1(C四重峰，C-4‘)，155.1(C四重峰，COC(CH3)3)，171.2(C四重峰，C-1)。
HR-TOF-MS(方法24)C17H27N2O4[M+H]+计算值322.1893，实测值322.1890. 实施例118A (3R)-N2-[(苄氧基)羰基]-N2-[(苄氧基)羰基氨基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-3-(4-二甲基氨基苯基)-D-丙氨酸酯混合以甲基(3R)-N2-[(苄氧基)羰基]-N2-[(苄氧基)羰基氨基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-3-(4-二甲基氨基苯基)-L-丙氨酸甲酯
在氩气保护气氛下，将在THF中的1M LHMDS溶液(21.3ml，21.29mmol，2.2当量)加入70ml的无水THF中，并冷却到-78℃。加入化合物117A(3.1g，9.68mmol)在THF(35ml)中的溶液，并将所述溶液升温到-25℃，在所述温度其接着再搅拌10分钟。接着，再次将混合物冷却到-78℃，立刻加入氮杂二羧酸二苄酯(3.2g，10.65mmol，1.1当量)，并将所述混合物搅拌3小时。结束时，用乙酸(2.8ml，48.39mmol，5当量)在-78℃终止反应并在该温度再搅拌15分钟。在升温到室温后，加入浓碳酸氢钠水溶液并用数份乙酸乙酯进行提取。用饱和的氯化钠水溶液洗涤合并的有机提取物，通过硫酸钠干燥并浓缩。用二乙醚层覆盖无定形橙棕色残余物并静置数小时。在该时间内，分离部分晶体形式的实施例118A的产物。可以从滤液中通过急骤色谱法(Biotage 40M硅胶，环已烷/乙酸乙酯3:1)分离剩余的实施例118A的产物并在存在二乙醚的情况下重新结晶，产物混合以实施例119A的非对映异构体，所有的立体异构体和混合物的总产率1.5g(2.48mmol，18％理论值)。
对于分析目的，通过制备HPLC(方法33)精制实施例118A的纯的非对映异构体的样品。
HPLC(方法5)Rt＝4.52分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝2.87分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝621.5(50)[M+H]+. [α]20Na＝-22.8(c＝1.0，MeOH)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ＝1.30(s，9H，COC(CH3)3)，2.86(s，6H，N(CH3)2)，3.30(s，3H，OCH3)，4.74-5.11(m，6H)，6.62(d，J＝8.8Hz，2H)，7.15-7.51(m，12H，芳族.H)。
实施例119A (3R)-N2-[(苄氧基)羰基]-N2-[(苄氧基)羰基氨基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-3-(4-二甲基氨基苯基)-L-丙氨酸甲酯
将实施例118A的化合物(1.6g，1.90mmol)溶解于二氯甲烷(60ml)。在0℃，加入TMG(2.6ml，20.93mmol，11当量)并将反应物在室温搅拌过夜。为了终止反应，首先将混合物冷却到0℃并接着加入乙酸(1.3ml，22.83mmol，12当量)。将所述混合物用水稀释并用3份二氯甲烷提取，浓缩合并的有机提取物。将所述残余物用乙酸乙酯/二乙醚混合物研磨。结晶实施例119A的化合物，实施例118A的化合物主要残余在上清液中。将后者浓缩并再次用2ml的TMG和二氯甲烷(40ml)异构化。由此获得第二份的实施例119A的标题化合物。将结晶的上清液进行色谱分离(方法33)和再异构化，获得第三份的实施例119A。总产率1.1g(1.72mmol，90％理论值)的实施例119A，其为晶体形式。
HPLC(方法5)Rt＝4.76分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝3.12分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝621.5(90)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝619.5(60)[M-H]-. [α]20Na＝-118°(c＝1.0，CHCl3)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ＝1.30(s，9H，COC(CH3)3)，2.86(s，6H，N(CH3)2)，3.30(s，3H，OCH3)，4.75-5.23(m，4H)，6.62(d，J＝8.8Hz，2H)，7.15-7.61(m，12H)，8.29(br.s，1H，N-H)，8.72(br.s，1H，N-H)。
13C-NMR(126MHz，)δ＝27.94和28.07(CH3，C(CH3)3)，51.31(CH3)，51.62(CH3)，51.98(CH，C-7)，61.81(CH，C-6)，66.18和66.32和66.50(CH2，OCH2Ph)，67.49和67.65(CH2，OCH2Ph)，78.68和78.90(C四重峰，C-11)，111.74(CH，C-3‘)，123.54(CH)，124.06(CH)，126.76(CH)，127.18(CH)，127.30(CH)，127.55(CH)，127.76(CH)，127.83(CH)，127.98(CH)，128.24(CH)，128.30(CH)，128.79(CH)，135.59(C四重峰)，135.77(C四重峰)，135.99(C四重峰)，136.11(C四重峰)，149.74(C四重峰)，154.21(C四重峰)，154.68(C四重峰)，154.92(C四重峰)，155.03(C四重峰)，155.14(C四重峰)，156.09(C四重峰)，156.24(C四重峰)，166.97(C四重峰，C＝O)。
HR-TOF-MS(方法24)C33H41N4O8[M+H]+计算值621.2919，实测值621.2922. 实施例120A (3R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-(二甲基氨基苯基)-L-丙氨酸甲酯
将实施例119A的化合物(938mg，1.51mmol)溶解于二氯甲烷-甲醇1:1(30ml)。在氩气保护气氛下，加入阮内镍(约200mg)，在80巴下氢化所述混合物4天。当原材料通过HPLC不再能检测到时(方法5)，将所述催化剂通过过滤去除。浓缩所述滤液，获得0.6g的粗制产物(纯度约70％)，并在不经过进一步纯化的情况下将其用在下一个步骤中。对于分析目的，将来自实施例120A的纯的化合物的样品通过制备HPLC(方法27)精制。
HPLC(方法5)Rt＝3.25分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.34分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝338.2(30)[M+H]+. [α]20Na＝-11.5°(c＝1.0，MeOH)。
1H NMR(500MHz，d6-DMSO)δ＝1.37(s，9H，COC(CH3)3)，2.90(s，6H，N(CH3)2)，3.54(s，3H，OCH3)，4.24(d，J＝5.4Hz，1H，β-H)，4.96(dd，J＝8.4Hz，J＝8.0Hz，1H，α-H)，6.73(d，J2‘，3‘＝8.0Hz，2H，3‘-H)，7.13(d，J2‘，3‘＝8.0Hz，2H，2‘-H)，7.46(d，J＝9.6Hz，1H，NH)，8.470(br.s，2H，NH2)。
13C-NMR(126MHz，d6-DMSO)δ＝28.07(CH3，COC(CH3)3)，40.19(CH3，N(CH3)2)，52.68(CH3，OCH3)，54.11(CH，C-β)，56.79(CH，C-α)，78.87(C四重峰，COC(CH3)3)，112.53(CH，C-3‘)，127.65(CH，C-2‘)，149.87(C四重峰)，154.61(C四重峰，COC(CH3)3)，167.96(C四重峰，CO2CH3)。
HR-TOF-MS(方法24)C17H28N3O4[M+H]+计算值338.2075，实测值338.2064. 实施例121A (3R)-N2-(苄氧基)羰基)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-(二甲基氨基苯基)-L-丙氨酸甲酯
将550mg(1.14mmol，70％纯度)的实施例120A的化合物溶解于二噁烷/水 8:2.8，加入碳酸氢钠(479mg，5.71mmol，5当量)和氯甲酸苄酯(212μl，1.48mmol，1.3当量)，接着将所述混合物在室温搅拌2.5小时。接着，用水和乙酸乙酯提取混合物，并将有机相通过硫酸钠干燥并浓缩。可以通过用二乙醚研磨从所述残余物获得实施例121A的标题化合物，其为晶体。产率490mg(1.04mmol，91％理论值)。
HPLC(方法5)Rt＝4.14分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝2.52分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝472.3(100)[M+H]+. [α]20Na＝-13.4°(c＝1.0，MeOH)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ＝1.36(s，9H，COC(CH3)3)，2.86(s，6H，N(CH3)2)，3.30(s，3H，OCH3)，4.45(dd，Jα，ββ＝4.2Hz，J＝9.3Hz，1H，β-H)，4.94(d，Jgem＝12.5Hz，1H，OCH2Ph)，4.99(d，Jgem＝12.5Hz，1H，OCH2Ph)，5.15(dd，Jα，ββ＝4.2Hz，J＝10.3Hz，1H，α-H)，6.65(d，J2‘，3‘＝8.8Hz，2H，3‘-H)，7.10(d，J2‘，3‘＝8.8Hz，2H，2‘-H)，7.23-7.37(m，5H)，7.54(d，J＝9.3Hz，1H，NH)。
13C-NMR-(126MHz，d6-DMSO)δ＝28.0(CH3，COC(CH3)3)，41.1(CH3，N(CH3)2)，52.0(CH3，OCH3)，53.8(CH，C-β)，59.0(CH，C-α)，65.4(CH2，OCH2Ph)，78.3(C四重峰，COC(CH3)3)，113.7(CH)，126.9(C四重峰)，127.3(CH)，127.5(CH)，127.8(CH)，128.2(C四重峰)，128.3(CH)，136.6(C四重峰)，154.6(C四重峰，NCO2)，156.0(NCO2)，170.7(CO2CH3)。
HR-TOF-MSC25H34N3O6[M+H]+计算值472.2443，实测值472.2460. 实施例122A (3R)-N2-[(苄氧基)羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-(二甲基氨基苯基)-L-丙氨酸
将化合物121A(444mg，0.94mmol)溶解于5ml的THF和830μl的水。在0℃，加入99mg(2.35mmol，2.5当量)的一水合氢氧化锂。在0℃进行反应约2小时直到不再能检测到原材料121A(HPLC，方法5)。接着，用乙酸(620μl，2.83mmol，3当量)终止反应。将混合物用水稀释并用乙酸乙酯提取。将有机相通过硫酸钠干燥并将所述溶剂蒸馏除去。产率430mg(定量)。
HPLC(方法5)Rt＝3.80分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝2.21分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝458.2(100)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝456.3(100)[M-H]-. [α]20Na＝-16.5(c＝1.0，MeOH)。
1H NMR(500MHz，d6-DMSO)δ＝4.39(dd，Jα，β＝3.5Hz，J＝9.6Hz，1H，β-H)，4.92(d，Jgem＝12.8Hz，1H，OCH2Ph)，4.97(d，Jgem＝12.8Hz，1H，OCH2Ph)，5.19(dd，Jα，β＝3.5Hz，J＝10.0Hz，1H，α-H)，6.86(br.s，2H)，7.17(d，J＝8.1Hz，2H)，7.24(d，J＝7.0Hz，2H)，7.23-7.29(m，2H)，7.41(d，J＝10.1Hz，1H，NH)，7.48(d，J＝1Hz，1H，NH)，13.0(br.s，1H，COOH)。
13C-NMR(126MHz，d6-DMSO)δ＝28.0(CH3，COC(CH3)3)，41.2(CH3，N(CH3)2)，53.9(CH，C-β)，58.8(CH，C-α)，65.3(CH2，OCH2Ph)，78.1(C四重峰，COC(CH3)3)，113.7(CH)，126.7(C四重峰)，127.1(CH)，127.3(CH)，127.6(CH)，128.1(C四重峰)，128.2(CH)，136.9(C四重峰)，154.7(C四重峰，NCO2)，156.1(NCO2)，171.4(CO2H)。
HR-TOF-MS(方法24)C24H32N3O6[M+H]+计算值458.2286，实测值458.2277. 实施例123A (3R)-N-[(苄氧基)羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-(二甲基氨基苯基)-L-丙氨酸五氟苯基酯
在0℃，在氩气保护气氛下，将化合物122A(408mg，0.89mmol)溶解于无水THF(11ml)。加入二苯基亚膦酸五氟苯酯(514mg，1.34mmol，1.5当量)和NMM(360mg，3.57mmol，4当量)，并将所述反应混合物在室温搅拌16小时。接着，去除所述溶剂并将所述残余物通过色谱法纯化(方法33改变的梯度0-10分钟10％B，斜度，30分钟65％B，36-38分钟10％B)。除了123A(250mg，0.40mmol，45％理论值)之外，分离未反应的原材料(实施例122A，41mg，9μmol，10％理论值)。
HPLC(方法5)Rt＝3.66分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝3.23分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝624.4(100)[M+H]+. [α]20Na＝-19.8°(c＝0.5，CH2Cl2)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ＝1.36(s，9H，COC(CH3)3，2.90(s，6H，N(CH3)2)，4.96-5.04(m，3H，β-H和OCH2Ph)，5.39(dd，Jα，β＝4.4Hz，J＝10.2Hz，1H，α-H)，6.75(br.s，2H)，7.21-7.33(m，7H)，7.57(d，J＝10.3Hz，1H，NH)，7.89(d，J＝9.3Hz，1H，NH)。
13C-NMR(126MHz，d6-DMSO)δ＝28.2(CH3，COC(CH3)3)，43.8.(CH3，N(CH3)2)，55.6(CH，C-β)，59.1(CH，C-α)，67.5(CH2，OCH2Ph)，80.9(C四重峰，COC(CH3)3)，117.8(CH)，124.4(C四重峰，m)，128.1(CH)，128.4(CH)，128.6(CH)，128.7(CH)，132.9(C四重峰，m)，136.8(C四重峰，m)，138.9(C四重峰，m)，139.9(C四重峰，m)，141.9(C四重峰，m)，155.7(C四重峰，NCO2)，156.2(NCO2)，166.2(CO2H)。
实施例124A {(3R)-N-[(苄氧基)羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-4-(二甲基氨基苯基)-L-丙氨酰}-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
将化合物123A(237mg，0.38mmol)和化合物Edman3.0(示例性化合物3，465mg，0.46mmol，1.2当量)在0℃溶解于DMF(40ml)并加入DIEA(0.40ml，2.28mmol，6当量)。将反应混合物进一步搅拌过夜，在其中将其缓慢升温到室温。接着，将DMF在旋转式蒸发仪上去除，并将所述残余物通过色谱法纯化(方法44)。产率550mg(92％理论值)。
HPLC(方法5)Rt＝3.62分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝2.01分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝673.3(100)[M+2H]2+，MS(ESIneg)m/z(％)＝1343[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C61H98N15O19[M+H]+计算值1344.7158，实测值1344.7155. 实施例125A {(3R)-3-氨基-N-[(苄氧基)羰基]-4-(二甲基氨基苯基)-L-丙氨酰}-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸双三氟乙酸盐三(三氟乙酸盐)
将550mg(0.35mmol)的实施例124A的化合物溶解于二氯甲烷(2ml)并接着加入14ml的30％在二氯甲烷中的TFA。将所述混合物在室温搅拌15分钟，接着浓缩并在油泵真空下干燥。将粗制产物(644mg，约70％纯度，0.28mmol，80％理论值)进行反应，而不经过进一步的纯化。
HPLC(方法7)Rt＝3.46分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.56分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝622.9(100)，[M+2H]2+，MS(ESIneg.)m/z(％)＝1242.6[M-H]-. 实施例126A N2.1-(苄氧基羰基)-[(3R)-3-氨基-4-(二甲基氨基)-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-氢-xy-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺双三氟乙酸盐
将来自实施例125A的粗制产物(644mg，0.28mmol)溶解于DMF(30ml)并冷却到0℃。加入HATU(349mg，0.92mmol，3当量)，随后加入NMM(200μl，1.84mmol，6当量)。5分钟后，移去冰浴并将所述混合物在室温搅拌3小时。通过加入甲醇终止反应并将所述混合物开始通过凝胶色谱法(方法45，洗脱剂甲醇)进行预先纯化。合并包含产物的级分并通过制备HPLC(方法33)进行精制。产率211mg(52％理论值)。
HPLC(方法5)Rt＝3.64分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.70分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝614(100)[M+2H]2+，1226.8(20)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1224.9(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C56H88N15O16[M+H]+计算值1226.6528，实测值1226.6534. 实施例127A [(3R)-3-氨基-4-(二甲基氨基苯基)-L-丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺三盐酸盐
将实施例126A的化合物(209mg，0.14mmol)溶解于甲醇(50ml)，并加入1M盐酸水溶液(860μl，6当量)以及10％披钯碳。在环境压力下和在室温进行氢化90分钟。接着，过滤混合物以去除催化剂并浓缩。将所述残余物置入水中并冷冻干燥。获得170mg(98％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法7)Rt＝3.19分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.26分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝547.1(100)[M+2H]2+，1092.8(5)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C48H82N15O14[M+H]+计算值1092.6161，实测值1092.6133. 实施例128A N2.1-(叔丁氧羰基)-[3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-4-(二甲基氨基苯基)-L-丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺双盐酸盐
将实施例127A的化合物(85mg，71μmol)和二肽(实施例9A，40mg，106μmol，1.5当量)溶解于DMF(4ml)并冷却到0℃。接着加入NMM(31μl，281μmol，4当量)和HATU(43mg，113μmol，1.6当量)，并接着去除冰浴。将所述混合物缓慢升温到环境温度。1小时后，通过加入甲醇终止反应并使用甲醇作为流动相进行色谱分离(方法45)。通过HPLC(方法7)检查洗脱物，合并包含产物的级分并浓缩。获得约66％纯的(65％理论值)的105mg的标题化合物。在下一阶段中使用该物质，而不经过进一步纯化。
HPLC(方法7)Rt＝4.47分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝2.24分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝724.3(100)[M+2H]2+，1448.3(5)[M+H]+. 实施例129A (2S)-N-(叔丁氧羰基)-3-(三甲基甲硅烷基)丙氨酸 和 实施例130A (2R)-N-(叔丁氧羰基)-3-(三甲基甲硅烷基)丙氨酸 根据M.Merget，K.Günther，M.Bernd，E.Günther，R.Tacke，J.Organomet.Chem.2001 628，183-194制备目标化合物。通过在手性相上的制备HPLC(方法41)实现对映异构体的分离并通过与N-(叔丁氧羰基)-L-3-三甲基甲硅烷基丙氨酸(2R异构体，Mercachem AMR 39.260)真实样品的HPLC比较指定异构体。
实施例129A N-(叔丁氧羰基)-3-(三甲基甲硅烷基)-D-丙氨酸
手性HPLC(方法41)Rt＝4.16分钟，e.e.>99％. [α]D20＝+1.1(c＝0.83，甲醇) 实施例130A N-(叔丁氧羰基)-3-(三甲基甲硅烷基)-L-丙氨酸
手性HPLC(方法41)Rt＝9.27分钟，e.e.>99％ [α]D20＝-1.6(c＝0.66，甲醇) 实施例131A [N2-(叔丁氧羰基)-3-(三甲基甲硅烷基)-D-丙氨酰]-2-叔丁基-L-丙氨酸甲酯
在0℃，将2-叔丁基-L-丙氨酸甲酯三氟乙酸盐(215mg，0.82mmol)[S.D.Bull，S.G.Davies，A.C.Garner，M.D.O‘Shea，J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，2001，3281-3287]和实施例129A(225mg，0.82mmol，1当量)溶解于DMF(5ml)。接着加入NMM(360μl，3.29mmol，4当量)和HATU(470mg，1.24mmol，1.5当量)并将所述混合物在室温搅拌2小时。用MTBE和饱和的碳酸氢钠水溶液进行提取，并用1M柠檬酸洗涤合并的有机相，再次用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤，通过硫酸钠干燥并浓缩。在通过色谱法纯化后(方法33)，获得290mg(0.72mmol，88％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法7)Rt＝5.37分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝3.02分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝403.5(100)[M+H]+. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ＝0.01(s，9H，Si(CH3)3)，0.89(m，11H)，1.37(s，9H，COC(CH3)3)，1.55(dd，J＝8.8Hz，14.2Hz，1H)，1.63(dd，J＝3.4Hz，14.2Hz，1H)，3.62(s，3H，OCH3)，4.04(m，1H)，4.27(m，1H)，6.70(d，J＝9.0Hz，1H，NH)，7.96(d，J＝8.1Hz，1H，NH)。
实施例132A [N2-(叔丁氧羰基)-3-(三甲基甲硅烷基)-D-丙氨酰]-2-叔丁基-L-丙氨酸
将实施例131A(274mg，0.68mmol)置入THF/水(3:1，21ml)中并冷却到0℃。加入一水合氢氧化锂(57mg，1.36mmol，2当量)并将所述混合物0℃搅拌1小时。在真空中去除大部分的THF，通过加入1M柠檬酸将pH调节到4，并将所述混合物用乙酸乙酯提取2次。将合并的有机相通过硫酸钠干燥并浓缩。在通过色谱法纯化后(方法33，具有改变的梯度0-2分钟30％ B，斜度，30-35分钟-90％ B)，获得237mg(0.61mmol，90％理论值)的标题化合物，其为无色的固体。
HPLC(方法7)Rt＝4.93分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝2.76分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝389.4(100)[M+H]+. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ＝0.00(s，9H，Si(CH3)3)，0.88(m，11H)，1.36(s，9H，COC(CH3)3)，1.51(dd，J＝9.3Hz，14.2Hz，1H)，1.64(dd，J＝3.0Hz，14.2Hz，1H)，4.02(m，1H)，4.20(m，1H)，6.71(d，J＝9.3Hz，1H，NH)，7.80(d，J＝8.1，1H，NH)，12.49(br s，1H，COOH)。
实施例133A N2.1-(叔丁氧羰基)-[3-三甲基甲硅烷基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-4-(二甲基氨基苯基)-L-丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺双盐酸盐
将实施例127A的化合物(102mg，85μmol)和二肽(实施例132A，50mg，127μmol，1.5当量)溶解于DMF(4ml)并冷却到0℃。接着加入NMM(37μl，340μmol，4当量)和HATU(65mg，170μmol，2.0当量)并接着去除冰浴。将所述混合物缓慢升温到环境温度。1小时后，通过加入甲醇终止反应，并在Sephadex LH20上，使用甲醇作为流动相进行色谱分离(方法45)。通过HPLC(方法7)检查洗脱物，合并包含产物的级分并浓缩。获得126mg(82μmol，96％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法7)Rt＝4.55分钟。
实施例134A N2-(叔丁氧羰基)-D-苯基丙氨酰-L-苯丙氨酸苄酯
在-10℃，将HOBt(2.0g，15.08mmol，4当量)，NMM(1.2ml，1.1g，11.31mmol，3当量)，N-(叔丁氧羰基)-D-苯丙氨酸(1.0g，3.77mmol，1当量)[Anderson，McGregor；J.Am.Chem.Soc.；79；1957；6180，6181]，EDC(1.4g，7.54mmol，2当量)和另外的NMM(0.8ml，0.8g，7.54mmol，2当量)连续加入L-苯丙氨酸苄酯盐酸盐(1.1g，4.15mmol，1.1当量)在二氯甲烷p.a.(365ml)中的溶液。将反应混合物缓慢升温到室温并在该温度搅拌过夜。将所述溶剂彻底去除，并将所述残余物与乙酸乙酯混合并随后用饱和的碳酸氢钠水溶液，5％柠檬酸水溶液，饱和的碳酸氢钠水溶液(500ml)和饱和的氯化钠水溶液洗涤混合物。将所述混合物通过硫酸钠干燥并过滤。将所述混合物在真空中蒸发到干燥，并接着在高真空下干燥。获得1.8g(96％理论值)的标题化合物，并在不经过进一步纯化的情况下反应。
HPLC(方法12)Rt＝9.16分钟。
HPLC(方法4)Rt＝5.16分钟。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ＝1.18/1.27(2s，9H，OtBu)，2.47-2.57(m在H-DMSO-信号下，1H，β-H)，2.66(dd，J＝13.8，3.7Hz，1H，β-CH)，2.91(dd，J＝13.8，9.4Hz，1H，β-CH)，3.09(dd，J＝13.8，3.1Hz，1H，β-CH)，4.19(td，J＝9.3，4.2Hz，1H，α-CH)，4.57(td，J＝8.8，5.9Hz，1H，α-CH)，5.12(s，2H，OCH2Ph)，6.76(d，J＝9.2Hz，1H，NH)，7.08-7.43(m，15H，Aryl-H)，8.48(d，J＝8.1Hz，1H，NH)。
HR-TOF-MS(方法24)C30H36N2O5[M+H]+实测值503.2566，计算值503.2546. 实施例135A N2-(叔丁氧羰基)-D-苯基丙氨酰-L-苯丙氨酸
根据操作方法5，标题化合物制备自实施例134A的化合物(563.0mg，1.12mmol)。在大气压下，在氢气氛下和在室温下搅拌3小时后，根据反应监测(方法12)获得完全的转化。获得452.2mg(97.9％理论值)的产物。
[α]20Na＝+33.2°(c＝0.57，在CH2Cl2中)。
HPLC(方法12)Rt＝7.64分钟。
HPLC(方法4)Rt＝4.45分钟。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ＝1.19/1.26(2s，9H，OtBu)，2.44-2.56(m在H-DMSO-信号下，1H，β-H)，2.69(dd，J＝14.0，3.8Hz，1H，β-CH)，2.86(dd，J＝14.0，9.5Hz，1H，β-CH)，3.08(dd，J＝14.0，4.6Hz，1H，β-CH)，4.18(td，J＝9.7，3.57Hz，1H，α-CH)，4.48(td，J＝9.3，4.5Hz，1H，α-CH)，6.71(d，J＝8.7Hz，1H，NH)，7.08-7.32(m，10H，Aryl-H)，8.27(d，J＝8.0Hz，1H，NH)，12.77(s br.，1H，COOH)。
HR-TOF-MS(方法24)C23H30N2O5[M+H]+实测值413.2082，计算值413.2076. 实施例136A 2-(三甲基甲硅烷基)乙基N2-[(苄氧基)羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-L-丙氨酸酯
将N-[(苄氧基)羰基]-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-L-丙氨酸(1000.0mg，2.96mmol)[Rane，F.Dinanath等；Tetrahedron Lett.(四面体通讯)；EN；34；20；1993；3201-3204]溶解于二氯甲烷(20ml)，并在-20℃将三甲基甲硅烷基-乙醇(4.2ml，3.5g，29.55mmol，10当量)，DCC(1.22g，5.91mmol，2当量)和DMAP(361.1mg，2.96mmol，1当量)连续加入所述溶液。将所述反应物升温到室温，在该温度搅拌过夜并得到完全的转化。对于后处理，浓缩混合物并将所述残余物置入二乙醚中，随后用水提取两次，用饱和的氯化钠水溶液提取一次。将醚相通过硫酸钠干燥，通过硅胶过滤去除干燥剂并在旋转式蒸发仪上从滤液中去除大部分的所述溶剂。如果沉淀物在浓缩过程中分离出来，如果合适，其可以通过硅胶再次去除。接着，通过色谱法(方法31)将获得的残余物精制(方法31)并获得1.1g(86.4％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法12)Rt＝9.31分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝2.97分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝439(100)[M+H]+. 实施例137A 2-(三甲基甲硅烷基)乙基3-氨基-N2-(苄氧基羰基)-L-丙氨酸酯三氟乙酸盐
如在操作方法1中所述，标题化合物制备自实施例136A的化合物(100.0mg，0.23mmol)。在精制(方法35)后将41mg(39.7％理论值)的产物分离自粗制产物。
HPLC(方法12)Rt＝6.33分钟。
LC-MS(方法23)Rt＝4.83分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝339(15)[M+H]+，311(100)。
实施例138A N2-(苄氧基羰基)-N3-{N2.1-叔丁氧羰基[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酰}-(3R)-3-氨基-L-丙氨酸2-(三甲基甲硅烷基)乙基酯三氟乙酸盐
在氩气保护气氛下，在0℃将八肽(实施例100A，9.0mg，8.04μmol)和示例性化合物137A(17.0mg，39.95μmol，5当量)提供在DMF(900μl)中。随后，将来自NMM存贮溶液(0.91mmol/ml，在DMF中)的碱(9μl，0.8mg，8.04μmol，1当量)，HATU(6.1mg，16.08μmol，2当量)和另外的NMM-溶液(9μl，0.8mg，8.04μmol，1当量)连续加入混合物中。在搅拌15分钟后，最终加入NMM存贮溶液(22μl，2mg，20.10μmol，2.5当量)，将所述混合物缓慢升温到室温并在该温度搅拌过夜。将所述溶液通过制备HPLC预纯化(方法36)并通过凝胶色谱法(方法45，洗脱剂甲醇以及0.25％冰醋酸)精制。获得8.0mg(69.1％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法12)Rt＝7.21分钟。
LC-MS(方法23)Rt＝5.30分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝1325(75)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1323(100)[M-H]-. 实施例139A N2-(苄氧基羰基)-N3-{N2.1-叔丁氧羰基[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酰}-(3R)-3-氨基-L-丙氨酸三氟乙酸盐
在900μl的THF中提供实施例138A的化合物(7.5mg，5.21μmol)并加入4份在THF中的1M TBAF溶液(26μl，6.8mg，26.05μmol，5当量)，在加入15当量的碱以后，还加入分子筛(

)。将所述反应物在室温搅拌1小时，并通过HPLC监测(方法12)确定完全的转化。对于后处理，将所述混合物用冰醋酸中和，随后在真空中浓缩并通过制备HPLC(方法29)进行色谱法。获得6.2mg(88.9％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法12)Rt＝6.24分钟。
LC-MS(方法23)Rt＝4.88分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝1224(80)[M+H]+，242(100)；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1223(100)[M-H]-. 实施例140A N2-(苄氧基羰基)-N3-{N2.1-叔丁氧羰基[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酰}-(3R)-3-氨基-L-丙氨酸五氟苯基酯三氟乙酸盐
在氩气保护气氛下，将实施例139A的化合物(3.1mg，2.31μmol)提供在二氯甲烷(1ml)中，并加入五氟苯酚(4.3mg，23.14μmol，10当量)。将所述反应物冷却到-20℃并最终加入EDC(1.0mg，5.32μmol，2.3当量)，将所述混合物升温到室温并在该温度搅拌过夜。对于后处理，将所述溶剂完全去除并将所述残余物冷冻干燥。将所述标题化合物进一步作为粗制产物反应，并假定定量产率。
HPLC(方法12)Rt＝7.18分钟。
LC-MS(方法23)Rt＝5.56分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝1392(80)[M+H]+. 实施例141A N2-(苄氧基羰基)-N3-{[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酰}-(3R)-3-氨基-L-丙氨酸五氟苯基酯双盐酸盐
根据操作方法3，标题化合物制备自实施例140A(3.0mg，1.99μmol)的化合物。在0℃，加入盐酸后，在30分钟后通过HPLC监测(方法12)确定完全的转化。获得标题化合物，其为粗制产物，假定其定量产率。
LC-MS(方法23)Rt＝4.47分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝1292(3)[M+H]+，646(100)[M+2H]2+，MS(ESIneg.)m/z(％)＝1290(40)[M-H]-，1106(100)。
实施例142A N2.1-(苄氧基羰基)-[(3R)-3-氨基-L-丙氨酰)]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺盐酸盐
在氩气保护气氛下，将实施例141A的化合物(3.0mg，2.20μmol)提供在氯仿(20ml)中。将三乙胺(22μl，15.8mg，131.94μmol)溶解于氯仿(25ml)并在1小时过程中逐滴加入溶液。在添加结束后，将所述反应物在室温搅拌过夜。对于后处理，将所述混合物用TFA中和，随后在真空中浓缩并通过凝胶色谱法(方法45，洗脱剂甲醇以及0.25％冰醋酸)进行预先纯化。在通过制备HPLC精制后(分离相Xterra 10mm，洗脱剂0.1％TFA，乙腈-水梯度)分离0.4mg(15.9％理论值)的产物。
HPLC(方法12)Rt＝5.96分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.72分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝1108(48)[M+H]+，132(100)；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1106(100)[M-H]-. 实施例143A [(3R)-3-氨基-L-丙氨酰)]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺双盐酸盐
如在操作方法4中所述，标题化合物(0.4mg，0.35μmol)制备自实施例142A的化合物。在大气压和在室温进行氢化6小时后，获得完全的转化。获得0.3mg(81.9％理论值)的标题化合物，其为粗制产物，将其进一步反应。
实施例144A N2.1-(叔丁氧羰基)-[D-苯基丙氨酰]-[L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-丙氨酰)]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺三氟乙酸盐
在氩气保护气氛下，将去保护的胺(实施例143A，0.3mg，0.29μmol)和二肽(1.2mg，2.86μmol，10当量)在DMF(100μl)中提供，并将所述溶液冷却到0℃。加入来自NMM贮存溶液(90.9μmol/ml，在DMF中)的碱(16μl，147μg，1.43μmol，5当量)，HATU(1.1mg，2.95μmol，10.3当量)和另外的NMM存贮溶液(16μl，147μg，1.43μmol，5当量)，并将所述反应物搅拌15分钟。最终，再次将碱(40μl，367μg，3.62μmol，12.5当量)加入到混合物中，将其置于室温并同时搅拌。在该温度持续搅拌过夜。对于后处理，将所述混合物在真空中浓缩并通过凝胶色谱法(方法45，洗脱剂甲醇)进行精制。获得0.3mg(70.6％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法12)Rt＝7.80分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝2.17分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1368(5)[M+H]+，634(100)；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1367(30)[M-H]-，683(100)[M-2H]2-. 实施例145A 聚合物结合的[N2-芴基甲氧基羰基-L-异亮氨酰]-O3-(叔丁基)-L-丝氨酸
如操作方法7中所述将Fmoc保护基从聚合物(实施例41A，500mg，0.75mmol)中去除。将结合于树脂的去保护的氨基酸随后与N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-异亮氨酸(1.05g，2.98mmol，4当量)，DIEA(0.78ml，577mg，4.47mmol，6当量)和TBTU(957mg，2.98mmol，4当量)反应过夜以得到Fmoc-保护的二肽。聚合物的后处理以类似于操作方法7的方式进行。在样品去除后证实相应的侧链-保护的二肽。
LC-MS(方法21)Rt＝2.68分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝497.5(60)[M+H]+，441.4(100)；MS(ESIneg)m/z(％)＝495.5(5)[M-H]-，273.4(100)。
实施例146A 聚合物结合的[(N2-(9H-芴-9-基甲氧基)羰基)-N5-(亚氨基{[(2，2，5，7，8-五甲基-3，4-二氢-2H-色烯-6-基)磺酰基]氨基}甲基)-D-鸟氨酰]-L-异亮氨酰-O3-(叔丁基)-L-丝氨酸
如操作方法7中所述，将Fmoc保护基从聚合物(实施例145A，500mg，0.75mmol)中去除。将结合于树脂的去保护的氨基酸随后与(N2-(9H-芴-9-基甲氧基)羰基)-N5-(亚氨基{[(2，2，5，7，8-五甲基-3，4-二氢-2H-色烯-6-基)磺酰基]氨基}甲基)-D-鸟氨酸(740mg，1.12mmol，1.5当量)，DIEA(0.39ml，289mg，2.24mmol，3当量)和TBTU(318mg，0.99mmol，2当量)反应过夜以得到Fmoc-保护的三肽。聚合物的后处理以类似于操作方法7的方式进行。在样品去除后，证实相应的侧链-保护的二肽。
LC-MS(方法21)Rt＝2.89分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝919.5(100)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝917.7(100)[M-H]-. 实施例147A 聚合物结合的[(N2-(9H-芴-9-基甲氧基)羰基)-L-亮氨酰]-[N5-(亚氨基-{[(2，2，5，7，8-五甲基-3，4-二氢-2H-色烯-6-基)磺酰基]氨基}甲基)-D-鸟氨酰]-L-异亮氨酰-O3-(叔丁基)-L-丝氨酸
如操作方法7中所述，将Fmoc保护基从聚合物中去除(实施例146A，500mg，0.75mmol)。将结合于树脂的去保护的氨基酸随后与N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-亮氨酸(1.05g，2.98mmol，4当量)，DIEA(0.78ml，577mg，4.47mmol，6当量)和TBTU(956mg，2.98mmol，4当量)反应过夜以得到Fmoc-保护的四肽。聚合物的后处理以类似于操作方法7的方式进行。在样品去除后证实相应的侧链-保护的二肽。
LC-MS(方法21)Rt＝3.27分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1033.3(100)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝1032.2(100)[M-H]-. 实施例148A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-[N5-(亚氨基{[(2，2，5，7，8-五甲基-3，4-二氢-2H-色烯-6-基)磺酰基]氨基}甲基)-D-鸟氨酰]}-L-异亮氨酰-O3-(叔丁基)-L-丝氨酸
如在操作方法7中所述，将Fmoc保护基从聚合物(实施例147A，500mg，0.75mmol)中去除。将结合于树脂的去保护的氨基酸随后与(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酸(276mg，1.12mmol，1.5当量)，DIEA(0.26ml，193mg，1.49mmol，2当量)和TBTU(359mg，1.12mmol，1.5当量)反应过夜以得到Boc-保护的五肽。接着，将其用DMF，THF并最终用二氯甲烷洗涤，并用冰醋酸，三氟乙醇和二氯甲烷(1+1+3)的混合物从树脂中去除。通过色谱法纯化粗制反应产物。以145mg(19％理论值)的产率分离标题化合物。
LC-MS(方法21)Rt＝3.17分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1040.0(100)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝1038.0(100)[M-H]-. 实施例149A L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
根据操作方法2，将500mg(1.69mmol)的N-叔丁氧羰基-L-丝氨酸苄酯在5.50ml的试剂溶液中反应。将所述产物进一步反应，不经过进一步纯化。产率505mg(1.63mmol，96％理论值)。
HPLC(方法3)Rt＝3.10分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝1.94分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝196.0(100)[M+H]+. 实施例150A [N2-(叔丁氧羰基)-L-丝氨酰]-L-丝氨酸苄酯
将实施例149A的化合物(500mg，1.62mmol)和N-叔丁氧羰基-L-丝氨酸(332mg，1.62mmol，1当量)溶解于二氯甲烷(8.2ml)并冷却到0℃。加入HATU(922mg，2.43mmol，1.5当量)并接着在15分钟的过程中，逐滴加入N，N-二异丙基乙基胺(1.41ml，8.08mmol，5当量)在二氯甲烷(5ml)中的溶液。接着，将所述混合物在室温搅拌72小时，随后用碳酸氢钠洗涤。将有机相干燥并浓缩。将所述粗制产物通过色谱法纯化(方法34)。获得包含产物的级分并进行冷冻干燥。产率308mg(0.81mmol，50％理论值)，其为无色的固体。
HPLC(方法4)Rt＝3.81分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.98分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝283.5(100)[M-Boc+H]+；383.6(30)[M+H]+. 实施例151A [N2-(叔丁氧羰基)-3-(3-吡啶基)-L-丙氨酰]-L-丝氨酸苄酯
根据实施例150A的化合物的制备方法，从实施例149A的化合物(780mg，2.52mmol)和N2-叔丁氧羰基-3-(3-吡啶基)-L-丙氨酸(707mg，2.52mmol)，获得780mg(69％理论值)产率的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.61分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.82分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝444.2(100)，[M+H]+. 实施例152A [N2-(叔丁氧羰基)-L-苯基丙氨酰]-L-丝氨酸苄酯
根据实施例150A的化合物的制备方法，从实施例149A的化合物(350mg，1.13mmol)和N2-叔丁氧羰基-L-苯丙氨酸(300mg，1.13mmol)获得275mg(55％理论值)产率的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝4.50分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝2.23分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝443.2(100)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝441(50)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C24H31N2O6计算值443.2177，实测值443.2180[M+H]+. 实施例153A [N2-(叔丁氧羰基)-L-苏氨酰]-O3-叔丁基-L-丝氨酸苄酯
根据实施例150A的化合物的制备方法，从O3-(叔丁基)-L-丝氨酸苄酯(320mg，0.88mmol)和N2-叔丁氧羰基苏氨酸(192mg，0.88mmol)获得196mg(49％理论值)的产率的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝4.73分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝2.56分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝453.0(100)[M+H]+. 实施例154A [N2-(叔丁氧羰基)-L-别苏氨酰]-L-丝氨酸苄酯
在0℃，将L-丝氨酸苄酯(314mg，1.02mmol)和NMM(335μl，3.05mmol，3当量)提供在DNF中。接着，加入(N2-叔丁氧羰基)别苏氨酸(223mg，1.02mmol，1当量)，随后加入TCTU(506mg，1.42mmol，1.4当量)。将所述混合物搅拌过夜，并接着通过色谱法根据方法45进行后处理。获得298mg(73％理论值)的产率的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.89分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.91分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝397.0(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C19H29N2O7计算值397.1970，实测值397.1971[M+H]+. 实施例155A [N2-(叔丁氧羰基)-L-丙氨酰]-L-丝氨酸苄酯
根据实施例150A的化合物的制备方法，从L-丝氨酸苄酯(300mg，0.97mmol)和N2-叔丁氧羰基丙氨酸(220mg，1.16mmol)获得277mg(78％理论值)的产率的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝4.05分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.81分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝367.2(50)[M+H]+. 实施例156A [N2-(叔丁氧羰基)-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸苄酯
根据实施例150A的化合物的制备方法，从L-丝氨酸苄酯(610mg，1.97mmol)和N2-叔丁氧羰基天冬酰胺(458mg，1.97mmol，1当量)以313mg(39％理论值)的产率获得标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.70分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.78分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝410.1(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C19H27N3O7计算值410.1922，实测值410.1914[M+H]+. 实施例157A L-丝氨酰-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
根据操作方法2，将实施例150A的化合物(290mg，0.76mmol)进行反应。获得451mg(定量)的粗制标题化合物，并在不经过进一步纯化的情况下进一步反应。
LC-MS(方法22)Rt＝2.16分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝283.0(100)[M+H]+. 实施例158A [3-(3-吡啶基)-L-丙氨酰]-L-丝氨酸苄酯双三氟乙酸盐
将实施例151A的化合物(460mg，0.99mmol)，根据操作方法2进行反应。获得565mg(定量)的粗制标题化合物，并在不经过进一步纯化的情况下反应。
HPLC(方法5)Rt＝3.03分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.23分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝344.2(30)[M+H]+. 实施例159A L-苯基丙氨酰-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
将实施例152A的化合物(275mg，0.62mmol)，根据操作方法2反应。获得285mg(93％理论值)的粗制标题化合物并在不经过进一步纯化的情况下进一步反应。
HPLC(方法6)Rt＝3.33分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.14分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝343.3(100)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝341.3(100)[M-H]-. 实施例160A L-苏氨酰-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
将实施例153A的化合物(195mg，0.43mmol)，根据操作方法2反应。获得235mg(定量)的粗制标题化合物，并在不经过进一步纯化的情况下反应。
HPLC(方法5)Rt＝3.20分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.32分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝297(100)[M+H]+. 实施例161A L-别苏氨酰-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
根据操作方法2，使实施例154A的化合物(286mg，0.72mmol)反应。获得326mg(定量)的粗制标题化合物，并在不经过进一步纯化的情况进一步反应。
HPLC(方法5)Rt＝3.16分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.38分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝297(15)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C14H21N2O5计算值297.1445，实测值297.1436[M+H]+. 实施例162A L-丙氨酰-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
将实施例155A的化合物(277mg，0.76mmol)，根据操作方法2反应。获得285mg(定量)的粗制标题化合物并在不经过进一步纯化的情况进一步反应。
HPLC(方法5)Rt＝3.20分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.35分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝267(100)[M+H]+. 实施例163A L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
将实施例156A的化合物(313mg，0.76mmol)，根据操作方法2反应。获得428mg(定量)的粗制标题化合物并在不经过进一步纯化的情况进一步反应。
HPLC(方法6)Rt＝2.96分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.07分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝310(100)[M+H]+. 实施例164A [N2-(叔丁氧羰基)甘氨酰]-L-丝氨酰-L-丝氨酸苄酯
将实施例157A的化合物(360mg，0.85mmol)和N-叔丁氧羰基甘氨酸(149mg，0.85mmol，1当量)溶解于二氯甲烷(4.4ml)并冷却到0℃。加入HATU(485mg，1.28mmol，1.5当量)并接着在15分钟的过程中，逐滴加入N，N-二异丙基乙基胺(0.74ml，4.26mmol，5当量)在二氯甲烷(3ml)中的溶液。接着，将所述混合物在室温搅拌24小时，随后用碳酸氢钠洗涤，干燥有机相(硫酸钠)并浓缩。将所述粗制产物通过色谱法纯化(方法34)。合并包含产物的级分并进行冷冻干燥。产率220mg(0.50mmol，59％理论值)，其为无色的固体。
HPLC(方法3)Rt＝3.70分钟。
LC-MS(方法1)Rt＝1.93分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝440.7(100)。
实施例165A [N2-(叔丁氧羰基)甘氨酰]-[3-(3-吡啶基)-L-丙氨酰]-L-丝氨酸苄酯
根据实施例164A的化合物的制备方法，用DMF(1.8ml)替代二氯甲烷作为溶剂，从实施例158A的化合物(565mg，0.95mmol)和N-叔丁氧羰基甘氨酸(166mg，0.95mmol，1当量)获得405mg(85％理论值)产率的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.52分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.49分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝501.4(100)[M+H]+. 实施例166A [N2-(叔丁氧羰基)甘氨酰]-L-苯基丙氨酰-L-丝氨酸苄酯
根据实施例164A的化合物的制备方法，用DMF(2.0ml)替代二氯甲烷作为溶剂，从实施例159A(285mg，0.58mmol)和N-叔丁氧羰基甘氨酸(122mg，0.70mmol，1当量)获得237mg(82％理论值)产率的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝4.28分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝2.29分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝500.2(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C26H34N3O7计算值500.2392，实测值500.2399[M+H]+. 实施例167A [N2-叔丁氧羰基-甘氨酰]-L-苏氨酰-L-丝氨酸苄酯
根据实施例164A的化合物的制备方法，用DMF(1.8ml)替代二氯甲烷作为溶剂从实施例160A的化合物(173mg，0.49mmol)和N2-叔丁氧羰基甘氨酸(103mg，0.59mmol，1.2当量)获得84mg(34％理论值)产率的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝4.45分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝2.38分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝510.2(100)[M+H]+. 实施例168A [N2-叔丁氧羰基-甘氨酰]-L-别苏氨酰-L-丝氨酸苄酯
在0℃，将实施例161A的化合物(295mg，0.72mmol)和N2-叔丁氧羰基甘氨酸(126mg，0.72mmol，1.0当量)提供在DMF中。接着，加入TCTU(329mg，0.87mmol，1.2当量)和NMM(238μl，2.16mmol，3当量)。将所述混合物在室温搅拌过夜并接着通过根据方法45的色谱法进行后处理。根据改进的方法32(梯度0-5分钟10％B，5.01-35分钟斜度85％B，35.01-40分钟85％B)，合并包含产物的级分并通过色谱法纯化。获得170mg(52％理论值)的产率的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.73分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.82分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝454.1(80)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C21H32N3O8计算值454.2184，实测值454.2177[M+H]+. 实施例169A [N2-叔丁氧羰基-甘氨酰]-L-丙氨酰-L-丝氨酸苄酯
根据实施例164A的化合物的制备方法，用DMF(1.8ml)替代二氯甲烷作为溶剂，从实施例162A(285mg，0.75mmol)的化合物和N2-叔丁氧羰基甘氨酸(157mg，0.90mmol，1.2当量)获得产率172mg(43％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.83分钟。
LC-MS(方法21)Rt＝1.85分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝424.4(100)[M+H]+. 实施例170A [N2-(叔丁氧羰基)-甘氨酰]-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸苄酯
根据实施例164A的化合物的制备方法，用DMF(2.0ml)替代二氯甲烷作为溶剂，从实施例163A的化合物(428mg，0.80mmol)和N2-叔丁氧羰基甘氨酸(167mg，0.96mmol，1.2当量)获得208mg(56％理论值)产率的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝3.60分钟。
LC-MS(方法21)Rt＝1.75分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝467.0(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C21H31N4O8计算值467.2137，实测值467.2142[M+H]+. 实施例171A 甘氨酰-L-丝氨酰-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
实施例164A的化合物(88mg，0.20mmol)在1.5ml的试剂溶液中，根据操作方法2反应。将粗制产物进行进一步的反应，而无需进一步纯化。产率118mg(定量)。
HPLC(方法3)Rt＝3.08分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.56分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝340.0(100)[M+H]+. 实施例172A [甘氨酰]-[3-(3-吡啶基)-L-丙氨酰]-L-丝氨酸苄酯双三氟乙酸盐
将实施例165A的化合物(60mg，0.12mmol)在1.5ml的试剂溶液中根据操作方法2反应。将所述粗制产物进行进一步的反应，而无需进一步纯化。产率81mg(定量) HPLC(方法5)Rt＝3.05分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.36分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝401.0(40)[M+H]+. 实施例173A 甘氨酰-L-苯基丙氨酰-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
将实施例166A的化合物(63mg，0.13mmol)在1.0ml的试剂溶液中根据操作方法2反应。将粗制产物进行进一步的反应，而无需进一步纯化。产率65mg(96％理论值)。
HPLC(方法6)Rt＝3.35分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝1.26分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝400.1(90)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝398.1(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C21H26N3O5计算值400.1867，实测值400.1869[M+H]+. 实施例174A 甘氨酰-L-苏氨酰-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
将实施例167A的化合物(82mg，0.16mmol)在1.5ml的试剂溶液中根据操作方法2反应。将所述粗制产物通过色谱法纯化(方法44)。产率43mg(76％理论值)。
HPLC(方法5)Rt＝3.16分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.35分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝354(50)[M+H]+. 实施例175A 甘氨酰-L-别苏氨酰-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
将实施例168A的化合物(169mg，0.37mmol)在1.5ml的试剂溶液中根据操作方法2反应。将所述粗制产物(194mg，约定量)进行进一步的反应，而无需进一步纯化。
HPLC(方法5)Rt＝3.16分钟。
LC-MS(方法21)Rt＝0.78分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝354.3(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C16H24N4O6计算值354.1660，实测值354.1648[M+H]+. 实施例176A 甘氨酰-L-丙氨酰-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
将实施例169A的化合物(172mg，0.32mmol)在3.0ml的试剂溶液中根据操作方法2反应。将所述粗制产物进行反应而不经过进一步的纯化。产率175mg(99％理论值)。
HPLC(方法5)Rt＝3.20分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.41分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝324(40)[M+H]+. 实施例177A 甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
将实施例170A的化合物(60mg，0.13mmol)在1.0ml的试剂溶液中根据操作方法2反应。将所述粗制产物进行反应，而不经过进一步的纯化。产率62mg(定量)。
HPLC(方法6)Rt＝2.89分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.14分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝367(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C16H23N4O6计算值367.1613，实测值367.1609[M+H]+. 实施例178A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-丝氨酰-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
将实施例32A的化合物(75mg，38μmol)和171A(26mg，45μmol，1.2当量)溶解于DMF(950μl)，并将所述溶液冷却到-20℃。加入4-甲基吗啉(29μl，263μmol，7当量)和HATU(23mg，60μmol，1.6当量)并将所述混合物在室温搅拌16小时。接着将所述完全的混合物置于HPLC柱上并根据方法33通过色谱法纯化。合并包含产物的级分并进行冷冻干燥。获得15mg(34％理论值)的标题化合物，其为无色的固体。
HPLC(方法5)Rt＝3.89分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.81分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1053(90)[M+H]+. 实施例179A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[3-(3-吡啶基)-L-丙氨酰]-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
根据实施例178A的化合物的制备方法，从实施例32A的化合物(80mg，83μmol)和实施例172A的化合物(79mg，125μmol，1.5当量)获得标题化合物，其产率为34mg(33％理论值)。
HPLC(方法5)Rt＝3.75分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.52分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝557.6(100)[M+2H]2+；1113.8(10)[M+H]+. 实施例180A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-苯基丙氨酰-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
根据实施例178A的化合物的制备方法，从实施例32A的化合物(82mg，97μmol)和实施例173A的化合物(65mg，126μmol，1.3当量)获得产率为39mg(33％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝3.96分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.87分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝506.8(90)[M+2H]2+；1112.5(100)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝1110.5(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C54H86N11O14计算值1112.6351，实测值1112.6343[M+H]+. 实施例181A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-苏氨酰-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
根据实施例178A的化合物的制备方法，从实施例32A的化合物(67mg，80μmol)和实施例174A的化合物(31mg，88μmol，1.1当量)获得产率为21mg(20％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.89分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.71分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1066.7(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C49H84N11O15计算值1066.6143，实测值1066.6130[M+H]+. 实施例182A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-别苏氨酰-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
将实施例32A的化合物(57mg，59μmol)和实施例175A的化合物(48mg，71μmol，1.2当量)，根据实施例178A的化合物的制备方法反应。在Sephadex LH20(方法45)上进行后处理，随后根据改进的方法44(梯度0-5分钟5％ B，斜度，30-35分钟75％ B，35.01-40分钟75％ B)进行色谱法。获得产率为65mg(93％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝3.70分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.70分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝483.9(100)[M-Boc+2H]2+，1066.6(70)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C49H84N11O15计算值1066.6143，实测值1066.6134[M+H]+. 实施例183A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-丙氨酰-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
根据实施例178A的化合物的制备方法，并在通过色谱法进行另外的纯化后(Kromasil RP-185μm，

250 x 20mm；洗脱剂A水+0.05％TFA，洗脱剂B乙腈+0.05％ TFA流速10ml/分钟；60％ A，40％B等度)，从实施例32A的化合物(80mg，84μmol)和实施例176A的化合物(60mg，109μmol，1.3当量)获得产率为48mg(50％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.99分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.70分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1036.6(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C48H81N11O14计算值1036.6038，实测值1036.6027[M+H]+. 实施例184A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-[N5-(亚氨基-{[(2，2，5，7，8-五甲基-3，4-二氢-2H-色烯-6-基)磺酰基]氨基}甲基)-D-鸟氨酰]}-L-异亮氨酰-[O3-(叔丁基)-L-丝氨酰]-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸苄酯
根据实施例178A的化合物的制备方法并在通过色谱法进行另外的纯化后(Kromasil RP-185μm，

250 x 20mm；洗脱剂A水+0.05％TFA，洗脱剂B乙腈+0.05％ TFA流速10ml/分钟；60％ A，40％ B等度)，从实施例148A的化合物(87mg，84μmol)和实施例36A的化合物(50mg，101μmol，1.2当量)获得产率为62mg(49％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝4.40分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝2.97分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1403.7(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C66H107N12O19S计算值1403.7491，实测值1403.7517[M+H]+. 实施例185A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
根据对于实施例178A的化合物的制备方法，从实施例32A的化合物(100mg，118μmol)和实施例177A的化合物(62mg，130μmol，1.1当量)获得产率为48mg(31％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝3.66分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝1.66分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝490.3(100)[M-Boc+2H]2+，1079.6(80)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C49H83N12O15计算值1079.6096，实测值1079.6090[M+H]+. 实施例186A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-丝氨酰-L-丝氨酸三氟乙酸盐
在存在5mg的10％披钯碳的情况下，在室温在大气压下将实施例178A的化合物(21mg，18μmol)在750μl的乙酸中进行氢化2小时。过滤所述混合物以去除催化剂并在油泵真空下将其干燥到恒重。获得定量产率(20mg)的标题化合物并且不经过纯化进行进一步反应。
HPLC(方法5)Rt＝3.56分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.72分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝963.0(90)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C41H76N11O15计算值962.5517，实测值962.5537[M+H]+. 实施例187A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[3-(3-吡啶基)-L-丙氨酰]-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
根据实施例186A的化合物的制备方法，将实施例179A的化合物(55mg，45μmol)进行氢化。在浓缩粗制产物后，将其根据操作方法2直接进行Boc去除并再次浓缩。获得41mg(88％理论值)的标题化合物并在不经过进一步纯化的情况进一步反应。
HPLC(方法5)Rt＝3.56分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.19分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝462(40)[M+H]+；(ESIneg)m/z(％)＝[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C41H71N12O12计算值923.5309，实测值923.5321[M+H]+. 实施例188A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-苯基丙氨酰-L-丝氨酸三氟乙酸盐
将实施例180A的化合物(39mg，32μmol)，根据制备实施例186A的化合物的制备方法进行氢化。获得36mg(定量)的标题化合物并在不经过进一步纯化的情况进一步反应。
HPLC(方法6)Rt＝3.55分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.75分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝462(100)[M-Boc+2H]2+，1022.1(10)[M+H]+；(ESIneg)m/z(％)＝1020.8[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C47H80N11O14计算值1022.5881，实测值1022.5876[M+H]+. 实施例189A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-苏氨酰-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
将实施例181A的化合物(21mg，18μmol)，根据实施例186A的化合物的制备方法进行氢化。获得18mg(98％理论值)的标题化合物，其为无色的固体。
HPLC(方法5)Rt＝3.58分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.58分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝976.6(80)[M+H]+. 实施例190A [(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-别苏氨酰-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
将实施例197A的化合物(44mg，37μmol)溶解于甲醇(5.0ml)，加入10％ Pd/C(20mg)并将所述混合物在室温在大气压下氢化2小时。过滤所述混合物以除去催化剂并将所述滤液进行浓缩。获得42mg(定量)的粗制标题化合物并进行进一步的反应，而不经过纯化。
HPLC(方法5)Rt＝3.00分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.32分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝439(100)[M+2H]2+；MS(ESIneg)m/z(％)＝875(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C37H69N11O13计算值876.5150，实测值876.5146[M+H]+. 实施例191A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-丙氨酰-L-丝氨酸三氟乙酸盐
将实施例183A的化合物(47mg，41μmol)，根据实施例186A的化合物的制备方法进行氢化。获得43mg(99％理论值)的标题化合物，其为固体。
HPLC(方法5)Rt＝3.62分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.58分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝946.5(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C41H76N11O14计算值946.5568，实测值946.5569[M+H]+. 实施例192A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-[N5-(亚氨基{[(2，2，5，7，8-五甲基-3，4-二氢-2H-色烯-6-基)磺酰基]氨基}甲基)-D-鸟氨酰]}-L-异亮氨酰-[O3-(叔丁基)-L-丝氨酰]-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸
将实施例184A的化合物(62mg，41μmol)，根据实施例186A的化合物的制备方法进行氢化。获得56mg(96％理论值)的标题化合物，其为固体。
HPLC(方法5)Rt＝4.57分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝3.06分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1313.7(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C59H101N12O19S计算值1313.7022，实测值1313.7020[M+H]+. 实施例193A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸三氟乙酸盐
将实施例185A的化合物(48mg，40μmol)，根据实施例186A的化合物的制备方法进行氢化。获得42mg(99％理论值)的标题化合物，其为无色的固体。
HPLC(方法5)Rt＝3.40分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.57分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝445.3(100)[M+2H]2+，9989.6(70)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C42H77N12O15计算值989.5626，实测值989.5619[M+H]+. 实施例194A [(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-丝氨酰-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
将实施例186A的化合物(20mg，18μmol)，根据操作方法2反应。获得20mg(99％理论值)的标题化合物，其为固体。
HPLC(方法5)Rt＝2.96分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.25分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝432(100)[M+2H]2+，862.6(1)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C36H68N11O13计算值862.4993，实测值862.5027[M+H]+. 实施例195A [(3R)3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-苯基丙氨酰-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
将实施例188A的化合物(36mg，32μmol)，根据操作方法2反应。获得36mg(99％理论值)的标题化合物，其为固体。
HPLC(方法6)Rt＝2.98分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.11分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝461.8(100)[M+2H]2+，922.5(10)[M+H]+；MS(ESIpos)m/z(％)＝920.5(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C42H72N11O12计算值922.5357，实测值922.5357[M+H]+. 实施例196A [(3-R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-苏氨酰-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
将实施例189A的化合物(18mg，17μmol)，根据操作方法2反应。获得18mg(94％理论值)的标题化合物，其为固体。
HPLC(方法5)Rt＝2.99分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.47分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝439(100)[M+2H]2+. HR-TOF-MS(方法24)C37H70N11O13计算值876.5150，实测值876.5161[M+H]+. 实施例197A [(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-别苏氨酰-L-丝氨酸苄酯双三氟乙酸盐
将实施例182A的化合物(57mg，48μmol)，根据操作方法2反应。在根据改进的方法44(梯度0-5分钟5％B，斜度，30-35分钟60％B，35.01-40分钟60％B)，通过色谱法进行纯化后，获得45mg(78％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.40分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.12分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝483.9(100)[M+2H]2+，966.6(10)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C44H75N11O13计算值966.5619，实测值966.5643[M+H]+. 实施例198A [(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-丙氨酰-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
将实施例191A的化合物(43mg，38μmol)在2ml的试剂溶液中根据操作方法2反应。获得45mg的粗制标题化合物，其为固体。
HPLC(方法5)Rt＝2.99分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.32分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝424(100)[M+2H]2+. HR-TOF-MS(方法24)C36H67N11O12计算值846.5044，实测值846.5029[M+H]+. 实施例199A [(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-丝氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸酯双三氟乙酸盐
将实施例192A的化合物(56mg，39μmol)，11μl的水和11μl的三异丙基硅烷置入4.0ml的TFA中。在2小时后，将所述混合物浓缩并通过色谱法纯化(方法45)。获得40mg的标题化合物(90％理论值)，其为固体。
HPLC(方法5)Rt＝2.96分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.30分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝446(100)[M+2H]2+. 实施例200A [(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
将实施例193A的化合物(42mg，38μmol)在2ml的试剂溶液中根据操作方法2反应。获得42mg(99％理论值)的粗制标题化合物，其为固体。
HPLC(方法5)Rt＝2.77分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.16分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝446(100)[M+2H]2+，890(20)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝888(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C37H69N12O13计算值889.5102，实测值889.5095[M+H]+. 实施例201A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-{(叔丁氧羰基)氨基}-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-丝氨酰-L-丝氨酸三氟乙酸盐
在0℃，将实施例194A的化合物(19mg，17μmol)和实施例17A的化合物(12mg，19μmol，1.1当量)溶解于DMF(530μl)，并加入DIEA(15μl，87μmol，5当量)。将反应混合物进一步搅拌过夜，在此过程中将其缓慢升温到室温。将所述混合物置入乙腈中并通过色谱法纯化(方法44)。产率14mg，(10μmol 59％理论值)的标题化合物，其为固体。
HPLC(方法5)Rt＝3.94分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.93分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1259.1(50)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C58H92N13O18计算值1258.6678，实测值1258.6675[M+H]+. 实施例202A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-{(叔丁氧羰基)氨基}-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[3-(3-吡啶基)-L-丙氨酰]-L-丝氨酸三氟乙酸盐
根据实施例201A的化合物的制备方法，将实施例187A的化合物(41mg，36μmol)与实施例17A的化合物(23mg，39μmol，1.1当量)进行反应。获得37mg(73％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.87分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.72分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝660.5(100)[M+2H]2+，1319.7(5)[M+H]+；(ESIneg)m/z(％)＝1317.5(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C63H95N14O17计算值1319.6995，实测值1319.6978[M+H]+. 实施例203A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-{(叔丁氧羰基)氨基}-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-苯基丙氨酰-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
根据实施例201A的化合物的制备方法，将实施例195A的化合物(36mg，31μmol)与实施例17A的化合物(22mg，39μmol，1.2当量)进行反应。获得34mg(70％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝3.93分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝2.01分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝610.1(100)[M-Boc+2H]2+，1318.8(20)[M+H]+；(ESIneg)m/z(％)＝1316.7(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C64H96N13O17计算值1318.7042，实测值1318.7036[M+H]+. 实施例204A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-{(叔丁氧羰基)氨基}-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-苏氨酰-L-丝氨酸三氟乙酸盐
根据实施例201A的化合物的制备方法，将实施例196A的化合物(18mg，17μmol)与实施例17A的化合物(12mg，21μmol，1.1当量)进行反应。在根据方法45纯化后，分离17mg(76％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.96分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.97分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1272.8(40)[M+H]+ HR-TOF-MS(方法24)C59H94N13O18计算值1272.6835，实测值1272.6853[M+H]+. 实施例205A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-{(叔丁氧羰基)氨基}-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-别苏氨酰-L-丝氨酸酯三氟乙酸盐
根据实施例201A的化合物的制备方法，使实施例190A的化合物(44mg，40μmol)与实施例17A的化合物(25mg，44μmol，1.1当量)进行反应。在根据方法45纯化后，分离50mg(90％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.80分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.98分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1272.7(20)[M+H]+ HR-TOF-MS(方法24)C59H94N13O18计算值1272.6835，实测值1272.6846[M+H]+. 实施例206A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-{(叔丁氧羰基)氨基}-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-丙氨酰-L-丝氨酸三氟乙酸盐
根据实施例201A的化合物的制备方法，使实施例198A的化合物(45mg，42μmol)与实施例17A的化合物(32mg，54μmol，1.3当量)进行反应。在根据方法45纯化后，分离38mg(67％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.99分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝2.12分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝571.9(90)[M-Boc+2H]2+；1242.7(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C58H92N13O17计算值1242.6729，实测值1242.6691[M+H]+. 实施例207A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-{(叔丁氧羰基)氨基}-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-丝氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸酯三氟乙酸盐
根据实施例201A的化合物的制备方法，使实施例199A的化合物(39mg，35μmol)与实施例17A的化合物(24mg，42μmol，1.2当量)进行反应。在根据方法45纯化后，分离42mg(80％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.93分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.93分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝594.4(100)[M-Boc+2H]2+；1287.7(30)[M+H]+. 实施例208A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-{(叔丁氧羰基)氨基}-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸三氟乙酸盐
根据实施例201A的化合物的制备方法，使实施例200A的化合物(42mg，38μmol)与实施例17A的化合物(26mg，45μmol，1.2当量)进行反应。在根据方法45纯化后，分离46mg(81％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.78分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.91分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1285.7(40)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C59H93N14O18计算值1285.6787，实测值1285.6777[M+H]+. 实施例209A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基}-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-丝氨酰-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
根据操作方法2，使实施例201A的化合物(14mg，10μmol)与0.5ml的试剂溶液反应。在不经过进一步纯化的情况下，获得13mg(9.3μmol，95％理论值)的标题化合物，其为固体。
HPLC(方法5)Rt＝3.44分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.19分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝580(100)[M+2H]2+，1158.6(5)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C53H84N13O16计算值1158.6154，实测值1158.6183[M+H]+. 实施例210A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基}-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[3-(3-吡啶基)-L-丙氨酰]-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
根据操作方法2使实施例202A的化合物(37mg，26μmol)与0.5ml的试剂溶液反应。在不经过进一步纯化的情况下，获得46mg的粗制标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.39分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.67分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝610(20)[M+2H]2+；(ESInegm/z(％)＝1218(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C58H87N14O15计算值1219.6470，实测值1219.6472[M+H]+. 实施例211A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基}-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-苯基丙氨酰-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
根据操作方法2，使实施例203A的化合物(34mg，22μmol)与2.0ml的试剂溶液反应。在不经过进一步纯化的情况下，获得34mg(定量)的粗制标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.34分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.37分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝610.1(100)[M+2H]2+，1218.8(5)[M+H]+；(ESInegm/z(％)＝1216.8(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C59H88N13O15计算值1218.6518，实测值1218.6539[M+H]+. 实施例212A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基}-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-苏氨酰-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
根据操作方法2，使实施例204A的化合物(17mg，12μmol)与1.0ml的试剂溶液反应。在不经过进一步纯化的情况下，获得17mg(定量)的粗制标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.48分钟。
LC-MS(方法21)Rt＝1.49分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝587.2(100)[M+2H]2+，1172.7(5)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C54H86N13O16计算值1172.6310，实测值1172.6328[M+H]+. 实施例213A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基}-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-别苏氨酰-L-丝氨酸酯双三氟乙酸盐
根据操作方法2，使实施例205A的化合物(50mg，36μmol)与4.8ml的试剂溶液反应。在不经过进一步纯化的情况下，获得56mg(定量)的粗制标题化合物并进行反应，而不经过进一步的纯化。
HPLC(方法6)Rt＝3.22分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.32分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝586.9(100)[M+2H]2+. HR-TOF-MS(方法24)C54H86N13O16计算值1172.6310，实测值1172.6323[M+H]+. 实施例214A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-丙氨酰-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
根据操作方法2，使实施例206A的化合物(49mg，36μmol)与1.0ml的试剂溶液反应1小时。在不经过进一步纯化的情况下，获得49mg(定量)的粗制标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.46分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.49分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝572.0(100)[M+2H]2+，1142.6(5)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C53H84N13O15计算值1142.6205，实测值1142.6221[M+H]+. 实施例215A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-丝氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸酯双三氟乙酸盐
根据操作方法2，使实施例207A的化合物(42mg，28μmol)与1.0ml的试剂溶液反应1小时。在不经过进一步纯化的情况下，获得43mg(定量)的粗制标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.43分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.34分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝594.5(100)[M+2H]2+，1187.6(5)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C53H83N14O17计算值1187.6056，实测值1187.6074[M+H]+. 实施例216A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
根据操作方法2，使实施例208A的化合物(46mg，30μmol)与1.0ml的试剂溶液反应30分钟。在不经过进一步纯化的情况下，获得46mg(定量)的粗制标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.21分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.31分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝593.5(100)[M+2H]2+，1185.5(5)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C54H85N14O16计算值1185.6263，实测值1185.6241[M+H]+. 实施例217A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-丝氨酰-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺三氟乙酸盐
将实施例209A的化合物(13mg，9.3μmol)溶解于DMF(480μL)，并将所述溶液冷却到0℃。加入4-甲基吗啉(6μL，56μmol，6当量)和HATU(11mg，28μmol，3当量)并将所述混合物0℃搅拌2小时。接着，将完全的混合物置于HPLC柱并根据方法44通过色谱法纯化。合并包含产物的级分并进行冷冻干燥。获得5mg(4.0μmol，43％理论值)的标题化合物，其为固体。
HPLC(方法5)Rt＝3.70分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.49分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝570.9(80)[M+2H]2+，1140.6(90)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C53H82N13O15计算值1140.6048，实测值1140.6066[M+H]+. 实施例218A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[3-(3-吡啶基)-L-丙氨酰]-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺三氟乙酸盐
根据实施例217A的化合物的制备方法，从实施例210A的化合物(37mg，26μmol)获得标题化合物，其产率为17mg(51％理论值)。
HPLC(方法5)Rt＝3.60分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.45分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝601.5(100)[M+2H]2+，1201.6(20)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C58H85N14O14计算值1204.6365，实测值1201.6338[M+H]+. 实施例219A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-苯基丙氨酰]-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺三氟乙酸盐
根据实施例217A的化合物的制备方法，从实施例211A(34mg，22μmol)的化合物获得产率为28mg(96％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝3.78分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.75分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝601.0(50)[M+2H]2+，1200.8(100)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝1198.8(100)[M-H]-. 实施例220A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-苏氨酰-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺三氟乙酸盐
根据实施例217A的化合物的制备方法，从实施例212A(17mg，12μmol)的化合物获得产率为10mg(65％理论值)获得标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.75分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.59分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1154.7(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C54H84N13O15计算值1154.6205，实测值1154.6194[M+H]+. 实施例221A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-别苏氨酰-L-丝氨酸酯C1.9-N3.1-内酰胺三氟乙酸盐
根据实施例217A的化合物的制备方法，环化实施例213A的化合物(50mg，36μmol)。接着将方法45用于色谱法。获得产率为52mg(75％纯度，86％理论值)的粗制标题化合物并且不进一步纯化。
HPLC(方法6)Rt＝3.55分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.60分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1154.7(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C54H84N13O15计算值1154.6205，实测值1154.6171[M+H]+. 实施例222A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-丙氨酰-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺三氟乙酸盐
根据实施例217A的化合物的制备方法，其中根据方法45进行纯化，从实施例214A的化合物(49mg，36μmol)获得产率为34mg(77％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.78分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.61分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1124.6(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C53H82N13O14计算值1154.6099，实测值1124.6073[M+H]+. 实施例223A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺三氟乙酸盐
根据实施例217A的化合物的制备方法，其中纯化根据方法45进行，从实施例215A的化合物(42mg，27μmol)获得产率为28mg(73％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.68分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.57分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1169.6(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C53H81N14O16计算值1169.5950，实测值1169.5939[M+H]+. 实施例224A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺三氟乙酸盐
根据实施例217A的化合物的制备方法，其中纯化根据方法45进行，从实施例216A的化合物(45mg，30μmol)获得产率为29mg(75％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.52分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.56分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1167.5(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C54H83N14O15计算值1167.6157，实测值1167.6152[M+H]+. 实施例225A [(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-丝氨酰-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺双盐酸盐
在存在1M盐酸(24μL，6当量)的情况下，将实施例217A的化合物溶解于甲醇(750μL)并在存在3mg的10％披钯碳的情况下，在大气压下在室温进行氢化1.5小时。过滤所述溶液以去除催化剂并浓缩。获得产率为4.3mg(定量)的标题化合物，其为固体。
HPLC(方法5)Rt＝3.21分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝0.90分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝503.9(100)[M+2H]2+，1006.6(3)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C45H76N13O13计算值1006.5681，实测值1006.5670[M+H]+. 实施例226A [(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[3-(3-吡啶基)-L-丙氨酰]-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺双盐酸盐
根据实施例225A的化合物的制备方法，从实施例218A的化合物(17mg，13μmol)获得产率为17mg(定量)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.17分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.34分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝534(20)[M+2H]2+；(ESIneg)m/z(％)＝1065(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C50H79N14O12计算值1067.5997，实测值1067.6006[M+H]+. 实施例227A [(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-苯基丙氨酰-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺双盐酸盐
根据实施例225A的化合物的制备方法，从实施例219A的化合物(28mg，21μmol)获得产率为24mg(99％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.17分钟。
LC-MS(方法21)Rt＝1.15分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝534(100)[M+2H]2+；(ESIneg)m/z(％)＝1064.8(50)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C51H80N13O12计算值1066.6044，实测值1066.6013[M+H]+. 实施例228A [(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-苏氨酰-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺双盐酸盐
根据实施例225A的化合物的制备方法，从实施例220A的化合物(10mg，8μmol)获得产率为8.5mg(99％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.25分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.49分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝511(100)[M+2H]2+. HR-TOF-MS(方法24)C46H78N13O13计算值1020.5837，实测值1020.5831[M+H]+. 实施例229A [(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-别苏氨酰-L-丝氨酸酯C1.9-N3.1-内酰胺双盐酸盐
根据实施例225A的化合物的制备方法，从实施例221A的化合物(52mg，41μmol)获得产率为40mg(86％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝2.93分钟。
实施例230A [(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-丙氨酰-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺双盐酸盐
根据实施例225A的化合物的制备方法，从实施例222A的化合物(34mg，27μmol)获得产率为29mg(99％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.24分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.48分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝496(100)[M+2H]2+. HR-TOF-MS(方法24)C45H76N13O12计算值990.5731，实测值990.5726[M+H]+. 实施例231A [(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺双盐酸盐
根据实施例225A的化合物的制备方法，从实施例223A的化合物(28mg，20μmol)获得产率为21mg(95％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.16分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.43分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝519(100)[M+2H]2+. HR-TOF-MS(方法24)C45H75N14O14计算值1035.5582，实测值1035.5585[M+H]+. 实施例232A [(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺双盐酸盐
根据实施例225A的化合物的制备方法，从实施例224A的化合物(29mg，23μmol)获得产率为24mg(96％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝2.90分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.32分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝517(100)[M+2H]2+，1033(5)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C46H76N14O13计算值1033.5790，实测值1033.5773[M+H]+. 实施例233A [N2-(苄氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-丝氨酰-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺盐酸盐
将实施例225A的化合物(4.3mg，4μmol)和实施例10A的化合物(2.5mg，6μmol，1.5当量)溶解于DMF(300μl)并将所述溶液冷却到0℃。加入4-甲基吗啉(20μl，16μmol，4当量)和HATU(2.4mg，6μmol，1.6当量)并将所述混合物在室温搅拌2小时。接着用3ml的甲醇终止反应并根据方法45通过色谱法纯化。合并包含产物的级分并浓缩。获得4mg(2.8μmol，70％理论值)的标题化合物，其为固体。
HPLC(方法5)Rt＝4.45分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝2.08分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝698.6(100)[M+2H]2+，1395.4(30)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C67H109N15O17计算值1394.8043，实测值1394.8070[M+H]+. 实施例234A [N2-(苄氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[3-(3-吡啶基)-L-丙氨酰]-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺盐酸盐
根据制备示例性化合物233A的制备方法，从示例性化合物226A(17mg，13μmol)获得产率为12mg(54％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝4.25分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝3.61分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝729(100)[M+2H]2+；(ESIneg)m/z(％)＝1454(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C72H111N16O16计算值1455.8359，实测值1455.8347[M+H]+. 实施例235A [N2-(叔丁氧羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-苯基丙氨酰-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺盐酸盐
根据实施例233A的化合物的制备方法，从实施例227A(24mg，21μmol)的化合物和实施例8A的二肽(10mg，27μmol，1.3当量)获得产率为19mg(62％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝4.57分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝2.291分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝661.2(100)[M-Boc+2H]2+，1421.0(30)[M+H]+；(ESIneg)m/z(％)＝1419.1(20)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C70H113N15O16计算值1420.8563，实测值1420.8558[M+H]+. 实施例236A [N2-(叔丁氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[L-苏氨酰]-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺盐酸盐
根据实施例233A的制备方法，从实施例228A的化合物(8.5mg，8μmol)和实施例8A的二肽(4mg，10μmol，1.3当量)获得产率为10mg(91％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝4.65分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝2.09分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1374.8(30)[M+H]+ HR-TOF-MS(方法24)C65H112N15O17计算值1374.8356，实测值1374.8376[M+H]+. 实施例237A [N2-(叔丁氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-别苏氨酰-L-丝氨酸酯C1.11-N3.3-内酰胺盐酸盐
根据实施例233A的化合物的制备方法，从实施例229A的化合物(40mg，35μmol)和实施例8A的二肽(17mg，46μmol，1.5当量)，获得产率为47mg(纯度77％，69％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝4.31分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝2.08分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1374.8(50)[M+H]+ HR-TOF-MS(方法24)C65H112N15O17计算值1374.8356，实测值1374.8362[M+H]+. 实施例238A [N2-(叔丁氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-丙氨酰-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺盐酸盐
根据实施例233A的化合物的制备方法，从实施例230A的化合物(29mg，27μmol)和实施例8A的二肽(13mg，35μmol，1.3当量)获得产率为37mg(98％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝4.60分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝2.10分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝623.0(100)[M-Boc+2H]2+；1344.9(90)[M+H]+ HR-TOF-MS(方法24)C64H109N15O16计算值1344.8250，实测值1344.8241[M+H]+. 实施例239A [N2-(叔丁氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺盐酸盐
根据实施例233A的化合物的制备方法，从实施例231A(21mg，19μmol)的化合物和实施例8A的二肽(9mg，25μmol，1.3当量)获得产率为24mg(89％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝4.42分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝2.03分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝645.5(100)[M-Boc+2H]2+；1389.9(40)[M+H]+ HR-TOF-MS(方法24)C64H108N16O18计算值1389.8101，实测值1389.8105[M+H]+. 实施例240A [N2-(叔丁氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺盐酸盐
根据实施例233A的化合物的制备方法，从实施例232A的化合物(24mg，22μmol)和实施例8A的二肽(11mg，28μmol，1.3当量)获得产率为30mg(97％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝4.26分钟。
LC-MS(方法21)Rt＝2.19分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝644.7(100)[M-Boc+2H]2+. HR-TOF-MS(方法24)C65H111N16O17计算值1387.8308，实测值1387.8304[M+H]+. 实施例241A N2-(叔丁氧羰基)-L-丙氨酸苄酯
将N2-(叔丁氧羰基)-L-丙氨酸(1.13g，5.83mmol)溶解于无水DCM(6ml)中，加入一些

分子筛，接着将所述混合物冷却到0℃。加入苄基醇(1.81ml，17.48mmol，3当量)，EDCI(2.23g，11.65mmol，2当量)，和DMAP(71mg，0.58mmol，0.1当量)。将所述混合物搅拌150分钟，在此过程中，容许其缓慢升温到室温。接着将所述混合物浓缩到干燥并将所述残余物通过色谱法(Biotage，环已烷-乙酸乙酯 9:1)进行后处理。合并包含产物的级分并浓缩。获得产率为1.03g(63％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝4.70分钟。
LC-MS(方法21)Rt＝2.44分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝280.3(30)[M+H]+. 实施例242A L-丙氨酸苄酯三氟乙酸盐
将实施例241A的化合物(200mg，716μmol)与2.0ml的试剂溶液根据操作方法2反应60分钟。在不经过进一步纯化的情况下，获得200mg(95％理论值)的粗制标题化合物。
LC-MS(方法22)Rt＝2.30分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝180(100)[M+H]+. 实施例243A [N2-(叔丁氧羰基)-甘氨酰]-[(3S)-3-羟基-O4-甲基-L-天冬氨酰]-L-丙氨酸苄酯
将实施例33A的化合物(441mg，895μmol)和实施例242A的化合物(315mg，1.07mmol，1.2当量)溶解于DMF(4.8ml)并冷却到-20℃。接着加入4-甲基吗啉(492μl，4.48mmol，5当量)和HATU(510mg，1.34mmol，1.5当量)，将所述混合物缓慢升温到室温并搅拌约16小时。接着，通过色谱法在两步中纯化所述混合物(方法45，接着方法34)。获得产率为277mg(64％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝4.06分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝2.13分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝482.1(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C22H32N3O9计算值482.2134，实测值482.2120[M+H]+. 实施例244A [N2-(叔丁氧羰基)-甘氨酰]-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丙氨酸苄酯
将实施例243A的化合物(139mg，288μmol)提供在5.1ml的乙腈中并冷却到0℃；加入3.1ml的浓氨水溶液，并在0℃持续搅拌。在20分钟后，用冰醋酸(2.6ml)终止反应，用水稀释，并用乙酸乙酯提取。将所述有机提取物用浓盐水洗涤，通过硫酸钠干燥并浓缩。产率122mg(75％理论值)的粗制标题化合物，将其进行反应不经过进一步的纯化。
HPLC(方法6)Rt＝3.78分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.69分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝467.1(100)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝465.2(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C21H31N4O8计算值467.2137，实测值467.2137[M+H]+. 实施例245A 甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丙氨酸苄酯三氟乙酸盐
将实施例241A的化合物(122mg，217μmol)与2.0ml的试剂溶液根据操作方法2反应60分钟。在不经过进一步纯化的情况下，获得100mg(96％理论值)的粗制标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝3.05分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.23分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝367(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C16H23N4O6计算值367.1613，实测值367.1622[M+H]+. 实施例246A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丙氨酸苄酯三氟乙酸盐
将实施例32A的化合物(133mg，139μmol)和实施例245A的化合物(100mg，208μmol，1.5当量)溶解于DMF(950μl)，并将所述溶液冷却到-20℃。加入4-甲基吗啉(46μl，416μmol，3当量)和HATU(84mg，222μmol，1.6当量)并将所述混合物室温搅拌16小时。接着将完全的混合物根据方法45通过色谱法进行纯化。合并包含产物的级分并进行冷冻干燥。获得157mg(95％理论值)的标题化合物，其为固体。
HPLC(方法6)Rt＝3.66分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.71分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1079.1(80)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C49H83N12O15计算值1079.6096，实测值1079.6094[M+H]+. 实施例247A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丙氨酸三氟乙酸盐
将实施例246A的化合物(190mg，159μmol)，根据制备实施例186A的化合物的方法进行氢化。获得172mg(98％理论值)的标题化合物，其为固体。
HPLC(方法6)Rt＝3.39分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.55分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝445.3(100)[M+2H]2+，989.5(60)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝987.5(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C42H77N12O15计算值989.5626，实测值989.5651[M+H]+. 实施例248A [(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丙氨酸双三氟乙酸盐
将实施例247A的化合物(172mg，156μmol)与2.0ml的试剂溶液根据操作方法2反应30分钟。在不经过进一步纯化的情况下，获得174mg(定量)的粗制标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝2.78分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.17分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝889(80)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝887(100)，[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C37H69N12O13计算值889.5102，实测值889.5096[M+H]+. 实施例249A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-{(叔丁氧羰基)氨基}-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丙氨酸三氟乙酸盐
根据制备实施例201A的化合物的方法，使实施例248A的化合物(174mg，156μmol)与实施例17A的化合物(99mg，171μmol，1.1当量)进行反应。在通过色谱法纯化后(方法36的变体，取代梯度，分离用洗脱剂A洗脱剂B＝32等度进行，分离81mg(34％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝3.76分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.89分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝593.4(100)[M-Boc+2H]2+，1285.7(30)[M+H]+；(ESIneg)m/z(％)＝1283.5(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C59H93N14O18计算值1285.6787，实测值1285.6781[M+H]+. 实施例250A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丙氨酸双三氟乙酸盐
将实施例249A的化合物(81mg，54μmol)与2.0ml的试剂溶液根据操作方法2反应60分钟。在不经过进一步纯化的情况下，获得81mg(99％理论值)的粗制标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝3.20分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.29分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝593.7(100)[M+2H]2+，1185.6(5)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝1183.7(100)，[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C54H85N14O16计算值1185.6263，实测值1185.6249[M+H]+. 实施例251A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丙氨酸C1.9-N3.1-内酰胺三氟乙酸盐
根据制备实施例217A的化合物的方法，其中纯化根据方法45进行，从实施例250A的化合物(81mg，53μmol)获得产率为69mg(93％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝3.56分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.67分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1167.6(100)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝1165.6(100)，[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C54H83N14O15计算值1167.6157，实测值1167.6154[M+H]+. 实施例252A [(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丙氨酸C1.9-N3.1-内酰胺双盐酸盐
根据制备实施例225A的化合物的方法，从实施例251A的化合物(69mg，49μmol)获得产率为53mg(97％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝2.98分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝0.96分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝517.5(100)[M+2H]2+，1033.7(10)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝1031.7(60)[M-H]-，1077.7(100)[M+HCOOH-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C46H77N14O13计算值1033.5790，实测值1033.5782[M+H]+. 实施例253A [N2-(叔丁氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丙氨酸C1.11-N3.3-内酰胺盐酸盐
根据制备实施例233A的化合物的方法，从实施例252A的化合物(53mg，48μmol)和实施例8A的二肽(23mg，62μmol，1.3当量)获得产率为58mg(85％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝4.35分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝2.08分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1387.9(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C65H111N16O17计算值1387.8308，实测值1387.8314[M+H]+. 实施例254A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酸五氟苯酯三氟乙酸盐
在0℃，在氩气下，将实施例32A的化合物(60mg，71μmol)，五氟苯酚(65mg，355μmol，5当量)和EDCI(20mg，107μmol，1.5当量)溶解于二氯甲烷(0.9ml)并在室温搅拌过夜。将所述溶剂去除并将所述残余物进行色谱分离(方法34)。分离产率为32mg(45％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝4.12分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.93分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝897.4(100)[M+H]+. 实施例255A N2-(叔丁氧羰基)-D-丙氨五氟苯酸
以类似于制备实施例254A的化合物的方式，从N2-(叔丁氧羰基)-D-丙氨酸(390mg，2.06mmol)分离产率为471mg(64％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝5.00分钟。
LC-MS(方法21)Rt＝2.74分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝356(5)[M+H]+. 实施例256A [N2-(叔丁氧羰基)-D-丙氨酰]-(3S)-O4-甲基-3-羟基-L-天冬氨酸
在0℃，将实施例255A的化合物(470mg，1.32mmol)和(2S，3S)-2-氨基-3-羟基-4-甲氧基-4-氧代丁酸盐酸盐(见用于制备的实施例33A，407mg，2.04mmol，1.6当量)溶解于DMF(20ml)，并加入DIPEA(1.78ml，10.20mmol，7.7当量)。将所述混合物在室温搅拌约16小时，接着根据方法45进行色谱法并通过方法32进行精制。产率200mg(29％理论值)。
HPLC(方法5)Rt＝3.26分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.48分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝335.2(90)[M+H]+. 实施例257A [N2-(叔丁氧羰基)-D-丙氨酰]-[(3S)-O4-甲基-3-羟基-L-天冬氨酰]-L-丝氨酸苄酯
将实施例256A的化合物(195mg，0.58mmol)和实施例149A的化合物(190mg，0.61mmol，1.1当量)溶解于DMF(5.0ml)并将所述溶液冷却到0℃。加入4-甲基吗啉(203μl，1.84mmol，3当量)和TCTU(326mg，0.92mmol，1.5当量)并将所述混合物在室温搅拌2.5小时。接着，将完全的混合物进行色谱分离(方法45)并通过方法32进行精制。合并包含产物的级分并进行冷冻干燥。获得146mg(47％理论值)的标题化合物，其为固体。
HPLC(方法5)Rt＝3.89分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.94分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝511.1(100)[M+H]+. [α]20Na＝+15.9(c＝0.5，MeOH)。
实施例258A [N2-(叔丁氧羰基)-D-丙氨酰]-[(3S)-O4-甲基-3-羟基-L-天冬氨酰]-L-丝氨酸
将实施例257A的化合物(135mg，264μmol)在30mg的10％披钯碳存在的情况下，在甲醇中(8.0ml)在室温氢化2小时。过滤所述混合物以去除催化剂并浓缩，并将所述粗制产物进行色谱分离(方法32)。产率117mg(定量)。
HPLC(方法5)Rt＝3.11分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.40分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝422.1(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C16H28N3O10计算值422.1770，实测值422.1776[M+H]+. 实施例259A [N2-(叔丁氧羰基)-D-丙氨酰]-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸
将实施例258A的化合物(116mg，275μmol)提供在5.0ml的乙腈中并冷却到0℃；加入3.0ml的浓氨水溶液，并在0℃持续搅拌。用冰醋酸(1.2ml)终止反应，浓缩并进行色谱分离(方法32)。产率64mg(57％理论值) HPLC(方法6)Rt＝2.82分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.12分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝407.0(90)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝405.0(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C15H27N4O9计算值407.1773，实测值407.1781[M+H]+. 实施例260A [D-丙氨酰]-[(3S)-3-羟基-L-天冬氨酰-L-丝氨酸三氟乙酸盐
将实施例259A的化合物(63mg，155μmol)与2.0ml的试剂溶液根据操作方法2反应30分钟。在不经过进一步纯化的情况下，获得67mg(定量)的粗制标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝0.72分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝0.52分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝307(100)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C10H19N4O7计算值307.1249，实测值307.1245[M+H]+. 实施例261A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-D-丙氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸酯三氟乙酸盐
在0℃，将实施例254A的化合物(32mg，32μmol)和实施例260A的化合物，13mg，32μmol，1当量)溶解于DMF(1.5ml)并加入DIPEA(28μl，158μmol，5当量)。将所述混合物在室温搅拌约16小时，接着根据方法45进行色谱法。产率30mg(84％理论值)。
HPLC(方法6)Rt＝3.40分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.60分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝460.3(100)[M-Boc+2H]2+，1019.6(60)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C43H79N12O16计算值1019.5732，实测值1019.5716[M+H]+. 实施例262A [(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-D-丙氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸酯双三氟乙酸盐
将实施例261A的化合物(59mg，52μmol)与2.0ml的试剂溶液根据操作方法2反应30分钟。不经过纯化，获得64mg(定量)的粗制标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝2.91分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.20分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝461(100)[M+2H]2+；MS(ESIneg)m/z(％)＝918(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C38H71N12O14计算值919.5208，实测值919.5212[M+H]+. 实施例263A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-{(叔丁氧羰基)氨基}-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-D-丙氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸三氟乙酸盐
根据制备实施例201A的化合物的方法，使实施例262A的化合物(92mg，80μmol)与实施例17A的化合物(51mg，88μmol，1.1当量)进行反应。在通过色谱法纯化后(方法44)，分离35mg(31％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝3.76分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.94分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝608.4(100)[M-Boc+2H]2+，1315.6(30)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝1313.7(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C60H95N14O19计算值1315.6893，实测值1315.6873[M+H]+. 实施例264A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-D-丙氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸双三氟乙酸盐
实施例262A的化合物(35mg，24μmol)与2.0ml的试剂溶液根据操作方法2反应30分钟。在不经过进一步纯化的情况下，获得37mg(定量)的粗制标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝3.20分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.36分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝608.3(100)[M+2H]2+，1215.7(5)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝1213.7(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C55H87N14O17计算值1215.6369，实测值1215.6340[M+H]+. 实施例265A [(3R)-N2-(苄氧基羰基)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-D-丙氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺三氟乙酸盐
根据制备实施例217A的化合物的方法，其中纯化根据方法45进行，从实施例264A的化合物(36mg，25μmol)获得产率为46mg(48％理论值(约34％纯度))的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝3.55分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.61分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝599.3(100)[M+2H]2+；1197.6(30)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝1195.6(100)，[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C55H85N14O16计算值1197.6263，实测值1197.6290[M+H]+. 实施例266A [(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-D-丙氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.9-N3.1-内酰胺三氟乙酸盐
使实施例265A的化合物(46mg，纯度约34％，约12μmol)在存在一刮勺尖10％披钯碳的情况下，在甲醇中，在大气压下在室温氢化1小时。过滤所述混合物以去除催化剂并浓缩。粗制产物(42g)进行进一步反应，不经过纯化。
HPLC(方法6)Rt＝2.98分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.33分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝533(100)[M+2H]2+，1064(10)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝1062(100)[M]-. HR-TOF-MS(方法24)C47H79N14O14计算值1063.5895，实测值1063.5869[M+H]+. 实施例267A [N2-(叔丁氧基羰基)-3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-D-丙氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺三氟乙酸盐
根据制备实施例233A的化合物的方法，从实施例266A的化合物(34mg的粗制产物，约12μmol)和实施例8A的二肽(13mg，35μmol，约2.4当量)获得粗制产率为28mg的标题化合物。在不经过进一步纯化的情况下，将所述产物用在下一个合成步骤中。
HPLC(方法6)Rt＝4.27分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝2.12分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝659.6(100)[M-Boc+2H]2+1417.8(50)[M+H]+. 实施例268A 外消旋N-(叔丁氧羰基)-3-(三甲基甲硅烷基)丙氨酸 合成根据Merget，K.Günther，M.Bernd，E.Günther，R.Tacke，J.Organomet.Chem.2001 628，183-194进行。通过在手性相上的制备HPLC分离对映异构体 Gilson Abimed HPLC，UV检测器212nm，柱Daicel Chiralpak AD-H5μm；250 x 20mm；流速15ml/分钟；洗脱剂A异已烷，洗脱剂B0.2％乙酸/1％水/2-丙醇；等度。
实施例269A (2S化合物或N-(叔丁氧羰基)-D-3-三甲基甲硅烷基丙氨酸)
制备HPLCRt＝4.16分钟 [α]D20＝+1.1(c＝0.83，甲醇) 实施例270A (2R或N-(叔丁氧羰基)-L-3-三甲基甲硅烷基丙氨酸)
制备HPLCRt＝9.27分钟 [α]D20＝-1.6(c＝0.66，甲醇) 实施例271A N-(叔丁氧羰基)-3-吡啶-3-基-L-丙氨酸甲酯
类似于B.Neises，W.Steglich，Org.Synth.1985，63，183-187. 在氩气下，将(2S)-N-(叔丁氧羰基)-3-(3-吡啶基)丙氨酸(25.00g，93.88mmol)溶解于300ml的二氯甲烷。加入甲醇(11.4ml，9.02g，281mmol，3当量)并加入DMAP的颗粒。接着，将所述混合物冷却到0℃。加入EDC(19.80g，103mmol，1.1当量)。在5分钟后，去除冰浴，并将所述混合物在室温搅拌1小时。接着，将所述混合物在真空中浓缩并将所述残余物与乙酸乙酯混合，并用浓碳酸氢钠提取。将水相用乙酸乙酯反萃取1次，并接着将合并的有机相用0.5M柠檬酸洗涤，随后再次用浓碳酸氢钠洗涤1次。将有机相通过硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。余下的澄清的油，在油泵真空下干燥后结晶。产率23.60g(84.2mmol，90％理论值)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝3.28分钟。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ1.30(s，9H)，2.86(m，1H)，3.04(m，1H)，3.63(s，3H)，4.22(m，1H)，7.28-7.39(m，2H)，7.69(d，1H)，8.43(m，2H)。
LC-MS(方法18)Rt 1.21分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝281(100)[M+H]+. 实施例272A 3-[(2S)-2-氨基(ammonio)-3-甲氧基-3-氧代丙基]吡啶鎓双(三氟乙酸盐)
将化合物271A(11.8g，42.09mmol)溶解于在二氯甲烷中的30％TFA(160ml)并在室温搅拌30分钟。接着，将所述混合物在真空中浓缩。将所述残余物置入少量的水中并进行冷冻干燥。接着，将冻干物与甲苯混合并在真空中浓缩。最终，在油泵真空下将所述产物干燥到恒重。产率17.15g(定量)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝0.88分钟。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ 2.79(dd，1H)，2.92(dd，1H)，3.60(s，3H)，3.63(m，1H)，7.30(m，1H)，7.62(d，1H)，8.41(m，2H)。
LC-MS(方法18)Rt0.46分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝181(100)[M+H]+. 实施例273A N-(叔丁氧羰基)-3-(三甲基甲硅烷基)-D-丙氨酰-3-吡啶-3-基-L-丙氨酸甲酯
在0℃，将化合物269A(10.31g，39.4mmol)和化合物272A(16.10g，39.4mmol，1当量)溶解于DMF(186mL)。接着加入NMM(17.34ml，16.00g，4当量)和HATU(22.49g，59.16mmol，1.5当量)。将所述混合物在室温搅拌2小时。加入叔丁基甲基醚，并将所述混合物用浓碳酸钠洗涤。将所述水相用叔丁基甲基醚反萃取1次，并接着用1M柠檬酸水溶液洗涤合并的有机相，并再次用浓碳酸钠洗涤，通过Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过硅胶(环已烷/乙酸乙酯2+1)进行过滤。产率14.1g(84％理论值)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝3.91分钟。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ-0.09(s，9H)，0.56-0.75(m，2H)，1.47(s，9H)，2.90(dd，1H)，3.09(dd，1H)，3.62(s，3H)，3.98(m，1H)，4.49(m，1H)，3.68(d，1H)，7.26(dd，1H)，7.61(m，1H)，8.20(d，1H)，8.40(m，2H)。
LC-MS(方法18)Rt1.90分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝424(50)[M+H]+. 实施例274A N-(叔丁氧羰基)-3-(三甲基甲硅烷基)-D-丙氨酰-3-吡啶-3-基-L-丙氨酸
将化合物273A(7.4g，17.56mmol)置入THF/水(6+4)中，冷却到0℃，并加入一水合氢氧化锂(1.47g，35.13mmol，2当量)。将所述混合物0℃搅拌。在1小时后，加入另一当量(0.74g)的一水合氢氧化锂，并持续搅拌1小时。在真空中去除大部分的THF，并接着将pH通过加入柠檬酸调节到4。固体沉淀。将所述混合物用三份乙酸乙酯提取，在此过程中，固体溶解。将合并的有机相通过硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所述粗制产物在Sephadex LH 20上通过色谱法(方法45)纯化。产率6.67g(93％理论值)。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝3.73分钟。
1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ-0.09(s，9H)，0.56-0.75(m，2H)，1.35(s，9H)，2.90(dd，1H)，3.09(dd，1H)，3.98(m，1H)，4.41(m，1H)，6.70(d，1H)，7.26(dd，1H)，7.60(m，1H)，8.00(d，1H)，8.37(m，2H)。
LC-MS(方法18)Rt 1.71分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝410(100)[M+H]+. 实施例275A (3R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-L-苯丙氨酸
将示例性化合物16A(3.00g，7.24mmol)溶解于甲醇(60ml)，加入10％披钯活性碳(50mg)，并将所述混合物在室温在氢气氛下和在大气压下搅拌6小时。接着，将所述混合物过滤以去除催化剂并浓缩。将粗制反应产物(2.20g，再定量)用在下一个步骤中，不经过纯化。
HPLC(方法6)Rt＝3.21分钟。
LC-MS(方法51)Rt＝1.55分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝281.3(30)[M+H]+，MS(ESIneg)m/z(％)＝279.1(100)[M-H]-. [α]20Na＝-23.4(c＝1.0，MeOH)。
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝1.34(s，9H)，3.52(d，J＝4.6Hz，1H)，4.88(dd，J＝4.6，J＝8.4Hz，1H)，7.29(m，5H)，8.02(d，J＝8.6Hz，1H)。
HR-TOF-MSC14H21N2O4计算值281.1496，实测值281.1503[M+H]+. 实施例276A (βR)-β-[(叔丁氧羰基)氨基]-N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-苯丙氨酸
将示例性化合物275A(2.2g的粗制产物，7.24mmol)和(9H-芴-9-基甲氧基)羰基琥珀酰亚胺(2.90g，8.58mmol，1.2当量)，以及碳酸钠(1.18g，11.70mmol，1.5当量)溶解于1，4-二噁烷-水(7+3)并在室温搅拌过夜。接着，将所述反应物通过加入5％柠檬酸水溶液终止并用两份乙酸乙酯提取。通过硫酸钠干燥合并的有机提取物并浓缩，将所述残余物用水和乙腈研磨。接着，根据方法34通过色谱法纯化结晶的粗制产物。产率2.58g(66％理论值)，其为无色的固体。
HPLC(方法6)Rt＝4.86分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝2.51分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝503.2(70)[M+H]+，MS(ESIneg)m/z(％)＝501.3(100)[M-H]-. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝1.38(s，9H)，4.75(dd，J＝3.9，J＝9.8Hz，1H)，5.29(dd，J＝3.9，J＝10.0Hz1H)，7.21-7.60(m，13H)，7.87(d，J＝7.4Hz，1H)。
HR-TOF-MSC29H31N2O6计算值503.2177，实测值503.2158[M+H]+. 实施例277A (3R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-苯丙氨酸五氟苯酯
将示例性化合物276A(2.58g，5.14mmol)和五氟苯酚(4.72g，25.68mmol，5当量)溶解于二氯甲烷(350ml)，并冷却到0℃。加入EDCI(1.48g，7.70mmol，1.5当量)，并将所述混合物搅拌6小时，同时缓慢升温到室温。接着，将所述溶剂蒸馏除去并将所述残余物根据方法34通过色谱法以数份进行纯化。产率2.80g(81％理论值)的标题化合物，其为无色的固体。
HPLC(方法54)Rt＝5.09分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝3.34分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝6693.0(20)[M+H]+. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝1.39(s，9H)，4.11-4.26(m，3H)，5.16(dd，J＝4.4，J＝9.5Hz，1H)，5.52(dd，J＝4.4，J＝10.0Hz，1H)，7.27-7.57(m，9H)，7.56(t，J＝6.6Hz，2H)，7.73(d，J＝10.3Hz，1H)，7.87(d，J＝7.4Hz，2H)，7.93(d，J＝9.6Hz，1H)。
HR-TOF-MSC35H30N2O6计算值669.2019，实测值669.1996[M+H]+. 实施例278A (3R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-N2-(二苯基亚甲基)-L-亮氨酸乙酯
Mannich反应是基于将烯醇化铜加到磺酰基亚胺上的方法L.Bernardi，A.Gothelf，R.G.Hazell，K.A.

J.Org.Chem.(有机化学杂志)2003，68，2583-2591进行。[(1E)-苯基亚甲基]氨基甲酸叔丁酯可以根据文献进行制备A.Klepacz，A.Zwierzak，Tetrahedron Lett.(四面体通讯)200243；1079-1080。
将新鲜活化的

分子筛，四(乙腈)六氟磷酸铜(I)(293mg，0.79mmol，0.035当量)和(R)-(+)-2-(2-(二苯基膦基)苯基)-4-异丙基-2-噁唑啉(335mg，0.90mmol，0.04当量)在氩气下提供并加入无水THF(228ml)。接着，将三乙胺(109μl，80mg，0.79mmol，0.035当量)移入。将所述混合物冷却到-20℃并只要达到该温度，加入N-(二苯基亚甲基)甘氨酸乙酯(6.00g，22.44mmol)和[(1E)-苯基亚甲基]氨基甲酸叔丁酯(6.92g，40.4mmol，1.8当量)。将所述混合物搅拌16小时，在此过程中使其缓慢达到室温。接着加入硅胶(约15g)并将所述溶剂在真空中蒸馏除去。将所述残余物上样到用硅胶包装的玻璃柱上，并用环已烷-乙酸乙酯9+1洗脱。标题化合物(Rf＝0.22，CyHex-EtOAc 9+1)包含具有D-苏型构型的对映异构体和更少量的(约36％)的具有赤型构型的两种对映异构体，其在后面的阶段被去除。所述产物对酸非常敏感，通过HPLC(方法6)和LC-MS(方法19)的研究一直显示在色谱法条件下去除的二苯甲酮的比例。产率2.66g(27％理论值)。
LC-MS(方法19)Rt＝3.23分钟(21％，赤型)，MS(ESIpos)m/z(％)＝439.4(100)[M+H]+和3.23分钟(48％，苏型)，MS(ESIpos)m/z(％)＝439.3(100)[M+H]+. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝0.62(d，J＝6.6Hz，3H)，0.83(d，J＝6.6Hz，3H)，1.13(t，J＝7.1Hz，3H)，1.38(s，9H)，1.61(m，1H)，3.74(ddd，J1＝2.7，J2＝J3＝9.6Hz，1H)，3.96(d，J＝2.7Hz，1H)，3.99-4.06(m，2H)，6.51(d，J＝10.0Hz，1H)，7.07(m，2H)，7.38-7.52(m，6H)，7.67-7.77(m，2H)。
HR-TOF-MSC26H35N2O4计算值439.2592，实测值439.2606[M+H]+. 实施例279A (3R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-L-亮氨酸乙酯三氟乙酸盐
将实施例278A的标题化合物(4.44g，10.12mmol)溶解于二氯甲烷(87ml)，加入857μl的TFA(11.13mmol，1.1当量)和水(273μl，15.18μmol，1.5当量)，并将所述混合物在室温搅拌1小时。将反应混合物的所有的挥发性成分在真空中蒸馏除去，并将所述残余物(5.97g)用在下一个阶段中，而不经过纯化。
HPLC(方法6)Rt＝3.41分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.31分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝275.2(50)[M+H]+. 实施例280A (3R)-N2-(苄氧基)羰基-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-L-亮氨酸乙酯
将示例性化合物279A(5.97g的粗制产物，约10.11mmol)和苄氧基羰基琥珀酰亚胺(3.02g，12.13mmol，1.2当量)溶解于二氯甲烷-水(4+1)，并将所述混合物冷却到0℃。在剧烈搅拌的同时，加入碳酸氢钠(2.55g，30.33mmol，3当量)和碘化四丁基铵(373mg，1.01mmol，0.1当量)，并将所述混合物在室温剧烈搅拌16小时。将有机相分离除去，用浓NaCl洗涤，通过硫酸钠干燥并浓缩。根据方法34以数份分离粗制产物，去除二苯甲酮和部分的赤型非对映异构体。共获得1.65g的标题化合物(4.03mmol，40％的理论值) Rf＝0.076(CyHex-EtOAc 9+1)。
HPLC(方法54)Rt＝4.33分钟(赤型非对映异构体)和4.52分钟(苏型非对映异构体)。
LC-MS(方法19)Rt＝2.71分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝409.3(30)[M+H]+，赤型异构体和Rt＝2.75分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝409.0(70)[M+H]+苏型异构体)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝0.71-0.86(m，6H)，1.16(t，J＝7.1Hz，3H)，1.34(s，9H)，1.59(m，1H)，3.70(ddd，J＝3.4，J1＝J2＝10.3Hz，1H)，3.99-4.08(m，2H)，4.32(dd，J＝3.4，J＝9.5Hz，1H)，5.03(d，J＝12.4Hz，1H)，5.10(d，J＝12.4Hz，1H)，6.62(d，J＝10.5Hz，1H)，7.31-7.40(m，5H)，7.44(d，J＝9.3Hz，1H)。
HR-TOF-MSC21H33N2O6计算值409.2334，实测值409.2329[M+H]+. 实施例281A (3R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-N2-(苄氧基)羰基-L-亮氨酸
在0℃，将实施例280A的标题化合物(2.78g，6.82mmol)溶解于THF-水混合物(1+1，40ml)，加入一水合氢氧化锂(629mg，15.0mmol，2.2当量)并将所述混合物0℃搅拌3小时。接着将THF蒸馏除去，并将水性残余物用1M柠檬酸酸化并用两份的乙酸乙酯提取。将合并的有机提取物通过硫酸钠干燥并浓缩。根据方法55，在手性相上通过色谱法分离粗制残余物(2.42g，93％理论值)。在该情形中，分别单独获得苏型非对映异构体的对映异构体和较少的赤型非对映异构体的那些。在手性色谱法后的主要异构体(标题化合物)的e.e.根据方法56确定并且是100％。标题化合物的产率是780mg(30％理论值，基于起始化合物280A)。
HPLC(方法6)Rt＝4.51分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝2.44分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝381.1(30)[M+H]+，MS(ESIneg)m/z(％)＝379.2(100)[M-H]-. 1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝0.82(d，J＝9.3Hz，3H)，0.85(d，J＝6.6Hz，3H)，1.35(s，9H)，3.72(ddd，J1＝3.2，J2＝J3＝10.0Hz，1H)，4.26(dd，J＝3.2，J＝9.6Hz，1H)，5.03(d，J＝12.7Hz，1H)，5.08(d，J＝12.4Hz，1H)，6.63(d，J＝10.5Hz，1H)，7.31-7.40(m，6H)，12.62(br s，1H)。
HR-TOF-MSC19H28N2O6Na计算值403.1845，实测值403.1832[M+Na]+. 手性HPLC(方法56)Rt＝8.97分钟。
实施例282A (3R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-N2-(苄氧基)羰基氨基-L-亮氨酸五氟苯酯
将示例性化合物281A(100mg，263μmol)和五氟苯酚(242mg，1.31mmol，5当量)在室温溶解于二氯甲烷(20ml)，并接着加入EDCI(76mg，394μmol，1.5当量)，将所述混合物置于冰箱中约12小时。将所述溶剂随后在真空中蒸馏除去，并将所述残余物通过色谱法进行纯化(方法32)。获得产率为132mg(92％理论值)的标题化合物，其为无色的固体。
HPLC(方法54)Rt＝4.89分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝3.19分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝547.2(40)[M+H]+. 实施例283A N2-(叔丁氧羰基)-3-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-L-丙氨酰-L-丝氨酸苄酯
将实施例149A的化合物(2.08g，6.73mmol)和N-(叔丁氧羰基)-3-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-L-丙氨酸(22.73g，6.39mmol，0.95当量)溶解于DMF(32mL)并冷却到0℃。加入HATU(3.84g，10.09mmol，1.5当量)和4-甲基吗啉(2.22mL，20.18mmol，3当量)。接着将所述混合物在室温搅拌2.5小时。将完全的混合物随后上样到Sephadex LH20柱并根据方法45进行色谱法。合并包含产物的级分并根据方法34纯化。产率2.41g(59％理论值)，其为无色的固体。
HPLC(方法6)Rt＝4.81分钟。
LC-MS(方法51)Rt＝3.94分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝504.4(100)[M-BOC+H+]+，604.4(40)[M+H]+. [α]20Na＝+1.5(c＝0.5，MeOH)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝1.36(s，9H)，3.18(m，1H)，3.66(m，1H)，3.75(m，1H)，4.15-4.28(m，4H)，4.42(m，1H)，5.90(t，J＝5.6Hz，1H)，5.20(s，2H)，6.82(d，J＝8.04Hz，1H)，7.21(m，1H)，7.31-7.43(m，10H)，7.67(d，J＝7.8Hz，1H)，7.89(d，J＝7.6Hz，1H)，8.14(d，J＝7.6Hz，1H)。
HR-TOF-MSC33H38N3O8计算值604.2654，实测值604.2646[M+H]+. 实施例284A 3-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-L-丙氨酰-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
将示例性化合物283A(2.39g，3.96mmol)，根据操作方法2反应。获得2.96g(定量)的粗制标题化合物并在不经过进一步纯化的情况进一步反应。
HPLC(方法6)Rt＝3.84分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝3.14分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝504.0(100)[M+H]+. [α]20Na＝-0.5(c＝1.0，MeOH)。
HR-TOF-MSC28H30N3O6计算值504.2130，实测值504.2140[M+H]+. 实施例285A [N-(叔丁氧羰基)甘氨酰]-[3-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-L-丙氨酰]-L-丝氨酸苄酯
将示例性化合物284A(2.90g，～83％纯度，3.89mmol)和N-叔丁氧羰基甘氨酸(751mg，4.29mmol，1当量)溶解于DMF(20ml)并冷却到0℃。加入HATU(2.22g，5.85mmol，1.5当量)和4-甲基吗啉(2.14ml，19.49mmol，5当量)。将反应混合物在0℃搅拌2.5小时，并接着通过加入5％柠檬酸水溶液终止反应并用5份MTBE提取。干燥合并的有机提取物(硫酸钠)并浓缩。将所述粗制产物通过色谱法纯化(方法34)。合并包含产物的级分并进行冷冻干燥。产率1.54g(60％理论值)，其为无色的固体。
HPLC(方法3)Rt＝4.64分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝2.65分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝661.2(100)[M+H]+. [α]20Na＝-8.7(c＝0.5，MeOH)。
HR-TOF-MSC35H41N4O9计算值661.2869，实测值661.2864[M+H]+. 实施例286A 甘氨酰]-[3-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-L-丙氨酰]-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
将实施例285A的标题化合物(88mg，0.20mmol)，根据操作方法2反应。将粗制产物进行进一步的反应，而无需进一步纯化。产率1.84g(定量) HPLC(方法3)Rt＝3.78分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.74分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝561.2(100)[M+H]+. [α]20Na＝0.0(c＝1.0，MeOH)。
HR-TOF-MSC30H33N4O7计算值561.2344，实测值561.2343[M+H]+. 实施例287A [(3R)-N2-(叔丁氧羰基)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[3-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-L-丙氨酰]-L-丝氨酸苄酯三氟乙酸盐
将示例性化合物32A(701mg，830μmol)和286A(700mg，830μmol，1当量)溶解于DMF(11.2ml)，并将所述溶液冷却到0℃。加入4-甲基吗啉(274μl，2.49mmol，3当量)和HATU(473mg，1.25mmol，1.5当量)，并将所述混合物0℃搅拌3小时。接着将完全的混合物置于Sephadex LH-20柱并根据方法45进行色谱法。合并包含产物的级分，浓缩并根据方法34进行纯化。合并包含产物的级分并进行冷冻干燥。获得643mg(56％理论值)的标题化合物，其为无色的固体。
HPLC(方法6)Rt＝4.27分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝2.13分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝1273.9(30)[M+H]+，MS(ESIneg)m/z(％)＝1317.9(100)[M+HCOO-]-. HR-TOF-MSC63H93N12O16计算值1273.6826，实测值1273.6851[M+H]+. 实施例288A [(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[3-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-L-丙氨酰]-L-丝氨酸苄酯双三氟乙酸盐
将化合物287A(643mg，463μmol)，根据操作方法2反应。获得以约定量产率(783mg)的粗制标题化合物并不经过进一步的纯化而进行反应。
HPLC(方法5)Rt＝3.61分钟。
LC-MS(方法51)Rt＝2.53分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝588.1(100)[M+2H]2+. HR-TOF-MSC58H85N12O14计算值1173.6306，实测值1173.6304[M+H]+. 聚合物结合的肽 实施例289A 聚合物结合的N-(叔丁氧基羰基)-O-叔丁基-L-苏氨酰-L-亮氨酰-N5-(亚氨基{[(2，2，5，7，8-五甲基-3，4-二氢-2H-色烯-6-基)磺酰基]氨基}甲基)-D-鸟氨酰-L-异亮氨酰-O-叔丁基-L-别苏氨酰-甘氨酰-O-叔丁基-L-丝氨酰-O-叔丁基-L-丝氨酸
将34.00g(50.66mmol)的2-氯三苯甲基-树脂(Iris Biotech，CAS No42074-68-0，负载1.49mmol/g)提供在400ml的二氯甲烷中，并加入67.989g(177.31mmol)的O-叔丁基-N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-丝氨酸和65.476g(506.60mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。加入5ml的甲醇，并将所述混合物在室温振荡30分钟。通过吸滤收集所述固体，洗涤3次，每次分别用400ml的二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷并通过吸滤收集。随后将所述固体用哌啶如下连续处理两次将树脂与400ml 20％的哌啶在二甲基甲酰胺中的溶液混合，振荡30分钟并通过吸滤收集。
将以这种方式获得的树脂提供在400ml的二甲基甲酰胺中，并加入48.564g(126.65mmol)的O-叔丁基-N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-丝氨酸，40.665g(126.65mmol)的N-[(1H-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)-亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TBTU)和24.553g(189.975mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤3次，每次分别用400ml的二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷并通过吸滤收集。随后将所述固体用哌啶如下连续处理两次将树脂与400ml的20％的哌啶在二甲基甲酰胺中的溶液混合，振荡30分钟并通过吸滤收集。
将以这种方式获得的树脂提供在400ml的二甲基甲酰胺，并加入37.665g(126.65mmol)的N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-甘氨酸，40.665g(126.65mmol)的N-[(1H-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TBTU)和24.553g(189.975mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤3次，每次分别用400ml的二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷并通过吸滤收集。随后将所述固体用哌啶如下连续处理两次将树脂与400ml的20％的哌啶在二甲基甲酰胺中的溶液混合，振荡30分钟并通过吸滤收集。
将以这种方式获得的树脂提供在400ml的二甲基甲酰胺中，并加入50.340g(126.65mmol)的O-叔丁基-N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-别苏氨酸，40.665g(126.65mmol)的N-[(1H-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TBTU)和24.553g(189.975mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤3次，每次分别用400ml的二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷并通过吸滤收集。随后将所述固体用哌啶如下连续处理两次将树脂与400ml的20％的哌啶在二甲基甲酰胺中的溶液混合，振荡30分钟并通过吸滤收集。
将以这种方式获得的32g(47.68mmol；设想的1.49mmol/g负载)的树脂提供在400ml的二甲基甲酰胺中，并加入42.128g(119.20mmol)的N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-异亮氨酸，38.273g(119.20mmol)的N-[(1H-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TBTU)和23.109g(178.80mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤3次，每次分别用400ml的二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷并通过吸滤收集。因为偶联不完全(根据HPLC)，再次加入400ml的二甲基甲酰胺，25.277g(71.52mmol)的N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-异亮氨酸，22.964g(71.52mmol)的N-[(1H-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TBTU)和13.865g(107.28mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)，并将所述混合物振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤3次，每次分别用400ml的二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷并通过吸滤收集。随后将所述固体用哌啶如下连续处理两次将树脂与400ml的20％的哌啶在二甲基甲酰胺中的溶液，振荡30分钟，通过吸滤收集并在真空中干燥。
将以这种方式获得的14g(20.86mmol；设想的1.49mmol/g负载)的树脂提供在200ml的二甲基甲酰胺，并加入34.566g(52.15mmol)的N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-N5-(亚氨基{[(2，2，5，7，8-五甲基-3，4-二氢-2H-色烯-6-基)磺酰基]氨基}甲基)-D-鸟氨酸，16.745g(52.15mmol)N-[(1H-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TBTU)和13.48g(104.30mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤3次，每次分别用200ml的二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷并通过吸滤收集。随后将所述固体用哌啶如下连续处理两次将树脂与200ml的在二甲基甲酰胺中的20％哌啶溶液混合，振荡30分钟，通过吸滤收集并在真空中干燥。
将以这种方式获得的树脂提供在200ml的二甲基甲酰胺中，并加入18.431g(52.15mmol)的N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-亮氨酸，16.745g(52.15mmol)的N-[(1H-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TBTU)和13.480g(104.30mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤3次，每次分别用200ml的二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷并通过吸滤收集。随后将所述固体用哌啶如下连续处理两次将树脂与200ml的哌啶在二甲基甲酰胺中的20％溶液混合，振荡30分钟，通过吸滤收集并在真空中干燥。
将以这种方式获得的2.0g(2.98mmol；设想的1.49mmol/g负载)的树脂提供在20ml的二甲基甲酰胺中，并加入2.462g(8.94mmol)的N-(叔丁氧羰基)-O-叔丁基-L-苏氨酸，2.870g(8.94mmol)的N-[(1H-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TBTU)和2.311g(17.88mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤3次，每次分别用20ml的二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷，并通过吸滤收集。
实施例290A N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]甘氨酰-L-丝氨酸
将1g(0.62mmol)的Wang树脂(默克生物科学(Merck Biosciences)；负载0.62mmol/g)用O-叔丁基-N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-丝氨酸预先负载，用哌啶如下连续处理两次将所述树脂与10ml的20％的哌啶在二甲基甲酰胺中的溶液混合，振荡30分钟并通过吸滤收集。将以这种方式获得的树脂提供在10ml的二甲基甲酰胺中，并加入369mg(1.24mmol)的N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]甘氨酸，398mg(1.24mmol)的N-[(1H-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TBTU)和240mg(1.86mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤三次，每次分别用10ml的二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷，并通过吸滤收集。加入20ml的50％三氟乙酸在二氯甲烷中的溶液并留待作用60分钟，通过在玻璃料上过滤去除树脂并将所述树脂用10ml的二氯甲烷洗涤三次。浓缩滤液并获得目标化合物作为粗制产物。
LC-MS(方法LC-MS(方法19)Rt＝2.10分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝)385.0[M+H]+. 实施例291A 聚合物结合的[N-叔丁氧基羰基-(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[N5-(亚氨基{[(2，2，5，7，8-五甲基-3，4-二氢-2H-色烯-6-基)磺酰基]氨基}-甲基)-D-鸟氨酰]-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[O3-叔丁基-L-丝氨酰]-O3-叔丁基-L-丝氨酸
将1g(0.62mmol)的Wang树脂(默克生物科学(Merck Biosciences)；负载0.62mmol/g)用O-叔丁基-N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-丝氨酸预先负载，用哌啶如下连续处理两次将所述树脂与10ml的20％的哌啶在二甲基甲酰胺中的溶液混合，振荡30分钟并通过吸滤收集。将以这种方式获得的树脂提供在10ml的二甲基甲酰胺中并加入477mg(1.24mmol)的示例性化合物290A，398mg(1.24mmol)的N-[(1H-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TBTU)和320mg(2.48mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤三次，每次分别用10ml的二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷，并通过吸滤收集。随后将所述固体用哌啶如下连续处理两次将所述树脂与10ml的20％的哌啶在二甲基甲酰胺中的溶液混合，振荡30分钟并通过吸滤收集。
将以这种方式获得的树脂提供在10ml的二甲基甲酰胺中，并加入423mg(1.24mmol)的N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-D-别苏氨酸，399mg(1.24mmol)的N-[(1H-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TBTU)和320mg(2.48mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤三次，每次分别用10ml的二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷并通过吸滤收集。随后将所述固体用哌啶如下连续处理两次将所述树脂与10ml的20％哌啶在二甲基甲酰胺中的溶液混合，振荡30分钟并通过吸滤收集。
将以这种方式获得的树脂提供在10ml的二甲基甲酰胺中，并加入438mg(1.24mmol)的N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-异亮氨酸，399mg(1.24mmol)的N-[(1H-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TBTU)和240mg(1.86mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤三次，每次分别用10ml的二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷并通过吸滤收集。随后将所述固体用哌啶如下连续处理两次将所述树脂与10ml的20％哌啶在二甲基甲酰胺中的溶液混合，振荡30分钟并通过吸滤收集。
将以这种方式获得的树脂提供在10ml二甲基甲酰胺中，并加入821mg(1.24mmol)的N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-N5-(亚氨基{[(2，2，5，7，8-五甲基-3，4-二氢-2H-色烯-6-基)磺酰基]氨基}甲基)-D-鸟氨酸，399mg(1.24mmol)的N-[(1H-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TBTU)和240mg(1.86mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤三次，每次分别用10ml的二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷并通过吸滤收集。随后将所述固体用哌啶如下连续处理两次将所述树脂与10ml的20％哌啶在二甲基甲酰胺中的溶液混合，振荡30分钟并通过吸滤收集。
将以这种方式获得的812mg(0.503mmol)的树脂提供在10ml的二甲基甲酰胺中，并加入370mg(1.01mmol)的N-[(9H-芴-9-基甲氧基)-羰基]-4-甲基-L-亮氨酸，323mg(1.01mmol)的N-[(1H-苯并三唑-1-基氧基)-(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TBTU)和195mg(1.51mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤三次，每次分别用10ml的二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷并通过吸滤收集。随后将所述固体用哌啶如下连续处理两次将所述树脂与10ml的20％哌啶在二甲基甲酰胺中的溶液混合，振荡30分钟并通过吸滤收集。
将以这种方式获得的树脂提供在10ml二甲基甲酰胺中，并加入157mg(0.633mmol)的N-(叔丁氧羰基)-(3R)-3-羟基-L-亮氨酸，203mg(0.633mmol)的N-[(1H-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TBTU)和196mg(1.52mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤三次，每次分别用二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷并通过吸滤收集。随后将所述固体用哌啶如下连续处理两次将所述树脂与10ml的20％哌啶在二甲基甲酰胺中的溶液混合，振荡30分钟并通过吸滤收集。
实施例292A 聚合物结合的[N-叔丁氧基羰基-(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-[3-三甲基甲硅烷基-L-丙氨酰]-[N5-(亚氨基{[(2，2，5，7，8-五甲基-3，4-二氢-2H-色烯-6-基)磺酰基]氨基}甲基)-D-鸟氨酰]-L-异亮氨酰-[O-叔丁基-L-别苏氨酰]-甘氨酰-[O3-叔丁基-L-丝氨酰]-O3-叔丁基-L-丝氨酸
将1g的Wang树脂(Rapp聚合物；负载1.28mmol/g)引入10ml的二甲基甲酰胺中。加入982mg(2.56mmol)的O-叔丁基-N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-丝氨酸，910mg(2.56mmol)的N-{[(6-氯-1H-苯并三唑-1-基)氧基](二甲基氨基)亚甲基}-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TCTU)和496mg(3.84mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤三次，每次分别用10ml的二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷并通过吸滤收集。随后将所述固体用哌啶如下连续处理两次将所述树脂与10ml的20％哌啶在二甲基甲酰胺中的溶液混合，振荡30分钟，并通过吸滤收集。
使用相同比率量并在所述条件下(直接见上)，进行与O-叔丁基-N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-丝氨酸的另外的偶联。
将以这种方式获得的树脂提供在10ml二甲基甲酰胺中，并加入761mg(2.56mmol)的N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]甘氨酸，910mg(2.56mmol)的N-{[(6-氯-1H-苯并三唑-1-基)氧基](二甲基氨基)亚甲基}-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TCTU)和496mg(3.84mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡5小时。通过吸滤收集所述固体，洗涤三次，每次分别用二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷并通过吸滤收集。随后将所述固体用哌啶如下连续处理两次将所述树脂与10ml的20％哌啶在二甲基甲酰胺中的溶液混合，振荡30分钟并通过吸滤收集。
将以这种方式获得的树脂提供在10ml二甲基甲酰胺中，并加入1.017g(2.56mmol)的O-叔丁基-N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-D-别苏氨酸，910mg(2.56mmol)的N-{[(6-氯-1H-苯并三唑-1-基)氧基](二甲基氨基)亚甲基}-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TCTU)和496mg(3.84mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤三次，每次分别用二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷并通过吸滤收集。随后将所述固体用哌啶如下连续处理两次将所述树脂与10ml的20％哌啶在二甲基甲酰胺中的溶液混合，振荡30分钟并通过吸滤收集。
将以这种方式获得的树脂提供在10ml二甲基甲酰胺中，并加入904mg(2.56mmol)的N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-L-异亮氨酸，822mg(2.56mmol)的N-{[(1H-苯并三唑-1-基)氧基](二甲基氨基)亚甲基}-N-甲基-甲铵四氟硼酸盐(TBTU)和496mg(3.84mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤三次，每次分别用二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷，并通过吸滤收集。随后将所述固体用哌啶如下连续处理两次将所述树脂与10ml的20％哌啶在二甲基甲酰胺中的溶液混合，振荡30分钟并通过吸滤收集。
将以这种方式获得的树脂提供在10ml二甲基甲酰胺中，并加入1.697g(2.56mmol)的N2-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-N5-(亚氨基{[(2，2，5，7，8-五甲基-3，4-二氢-2H-色烯-6-基)磺酰基]氨基}甲基)-D-鸟氨酸，822mg(2.56mmol)的N-[(1H-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TBTU)和662mg(5.12mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤三次，每次分别用10ml的二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷并通过吸滤收集。随后将所述固体用哌啶如下连续处理两次将所述树脂与10ml的20％哌啶在二甲基甲酰胺中的溶液混合，振荡30分钟并通过吸滤收集。
将以这种方式获得的树脂提供在10ml二甲基甲酰胺中，并加入982mg(2.56mmol)的N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-3-(三甲基甲硅烷基)-L-丙氨酸(allanine)，822mg(2.56mmol)的N-[(1H-苯并三唑-1-基氧基(二甲基氨基)-亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TBTU)和662mg(5.12mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤三次，每次分别用10ml的二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷并通过吸滤收集。随后将所述固体用哌啶如下连续处理两次将所述树脂与10ml的20％哌啶在二甲基甲酰胺中的溶液混合，振荡30分钟并通过吸滤收集。
将以这种方式获得的树脂提供在10ml二甲基甲酰胺中，并加入261mg(0.705mmol)的苏型N-(叔丁氧羰基)-(3R)-3-羟基-L-亮氨酸，339mg(1.057mmol)的N-[(1H-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(TBTU)和273mg(2.114mmol)的N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(DIEA)。将所述混合物在室温振荡过夜。通过吸滤收集所述固体，洗涤三次，每次用10ml的二甲基甲酰胺，甲醇和二氯甲烷并通过吸滤收集。
在下表中描述的化合物293A-458A根据指定的方法从指定的原材料制备。











去保护的八肽











保护的九肽














部分去保护的九肽














环化















环化产物的去保护















N-端二肽片段的连接



















实施例459A [(苯基磺酰基)(吡啶-3-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯
将吡啶-3-甲醛(5.36g，50mmol)，氨基甲酸叔丁酯(11.7g，100mmol，2当量)，苯亚磺酸钠(20.36g，124mmol，2.48当量)，甲酸(1.89ml，2.30g，1当量)，甲醇(55ml)和水(111ml)混合并在室温剧烈搅拌3天。沉淀无色晶体形式的产物，其通过过滤收集，用水和少量MTBE洗涤并在真空中干燥。产率4.10g(24％理论值)。
LC-MS(方法51)Rt＝2.51分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝349.3(100)[M+H]+. 实施例460A [(吡啶-3-基)亚甲基]氨基甲酸叔丁酯
将碳酸钾(4.78g，34mmol，6当量)在真空中加热干燥并用THF层(70mL)覆盖。将所述混合物加热到回流16小时，接着使其冷却并通过硅藻土层过滤。浓缩滤液并将油性残余物(1.33g的粗制产物，定量)进行反应不经过进一步的纯化。
实施例461A 外消旋-苏型-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-N2-(二苯基亚甲基)-3-吡啶-3-基-丙氨酸乙酯
所述反应基于将烯醇化铜加入磺酰亚胺的方法进行L.Bernardi，A.Gothelf，R.G.Hazell，K.A.

J.Org.Chem.(有机化学杂志)2003，68，2583-2591。[(1E)-苯基亚甲基]氨基甲酸叔丁酯可以根据文献进行制备A.Klepacz，A.Zwierzak，Tetrahedron Lett.(四面体通讯)200243；1079-1080。
将新鲜活化的3

分子筛，四(乙腈)六氟磷酸铜(I)(179mg，0.48mmol，0.1当量)和(R)-(+)-2-(2-(二苯基膦基)苯基)-4-苯基-2-噁唑啉(329mg，0.53mmol，0.11当量)在氩气下提供并加入无水THF(41ml)。接着，将三乙胺(67μl，49mg，0.48mmol，0.1当量)移入。将所述混合物冷却到-20℃并只要达到该温度，加入N-(二苯基亚甲基)甘氨酸乙酯(1.29g，4.81mmol)和示例性化合物459A(1.19g，5.77mmol，1.2当量)。将所述混合物搅拌16小时，在此过程中使其缓慢达到室温。接着加入硅胶(约15g)并将所述溶剂在真空中蒸馏除去。将所述残余物用环已烷-乙酸乙酯9+1进行色谱分离(具有ZIF-SIM35的Biotage 40M)。获得产率1.85g的标题化合物(95％纯，77％理论值)。
LC-MS(方法51)Rt＝3.55分钟MS(ESIpos)m/z(％)＝474.3(100)[M+H]+. 实施例462A 外消旋-苏型-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-3-吡啶-3-基-丙氨酸乙酯三氟乙酸盐
将来自实施例461A的标题化合物(350mg，0.74mmol)溶解于乙腈(9.33ml)并且加入187μl的TFA(2.42mmol，3.3当量)和水(187μl，10.4μmol，14当量)，将所述混合物在4℃静置16小时。将反应混合物的所有的挥发性成分在真空中蒸馏除去，并通过色谱法纯化所述残余物(方法34)。产率366mg(92％理论值)。
HPLC(方法6)Rt＝3.03分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.32分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝310.0(80)[M+H]+. HR-TOF-MSC15H24N3O4计算值310.1762，实测值310.1767[M+H]+. 实施例463A 外消旋-苏型-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-N2-(苄氧基)羰基氨基-3-吡啶-3-基-丙氨酸乙酯
将示例性化合物462A(366mg，0.68mmol)和苄氧基羰基琥珀酰亚胺(209mg，0.82mmol，1.2当量)溶解于5ml的二氯甲烷-水(4+1)，并将所述混合物冷却到0℃。在剧烈搅拌的同时，加入碳酸氢钠(86mg，1.03mmol，1.5当量)和四丁基溴化铵(11mg，34μmol，0.05当量)，并将所述混合物在室温剧烈搅拌16小时。分离除去有机相，用浓NaCl洗涤，通过硫酸钠干燥并浓缩。将所述粗制产物进行色谱分离(方法34)。产率314mg(84％纯度，0.60mmol，88％理论值)的标题化合物。
Rf＝0.076(CyHex-EtOAc9+1)。
HPLC(方法54)Rt＝4.33分钟(赤型非对映异构体)和4.52分钟(苏型非对映异构体)。
LC-MS(方法19)Rt＝2.71分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝409.3(30)[M+H]+，赤型异构体和Rt＝2.75分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝409.0(70)[M+H]+苏型异构体)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)＝0.71-0.86(m，6H)，1.16(t，J＝7.1Hz，3H)，1.34(s，9H)，1.59(m，1H)，3.70(ddd，J＝3.4，J1＝J2＝10.3Hz，1H)，3.99-4.08(m，2H)，4.32(dd，J＝3.4，J＝9.5Hz，1H)，5.03(d，J＝12.4Hz，1H)，5.10(d，J＝12.4Hz，1H)，6.62(d，J＝10.5Hz，1H)，7.31-7.40(m，5H)，7.44(d，J＝9.3Hz，1H)。
HR-TOF-MSC21H33N2O6计算值409.2334，实测值409.2329[M+H]+. 实施例464A (3R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-N2-(苄氧基)羰基氨基-3-吡啶-3-基-L-丙氨酸
在0℃，将来自实施例463A的标题化合物(314mg，0.56mmol)溶解于THF-水混合物(2+1，17ml)，加入一水合氢氧化锂(25mg，0.59mmol，1.1当量)并将所述混合物0℃搅拌3小时。接着将THF蒸馏除去，并冷冻干燥水性残余物，接着通过色谱法(方法44)进行纯化。根据方法58，通过在手性相上的色谱法分离所述产物。由此分别单独获得苏型非对映异构体的对映异构体和少量赤型非对映异构体的那些。在手性色谱法后，通过方法59确定主要异构体(标题化合物)的e.e.，其是100％。标题化合物的产率是113mg(38％理论值基于起始化合物463A。
HPLC(方法6)Rt＝3.53分钟。
手性HPLC(方法59)Rt＝4.71分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.85分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝416.2(100)[M+H]+，MS(ESIneg)m/z(％)＝414.1.2(100)[M-H]-. HR-TOF-MSC21H26N3O6计算值416.1817，实测值416.1808[M+H]+. 实施例465A (3R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-N2-(苄氧基)羰基氨基-3-吡啶-3-基-L-丙氨酸五氟苯酯
将示例性化合物464A(63mg，119μmol)和五氟苯酚(24mg，131μmol，1.1当量)在室温溶解于二氯甲烷(0.8ml)并接着加入EDCI(25mg，131μmol，1.1当量)，将所述混合物在冰箱中静置约12小时。将所述溶剂随后在真空中蒸馏除去，并将所述残余物通过色谱法进行纯化(方法44)。获得产率为47mg(51％理论值)的标题化合物，其为无色的固体。
HPLC(方法54)Rt＝4.49分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝2.74分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝582.2(40)[M+H]+. HR-TOF-MSC27H25N3O6F5计算值582.1659，实测值582.1647[M+H]+. 在下列表中列出的化合物466A-470A通过指定的方法从指定的原材料进行制备。




示例性实施方案 实施例1 [3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺双三氟乙酸盐
在1小时后，根据操作方法4通过氢解作用，在二噁烷和0.1％TFA水溶液(1ml，10当量)中，将保护基从苄氧基羰基-保护的肽(实施例53A，1.5mg，0.89μmol)去除。在通过制备HPLC精制后(方法26)获得1.3mg(96.6％理论值)的产物。
备选地，使用0.1N盐酸(508μl，1.9mg，50.79μmol，6当量)，在甲醇中(5ml)，在酯的氢解裂解(操作方法4)后，胺(实施例1)从实施例58A(13.0mg，8.47μmol)的化合物中释放出来。在色谱法(方法26)后，分离12.0mg(93.5％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法9)Rt＝14.73分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.71分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1288(3)[M+H]+，644(100)[M+2H]2+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1286(50)[M-H]-，642(38)[M-2H]2-，1332(100)。
HR-TOF-MS(方法24)C60H103N16O15[M+H]+实测值1287.7810，计算值1287.7784. 实施例2 D-亮氨酰-L-亮氨酰-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺双三氟乙酸盐
在甲醇(10ml)中和0.1N盐酸水溶液(219μl，0.8mg，21.89μmol，1当量)中，在氢化酯裂解(操作方法4)后，将标题化合物制备自苄氧基羰基-保护的肽(实施例73A，33.0mg，21.89μmol)。通过制备HPLC(方法26)进行精制并分离18.1mg(56.1％理论值)的产物。
HPLC(方法9)Rt＝14.15分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.52分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1259(5)[M+H]+，630(100)[M+2H]2+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1257(100)[M-H]-，628(28)[M-2H]2-. HR-TOF-MS(方法24)C58H100N16O15[M+H]+实测值1259.7454，计算值1259.7471. 实施例3 [3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-鸟氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺双三氟乙酸盐
在甲醇(10ml)中和0.1N盐酸水溶液(198μl，0.7mg，19.8μmol，1.5当量)中，在氢化酯裂解(操作方法4)后，将标题化合物制备自苄氧基羰基-保护的肽(实施例81A，20.0mg，13.21μmol)。通过制备HPLC(方法26)进行精制并分离17.9mg(91.9％理论值)的产物。
HPLC(方法9)Rt＝15.51分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.57分钟；MS(ESIpos)m/z(％)＝1245(13)[M+H]+，623(100)[M+2H]2+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1243(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C59H102N14O15[M+H]+实测值1245.7560，计算值1245.7566. 实施例4 [3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-O-甲基-L-酪氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺双三氟乙酸盐
将实施例112A的化合物(23mg，14.5μmol)，根据操作方法5进行反应。在以制备HPLC的方式通过色谱法纯化(方法43)后，通过冷冻干燥获得17mg(75％理论值)的产物。
HPLC/UV-Vis(方法5)Rt＝3.69分钟。
HPLC/UV-Vis(方法4)Rt＝3.95分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.71分钟；MS(ESIpos.)m/z(％)＝667(100)[M+2H]2+，1333(2)[M+H]+；MS(ESIneg.)m/z(％)＝1331(100)[M-H]-. 实施例5 [3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-4-(二甲基氨基苯基)-L-丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺三(三氟乙酸盐)
将实施例128A的化合物(105mg，66％纯度，41μmol)溶解于在二氯甲烷中的30％的TFA(4ml)并在室温搅拌20分钟。接着将所述混合物在真空中浓缩并将所述残余物通过色谱法纯化(方法44，具有改变的梯度0-2分钟10％ B，斜度，38分钟60％B)。获得49mg(29μmol，70％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法7)Rt＝3.62分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.72分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝450.0(100)[M+3H]3+，674.4(40)[M+2H]2+. HR-TOF-MS(方法24)C62H108N17O16[M+H]+计算值1346.8155，实测值1346.8130. 实施例6 [3-三甲基甲硅烷基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-4-(二甲基氨基苯基)-L-丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺三(三氟乙酸盐)
将实施例133A的化合物(126mg，82μmol)溶解于在二氯甲烷中的30％的TFA(4ml)并在室温搅拌20分钟。接着将所述混合物在真空中浓缩并将所述残余物通过色谱法纯化(方法44，具有改变的梯度0-2分钟10％B，斜度，38分钟60％ B)。获得78mg(46μmol，56％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法7)Rt＝3.69分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.66分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝682.3(100)[M+2H]2+，1364.1(2)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C61H108N17O16Si[M+H]+计算值1362.7924，实测值1362.7949. 实施例7 D-苯基丙氨酰-L-苯基丙氨酰-[(3R)-3-氨基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺双三氟乙酸盐
如在操作方法1中所述，目标化合物制备自实施例144A的化合物(0.3mg，0.20μmol)。在精制后通过凝胶色谱法(方法45，洗脱剂甲醇)，分离0.1mg(23.3％理论值)的产物。
HPLC(方法12)Rt＝5.74分钟。
LC-MS(方法18)Rt＝1.57分钟，MS(ESIpos.)m/z(％)＝1268(2)[M+H]+，634(100)[M+2H]2+；MS(ESIpos.)m/z(％)＝1266(50)[M-H]-，632(22)[M-2H]2-，1312(100)[M-H+HCO2H]-. MALDI-MS(方法25)C58H92N16O16[M+H]+计算值1267.68，实测值1267.65. 实施例8 [3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-丝氨酰-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺双三氟乙酸盐
将实施例233A的化合物(4mg，3μmol)溶解于甲醇(1ml)。加入17μl的1M盐酸和10％披钯碳(2mg)，并在室温将所述混合物在大气压下氢化2小时。过滤溶液以去除催化剂并浓缩。在通过色谱法纯化后(方法44)获得2.2mg(1.5μmol，53％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝4.45分钟。
LC-MS(方法20)Rt＝1.45分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝631.1(100)[M+2H]2+，1260.9(3)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C59H102N15O15计算值1260.7675，实测值1260.7670[M+H]+. 实施例9 [3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[3-(3-吡啶基)-L-丙氨酰]-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺三(三氟乙酸盐)
根据制备实施例233A的化合物的方法，从实施例226A的化合物(12mg，13μmol)获得产率为4mg(32％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.60分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.43分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝661.5(100)[M+2H]2+，1321.8(10)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C64H105N16O14计算值1321.7991，实测值1321.7955[M+H]+. 实施例10 [3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-苯基丙氨酰-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺双三氟乙酸盐
根据通用方法2，实施例235A的化合物与1ml的试剂溶液进行反应1小时，并将所述产物根据改进的方法44(梯度0分钟25％ B，斜度，35-38分钟35％ B)进行纯化。获得产率为10mg(50％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.41分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.57分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝661.1(100)[M+2H]2+，1320.8(5)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝1318.6(90)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C65H106N15O14计算值1320.8039，实测值1320.8042[M+H]+. 实施例11 [3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[L-苏氨酰]-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺双三氟乙酸盐
根据通用方法2，将实施例236A的化合物与1ml的试剂溶液进行反应30分钟，并根据方法44纯化所述产物。获得产率为3mg(27％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.73分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.53分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝638.0(100)[M+2H]2+. HR-TOF-MS(方法24)C60H103N15O15计算值1274.7831，实测值1274.7827[M+H]+. 实施例12 [3-叔丁基-D-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-别苏氨酰-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺双三氟乙酸盐
将实施例237A的化合物(47mg，24μmol)，根据通用方法2与1ml的试剂溶液反应30分钟，并根据方法44纯化所述产物。获得产率为21mg(57％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝3.43分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.52分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝638.1(100)[M+2H]2+；MS(ESIneg)m/z(％)＝1273.6[M]-. HR-TOF-MS(方法24)C60H103N15O15计算值1274.7831，实测值1274.7800[M+H]+. 实施例13 [3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-丙氨酰-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺双三氟乙酸盐
根据通用方法2，将实施例238A的化合物与1ml的试剂溶液反应30分钟，并根据方法44纯化所述产物。接着进行进一步的精制柱WatersSymmetry-PrepTM C-18，7μm，300mm x 19mm；洗脱剂A水+0.05％TFA，洗脱剂B乙腈+0.05％ TFA流速10ml/分钟；AB65/35等度.获得产率为8mg(20％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.71分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.49分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝623.2(100)[M+2H]2+. HR-TOF-MS(方法24)C59H101N15O14计算值1244.7726，实测值1244.7748[M+H]+. 实施例14 [3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-丝氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺双三氟乙酸盐
根据通用方法2，将实施例239A的化合物与1ml的试剂溶液反应1小时，并根据方法44纯化所述产物。接着进行进一步的精制柱WatersSymmetry-PrepTM C-18，7μm，300mm x 19mm；洗脱剂A水+0.05％TFA，洗脱剂B乙腈+0.05％ TFA流速10ml/分钟；AB 65/35等度.获得产率为9mg(6μmol，35％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.63分钟。
LC-MS(方法19)Rt＝1.43分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝643.7(100)[M+2H]2+，1289.8(10)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C59H101N16O16计算值1289.7576，实测值1289.7578[M+H]+. 实施例15 [3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-L-天冬酰胺酰-L-丝氨酸-C1.11-N3.3-内酰胺-双三氟乙酸盐
根据通用方法2，将实施例240A的化合物与1ml的试剂溶液反应1小时，并将所述产物根据方法44纯化数次。获得产率为1.1mg(6μmol，3.5％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法5)Rt＝3.41分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.90分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝645(100)[M+2H]2+，1288(10)[M+H]+. HR-TOF-MS(方法24)C60H103N16O15计算值1287.7784，实测值1287.7786[M+H]+. 实施例16 [3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-甘氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丙氨酸C1.11-N3.3-内酰胺双三氟乙酸盐
根据通用方法2，将实施例253A的化合物与2ml的试剂溶液反应1小时，并根据方法44纯化所述产物。根据改进的方法34(使用洗脱剂A:洗脱剂B 3:2；等度而非梯度)精制产物。获得产率为22mg(36％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝3.43分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.90分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝645(100)[M+2H]2+，1288(60)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝1286(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C60H103N16O15计算值1287.7784，实测值1287.7800[M+H]+. 实施例17 [3-叔丁基-D-丙氨酰]-[3-叔丁基-L-丙氨酰]-[(3R)-3-氨基-L-苯基丙氨酰]-[(3R)-3-羟基-L-亮氨酰]-L-亮氨酰-D-精氨酰-L-异亮氨酰-L-别苏氨酰-D-丙氨酰-[(3S)-3-羟基-L-天冬酰胺酰]-L-丝氨酸C1.11-N3.3-内酰胺双三氟乙酸盐
将实施例267A的化合物(34mg的粗制产物，约6μmol)，根据通用方法2与1ml的试剂溶液反应30分钟。根据方法33，通过色谱法2次，获得纯的产物。获得产率为6mg(65％理论值)的标题化合物。
HPLC(方法6)Rt＝3.42分钟。
LC-MS(方法22)Rt＝2.90分钟，MS(ESIpos)m/z(％)＝660(100)[M+2H]2+，1317.8(10)[M+H]+；MS(ESIneg)m/z(％)＝1315.8(100)[M-H]-. HR-TOF-MS(方法24)C61H105N16O16计算值1317.7889，实测值1317.7892[M+H]+. 在下面的表中显示的化合物19-44根据指定的方法从指定的原材料进行制备。


















B.生理活性的评价 可以在下列测定中显示本发明化合物的体外活性 最低抑制浓度(MIC)的测定 根据NCCLS准则在液体稀释试验中测定MIC。将金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)133、屎肠球菌(Entercococcus.faecalis)27159、粪肠球菌(E.faecium)4147和肺炎链球菌(S.pneumoniae)G9a的过夜培养物在1:2的稀释系列中与所述的测试物质温育。用Isosensitest培养基(Difco，Irvine/USA)中每ml细胞数为105个微生物进行MIC测定，除肺炎链球菌在含有10％牛血清的BHI肉汤(Difco，Irvine/USA)中以每ml细胞数为106微生物以外。将所述培养物在37℃温育18-24小时，肺炎链球菌在10％ CO2的存在下。
将不再有可见的细菌生长发生时每种物质的最低物质浓度定义为MIC。MIC的值以μg/ml报道。
在表A中显示了本发明化合物的典型体外活性数据 表A 可以在下列动物模型中显示本发明化合物对于细菌感染治疗的适合性 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)133的全身感染 将金黄色葡萄球菌(S.aureus)133的细胞在BHI肉汤(Oxoid，纽约/USA)中过夜培养。将过夜的培养物在新鲜BHI肉汤中1:100稀释并温育3小时。将当时在对数生长期中的细胞离心出并用缓冲的生理盐水洗涤两次。然后将盐水中的细胞悬浮液光度测定地调节到50个消光单位。在稀释步骤(1:15)后，将所述悬浮液与10％粘蛋白溶液1:1混合。腹膜内给药0.25ml/20g小鼠的该感染溶液(相当于1×106微生物/小鼠)。在感染后30分钟在腹膜内或静脉内进行治疗。将雌性CFW1小鼠用于感染实验。在6天的时期内记录所述动物的存活率。
本发明化合物的肾耐受性的性质可以在下列动物模型中显示 用于测定肾毒性作用的小鼠模型 通过组织学观察在多次给药具体剂量后的小鼠的肾来分析九酯肽的肾毒性副作用。为此，用溶解在水溶液或加入Solutol的物质每日静脉内(i.v.)或腹膜内(i.p.)处理5-6只动物。通过光学显微镜评估肾脏的苏木精和曙红(H&E)染色石蜡切片来确定肾毒性作用。任选地进行′高碘酸Schiff(PAS)反应来更好地显示糖蛋白。作为管型嗜碱粒细胞增多和变性/再生发生的严重程度(严重程度0＝无作用；1＝最小作用；2＝轻微作用；3＝中度作用；4＝严重损伤)，对于每只动物半定量地确定肾毒性作用。每个动物组或衍生系计算管型变性/再生的平均严重程度和发生率(涉及的动物的数目)。超出此的肾脏变化，如管膨胀和坏死以及坏死物质的累积也被列出。
确定肾毒性作用的大鼠模型 在多次给药具体剂量后，通过大鼠中肾的组织病理学检查分析九酯肽的肾毒性作用。为此目的，用溶解于盐水或Ringer’s乳酸盐溶液的物质每日静脉内(i.v.)处理5只动物。通过光学显微镜评估肾脏的苏木精和曙红(H&E)染色石蜡切片来确定肾毒性作用。任选地进行′高碘酸Schiff(PAS)反应来更好地显示糖蛋白。作为管型嗜碱粒细胞增多和变性/再生发生的严重程度(严重程度0＝无作用；1＝最小作用；2＝轻微作用；3＝中度作用；4＝严重损伤)，对于每只动物半定量地确定肾毒性作用。每个动物组或衍生系计算管型变性/再生的平均严重程度和发生率(涉及的动物的数目)。超出此的肾脏变化，如管膨胀和坏死以及坏死物质的累积也被列出。
通过Transil确定游离级分的原理 本文所述的确定测试物质的游离级分(fu)的方法被分为两部分 a)通过将测试物质在

-缓冲液(pH 7.4)分散体中温育并随后确定在分散体和缓冲液上清液中的浓度来确定

/缓冲液分布比率(MA缓冲液)。
b)通过将测试物质在

-血浆分散体中温育并随后确定在分散体和血浆中的浓度来确定

血浆分布比率(MA血浆)。
两个分布比率的商产生fu。
在高度蛋白质结合物质的情形中，通常将血浆用等度的磷酸盐缓冲液(pH 7.4)稀释并随后用

悬浮。以类似于确定fu的方式进行在该稀释的蛋白溶液中的fu′(在稀释的血浆中的游离级分)的确定。从fu′和稀释因子计算在未稀释的血浆中的游离级分。
关于该方法，还参考Schuhmacher，Joachim；Kohlsdorfer，Christian；Buehner，Klaus；Brandenburger，Tim；Kruk，Renate，“High-throughputdetermination of free fraction of drugs strongly bound to plasma proteins(与血浆蛋白强结合的药物的游离级分的高通量的确定)。”Journal ofPharmaceutical Sciences(药物科学杂志)2004，93，816-830。
在分布在

和缓冲液(MAbuffer)后确定测试物质的膜亲和性 在适合的玻璃容器，例如玻璃瓶，圆底(ground-socket)的试管中进行所有的温育。总体积通常是0.5-5ml，

体积是10-100μl。如果预期高膜亲和性，可以将

分散体用磷酸盐缓冲液，pH 7.4例如Dulbecco’s PBS稀释到多达20倍。将pH 7.4的磷酸盐缓冲液提供在温育容器中并将

在彻底混合后吸移进去。将测试物质以例如200ng/ml的浓度吸移，n＝6。有机溶剂的比例应该是≤2％。将所述混合物在室温温育30分钟，例如在微型振荡器上，以约45°的角度，在约400rpm上进行。为了测定100％的值，去除例如，100μl的至少一等分试样，并在约1800g将剩余的混合物离心约10分钟。从每个样品移去至少2个等分试样(例如100μl)的上清液用于确定浓度。
在未稀释或稀释的血浆中测定MA血浆 总的温育体积和加入的

的体积取决于预期的游离级分。总体积通常是0.5-1ml，

体积是10-100μl。如果游离级分非常低，用等度的缓冲液溶液pH 7.4稀释待研究的物种的血浆，例如10-400倍，接着加入

如上所述进行随后的方法以测定MA缓冲液值。
通过超滤测定游离级分的原理 通过半透膜过滤待研究的物种的血浆。测量滤液中的物质浓度并且从中计算游离级分fu。使用来自Millipore/Amicon的Centrifree微分区(micropartition)系统。超滤膜具有30000Da截断值。将1ml的血浆掺入约1μg/ml浓度的物质。溶剂比率应该是<2％。在室温温育30分钟后，将血浆移入超滤系统并在1800g离心10分钟。测量在超滤液中的物质浓度(Cu；未结合的物质浓度)和在离心前在血浆中的物质浓度(C；总物质浓度)。根据公式fu(％)＝Cu/C*100计算游离级分。
在稍碱性的水溶液中确定化学稳定性 将0.3mg的测试物质溶解于0.25ml的乙腈，0.25ml的DMSO和0.5ml的pH 7.8的缓冲液(由111mg(1mmol)的氯化钙，7.91g(100mmol)的碳酸氢铵，100ml的乙腈加到1000ml组成)的混合物并留待在室温静置。从溶液中一小时一次地取出5μl等分试样并通过HPLC(方法57)分析。将通过UV吸光度(IE)显示的0小时的测试化合物的浓度设定为100％，并随时间观察到减少。同时，在观察到开环降解产物的增加。
该测定提供在图1-5中显示的结果。从所述曲线显而易见的是本发明的化合物在碱性水溶液中明显地比溶杆菌素更稳定。
C. 药物组合物的例举性实施方案 本发明的化合物可以以下列方式转化成药物制剂 片剂 组成 100mg实施例1的化合物，50mg乳糖(一水合物)，50mg玉米淀粉(天然的)，10mg聚乙烯吡咯烷酮(PVP25)(BASF，Ludwigshafen，德国)和2mg硬脂酸镁。
片剂重量212mg。直径8mm，曲率半径12mm。
制备 将活性化合物、乳糖和淀粉的混合物用水中的5％PVP溶液(m/m)造粒。将所述粒剂干燥然后与硬脂酸镁混合5分钟。将该混合物用常规压片机挤压(参见上面用于片剂的形式)。用于压缩的压缩力指标是15kN。
可以口服给药的混悬剂 组成 1000mg实施例1的化合物，1000mg乙醇(96％)，400mg的Rhodigel(来自FMC的黄原胶，宾夕法尼亚，USA)和99g水。
10ml的口服混悬剂对应于100mg本发明化合物的单一剂量。
制备 将Rhodigel悬浮在乙醇中，并将所述活性化合物加入到所述混悬液。搅拌的同时加入水。将所述混合物搅拌约6小时直到Rhodigel的溶胀是完全的。
可以静脉内给药的溶液剂 组成 100-200mg实施例1的化合物，15g聚乙二醇400和250g注射用水。
制备 在搅拌下将实施例1的化合物和聚乙二醇400一起溶解在水中。通过过滤(孔径0.22μm)将所述溶液消毒并在无菌条件下分配到热灭菌的输液瓶中。将后者用输注塞和卷曲帽封闭。
权利要求
1.下式的化合物
其中
R1表示2-甲基丙-1-基，2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基，苄基，2-吡啶基甲基，3-吡啶基甲基，2-噻吩基甲基，3-噻吩基甲基或1，3-噻唑-4-基甲基，
其中苄基，2-吡啶基甲基，3-吡啶基甲基，2-噻吩基甲基，3-噻吩基甲基和1，3-噻唑-4-基甲基可以被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，三氟甲基，甲基和甲氧基，
R2表示2-甲基丙-1-基，2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基，苄基，2-吡啶基甲基，3-吡啶基甲基，2-噻吩基甲基，3-噻吩基甲基或1，3-噻唑-4-基甲基，
其中苄基，2-吡啶基甲基，3-吡啶基甲基，2-噻吩基甲基，3-噻吩基甲基和1，3-噻唑-4-基甲基可以被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，三氟甲基，甲基和甲氧基，
R3表示氢，C1-C4-烷基，C3-C7-环烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基或5-或6-元杂芳基甲基，
其中环烷基，环烷基甲基，苯基，苄基，杂芳基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基，C1-C4-烷基氨基羰基和通过氮结合的5-或6-元杂环基，
R4表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基，5-或6-元杂芳基甲基，三甲基甲硅烷基甲基或2-氨基-2-氧代乙基，
其中烷基可以被1-3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基，
并且
其中环烷基，环烷基甲基，苯基，苄基，杂芳基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基，
R5表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基，5-或6-元杂芳基甲基，三甲基甲硅烷基甲基或2-氨基-2-氧代乙基，
其中烷基可以被1-3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基，
并且
其中环烷基，环烷基甲基，苯基，苄基，杂芳基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基，
R6表示C1-C6-烷基，其中烷基被选自由下列组成的组的取代基取代氨基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基，[氨基-(亚氨基)甲基]氨基，2-吡啶基，3-吡啶基和4-吡啶基，
R7表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基，5-或6-元杂芳基甲基或三甲基甲硅烷基甲基，
其中烷基可以被1-3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基，
并且
其中环烷基，环烷基甲基，苯基，苄基，杂芳基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基，
R8表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基，5-或6-元杂芳基甲基，三甲基甲硅烷基甲基或2-氨基-2-氧代乙基，
其中烷基可以被1-3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基，
并且
其中环烷基，环烷基甲基，苯基，苄基，杂芳基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基，
R9表示氢，C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基，5-或6-元杂芳基甲基，三甲基甲硅烷基甲基或2-氨基-2-氧代乙基，
其中烷基可以被1-3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基，
并且
其中环烷基，环烷基甲基，苯基，苄基，杂芳基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基，
R10表示氢，C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基，5-或6-元杂芳基甲基，三甲基甲硅烷基甲基，2-氨基-2-氧代乙基，2-氨基-1-羟基-2-氧代乙基，(氨基磺酰基)(羟基)甲基，2-(C1-C4-烷基氨基)-2-氧代乙基或2-(C1-C4-烷基氨基)-1-羟基-2-氧代乙基，
其中烷基可以被选自由下列组成的组的取代基取代卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基，
并且
其中环烷基，环烷基甲基，苯基，苄基，杂芳基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基，
R11表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基，5-或6-元杂芳基甲基，三甲基甲硅烷基甲基，2-氨基-2-氧代乙基，2-氨基-1-羟基-2-氧代乙基，(氨基磺酰基)(羟基)甲基，2-(C1-C4-烷基氨基)-2-氧代乙基或2-(C1-C4-烷基氨基)-1-羟基-2-氧代乙基，
其中烷基可以被选自由下列组成的组的取代基取代卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基，
并且
其中环烷基，环烷基甲基，苯基，苄基，杂芳基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基，
或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种，
不包括下式的化合物
其中
R1表示2-甲基丙-1-基，2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基，苄基，2-吡啶基甲基，3-吡啶基甲基，2-噻吩基甲基，3-噻吩基甲基或1，3-噻唑-4-基甲基，
其中苄基，2-吡啶基甲基，3-吡啶基甲基，2-噻吩基甲基，3-噻吩基甲基和1，3-噻唑-4-基甲基可以被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，三氟甲基，甲基和甲氧基，
R2表示2-甲基丙-1-基，2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基，苄基，2-吡啶基甲基，3-吡啶基甲基，2-噻吩基甲基，3-噻吩基甲基或1，3-噻唑-4-基甲基，
其中苄基，2-吡啶基甲基，3-吡啶基甲基，2-噻吩基甲基，3-噻吩基甲基和1，3-噻唑-4-基甲基可以被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，三氟甲基，甲基和甲氧基，
并且
R12表示氢或甲基，
或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
2.根据权利要求1的化合物，其特征在于
R10表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基，5-或6-元杂芳基甲基，三甲基甲硅烷基甲基，2-氨基-2-氧代乙基，2-氨基-1-羟基-2-氧代乙基，(氨基磺酰基)(羟基)甲基，2-(C1-C4-烷基氨基)-2-氧代乙基或2-(C1-C4-烷基氨基)-1-羟基-2-氧代乙基，
其中烷基可以被选自由下列组成的组的取代基取代卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基，
并且
其中环烷基，环烷基甲基，苯基，苄基，杂芳基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基，
或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
3.根据权利要求1或2的化合物，其特征在于
R1表示2-甲基丙-1-基，2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基，苄基，2-吡啶基甲基或3-吡啶基甲基，
其中苄基，2-吡啶基甲基和3-吡啶基甲基可以被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，三氟甲基和甲基，
R2表示2-甲基丙-1-基，2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基，苄基，2-吡啶基甲基或3-吡啶基甲基，
其中苄基，2-吡啶基甲基和3-吡啶基甲基可以被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，三氟甲基和甲基，
R3表示C1-C4-烷基，苯基，苄基，2-吡啶基，3-吡啶基或4-吡啶基，
其中苯基，苄基，2-吡啶基，3-吡啶基和4-吡啶基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-烷基氨基，
R4表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基甲基，苄基，5-或6-元杂芳基甲基或三甲基甲硅烷基甲基，
其中烷基可以被羟基取代基取代，
并且
其中环烷基甲基，苄基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基，
R5表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基甲基或三甲基甲硅烷基甲基，
其中烷基可以被选自由下列组成的组的取代基取代卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基，
并且
其中环烷基甲基，苯基，苄基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-烷基氨基，
R6表示C1-C6-烷基，
其中烷基被选自由下列组成的组的取代基取代氨基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基，[氨基-(亚氨基)甲基]氨基，2-吡啶基，3-吡啶基和4-吡啶基，
R7表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基甲基，苯基，苄基，5-或6-元杂芳基甲基或三甲基甲硅烷基甲基，
其中烷基可以被选自由下列组成的组的取代基取代卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基，
并且
其中环烷基甲基，苯基，苄基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-烷基氨基，
R8表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基甲基，苄基，5-或6-元杂芳基甲基或三甲基甲硅烷基甲基，
其中烷基可以被羟基取代基取代，
并且
其中环烷基甲基，苄基和杂芳基甲基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷基氨基，羟基羰基，C1-C4-烷氧基羰基，氨基羰基和C1-C4-烷基氨基羰基，
R9表示氢，C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，苯基，三甲基甲硅烷基甲基或2-氨基-2-氧代乙基，
其中甲基可以被选自由下列组成的组的取代基取代羟基，氨基和巯基，
并且
其中环烷基和苯基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-烷基氨基，
R10表示氢，C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，苯基，三甲基甲硅烷基甲基，2-氨基-2-氧代乙基，2-氨基-1-羟基-2-氧代乙基，(氨基磺酰基)(羟基)甲基，2-(C1-C4-烷基氨基)-2-氧代乙基或2-(C1-C4-烷基氨基)-1-羟基-2-氧代乙基，
其中烷基可以被选自由下列组成的组的取代基取代卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基，
并且
其中环烷基和苯基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-烷基氨基，
R11表示甲基或乙基，
其中甲基和乙基可以被选自由下列组成的组的取代基取代羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基，
或其盐、其溶剂合物、或其盐的溶剂合物中的一种，
不包括式(Ia)的化合物，其中
R1表示2-甲基丙-1-基，2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基，苄基，2-吡啶基甲基或3-吡啶基甲基，
其中苄基，2-吡啶基甲基和3-吡啶基甲基可以被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，三氟甲基和甲基，
R2表示2-甲基丙-1-基，2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基，苄基，2-吡啶基甲基或3-吡啶基甲基，
其中苄基，2-吡啶基甲基和3-吡啶基甲基可以被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，三氟甲基和甲基，
并且
R12表示氢或甲基，
或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
4.根据权利要求3的化合物，其特征在于
R1表示2-甲基丙-1-基，2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基或苄基，
其中苄基可以被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，三氟甲基和甲基，
或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
5.根据权利要求3或4的化合物，其特征在于
R3表示苯基，苄基，2-吡啶基，3-吡啶基或4-吡啶基，
其中苯基，苄基，2-吡啶基，3-吡啶基和4-吡啶基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-烷基氨基，
或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
6.根据权利要求3-5中任一项的化合物，其特征在于
R10表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基，苯基，三甲基甲硅烷基甲基，2-氨基-2-氧代乙基，2-氨基-1-羟基-2-氧代乙基，(氨基磺酰基)-(羟基)甲基，2-(C1-C4-烷基氨基)-2-氧代乙基或2-(C1-C4-烷基氨基)-1-羟基-2-氧代乙基，
其中烷基可以被选自由下列组成的组的取代基取代卤素，羟基，氨基，巯基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基，
并且
其中环烷基和苯基可以被1-4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，羟基，氨基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-烷基氨基，
或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
7.根据权利要求1-6中任一项的化合物，其特征在于
R1表示2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基或3-吡啶基甲基，
R2表示2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基或3-吡啶基甲基，
R3表示C1-C4-烷基，3-吡啶基或苯基，
其中3-吡啶基或苯基可以被选自由下列组成的组的取代基取代卤素，氰基，甲基，甲氧基，二甲基氨基和二乙基氨基，
R4表示-CH(OH)-C1-C5-烷基或-CH(OH)苯基，
其中-CH(OH)苯基可以被1-3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-二烷基氨基，
R5表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基甲基，苄基或三甲基甲硅烷基甲基，
R6表示直链C2-C4-烷基，
其中烷基被选自由下列组成的组的取代基取代氨基，1，4，5，6-四氢嘧啶-2-基氨基和[氨基(亚氨基)甲基]氨基，
R7表示C1-C6-烷基，C3-C7-环烷基甲基，苄基或三甲基甲硅烷基甲基，
R8表示C1-C4-烷基，-CH2-OH，-CH(OH)-C1-C5-烷基或-CH(OH)-苯基，
其中-CH(OH)苯基可以被1-3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-二烷基氨基，并且
R9表示氢，C1-C6-烷基，羟基甲基或2-氨基-2-氧代乙基，
R10表示氢，C1-C4-烷基，2-氨基-2-氧代乙基或2-氨基-1-羟基-2-氧代乙基，
其中C1-C4-烷基可以被选自由下列组成的组的取代基取代氨基和羟基，除了R10不是4-氨基丁-1-基以外，
R11表示甲基，
其中甲基被选自由下列组成的组的取代基取代羟基和氨基，
或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种，
不包括式(Ia)的化合物，其中
R1表示2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基或3-吡啶基甲基，
R2表示2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基，三甲基甲硅烷基甲基或3-吡啶基甲基，
并且
R12表示氢或甲基，
或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
8.根据权利要求7的化合物，其特征在于
R1表示2，2-二甲基丙-1-基，2，2-二甲基丁-1-基或三甲基甲硅烷基甲基，
或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
9.根据权利要求7或8的化合物，其特征在于
R2表示2，2-二甲基丙-1-基或3-吡啶基甲基，
或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
10.根据权利要求7-9中任一项的化合物，其特征在于
R3表示苯基，
其中苯基可以被选自由下列组成的组的取代基取代卤素，氰基，甲基，甲氧基，二甲基氨基和二乙基氨基，
或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
11.根据权利要求7-10中任一项的化合物，其特征在于
R8表示-CH(OH)-C1-C5-烷基或-CH(OH)苯基，
其中-CH(OH)苯基可以被1-3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自由下列组成的组卤素，氰基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基和C1-C4-二烷基氨基，和
或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
12.根据权利要求7-11中任一项的化合物，其特征在于
R10表示甲基，乙基，2-氨基-2-氧代乙基或2-氨基-1-羟基-2-氧代乙基，
其中甲基和乙基可以被羟基取代基取代，
或其盐、其溶剂合物或其盐的溶剂合物中的一种。
13.制备根据权利要求1的式(I)的化合物的方法，其特征在于
[A]使式(II)的化合物
其中
R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10和R11具有权利要求1中指定的含义，首先与式(III)的化合物反应，
其中
R1和R2具有权利要求1中指定的含义，
Y1表示叔丁氧羰基或苄氧基羰基，并且
X1表示卤素，优选地溴、氯或氟，或羟基，
并且
随后与酸反应和/或通过氢解反应，
或
[B]使下式的化合物，
其中
R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10和R11具有权利要求1中指定的含义，首先与下式的化合物反应，
其中
R1，R2和R3具有权利要求1中指定的含义，并且
Y1表示叔丁氧羰基或苄氧基羰基，
和随后在4步合成中
a)与氟化物试剂如氟化四丁基铵反应，
b)与酸反应，
c)与脱水剂，在适合时在碱存在下反应，
和
d)通过氢解反应。
14.根据权利要求13的方法，其特征在于式(II)的化合物如下制备
使下式的化合物，
其中
R4，R5，R6，R7，R8，R9，R10和R11具有权利要求1中指定的含义，首先与下式的化合物反应，
其中
R3具有权利要求1中指定的含义，并且
R13表示氰基甲基，对硝基苯基，邻硝基苯基，2，4-二硝基苯基，2，4，5-三氯苯基，五氯苯基，五氟苯基(Pfp)，N-羟基苯邻二甲酰亚胺基，N-羟基琥珀酰亚胺基(O-Su)，1-羟基哌啶基或5-氯-8-羟基喹啉基，
和随后在3步合成中
a)与酸反应，
b)与脱水剂，在适合时在碱存在下反应，
和
c)通过氢解反应。
15.根据权利要求1-12中任一项的化合物，其用于治疗和/或预防疾病。
16.根据权利要求1-12中任一项的化合物用于制备治疗和/或预防疾病的药物的应用。
17.根据权利要求1-12中任一项的化合物用于制备治疗和/或预防细菌感染的药物的应用。
18.药物，其包含根据权利要求1-12中任一项的化合物和惰性、非毒性的药用赋形剂。
19.根据权利要求18的药物，其用于治疗和/或预防细菌感染。
20.用于控制人和动物中细菌感染的方法，所述方法通过施用抗菌有效量的至少一种根据权利要求1-12中任一项的化合物，根据权利要求18的药物或根据权利要求16或17获得的药物而进行。
全文摘要
本发明涉及溶杆菌素酰胺和制备它们的方法，以及它们用于制备药物的应用，所述药物用于治疗和/或预防疾病、特别是细菌感染性疾病。
文档编号C07K7/56GK101466729SQ200780021362
公开日2009年6月24日 申请日期2007年4月13日 优先权日2006年4月13日
发明者弗朗茨·冯努斯鲍姆, 哈穆特·贝克, 尼娜·布吕纳, 赖纳·恩德曼, 约翰内斯·克贝林, 雅克·拉戈, 约阿希姆·泰尔塞, 约阿希姆·舒马赫尔, 索尼亚·安劳夫, 约兰多·坎乔-格朗德, 苏珊·格雷沙特, 汉斯-克里斯蒂安·米利齐泽, 吉多·席费尔 申请人:艾库里斯有限及两合公司